尿液蛋白质的检测及其临床应用课件

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1、尿液蛋白质的检测及其临床应用尿液蛋白质的检测及其临床应用尿液蛋白质的检测及其临床应用尿液尿液分析是医学检验的重要项目, 它不仅可反映泌尿系统疾病,对消化系统、心血管、内分泌等多种疾病的诊断、鉴别诊断、疗效观察、预后评估，以与对人群健康保健均有重要价值。尿液分析因标本易得、检测简便、结果客观而成为临床使用最广泛的检验项目之一。2尿液分析是医学检验的重要项目,它不 尿液分析尿液分析物理检查 有形成分化学成分尿液化学成份定性分析尿液化学成份定性分析 尿液化学成份定量分析尿液化学成份定量分析3尿液分析物理检查肾单位的组成：u肾小球：滤过u肾小管 远曲小管：浓缩和稀释 近曲小管：排泄肾脏的功能单位肾脏的

2、功能单位 肾单位肾单位每个肾脏大约有每个肾脏大约有200200个肾单位个肾单位4肾单位的组成：肾脏的功能单位肾单位4180L肾小球滤液1/3原液(60L)18L(10%)(1L)髓袢髓袢远曲小管远曲小管HCO3-,NaCl优先重吸收优先重吸收葡萄糖，氨基酸完全重吸收葡萄糖，氨基酸完全重吸收近曲小管近曲小管水、钠重吸收水、钠重吸收浓缩、稀释浓缩、稀释集合管5180L肾小球滤液髓袢远曲小管HCO3-,NaCl优先重吸肾脏疾病不会感觉疼痛 !肾脏疾病不会引起疼痛 肾脏疾病不容易被患者察觉 需要筛查肾脏疾病如果能够在早期进行诊断治疗，可以延缓疾病进程甚至逆转其发展 实验室测定 = 最有效的方法筛查肾脏

3、疾病肾脏疾病是一些常见疾病如糖尿病、高血压，CVD和自身免疫疾病等的主要并发症之一6肾脏疾病不会感觉疼痛!肾脏疾病不会引起疼痛肾脏疾病不ESDR 正在快速发展l早期的肾脏疾病会发展到终末期肾病 (ESRD) = 肾衰 需要血透或移植 在美国ESDR 的患者数量以每年 6% 的速度增长= 在过去10年中翻了一倍7ESDR正在快速发展早期的肾脏疾病会发展到终末期肾病(E超过2000万美国人 每9个成年人中有一个 患有慢性肾脏疾病，大多数并不知情!8超过2000万美国人每9个成年人中有一个患有慢性流行病学调查成年人：14622 人微量白蛋白尿（30-300 mg/24小时） 8.3%白蛋白尿（300

4、 mg/ 24小时） 1.0%糖尿病 1/3高血压但没有糖尿病 1/7年龄高于60岁 1/6The Third National Health and Nutrition Examination Survey The Third National Health and Nutrition Examination Survey （NHAUNES NHAUNES IIIIII）9流行病学调查成年人：14622人9KDIGO肾脏疾病肾脏疾病: : 改善全球治疗成果改善全球治疗成果( (国际性独立组织，旨在制定循证临床实践国际性独立组织，旨在制定循证临床实践指南，以改善肾脏疾病的治疗和预后指南，以改善

5、肾脏疾病的治疗和预后) )慢性肾脏疾病 (CKD) 定义为GFR 30 mg/g Crea， 3次取尿样中2次阳性10KDIGO肾脏疾病:改善全球治疗成果(国际性独立组织定义“蛋白尿蛋白尿”： 尿液中白蛋白、其他特定蛋白或 总蛋白分泌增加“白蛋白尿白蛋白尿”： 尿液中白蛋白的分泌增加“微量白蛋白尿微量白蛋白尿”： 尿液中白蛋白的分泌超过正常范 围但低于尿液总蛋白测定的检测 水平 NKFNKF指南指南(national kidney foundation )(national kidney foundation )11定义“蛋白尿”：尿液中白蛋白、其白蛋白尿(KDIGO：肾脏损伤的标志物）肾脏损

6、伤的标志物）白蛋白白蛋白 = = 首选的筛查尿液蛋白首选的筛查尿液蛋白蛋白测定的首选项目是白蛋白白蛋白检测应该溯源到白蛋白检测应该溯源到CRM 470CRM 470只有在没有其他选择时，才接受使用传统的试纸条法只有在没有其他选择时，才接受使用传统的试纸条法可以使用随机不定时的尿液样本,最好使用第一次的晨尿样本最好使用第一次的晨尿样本结果应该表示为白蛋白结果应该表示为白蛋白- -肌酐清除率肌酐清除率，以便校正水和作用的影响3次重复测定中2 次为阳性可以进行诊断用试纸条排除感染或月经血的干扰12白蛋白尿(KDIGO：肾脏损伤的标志物）白蛋白=首选的尿蛋白增高的机制在正常情况下，由于肾小球毛细血管滤

7、过膜的孔径屏障以与电荷屏障，血浆中大量高分子量的蛋白不能通过滤过膜；小分子量蛋白可以通过毛细血管壁，但滤过量很小，在近曲小管95以上被重吸收。尿蛋白量增高可有4种机制：肾小球毛细血管壁断裂或电荷屏障改变，大量高分子量蛋白漏出，超过近端肾小管重吸收能力而出现于终尿中；肾小管功能损害，抑制近端肾小管重吸收能力血浆中小分子量蛋白或阳性电荷蛋白的异常增多，经肾小球滤过，超过肾小管重吸收能力；肾小管分泌T-H糖蛋白增加。13尿蛋白增高的机制在正常情况下，由于肾小球蛋白尿类型和标志性蛋白蛋白尿类型 病因蛋白分子量（ 103）排泄量标志标志性蛋白 选择性肾小球性蛋白尿增加肾小球对中等大小阴离子蛋白的通透性5

8、070，大多数白蛋白和转铁蛋白00303白蛋白，转铁蛋白非选择性肾小球性蛋白尿增加肾小球对大分子蛋白的通透性501501520白蛋白，IgG肾小管性蛋白尿降低肾小管对小分子蛋白的重吸收1070015151-微球蛋白 ，2-微球蛋白 ，视黄醇结合蛋白，半胱氨酸蛋白酶抑制物C， NAG混合性蛋白尿增加大分子蛋白的通透性和继发性损害或肾小管重吸收的饱和（溢出性蛋白尿）1015001520白蛋白， 1-微球蛋白 ，总蛋白肾前性蛋白尿增加血浆小分子蛋白的释放，肾小管溢出血红蛋白，肌球蛋白，Bence-Jones蛋白（游离单克隆免疫球蛋白轻链）0150增加的总蛋白，正常白蛋白肾后性蛋白尿下尿路出血或渗出T

9、amm Horsfall蛋白，血浆蛋白变化不定-巨球蛋白，载脂蛋白A-I14蛋白尿类型和标志性蛋白蛋白尿类型病因蛋白分子量损伤部位损伤部位可检出的标志物可检出的标志物肾小球选择通透性白蛋白、转铁蛋白、IgG、2-巨球蛋白（2-MG）肾小管重吸收1-微球蛋白、2-微球蛋白、视黄醇结合蛋白（RBP）、溶菌酶（LYS）近端小管刷状缘-谷氨酰氨基转移酶、碱性磷酸酶、丙氨酸氨基肽酶近端小管溶酶体N-乙酰-氨基葡萄糖苷酶、-葡萄糖苷酸酶肾小管胞质乳酸脱氢酶肾小管髓袢厚壁升支Tamm-Horsfall蛋白肾小球肾小球- -肾小管损伤的标志物肾小管损伤的标志物15损伤部位可检出的标志物肾小球选择通透性白蛋白、

10、转铁蛋白、Ig肾小球性蛋白尿（glomerularproteinuria）：16肾小球性蛋白尿（glomerularproteinuria肾小球蛋白尿试纸条:通常阳性,但在微量蛋白尿阶段也可以为阴性TPU100mg/LAlb偏高20-200mg/gCrea=微量白蛋白尿200mg/gCrea=白蛋白尿IgG偏高表明Alb300mg/L1M2g/24h尿。根据病变滤过膜损伤程度与蛋白尿的组分又分为2种：18机制和特征由于肾小球滤过膜因炎症、免疫、选择性蛋白尿非选择性蛋白尿肾小球滤过膜损伤程度组分治疗反应预后轻；以白蛋白为主，并有小 量 小 分 子 量 蛋 白（2M），尿中无大分子量蛋白好良重；尿

11、蛋白可呈现出血循环中蛋白的成分：有大分子量的蛋白。不好不良19选择性蛋白尿非选择性蛋白尿肾小球滤过膜损伤程度轻；重；1肾小球性蛋白尿p白蛋白p转铁蛋白pIgGpIgMp2MG20肾小球性蛋白尿白蛋白20 mAIb测定的应用作为80年代对糖尿病患者的两大贡献之一，不仅对糖尿病肾病的早期诊断和改善预后具有重要的意义，且对高血压肾病、子痫与各种毒性物质所致的肾损伤都具有重要的诊断价值。近年来，MA测定已成为早期肾损伤监测和追踪的重要生化指标。 尿微量白蛋白尿微量白蛋白（Microalbuminuria） 21mAIb测定的应用作为80年代对糖尿病微量白蛋白尿的形成机制 正常肾小球基底膜具有3-4nm

12、 的微孔，并带有一层负电荷，即具有孔径屏障和电荷屏障，使血浆中带负电荷的中等分子与大分子蛋白质不易通过。 白蛋白是血浆中含量最高的蛋白质，平均44g/L，相对分子量为66000，半径约为36nm，不易通过肾小球基底膜的孔径屏障；白蛋白的PI为47，在PH74 的血浆环境，带有大量负电荷，不易通过基底膜的电荷屏障。肾小球接受心输出量的25，每24h约有70kg白蛋白通过肾脏白蛋白通过肾脏，正常时白蛋白不易通过肾小球滤过，其滤过系数仅为00002，原尿中的白蛋白（每天约14g），在肾小管几乎全部被重吸收，每日排出仅10-30mg。 每日滤过的14g 白蛋白，加上数克小分子量蛋白质(1微球蛋白、视黄

13、醇结合蛋白、 2微球蛋白等）已达到肾小管重吸收能力的饱和，如果任何原因使原尿中任一种蛋白质浓度增加，都会超过肾小管重吸收能力，由于竞争性重吸收抑制，则均会使白蛋白排出量增多。 临床上，一旦出现入球毛细血管压升高、肾小球基底膜滤过孔径增大、电荷屏障作用降低、肾小管重吸收能力下降及血浆中、小分子量蛋白质增多等时，尿液中白蛋白排出量都会增多，出现微量或临床白蛋白尿。22微量白蛋白尿的形成机制正常肾小球基底膜具有3-4nm尿微量白蛋白检测的临床意义 1、糖尿病肾病的早期诊断和治疗管理：糖尿病肾病是糖尿病（包括型和型糖尿病）的一种严重并发症，约占糖尿病人的1/3 以上。糖尿病肾病是一个较长期的进程，从微

14、量白蛋白尿开始，经过1020 年，可致终末期肾衰，成为糖尿病病人的一个重要死因。有研究指出，糖尿病人约50存在微量白蛋白尿。而且微量白蛋白尿还与高血压、视网膜疾病显著相关。美国国家临床生物化学科学院(National Academy of Clinical Bio Chemistry，NACB)与美国糖尿病学会(American Diabetes Association，ADA）推荐将微量白蛋白尿检查作为糖尿病病人的常规监测指标。用微量白蛋白尿监测肾功能有可能在糖尿病肾病的早期进行治疗干预。23尿微量白蛋白检测的临床意义1、糖尿病肾病的早期诊断和治疗白蛋白尿与糖尿病肾病分类(KDIGO)正常微

15、量白蛋白尿白蛋白尿Alb/Crea(mg/mmol)30(mg/g)250Alb(mg/L)200Alb清除率(mg/day)300糖尿病性肾病II期期 III期期 IV期期24白蛋白尿与糖尿病肾病分类(KDIGO)尿微量白蛋白检测的临床意义 2、高血压病人心血管损伤的标记：微量白蛋白尿是特发性高血压病人心血管危险的一个综合指标。大量流行病学和临床证据显示，非糖尿病人的微量白蛋白尿与心血管疾病危险因子如血压升高、心脏肥大、有害的代谢状态、吸烟、血管紧张素水平升高、内皮功能紊乱、急性和亚临床炎症等相关，因而微量白蛋白尿被认定为心血管疾病危险的综合指标。 3、肾脏与泌尿系统疾病诊断的灵敏指标：微量

16、白蛋白尿时，应结合尿液总蛋白质定量、大分子量蛋白质和小分子量蛋白质（如1微球蛋白、视黄醇结合蛋白、2微球蛋白）测定及病情作分析。不能简单地将尿液白蛋白排出增加评价为肾小球功能受损，将尿液小分子量蛋白质排出增多评价为肾小管功能受损。 4、评价临床用药的安全性：微量白蛋白尿是反映肾功能损伤的灵敏指标，已广泛用于评价体内用药的肾毒性作用，如各类抗生素、抗癌药物、降压药，甚至一些中成药等等。25尿微量白蛋白检测的临床意义2、高血压病人心血管损伤的标尿微量白蛋白/尿肌酐24 h 尿蛋白的定量测定是长期以来的“金指标”。24 h 尿蛋白定量法是较准确而传统的测定尿蛋白的方法, 但常常存在定时不准确、部分尿

17、样丢失、膀胱排空不完全、患者依从性差等问题, 影响结果的准确性。美国NKF K/DOQI 目前推荐用随机尿蛋白与尿肌酐比值法( urinary protein /creatitine,Pro/Cr)。由于尿蛋白和肌酐在水中溶解性都很好, 因而它们在尿中的稀释程度是相似或相同的。如果1 天中肌酐的排泄率相对恒定且个体差异不大, 那么随机尿样中的尿Pro/Cr 比值将反映尿蛋白的排泄。尽管肌酐的排泄因年龄、性别、体重和人种的不同而有所差异, 但无论对于成人和儿童, 其相关性仍然很强。26尿微量白蛋白/尿肌酐24h尿蛋白的定量测定是长期以来的“尿微量白蛋白/尿肌酐英国慢性肾脏病诊疗指南英国慢性肾脏病

18、诊疗指南 ： 在初级诊疗过程中无需收集24小时尿液进行尿蛋白定量。 如果试纸检测为阳性结果(1+或更强),就应将尿样(最好是晨尿)送到实验室进行总蛋白/肌酐或白蛋白/肌酐比值测定(依实验室的实际情况选择)。同时要取中段尿样本进行尿培养,排除泌尿道感染(UTI)。 尿蛋白/肌酐比值45 mg/mmol或白蛋白/肌酐比值30 mg/mmol时,考虑蛋白尿为阳性。对尿蛋白阳性的患者,应通过分析晨尿样本排除体位性蛋白尿。 有2次以上蛋白尿阳性的患者(最好间隔12周复查)应诊断为持续蛋白尿。27尿微量白蛋白/尿肌酐英国慢性肾脏病诊疗指南：27需要进行白蛋白尿检查的人群糖尿病患者 (每年一次)高血压患者有

19、慢性肾脏疾病家族史过去或家族史中有心脏病发生的,尿液中白蛋白分泌是一个强有力的心血管危险因子 在糖尿病患者, 高血压患者,以与常规人群中28需要进行白蛋白尿检查的人群糖尿病患者(每年一次)28微量转铁蛋白尿（microtransferrinuria,MTFU）作为一个专用名词，其定义与微量蛋白尿（MAU）相似，即尿总蛋白尚在正常范围时，尿TF排泄量已高出正常上限。尿转铁蛋白29微量转铁蛋白尿（microtransfu铁转运的主要蛋白u分子量为80Kdu是一种糖蛋白，属于1微球蛋白u等电点（PI）为5.66.6u在肝脏中合成u是一种循环蛋白u在某些疾病状态下，从肾小球基底膜漏出。转铁蛋白生化特性

20、30铁转运的主要蛋白转铁蛋白生化特性30尿中出现转铁蛋白的机理肾小球滤过膜对蛋白质滤过有两种屏障，即体积屏障和电荷屏障。转铁蛋白PI：5.66.6属于带负电荷的蛋白质。已有证明一旦肾小球疾病，肾小球滤过膜中带负电荷成分涎酸和硫酸肝素含量减少，此中电荷屏障受损使带负电荷的蛋白质易滤出，从而进入肾小囊并从尿中排泄。而TF的等电点高出白蛋白一个单位,故能更敏感地反映电荷屏障受损。31尿中出现转铁蛋白的机理肾小球滤过膜对蛋白质滤过有两种屏障尿转铁蛋白的临床意义糖尿病糖尿病患者尿白蛋白排泄已被公认为早期肾损伤的指标。最近一些研究报道：尿转铁蛋白排泄增加可敏感地反映糖尿病患者早期肾损伤，甚至其改变早于尿白

21、蛋白。肺心病慢性肺源性心脏病（肺心病），由于长期缺氧和二氧化碳潴留，常导致呼吸衰竭，酸碱平衡失调，右心功能不全，并可损害肾脏与其它器官。所以监测其早期肾功能改变，对预防合并肾功能衰竭尤为重要。研究结果显示肺心病患者视黄醇结合蛋白（RBP）、TRF水平明显增高，如果合并有心衰时，肾小球及肾小管功能进一步受损，他们阳性检出率明显高于血BUN和血Cr。这样有利于早期发现肺心病患者肾脏功能受损。动态观察尿RBP、TRF水平变化有助于判断其损害部位、程度，指导临床用药，保护肺心病患者的肾功能具有一定的临床价值。各种肾炎由各种肾炎：肾外肾炎、链感肾炎、肾盂肾炎等引起的肾小球性的蛋白尿中，尿TRF水平明显增

22、高。32尿转铁蛋白的临床意义糖尿病糖尿病患者尿白蛋白排泄已被公认为有助于早期发现糖尿病肾病有助于早期发现糖尿病肾病IE410001000ABC健康人糖尿病患者Tf/CR比值在健康人和三组非胰岛素依赖性糖尿病患者中的比值，A组：MA/Cr 26.8 mg/mmol；Tf/CR比值（ug/mmol)33有助于早期发现糖尿病肾病IE410001000ABC健康人糖非胰岛素依赖性糖尿病患者尿转铁蛋白的变化肾功能不肾功能不全组全组大量蛋大量蛋白尿组白尿组微量蛋微量蛋白尿组白尿组正常蛋正常蛋白尿组白尿组健康对健康对照组照组单位：单位：log（mg/mmol）肌酐）肌酐 0.90 0.45 0.451 0.

23、69 - 0.69 0.5 -1.41 0.62 -1.54 0.30 34非胰岛素依赖性糖尿病患者尿转铁蛋白的变化肾功能不全组大量蛋白原发性高血压患者尿转铁蛋白的变化原发性高血压原发性高血压血压正常的健康血压正常的健康对照组对照组单位：单位：mg/d35原发性高血压患者尿转铁蛋白的变化原发性高血压血压正常的健康对尿IgGIgG是血清中含量最多的一种大分子蛋白，其分子量为160kD。正常情况下，由于肾小球基底膜的选择性功能，不易透过。当尿中大量出现IgG等大分子蛋白时，说明肾小球基底膜已丧失选择功能，所以此时的蛋白尿又称为非选择性的蛋白尿。因此尿IgG主要用于肾功能恶化和预后的指标。 尿IgG

24、作为原发性膜肾病的预后指标在成年人中，膜肾病是导致肾病终合症最常见的因素，所以它和表面抗原，SLE，恶性瘤，药物的负面影响等列入潜在性疾病。大约有3/4的病人会出现蛋白尿，其中又有一半人最终导致肾功能障碍，很难治愈。因此一些研究者者通过肾脏的血液动力学和测定尿液中不同蛋白的方法，分析各种参数，想寻找肾功能恶化的指标，研究发现尿IgG的排泄量是最有价值的参数。当尿排泄量250mg/天肾功能开始逐步恶化，所以可作为预后指标，说明预后不良。36尿IgGIgG是血清中含量最多的一种大分子蛋白，其分子量为尿尿IgGIgG是原发性膜肾病的预测指标是原发性膜肾病的预测指标尿尿IgG排排泄泄量量（毫克（毫克/

25、天）天）尿尿 IgG 排泄量排泄量250mg/天可天可作为肾功能恶作为肾功能恶化的指标化的指标肾功能稳定组肾功能稳定组 肾功能恶化组肾功能恶化组80060020040037尿IgG是原发性膜肾病的预测指标尿尿IgG排泄量肾功能稳原发性高血压原发性高血压 患者的尿患者的尿IgG原发性高血压患者原发性高血压患者血压正常的对照组血压正常的对照组单位：单位：mg/d38原发性高血压患者的尿IgG原发性高血压患者血压正常的对照组肾小管性蛋白尿（tubularproteinuria）39肾小管性蛋白尿（tubularproteinuria）39肾小管蛋白尿试纸条蛋白通常阴性,因为1M不能用试纸条进行测定T

26、PU通常14mg/gCrea40肾小管蛋白尿试纸条蛋白通常阴性,因为1M不能用试纸条进肾小管型蛋白尿肾小管分泌或损害释放的蛋白肾小管分泌或损害释放的蛋白(Tamm Horsfall protein， N-乙酰乙酰-氨基葡糖苷氨基葡糖苷酶酶 (NAG),）从肾小球滤过的小分子蛋从肾小球滤过的小分子蛋白白 被肾小管重吸收被肾小管重吸收(溶酶体溶酶体, 2 M, 视黄醇结合蛋白视黄醇结合蛋白)41肾小管型蛋白尿肾小管分泌或损害释放的蛋白(TammHors机制：在感染、中毒所致肾小管损害或继发于肾小球疾病时，肾小球滤过膜可正常或不正常，因近曲小管损伤重吸收能力降低，而产生的蛋白尿。2-微球蛋白（2m）

27、1-微球蛋白（1MG）视黄醇结合蛋白（RBP）Tamn-Horsfall蛋白（THP）肾小管性蛋白尿（tubularproteinuria）42机制：在感染、中毒所致肾小管损害或继发于肾小球疾病时，肾2-微球蛋白2-微球蛋白(2-microglobulin，2-MG)是由Berggard于1968年在肾小管疾病的患者尿中发现的一种低分子的蛋白质，分子量为11.8kD。 存在于除红细胞和胎盘滋养层细胞以外的所有有核细胞，并以游离形式存在于血、尿、脑脊液等体液中。432-微球蛋白2-微球蛋白(2-microglo2-微球蛋白生化特性2-微球蛋白是由100个氨基酸组成的单链多肽，不含糖基，PI为5.

28、7。由于其分子量小，可自由通过肾小球滤过膜，滤过的2-微球蛋白在近端肾小管几乎被全部重吸收，吸收率达99.92%，被重吸收的2-MG在肾小管被完全降解。血中2-MG的半寿期为18h，血循环中的2-MG浓度受肾脏功能（肾小球滤过率）、巨核细胞的转化与免疫激活的影响。尿中的2-MG排出量取决于肾小管重吸收能力和血中2-MG浓度。442-微球蛋白生化特性2-微球蛋白是由100个氨基酸2-微球蛋白临床意义反映肾小球的滤过功能 判断肾小管受损的程度 肾小管性蛋白尿的诊断和鉴别诊断 用于鉴别上、下尿路的感染 用于肾脏病的病情观察和疗效估计用于糖尿病肾病(DN)早期诊断 判断是否重金属中毒 监视药物对肾小管

29、的损害 估计肾移植的排斥反应 452-微球蛋白临床意义反映肾小球的滤过功能45睾丸癌患者尿睾丸癌患者尿2 2-MG-MG的排泄率的排泄率46睾丸癌患者尿2-MG的排泄率46胰岛素依赖性糖尿病患者尿胰岛素依赖性糖尿病患者尿2 2-MG-MG的排泄率的排泄率胰岛素依赖性糖胰岛素依赖性糖尿病昏迷患者尿病昏迷患者健康对照组健康对照组47胰岛素依赖性糖尿病患者尿2-MG的排泄率胰岛素依赖性糖尿病肾小球肾炎肾小球肾炎患者尿患者尿2 2-MG-MG的排泄率的排泄率1=IgA型肾小球肾炎；型肾小球肾炎；2=慢性肾衰的慢性肾衰的IgA型肾小球肾炎；型肾小球肾炎；3=模性肾炎；模性肾炎；4=健康对照组健康对照组单

30、位：单位：ug/d48肾小球肾炎患者尿2-MG的排泄率1=IgA型肾小球肾炎；2肾功能不全患者肾功能不全患者尿尿2 2-MG-MG的排泄率的排泄率注：注：1=血清肌酐高于120umol/L的儿童 ；2=血清肌酐低于120umol/L的儿童 ；3=健康对照组 49肾功能不全患者尿2-MG的排泄率注：1=血清肌酐高于120尿尿2 2-MG-MG可鉴别上尿路和下尿路感染可鉴别上尿路和下尿路感染50尿2-MG可鉴别上尿路和下尿路感染501-微球蛋白1-微球蛋白(1-microglobulin，1MG)又称蛋白HC，是相对分子量较小的糖蛋白。由于该蛋白的产生恒定，容易通过肾小管重吸收降解，且其测定较少受

31、尿液变动的影响，因此在肾脏病诊断方面被认为具有重要价值。511-微球蛋白1-微球蛋白(1-microglobul1MG生化特性1MG是一种分子量为kD的糖蛋白，等电点为4.5-5.5。1MG由肝脏产生，血液中的1MG以两种形式存在，即游离型和与IgA结合型。游离型可以通过肾小球滤过，绝大部分在肾小管重吸收降解，故尿中的1MG主要是游离型的。521MG生化特性1MG是一种分子量为kD的糖蛋白，等1MG临床意义1MG作为低分子量的蛋白质的一种与2MG一样，在肾小管损伤时的低分子量蛋白尿与混合性蛋白尿时，尿中1MG排出量均有明显增加，因而尿液1MG排泄量测定对肾功能损伤均有早期诊断意义。尿液1MG浓

32、度测定有助于上、下尿路感染，肾性与肾后性血尿、蛋白尿的鉴别。在上尿路感染、肾性蛋白尿及血尿时，尿液1MG均有明显增加；反之,下尿路感染、肾后性血尿及蛋白尿时，尿中1MG无明显增加。1MG的产生量恒定，尿中1MG的排出量较少受肾外因素影响，被认为是较特异的肾功能损伤诊断试验。健康人及疾病时尿中1MG在各种PH的稳定性均优于2MG，这使尿液1MG浓度测定的精度大为提高，为临床提供了一个较好的肾功能实验。531MG临床意义1MG作为低分子量的蛋白质的一种与非胰岛素依赖性糖尿病患者尿非胰岛素依赖性糖尿病患者尿1MG1MG单位：单位：mg/g肌酐肌酐 注：注：1=1=非胰岛素依赖性糖尿病患者和大量蛋白尿

33、患者非胰岛素依赖性糖尿病患者和大量蛋白尿患者 ；2=胰岛素依赖性糖尿胰岛素依赖性糖尿病患者和正常蛋白尿患者病患者和正常蛋白尿患者 54非胰岛素依赖性糖尿病患者尿1MG单位：mg/g肌酐注：尿尿 1-MG与与 2 MG的关系的关系alpha1-微球蛋白与微球蛋白与 beta2-微球蛋白在反映肾小管损伤方面有很大的相关性微球蛋白在反映肾小管损伤方面有很大的相关性烧伤天数烧伤天数55尿1-MG与2MG的关系alpha1-微球蛋白与视黄醇结合蛋白（视黄醇结合蛋白（Retinol binding protein） 视黄醇结合蛋白（视黄醇结合蛋白（RBP）是存在血液中）是存在血液中的一种分子量为的一种分子

34、量为21Kd的蛋白。在正常人血液的蛋白。在正常人血液中的中的RBP经肾小球滤过后，则在肾近曲小管重经肾小球滤过后，则在肾近曲小管重吸收。因此，正常人尿中吸收。因此，正常人尿中RBP排量极少（约排量极少（约100g/24h）。尿）。尿RBP升高能敏感的反映肾近升高能敏感的反映肾近曲小管的损害程度。尿曲小管的损害程度。尿RBP排量与小管间质损排量与小管间质损害程度有明显相关，可作为监测病程，指导治害程度有明显相关，可作为监测病程，指导治疗和判断预后的一项敏感的生化指标。疗和判断预后的一项敏感的生化指标。56视黄醇结合蛋白（Retinolbindingprotei 血清血清与与尿中尿中RBP浓度升高

35、，较少受肾外浓度升高，较少受肾外因素的影响。因而尿中因素的影响。因而尿中RBP浓度测定对肾脏浓度测定对肾脏疾病，尤其是肾小管功能损伤诊断的特异性疾病，尤其是肾小管功能损伤诊断的特异性较尿液较尿液2m测定高；诊断的敏感性与尿液测定高；诊断的敏感性与尿液2m测定相似。测定相似。RBP在尿液标本中的稳定性较在尿液标本中的稳定性较2m好，因而尿液好，因而尿液RBP测定是一个评价肾脏测定是一个评价肾脏疾病的良好指标。疾病的良好指标。57血清与尿中RBP浓度升高，较少受肾外因素的影响Tamm-Horsfall蛋白（THP）正常时THP是肾小管髓袢厚壁升支与远曲小管细胞合成和分泌的一种糖蛋白，它作为一隐秘抗

36、原只存在于上述细胞膜上，而不暴露于免疫系统。当小管间质病变时，THP漏入间质引起免疫反应产生抗THP抗体。58Tamm-Horsfall蛋白（THP）u尿中THP检测用于诊断、监测肾小管损伤（如毒物、肾移植排异反应）。u肾实质病变、肾单位大量减少时尿中排出减少，单纯下尿路感染时排量正常。u血中THP抗体高低可区别上下尿路感染，在急性肾盂炎时，血清THP抗体的IgG组份显著增高，而膀胱炎则无此现象。血清THP抗体IgG的测定有助于泌尿道感染的定位。尿液尿液THP测定的临床意义测定的临床意义59尿中THP检测用于诊断、监测肾小管损伤（如毒物、肾移植排异肾小球-管性混合蛋白尿试纸条蛋白 阳性TPU1

37、00mg/LAlb20mg/gCrea1M14mg/gCrea通常,在混合性蛋白尿情况下，肾小球和肾小管两种标志物都会显著增高60肾小球-管性混合蛋白尿试纸条蛋白阳性60肾前性蛋白尿只要不存在肾小球损伤，试纸条蛋白检测通常是阴性的。TPU100mg/LAlb20mg/gCrea根据疾病阶段而定1M14mg/gCrea,因为会和轻链竞争肾小管的重吸收容量在gamma病条件下-或-轻链增高因为血清水平偏高会造成肾前性蛋白尿的其他小分子蛋白质有肌红蛋白,2-微球蛋白,血红蛋白61肾前性蛋白尿只要不存在肾小球损伤，试纸条蛋白检测通常是阴性肾后性蛋白尿(=肾后性血尿)试纸条蛋白阳性试纸条红细胞阳性TPU

38、100mg/LAlb20mg/gCrea,IgG10mg/gCrea;IgG/Alb0.21M14mg/gCrea2M10mg/gCrea2M/Alb0.02相比于小分子蛋白质而言，大分子蛋白会典型地显著增高62肾后性蛋白尿(=肾后性血尿)试纸条蛋白阳性尿酶系列u乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）、亮氨酸氨基肽酶（LAP）等属于反映代谢的酶u溶菌酶（LYS）、-葡萄糖苷酸酶（-GLU）、N-乙酰-氨基葡萄糖苷酶（NAG）等为溶酶体的酶u-谷氨酰转肽酶（-GT）和丙氨酸氨基肽酶（AAP）是反映近端肾小管刷状缘功能的酶。63尿酶系列乳酸脱氢酶（LDH）、碱性磷酸酶（ALP）、亮氨酸氨蛋白尿

39、的鉴别操作流程蛋白尿的鉴别操作流程DipstickUTPUTP 100mg/L 或或Dipstick 阳性阳性U-AlbU-Alb500mg/g CrU-Alb/UTPU-Alb/UTP 0.3或或UTP300mg/LU 1-MG U-Cr分析报告分析报告UTP100mg/L,红细胞阴性、细胞阴性U-Alb 500mg/g CrIgGU-Alb/UTP0.3和和UTP 300mg/L尿尿 轻链轻链 尿尿 轻链轻链 敏感方法：敏感方法：不考虑Dipstick和UTP结果，对所有浅蓝色指标均进行分析64蛋白尿的鉴别操作流程DipstickUTPUTP100m蛋白尿检测流程基本旁路基本旁路敏感旁路敏

40、感旁路 尿尿 IgG试纸条试纸条尿总蛋白尿总蛋白尿白蛋白尿白蛋白尿白蛋白尿白蛋白/尿总蛋白尿总蛋白 U + U评估评估尿尿 1M尿液肌酐尿液肌酐尿白蛋白尿白蛋白/尿肌酐尿肌酐尿白蛋白尿白蛋白/尿总蛋白尿总蛋白 300 mg/l尿白蛋白尿白蛋白 300 mg/lIgG U 2巨球蛋白巨球蛋白 U尿白蛋白尿白蛋白 100 mg/g 肌酐肌酐 和和 红细胞阳性红细胞阳性尿总蛋白尿总蛋白 100 mg/l 和和红细胞红细胞 = 0 和和白细胞白细胞 = 0 和和总蛋白总蛋白 = 0 和和葡萄糖葡萄糖 = 0只在需要时只在需要时进行检测进行检测筛选鉴别排除肾脏因素排除肾脏因素Cystatin C65蛋白

41、尿检测流程基本旁路敏感旁路尿IgG试纸条尿总蛋白尿白蛋白尿的鉴别操作流程蛋白尿的鉴别操作流程- -敏感方法敏感方法筛选：筛选：Dipstick*(尿常规试纸条)尿总蛋白（UTP）尿白蛋白（U-Alb）尿1-微球蛋白（(U1-MG)尿肌酐（UCr）鉴别诊断：鉴别诊断：U-IgG尿/轻链66蛋白尿的鉴别操作流程-敏感方法筛选：66蛋白尿的鉴别操作流程蛋白尿的鉴别操作流程- -常规方法常规方法筛选：筛选：Dipstick*(尿常规试纸条)尿总蛋白（UTP）鉴别诊断鉴别诊断：尿白蛋白（U-Alb）尿1-微球蛋白（(U1-MG)尿肌酐（U-Cr）U-IgG尿/轻链67蛋白尿的鉴别操作流程-常规方法筛选：

42、67蛋白尿的鉴别操作流程蛋白尿的鉴别操作流程- -评价评价U-IgG/U-Alb0.03为非选择性肾小球性蛋白尿；U1-MG/U-Alb比值0.1为混合肾小球/肾小管性蛋白尿；U-Alb+U-IgG+U1-MG/UTP比值0.6为肾性蛋白尿，0.6为本周氏蛋白尿；尿/轻链1.0为单克隆轻链，11.52为多克隆轻链，68蛋白尿的鉴别操作流程-评价U-IgG/U-Alb50ml 园形开口的直径4cm 具有较宽的底部 尽可能使用具有安全、易于开启的 密封装置。 收集标本的容器 收集和运送尿液的容器应由不与尿液成份发生反应的惰性材料制成，应具备以下条件：74收集标本的容器74尿蛋白检测方法与其评估传统

43、的尿蛋白检测方法有免疫扩散、免疫电泳、免疫比浊、放射免疫、EL ISA 等。一些高效检测技术(如高效液相层析、毛细管电泳、质谱等) 由于仪器昂贵、检测复杂而难以在临床得到推广。近年来,生物传感器技术得到迅速发展,一些新型生物芯片,如生物电子芯片、毛细管电泳或层析芯片、PCR 芯片等应运而生。其中用于蛋白检测的免疫传感器已有不少报道。这些生物传感器具有高特异性、高灵敏度、高效率、小型简便等特点,将成为生物医学领域的新工具。75尿蛋白检测方法与其评估传统的尿蛋白检测方法有免疫扩散、免疫尿干化学分析的蛋白质膜块是利用指示剂蛋白误差法原理，仅对白蛋白敏感，灵敏度100300mg/L，磺基水杨酸法用生物

44、碱的阴离子与蛋白质的阳离子结合成不溶性蛋白；盐沉淀的原理检测白蛋白、球蛋白、本周氏蛋白等，灵敏度为50100mg/L；加热加酸法是通过加热使蛋白质变性凝固，再加酸使蛋白质凝固的原理检测各种蛋白质，灵敏度150mg/L。按NCCLS Literation GP16-A规定：尿蛋白用磺基水杨酸法确证；76尿干化学分析的蛋白质膜块是利用指示剂蛋蛋白尿定性检测n高度敏感-albumin(asitcontainsthemostaminogroups)可以检测globulins不反应Bence-Jonesproteins77蛋白尿定性检测高度敏感77假阴性和假阳性筛选+/+1gm/m2/day阳性预期值为89%0/trace 0.1g/m2/day阴性预期值为60%假阳性造影剂,lowpH假阴性青霉素，磺胺类highpH,尿液稀释78假阴性和假阳性筛选78免疫比浊法和HPLC检测白蛋白的比较79免疫比浊法和HPLC检测白蛋白的比较79谢谢 谢谢 80谢谢80谢谢！81谢谢！81谢谢观赏谢谢观赏谢谢观赏