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1、第第4 4讲讲 动物细胞工程动物细胞工程 一、动物细胞培养续表 【例1】动物细胞培养和植物组织培养的主要区别是() A动物细胞培养所用的培养基的成分与植物的不同 B动物细胞培养是培养单个细胞，植物组织培养是培养组织 C动物细胞培养可以传代培养，而植物组织培养不能传代培养 D动物细胞培养过程中可发生遗传物质的改变，而植物组织培养不能A 【解析】动物细胞培养通常用液体培养基，成分中糖类用葡萄糖，还必须含有动物血清；植物组织培养通常用固体培养基，成分中含有蔗糖及植物激素等物质。 二、动物细胞融合续表 【友情提醒】(1)在细胞融合时，可出现多种杂种细胞，如B细胞B细胞，骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞，B细胞骨髓
2、瘤细胞。 (2)各项技术在使用中一般要借助于其他某种技术的协助，如动物细胞融合、单克隆抗体的制备、胚胎移植、核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程技术的基础。续表 【例2】下列关于单克隆抗体制备过程的叙述，正确的是() A制备过程中不需要动物细胞培养技术 B杂交瘤细胞具有浆细胞与癌细胞的所有特点 C经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产 D单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂D 【解析】单克隆抗体的制备是将骨髓瘤细胞与浆细胞结合，经过选择培养基的筛选得到杂交瘤细胞并经单一抗体检测后，培养能产生特定抗体的杂交瘤细胞即可得单克隆抗体，杂交瘤细胞能无限繁殖但不具有癌细胞的转
3、移能力。 三、动物体细胞核移植与克隆动物 1原理 动物细胞核的全能性。动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。 2供核细胞 一般选优良动物的传代10代以内的细胞。 3受体细胞 去核的M期卵母细胞。 4过程 【例3】在克隆多利羊的过程中，下列哪项技术没有运用到() A细胞培养技术 B细胞核移植 C胚胎移植技术 D基因工程技术【解析】克隆技术需利用核移植以产生重组细胞，重组细胞经细胞培养形成早期胚胎后，需移植到母体子宫发育成个体。 D制备单克隆抗体过程中的两次筛
4、选的不同点制备单克隆抗体过程中的两次筛选的不同点第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出B瘤融合的杂交细胞。第二次筛选是将产生特定抗体的杂交瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内获取的免疫过的B淋巴细胞有很多种，形成的杂交瘤细胞也有很多种，所以需要筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。 1.(2010四川)某实验室做了下图所示的实验研究，下列相关叙述，正确的是( ) A与纤维母细胞相比，过程形成的诱导干细胞的全能性较低 B过程是诱导干细胞的结构和遗传物质发生稳定性差异的过程 C每个Y细胞只产生一种抗体，故过程不需要选择性
5、培养基进行筛选 D过程产生的单抗，不需细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外D 【解析】本题考查细胞分化及细胞工程相关知识，考查学生的综合应用能力。过程形成的诱导干细胞全能性高，A错。过程是细胞的分化过程，分化时遗传物质不会发生变化，B错。过程要用选择培养基才能选出杂交瘤细胞，C错。过程分泌抗体蛋白，是胞吐过程，不需载体蛋白协助。 2.(2010浙江)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是( ) A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞 B克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变 C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的 D恶性细胞系的细胞可进行传代培养D 【解析】本题主要考查细胞
6、工程的有关知识，动物细胞培养可以分为原代培养和传代培养，原代培养到一定程度后要进行传代，因为细胞有接触抑制现象，当细胞接触时就会停止分裂(在细胞培养过程中进行的是有丝分裂，所以培养出来的多数细胞基因型相同)，但是细胞在培养过程中，传代次数也是有限的，一般为50次就会死亡，留下来的细胞就是发生了癌变的细胞，遗传物质发生改变，具有不死性，但是细胞膜表面糖蛋白减少，细胞易转移，可以无限增殖，即可以进行传代培养，这个也就是人体中癌细胞会转移的原因。 3.(2011浙江)为了探究某物质(X)的作用，研究者提出了以下实验思路：(1)实验分组：甲组：培养液Y细胞3HTdR(3H标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)生理盐
7、水乙组：培养液Y细胞3HTdRX(用生理盐水配制)每组设置若干个重复样品。(2)分别测定两组的CRD(细胞内的放射性强度)，求每组的平均值。(3)将各样品在适宜条件下培养合适时间后，测定CRD，求每组平均值并进行统计分析。(要求与说明：答题时用X、CRD、3HTdR表示相关名词；Y细胞是能增殖的高等动物体细胞)请回答：(1)实验目的：探究X对Y细胞增殖(DNA合成)的影响。(2)预测实验结果及结论：如果乙组CRD明显高于甲组，说明X对Y细胞增殖(DNA合成)有促进作用；如果乙组CRD与甲组基本相同，说明X对Y细胞增殖(DNA合成)无影响；如果乙组CRD明显低于甲组，说明X对Y细胞增殖(DNA合
8、成)有抑制作用。(3)实验中采用3HTdR的原因是：3HTdR是DNA合成的原料之一，可根据CRD变化来判断细胞增殖(DNA合成)情况。4.(2011福州模拟)以H1N1病毒核衣壳蛋白为抗原，采用细胞工程制备单克隆抗体，下列叙述正确的是( )A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清为单克隆抗体B体外培养单个浆细胞可以获得大量针对H1N1病毒的单克隆抗体C将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D利用该单克隆抗体与H1N1病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可以诊断该病毒感染体D【解析】单克隆抗体是相应的杂交瘤细胞产生的，单个浆细胞的培养不能获得单克隆抗体；用纯化的核衣
9、壳蛋白反复注射到小鼠体内，血清中的抗体不是单一抗体，还含有体内已存在的其他抗原的抗体；等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，只考虑两个细胞融合，可以形成三种杂交细胞，但只有浆细胞和骨髓瘤细胞融合而成的细胞称为杂交瘤细胞。5.(2011厦门模拟)英国科学家威尔穆特首次用羊的体细胞、乳腺细胞成功地培育出一只小母羊，取名为“多利”，这种方法被称之为“克隆”。以下四项中与此方法在本质上最相近的是( )A将兔的早期胚胎分割后，分别植入两只母兔的子宫内，并最终孕育成两只一样的兔B将人的抗病毒基因嫁接到烟草的DNA分子上，培育出了具有抗病毒能力的烟草新品种C将鼠骨髓瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞D将人的精、
10、卵在体外受精，待受精卵发育到囊胚期时，再植入女性子宫内发育成“试管婴儿” A6.单克隆抗体(单抗)实质上是单个效应B细胞通过克隆形成的细胞群产生的化学性质单一、特异性强的免疫球蛋白。下列有关叙述中，错误的是( )A单抗作为生物导弹能定向到达癌细胞所在部位B单抗制备的过程要用到动物细胞培养和细胞融合技术C在单抗制备的过程中必须经过至少两次细胞筛选D只有用物理或化学方法诱导，才能促使B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞 D【解析】诱导B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞的融合有三种方法：灭活病毒、物理方法、化学方法。7.请据图判断，下列说法不正确的是( ) C A若a，b分别对应为骨髓瘤细胞和效应B细胞，则d能产生单克隆抗体是b的遗传物质选择性表达的结果B若d形成有性杂交后代，则a和b融合形成d的过程叫受精作用C若d形成无性杂种植株，则采用了细胞工程中的核移植技术D若d形成无性杂种植株，由于杂种细胞具双亲叶绿体，则可能培育出比有性杂交品种光合作用性能更好的植株【解析】杂交瘤细胞产生单克隆抗体是细胞内基因选择性表达的结果；有性杂交是通过受精作用实现的；采用细胞工程中的植物体细胞杂交可以获得无性杂种植株；此生物细胞内具有双亲的叶绿体，可能比有性杂交品种的光合作用性能更好。
