食源性疾实验室检测技术要点

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1、食源性疾病实验室食源性疾病实验室检测技术要点检测技术要点温州市温州市CDCCDC微生物检验科微生物检验科 李毅李毅前言前言食物中毒食物中毒应急急处理与理与现场调查现场调查中的实验室支持现场调查中的实验室支持概念与分概念与分类前言?食品平安事故流行病学调查工作标准? 卫监督发202186号 本标准自2021年1月1日起施行 食品平安事故流行病学调查工作标准主要内容包括1 、总那么2 、调查机构管理3 、调查内容和程序 5局部主要内容和总共23条4 、调查结论和报告5 、附那么 第三条第三条 事故流行病学调查包括人群流行病学调查、危害因素调查和实验室检验，具体调查技术应当遵循流行病学调查相关技术指

2、南。第六条第六条 事故流行病学调查实行调查员制度。各级调查机构应当根据工作需要配备事故流行病学调查员。 调查员应当由具有1年以上流行病学调查工作经验的卫生相关专业人员担任。经专业培训考核合格后，由同级卫生行政部门聘任。食品平安事故流行病学调查工作标准食品平安事故流行病学调查工作标准第九条第九条 事故流行病学调查由调查机构成立的事故流行病学调查组事故流行病学调查由调查机构成立的事故流行病学调查组以下简称调查组具体实施。调查组应当由以下简称调查组具体实施。调查组应当由3名以上调查员组成，名以上调查员组成，并指定并指定1名负责人。名负责人。第十一条第十一条 开展人群流行病学调查应当包括以下内容：开展

3、人群流行病学调查应当包括以下内容： 一制订病例定义，开展病例搜索；一制订病例定义，开展病例搜索；二统一个案调查方法，开展个案调查；二统一个案调查方法，开展个案调查；三采集有关标本和样品；三采集有关标本和样品；四描述发病人群、发病时间和发病地区分布特征；四描述发病人群、发病时间和发病地区分布特征；五初步判断事故可疑致病因素、可疑餐次和可疑食品；五初步判断事故可疑致病因素、可疑餐次和可疑食品；六根据调查需要，开展病例对照研究或队列研究。六根据调查需要，开展病例对照研究或队列研究。食品平安事故流行病学调查工作标准第十二条第十二条 开展危害因素调查应当包括以下内容：开展危害因素调查应当包括以下内容：一

4、访谈相关人员，查阅有关资料，获取就餐环一访谈相关人员，查阅有关资料，获取就餐环境、可疑食品、配方、加工工艺流程、生产经营境、可疑食品、配方、加工工艺流程、生产经营过程危害因素控制、生产经营记录、从业人员健过程危害因素控制、生产经营记录、从业人员健康状况等信息康状况等信息二现场调查可疑食品的原料、生产加工、储存、二现场调查可疑食品的原料、生产加工、储存、运输、销售、食用等过程中的相关危害因素；运输、销售、食用等过程中的相关危害因素；三采集可疑食品、原料、半成品、环境样品等，三采集可疑食品、原料、半成品、环境样品等，以及相关从业人员生物标本。以及相关从业人员生物标本。食品平安事故流行病学调查工作标

5、准第十三条第十三条 送检标本和样品应当由调查员提供检送检标本和样品应当由调查员提供检验工程和样品相关信息，由具备检验能力的技验工程和样品相关信息，由具备检验能力的技术机构检验。标本和样品应当尽可能在采集后术机构检验。标本和样品应当尽可能在采集后24小时内进行检验。小时内进行检验。 实验室应当妥善保存标本和样品，并实验室应当妥善保存标本和样品，并按照规定期限留样。按照规定期限留样。(一)概念食源性疾病食源性疾病 指通过摄食而进入人体指通过摄食而进入人体的有毒有害物质包括生物性病的有毒有害物质包括生物性病原体等致病因子所造成的疾病。原体等致病因子所造成的疾病。一般可分为感染性和中毒性，包一般可分为

6、感染性和中毒性，包括常见的食物中毒、肠道传染病、括常见的食物中毒、肠道传染病、人畜共患传染病、寄生虫病以及人畜共患传染病、寄生虫病以及化学性有毒有害物质所引起的疾化学性有毒有害物质所引起的疾病。病。 WHOWHO食物中毒食物中毒 指食用了被有毒有害物质污指食用了被有毒有害物质污染或含有有毒有害物质的食品后染或含有有毒有害物质的食品后出现的急性、亚急性疾病；出现的急性、亚急性疾病； 食源性疾病有爆发和散发两食源性疾病有爆发和散发两种形式，食物中毒是食源性疾病种形式，食物中毒是食源性疾病的爆发形式的爆发形式食品平安事故 指食物中毒、食源性疾病、食品污染等源于食品，对人体健康有危害或者可能有危害的事

7、故。食源性疾病的分类食物中毒急性食物中毒急性食源性肠道传染病食源性肠道传染病食源性寄生虫病食源性寄生虫病变态反响性疾病食物过敏变态反响性疾病食物过敏暴饮暴食引起的急性胃肠炎等暴饮暴食引起的急性胃肠炎等一次大量或长期低剂量摄入某些有毒、有一次大量或长期低剂量摄入某些有毒、有害物质引起的以慢性毒害为主要特征的疾害物质引起的以慢性毒害为主要特征的疾病，病，食物营养不平衡所造成的某些慢性疾病等食物营养不平衡所造成的某些慢性疾病等 概述食物中毒应急处理与现场调查 为了及时准确掌握食物中毒发生原因，积极采取有效防范措施，在食物 中毒调查时，要按照一定程序开展工作。 ?食物中毒事故处理方法? 卫生部1999

8、 ?突发公共卫生事件应急条例? 国务院2003年5月7日 ?食品平安法? 2021年2月28日?中华人民共和国食品平安法实施条例? ?食品平安事故流行病学调查工作标准? 2021年 相关法律法规相关法律法规食物中毒应急处理组织与职责 食物中毒食物中毒应急急处理涉及理涉及 卫生行政部生行政部门 卫生生监督机构督机构 疾病疾病预防控制机构防控制机构 医医疗救治机构救治机构 其他有关部其他有关部门食物中毒报告、信息管理制度1 1中毒人数超过中毒人数超过3030人的应当于人的应当于6 6小时内报告同级小时内报告同级人民政府和上级人民政府卫生行政部门；人民政府和上级人民政府卫生行政部门；2 2中毒人数超

9、过中毒人数超过100100人或者死亡人或者死亡1 1人以上的，应当人以上的，应当于于6 6小时内上报卫生部，并同时报告同级人民政府小时内上报卫生部，并同时报告同级人民政府和上级人民政府卫生行政部门；和上级人民政府卫生行政部门；3 3中毒事故发生在学校、地区性或全国性重要活中毒事故发生在学校、地区性或全国性重要活动期间的应当于动期间的应当于6 6小时内上报卫生部，并同时报告小时内上报卫生部，并同时报告同级人民政府和上级人民政府卫生行政部门；同级人民政府和上级人民政府卫生行政部门；4 4其它需要实施紧急报告制度的食物中毒事故。其它需要实施紧急报告制度的食物中毒事故。食物中毒应急处理准备一、一、应急

10、急处理准理准备原那么要求原那么要求“预防防为主、常主、常备不懈不懈 二、重大食物中毒二、重大食物中毒应急急处理准理准备与支援与支援一食物中毒一食物中毒监测与与预警警二二资金金储藏藏三食物中毒物三食物中毒物资准准备三、食物中毒三、食物中毒应急急处理演理演练四、四、预防和控制食物中毒的宣防和控制食物中毒的宣传和公众教育和公众教育 食物中毒应急物资准备1.1.食物中毒事故食物中毒事故应急急处理理专用用车辆：配：配备救救护顶灯、灯、车载、储物小冰箱、打印物小冰箱、打印机等。机等。 食品、食品、现场涂抹涂抹样品、便品、便样、患者呕吐物、血、患者呕吐物、血样等等 ：录音机笔、照相机、音机笔、照相机、摄像机

11、各像机各1 1部。部。4.4.现场快速快速检验、测量量设备：食物中毒快速：食物中毒快速检样箱，箱，食品温度食品温度测试计、消毒、消毒剂浓度度检测试纸等。等。5.5.法律文法律文书：食物中毒事故个案：食物中毒事故个案调查登登记表、表、现场卫生生监督笔督笔录、现场检查笔笔录、调查笔笔录、样品采集品采集记录表、采表、采样记录、样品送品送检单、先行登、先行登记保存保存证物通知物通知书及存根、及存根、卫生生监督意督意见书、责令改正通知令改正通知书、卫生行政控制决定生行政控制决定书、封条、送达回、封条、送达回执等。等。：食物中毒：食物中毒诊断断标准、有关准、有关卫生部生部规章、参考章、参考书籍等。籍等。7

12、.7.其它有关物品：如便携式其它有关物品：如便携式电脑、或或对讲机等通机等通讯设施以及用于保存运送培养基的冰箱、冰施以及用于保存运送培养基的冰箱、冰块等等病因初步判断病症体征病症体征 微生物食物中毒大多为急性胃肠炎病症。微生物食物中毒大多为急性胃肠炎病症。如霍乱弧菌中毒表现为呕吐、泻水、脱水、体如霍乱弧菌中毒表现为呕吐、泻水、脱水、体温下降等；沙门菌、志贺菌中毒表现为腹痛、温下降等；沙门菌、志贺菌中毒表现为腹痛、腹泻、发热等；变形杆菌中毒以上腹部刀绞样腹泻、发热等；变形杆菌中毒以上腹部刀绞样疼痛及急性胃肠炎病症为主；葡萄球菌肠毒素疼痛及急性胃肠炎病症为主；葡萄球菌肠毒素引起胃肠炎，神经系统病症

13、肉毒毒素、真菌引起胃肠炎，神经系统病症肉毒毒素、真菌毒素、化学毒物；呼吸道病症链球菌等；毒素、化学毒物；呼吸道病症链球菌等；甲醇中毒主要表现为视觉障碍、复视、失明；甲醇中毒主要表现为视觉障碍、复视、失明；亚硝酸盐中毒主要表现为缺氧病症，呼吸浅表、亚硝酸盐中毒主要表现为缺氧病症，呼吸浅表、窒息；毒鼠强、氟乙酰胺主要表现为恶心、头窒息；毒鼠强、氟乙酰胺主要表现为恶心、头痛、痉挛、肌肉震颤、流涎、大小便失禁等；痛、痉挛、肌肉震颤、流涎、大小便失禁等；有机磷中毒主要表现为毒蕈碱样和烟碱样中毒有机磷中毒主要表现为毒蕈碱样和烟碱样中毒病症；氰化物中毒主要表现为闪电样击倒，迅病症；氰化物中毒主要表现为闪电样

14、击倒，迅速死亡；安眠镇静药、一氧化碳、吗啡中毒主速死亡；安眠镇静药、一氧化碳、吗啡中毒主要表现为昏睡，等等。要表现为昏睡，等等。病因初步判断潜伏期潜伏期 平均潜伏期意义：是确诊标准之一；平均潜伏期意义：是确诊标准之一；用于估计事故发生开展态势；决定调查起用于估计事故发生开展态势；决定调查起点餐次；确定采取防治措施的时间范围，点餐次；确定采取防治措施的时间范围，并考核防治措施效果。并考核防治措施效果。病因初步判断病因初步判断4类食物中毒的潜伏期一般是：类食物中毒的潜伏期一般是： 5 L 液体食品液体食品 致病菌或毒物分析致病菌或毒物分析 可疑食物可疑食物200ml 固体食品固体食品 致病菌或毒物

15、分析致病菌或毒物分析 可疑食物可疑食物200g 呕吐物呕吐物 致病菌或毒物分析致病菌或毒物分析 50g(ml) 洗胃液洗胃液 致病菌或毒物分析致病菌或毒物分析 200ml 腹泻物腹泻物 致病菌或毒物分析致病菌或毒物分析 50g(ml) 血液血液 病原别离、抗体分析病原别离、抗体分析 5ml 脑脊液脑脊液 病原别离病原别离 2ml 皮损分泌物皮损分泌物 病原分析病原分析 灭菌生理盐水浸泡棉签涂取灭菌生理盐水浸泡棉签涂取采多少所有标本在采集时立即分装，一所有标本在采集时立即分装，一式式 N N 份份( (不同检验工程、重复实不同检验工程、重复实验、其它实验室复核、留样验、其它实验室复核、留样) )

16、 采什么样 对对 照照内对照内对照外对照外对照爆发性食源性疾病爆发性食源性疾病多途径传播疾病大肠杆菌多途径传播疾病大肠杆菌O157:H7 潜伏期长的疾病伤寒、李斯特菌等潜伏期长的疾病伤寒、李斯特菌等非消化道病症的疾病非消化道病症的疾病水源性传播疾病水源性传播疾病需注意需注意什么时间采 采样时间采样时间氟乙酰胺在体内数小时后就开始转化为氟乙酰胺在体内数小时后就开始转化为氟乙酸，血中在十余小时或数天后就检氟乙酸，血中在十余小时或数天后就检不出了氟乙酰胺，这个阶段体内氟乙酸不出了氟乙酰胺，这个阶段体内氟乙酸浓度仍较高，所以应该采集患者的血样浓度仍较高，所以应该采集患者的血样或尿样来检测氟乙酸；毒鼠强

17、在体内代或尿样来检测氟乙酸；毒鼠强在体内代谢缓慢，中毒后数月后采集的血样对病谢缓慢，中毒后数月后采集的血样对病因确定仍有重要价值。因确定仍有重要价值。血清：如疑心是沙门菌、变形杆菌、致血清：如疑心是沙门菌、变形杆菌、致泻大肠艾希菌食物中毒时，应分别在患泻大肠艾希菌食物中毒时，应分别在患者急性期者急性期3天以内和恢复期天以内和恢复期2周左周左右各采取血液右各采取血液23毫升，待凝固时别毫升，待凝固时别离血清，做抗体滴度测定。如做血液细离血清，做抗体滴度测定。如做血液细菌培养时，应将采取的血液直接注入含菌培养时，应将采取的血液直接注入含有玻璃株的无菌小烧瓶中进行振摇，然有玻璃株的无菌小烧瓶中进行振

18、摇，然后参加相应培养基或直接将血液注入培后参加相应培养基或直接将血液注入培养基中。如疑心副溶血性弧菌食物中毒养基中。如疑心副溶血性弧菌食物中毒时，应分别在患者中毒时，应分别在患者中毒12天和天和1周时采周时采取血液做抗体滴度测定。因取血液做抗体滴度测定。因1周后抗体周后抗体就降低或消失。就降低或消失。病毒别离标本最好在发病初期病毒别离标本最好在发病初期1-2天天采采样样 品品 采采 集集怎么采不同检验目的的样品不同检验目的的样品细菌别离细菌别离 病毒别离病毒别离抗原抗原-抗体检测抗体检测化学毒物检测化学毒物检测无菌部位无菌部位基因检测基因检测木制的棉拭子木制的棉拭子 ？食物中毒事件怎么采 粪便

19、可直接采取或采便管插入直肠采集；呕吐物可注入灭菌试管内，由于胃酸能使样品为酸性，不利于细菌的存活，所以应在采集的呕吐物内参加10苏打予以中和，以保持细菌的活性。咽喉涂抹样可用棉签涂擦咽喉部采取洗胃液直接抽取注入灭菌容器内。血液血样的采集应尽早抽取患者的血液，在中毒患者急性期必要时可作血样培养，但主要是用来检测患者血液中的抗体。一般需采血二次以上，第一次在发病初期(3天以内)，第二次是在恢复期(2周左右)，假设患者血中抗体呈明显上升趋势，即可证实其受到过相应致病菌的感染。方法是从肘静脉采取血液23ml，注入干热灭菌试管内，使成斜面，待凝固后，分出血清送检。如做血液细菌培养，可直接注入灭菌并带有玻

20、璃珠的三角瓶中，立即振摇数分钟，以防凝固，然后送检。食物中毒事件怎么采(3)对可疑中毒患者在解剖前不要将尸体用福尔马林、酒精等化学物处理，解剖台要冲洗干净，所用的解剖器具、手套要预先冲洗干净、晾干备用，不要沾染消毒药液如来苏、酒精、升汞溶液等以免污染了检材。例如在解剖时使用了升汞溶液浸泡过的手套，手套上的升汞就可能对样本污染，会干扰了病因的判定。在尸体周围不要喷洒农药灭蚊蝇，以免污染可能用于毒物分析的检材。尸体解剖检样可采取胃肠内容物、脏器、肠系膜淋巴结及血液等。内容物用灭菌注射器或灭菌器械采取，置入灭菌瓶内；脏器应先用烙铁烧灼消毒外表，再用解剖刀剪和镊子取内部检样1020克，置于灭菌容器内送

21、检。血液及体液用灭菌注射器直接抽取或用灭菌棉签蘸取。对死亡患者一般从心腔内采集血液，也可采集腋下静脉、颈静脉、股静脉血液，心腔内血液和周围血中毒物浓度不同。食物中毒事件怎么采疑为百草枯中毒患者的血液不能用玻璃试管，因为玻璃可以使百疑为百草枯中毒患者的血液不能用玻璃试管，因为玻璃可以使百草枯钝化，钝化后的百草枯实验室是不能检出的。草枯钝化，钝化后的百草枯实验室是不能检出的。疑为一氧化碳中毒者应尽早抽血疑为一氧化碳中毒者应尽早抽血5-15毫升注入玻璃试管内，量毫升注入玻璃试管内，量要直装至瓶口，必须用密封玻璃塞塞紧，防止瓶中残留空气，血要直装至瓶口，必须用密封玻璃塞塞紧，防止瓶中残留空气，血液是分

22、析一氧化碳中毒的唯一检体。其他易挥发毒物样本也要尽液是分析一氧化碳中毒的唯一检体。其他易挥发毒物样本也要尽量密封保存，尽快检测。如氰化物。量密封保存，尽快检测。如氰化物。怎么采 样品采集程序样品采集程序 采样用物品准备采样用物品准备 采样程序方法采样程序方法 采样纪录采样纪录 样品编号样品编号 样品保存样品保存 使用卫生部统一制定的采样记录文书，经有关责任人员签字后送检；注意注意样样 品品 采采 集集影响采样的主要因素缺乏及时性：缺乏及时性： 由于一些消费者对由于一些消费者对? ?食品平安法食品平安法? ?观念淡薄，缺乏自我保护意识，观念淡薄，缺乏自我保护意识，食源性疾病发生后他们不是首先及时

23、向相关部门报告疫情，而是食源性疾病发生后他们不是首先及时向相关部门报告疫情，而是自己先与经营者交涉，在不能如愿的情况下才向卫生监督部门举自己先与经营者交涉，在不能如愿的情况下才向卫生监督部门举报，因此造成一是经营者在得知发生食源性疾病的情况后，首先报，因此造成一是经营者在得知发生食源性疾病的情况后，首先处理掉一切可疑剩余食品，对加工经营现场、工具、容器作了相处理掉一切可疑剩余食品，对加工经营现场、工具、容器作了相应的处理；二是延误了报告的时间，从而影响了对可疑食品和病应的处理；二是延误了报告的时间，从而影响了对可疑食品和病人排泄物的采集。人排泄物的采集。采样缺乏代表性：采样缺乏代表性： 由于食

24、源性疾病多是突发性的，如细菌性食物中毒都有特定的由于食源性疾病多是突发性的，如细菌性食物中毒都有特定的潜伏期，最短潜伏期，最短1h 1h 3h 3h，一般，一般5h5h 10h 10h ，但当相关部门接到疫，但当相关部门接到疫情到达现场后，往往时间周期间隔较长，可疑食物已清理，即使情到达现场后，往往时间周期间隔较长，可疑食物已清理，即使采到几份剩余食物，也可能不是当日餐桌上剩余菜肴，因此，常采到几份剩余食物，也可能不是当日餐桌上剩余菜肴，因此，常常出现食品中检出的细菌与病人排泄物中检出的细菌不相符，影常出现食品中检出的细菌与病人排泄物中检出的细菌不相符，影响了结果的分析。响了结果的分析。 影响

25、采样的主要因素影响采样的主要因素食品加工制作现场各环节的采样往往能提供一些线索，但常常见食品加工制作现场各环节的采样往往能提供一些线索，但常常见到现场已被清扫，食具和用具已清洗干净，同样也影响了食品加到现场已被清扫，食具和用具已清洗干净，同样也影响了食品加工工具、容器、场所的采样和检验。工工具、容器、场所的采样和检验。采样缺乏典型性：采样缺乏典型性：中毒病人发病后，患者一般开始时自行用抗菌毒，严重时才去当中毒病人发病后，患者一般开始时自行用抗菌毒，严重时才去当地医院治疗，由于一些医务人员对食源性疾病报告制度意识不强，地医院治疗，由于一些医务人员对食源性疾病报告制度意识不强，导致了只管用药治疗，

26、无视了对病人呕吐物和排泄物的留取，大导致了只管用药治疗，无视了对病人呕吐物和排泄物的留取，大量的抗菌素抑制了致病菌繁殖，从而影响了致病菌的检出率。量的抗菌素抑制了致病菌繁殖，从而影响了致病菌的检出率。采样缺乏完整性：采样缺乏完整性：一般中毒病人发病期的血液能采集到，但是采集恢复期的血液，一般中毒病人发病期的血液能采集到，但是采集恢复期的血液，由于病人的不配合或外出经常采不全也影响了检验结果的全面由于病人的不配合或外出经常采不全也影响了检验结果的全面分析。分析。 样品的处理(1)固体食物如系大块鱼肉、组织脏器等，先用烙铁烧灼外表，或在沸水中烫35秒钟，然后再取内部检样510克，按无菌要求，剪碎后

27、置无菌乳钵内，加人适量灭菌海沙研细，再加人无菌生理盐水作1：5稀释，混匀沉淀后，取上清液进行接种和涂片染色镜检。(2)液体食物可将液体食物直接接种培养基，或离心(每分钟3000转以上)半小时后，采取沉淀物进行细菌培养。(3)罐头食品如罐头尚未翻开，先用温水洗净外表，并以95酒精燃烧消毒，然后用灭菌开口刀将罐头翻开，以无菌操作将检样取出进行细菌检验。如罐头为空盒，可用肉汤培养基冲洗盒内壁，以洗液做细菌培养。样品的处理(4)(4)粪便和呕吐物以无菌生理盐水，充分搅拌混匀、静粪便和呕吐物以无菌生理盐水，充分搅拌混匀、静置，待其中粗块下沉后，取上清液进行接种及涂片染置，待其中粗块下沉后，取上清液进行接

28、种及涂片染色镜检。色镜检。(5)(5)洗胃液用无菌试管低速离心后，取沉淀物进行检验。洗胃液用无菌试管低速离心后，取沉淀物进行检验。(6)(6)血液检样用做细菌培养的抗凝血，以灭菌吸管吸取，血液检样用做细菌培养的抗凝血，以灭菌吸管吸取，注人肉汤或其他培养基内增菌。用于测定患者血清效注人肉汤或其他培养基内增菌。用于测定患者血清效价的血样，可用离心沉淀法或自然析出法将血清分出，价的血样，可用离心沉淀法或自然析出法将血清分出，与可疑中毒菌株作试管凝集试验。与可疑中毒菌株作试管凝集试验。(7)(7)炊事用具擦洗水等可直接接种培养基。炊事用具擦洗水等可直接接种培养基。样本标签内容样本标签内容样本编号样本编

29、号唯一性唯一性样本来源样本来源从什么物质、材料中采集的，如病理采集从什么物质、材料中采集的，如病理采集的肝脏就可标的肝脏就可标 注为某某患者肝脏；注为某某患者肝脏；样本数量样本数量包装中样本的数量，如此包装中同时采集包装中样本的数量，如此包装中同时采集了了2块肝脏样本块肝脏样本 就要标注为就要标注为2 采样时间：采样时间：采样地点：采样地点：采样人：采样人：样本处理情况：抗凝剂样本处理情况：抗凝剂 、运送培养基、标本状况开、运送培养基、标本状况开封食品封食品样本标签内容样本标签内容 最小包装每个标本最小包装每个标本 每个包装箱每个包装箱 每批样本后要附上一个样本清单，详细列出此批样本每批样本后

30、要附上一个样本清单，详细列出此批样本的名称、状态和本卷须知。的名称、状态和本卷须知。样品的包装 感染性样本感染性样本 放射性样本放射性样本 易腐性样本易腐性样本 挥发性样本挥发性样本样品的运送标本应由专业人员专人运送，最好使用专车。标本应由专业人员专人运送，最好使用专车。邮寄样品邮寄样品除患者检测血浆外，其他样本不宜通过邮寄方除患者检测血浆外，其他样本不宜通过邮寄方式转运。式转运。检测血浆用带盖的小塑料管盛装，外衬缓冲包检测血浆用带盖的小塑料管盛装，外衬缓冲包装和吸附材料，通过装和吸附材料，通过EMSEMS邮寄。邮寄。在送邮件时要明确向邮局说明邮寄物品的成分在送邮件时要明确向邮局说明邮寄物品的

31、成分及平安性。及平安性。在运送过程中，要保证条件能够持续保障。在运送过程中，要保证条件能够持续保障。样品的保存容器、介质、温度介质、温度检测目的检测目的 细菌细菌 病毒病毒 寄生虫寄生虫 抗原抗体抗原抗体 核酸核酸 化学毒物化学毒物预期保存时间预期保存时间样品的保存运送样品的保存运送平安性平安性 样品的平安样品的平安 环境的平安不泄漏、不污染环境的平安不泄漏、不污染交接手续交接手续样品送检本卷须知 1 1采集的样品一般应在采集的样品一般应在4 4小时内接种完毕，故必须及时送检。小时内接种完毕，故必须及时送检。2 2夏季送检样品时，应注意冷藏。不得参加任何防腐剂。夏季送检样品时，应注意冷藏。不得

32、参加任何防腐剂。3 3应应附附详详细细送送检检单单，应应填填明明样样品品名名称称、份份数数、重重量量、来来源源、中中毒毒表表现现、送送检检时时间间、有有范范围围的的检检验验工工程程、采采样样条条件件容容器器是是否否灭灭菌菌、有无封条、送样人。有无封条、送样人。4 4样品必须有牢固的标签，包装严密封闭。样品必须有牢固的标签，包装严密封闭。5 5注意无菌操作，防止污染，以免影响结果。注意无菌操作，防止污染，以免影响结果。6 6采采样样过过程程中中履履行行必必要要的的采采样样手手术术。发发生生中中毒毒单单位位负负责责人人签签封封与与开具收据等开具收据等7 7采采集集肛肛拭拭人人数数，中中毒毒事事件件

33、规规模模较较小小，患患者者人人数数1010人人以以下下的的，全全部部采采样样；中中毒毒事事件件规规模模较较大大，患患者者人人数数较较多多，至至少少应应对对30%-50%30%-50%临临床病症典型的患者进行采集。床病症典型的患者进行采集。检验检什么实验工程要结合现场流行病学调查实验工程要结合现场流行病学调查. .临床临床. .血检血检. .电生理电生理. .影像学检查等结果。影像学检查等结果。确定实验工程应同时考虑以下几点确定实验工程应同时考虑以下几点: : 早期早期IgMIgM和双份和双份IgGIgG血清学检验；血清学检验； 排泄物排泄物. .分泌物分泌物. .血液中的病原体的形态学血液中的

34、病原体的形态学. .血清学和核酸分型鉴定。血清学和核酸分型鉴定。 人体外环境病原鉴定结果与人体内抗原、抗体的吻人体外环境病原鉴定结果与人体内抗原、抗体的吻合、匹配；合、匹配； 毒力分析和动物实验模型佐证；毒力分析和动物实验模型佐证； 病原侵入与发病的时间顺序；病原侵入与发病的时间顺序； 主导病原与主导病原与併併发病原的甄别发病原的甄别; ; 安排检验工程要有几套预备方案安排检验工程要有几套预备方案, ,实验的无果和失败。实验的无果和失败。检什么病原别离病原别离 细菌细菌需氧菌、厌氧菌、兼需氧菌、厌氧菌、兼性厌氧菌、性厌氧菌、L L型菌型菌 病毒病毒 寄生虫寄生虫血清学检查：血清学检查： 抗原抗

35、原 抗体抗体 急性期急性期IgMIgM抗体抗体 急性期和恢复期双份静脉血测定急性期和恢复期双份静脉血测定特异性特异性IgGIgG抗体。抗体。核酸检测核酸检测 特征基因、毒力基因、溯源比较特征基因、毒力基因、溯源比较定性定性/ /定量定量细菌性食物中毒的实验室诊断致病菌的定量检验致病菌的定量检验对细菌性食物中毒的调查对细菌性食物中毒的调查 需需要要做做定定量量检检验验的的细细菌菌食食物物中中毒毒与与摄摄入入量量有关有关产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌、变形杆菌产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌、变形杆菌 样品：中毒相关食品、粪便、呕吐物样品：中毒相关食品、粪便、呕吐物收集致病菌对人的最低感染剂量的资料收集致病

36、菌对人的最低感染剂量的资料危险性分析中对暴露量的评估危险性分析中对暴露量的评估摄摄入入的的菌菌量量与与产产生生有有害害健健康康作作用用的的概概率率和和程程度度成成正正相相关关，但但通通常常不不是是呈呈线线性性关关系系。摄摄入入菌菌量量的的增加通常降低肠道疾病的潜伏期。增加通常降低肠道疾病的潜伏期。怎么检灵敏度、准确度、重现性、不同方法结果的可比较性灵敏度、准确度、重现性、不同方法结果的可比较性用什么标本用什么标本用什么方法用什么方法用什么试剂用什么试剂 对重大事件的毒物鉴定或样本检测要同时送数家具有鉴定检验资质的实验室同步开展工作，防止因实验室管理和技术因素对结果的影响。检测工程和方法确实定检

37、测工程和方法确实定分析方法的选用要考虑待测样品原形、代谢物、分析方法的选用要考虑待测样品原形、代谢物、分析要求定性、定量、样品类型、实验室条件，分析要求定性、定量、样品类型、实验室条件，分析目的等因素，还要考虑时效性、准确性、经济性分析目的等因素，还要考虑时效性、准确性、经济性等要求。有时毒物有定性结果即可说明问题，而对于等要求。有时毒物有定性结果即可说明问题，而对于那些有环境或内源性本底的毒物，或需用于现场评价、那些有环境或内源性本底的毒物，或需用于现场评价、应急处理方法选择或用于患者治疗效果评价的要用定应急处理方法选择或用于患者治疗效果评价的要用定量分析。临床治疗药物监测必须进行定量分析。

38、量分析。临床治疗药物监测必须进行定量分析。 食品平安国家标准食品微生物学国家检验的演变GB4789.1-2010 食品微生物学检验 总则GB4789.2-2010 食品微生物学检验 菌落总数测定 GB4789.3-2010 食品微生物学检验 大肠菌群计数GB4789.4-2010 食品微生物学检验 沙门氏菌检验GB4789.10-2010 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验GB4789.15-2010 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数GB4789.18-2010 食品微生物学检验 乳与乳制品检验GB4789.30-2010 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验GB4789.35-20

39、10 食品微生物学检验 乳酸菌检验GB4789.40-2010 食品微生物学检验 阪崎肠杆菌检验怎么检快速灵敏方法的应用快速灵敏方法的应用仪器自动化方法仪器自动化方法别离培养方法的改进别离培养方法的改进快速灵敏方法的应用快速灵敏方法的应用1.细菌培养的前、后处理方法的自动化细菌培养的前、后处理方法的自动化 培养法的前处理包括采样、称量、分样、匀浆、制作培养法的前处理包括采样、称量、分样、匀浆、制作琼脂培养基、样品与培养基混释等。这些操作自动化仪琼脂培养基、样品与培养基混释等。这些操作自动化仪器有：自动称量分注装置、均化器、培养基制作装置、器有：自动称量分注装置、均化器、培养基制作装置、菌液自动

40、涂抹装置等。培养后，进行菌落计数的自动化菌液自动涂抹装置等。培养后，进行菌落计数的自动化装置有：笔型手动式计数器、用图像将平板内菌落摄录装置有：笔型手动式计数器、用图像将平板内菌落摄录下来的自动计数仪、彩色图像菌种鉴定仪。下来的自动计数仪、彩色图像菌种鉴定仪。快速灵敏方法的应用快速灵敏方法的应用各种简易培养基：简易培养基是食各种简易培养基：简易培养基是食品微生物检验中应用较为普遍的一品微生物检验中应用较为普遍的一种快速简便的方法。培养基有印花种快速简便的方法。培养基有印花型、平板型、滤膜型等多种类型。型、平板型、滤膜型等多种类型。例如，日本几家公司生产的含有酶例如，日本几家公司生产的含有酶显色

41、底物的印花型培养基，由于有显色底物的印花型培养基，由于有酶显色底物，因而有快速易判断等酶显色底物，因而有快速易判断等特点。液体样品检测用培养基有多特点。液体样品检测用培养基有多种形式，有的在孔板上固定有无菌种形式，有的在孔板上固定有无菌液体培养基，检测时只要注入液体液体培养基，检测时只要注入液体样品即可判断结果；颗粒状培养基样品即可判断结果；颗粒状培养基参加液体样品培养即可判断结果；参加液体样品培养即可判断结果；而枯燥型培养基是将培养基成分和而枯燥型培养基是将培养基成分和胶体化物质涂布在培养基垫上，它胶体化物质涂布在培养基垫上，它便于携带，操作简便。便于携带，操作简便。 快速灵敏方法的应用快速

42、灵敏方法的应用快速灵敏方法的应用快速灵敏方法的应用检测活菌数方法与器材检测活菌数方法与器材 不需进行培养不需进行培养即可直接检测活菌数的方法有：观察细菌引起电流阻即可直接检测活菌数的方法有：观察细菌引起电流阻抗值变化的阻抗测定法；以细胞内抗值变化的阻抗测定法；以细胞内ATP为指标的生物为指标的生物发光法；用荧光剂标记微生物细胞测定发光量的荧光发光法；用荧光剂标记微生物细胞测定发光量的荧光染色法；用滤膜集菌，用染色法；用滤膜集菌，用ATP发光试剂标记，然后进发光试剂标记，然后进行测定的滤膜光子检测法等。这些方法是直接检测活行测定的滤膜光子检测法等。这些方法是直接检测活菌数，因而适于观察细菌随时问

43、发生的变化，可用于菌数，因而适于观察细菌随时问发生的变化，可用于发酵食品的质量管理、饮料生产工艺的监测等。发酵食品的质量管理、饮料生产工艺的监测等。快速灵敏方法的应用高选择性显色培养基高选择性显色培养基食物中毒致病菌简易快速的检测方法与器材沙门氏菌、O157大肠菌、李斯特菌等食物中毒致病菌如用培养法检测，由于菌量少，需进行前培养和增菌培养，故费时较多，且需熟练的检测技术。因此，近年来国外对食物中毒致病菌简易快速的检测方法与器材的研究十分重视，许多公司纷纷研制出省时、容易判断结果的简易细菌检测方法与器材。目前，已到达实用化程度的快速、简易的细菌检测方法有：应用抗原体反响原理的免疫凝集法、免疫沉降

44、法、免疫荧光法、 EIA法，免疫色谱法、以及磁珠法等，DNA探针法，PCR法。分子生物学技术在检测食源性病原微生物中的应用DNA探针技术探针技术 DNA探针技术是最新开展起来的一探针技术是最新开展起来的一项特异、灵敏、快速的检测方法，但因项特异、灵敏、快速的检测方法，但因有一定比例的假阳性反响，故所有阳性有一定比例的假阳性反响，故所有阳性结果必须用标准的培养方法加以确证。结果必须用标准的培养方法加以确证。聚合酶链反响聚合酶链反响(PCR)技术技术 PCR技术原理为提高技术原理为提高DNA探针的敏感性，探针的敏感性，可先将靶可先将靶 DNA序列扩增，增加序列扩增，增加 DNA数数量，使其到达足够

45、的检测量，假设反响量，使其到达足够的检测量，假设反响以动力学为根底，那么能定量分析。在以动力学为根底，那么能定量分析。在PCR反响中引人反响中引人Taq聚合酶使反响得以半聚合酶使反响得以半自动化和简便反响程序。用扩增自动化和简便反响程序。用扩增DNA进进行的行的PCR反响具有无与伦比的优越性。反响具有无与伦比的优越性。 快速检出细菌的毒素快速检出细菌的毒素 自临床标本中直接检出细菌的毒素，常比自临床标本中直接检出细菌的毒素，常比细菌培养更可靠。如难辨梭菌在正常肠道中细菌培养更可靠。如难辨梭菌在正常肠道中也可出现，故对抗生素相关性肠炎的诊断，也可出现，故对抗生素相关性肠炎的诊断，检出其毒素比细菌

46、培养更有意义。已应用此检出其毒素比细菌培养更有意义。已应用此类毒素的单抗以快速凝集或类毒素的单抗以快速凝集或EIA法自粪便标法自粪便标本中直接检出毒素本中直接检出毒素A或或B进行诊断。产毒素埃进行诊断。产毒素埃希氏菌希氏菌ETEC感染的诊断主要依靠检查感染的诊断主要依靠检查细菌的细菌的LT热敏毒素与热敏毒素与ST耐热毒素耐热毒素可应用其单抗以多种免疫学手段检出。肠出可应用其单抗以多种免疫学手段检出。肠出血性大肠埃希氏菌血性大肠埃希氏菌EHEC的重要特征是的重要特征是产生产生Vero细胞毒素细胞毒素VT或称志贺样毒素或称志贺样毒素SLT。由于。由于EHEC的血清型繁多，生化的血清型繁多，生化反响

47、也可不典型，故检查该菌的毒素极具诊反响也可不典型，故检查该菌的毒素极具诊断价值。断价值。快速检出细菌的毒素快速检出细菌的毒素 英国Unipaih公司已研制出VTEC的PRLA乳胶凝集试剂分别检查VT-1与VT-2，试验时以多粘菌素裂解菌体，释出VT，与乳胶试剂在U形板中温育24小时，肉眼判定有无凝集。日本生研公司的VIEC -RPLA也为快速凝集试剂。Bentin等注意到90%的VTEC在洗过的羊血肉汤平板上经37温育过夜可表现出溶血；而非溶血菌落均无VT或SLT基因。这一发现为VTEC的检测提供一迅速的筛查方法。 金黄色葡萄球菌产生的多种肠毒素也用单抗的协同凝集试验迅速检出，是诊断该菌致成的

48、事物中毒的可靠手段。应用反向被动乳胶凝集法Oxoid公司试剂快速检测葡萄球菌的TSST1，可及时诊断出由葡萄球菌致成的中毒性休克综合征。快速的细菌对抗菌药物的快速的细菌对抗菌药物的敏感性试验敏感性试验 新的检测手段，如分子生物学手段检测细菌的耐药基新的检测手段，如分子生物学手段检测细菌的耐药基因，自动化的药敏试验仪器，因，自动化的药敏试验仪器，E test法等可提高准确法等可提高准确性与效率性与效率 。 快速纸片法快速纸片法Nitrocefin检查检查内酰胺酶，对内酰胺酶，对革兰阳性球菌，淋病奈瑟菌，流感嗜血杆菌，卡他莫革兰阳性球菌，淋病奈瑟菌，流感嗜血杆菌，卡他莫拉菌有重要意义。拉菌有重要意

49、义。 快速乳胶凝集试验日本生研公司可检出变异的快速乳胶凝集试验日本生研公司可检出变异的青霉素结合蛋白青霉素结合蛋白PBP2a经与经与mecA基因检测比较，基因检测比较，其敏感性其敏感性98.5%，特异性达，特异性达100%。 细菌性食物中毒样品检验程序1 1 样品采集样品采集 以无菌容器采集可疑样品及病人的排泄物。以无菌容器采集可疑样品及病人的排泄物。2 2别离培养别离培养 在病原菌不明确的情况下，多准备一些各在病原菌不明确的情况下，多准备一些各类菌的选择性培养基，如类菌的选择性培养基，如ssss平板，伊红美兰平板作沙平板，伊红美兰平板作沙门菌、志贺菌；血平板、门菌、志贺菌；血平板、P-KP-

50、K琼脂平板作金黄色葡萄球琼脂平板作金黄色葡萄球菌别离用；氯化钠蔗糖琼脂或菌别离用；氯化钠蔗糖琼脂或TCBSTCBS琼脂作副溶血性弧琼脂作副溶血性弧菌及溶藻性弧菌用；甘露醇卵黄多粘菌素琼脂作蜡样菌及溶藻性弧菌用；甘露醇卵黄多粘菌素琼脂作蜡样芽孢杆菌别离用等等。芽孢杆菌别离用等等。接种：取适量可疑样品放置无菌平皿中，参加与样品接种：取适量可疑样品放置无菌平皿中，参加与样品等量的无菌生理盐水，将样品与生理盐水充分混匀，等量的无菌生理盐水，将样品与生理盐水充分混匀，用取菌环分别接种于各种平板培养基上，置用取菌环分别接种于各种平板培养基上，置37 37 培养培养20h20h左右，观察各平皿菌落特征，进一

51、步鉴定。左右，观察各平皿菌落特征，进一步鉴定。细菌性食物中毒样品检验程序 3. 取优势菌株进行系统鉴定 对优势菌株进行涂片镜检，革兰染色，以形态特征、菌落特点做出意向性判断进行下步鉴定，接种克氏双糖含铁琼脂培养，然后做血清凝集，生化实验，毒性实验等，报结果 4.活菌数的测定某些细菌在食品中须到达一定量时才可引起中毒病症(如金黄色 葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、产气荚膜梭菌等)。方法是取样品的各个稀释液包括1:10接种2只相应的平板，用灭菌玻璃棒在每只平板外表涂布均匀。将平板置30培养24小时， 数出可疑菌落数，然后挑取典型菌落5个或更多的可疑菌落，经过证实试验后，计算出菌落数。细菌性食物中毒样品检验

52、程序5.毒素测定 有些细菌性食物中毒并不是细菌本身所引起，而是由其所产生的毒素引起的，如金黄色葡萄球菌肠毒素、肉毒梭菌毒素，故须做其毒素的测定。 动物试验将可疑食物制备浸出液，或别离所得的上清液，皮下或腹腔注射动物(小白鼠 )体内，观察数日，看有无中毒 。细菌性食物中毒样品检验程序6.血清凝集试验 将中毒患者急性期和恢复期的血清，与自中毒检样中别离的致病菌所制成的菌体抗原(将别离菌接种培养基，37培养24小时，待其生长旺盛后，刮取菌苔至灭菌盐水中，混散均匀，用生理盐水稀释成6亿，毫升即成)做试管凝集试验，观察凝集价有无上升趋势，如恢复期的血清效价比发病初期有明显增高增高4倍或以上即有诊断价值。

53、经验 1.对所有样品进行致病菌别离和鉴定时应按照国家标准检验方法和已公认的微生物检验程序，应用直接别离及增菌双重培养，直接别离可检出样品中的优势菌(包括一些条件致病菌)增菌可将样品中污染的但又菌量较少的病原菌捡出，同时对服药患者肛试样品中被抗菌素抑制的细菌到达复苏和增加菌量帕作用 2.由于多种病原菌引起的食物中毒，有相类似的临床病症，因此对致病菌的检测范围应扩大，在别离培养时应多准备一些各类菌的选择性培养基，采取多思路、多方法同时检测各种致病菌的原那么，从而获得满意的检验结果。经验金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌按按GB47892021(GB47892021(以下简称以下简称GB)GB)的方法有时

54、不能检出。的方法有时不能检出。有一次食物中毒检验中我们同时用有一次食物中毒检验中我们同时用GBGB的方法和法国的方法和法国梅里埃公司生产的血浆凝固酶平板的方法，结果梅里埃公司生产的血浆凝固酶平板的方法，结果GBGB的方法没有检出，而血浆凝固酶平板的方法却检出的方法没有检出，而血浆凝固酶平板的方法却检出了金黄色葡萄球菌，看来多种检验方法并用能提高了金黄色葡萄球菌，看来多种检验方法并用能提高致病菌的检出率。致病菌的检出率。2 2 副溶血性弧菌副溶血性弧菌食物中毒中最多见的一种致病菌。按食物中毒中最多见的一种致病菌。按GBGB方法样品经方法样品经增菌后划增菌后划TCBSTCBS平板，经平板，经181

55、824 h24 h培养后菌落有时为培养后菌落有时为不典型的黄色或黄绿色，继续培养不典型的黄色或黄绿色，继续培养24 h24 h后菌落才成后菌落才成典型的蓝绿色，经生化鉴定符合副溶血性弧菌。这典型的蓝绿色，经生化鉴定符合副溶血性弧菌。这是因为溶藻性弧菌呈优势菌时，会影响副溶血性弧是因为溶藻性弧菌呈优势菌时，会影响副溶血性弧菌的菌落颜色。所以经菌的菌落颜色。所以经24 h24 h培养，菌落不典型时不培养，菌落不典型时不要轻易放弃，应继续培养要轻易放弃，应继续培养24 h24 h后再作鉴定。我们在后再作鉴定。我们在培养副溶血性弧菌时已屡次出现这种情况。培养副溶血性弧菌时已屡次出现这种情况。经验3 沙

56、门菌也是较常见的一种致病菌。 结果的果的报告、解告、解释、分析、分析结果的报告、解释、分析实验室检测结果是确定病因的重要依据，但实验室结果要和现场实验室检测结果是确定病因的重要依据，但实验室结果要和现场调查情况、患者的临床表现一起分析，才能确定病因。调查情况、患者的临床表现一起分析，才能确定病因。检验结果的正确性不仅取决于实验室的条件和技术水平，同时还检验结果的正确性不仅取决于实验室的条件和技术水平，同时还与检验样品的采集、保存、送样方法等方面有关。因此在分析检与检验样品的采集、保存、送样方法等方面有关。因此在分析检验结果时，除了应考虑结果是否符合有关实验室判定标准外，还验结果时，除了应考虑结

57、果是否符合有关实验室判定标准外，还应综合考虑各种困难影响检验结果的因素。应综合考虑各种困难影响检验结果的因素。阳性结果不一定能说明病原因子在爆发事件中的致病作用；反之阳性结果不一定能说明病原因子在爆发事件中的致病作用；反之阴性结果也不一定能完全否认某种病原因子的病因假设阴性结果也不一定能完全否认某种病原因子的病因假设细菌性食物中毒的实验室诊断 要点：要点：从相关食品及发病者中别离到相同的致病菌从相关食品及发病者中别离到相同的致病菌从同批发病者中别离到相同的致病菌从同批发病者中别离到相同的致病菌从从食食品品中中别别离离到到致致病病菌菌的的致致病病特特点点与与发发病病者者的的临临床床病病症症相符相

58、符检出限值和检验结果的表达检出限值和检验结果的表达每个实验室对已经建立的检测方法都要进行准确性和每个实验室对已经建立的检测方法都要进行准确性和灵敏性评价，还要争取开展与其它检测方法之间进行灵敏性评价，还要争取开展与其它检测方法之间进行比较的工作。每批样本都要对方法进行检出限值最比较的工作。每批样本都要对方法进行检出限值最低检出浓度测算，并将最低检出限值在发出的检测低检出浓度测算，并将最低检出限值在发出的检测报告中注明。报告中注明。对定量检测，如样本中毒物浓度超过检出限值，应标对定量检测，如样本中毒物浓度超过检出限值，应标注出实际测出的数值；如在样本中检测出所检测的毒注出实际测出的数值；如在样本

59、中检测出所检测的毒物，但毒物的量或浓度低于检出限值，应在检测物，但毒物的量或浓度低于检出限值，应在检测报告中报告报告中报告“检出；对在样本中未发现目标毒物，检出；对在样本中未发现目标毒物，应该检测报告上注明应该检测报告上注明“未检出。未检出。对定性检测，样本中检出目标毒物时在检验报告上注对定性检测，样本中检出目标毒物时在检验报告上注明明“阳性；对未检出目标毒物者在检验报告上注明阳性；对未检出目标毒物者在检验报告上注明“阴性。阴性。结合流调资料分析检测结果结合流调资料分析检测结果 一致（合理）合理）不一致（合理）合理）检测阳性假设成立是否混杂？流调资料可信度？检测阴性假设成立是否假阴性？流调资料

60、可信度？冲突结果的处理冲突结果的处理每个重大中毒事件病因确定或中毒患者诊断的过程中都每个重大中毒事件病因确定或中毒患者诊断的过程中都会有一次或屡次毒物鉴定检测，各次检测结果应该有一会有一次或屡次毒物鉴定检测，各次检测结果应该有一致性，这些结果共同指向某一种或多种毒物。致性，这些结果共同指向某一种或多种毒物。冲突的原因分析冲突的原因分析a. 检测方法、所用的仪器不同，其灵敏度、精确度不同，检测方法、所用的仪器不同，其灵敏度、精确度不同，每种方法都有其局限性。一种方法能够检出的另外一种每种方法都有其局限性。一种方法能够检出的另外一种方法可能检不出。方法可能检不出。b. 每个实验室采用的实验方法不同

61、，包括样本前处理、每个实验室采用的实验方法不同，包括样本前处理、实验条件等对结果也有影响。实验条件等对结果也有影响。c. 用于分析的样本是来自不同的个体、材料、位置及同用于分析的样本是来自不同的个体、材料、位置及同一不均匀样本的不同部位，这些都带来不同的分析结果。一不均匀样本的不同部位，这些都带来不同的分析结果。d. 样本采集、运输、实验室操作过程中的污染样本采集、运输、实验室操作过程中的污染 别离不到病原性微生物可能的原因有1.1.检测工程如农药和病原体品种、厌氧菌检测工程如农药和病原体品种、厌氧菌2.2.L L型细菌型细菌3.3.病原性微生物的数量很少，培养不出来病原性微生物的数量很少，培

62、养不出来4.4.细菌处于非可培养的状态细菌处于非可培养的状态5.5.现有的培养基和培养技术不适合这种微生物的生长现有的培养基和培养技术不适合这种微生物的生长6.6.技术、设备、试剂的原因技术、设备、试剂的原因7.7.新的病原微生物？未知毒物？新的病原微生物？未知毒物？流行病学流行病学实验室实验室配合配合 合作合作流行病学流行病学实验室实验室 样本采集方案与检测人员沟通，便于以后实验室分析处理。样本采集方案与检测人员沟通，便于以后实验室分析处理。样本采集方案与检测人员沟通，便于以后实验室分析处理。样本采集方案与检测人员沟通，便于以后实验室分析处理。 共同商定分析方案：现场工作人员或临床医务工作者

63、要和毒物共同商定分析方案：现场工作人员或临床医务工作者要和毒物共同商定分析方案：现场工作人员或临床医务工作者要和毒物共同商定分析方案：现场工作人员或临床医务工作者要和毒物分析人员多沟通，对现场情况、所收集样本的情况、现场工作分析人员多沟通，对现场情况、所收集样本的情况、现场工作分析人员多沟通，对现场情况、所收集样本的情况、现场工作分析人员多沟通，对现场情况、所收集样本的情况、现场工作的方向等进行讨论，确定应该检验的毒物种类以及是否需要定的方向等进行讨论，确定应该检验的毒物种类以及是否需要定的方向等进行讨论，确定应该检验的毒物种类以及是否需要定的方向等进行讨论，确定应该检验的毒物种类以及是否需要

64、定量，据此制定分析工作方案量，据此制定分析工作方案量，据此制定分析工作方案量，据此制定分析工作方案 共同讨论对结果进行分析解释共同讨论对结果进行分析解释共同讨论对结果进行分析解释共同讨论对结果进行分析解释提高实验室诊断率采样流行病采样流行病-实验室实验室检验实验室检验实验室报告流行病报告流行病-实验室实验室实验室检测能力的提高仪器仪器方法方法技术技术管理管理培训培训质量控制质量控制人人常规别离鉴定常规别离鉴定染色液染色液培养基培养基检测试剂条、试剂盒检测试剂条、试剂盒阴性、阳性、试剂对照阴性、阳性、试剂对照实验室管理和质量控制实验室管理和质量控制分子生物学实验室分子生物学实验室实验室分区要求室分区要求 环境、境、试剂、标本防本防污染染实验室管理和质量控制实验室管理和质量控制实验室管理和质量控制实验室管理和质量控制实验室清洁实验室清洁清清洁方向方向 应按按检测工作流程方向工作流程方向进行：行：试剂贮存和准存和准备区区样品粉碎区品粉碎区核酸制核酸制备区区扩增区增区产物分析区物分析区 清清洁用具用具 不同不同实验区域的清区域的清洁用具用具应固定，不能交叉使用。固定，不能交叉使用。工作工作结束后束后应立即立即对工作区域工作区域进行清行清洁。谢谢大家请批评指正