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1、传染病诊断技术传染病诊断技术国产化和产业化的必要性国产化和产业化的必要性 许文波许文波 国家麻疹国家麻疹国家麻疹国家麻疹/ / / /脊灰实验室脊灰实验室脊灰实验室脊灰实验室 病毒病预防控制所病毒病预防控制所病毒病预防控制所病毒病预防控制所, , , ,中国疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心对于传染病的预防、控制和治疗，最关对于传染病的预防、控制和治疗，最关键的是对疾病的早期诊断。键的是对疾病的早期诊断。无论是细菌性的还是病毒性的传染病，无论是细菌性的还是病毒性的传染病，快速、准确地诊断出传染病病因和传播快速、准确地诊断出传染病病因和传播途径对于传染病
2、的预防、控制尤其重要途径对于传染病的预防、控制尤其重要一些新出现的传染性疾病，尤其是病毒一些新出现的传染性疾病，尤其是病毒性传染病的发生频率越来越高，给人民性传染病的发生频率越来越高，给人民的健康平安带来严重威胁。的健康平安带来严重威胁。1.新发和突发传染病新发和突发传染病2.病毒诊断用的标本病毒诊断用的标本3.病毒别离鉴定所用的细胞病毒别离鉴定所用的细胞4.病毒实验室检测类型病毒实验室检测类型5.诊断试剂国产化和产业化的展望诊断试剂国产化和产业化的展望6.临床中的病毒病诊断临床中的病毒病诊断7.分子流行病学在病毒病诊断中的应用分子流行病学在病毒病诊断中的应用8.国家麻疹、脊灰和国家麻疹、脊灰
3、和HFMD实验室网络和实验室网络和研究领域研究领域1.1.新发和突发传染病新发和突发传染病EmergingEmerging and re-emerging viral diseases and re-emerging viral diseases : :一种新的疾病以前没有鉴定出来一种新的疾病以前没有鉴定出来已经知道的疾病的发病率或地理分布明显增加或扩大已经知道的疾病的发病率或地理分布明显增加或扩大已经存在的病毒发生重组形成一个新病毒已经存在的病毒发生重组形成一个新病毒SARS-coronavirusSARS-coronavirusNipah virusNipah virusHendra vi
4、rusHendra virusAustralian bat lyssavirusAustralian bat lyssavirusMenangle virusMenangle virusJapanese encephalitis virusJapanese encephalitis virusChikungunya virusChikungunya virusDengue virusesDengue virusesAdv14Adv14Adv11Adv11变异株变异株 ( (和和Adv14Adv14重组重组) ) Enterovirus 71Enterovirus 712021-H1N1 Flu
5、 (Swine Flu) 2021-H1N1 Flu (Swine Flu) 病原微生物危险病原微生物危险感染性的致病因子，无论是直接感染人感染性的致病因子，无论是直接感染人类，还是间接地散播到环境中去，对人类、类，还是间接地散播到环境中去，对人类、动物或植物都是一个现实的或潜在的危险。动物或植物都是一个现实的或潜在的危险。AnimalsHumansPlantsChernobyl2.2.病毒诊断所用的标本病毒诊断所用的标本-a-a - -标本质量对于病毒诊断至关重要标本质量对于病毒诊断至关重要对对于于诊诊断断急急性性病病毒毒性性感感染染最最好好是是采采集集于于疾疾病病发发生生的部位、或传播部位
6、的标本。的部位、或传播部位的标本。标标本本除除血血清清外外运运输输应应在在44冷冷藏藏, ,如如果果超超过过2424小时小时, ,标本应保存于标本应保存于-70-70或更低。或更低。血血清清学学诊诊断断的的急急性性期期标标本本通通常常应应在在发发病病最最初初几几天天获得，恢复期标本在获得，恢复期标本在2-42-4周后获得。周后获得。一些病毒感染也可从唾液或尿中检测到抗体。一些病毒感染也可从唾液或尿中检测到抗体。2.2.病毒诊断用的标本病毒诊断用的标本-b-b 标本的正确收集、处理至关重要标本的正确收集、处理至关重要-1-1成成功的第一步功的第一步 病毒别离和用于提取病毒别离和用于提取RNARN
7、A标本的采集时间，位置及质量标本的采集时间，位置及质量 直接关系到能否成功别离到病毒或直接关系到能否成功别离到病毒或RNARNA的活性，而标的活性，而标本本 保存与运输不当也会影响病毒的别离。保存与运输不当也会影响病毒的别离。 为提高病毒的别离率。在用于病毒别离的样品采集的为提高病毒的别离率。在用于病毒别离的样品采集的 数量、类型和地点方面，实验室与流行病医生应达成数量、类型和地点方面，实验室与流行病医生应达成 共识。一般来说，病毒别离用样品应与血样同时采共识。一般来说，病毒别离用样品应与血样同时采 集，以便做血清学诊断。集，以便做血清学诊断。血液、血液、CSFCSF、尸检组织标本、尸检组织标
8、本, , 粪便标本粪便标本, ,咽拭子、咽拭子、 鼻咽拭子和下呼吸道分泌物吸取液鼻咽拭子和下呼吸道分泌物吸取液病毒实验室维持良好的细胞系特别重要病毒实验室维持良好的细胞系特别重要细胞系经常被支原体污染细胞系经常被支原体污染 支原体污染会严重影响细胞的培养，因为这种污支原体污染会严重影响细胞的培养，因为这种污染不抑制细胞生长，即使在显微镜下观察也很难觉察。染不抑制细胞生长，即使在显微镜下观察也很难觉察。与细菌和真菌相比，支原体污染比较容易蔓延到其他与细菌和真菌相比，支原体污染比较容易蔓延到其他培养中，而且很多对细菌污染有效的抗生素，支原体培养中，而且很多对细菌污染有效的抗生素，支原体却并不敏感。
9、却并不敏感。 3.3.病毒别离鉴定所用的细胞病毒别离鉴定所用的细胞树立树立“预防为主预防为主”的思想的思想保证细胞来源干净保证细胞来源干净确保基质和器材无菌确保基质和器材无菌严格无菌操作严格无菌操作细胞培养时避免交谈细胞培养时避免交谈操作结束时消毒台面操作结束时消毒台面每传每传1515代的细胞应更换代的细胞应更换所有细胞培养材料丢弃前应高压消毒所有细胞培养材料丢弃前应高压消毒3.病毒别离鉴定所用的细胞病毒别离鉴定所用的细胞2L20B adenovirus CPERD-A adenovirus CPE病毒复制的检测病毒复制的检测抗原检测抗原检测核酸检测核酸检测血清学血清学抗体抗体检测检测4.病毒
10、实验室检测类型病毒实验室检测类型每种方法各有优势每种方法各有优势,依据病毒来定检测策略依据病毒来定检测策略4.4.病毒实验室检测类型病毒实验室检测类型- - - -病毒实验室诊断方法病毒实验室诊断方法病毒实验室诊断方法病毒实验室诊断方法检测抗体检测抗体/ /抗原抗原检测病毒检测病毒检测核酸检测核酸ELISA/HI/PAELISA/HI/PA蛋白印迹蛋白印迹免疫荧光免疫荧光病毒别离病毒别离ELISAELISA中和试验中和试验电镜电镜基因芯片基因芯片中和试验中和试验RT-PCRRT-PCR实时荧光定量实时荧光定量PCRPCR套式套式PCRPCRLAMPLAMP免疫荧光免疫荧光基因芯片基因芯片每种方
11、法每种方法每种方法每种方法各有优势各有优势各有优势各有优势, ,依据病毒依据病毒依据病毒依据病毒来定检测策略来定检测策略来定检测策略来定检测策略Newmoleculartoolsforepidemiologystudiesanddiagnosis病毒复制的检测病毒复制的检测1细胞病变-病毒别离和鉴定2血吸附实验3干扰试验。4其它检测方法5Shellviralculture6基因工程细胞学7电子显微镜8标本的直接检测9检测固定的细胞10)感染型细胞的检查11)光学显微镜12细胞学检查13组织学检查14)核酸检测病毒包涵体病毒包涵体病毒包涵体病毒包涵体抗抗原原检检测测-1用于病毒抗原检测的方法包括
12、用于病毒抗原检测的方法包括IFA、IHC、ELISA优点：优点：可在接到标本几个小时内获得结果，检测不可在接到标本几个小时内获得结果，检测不需活病毒特别是标本运输时间较长时需活病毒特别是标本运输时间较长时在以下情况可进行抗原检测在以下情况可进行抗原检测有病毒抗原表达；有病毒抗原表达；有特异性抗体；有特异性抗体；抗原有变异，但在不同株之间有共同抗原位点；抗原有变异，但在不同株之间有共同抗原位点；抗原在运输贮藏时稳定。抗原在运输贮藏时稳定。抗抗原原检检测测-2标本：呼吸道鼻咽拭子或鼻咽洗液，气管呼吸道灌洗液标本：呼吸道鼻咽拭子或鼻咽洗液，气管呼吸道灌洗液病毒：呼吸道合胞病毒，流感病毒病毒：呼吸道合
13、胞病毒，流感病毒A，B。副流感病毒。副流感病毒1-3麻疹和腺病毒麻疹和腺病毒,风疹风疹标本：皮肤和黏膜拭子标本：皮肤和黏膜拭子病毒：水痘病毒，疱疹病毒病毒：水痘病毒，疱疹病毒标本：结膜或角膜拭子标本：结膜或角膜拭子病毒：疱疹病毒病毒：疱疹病毒,腺病毒腺病毒标本：粪便标本：粪便病毒：腺病毒肠道血清型，轮状病毒病毒：腺病毒肠道血清型，轮状病毒,肠道病毒肠道病毒?等等标本：血标本：血病毒：病毒：CMVpp65，乙肝病毒外表抗原，乙肝病毒外表抗原，HIVp24用于病毒诊断的核酸检测标本用于病毒诊断的核酸检测标本血液、血液、CSFCSF、尸检组织标本、尸检组织标本, , 粪便标本粪便标本, ,咽拭子、鼻
14、咽拭子和下呼吸道分泌物吸取液咽拭子、鼻咽拭子和下呼吸道分泌物吸取液血血 清清 学学 诊诊 断断-1-1测定病毒抗体是最早应用于病毒学诊断的方法之一，仍然在病毒测定病毒抗体是最早应用于病毒学诊断的方法之一，仍然在病毒学诊断中占有重要的地位。血清学诊断对那些不能培养或培养缓学诊断中占有重要的地位。血清学诊断对那些不能培养或培养缓慢或较困难的病毒尤其重要。慢或较困难的病毒尤其重要。血清学方法的敏感性十分重要，血清学方法的敏感性十分重要， ELISA ELISA法应用广泛。法应用广泛。 1 1病毒抗体反响的动态变化病毒抗体反响的动态变化 2) 2) 再感染和再激活时抗体的变化再感染和再激活时抗体的变化
15、 3 3慢性感染的血清学慢性感染的血清学 4 4血清学方法血清学方法 A A 结合试验：结合试验： B B 抗原别离试验：抗原别离试验： C C 功能测定试验功能测定试验 D D 凝集试验凝集试验 5 5特异性特异性IgM, IgAIgM, IgA和和IgGIgG抗体抗体 6 6唾液和尿液中的抗体检测唾液和尿液中的抗体检测 7 7CSFCSF中抗体检测中抗体检测血清学诊断血清学诊断-2-2病毒的急性期感染病毒的急性期感染Epstein-BarrvirusaCytomegalovirus(mononucleosissyndrome)aHepatitisViruses(A-E)bMeaslesaR
16、ubellaaMumpsaParvovirusB19aEncephalitisvirusesaRabiesHemorrhagicfevervirusesaDengueaHumanimmunodeficiencyvirusHumanT-celllymphotrophicvirustypesIandIIA A：检测特异：检测特异IgMIgMB B：用于：用于HAVHAV和抗和抗HBVHBV核心抗原的核心抗原的IgMIgM检测检测血清学诊断血清学诊断-3-3测定对特定病毒的免疫水平测定对特定病毒的免疫水平 VZVHSVEpstein-Barrvirus(IgGtotheviralcapsidanti
17、gen)RubellaMeaslesParvovirusB19HepatitisAvirus(totalantibodies)HepatitisBvirus(anti-HBs) 常用的病毒常用的病毒ELISA检测方法主要有两种：检测方法主要有两种：CaptureELISAIndirectELISA一般认为抗体捕捉法一般认为抗体捕捉法ELISA比间接比间接ELISA法优法优越，无需对血清进行预处理越，无需对血清进行预处理血清学血清学检测IgM/IgGIgM/IgG抗体抗体检测间接法ELISA检测IgM/IgG抗体原理图 IgM检测时，血清需进行预吸附以去除IgG抗体和类风湿因子ELISA捕获法检
18、测风疹捕获法检测风疹IgM抗体原理图抗体原理图血清学血清学检测新技术新技术-多种病原的同时检测多种病原的同时检测目前广泛使用的免疫学试验方法目前广泛使用的免疫学试验方法只能获得单个病原体的实验数据只能获得单个病原体的实验数据不明原因疫情需要按顺序进行排查不明原因疫情需要按顺序进行排查消耗时间和价格较高消耗时间和价格较高试验方法不统一试验方法不统一昂贵的自动化昂贵的自动化信息量少。信息量少。多种病毒抗体的同时检测多种病毒抗体的同时检测可同时得到多种参数可同时得到多种参数短时间内短时间内价格低廉价格低廉用统一的方式用统一的方式简单的自动化简单的自动化新技术新技术:短时间内可同时得到多种病原体检测结
19、短时间内可同时得到多种病原体检测结果果相对价格低廉相对价格低廉试验方法统一试验方法统一易于自动化，操作简单。易于自动化，操作简单。根本原理根本原理首先将不同病首先将不同病原体的抗原包原体的抗原包被于球形固相被于球形固相载体上载体上对球型固相载体进行编码对球型固相载体进行编码u用不同的用不同的荧光色的深荧光色的深度来表示不度来表示不同的抗原同的抗原u在在700700纳纳米时其吸收米时其吸收值最大值最大混合包被混合包被的抗原的抗原与待测血清与待测血清中抗体结合中抗体结合参加荧光标记参加荧光标记二抗二抗照射照射:488纳米的纳米的激光激光绿色荧光绿色荧光(定量定量):标记物指示抗体多标记物指示抗体多
20、少少红色荧光红色荧光(定性定性):决决定被检物是是哪种定被检物是是哪种病原体病原体流程图流程图检测: 原理(2)照射照射:488纳米的纳米的激光激光检测检测:原理原理(3)绿色绿色:荧光标记物荧光标记物多少抗体多少抗体(定量定量)红色红色:包被的抗原包被的抗原哪种抗原哪种抗原(定性定性)检测检测:报告输出格式报告输出格式定量定量定性定性检测需要流式细胞仪检测需要流式细胞仪多种检测技术的应用多种检测技术的应用-ToRCH一些病原体能感染孕期妇女导致新生儿先一些病原体能感染孕期妇女导致新生儿先天畸形如：天畸形如：弓形虫弓形虫风疹病毒风疹病毒巨细胞病毒巨细胞病毒单纯疱疹病毒单纯疱疹病毒 主要依靠临床
21、诊断主要依靠临床诊断导致误诊，病原构成导致误诊，病原构成 不明确，难以发现新病原引起的疾病负担不明确，难以发现新病原引起的疾病负担 特异诊断主要依靠病原别离特异诊断主要依靠病原别离慢，灵敏度不高慢，灵敏度不高 爆发应急病因学诊断效率低爆发应急病因学诊断效率低常不能确定病常不能确定病 原，或时间长、病原多、工作量大原，或时间长、病原多、工作量大 水、食品、空气标本细菌检测灵敏度低水、食品、空气标本细菌检测灵敏度低无法无法 开展常规监测、危险度评估、爆发流行中溯源开展常规监测、危险度评估、爆发流行中溯源 别离菌落依靠血清鉴定和生化反响别离菌落依靠血清鉴定和生化反响慢，通量慢，通量 低，只能选择局部
22、低，只能选择局部“疑似疑似菌落进行鉴定，偏主菌落进行鉴定，偏主 观、存在漏检观、存在漏检5.5.诊断试剂国产化和产业化的展望诊断试剂国产化和产业化的展望诊断试剂国产化和产业化的展望诊断试剂国产化和产业化的展望1-1-1-1-商品化试剂严重滞后商品化试剂严重滞后引起五大症侯群的常见病原微生物引起五大症侯群的常见病原微生物发热呼吸道症候群发热呼吸道症候群病毒：人流感病毒、呼吸道合胞病毒、人腺病毒、人副流感病毒、人偏肺病毒、病毒：人流感病毒、呼吸道合胞病毒、人腺病毒、人副流感病毒、人偏肺病毒、人冠状病毒、人博卡病毒等人冠状病毒、人博卡病毒等细菌：肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球
23、菌、铜绿细菌：肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、假单胞菌、A A组链球菌、军团菌、肺炎衣原体、肺炎支原体等组链球菌、军团菌、肺炎衣原体、肺炎支原体等腹泻症候群腹泻症候群细菌：沙门菌、志贺菌、弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌、致病性弧菌（霍乱弧细菌：沙门菌、志贺菌、弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌、致病性弧菌（霍乱弧菌、副溶血弧菌、其他致病弧菌）、致泻性大肠杆菌（菌、副溶血弧菌、其他致病弧菌）、致泻性大肠杆菌（EPECEPEC、ETECETEC、EIECEIEC、EHECEHEC）、嗜水气单胞菌、类志贺邻单胞菌等。）、嗜水气单胞菌、类志贺邻单胞菌等。病毒：轮状病毒、肠道
24、腺病毒、诺如病毒、札如病毒、星状病毒、小双节病毒：轮状病毒、肠道腺病毒、诺如病毒、札如病毒、星状病毒、小双节RNARNA病病毒等。毒等。寄生虫：溶组织内阿米巴、贾第虫、隐孢子虫等寄生虫：溶组织内阿米巴、贾第虫、隐孢子虫等发热伴出疹症候群发热伴出疹症候群病毒：水痘病毒：水痘- -带状疱疹病毒、人类小带状疱疹病毒、人类小DNADNA病毒病毒B19B19、登革热病毒、肠道病毒、风疹、登革热病毒、肠道病毒、风疹病毒、麻疹病毒等。病毒、麻疹病毒等。细菌：链球菌、伤寒副伤寒沙门菌、伯氏疏螺旋体等细菌：链球菌、伤寒副伤寒沙门菌、伯氏疏螺旋体等发热伴出血症候群发热伴出血症候群细菌：鼠疫杆菌、脑膜炎奈瑟菌、钩端
25、螺旋体、猪链球菌、溶血性链球菌、立细菌：鼠疫杆菌、脑膜炎奈瑟菌、钩端螺旋体、猪链球菌、溶血性链球菌、立克次体等。克次体等。病毒：汉坦病毒、登革病毒、新疆出血热病毒等病毒：汉坦病毒、登革病毒、新疆出血热病毒等脑炎脑膜炎症候群脑炎脑膜炎症候群细菌：脑膜炎奈瑟菌、细菌：脑膜炎奈瑟菌、b b型流感嗜血杆菌、葡萄球菌、肺炎链球菌、猪链球菌、型流感嗜血杆菌、葡萄球菌、肺炎链球菌、猪链球菌、大肠杆菌、隐球菌等。大肠杆菌、隐球菌等。病毒：乙脑病毒、腮腺炎病毒、肠道病毒、单纯疱疹病毒等。病毒：乙脑病毒、腮腺炎病毒、肠道病毒、单纯疱疹病毒等。寄生虫：弓形虫、囊虫、疟原虫（脑型疟疾）等寄生虫：弓形虫、囊虫、疟原虫（
26、脑型疟疾）等5.诊断试剂国产化和产业化的展望诊断试剂国产化和产业化的展望-2现阶段病毒学诊断已成为医院里的常规效劳，特现阶段病毒学诊断已成为医院里的常规效劳，特别是以下因素的影响，加速了临床医院和别是以下因素的影响，加速了临床医院和CDCCDC病病毒病诊断的开展。毒病诊断的开展。 1 1 HIV HIV的流行和的流行和AIDSAIDS的治疗的治疗 2 2病毒感染与器官移植病毒感染与器官移植 3 3多种抗病毒制剂的应用，依赖于正确的多种抗病毒制剂的应用，依赖于正确的诊断诊断 4 4诊断技术的开展诊断技术的开展: :单克隆抗体单克隆抗体McabMcab、基、基因工程抗因工程抗 原和原和PCRPCR
27、技术的应用，使诊断时间大大缩短。技术的应用，使诊断时间大大缩短。 5 5多种方法应用于病毒病感染的诊断。病毒多种方法应用于病毒病感染的诊断。病毒培养、检测培养、检测 抗体、检测抗原、核酸等。抗体、检测抗原、核酸等。 6) 6) 病毒病的强化控制病毒病的强化控制, ,消除和消灭消除和消灭 但大局部病毒诊断技术仍集中省级但大局部病毒诊断技术仍集中省级CDCCDC、大医、大医院或大的医疗研究中心院或大的医疗研究中心5.诊断试剂国产化和产业化的展望诊断试剂国产化和产业化的展望-3在一些临床领域病毒实验室诊断具有重要的位置在一些临床领域病毒实验室诊断具有重要的位置免疫缺陷的病人、器官移植的接受者、免疫缺
28、陷的病人、器官移植的接受者、HIV或或AIDS.急性呼吸道感染、儿童胃肠道感染。急性呼吸道感染、儿童胃肠道感染。感染单核细胞增多症，急慢性病毒性肝炎、严重的眼部感染。感染单核细胞增多症，急慢性病毒性肝炎、严重的眼部感染。新生儿或胎儿先天性感染。新生儿或胎儿先天性感染。发热和出疹性疾病发热和出疹性疾病通过病毒学检测直接或间接确定和评价一个新的治疗方案。例通过病毒学检测直接或间接确定和评价一个新的治疗方案。例如对如对HIV或或AIDS的抗病毒治疗中依赖于血浆的的抗病毒治疗中依赖于血浆的HIVRNA的含的含量、基因型别和表型及对药物的抵抗。量、基因型别和表型及对药物的抵抗。5.诊断试剂国产化和产业化
29、的展望诊断试剂国产化和产业化的展望-4诊断病毒学在公共卫生方面的重要性诊断病毒学在公共卫生方面的重要性监测和分析新的病毒别离株监测和分析新的病毒别离株, ,包括新的血清型包括新的血清型或基因型，监测可能的输入病毒或预测可能的或基因型，监测可能的输入病毒或预测可能的流行。流行。早期诊断麻疹和风疹为强化免疫提供科学依据，早期诊断麻疹和风疹为强化免疫提供科学依据，防止爆发和流行。防止爆发和流行。鉴定虫媒脑炎，帮助制订控制蚊子的措施。鉴定虫媒脑炎，帮助制订控制蚊子的措施。检测检测NorwalkNorwalk病毒和其他杯状病毒病毒和其他杯状病毒calicivirusescaliciviruses帮助制订
30、和控制食物和帮助制订和控制食物和 水水传播的胃肠道炎。传播的胃肠道炎。 “阜阳阜阳1313例不明原因肺炎死亡病例例不明原因肺炎死亡病例病例高度散发病例高度散发不具有传染性，可能为感染性疾病不具有传染性，可能为感染性疾病只在一例中发现疹子只在一例中发现疹子以以“重症肺炎重症肺炎为主要临床表现为主要临床表现病情进展迅速，大局部入院几小时病情进展迅速，大局部入院几小时-2-2天死亡天死亡病因不明病因不明讨论会讨论会: :EV71EV71感染中枢感染中枢 神经系统引起的神经系统引起的 心肺衰竭可能性最大心肺衰竭可能性最大“疫情概况疫情概况阜阳不明原因肺炎死亡病原学鉴定阜阳不明原因肺炎死亡病原学鉴定4月
31、18，中国CDC组织专家组流行病学临床资料实验室检测EV71是此次疾病的主要致病原是此次疾病的主要致病原证实证实4月月23日日分析判定病原和实验室检测方向为分析判定病原和实验室检测方向为=HEV71手足口病第38种需上报的传染性疾病手足口病皮疹分布 1. 颊粘膜和手指; 2. 手掌 3. 足底 4. 唇粘膜 5.咽峡炎12345EV71; 无皮疹的重症病例52005年年8月月17日日468例发热呼吸道传染病爆发主要例发热呼吸道传染病爆发主要临床表现构成图临床表现构成图6.临 床 中 的 病 毒 病 诊 断6.临 床 中 的 病 毒 病 诊 断疱疹病毒感染呼吸道感染胃肠道病毒感染病毒性脑膜炎和脑
32、炎病毒性肝炎人乳头瘤病毒Human Papillomaviruses人类多瘤病毒Human Polyomaviruses病毒引起的出疹性疾病肠道病毒感染病毒先天性或新生儿感染逆转录病毒Retroviruses 外部传入病毒的感染疱疱 疹疹 病病 毒毒 感感 染染 -疱疹病毒疱疹病毒疱疹病毒疱疹病毒HSVHSVHSVHSV和和和和VZVVZVVZVVZV，可感染中枢神经系统引起脑炎、脑膜炎和脊髓，可感染中枢神经系统引起脑炎、脑膜炎和脊髓，可感染中枢神经系统引起脑炎、脑膜炎和脊髓，可感染中枢神经系统引起脑炎、脑膜炎和脊髓炎。可通过培养和抗原检测来诊断，新鲜的水泡更易于别炎。可通过培养和抗原检测来诊
33、断，新鲜的水泡更易于别炎。可通过培养和抗原检测来诊断，新鲜的水泡更易于别炎。可通过培养和抗原检测来诊断，新鲜的水泡更易于别离病毒。离病毒。离病毒。离病毒。HSVHSVHSVHSV对兔肾，豚鼠胚胎细胞；貂肺细胞和对兔肾，豚鼠胚胎细胞；貂肺细胞和对兔肾，豚鼠胚胎细胞；貂肺细胞和对兔肾，豚鼠胚胎细胞；貂肺细胞和VeroVeroVeroVero细细细细胞培养敏感。胞培养敏感。胞培养敏感。胞培养敏感。VZVVZVVZVVZV培养较困难，只在人胚纤维细胞中和猴培养较困难，只在人胚纤维细胞中和猴培养较困难，只在人胚纤维细胞中和猴培养较困难，只在人胚纤维细胞中和猴肾上生长。肾上生长。肾上生长。肾上生长。FAF
34、AFAFA可快速诊断可快速诊断可快速诊断可快速诊断HSVHSVHSVHSV和和和和VZVVZVVZVVZV，也可用，也可用，也可用，也可用PCRPCRPCRPCR法检测。法检测。法检测。法检测。血清学：需双份血，特别是血清学交叉反响，不能区分初血清学：需双份血，特别是血清学交叉反响，不能区分初血清学：需双份血，特别是血清学交叉反响，不能区分初血清学：需双份血，特别是血清学交叉反响，不能区分初次和无病症复发。次和无病症复发。次和无病症复发。次和无病症复发。HSV-HSV-HSV-HSV-型和型和型和型和型特异性诊断方法已型特异性诊断方法已型特异性诊断方法已型特异性诊断方法已建立。建立。建立。建立
35、。 VZVVZVVZVVZV：如果在未能获得病毒培养和抗原检测结果时，血清：如果在未能获得病毒培养和抗原检测结果时，血清：如果在未能获得病毒培养和抗原检测结果时，血清：如果在未能获得病毒培养和抗原检测结果时，血清阳转可诊断。如果阳转可诊断。如果阳转可诊断。如果阳转可诊断。如果IgMIgMIgMIgM阳性证明可能是原发感染或激活。阳性证明可能是原发感染或激活。阳性证明可能是原发感染或激活。阳性证明可能是原发感染或激活。ELISAELISAELISAELISA，IFAIFAIFAIFA和乳胶凝集法已广泛应用于和乳胶凝集法已广泛应用于和乳胶凝集法已广泛应用于和乳胶凝集法已广泛应用于VZVVZVVZV
36、VZV免疫力的测定。免疫力的测定。免疫力的测定。免疫力的测定。 疱疱 疹疹 病病 毒毒 感感 染染-疱疹病毒疱疹病毒疱疹病毒疱疹病毒CMVCMV、HHV6HHV6、HHV7HHV7这些病毒在人群中这些病毒在人群中广泛感染多为无病症，但有时特别是广泛感染多为无病症，但有时特别是免疫抑制者中引起严重疾病。问题是免疫抑制者中引起严重疾病。问题是检测的结果是否伴随病理损害，组织检测的结果是否伴随病理损害，组织学检查可提供依据。学检查可提供依据。CMVCMV只在人胚纤维细胞中生长，只在人胚纤维细胞中生长，7-217-21天才能出现天才能出现CPECPE。Shell viralShell viral诊断诊
37、断CMVCMV可在可在24-2824-28小时出结果，在临床上小时出结果，在临床上快速诊断尤其重要。快速诊断尤其重要。CMVCMV培养结果阳培养结果阳性不一定代表引起疾病，无病症者唾性不一定代表引起疾病，无病症者唾液和尿液中都能释放病毒，对诊断意液和尿液中都能释放病毒，对诊断意义不大。但血液中的培养更确切，因义不大。但血液中的培养更确切，因为无病症者血清中无为无病症者血清中无CMVCMV免疫抑者免疫抑者除外。但血清阳性的免疫抑制者可除外。但血清阳性的免疫抑制者可无病症或提示有感染引起的病症。无病症或提示有感染引起的病症。FAFA和和IPIP法快速检测血中白细胞上的法快速检测血中白细胞上的PP6
38、5PP65抗原。抗原。CMVCMV在正常机体里常表现为单核细胞在正常机体里常表现为单核细胞样增多症，通常检测样增多症，通常检测CMV-IgMCMV-IgM做为一做为一种简便的诊断。种简便的诊断。EBVEBV感染可导致感染可导致CMV IgMCMV IgM假阳性，假阳性，CMVCMV引起的单核增多症可从尿和血中培养引起的单核增多症可从尿和血中培养到到CMVCMV或或PCRPCR检测检测PP65PP65基因。基因。疱疱 疹疹 病病 毒毒 感感 染染-疱疹病毒疱疹病毒疱疹病毒疱疹病毒CMVCMVCMVCMV的核酸检测法：用的核酸检测法：用的核酸检测法：用的核酸检测法：用PCRPCRPCRPCR和地高
39、辛标记的核酸杂交法检测和地高辛标记的核酸杂交法检测和地高辛标记的核酸杂交法检测和地高辛标记的核酸杂交法检测CMVCMVCMVCMV的的的的DNADNADNADNA。通常检测血。通常检测血。通常检测血。通常检测血中中中中DNADNADNADNA证实急性期感染，并且血清证实急性期感染，并且血清证实急性期感染，并且血清证实急性期感染，并且血清DNADNADNADNA阳性的个体提示正在临床感染期或近期感染阳性的个体提示正在临床感染期或近期感染阳性的个体提示正在临床感染期或近期感染阳性的个体提示正在临床感染期或近期感染过。免疫抑制个体者除外。定量检测血中过。免疫抑制个体者除外。定量检测血中过。免疫抑制个
40、体者除外。定量检测血中过。免疫抑制个体者除外。定量检测血中CMV DNACMV DNACMV DNACMV DNA量对该抗病毒治疗尤为重要。量对该抗病毒治疗尤为重要。量对该抗病毒治疗尤为重要。量对该抗病毒治疗尤为重要。CMVCMVCMVCMV的的的的ELISAELISAELISAELISA血清学诊断方法：不用于免疫抑制个体，但用于检测献血者、受血清学诊断方法：不用于免疫抑制个体，但用于检测献血者、受血清学诊断方法：不用于免疫抑制个体，但用于检测献血者、受血清学诊断方法：不用于免疫抑制个体，但用于检测献血者、受血者、器官捐献者和接受者的血者、器官捐献者和接受者的血者、器官捐献者和接受者的血者、器
41、官捐献者和接受者的CMVCMVCMVCMV的免疫状态。的免疫状态。的免疫状态。的免疫状态。CMVCMVCMVCMV在免疫抑制的个体：在器官或骨髓移植后，没有完美的方法诊断在免疫抑制的个体：在器官或骨髓移植后，没有完美的方法诊断在免疫抑制的个体：在器官或骨髓移植后，没有完美的方法诊断在免疫抑制的个体：在器官或骨髓移植后，没有完美的方法诊断CMVCMVCMVCMV感染综合感染综合感染综合感染综合征。征。征。征。CMVCMVCMVCMV局部感染的诊断：局部感染的诊断：局部感染的诊断：局部感染的诊断：CMVCMVCMVCMV感染肺炎或胃肠炎等并不一定伴随病毒血症，最好的方感染肺炎或胃肠炎等并不一定伴随
42、病毒血症，最好的方感染肺炎或胃肠炎等并不一定伴随病毒血症，最好的方感染肺炎或胃肠炎等并不一定伴随病毒血症，最好的方法采取局部组织检查，诊断中检查中枢系统感染最好是检测法采取局部组织检查，诊断中检查中枢系统感染最好是检测法采取局部组织检查，诊断中检查中枢系统感染最好是检测法采取局部组织检查，诊断中检查中枢系统感染最好是检测CSFCSFCSFCSF中中中中DNADNADNADNAPCRPCRPCRPCR法法法法CMVCMVCMVCMV在移植后病症前的诊断：术者在移植后病症前的诊断：术者在移植后病症前的诊断：术者在移植后病症前的诊断：术者4 4 4 4个月内每个月内每个月内每个月内每1-21-21-
43、21-2周进行血清中周进行血清中周进行血清中周进行血清中CMVCMVCMVCMV检测，检测，检测，检测，PCRPCRPCRPCR最敏感，最敏感，最敏感，最敏感，也可用核酸杂交，也可用核酸杂交，也可用核酸杂交，也可用核酸杂交，PP65PP65PP65PP65抗原检测法。细胞培养最不敏感。抗原检测法。细胞培养最不敏感。抗原检测法。细胞培养最不敏感。抗原检测法。细胞培养最不敏感。评判抗评判抗评判抗评判抗CMVCMVCMVCMV治疗的效果：治疗的效果：治疗的效果：治疗的效果： 先天性先天性先天性先天性CMVCMVCMVCMV感染通过培养或感染通过培养或感染通过培养或感染通过培养或PCRPCRPCRPC
44、R检测出生后第检测出生后第检测出生后第检测出生后第1 1 1 1周尿中的病周尿中的病周尿中的病周尿中的病毒，也可检测羊水但时间要准确毒，也可检测羊水但时间要准确毒，也可检测羊水但时间要准确毒，也可检测羊水但时间要准确人单疱病毒人单疱病毒人单疱病毒人单疱病毒6 6 6 6和和和和7 7 7 7型。型。型。型。HHV6HHV6HHV6HHV6引起婴儿红疹，也可引起发热、脑炎、肝炎，骨髓转移引起婴儿红疹，也可引起发热、脑炎、肝炎，骨髓转移引起婴儿红疹，也可引起发热、脑炎、肝炎，骨髓转移引起婴儿红疹，也可引起发热、脑炎、肝炎，骨髓转移失败。失败。失败。失败。HHV7HHV7HHV7HHV7也可引起出疹
45、。两者广泛存在，多为无病症排泄病毒，在婴儿血清抗也可引起出疹。两者广泛存在，多为无病症排泄病毒，在婴儿血清抗也可引起出疹。两者广泛存在，多为无病症排泄病毒，在婴儿血清抗也可引起出疹。两者广泛存在，多为无病症排泄病毒，在婴儿血清抗体阳转可诊断急性感染，体阳转可诊断急性感染，体阳转可诊断急性感染，体阳转可诊断急性感染，PCRPCRPCRPCR可检测到外周血单核细胞中可检测到外周血单核细胞中可检测到外周血单核细胞中可检测到外周血单核细胞中HHV6HHV6HHV6HHV6。 疱疱 疹疹 病病 毒毒 感感 染染1 1-疱疹病毒疱疹病毒2 2-疱疹病毒疱疹病毒3 3-疱疹病毒疱疹病毒疱疱 疹疹 病病 毒毒
46、 感感 染染-疱疹病毒疱疹病毒疱疹病毒疱疹病毒现已发现现已发现EVBEVB和和HHV-8HHV-8 KAPOSIS Sarcomn virusKAPOSIS Sarcomn virus对人对人致病，在淋巴和上皮细胞中增殖致病，在淋巴和上皮细胞中增殖后潜伏在淋巴细胞中。后潜伏在淋巴细胞中。EBEB病毒引起单核细胞增多症，依病毒引起单核细胞增多症，依据血中特异性据血中特异性VCAVCACapsid Capsid antignantign,EA(early Ag),EA(early Ag)和和NA(nuclea Ag)NA(nuclea Ag)的抗体产生状况来的抗体产生状况来诊断。诊断。VCA-Ig
47、MVCA-IgM阳性代表急性感染，阳性代表急性感染， Anti-EAAnti-EA只在局部急性期病人检测只在局部急性期病人检测到，到，Anti-EAAnti-EA和和Anti-NAAnti-NA对确定感对确定感染的时间有意义。染的时间有意义。VCA IgGVCA IgG用于人用于人群免疫状态的调查。群免疫状态的调查。和其它疱疹病毒一样，在免疫个和其它疱疹病毒一样，在免疫个体也可引起严重的疾病，在体也可引起严重的疾病，在AIDSAIDS中也引起原发性中也引起原发性CNSCNS淋巴瘤淋巴瘤PCRPCR检测，检测，EBEB引起引起PTLDPTLD移植后淋移植后淋巴增殖紊乱巴增殖紊乱 呼呼吸吸道道感感
48、染染标本采集：标本采集：鼻咽分泌物、洗漱液、咽拭子、气管镜获得的气管吸液标本和灌洗液。方法方法:1)吸道病毒的培养吸道病毒的培养2)呼吸道病毒抗原的检测呼吸道病毒抗原的检测3)呼吸道病毒的核酸检测方法呼吸道病毒的核酸检测方法胃肠道病毒感染轮状病毒、腺病毒血清型40、41、caliciviruses、astroviruses、toroviruses这些病毒的诊断多依赖于电子显微镜检查，抗原检测和核酸技术。乙酸油酰或磷钨酸负染电镜可直接检测到粪便中的病毒，caliciviruses用免疫荧光，多用于专项实验室。抗原检测：ELISA和乳胶凝集法应用于粪便中的病毒检测。在感染期轮状病毒在粪便中可达10
49、11粒/g。核酸检测：RT-PCR和PCR已应用于检测，但无抗原检测优点多，但此方法可能对环境中的病毒和分子流行病学更有用。病毒性脑膜炎和脑炎病毒性脑膜炎和脑炎脑膜炎肠道病毒性脑膜炎HSV脑膜炎大多为伴随HSV-2，复发时病毒培养为阴性,PCR敏感性和特异性更好些。VZV脑膜炎脑炎：HSV脑炎虫媒病毒脑炎狂犬病毒引起脑炎和脑膜炎的病毒EVB、HHV-6、B-VIRUS、麻疹、腮腺炎、风疹、流感、腺病毒、在免疫抑制个体中引起中枢神经系统感染CMV引起脑炎和在中AIDS引起radiculomyelitis，CMV很难从CSF中培养出来,但可用PCR检测，通过PCR定量，可区分是CNS感染或无病症感
50、染前期。EB病毒在AIDS中引起CNS淋巴瘤，PCR法可检测CSF中的EB病毒。PCR诊断JC病毒病病毒毒性性肝肝炎炎6种肝炎病毒A、B、C、D、E和G是的。甲肝检测IgM抗体，病症出现后既产生IgM并持续数月，IgG抗体那么检测其对甲肝免疫力及以前的感染史或接种史乙肝有数个不同的血清学方法检测HBV的感染。检测HBs外表抗原证实现在乙肝的感染，如果HBs抗原阳性超过6个月，诊断为乙肝病毒携带者。在HBV感染后产生HBV抗体和HBC抗体，抗HBc抗体是首先出现的，并意味着临床感染，抗HBs随后产生，两者都可持续数年。HBc-IgM抗体阳性证明，急性HBV感染，特别是在窗口期，HBS和HBS抗体
51、都阴性时更有意义。疫苗接种后只产生HBs抗体，此也提示对HBV有免疫力。HBe抗原是C抗原的组成局部，E抗原阳性意味着病毒在复制，是活动期，抗HBe抗体在HBV携带者中阳性时提示不在活动期。PCR检测是最敏感的方法，也可定量测定DNA量。病病毒毒性性肝肝炎炎丙肝丙肝ELISA检测最常用，如阳性多用放免沉淀来证实检测最常用，如阳性多用放免沉淀来证实RT-PCR也用于定量也用于定量RNA检测，可监测治疗效果。检测，可监测治疗效果。核酸杂交和序列分析也应用于核酸杂交和序列分析也应用于HCV基因型别的鉴定并对治疗方案进基因型别的鉴定并对治疗方案进行订正。行订正。D、E和和G型肝炎型肝炎检测检测HDV抗
52、体，只在抗体，只在HBV感染的个体中有感染的个体中有HDV，可通过可通过RT-PCR检检测。测。HEV通常用通常用ELISA法，法，IgM阳性提示近期感染。阳性提示近期感染。HGV诊断方法还诊断方法还未商品化。未商品化。人类多瘤病毒人类多瘤病毒HumanPolyomavirusesJC和BK病毒是两种对人致病的病毒JC病毒引起进行性多发性脑病，常见于AIDS患者BK病毒引起出血性膀胱炎多见于骨髓移植的者BK生长于人胚肾细胞，JC只生长于人胎脑或人胎细胞中。PCR已用于检测CSF中的JC和尿中的BK。人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒HumanPapillomavirusesHPV和宫颈癌有关，特别是感染
53、16、18、31和45型HPV与宫颈癌高度相关HPV不能细胞培养。如发现在宫颈papanicolaou氏涂片上有HPV的细胞特征，提示有HPV感染。PCR和核酸杂交已应用于检测临床标本中的HPVDNA宫颈拭子的HPV检查已应用于高危人群，最常用的基因编码区是L1MAJORCPSID在所有型别HPV常见型别鉴定通过不同特异性DNA探针来进行，也可做定量DNA检测HPV是否作为常规宫颈癌的预防性检查还在研究之中。病毒引起的出疹性疾病病毒引起的出疹性疾病常见于麻疹、风疹、腮腺炎、小DNA病毒B19、肠道病毒。除了B19外上述病毒都可用细胞培养诊断，但现多被其它快速诊断方法所取代。ELISA法查特异性
54、IgM抗体已广泛应用于麻疹、风疹、腮腺炎和B19的早期诊断，也可通过双份血清抗体的阳转和4倍升高来诊断也用IgG抗体来评价4种病毒的特异性免疫力。麻疹和风疹在出疹3天内75%患者IgM阳性，4-28天100%阳性。查CSF中IgM也可诊断急性麻疹脑炎，风疹脑炎和腮腺炎脑炎。通过检测血和CSF中麻疹IgG抗体的滴度和比值可诊断SSPE。病毒引起的出疹性疾病病毒引起的出疹性疾病B19感染早期可引起溶血危机时血清中可能查不到IgM，但可通过PCR查到B19-DNA。在免疫抑制个体中B19造成造血干细胞的慢性感染，导致再生障碍性贫血，这种慢性感染者可能不产生B19抗体，但可通过检测血中B19DNA来诊
55、断。麻疹病例的临床诊断麻疹病例的临床诊断发热发热38OC38OC，出现斑丘疹和至少伴有以下一，出现斑丘疹和至少伴有以下一种病症：咳嗽，鼻炎或结膜炎或医务人员种病症：咳嗽，鼻炎或结膜炎或医务人员疑为麻疹疑为麻疹EchovirusesEcho病毒病毒Measles麻疹麻疹ParvovirusB19细小病毒细小病毒B19Dengue登革热登革热HHV-6疱疹病毒疱疹病毒6型型Rubella风疹风疹Others其它其它发热伴出疹，发热发热伴出疹，发热37.5，持续一天以上，持续一天以上，伴有全身或局部的皮肤或粘膜出疹。伴有全身或局部的皮肤或粘膜出疹。肠道病毒肠道病毒HEV71，CA16登革热病毒登革热
56、病毒麻疹、麻疹、风疹、风疹、B19其它其它发热伴出疹症候群发热伴出疹症候群伤寒、副伤寒伤寒、副伤寒链球菌链球菌伯氏疏螺旋体莱姆病伯氏疏螺旋体莱姆病水痘水痘Relative levels of antibody IgMsensitivity70%071421283542-7-14-210246810RashonsetDaysafterrashonsetIgGIgMInfectionvirusexcretion用于IgM抗体检测的血清标本要在初次接触病人时马上采集，以及出疹后28天内采集用于病毒别离的标本,需出疹天内采集咽拭子或尿液麻疹病毒感染体液免疫过程麻疹病毒感染体液免疫过程必要日期必要日期:
57、最后接种日期最后接种日期出疹日期出疹日期出生日期出生日期流行时间：春季适宜的气候条件，呈规律性季节发作流行时间：春季适宜的气候条件，呈规律性季节发作传播途径：主要靠气溶胶来传播。上呼吸道黏膜和鼻咽淋巴组织是病传播途径：主要靠气溶胶来传播。上呼吸道黏膜和鼻咽淋巴组织是病毒进入机体的入口毒进入机体的入口所致疾病：国际疾病分类委员会将风疹分为两种：风疹和先天性风疹所致疾病：国际疾病分类委员会将风疹分为两种：风疹和先天性风疹综合症综合症大多数婴幼儿或成年人风疹病毒的感染属于一过性和无明显病症大多数婴幼儿或成年人风疹病毒的感染属于一过性和无明显病症的亚临床感染的亚临床感染孕妇如在妊娠早期感染风疹病毒，所
58、生的新生儿可患先天性心脏孕妇如在妊娠早期感染风疹病毒，所生的新生儿可患先天性心脏畸形、耳聋、发育障碍等称为先天性风疹综合症畸形、耳聋、发育障碍等称为先天性风疹综合症CRS风疹病毒疹病毒该图示意了典型风疹病毒感染的免疫反响该图示意了典型风疹病毒感染的免疫反响临床标本血清临床标本血清急性期单份血急性期单份血急性期，恢复期双份血急性期，恢复期双份血ELISAIgM对临床标本进行病毒监测的流程图对临床标本进行病毒监测的流程图- -血清标本血清标本ELISAIgG(+)近期风疹感染近期风疹感染()l近期无风疹病毒感染近期无风疹病毒感染l如果采集血清是出疹如果采集血清是出疹5天内的，需再采集第天内的，需再
59、采集第2份血标本重新检测份血标本重新检测l恢恢复复期期病病人人血血清清中中风风疹疹IgG抗抗体体滴度比急性期有滴度比急性期有4倍或倍或4倍以上升高倍以上升高l或或急急性性期期抗抗体体阴阴性性而而恢恢复复期期抗抗体体阳转。阳转。对临床标本进行病毒监测的流程图对临床标本进行病毒监测的流程图- -病原学标本病原学标本直接对临床标本进行直接对临床标本进行RT-PCRRT-PCR或或rRT-PCRrRT-PCR病毒别离及其鉴定病毒别离及其鉴定临床标本临床标本鼻咽拭子鼻咽拭子病毒别离病毒别离Vero/SLAM细胞细胞盲传盲传2代，共培养代，共培养3代代l检测核酸进行鉴定检测核酸进行鉴定l收获病毒冻存到收获
60、病毒冻存到70cl将保存的病毒运送到将保存的病毒运送到国家实国家实验室进行序列分析验室进行序列分析RNA提取提取RT-PCR或荧光定量或荧光定量RT-PCR胎儿和新生儿的病毒感染的试验胎儿和新生儿的病毒感染的试验近年由于超声波的形态学检查、获得胎儿标本技术的改进和分子生物学技术的开展，使围产期的病毒学诊断已有了较大的进步。只需极少量标本即可检测到病毒的核酸或抗体因为IgM抗体不能通过胎盘，如果发现胎儿或新生儿有IgM抗体可证明其为先天感染怀孕20周后胎儿有产生IgM的能力。用于诊断胎儿和新生儿病毒感染的试验用于诊断胎儿和新生儿病毒感染的试验小小RNA病毒科病毒科Picornaviridae人肠
61、道病毒人肠道病毒CourtesyofLindaM.Stannardu30nmu二十面体对称u无包膜人肠道病毒的毒粒结构人肠道病毒的毒粒结构手足口病手足口病(HFMD)u病原病原:手足口病可由多种手足口病可由多种肠道病毒所引起，其中包括道病毒所引起，其中包括CoxA5,A10,uA16,A19,EV71,以及局部埃可病毒和柯以及局部埃可病毒和柯萨奇奇B组病毒病毒,以以CoxA16和和uEV71最最为常常见u传播途径播途径:粪-口途径口途径传播播:唾液与唾液与粪便便;u呼吸道呼吸道传播播:空气空气飞沫沫;u接触接触传播播u疱疹液中含大量病毒，疱疹破疱疹液中含大量病毒，疱疹破溃后病毒排出。后病毒排出
62、。uHFMD为全球性全球性传染病，在全球广泛分布，无明染病，在全球广泛分布，无明显的地域分布的地域分布,但但u近年近年EV71在在东南南亚一一带流行流行,引起引起较多的重症和死亡病例。多的重症和死亡病例。经水传播的病原体的感染途径经水传播的病原体的感染途径 河流海洋排毒排毒水海产品污水处理厂休闲、娱乐直接、间接接触灌溉盘子门把手洗主要研究内容主要研究内容-1-1针对针对脊灰病毒、脊灰病毒、NPEV、轮状病毒、诺如病毒轮状病毒、诺如病毒7.7.分子流行病学在病毒病诊断中的应用分子流行病学在病毒病诊断中的应用通过鉴定病毒的分子特征对流行病学方法进通过鉴定病毒的分子特征对流行病学方法进行补充行补充,
63、 ,特别是无流行病学资料时特别是无流行病学资料时. .确认确认/ /鉴别病毒的来源鉴别病毒的来源确定病毒的传播途径确定病毒的传播途径提供评估控制策略效果的方法提供评估控制策略效果的方法辅助分析不寻常的或严重的病例，例如辅助分析不寻常的或严重的病例，例如SSPE,MIE,CRSSSPE,MIE,CRS。评估病毒的传播模式评估病毒的传播模式提供评估控制策略效果的有效指标。提供评估控制策略效果的有效指标。帮助建立诊断方法帮助建立诊断方法帮助抗病毒制剂的研制中和抗体帮助抗病毒制剂的研制中和抗体开展疫苗筛选毒株，和中和位点开展疫苗筛选毒株，和中和位点MajorGlobalMeaslesD5VirusTr
64、ansmissionPathwaysMajorGlobalMeaslesD5VirusTransmissionPathways2006-08*2006-08*SuspectedtransmissionpathwaysTransmissionpathwayswithEpilinksAcknowledgement:DataprovidedbyWHOMeasles/RubellaLaboratoryNetworkandMeaslessurveillanceprogrammesKeyD5D5Jul07Apr07Jan07D5D5EndemicApr06Nov06Feb08Apr08Feb08*As o
65、f August 202177July08May06D5D5?WHOVaccinePreventableDiseaseLabNetworkPotential virus transmission patterns!78 The designation employed and the presentation of material on this map do not imply the expression of any opinion whatsoever on the part of the secretariat of the World Health Organisation co
66、ncerning the legal status of any country,territory, city or area or of its authorities, or concerning the delimitation of its frontiers or boundaries. Dotted lines on maps represent approximate border lines for which there may not yet be full agreement.专项参考参考实验室室地区参考地区参考实验室室国家国家/亚国家国家实验室室 2005年全球年全球
67、实验室网室网络共共监测 120,000 份大便份大便标本本全球脊灰消除的实验室网络全球脊灰消除的实验室网络N = 145 个实验室 8.国家麻疹、脊灰和国家麻疹、脊灰和HFMD实验室网络和研究领域实验室网络和研究领域麻疹麻疹实验室网室网络The designation employed and the presentation of material on this map do not imply the expression of any opinion whatsoever on the part of the secretariat of the World Health Organi
68、zation concerning the legal status of any country,territory, city or area or of its authorities, or concerning the delimitation of its frontiers or boundaries. Dotted lines on maps represent approximate border lines for which there may not yet be full agreement.31Provinciallabs31Provinciallabs331Pre
69、fectureLabs331PrefectureLabs154Sub-NationalLabs154Sub-NationalLabsGlobalSpecialisedLabsGlobalSpecialisedLabsNationalLaboratoriesNationalLaboratoriesRegionalReferenceLabsRegionalReferenceLabs166166MeaslesStrainBanks166countries166countriesProposedNationalLabsProposedNationalLabs10Sub-NationalLabs10Su
70、b-NationalLabsHainanBeijingTianjingXinjiangGansuXizangQinghaiNeimengHeilongjiangJilinLiaoningHebeiGuangdongHunanHenanFujianZhejiangJiangsuShanghaiTaiwanShanxiNingxiaShaanxiChongqingYunnanGuizhouSichuanGuangxiJiangxiHubeiAnhuiShandong20082008年中国年中国年中国年中国HFMDHFMD实验室监测网络建立实验室监测网络建立实验室监测网络建立实验室监测网络建立2131.National lab2. 31 Provincial labs3.331 Prefecture labs 基于症候群的实验室监测流程基于症候群的实验室监测流程5类症候群，包括：类症候群，包括：1.呼吸道症候群呼吸道症候群2.腹泻症候群腹泻症候群3.发热伴出疹症候群发热伴出疹症候群4.发热发热伴伴出血症候群出血症候群5.脑炎脑膜炎症候群脑炎脑膜炎症候群确定临床症候群和标本采集原那么与标准选择哨点医院病例信息采集标本采集、运输和保存标本检测核酸检测免疫学检测病原别离基因组信息数据集成和信息分析样本、毒种库管理监测数据分析利用其他分析谢谢谢谢
