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1、知识网络构建:胚胎工程胚胎工程胚胎工程的应用胚胎工程的应用胚胎移植胚胎移植胚胎分割胚胎分割基本程序基本程序移植的生理学基础移植的生理学基础体外受精和早期体外受精和早期胚胎培养胚胎培养试管动物技术试管动物技术体外受精体外受精早期胚胎培养早期胚胎培养体内受精和早期体内受精和早期胚胎发育胚胎发育精子的发生精子的发生卵子的发生卵子的发生受精受精早期胚胎发育早期胚胎发育胚胎干细胞胚胎干细胞2021/6/301一、体内受精和早期胚胎发育一、体内受精和早期胚胎发育（一）、精子和卵子的发生（一）、精子和卵子的发生（二）、受精（二）、受精（三）、胚胎发育（三）、胚胎发育2021/6/302（一）（一）1、精子的
2、发生、精子的发生1 1）、场所：）、场所：2 2）、时期：）、时期：3 3）、过程：）、过程：睾丸（的曲细精管）睾丸（的曲细精管）从从初情期初情期开始直到开始直到生殖功能生殖功能衰退衰退发生的过程大体可分为发生的过程大体可分为三个三个阶段阶段2021/6/303精原细胞精原细胞有丝分裂有丝分裂初级精母细胞初级精母细胞次级精母细胞次级精母细胞精子细胞精子细胞精子精子MM第一阶段第一阶段第二阶段第二阶段第三阶段第三阶段MM精精子子发发生生的的过过程程多个精原细胞多个精原细胞染色体复制染色体复制变形变形2021/6/3042021/6/305精子细胞变形中的主要变化：1.1.细胞核细胞核2.2.高尔
3、基体高尔基体3.3.中心体中心体4.4.线粒体线粒体5.5.细胞内其他物质细胞内其他物质精子头的主要部分精子头的主要部分头部的顶体头部的顶体精子的尾精子的尾线粒体鞘线粒体鞘( (尾的基部尾的基部) )原生质滴原生质滴( (球状球状, ,最后最后脱落脱落) )2021/6/3062.卵子的发生1)1)发生部位：发生部位：2)2)时间：时间：减数第一次分裂减数第一次分裂 完成；完成； 减数第二次分裂减数第二次分裂 的过程的过程中完成。中完成。在雌性动物排卵前后在雌性动物排卵前后在精子和卵子结合在精子和卵子结合卵巢卵巢l胚胎性别分化以后直至生殖机能衰退胚胎性别分化以后直至生殖机能衰退2021/6/3
4、07卵泡卵泡=卵泡细胞卵泡细胞+初级卵母细胞初级卵母细胞卵子卵子=次（初）级卵母细胞次（初）级卵母细胞 +透明带透明带+放射冠放射冠排卵排卵=卵子从卵泡中排出卵子从卵泡中排出2021/6/308卵原细胞卵原细胞有丝分裂有丝分裂多个卵原细胞多个卵原细胞染色体复制染色体复制初级卵母细胞初级卵母细胞M第一极体第一极体次级卵母细胞次级卵母细胞两个第二极体两个第二极体第二极体第二极体卵子卵子退化消失退化消失（ 3 3、卵卵子子发发生生过过程程M排卵前后完成排卵前后完成在受精过程完成在受精过程完成被卵泡细胞包被卵泡细胞包围围, ,形成卵泡形成卵泡胎胎儿儿期期完完成成2021/6/309误点警示：误点警示：
5、(课本课本P63讨论）讨论）1 1、一个卵泡中一般能形成一个成熟的卵子。、一个卵泡中一般能形成一个成熟的卵子。2 2、排卵是指卵子从卵泡中排出而不是指卵泡、排卵是指卵子从卵泡中排出而不是指卵泡 从卵巢中排出。从卵巢中排出。3 3、刚排出的卵子尚未完全成熟，一般仅完成、刚排出的卵子尚未完全成熟，一般仅完成 减数第一次分裂，需要在输卵管内进一步减数第一次分裂，需要在输卵管内进一步 成熟。成熟。2021/6/3010（二）受精（二）受精1 1、受精部位、受精部位: :2 2、受精标志、受精标志: :在在卵细胞膜和透明带卵细胞膜和透明带的间隙可以观察到的间隙可以观察到两个极两个极体体时。时。输卵管输卵
6、管2021/6/3011受精阶段受精阶段: :1)1)精子穿越放射冠精子穿越放射冠 和和 透明带透明带 顶体反应顶体反应使顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内的使顶体内的酶释放出来并溶解放射冠内的卵丘细胞卵丘细胞 透明带反应透明带反应是防止多精入卵受精的是防止多精入卵受精的第一道屏障第一道屏障2)2)精子进入卵细胞膜精子进入卵细胞膜 卵细胞膜封闭作用卵细胞膜封闭作用是防止多精入卵受精的是防止多精入卵受精的第二道第二道屏障屏障3)3)原核形成：原核形成： 雄原核形成雄原核形成 和和 雌原核形成雌原核形成4)4)配子结合：配子结合： 雌雄原核雌雄原核融合融合形成合子形成合子( (受精卵受精卵) )20
7、21/6/30123 3、过程、过程受精前的准受精前的准备阶段备阶段受精阶段受精阶段精子获能精子获能（在雌性动物生殖道）（在雌性动物生殖道）卵子获能卵子获能（达到减数第二次分（达到减数第二次分裂中期时才具备与精裂中期时才具备与精子受精的能力）子受精的能力）2021/6/3013放射冠放射冠放射冠放射冠（卵丘细胞）（卵丘细胞）（卵丘细胞）（卵丘细胞）透明带透明带透明带透明带卵黄膜卵黄膜卵黄膜卵黄膜细胞核细胞核细胞核细胞核第一极体第一极体第一极体第一极体发生发生顶体顶体反应反应，穿越放射冠穿越放射冠2021/6/3014 穿过透明带穿过透明带发生透明带发生透明带反应反应2021/6/3015 精子
8、进入卵精子进入卵子后子后, ,其细胞核其细胞核变大到和卵子细变大到和卵子细胞核相似胞核相似, ,精子精子细胞核细胞核( (雄原核雄原核) )和卵子细胞核和卵子细胞核( (雌原核雌原核) )同时向同时向细胞中部靠拢细胞中部靠拢, ,并相互融合成一并相互融合成一个细胞核个细胞核, ,这时这时称受精卵。称受精卵。形成受精卵：形成受精卵：2021/6/3016精、卵相遇精、卵相遇顶体反应顶体反应顶体酶释放顶体酶释放顶体酶溶顶体酶溶解透明带解透明带接触透明带接触透明带穿越放射冠穿越放射冠溶解卵丘细胞溶解卵丘细胞 （放射冠）（放射冠）穿越透明带穿越透明带接触卵细胞接触卵细胞膜膜产生透明带反应产生透明带反应
9、形成形成 屏障屏障精子被微绒毛抱合精子被微绒毛抱合精子外膜与卵黄膜融合精子外膜与卵黄膜融合精子进入卵精子进入卵第一道第一道2021/6/3017精精子子进进入入卵卵后后变化变化变化变化变化变化卵细胞膜反卵细胞膜反应应形成第二道屏障形成第二道屏障尾部脱离尾部脱离核膜破裂核膜破裂形成雄原核形成雄原核形成雌原核形成雌原核激活卵子完成激活卵子完成 （ ）分裂，排出）分裂，排出第二极体第二极体发育发育 移动移动 接触接触 合并合并形形成成受受精精卵卵减数第二次减数第二次2021/6/3018误点警示：误点警示：1 1、成熟的精子无受精能力，需要在（、成熟的精子无受精能力，需要在（ ）内（内（ ）后方能受
10、精。）后方能受精。2 2、动物排出的卵子并未成熟，只有达到、动物排出的卵子并未成熟，只有达到 （ ）时，才具备受精能力。）时，才具备受精能力。3 3、受精卵的遗传物质中，核遗传物质一半、受精卵的遗传物质中，核遗传物质一半 来自精子，一半来自卵子，质遗传物质几来自精子，一半来自卵子，质遗传物质几 乎全来自卵子。乎全来自卵子。生殖道生殖道获能获能减数第二次分裂中期减数第二次分裂中期2021/6/30194.意义 维持每种生物前后代体细胞中染色体数目维持每种生物前后代体细胞中染色体数目的恒定的恒定 ；对于生物的遗传和变异十分重要。；对于生物的遗传和变异十分重要。2021/6/3020（三）胚胎发育（
11、三）胚胎发育受精卵受精卵2细胞细胞4细胞细胞8细胞细胞桑葚胚桑葚胚2021/6/3021受精卵受精卵卵裂期卵裂期桑椹胚桑椹胚囊胚（内含囊胚腔）囊胚（内含囊胚腔）原肠胚（内含原肠腔）原肠胚（内含原肠腔）胎儿形成胎儿形成由具有由具有全能性细胞全能性细胞构成，细胞数在构成，细胞数在3232个个左右，排列紧密，形似桑椹左右，排列紧密，形似桑椹内细胞团：内细胞团：滋养层细胞：滋养层细胞：最初发育在最初发育在输卵管输卵管进行有丝分裂进行有丝分裂1 1、胚胎发育过程、胚胎发育过程一孔：一孔：胚孔胚孔二腔：二腔：扩大的原肠腔，扩大的原肠腔，缩小的囊胚腔缩小的囊胚腔三胚层：三胚层： 外胚层，中胚层，外胚层，中胚
12、层，内胚层内胚层发育成胎儿各组织发育成胎儿各组织发育成胎膜和胎盘发育成胎膜和胎盘2021/6/3022内细胞团：内细胞团：发育成胎儿各组织发育成胎儿各组织滋养层细胞：滋养层细胞：发育成胎膜和胎盘发育成胎膜和胎盘囊胚（内含囊胚腔）囊胚（内含囊胚腔）（开始分化（开始分化) )2021/6/3023一孔：一孔：胚孔胚孔二腔：二腔：扩大的原肠腔，扩大的原肠腔，缩小的囊胚腔缩小的囊胚腔三胚层：三胚层： 外胚层，中胚层，外胚层，中胚层，内胚层内胚层原肠胚（内含原肠腔）原肠胚（内含原肠腔）2021/6/3024误点警示：误点警示：1 1、发育中的细胞分裂均为（、发育中的细胞分裂均为（ ）分裂，）分裂，原肠胚
13、阶段是个体发育中分化程度最高的阶段，原肠胚阶段是个体发育中分化程度最高的阶段，但要注意细胞分化贯穿整个个体发育过程中。但要注意细胞分化贯穿整个个体发育过程中。2 2、桑椹胚以前的细胞，细胞（、桑椹胚以前的细胞，细胞（ ) )高，高， 是胚胎分割的最佳时期是胚胎分割的最佳时期3 3、桑椹胚到囊胚的发育过程中，细胞开始分化，、桑椹胚到囊胚的发育过程中，细胞开始分化，但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割但其全能性仍很高，也可用于胚胎分割有丝有丝全能性全能性2021/6/30254.4.卵裂期胚胎发育过程中物质和体积变化卵裂期胚胎发育过程中物质和体积变化（1 1）有机物：）有机物：（2 2）体积：）体积
14、：（3)3)细胞中的细胞中的DNA:DNA:（没有从母体获得有机物，而一直呼吸消耗）（没有从母体获得有机物，而一直呼吸消耗）有机物总量减少有机物总量减少胚胎总体积不变或略有减少胚胎总体积不变或略有减少但每个细胞体积减小但每个细胞体积减小（因为细胞数目增多）（因为细胞数目增多）总总DNA含量增多含量增多但每个细胞中核但每个细胞中核DNA含量保持相对稳定含量保持相对稳定2021/6/3026二、体外受精和早期胚胎培养二、体外受精和早期胚胎培养（一）、试管动物技术（一）、试管动物技术（二）、体外受精（二）、体外受精（三）、早期胚胎培养（三）、早期胚胎培养2021/6/3027 是指通过人工是指通过人
15、工操作使卵子和操作使卵子和 精精子在体外条件下子在体外条件下成成熟和熟和 受受 精精，并通，并通过过培养培养发育成早期发育成早期胚胎后，再经胚胎后，再经移植移植产生后代的技术。产生后代的技术。（一）试管动物技术（一）试管动物技术2021/6/302819821982年世界首例试管牛犊问世年世界首例试管牛犊问世 实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是 和和 的培养。的培养。体外受精体外受精早期胚胎早期胚胎2021/6/30291.1.卵母细胞的采集和培养卵母细胞的采集和培养（1）卵细胞的采集：）卵细胞的采集： a a小型动物如小鼠、兔，以及家畜猪、羊等小型动物如小鼠
16、、兔，以及家畜猪、羊等注射注射( )( )，使其，使其( )( )，从，从( )( )中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。 b b大家畜或大型动物，如牛，大家畜或大型动物，如牛，采用的主要方法采用的主要方法：从：从屠宰场已屠宰母畜的屠宰场已屠宰母畜的卵巢卵巢中采集卵母细胞，也可以借助中采集卵母细胞，也可以借助超声波超声波(B(B超超) )探测仪探测仪、内窥镜内窥镜或或腹腔镜腹腔镜等等工具确定卵泡工具确定卵泡位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）位置，直接从活体动物中吸取泡卵液（连同卵母细胞）取出，取出，在体外进行人工培养，使其成熟。在体外进
17、行人工培养，使其成熟。促性腺激素促性腺激素超数排卵超数排卵输卵管输卵管2021/6/30302.2.精子的收集和获能精子的收集和获能 收集精子的收集精子的方法有：方法有：假阴道法假阴道法手握法手握法电刺激法电刺激法2021/6/3031 在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用在体外受精前，要对精子进行获能处理。通常采用的的体外获能体外获能方法有方法有培养法培养法和和化学诱导法化学诱导法两种。两种。 培养法培养法：精子在：精子在( )中获能。中获能。化学诱导法化学诱导法：精子一定浓度的：精子一定浓度的( )中，用化学药物诱导获能。中，用化学药物诱导获能。获能液获能液肝素肝素或或钙离子载体钙
18、离子载体A23187A23187溶液溶液2021/6/30323.3.受精受精 获能的精子获能的精子和培养成熟的卵和培养成熟的卵子，一般情况下子，一般情况下在在获能溶液获能溶液或或专专用受精溶液用受精溶液中完中完成受精过程。成受精过程。2021/6/3033 发育培养液发育培养液:(:(两盐、两素、两酸、水和血两盐、两素、两酸、水和血清等）清等）（三）、胚胎的早期培养（三）、胚胎的早期培养 胚胎发育到适宜的阶段时，可取出向受体胚胎发育到适宜的阶段时，可取出向受体移植或冷冻保存移植或冷冻保存无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及水、动物血清等。核苷
19、酸以及水、动物血清等。2021/6/3034试管动物与克隆动物的区别试管动物与克隆动物的区别试管动物试管动物克隆动物克隆动物生殖方式生殖方式技术手段技术手段遗传规律遗传规律有性生殖有性生殖无性生殖无性生殖试管动物技术试管动物技术动物细胞核动物细胞核移植技术移植技术遵循遵循不遵循不遵循2021/6/3035三、胚胎工程的应用及前景三、胚胎工程的应用及前景（一）、胚胎移植（一）、胚胎移植（二）、胚胎分割（二）、胚胎分割（三）、胚胎干细胞的培养（三）、胚胎干细胞的培养2021/6/3036（一）、胚胎移植（一）、胚胎移植 1 1、概念、概念: :将雌性动物的早期胚胎将雌性动物的早期胚胎, ,或者通过
20、其他方式或者通过其他方式得到的胚胎得到的胚胎, ,移植到移植到同种的、生理状态相同同种的、生理状态相同的其他雌的其他雌性动物的体内，使之发育为新个体的技术。性动物的体内，使之发育为新个体的技术。2 2、胚胎移植的生理学基础、胚胎移植的生理学基础1)1)供体和受体相同的生理环境供体和受体相同的生理环境2)2)早期胚胎处于游离状态早期胚胎处于游离状态, ,为胚胎的收集提供了可能为胚胎的收集提供了可能3)3)受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥4)4)胚胎与受体建立正常的联系胚胎与受体建立正常的联系, ,但遗传物质没有改变但遗传物质没有改变2021/6/3
21、037选择选择 供体母牛供体母牛受体母牛受体母牛同期发情处理同期发情处理超数排卵超数排卵供体公牛供体公牛配种配种冲卵冲卵质量检查、培养质量检查、培养胚胎移植胚胎移植妊娠检查妊娠检查分娩（胚胎移植的犊牛）分娩（胚胎移植的犊牛）3 3、胚胚胎胎移移植植的的基基本本程程序序2021/6/30381.1.概念概念: :采用机械方法将早期胚胎切割成采用机械方法将早期胚胎切割成2 2等份等份,4,4等份等份或或8 8等份等等份等, ,经移植获得（经移植获得（ ）的技术。）的技术。2.2.特点特点: :后代具有相同的遗传物质（无性繁殖或克隆）后代具有相同的遗传物质（无性繁殖或克隆）3.3.选择的胚胎选择的胚
22、胎: :发育良好的发育良好的, ,形态正常的（形态正常的（ ）4.4.分割要求：（分割要求：（ ）均等分割）均等分割（二）、胚胎分割（二）、胚胎分割桑椹胚或囊胚。桑椹胚或囊胚。内细胞团内细胞团同卵双胎或多胎同卵双胎或多胎2021/6/30391.1.概念概念: :简称简称ESES或或EKEK细胞细胞, ,是由是由( ( ) )中分离出来的一类细胞。中分离出来的一类细胞。（三）、胚胎干细胞的培养（三）、胚胎干细胞的培养2.2.干细胞分类：干细胞分类：全能干细胞、多能干细胞、专能干细胞全能干细胞、多能干细胞、专能干细胞早期胚胎或原始性腺早期胚胎或原始性腺2021/6/30404.4.主要用途主要用
23、途(1)(1)治疗人类的某些顽症治疗人类的某些顽症(2)(2)培育出人造组织器官，用于器官移植培育出人造组织器官，用于器官移植(3)(3)是研究体外细胞分化的理想材料是研究体外细胞分化的理想材料3.3.特点特点: :1)1)形态形态: :2)2)功能功能: :具有具有 。可分化为成年动物体内任。可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。何一种组织细胞。3 3）在体外培养的条件下，）在体外培养的条件下，ESES细胞可以细胞可以 对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造。体积小，细胞核大体积小，细胞核大, ,核仁明显。核仁明显。发育的全能性发育的全能性增殖而不
24、发生分化增殖而不发生分化2021/6/3041第一处：在课本第一处：在课本6969页，超数排卵法中冲出页，超数排卵法中冲出的卵实质是减数第二次分裂中期的次级卵的卵实质是减数第二次分裂中期的次级卵母细胞。母细胞。第二处：在课本第二处：在课本7777页，收集胚胎时在母体页，收集胚胎时在母体子宫中冲卵实质是桑椹胚或囊胚子宫中冲卵实质是桑椹胚或囊胚本专题共涉及到了二处冲卵，它们都在课文本专题共涉及到了二处冲卵，它们都在课文中的什么位置上，冲出的卵实质是什么？中的什么位置上，冲出的卵实质是什么？2021/6/3042小结：小结：2021/6/30432021/6/3045 结束语结束语若有不当之处，请指正，谢谢！若有不当之处，请指正，谢谢！
