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1、实验八实验八 血型鉴定及交叉配血血型鉴定及交叉配血实验实验1医学课件ppt实验八 血型鉴定及交叉配血实验1医学课件ppt（一）ABO血型鉴定 1 1 1 1实验原理实验原理实验原理实验原理 红红细细胞胞膜膜上上具具有有血血型型糖糖蛋蛋白白，作作为为抗抗原原，也也称称为为凝凝集集原原；ABOABO血血型型就就是是根根据据红红细细胞胞表表面面抗抗原原来来确确定定的的，根根据据红红细细胞胞上上有有或或无无A A抗抗原原或或/ /和和B B抗抗原原，将将血血型型分分为为A A型型、B B型型、ABAB型及型及OO型四种。型四种。 血清中含有相应的特异性抗体称为凝集素。血清中含有相应的特异性抗体称为凝集
2、素。 凝凝集集原原和和相相应应的的凝凝集集素素特特异异性性结结合合，使使红红细细胞胞凝凝集集成成团团，进而引起红细胞破裂，产生溶血。进而引起红细胞破裂，产生溶血。 ABOABO血血型型鉴鉴定定的的原原理理是是利利用用红红细细胞胞凝凝集集试试验验，将将待待测测血血液液分分别别与与已已知知含含A A抗抗体体和和B B抗抗体体的的标标准准血血清清混混合合，观观察察是是否否发发生生凝凝集集现现象象，判判断断待待测测血血液液红红细细胞胞上上有有何何种种抗抗原原，由此确定待测血液的血型。由此确定待测血液的血型。2医学课件ppt（一）ABO血型鉴定 1实验原理2医学课件pptABO血型分类3医学课件pptA
3、BO血型分类3医学课件pptABO血型正反定型结果 4医学课件pptABO血型正反定型结果 4医学课件ppt（一）ABO血型鉴定2 22 2血型鉴定方法血型鉴定方法血型鉴定方法血型鉴定方法 标记凹载玻片：左上角写标记凹载玻片：左上角写AA，右上角写，右上角写BB。 分别吸取标准分别吸取标准AA血清和标准血清和标准BB血清各血清各11滴滴于双凹载玻片左端和右端。滴滴于双凹载玻片左端和右端。 采血针刺破左手无名指尖，待血液出来后，用采血针刺破左手无名指尖，待血液出来后，用22支毛细滴管吸取血支毛细滴管吸取血液，分别加入到玻片左、右两侧的血清内，并用牙签搅拌，使标准液，分别加入到玻片左、右两侧的血清
4、内，并用牙签搅拌，使标准血清与血液混匀。（切勿混用毛细滴管和牙签！）血清与血液混匀。（切勿混用毛细滴管和牙签！） 手持玻片转动数次，转动时玻片应保持在一个水平面上，然后置室手持玻片转动数次，转动时玻片应保持在一个水平面上，然后置室温下温下5min5min后观察结果。后观察结果。 肉眼观察：如果外观略呈花边状或锯齿状，看上去有沉淀，则多为肉眼观察：如果外观略呈花边状或锯齿状，看上去有沉淀，则多为凝集；如果血滴呈均匀状态，边缘整齐，则多为不凝集。凝集；如果血滴呈均匀状态，边缘整齐，则多为不凝集。 进一步在低倍镜下观察：在低倍镜下，如果观察到红细胞凝集成团，进一步在低倍镜下观察：在低倍镜下，如果观察
5、到红细胞凝集成团，或尚有少数游离细胞，则为凝集现象；如果红细胞均为游离状态，或尚有少数游离细胞，则为凝集现象；如果红细胞均为游离状态，则为不凝集。根据镜下所见有无凝集现象判定血型。则为不凝集。根据镜下所见有无凝集现象判定血型。5医学课件ppt（一）ABO血型鉴定2血型鉴定方法5医学课件ppt取干净载玻片取干净载玻片滴加定型剂滴加定型剂消毒消毒取血取血消毒消毒取血取血消毒消毒观察观察记录结果记录结果实验步骤实验步骤6医学课件ppt取干净载玻片滴加定型剂消毒取血消毒取血消毒观察记录结果实验步抗抗A抗抗B7医学课件ppt抗A抗B7医学课件ppt用7075的酒精消毒取血部位消毒取血部位8医学课件ppt
6、用7075的酒精消毒取血部位消毒取血部位8医学课件pp用针扎一下消毒部位，使血冒出，立即滴一滴血液在抗A或B上。 抗抗A抗抗B9医学课件ppt用针扎一下消毒部位，使血冒出，立即滴一滴血液在抗A或B上。 再用7075的酒精擦洗消毒刚用针扎的部位，然后再取一滴血液于抗B或A上。 抗抗A抗抗B10医学课件ppt再用7075的酒精擦洗消毒刚用针扎的部位，然后再取一滴血观察有无凝集，并按下表判定结果。 血型抗A试剂抗B试剂ABOAB+-+-+-+呈现均匀的淡红色时，表明不凝集，用呈现均匀的淡红色时，表明不凝集，用“一一”号表示。号表示。 在试剂里凝结成絮团状，形成鲜明的对比，表明凝集，用在试剂里凝结成絮
7、团状，形成鲜明的对比，表明凝集，用“十十”号表示。号表示。11医学课件ppt观察有无凝集，并按下表判定结果。 血型抗A试剂抗B试剂A+-主侧配血主侧配血主侧配血主侧配血 用患者血清与供用患者血清与供用患者血清与供用患者血清与供者红细胞进行试验者红细胞进行试验者红细胞进行试验者红细胞进行试验次测配血次测配血次测配血次测配血 供血者血清与患供血者血清与患供血者血清与患供血者血清与患者红细胞进行试验者红细胞进行试验者红细胞进行试验者红细胞进行试验患者献血者主侧次侧（二）交叉配血试验（二）交叉配血试验12医学课件ppt主侧配血患者献血者主侧次侧（二）交叉配血试验12医学课件pp 交叉配血的要求交叉配血
8、的要求 主侧配血要求：主侧配血要求：主侧配血要求：主侧配血要求：主侧配血要求：主侧配血要求： 绝对不可以有凝集或溶绝对不可以有凝集或溶绝对不可以有凝集或溶绝对不可以有凝集或溶绝对不可以有凝集或溶绝对不可以有凝集或溶血现象。血现象。血现象。血现象。血现象。血现象。 次测配血要求：次测配血要求：次测配血要求：次测配血要求：次测配血要求：次测配血要求： 供血者血清加受血者红供血者血清加受血者红供血者血清加受血者红供血者血清加受血者红供血者血清加受血者红供血者血清加受血者红细胞在允许范围内，可细胞在允许范围内，可细胞在允许范围内，可细胞在允许范围内，可细胞在允许范围内，可细胞在允许范围内，可以有凝集现
9、象，但不可以有凝集现象，但不可以有凝集现象，但不可以有凝集现象，但不可以有凝集现象，但不可以有凝集现象，但不可以有溶血。以有溶血。以有溶血。以有溶血。以有溶血。以有溶血。凝集不凝集13医学课件ppt 交叉配血的要求主侧配血要求：凝集不凝集13医学 交叉配血的目的交叉配血的目的n nn交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要血者血清
10、中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要目的是为了防止输血后产生溶血性反应。目的是为了防止输血后产生溶血性反应。目的是为了防止输血后产生溶血性反应。目的是为了防止输血后产生溶血性反应。目的是为了防止输血后产生溶血性反应。目的是为了防止输血后产生溶血性反应。n nn尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血尽可能确保对人和一个病人来说，输
11、了供血者的血尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持最长的存活时间。最长的存活时间。最长的存活时间。最长的存活时间。最长的存活时间。最长的存活时间。14医学课件ppt 交叉配血的目的交叉配血试验是输血前必要的步骤，交叉配血试验方法交叉配血试验方法 盐水介质配血盐水介质配血盐水介质配血盐水
12、介质配血盐水介质配血盐水介质配血 酶介质配血酶介质配血酶介质配血酶介质配血酶介质配血酶介质配血 菠萝酶，无花果酶，木瓜酶菠萝酶，无花果酶，木瓜酶菠萝酶，无花果酶，木瓜酶菠萝酶，无花果酶，木瓜酶菠萝酶，无花果酶，木瓜酶菠萝酶，无花果酶，木瓜酶 抗球蛋白介质配血抗球蛋白介质配血抗球蛋白介质配血抗球蛋白介质配血抗球蛋白介质配血抗球蛋白介质配血 经典方法，加经典方法，加经典方法，加经典方法，加经典方法，加经典方法，加LISSLISSLISS（低离子介质溶液）的方法低离子介质溶液）的方法低离子介质溶液）的方法低离子介质溶液）的方法低离子介质溶液）的方法低离子介质溶液）的方法 聚凝胺介质配血聚凝胺介质配血
13、聚凝胺介质配血聚凝胺介质配血聚凝胺介质配血聚凝胺介质配血 凝胶方法配血凝胶方法配血凝胶方法配血凝胶方法配血凝胶方法配血凝胶方法配血15医学课件ppt交叉配血试验方法盐水介质配血15医学课件ppt 盐水介质配血方法盐水介质配血方法患者献血者主侧次侧离心看结果阳性阴性16医学课件ppt 盐水介质配血方法患者献血者主侧次侧离心阳性阴性16医 抗球蛋白配血方法抗球蛋白配血方法患者献血者主侧次侧37 37水浴30分钟三洗 17医学课件ppt 抗球蛋白配血方法患者献血者主侧次侧37 37三 抗球蛋白方法配血方法抗球蛋白方法配血方法加抗球蛋白离心看结果阳性阴性18医学课件ppt 抗球蛋白方法配血方法加抗球蛋
14、白离心阳性阴性抗球蛋白试剂上 酶介质配血方法酶介质配血方法主次侧均加酶患者献血者主侧次侧19医学课件ppt 酶介质配血方法酶上海市血液中心血主次侧患者献血者 酶介质配血方法酶介质配血方法离心看结果阳性阴性37 37水浴30分钟20医学课件ppt 酶介质配血方法离心阳性阴性37 3720医二、二、Rh定型定型1、使用盐水介质试剂使用盐水介质试剂 用用LIM配制的红细胞悬液，可以代替配制的红细胞悬液，可以代替由生理盐水配制的红细胞悬液在盐水介质由生理盐水配制的红细胞悬液在盐水介质试剂中进行试剂中进行Rh定型，两者定型方法和效果定型，两者定型方法和效果均相同。均相同。21医学课件ppt二、Rh定型21医学课件ppt 聚凝胺聚凝胺(Polybrene)配血方法配血方法患者献血者主侧次侧室温放置1 分钟主次侧均加聚凝胺22医学课件ppt 聚凝胺(Polybrene)配血方法患者献血者主侧 聚凝胺聚凝胺(Polybrene)配血方法配血方法离心聚凝胺引起红细胞非特异性凝集阳性阴性主次侧均加重悬液看结果23医学课件ppt 聚凝胺(Polybrene)配血方法离心聚凝胺引起红细
