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1、放线菌一种高GC含量革兰氏阳性细菌本章纲要l1 放线菌的一般定义l2 放线菌的一般特征l3 放线菌亚目l4 微球菌亚目l5 棒杆菌亚目l6 小单孢菌亚目l7 链霉菌亚目l8 链孢囊菌亚目l9 弗兰克氏菌亚目l10 放线菌目的其他亚目1、 放线菌的一般定义l放线菌（antinomycetes）是一类呈菌丝状生长、主要以孢子繁殖和陆生性强的原核生物。 从医疗的角度看，放线菌非常重要当它们降解橡胶产品，在航空燃料中生长，产生有臭味的物质污染水源，在污水灌溉的植物上生长，形成厚厚的泡沫时，它们可能很讨厌。但另一方面，它们又是大多数抗生素的生产者。 2、 放线菌的一般特征l放线菌是一种原核生物，以菌落呈
2、放射放线菌是一种原核生物，以菌落呈放射状而得名。状而得名。l 分布：在自然界分布很广，主要习居于分布：在自然界分布很广，主要习居于土壤之中，每克土壤中含数万乃至数百土壤之中，每克土壤中含数万乃至数百万个放线菌孢子。中性、偏碱性的土壤万个放线菌孢子。中性、偏碱性的土壤和有机质丰富的土壤中较多。土壤特有和有机质丰富的土壤中较多。土壤特有的泥腥味主要由放线菌的代的泥腥味主要由放线菌的代 谢产物引起谢产物引起的。的。 结构：结构： 基内菌丝基内菌丝长在长在medium内，吸收营养内，吸收营养气生菌丝气生菌丝向向medium上空伸展上空伸展 孢子丝孢子丝 气生菌丝分枝部分，分化的具有形成孢子作用气生菌丝
3、分枝部分，分化的具有形成孢子作用 的繁殖菌丝，放线菌的孢子常具有色素，呈的繁殖菌丝，放线菌的孢子常具有色素，呈 白、灰等颜色，是分类的重要特征之一白、灰等颜色，是分类的重要特征之一分生孢子链分生孢子链琼脂表面琼脂表面l放线菌的分支菌丝在固体基质的内部和表面都放线菌的分支菌丝在固体基质的内部和表面都会生长，形成菌丝体。好氧的菌丝体末端会产会生长，形成菌丝体。好氧的菌丝体末端会产生分生孢子，孢子的外形一般相差很大。孢子生分生孢子，孢子的外形一般相差很大。孢子不耐高温，但可以耐干旱，这是放线菌的一种不耐高温，但可以耐干旱，这是放线菌的一种适应方式。适应方式。l绝大多数的放线菌不能运动。少数能通过鞭毛
4、绝大多数的放线菌不能运动。少数能通过鞭毛孢子实现运动。孢子实现运动。l不同放线菌的细胞壁组成差别非常大，可作为不同放线菌的细胞壁组成差别非常大，可作为分类标准。可以把放线菌的细胞壁分成分类标准。可以把放线菌的细胞壁分成4大类大类（表表）其中第）其中第、型放线菌的细胞抽提型放线菌的细胞抽提物分别含有特征糖，可用于分类（物分别含有特征糖，可用于分类（表表）。）。放线菌孢子的扫描电镜照片实例图1形成孢子的糖多孢菌属菌丝图2鼠毛上的囊轴发仙菌孢子囊图3玫瑰小双孢菌菌丝上成对孢子图4棘孢小单孢菌图5多毛的链霉菌孢子链图6世田北里孢菌的产气孢子D-GluDL-DAP可与肽桥或其他四可与肽桥或其他四肽链中的
5、肽链中的DAP相连相连革革兰兰氏氏阳阳性性菌菌细细胞胞壁壁L-AlaD-AlaN-乙酰胞壁酸N-葡萄糖胺肽聚糖的相互交联肽聚糖的相互交联表1 放线菌细胞壁类型细胞壁类细胞壁类型型二氨基庚二二氨基庚二酸异构体酸异构体肽桥上的肽桥上的甘氨酸甘氨酸特征糖特征糖代表属代表属L，L+无无类诺卡氏菌属，类诺卡氏菌属，链霉菌属链霉菌属内消旋内消旋+无无游动放线菌属，游动放线菌属，小单孢菌属等小单孢菌属等内消旋内消旋-无无弗兰克菌属等弗兰克菌属等内消旋内消旋-阿拉伯糖，阿拉伯糖，半乳糖半乳糖诺卡氏菌属等诺卡氏菌属等表2 放线菌全细胞糖模式类型糖模式糖模式类型类型特征糖特征糖代表属代表属A阿拉伯糖，半乳糖阿拉伯
6、糖，半乳糖诺卡氏菌属，红球菌属，糖单孢菌诺卡氏菌属，红球菌属，糖单孢菌属属B马杜拉糖马杜拉糖马杜拉放线菌属，链孢囊菌属，嗜马杜拉放线菌属，链孢囊菌属，嗜皮菌属皮菌属C无无高温单孢菌属，束丝放线菌属，地高温单孢菌属，束丝放线菌属，地嗜皮菌属嗜皮菌属D阿拉伯糖，木糖阿拉伯糖，木糖小单孢菌属，游动放线菌属小单孢菌属，游动放线菌属菌落特征介于细菌与霉菌之间，放线菌的气生菌丝菌落特征介于细菌与霉菌之间，放线菌的气生菌丝较细，生长缓慢，菌丝分枝交错缠绕，故菌落质地致较细，生长缓慢，菌丝分枝交错缠绕，故菌落质地致密。菌丝长在培养基内，不易挑起。密。菌丝长在培养基内，不易挑起。 放线菌形态特征的初步观察放线菌
7、形态特征的初步观察 培养基：培养基： 高氏一号高氏一号 可溶性淀粉可溶性淀粉 2% KNO3 0.1% K2HPO4 0.05% MgSO4.7H2O 0.05% NaCl 0.05% FeSO4 0.001% 插片法观察插片法观察 倒平板倒平板 10-12 ml，插片，将灭菌的盖玻片以，插片，将灭菌的盖玻片以45o角度角度插入培养基内，插入深度为插入培养基内，插入深度为1/2-1/3 盖片法观察盖片法观察切槽，去培养基，盖上玻片，培养后翻身观察切槽，去培养基，盖上玻片，培养后翻身观察 接种：将菌种接种在盖玻片与琼脂相边沿线，放置接种：将菌种接种在盖玻片与琼脂相边沿线，放置之之2828培养培养
8、6-156-15天天 观察：培养后菌丝体生长在培养基及盖玻片上，小观察：培养后菌丝体生长在培养基及盖玻片上，小心用摄子将盖玻片取出，擦去较差一面的菌丝体，放心用摄子将盖玻片取出，擦去较差一面的菌丝体，放在载玻片上（菌丝体覆盖在载玻片上），于显微镜观在载玻片上（菌丝体覆盖在载玻片上），于显微镜观察。察。 作用：作用：1) 产抗生素（产抗生素（4000种以上）种以上）2) 胞外酶，如：蛋白酶、葡糖异构酶（游胞外酶，如：蛋白酶、葡糖异构酶（游动放线菌）动放线菌）3) 甾体转化，环保，氰化物降解甾体转化，环保，氰化物降解 2. 抗菌谱测定抗菌谱测定 供试菌：供试菌： a. 枯草杆菌（枯草杆菌（G+Ro
9、d） b. 金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（G+Cocci） （G-肠道细菌）肠道细菌） c. 白色念珠菌（代表酵母型）白色念珠菌（代表酵母型） d. 分枝杆菌（代表结核杆菌）分枝杆菌（代表结核杆菌） e. 青霉、曲霉（丝状真菌）青霉、曲霉（丝状真菌） 琼脂块测定法：培养后的放线菌，用打孔器切成一定体积的琼脂块，琼脂块测定法：培养后的放线菌，用打孔器切成一定体积的琼脂块，移到供试菌（刚接种）平皿上，观察抑菌圈。移到供试菌（刚接种）平皿上，观察抑菌圈。 滤纸片法滤纸片法 （或杯碟法）：将滤纸片浸入受试发酵液中，直接放入平板（或杯碟法）：将滤纸片浸入受试发酵液中，直接放入平板或牛浸小杯，观察抑菌圈
10、。或牛浸小杯，观察抑菌圈。 放线菌的分类放线菌的分类 1. 放线菌科放线菌科 Actinomyces 属属 3. 双歧杆菌双歧杆菌 Bifidobacterium 2. 分枝杆菌科分枝杆菌科 Mycobacteriaceao 分枝杆菌属分枝杆菌属 Mycobacterium 3. 弗兰克氏菌弗兰克氏菌 Frankiaceae 4. 游动放线菌科游动放线菌科 Actinoplanaceae 5. 嗜皮菌科嗜皮菌科 Dermatophilaceae 6. 诺卡氏菌科诺卡氏菌科 Nocardiaceae 诺卡氏菌诺卡氏菌 Nocardia 假诺卡氏菌假诺卡氏菌 Pseudonocardia 7. 链
11、霉菌科链霉菌科 Streptomycetaceae 链霉菌属链霉菌属 Streptomyces 8. 小单孢菌科小单孢菌科 Micromonospora放线菌放线菌具有良好菌丝体具有良好菌丝体有分枝，无横隔，有分枝，无横隔，不断裂不断裂一般无气生菌丝一般无气生菌丝无气生菌丝，基无气生菌丝，基内菌丝无横隔，内菌丝无横隔，不断裂不断裂孢子丝多样，孢子丝多样，直波、曲、直波、曲、螺旋，呈现螺旋，呈现多种颜色多种颜色孢子丝盘卷形孢子丝盘卷形成孢囊，内有成孢囊，内有孢囊孢子孢囊孢子基内菌丝有横隔，基内菌丝有横隔，能断裂成杆状和能断裂成杆状和球状孢子球状孢子孢子单个着生于短梗顶端链霉菌属链霉菌属孢囊链霉菌
12、属孢囊链霉菌属诺卡氏菌属诺卡氏菌属小单孢菌属小单孢菌属常用放线菌的简捷分类常用放线菌的简捷分类3 放线菌亚目l这个亚目多数属为外形不规则，不产芽孢，好氧或好氧或兼性的兼性的革兰氏阳性杆菌（11个属为厌氧）。包括放线菌属，隐秘杆菌属，动弯杆菌属等。l放线菌属的细菌为直或微弯的杆菌，形状变化很大有真正分支的纤细菌丝。（见左图）放线菌属为兼放线菌属为兼性或严格厌氧性或严格厌氧，生长良好时需要CO2。图1 内氏放线菌（1000）图图2 放线菌属扫描电镜照片放线菌属扫描电镜照片（18 000）l多为致病菌，无气生菌丝，基内菌丝无多为致病菌，无气生菌丝，基内菌丝无隔膜，不断裂隔膜，不断裂l放线菌属的各个种
13、一般在人类和其他温放线菌属的各个种一般在人类和其他温血动物的粘膜表面生活，口腔就是个很血动物的粘膜表面生活，口腔就是个很好的环境。牛放线菌好的环境。牛放线菌()()导致牛的放线菌导致牛的放线菌颈肿病，放线菌属是人类放线菌病，眼颈肿病，放线菌属是人类放线菌病，眼睛感染和周期性疾病的病因。其中最重睛感染和周期性疾病的病因。其中最重要的人类致病菌是衣氏放线菌要的人类致病菌是衣氏放线菌()()4 微球菌亚目l微球菌亚目有微球菌亚目有10个科和许多属，个科和许多属，最著名的是微球菌属、节杆菌最著名的是微球菌属、节杆菌属和嗜皮菌属。属和嗜皮菌属。l微球菌属包括好氧的，过氧化微球菌属包括好氧的，过氧化氢酶阳
14、性的球菌，主要以成对，氢酶阳性的球菌，主要以成对，四体或不规则簇状存在。多不四体或不规则簇状存在。多不能运动（见左图）。能运动（见左图）。l节杆菌属包括好氧的，过氧化节杆菌属包括好氧的，过氧化氢酶阳性，营呼吸代谢的杆菌，氢酶阳性，营呼吸代谢的杆菌，肽聚糖中含赖氨酸，它最特别肽聚糖中含赖氨酸，它最特别之处是杆菌之处是杆菌-球菌的生长循环球菌的生长循环（图例图例）。）。l嗜皮菌属形成有簇生鞭毛的孢嗜皮菌属形成有簇生鞭毛的孢子的孢子囊，兼性厌氧，可寄子的孢子囊，兼性厌氧，可寄生于哺乳动物生于哺乳动物。图1 微球菌属。藤黄微球菌 甲基蓝染色（1000）l节杆菌（节杆菌（Arthrobacter）处于对
15、数生长）处于对数生长期呈不规则、分支的杆状，通过断裂繁期呈不规则、分支的杆状，通过断裂繁殖。进入稳定期后，细胞变为球状。转殖。进入稳定期后，细胞变为球状。转移到新鲜培养基后，球状又形成有活力移到新鲜培养基后，球状又形成有活力的杆状细胞。的杆状细胞。l它们能耐受贫瘠和干旱的环境，对营养它们能耐受贫瘠和干旱的环境，对营养的要求很灵活，甚至能降解一些杀虫剂的要求很灵活，甚至能降解一些杀虫剂和除草剂，对复杂的有机分子的矿化也和除草剂，对复杂的有机分子的矿化也很重要。很重要。节杆菌属 杆菌-球菌生长循环 图图a 培养培养6h球菌长出杆菌球菌长出杆菌 图图b 12h后的杆菌后的杆菌 图图c 24h后的细菌
16、后的细菌 图图d 3天后达到稳定期的细天后达到稳定期的细胞胞5 棒杆菌亚目l本目最重要的本目最重要的3个属为个属为棒杆菌属，分支杆菌棒杆菌属，分支杆菌属和诺卡氏菌属。属和诺卡氏菌属。l棒杆菌属包括好氧或棒杆菌属包括好氧或兼性，过氧化氢酶阳兼性，过氧化氢酶阳性，直或微弯的杆菌，性，直或微弯的杆菌，末端常尖。成团或成末端常尖。成团或成串存在（图串存在（图1）。）。l分支杆菌属为微弯或分支杆菌属为微弯或直的杆菌，有时分支直的杆菌，有时分支或形成菌丝（图或形成菌丝（图2）。）。图1 白喉棒杆菌图2 麻风分支杆菌 耐酸性染色lNocardia ： 基内菌丝内有隔膜，并可断基内菌丝内有隔膜，并可断裂成杆状
17、或球杆状。一般无气生菌丝，裂成杆状或球杆状。一般无气生菌丝，以横隔分裂方式形成孢子。产利福霉素，以横隔分裂方式形成孢子。产利福霉素，庆大霉素，可用于石油脱蜡、庆大霉素，可用于石油脱蜡、 烃类发酵烃类发酵等。等。l能降解许多分子，如石油烃，清洁剂，能降解许多分子，如石油烃，清洁剂，苯，多氯化联二苯，以及许多杀虫剂。苯，多氯化联二苯，以及许多杀虫剂。KCN HCONH2 HCOOH + NH3CH2=CH-CN CH2=CH CONH2 CH2=CH COOH丙烯腈丙烯腈丙烯酰胺丙烯酰胺污水处理污水处理腈水合酶腈水合酶酰胺水解酶酰胺水解酶丙烯酸丙烯酸l 建成年产建成年产20002000吨装置；吨装
18、置；l 腈水合酶活力高，达腈水合酶活力高，达10001000万单位每毫升发酵液；万单位每毫升发酵液；l 转化率高，转化率高，99%99%以上；以上；l 产物分离提取简便，产品纯度产物分离提取简便，产品纯度99.8%99.8%以上以上。面向重要精细化学品和功能手性化合物的大规模生产，通过路线变更，建立了节面向重要精细化学品和功能手性化合物的大规模生产，通过路线变更，建立了节能、减排、降耗的新型工艺路线，基础研究向应用研究有效延伸能、减排、降耗的新型工艺路线，基础研究向应用研究有效延伸 生物催化生产烟酰胺、羟基乙酸和生物催化生产烟酰胺、羟基乙酸和(S)-2,2-二二甲基环丙烷甲酰胺的工艺路线甲基环
19、丙烷甲酰胺的工艺路线l 率先实现羟基乙酸的生物法生产；率先实现羟基乙酸的生物法生产；l 建成年产建成年产150150吨工业装置；吨工业装置；l 腈水解酶活力达到腈水解酶活力达到1010万单位以上；万单位以上；l 转化率高，转化率高，99%99%以上；以上；腈水合酶腈水合酶/ /酰胺酶双菌双酶耦联法生产酰胺酶双菌双酶耦联法生产西司他丁关键中间体西司他丁关键中间体2,2-2,2-二甲基环丙甲酰胺二甲基环丙甲酰胺一株腈水合酶生产菌诺卡氏菌培养过程中的镜检照片6150倍 发育初期有明显的分枝菌丝，发育初期有明显的分枝菌丝，13h后开始断裂，后开始断裂，20h后后呈大小整齐的短杆状，呈链条堆状排列，呈大
20、小整齐的短杆状，呈链条堆状排列，48h菌体大小菌体大小为为 1.14 1.76m. 在营养琼脂平板上，菌落隆起，无气生菌丝，呈不规在营养琼脂平板上，菌落隆起，无气生菌丝，呈不规则圆形，表面光滑，有光泽，呈粉红色至桔红色。则圆形，表面光滑，有光泽，呈粉红色至桔红色。6 小单孢菌亚目l它们的菌丝往往有各它们的菌丝往往有各种颜色，能产生不同种颜色，能产生不同的色素。它们没有气的色素。它们没有气生菌丝或气生菌丝不生菌丝或气生菌丝不发达。菌丝末端生长发达。菌丝末端生长出孢子囊，分生孢子出孢子囊，分生孢子在孢子囊内形成。孢在孢子囊内形成。孢子有能运动的，也有子有能运动的，也有不能运动的。小单孢不能运动的。
21、小单孢菌属可以产生抗生素菌属可以产生抗生素如庆大霉素。如庆大霉素。图图1 成熟的游动放线菌孢子成熟的游动放线菌孢子囊的扫描电镜照片囊的扫描电镜照片小单孢菌科（Micromonosporaceae）是放线菌目的1科。生物学特征：基内菌丝形成单个孢子。通常无气生菌丝。小单孢菌属：小单孢菌属：基因菌丝发育良好，形成致密小菌落，直径约3毫米；菌丝纤细，直径微米，无鞘,有分枝，不断裂；一般无气生菌丝；孢子单个生在基内菌丝上，时常在基丝表面形成褐黑色孢子层，孢子表面光滑、粗糙或有突起;菌落黄橙或橙红,也有的为绛红、褐色或绿蓝等色；细胞壁化学组分型，即以内消旋二氨基庚二酸和甘氨酸为特征性组份，有时还有少量左
22、旋或羟基二氨基庚二酸；含有阿拉伯糖和木糖；DNA中的G+C克分子含量为。本属菌喜潮湿，常见于湖、河的水和泥中，能够分解一些不易分解的有机质，如纤维素、几丁质、木聚糖等。产生多种抗生素，特别是氨基糖苷类，如对绿脓杆菌有特效的庆大霉素等。代表种为青铜小单孢菌。放线单孢菌属：放线单孢菌属：基内菌丝上的长柄顶端形成单个大孢子，直径微米，无气生菌丝。至今只记述葡萄牙放线多孢菌1种。 7丙酸杆菌亚目（Propionibacterineae)l多形的不能运动杆菌，常为一端尖，一多形的不能运动杆菌，常为一端尖，一端圆的棒状。细胞可为球形或分支。兼端圆的棒状。细胞可为球形或分支。兼性厌氧或好氧，利用乳酸盐和糖产
23、生大性厌氧或好氧，利用乳酸盐和糖产生大量丙酸和二氧化碳。在动物的皮肤和消量丙酸和二氧化碳。在动物的皮肤和消化道，乳制品如乳酪中生长有丙酸杆菌化道，乳制品如乳酪中生长有丙酸杆菌属（属（Propionbacterium）细菌，它们对瑞细菌，它们对瑞士乳酪的生产很有意义。士乳酪的生产很有意义。瑞士乳酪瑞士乳酪含有丙酸杆菌发含有丙酸杆菌发酵产生的酵产生的CO2空空洞洞困难与希望共存的丙酸发酵困难与希望共存的丙酸发酵8 链霉菌亚目l本目有本目有1个科个科3个属，其中最个属，其中最重要的是链霉菌属。链霉菌重要的是链霉菌属。链霉菌属是一个大属，有大约属是一个大属，有大约500个种。严格好氧，个种。严格好氧，
24、型细胞壁。型细胞壁。它们的气生菌丝在一个平面它们的气生菌丝在一个平面上分支，形成上分支，形成3-50或更多的或更多的不能运动的分生孢子短链，不能运动的分生孢子短链，其孢子表面有光滑的，多刺其孢子表面有光滑的，多刺的，及多疣的。的，及多疣的。l链霉菌对生态和医药都很重链霉菌对生态和医药都很重要。在矿化作用中起着很重要。在矿化作用中起着很重要的作用。链霉菌最著名的要的作用。链霉菌最著名的特征是它们能合成各种抗生特征是它们能合成各种抗生素，其中一些被用于医药和素，其中一些被用于医药和生物学研究，如两性霉素生物学研究，如两性霉素B，氯霉素，红霉素，新霉素，氯霉素，红霉素，新霉素，制霉菌素，链霉素，四环
25、素制霉菌素，链霉素，四环素等。等。图1 雪白链霉菌的光滑孢子图2 美好链霉菌多疣的孢子lStreptomyces： 生长在含水量低，通气生长在含水量低，通气好的土壤中。有良好的分枝状菌丝体，好的土壤中。有良好的分枝状菌丝体，菌丝无隔膜。已知该菌属有菌丝无隔膜。已知该菌属有1000多种。多种。S.griseus 灰色链霉菌灰色链霉菌 龟裂链霉菌龟裂链霉菌图3 绿色产色链霉菌的多刺孢子图4 松果链霉菌孢子链的光学显微镜照片图6 产链霉素的灰色链霉菌图5 疮痂病链霉菌 生长在马铃薯上的一种放线菌9 链孢囊菌亚目l本亚目包括本亚目包括3个科个科14个属。个属。伯杰氏手册伯杰氏手册第一版第一版中它们位于
26、第中它们位于第30组（马组（马杜拉菌）和第杜拉菌）和第31组（高组（高温单孢菌相关属）温单孢菌相关属）l马杜拉放线菌属是与致马杜拉放线菌属是与致病性放线菌有关的一类病性放线菌有关的一类放线菌。高温单孢菌属放线菌。高温单孢菌属在气生菌丝，或气生菌在气生菌丝，或气生菌丝和基质菌丝上产生单丝和基质菌丝上产生单个孢子。个孢子。图1 马杜拉放线菌电镜照片图2 白色链孢囊菌的电镜照片孢囊链霉菌属：由气生菌丝的孢子丝盘卷成孢子孢囊链霉菌属：由气生菌丝的孢子丝盘卷成孢子囊。如：囊。如： 粉红孢囊链霉菌（粉红孢囊链霉菌（Streptosporangium roseum） 产生多霉素（产生多霉素（polycin）
27、抗）抗G+、G-、病毒、肿瘤、病毒、肿瘤10 弗兰克氏菌亚目l弗兰克氏菌属能形成不能运弗兰克氏菌属能形成不能运动的孢囊孢子。在菌丝断裂动的孢囊孢子。在菌丝断裂时，会释放出成群的孢子。时，会释放出成群的孢子。弗兰克氏菌在至少弗兰克氏菌在至少8个科的个科的高等非豆科植物的根系中共高等非豆科植物的根系中共生，能固氮，微需氧（赤杨生，能固氮，微需氧（赤杨这样的植物能在缺氧的环境这样的植物能在缺氧的环境下生长与此有关下生长与此有关)。l鱼孢菌属是最奇特的一类放鱼孢菌属是最奇特的一类放线菌。它缺乏基质菌丝体，线菌。它缺乏基质菌丝体，菌丝通过附着器与基质相连，菌丝通过附着器与基质相连，并向上生长形成气生菌丝
28、体，并向上生长形成气生菌丝体，在有水时释放出可运动的有在有水时释放出可运动的有鞭毛的分生孢子。鞭毛的分生孢子。图1 被菌丝包裹的一个孢子囊的扫描电镜照片红枝桤木的一个根瘤，细胞被弗兰克红枝桤木的一个根瘤，细胞被弗兰克氏菌的小囊所充满氏菌的小囊所充满11 双歧杆菌（Bifidobacteriales)双歧双歧杆双歧双歧杆（）是人类肠道的最早入住者，尤其是哺乳期的新生儿。1500倍倍双歧杆菌改良的乳制品双歧杆菌改良的乳制品相关生物有棒状杆菌类群和丙酸细菌科 棒杆菌属Corynebacterium 节杆菌属Arthrobacter 丙酸杆菌 Propionbacterium形态性状差别非常大，同一菌
29、种表现多态性。重要工业菌种： 北京棒杆菌（Coryn. pekinense) 谷氨酸棒杆菌(Coryn. Glutamicus) 黄色短杆菌(Brevibacterium flavum) 乳糖发酵短杆菌() 产氨短杆菌(B.ammoniagenes) 嗜乙酰乙酸棒杆菌 (Coryn. Acetoacidophilum)节杆菌属节杆菌属 (Arthrobacter) 产产D-氨基酸，甾类化合物氨基酸，甾类化合物 -聚赖氨酸的研究进展聚赖氨酸的研究进展 聚赖氨酸对多种细菌、酵母菌的生长有抑制作聚赖氨酸对多种细菌、酵母菌的生长有抑制作用，是一种新颖的营养性食品保鲜剂。结构式如用，是一种新颖的营养性食
30、品保鲜剂。结构式如下：下：建立了快速筛选放线菌的方法。建立了快速筛选放线菌的方法。建立了快速筛选放线菌的方法。建立了快速筛选放线菌的方法。高通量菌种初筛方法的建立高通量菌种初筛方法的建立高通量菌种初筛方法的建立高通量菌种初筛方法的建立l 50处理一个小时处理一个小时 5mmol/L磷酸缓冲液磷酸缓冲液l土样土样 取取1 克克l 或自然风干或自然风干3-10天天 l稀释不同浓度稀释不同浓度 5-7后挑菌落后挑菌落 1 株株1瓶瓶l 涂布涂布 纯种菌纯种菌 发酵发酵 诱变诱变l 所要的菌种所要的菌种 高产稳定优良的菌株高产稳定优良的菌株 显桔黄色沉淀显桔黄色沉淀 重新筛选重新筛选用用Dragend
31、orff 试剂检测试剂检测重铬酸钾（可同时抑制重铬酸钾（可同时抑制细菌和霉菌生长）细菌和霉菌生长）产-PL菌株培养两天的菌落形态筛选得到筛选得到-PL产生菌产生菌产-PL菌株培养一周的菌落形态产产-PL菌株菌丝形态菌株菌丝形态 1.2 有效、快速的定性分析方法的建立有效、快速的定性分析方法的建立 1.3 定量检测的方法的建立定量检测的方法的建立比色法比色法 -PL是阳离子性的物质，可以与带阴是阳离子性的物质，可以与带阴离子的试剂反应，如显色剂等。甲基离子的试剂反应，如显色剂等。甲基橙（橙（MeO）是一种阴离子型的显色剂，）是一种阴离子型的显色剂，其在其在465nm处有最大吸收峰值，在一处有最大
32、吸收峰值，在一定的浓度范围下，浓度与吸收峰值成定的浓度范围下，浓度与吸收峰值成线性关系。线性关系。-PL能和甲基橙进行反应，能和甲基橙进行反应，并生成沉淀，利用这一特性可以定量并生成沉淀，利用这一特性可以定量测定测定-PL的量。的量。HPLC法法 Tsk凝胶凝胶ODS-120T柱子柱子(4.6250, Tokyo)，0.1%H3PO4缓冲液用作洗脱液，流速，缓冲液用作洗脱液，流速，UV检测检测(215nm)。思考题l当你分离到一株新放线菌时，如何进行当你分离到一株新放线菌时，如何进行分类鉴定？分类鉴定？l描述链霉菌属的主要特征。描述链霉菌属的主要特征。l描述短杆菌属、棒杆菌属的主要特征，描述短杆菌属、棒杆菌属的主要特征，说明它们在工业中的应用。说明它们在工业中的应用。
