《三聚氰胺》由会员分享，可在线阅读，更多相关《三聚氰胺（20页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、食品中三聚氰胺的检测方法食品中三聚氰胺的检测方法湖南省食品质量监督检测所湖南省食品质量监督检测所康绍英康绍英2011.6 长沙 内内 容容u 概述概述u食品中三聚氰胺的常用检测方法食品中三聚氰胺的常用检测方法u 高效液相色谱法（高效液相色谱法（GB/T 22388-2008） 三三聚聚氰氰胺胺是是一一种种用用途途广广泛泛的的基基本本有有机机化化工工中中间间产产品品，最最主主要要的的用用途途是是作作为为生生产产三三聚聚氰氰胺胺甲甲醛醛树树脂脂（MF）的的原原料。三聚氰胺还可以作阻燃剂、减水剂、甲醛清洁剂等料。三聚氰胺还可以作阻燃剂、减水剂、甲醛清洁剂等。 装饰装饰面板面板 涂料涂料 模塑粉模塑粉
2、 纸张纸张 主要主要用途用途认识三聚氰胺（认识三聚氰胺（Melamine） C3N6H6，结构式 物理化学性质 纯白色单斜棱晶体，无味，常压熔点354，溶于热水、甲醇等，不溶于醚、苯和四氯化碳。弱碱性，与盐酸、硫酸、硝酸、乙酸、草酸等都能形成三聚氰胺盐。 结构及理化性质结构及理化性质为什么添加三聚氰胺为什么添加三聚氰胺 凯氏定氮法 假蛋白的原理 无色 无味 高氮含量奶制品中掺入三聚氰胺的变化 蛋白质中含氮量平均为16%。以某合格牛奶蛋白质含量为2.8%计算，含氮量为0.44%，某合格奶粉蛋白质含量为18%计算，含氮量为2.88%。三聚氰胺含氮量66.6%，是牛奶的151倍，是奶粉的23倍 三聚
3、氰胺的花费只有真实蛋白原料的1/5。 酶联免疫法酶联免疫法（ELISAELISA） 高效液相色谱法高效液相色谱法 （HPLC）气质联用法气质联用法（GC-MS或或GC-MSMS） 液质联用法液质联用法（LC-MSMS）食品中三聚氰胺的常用检测方法食品中三聚氰胺的常用检测方法高效液相色谱法（高效液相色谱法（HPLC）提取/制样净化（SPE） 检测LC-UV实验流程称样离心超声提取过柱氮吹定容检测详细过程定容奶制品中三聚氰胺提取奶制品中三聚氰胺提取 称取奶粉2.5g或液态奶5g于50mL具塞塑料离心管中，加入15mL 1%的三氯乙酸溶液和5mL乙腈，超声提取10min，以不低于4000rpm转速离
4、心10min，上清液转移至25mL容量瓶中并用三氯乙酸定容，移取5mL滤液加入5mL水混匀后待净化。SPE净化SPE净化原理图 PCX固相萃取柱 苯磺酸化聚苯乙烯/二乙烯苯树脂磺酸化,可以交换阳离子化的三聚氰胺。l活化：3mL甲醇，3mL水l上样：上清液过柱l淋洗：3mL水，3mL甲醇，抽干l洗脱：5mL 5%氨化甲醇洗脱并收集l浓缩：50，氮气吹干，20%甲醇/水定容至1mLSPE装置SPE小柱SPE操作过程解要操作过程解要解要提取三氯乙酸：使三聚氰胺充分离子化乙腈：沉淀蛋白活化1柱管体积甲醇，1柱管体积水/酸性缓冲溶液上样流速不要过快pka=2），使目标物去离子化,流速不要过快1ml/mi
5、n测定参考条件a) 色谱柱： C8柱，250 mm4.6 mm（i.d.）， 5 m，或相当者； C18柱，250 mm4.6 mm（i.d.），5 m，或相当者。b) 流动相： C8柱，离子对试剂缓冲液-乙腈（85+15，体积比），混匀。 C18柱，离子对试剂缓冲液-乙腈（90+10，体积比），混匀。c) 流速：1.0 mL/min。d) 柱温：40。e) 波长：240 nm。f) 进样量：20 L。辛烷磺酸钠原料乳中三聚氰胺快速检测原料乳中三聚氰胺快速检测（GBT 22400-2008 原料乳中三聚氰胺快速检测原料乳中三聚氰胺快速检测-液相色谱液相色谱法法）u提取：提取：称取混合均匀的15
6、g原料乳样品（精确至0.01g），置于50ml具塞刻度试管中，加入3ml乙腈，剧烈震荡6min，加水定容至满刻度，充分混匀后静止3min，过滤后，进液相分析u色谱条件色谱条件色 谱 柱：强阳离子交换色谱柱，Venusil SCX-M，250 mm 4.6 mm（i.d.），5 mVenusil SCX-M保护柱， 10 mm 4.6 mm（i.d.），5 m流 动 相：0.05ml/L磷酸二氢钾缓冲溶液乙腈7030流 速：1.5 mL/min；柱 温：室温。检测波长：240 nm；进 样 量：20 L。 原料乳中三聚氰胺快速检测原料乳中三聚氰胺快速检测图1 空白原奶色谱图 图2 空白原奶添加1
7、0ppm三聚氰胺色谱图食品中三聚氰胺的检测食品中三聚氰胺的检测固体样品 称取2.5g试样于50mL具塞塑料离心管中，用5mL水润湿样品，加入2.5mL三氯乙酸溶液和5mL无水乙醇，混匀后以不低于4000r/min离心10min，上清液倒出并定容至25mL，混匀后取部分溶液于10mL具塞塑料离心管中，加入1mL三氯甲烷摇匀以除去样品中的脂肪后以不低于4000r/min离心10min，上清液过微孔滤膜后供HPLC测定。液体样品 称取混合均匀的样品5g置于25ml具塞比色管中，加入2.5mL三氯乙酸溶液和5mL无水乙醇，剧烈震荡摇匀，加水定容至刻度，充分混匀后静止3min，取部分溶液于10mL具塞塑
8、料离心管中，加入1mL三氯甲烷摇匀以除去样品中的脂肪后以不低于4000r/min离心10min，上清液过微孔滤膜后供HPLC测定。HPLC参考条件参考条件色谱柱：Venusil ASB-C18 4.6250mm(i.d.),5 um；流动相：缓冲液+乙腈=90+10；流速：1.0mL/min；柱温：30；波长：235nm；进样量: 20 uL。离子对试剂缓冲液:准确称取2.16g辛烷磺酸钠和2.30g柠檬酸，加水溶解，用氨水（1ml）调节pH至3.7后，用水定容至1000ml，混合均匀。 三聚氰胺标样色谱图及光谱图三聚氰胺标样色谱图及光谱图含三聚氰胺样品色谱图及光谱图含三聚氰胺样品色谱图及光谱图
