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1、消毒质量现场采样与检测工作方法采样及检测原则采样时间:消毒处理后,医疗活动前期间采样后尽快检测,送检时间6小时,若样品保存04,送检时间24h一、空气器材:9cm普通营养琼脂平板方法:平板暴露法(沉降法)一般情况:按GB 15982-1995 医院消毒卫生标准:布点方法:室内面积30m2,设内、中、外对角线三点,内外布点距墙壁1m;室内面积30m2,设中央及四角5点,四点的布点位置距墙1m,暴露时间5min培养时间:48小时 计算公式:细菌总数(cfu/m3)=50000N/(AT)A:平板面积(cm2) T:平板暴露时间 N:平均菌落数 检出限:对于30m2房间,如果3块平板共长1个菌,则根
2、据公式,计算结果为52.3 报53cfu/ m3对于30m2房间 计算结果为31.4, 报32cfu/ m3对于洁净度要求高的环境,该方法的最低检出限与评价标准不一致GB 15928-1995规定 类环境10 cfu/ m3洁净手术室:依据GB 50333-2002检测平板沉降方法: 沉降时间30min布点要求及沉降菌标准区域等级洁净度布点数标准(cfu/皿)特别洁净手术室手术区百级13点0.2周边区千级5点0.4标准洁净手术室手术区千级5点0.75周边区万级2点1.5一般洁净手术室手术区万级2点2周边区十万级2点4二、物体表面1、采样液对于只清洁、未消毒的表面:无菌生理盐水消毒后的物体表面:
3、根据使用消毒剂选择含相应中和剂的采用液2采样方法5cm5cm标准规格板 棉拭采样100cm2;门把手等不规则物体表面:直接涂抹3、中和剂的选择消毒剂中和剂成分0.5%碘伏0.5%硫代硫酸钠、0.5%吐温80消毒剂 2000mg/L有效氯0.5%硫代硫酸钠、0.5%吐温8075%乙醇0.5%卵磷脂、0.5%吐温80季铵盐0.5%卵磷脂、0.5%吐温80洗必泰 0.5%卵磷脂、0.5%吐温802%戊二醛1%甘氨酸、0.5%吐温804、检测细菌总数:取1ml接种平皿金黄色葡萄菌:1ml接种5mlSCDLP液体培养基,361培养24h,血平板分离乙型溶血性链球菌:样品1ml接种1%葡萄糖肉汤沙门氏菌:
4、按照GB4789.4 1ml加入增菌液中四、工作人员手 1采样液:无菌生理盐水 适合只清洁,未用消毒剂的情况含相应中和剂的采样液 适用于消毒后采样2采样方法 被检人员五指并拢,用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液的棉拭子,在双手指屈面从指根到指端往返涂擦2次(一只手涂擦面积约30cm2)并随之转动采样棉拭,剪去操作者手接触部位,将棉拭投入采样液 五使用中消毒液1采样时间:更换前,使用中的消毒液2需要检测微生物污染情况的: 采样液:含相应中和剂的营养肉汤, 采样方法:取1.0ml消毒液加入9.0ml含中和剂的营养肉汤3需要测定含量:另取干净、干燥的采样瓶直接取样 采样量100ml 要求采样量满足检测需
5、要。六、内窥镜采样依据:内镜清洗消毒技术规范方法 检测部位:内镜的内腔面 用无菌注射器抽取10ml含相应中和剂的缓冲液,从待检内镜活检口注入,用15ml无菌试管从活检出口收集,及时送检,2小时内检测检测:菌落计数:充分振荡,取0.5ml接种2个平皿后倾注营养琼脂,35培养48h后计数致病菌: 0.2ml接种血平板 0.2ml接种中国兰平板 0.2ml接种SS平板涂布 35培养48h 观察有无致病菌生长七污水1、检测依据:GB 18466-2005 医疗机构水污染排放标准2、检测项目余氯的检测:现场用干净空瓶采样,直接用余氯测试盒检测余氯粪大肠菌群沙门氏菌志贺氏菌的检测: 采样:污水采样加入含1
6、g硫代硫酸钠的灭菌瓶中,根据GB18466-2005检测八灭菌器1、压力蒸汽灭菌器灭菌效果:嗜热脂肪杆菌芽孢 培养温度:561a.检测方法:下排气式压力蒸汽灭菌器、预真空和脉动真空灭菌器,生物指示剂置于标准包中心部位,标准包置于排气口上方。b.手提压力蒸汽灭菌器 用通气储物盒代替标准包,盒内盛满中试管,生物指示剂放于中心部位放于中心部位两只灭菌试管内,储物盒平放于手提压力蒸汽灭菌器底部2、环氧乙烷灭菌器灭菌:枯草杆菌黑色变种芽孢生物指示管 均匀分布灭菌物品中。 361培养 3、干热灭菌器:枯草杆菌黑色变种芽孢九紫外线辐照强度1器材:紫外辐照计2检测方法:开灯5min后,探头放在灯管中心距高1m处检测3注意事项: 仪器定期检定,在检定期内使用 每次使用时需要仪器调零 个人防护:眼罩、口罩、帽子、防止紫外线灼伤。 谢谢