《黄酮类化合物》PPT课件

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1、二、理化性质二、理化性质一、概述一、概述三、提取与分离三、提取与分离第四章第四章 黄酮类化合物黄酮类化合物四、结构鉴定四、结构鉴定黄酮化合物是植物中分布最广的一类物质黄酮化合物是植物中分布最广的一类物质,几乎几乎每种植物中都有。每种植物中都有。据估计，经植物光合作用所固定的碳据估计，经植物光合作用所固定的碳2%转变为转变为黄酮类化合物或与其密切相关的其他化合物，大部黄酮类化合物或与其密切相关的其他化合物，大部分的鞣质也是由黄酮类化合物转变来的。分的鞣质也是由黄酮类化合物转变来的。黄酮对植物的生长黄酮对植物的生长,发育发育,开花开花,结果以及抵御结果以及抵御异物的侵袭其着重要的作用异物的侵袭其着

2、重要的作用.由于其分布广由于其分布广,部分化部分化合物在植物中较高合物在植物中较高,而且多数化合物容易以结晶形而且多数化合物容易以结晶形式获得式获得,所以他是较早被人类发现的一类天然产物所以他是较早被人类发现的一类天然产物.很早已前 黄酮主要用作染料19世纪后 开始化学和生理活性研究1974 黄酮化合物1674 苷苷元 902,苷7221978 22001980 2721 1999 64672006 9000 黄酮类化合物具有一定生理活性, 虽然不及生物碱作用强, 由于分布广泛, 种类繁多, 因此这类化合物的研究比较广泛和深入, 是天然产物中的一类重要的化合物.新橙皮糖基（一）、定义（一）、定

3、义黄酮类化合物黄酮类化合物(flavonoids)：是是泛指两个泛指两个苯环苯环（A-A-与与B-B-环）通过中环）通过中 央央三碳链三碳链相互联结而成的一系列化合物。相互联结而成的一系列化合物。 即即 结构结构一、一、 概述概述一、一、 概述概述基本母核：黄酮类化合物多具有颜色，在植物体内大黄酮类化合物多具有颜色，在植物体内大部分与糖结合成甙，一部分以游离形式存在。部分与糖结合成甙，一部分以游离形式存在。而且生理活性多种多样，引起了国内外的广而且生理活性多种多样，引起了国内外的广重视，研究进展很快。重视，研究进展很快。如如芦丁：降低血管通透性芦丁：降低血管通透性银杏叶提取物：降低血胆固醇银杏

4、叶提取物：降低血胆固醇一、一、 概述概述（二）分类（二）分类 分类依据：分类依据：a：中央三碳链的氧化程度、中央三碳链的氧化程度、b：B-环联接位置（环联接位置（2-或或3-位）位）c：三碳链是否构成环状：三碳链是否构成环状可将重要的天然黄酮类化合物分类如下所示。可将重要的天然黄酮类化合物分类如下所示。一、一、 概述概述 （二）分类（二）分类1.黄酮及黄酮醇黄酮及黄酮醇三碳链部分结构三碳链部分结构黄酮类黄酮类(flavones)黄酮醇黄酮醇(flavonol)一、一、 概述概述 （二）分类（二）分类1.黄酮及黄酮醇黄酮及黄酮醇一、一、 概述概述黄芩素 （二）分类（二）分类2.二氢黄酮及二氢黄酮

5、醇二氢黄酮及二氢黄酮醇二氢黄酮类二氢黄酮类二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类花色素类花色素类(anthocyanidins)一、一、 概述概述 （二）分类（二）分类2.二氢黄酮及二氢黄酮醇二氢黄酮及二氢黄酮醇一、一、 概述概述杜鹃素二氢槲皮素 异黄酮类异黄酮类二氢异黄酮类二氢异黄酮类一、一、 概述概述（二）分类（二）分类3.异黄酮及二氢异黄酮异黄酮及二氢异黄酮 一、一、 概述概述（二）分类（二）分类3.异黄酮及二氢异黄酮异黄酮及二氢异黄酮大豆素大豆素 查耳酮类查耳酮类二氢查耳酮类二氢查耳酮类一、一、 概述概述（二）分类（二）分类4.查耳酮及二氢查耳酮类查耳酮及二氢查耳酮类 一、一、 概述概述（二）分类（

6、二）分类4.查耳酮及二氢查耳酮类查耳酮及二氢查耳酮类新橙皮糖基柑橘苷二氢查耳酮柑橘苷二氢查耳酮2-羟基查耳酮羟基查耳酮一、一、 概述概述（二）分类（二）分类4.查耳酮及二氢查耳酮类查耳酮及二氢查耳酮类二氢黄酮二氢黄酮一、一、 概述概述新红花苷（无色）新红花苷（无色）初期初期淡黄色淡黄色红花苷（黄色）红花苷（黄色）中期中期深黄色深黄色醌式红花苷（红色）醌式红花苷（红色）后期后期红色红色（二）分类（二）分类 5.橙酮类（噢橙酮类（噢类）类）一、一、 概述概述硫磺菊素（二）分类（二）分类6.花色素类花色素类 及黄烷醇类及黄烷醇类花色素类花色素类黄烷黄烷-3-醇类醇类黄烷黄烷-3,4-二醇二醇类类一、

7、一、 概述概述+（二）分类（二）分类6.花色素类花色素类 及黄烷醇类及黄烷醇类一、一、 概述概述矢车菊素无色矢车菊素（二）分类（二）分类7.鱼藤酮类鱼藤酮类一、一、 概述概述 Amorphigenolb 12-a-羟醛鱼羟醛鱼滕滕酮酮(12a-hydroxyretenoids) 2-hydroxypachyrrhigoneC脱脱氢鱼氢鱼滕滕酮酮(dehydroretenoids) a 鱼滕酮鱼滕酮(retenoids) dehydrolineone（二）分类（二）分类8.紫檀素类紫檀素类一、一、 概述概述 a. 6a-羟羟基紫檀素基紫檀素(6a-hydroxypetercarpans) b.紫

8、檀烯紫檀烯(petercarpenes)（二）分类（二）分类9.双苯吡酮类双苯吡酮类(酮类酮类)一、一、 概述概述异芒果素（二）分类（二）分类9.双苯吡酮类双苯吡酮类(酮类酮类)一、一、 概述概述（二）分类（二）分类9.高异黄酮类高异黄酮类一、一、 概述概述（二）分类（二）分类10.其他类其他类少少数数黄黄酮酮类类化化合合物物结结构构较较为为复复杂杂，如如水水飞飞蓟蓟素素(silybin)(silybin)为黄酮木脂体类化合物。为黄酮木脂体类化合物。一、一、 概述概述 而榕碱而榕碱(ficine)(ficine)及异榕碱及异榕碱(isoficine)(isoficine)则为生物则为生物碱型黄

9、酮。碱型黄酮。一、一、 概述概述一、一、 概述概述其他分类方法；其他分类方法；平面型分子：黄酮、黄酮醇、查耳酮、花色素类平面型分子：黄酮、黄酮醇、查耳酮、花色素类非平面型分子：二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮非平面型分子：二氢黄酮、二氢黄酮醇、异黄酮一、一、 概述概述二、理化性质二、理化性质一、概述一、概述三、提取与分离三、提取与分离第四章第四章 黄酮类化合物黄酮类化合物四、结构鉴定四、结构鉴定1、性状性状黄黄酮酮类类化化合合物物多多为为结结晶晶性性固固体体，少少数数（如如黄黄酮酮甙甙类类）为无定形粉末。为无定形粉末。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质2、颜色颜色黄黄酮酮的的色

10、色原原酮酮部部分分无无色色，在在2-2-位位上上引引入入苯苯环环后后，即即形形成成交交叉叉共共轭轭体体系系，使使共共轭轭链链延延长长，因而呈现出颜色。因而呈现出颜色。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质2、颜色颜色黄酮、黄酮醇及其甙类：多显灰黄黄酮、黄酮醇及其甙类：多显灰黄黄色，黄色，查耳酮：黄查耳酮：黄橙黄色，橙黄色，异黄酮：显微黄色，异黄酮：显微黄色，二氢黄酮、二氢黄酮醇：不显色。二氢黄酮、二氢黄酮醇：不显色。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质2、颜色颜色 在在上上述述黄黄酮酮、黄黄酮酮醇醇分分子子中中，尤尤其其在在7-7-位位及及4-4-位位引引入入

11、OHOH及及OCHOCH3 3等等供供电电基基后后，化化合合物物的的颜颜色色加加深深，但但在在其其它它位位置置引引入入OHOH、OCHOCH3 3等等供供电电基基影响较小。影响较小。花花色色甙甙及及其其甙甙元元的的颜颜色色随随pH不不同同而而改改变变，一一般般显红色显红色(pH 7)、紫色、紫色()、蓝色蓝色(pH )等颜色。等颜色。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质3、旋光性旋光性甙甙元元中中，二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮醇醇、黄黄烷烷及及黄黄烷烷醇醇具具有有手手性性碳碳，具具旋旋光光性性，其其余余黄黄酮酮类类无无旋旋光光性性。甙甙类类结结构构中中含含糖糖的的部部分

12、分结结构构，故故均均有有旋旋光光性性，且多为左旋。且多为左旋。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质二氢黄酮类二氢黄酮类二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类 (flavanones) (flavanones) (flavanonols) (flavanonols) 黄烷黄烷-3,4-3,4-二醇类二醇类 (flavan-3,4-diols) (flavan-3,4-diols) 二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质黄烷黄烷-3-3-醇类醇类 (flavan-3- (flavan-3-ols)ols)二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质4、溶解度溶解度一般

13、来说，一般来说，游离甙元：游离甙元：难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙难溶或不溶于水，易溶于甲醇、乙醇、醋酸乙 酯酯、乙乙醚醚等等有有机机溶溶剂剂及及稀稀碱碱液液中中。非非平平面面型型亲亲水水性性大于平面型分子。大于平面型分子。花色甙元（花青素）类：花色甙元（花青素）类：以以离离子子形形式式存存在在，水水溶溶度度较较大大。黄黄酮酮类类甙甙元元分分子子中羟基数越多，水中的溶解度越大。中羟基数越多，水中的溶解度越大。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质4、溶解度溶解度黄酮甙类：黄酮甙类：水水溶溶性性比比相相应应甙甙元元为为大大；糖糖链链越越长长，则则水水溶溶度度越越大大，一

14、一般般易易溶溶于于热热水水、甲甲醇醇、乙乙醇醇等等强强极极性性溶溶剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。剂中，但难溶或不溶于苯、氯仿等有机溶剂中。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质5、酸碱性酸碱性酸性酸性黄黄酮酮类类化化合合物物因因分分子子中中多多含含有有游游离离酚酚羟羟基基，故故显显酸酸性性，可可溶溶于于碱碱性性溶溶液液中中。酸酸性性强强弱弱顺顺序序依依次次为为：7 7，4-4-二二OH OH 7-7-或或4-OH4-OH 一一般般酚酚OH OH 5-OH 5-OH 。此此性性质质可用于提取、分离及鉴定工作可用于提取、分离及鉴定工作。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄

15、酮类化合物的理化性质5、酸碱性酸碱性碱性碱性黄黄酮酮类类化化合合物物分分子子中中 - -吡吡喃喃酮酮环环上上的的1-1-位位氧氧原原子子，因因有有未未共共用用的的电电子子对对，故故表表现现微微弱弱的的碱碱性性，可可与与强强无无机机酸酸，如如浓浓硫硫酸酸、盐盐酸酸等等生生成成（金金羊羊）盐盐，但但生生成成的的（金羊）（金羊） 盐不稳定，加水可分解。盐不稳定，加水可分解。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质6、显色反应显色反应1）盐酸盐酸-镁粉（或锌粉）反应：镁粉（或锌粉）反应：二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质6、显色反应显色反应1）盐酸盐酸-镁粉（或锌粉）

16、反应：镁粉（或锌粉）反应：多多数数黄黄酮酮、黄黄酮酮醇醇、二二氢氢黄黄酮酮及及二二氢氢黄黄酮酮醇醇类类化化合合物物显显橙橙红红紫紫红红色色，少少数数显显紫紫蓝蓝色色。查查耳耳酮酮、橙橙酮酮、儿儿茶茶素素类类不不显显色色。异异黄黄酮类一般不显色。酮类一般不显色。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质6、显色反应显色反应2）四氢硼钠（钾）反应：四氢硼钠（钾）反应：NaBHNaBH4 4是是对对二二氢氢黄黄酮酮类类化化合合物物专专属属性性较较高高的的一一种种还还原原剂剂。与与二二氢氢黄黄酮酮类类化化合合物物产产生红生红 紫色。其它黄酮类化合物均不显色。紫色。其它黄酮类化合物均不显色。

17、二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质6、显色反应显色反应3）铝盐：铝盐：生生 成成 的的 络络 合合 物物 多多 为为 黄黄 色色（ max=415nm），并并有有荧荧光光，可可用用于于定定性性及及定定量量分分析析。常常用用试试剂剂为为1%1%三三氯氯化化铝铝或或硝硝酸铝溶液。酸铝溶液。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质6、显色反应显色反应4）锆盐：锆盐：多多用用2%2%二二氯氯氧氧化化锆锆（ZrOClZrOCl2 2）甲甲醇醇溶溶液液。黄黄酮酮类类化化合合物物分分子子中中有有游游离离的的3-3-或或5-OH5-OH存存在在时时，均均可可反反应应生生成黄色

18、的锆络合物。成黄色的锆络合物。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质6、显色反应显色反应4）锆盐：锆盐：3-OH，4-酮酮基基络络合合物物的的稳稳定定性性 5-OH，4-酮酮基基络络合合物物（仅仅二二氢氢黄黄酮酮醇醇除除外外）。当当反反应应液液中中接接着着加加入入枸枸橼橼酸酸后后，5-5-羟羟基基黄黄酮酮的的黄黄色色溶溶液液显显著著褪褪色色，而而3-3-羟羟基基黄黄酮酮溶溶液液仍仍呈呈鲜鲜黄黄色色（锆（锆枸橼酸反应）。枸橼酸反应）。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质 6、显色反应显色反应5）镁盐：镁盐：二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮醇醇类类与与醋醋酸酸镁

19、镁的的甲甲醇醇溶溶液液，加加热热可可显显天天蓝蓝色色荧荧光光，若若具具有有C5-OHC5-OH，色色泽泽更更为为明明显显。而而黄黄酮酮、黄黄酮酮醇醇及及异异黄黄酮酮类类等等则显黄则显黄橙黄橙黄褐色。褐色。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质6、显色反应显色反应6）硼酸显色反应硼酸显色反应：在在无无机机酸酸或或有有机机酸酸存存在在条条件件下下，5-5-羟羟基基黄黄酮酮及及2-2-羟羟基基查查耳耳酮酮可可与与硼硼酸酸反反应应，呈呈亮亮黄黄色色并带黄绿色荧光。并带黄绿色荧光。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质6、显色反应显色反应7）氯化锶（氯化锶（SrCl2）：

20、）：在在氨氨性性甲甲醇醇溶溶液液中中，可可与与分分子子中中具具有有邻邻二二酚酚羟羟基基结结构构的的黄黄酮酮类类化化合合物物生生成成绿绿色色 棕棕色色乃乃至至黑色沉淀。黑色沉淀。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质6、显色反应显色反应8）碱性试剂显色反应：碱性试剂显色反应：在在日日光光及及紫紫外外光光下下，通通过过纸纸斑斑反反应应，观观察察样样品品用用氨氨蒸蒸气气和和其其他他碱碱性性试试剂剂处处理理后后的的色色变变深深的的情情况况。当当分分子子中中有有邻邻二二酚酚羟羟基基取取代代或或3,4-二二羟羟基基取取代代时时，在在碱碱液液中中很很快快氧氧化化，最最后后生生成成绿绿棕色沉淀

21、。棕色沉淀。二、二、 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质说明各化合物的结构类型说明各化合物的结构类型练习练习说明各化合物的结构类型说明各化合物的结构类型练习练习练习1.黄酮类化合物结构中有一个带_性的氧原子，2. 能与_形成yang盐。2. 黄酮类化合物就整个分子而言，由于具有多个_基，故呈_ _性，能溶于_性水液中。1.其酸性强弱顺序依次为_。 3.黄酮类化合物的基本骨架为_，其主要结构类型是依据_、_ _及_某特点而分类。 选择题1. 某中药的甲醇提取液，HCl-Mg粉反应时，溶液显酱红色，而加HCl后升起的泡沫呈红色，则该提取液中可能含有： A. 异黄酮 B. 查耳酮 C. 橙

22、酮 D. 黄酮醇2.四氢硼钠是一种专属性较高的还原剂，只作用于： A. 黄酮 B. 二氢黄酮（醇 ） C.异黄酮 D. 查耳酮3. 与醋酸镁显天蓝色荧光的化合物为： A. 二氢黄酮 B. 黄酮 C. 黄酮醇 D. 异黄酮4. 某化合物有：四氢硼钠反应呈紫红色；氯化锶反应阳性；锆-枸椽酸反应黄色褪去等性质，则该化合物应为：判断正误1. 能与盐酸-镁粉产生橙红色反应的化合物一定2. 是黄酮类化合物。 3.2. 与锆-枸椽酸反应产生阳性结果的化合物是4. 5-羟基黄酮。 5.3. 黄酮类化合物在7，4位连有-OH后，6. 酸性增强。7.4. 黄酮类化合物多为有色物质，因其色原酮部分8. 具有颜色。

23、9.5. 与FeCl3显色的反应为黄酮类化合物的专属反应。 10.6. 黄酮类化合物5-OH较一般酚-OH酸性弱。二、理化性质二、理化性质一、概述一、概述三、提取与分离三、提取与分离第四章第四章 黄酮类化合物黄酮类化合物（一）提取（一）提取黄酮甙类以及极性稍大的甙元黄酮甙类以及极性稍大的甙元：一般可用丙酮、醋酸：一般可用丙酮、醋酸乙酯、乙醇提取。乙酯、乙醇提取。一些多糖甙类可用沸水提取一些多糖甙类可用沸水提取。花青素类化合物：花青素类化合物：在提取时，可加入少量酸（在提取时，可加入少量酸（0.1%0.1%盐盐 酸，应当慎用，避免发生水解）。酸，应当慎用，避免发生水解）。大大多多数数黄黄酮酮甙甙

24、元元：宜宜用用氯氯仿仿、乙乙醚醚、醋醋酸酸乙乙酯酯等等中中极极性性溶溶剂剂提提取取，而而对对多多甲甲氧氧基基黄黄酮酮类类游游离离甙甙元元，甚甚至至可可用苯等低极性溶剂进行提取。用苯等低极性溶剂进行提取。 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离1.溶剂萃取法溶剂萃取法利利用用黄黄酮酮类类化化合合物物与与混混入入的的杂杂质质极极性性不不同同，选选用不同溶剂进行萃取可达到精制纯化目的。用不同溶剂进行萃取可达到精制纯化目的。例例如如植植物物叶叶子子的的醇醇浸浸液液，可可用用石石油油醚醚处处理理，以以便便除除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素。去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素。而而某某些些

25、药药料料水水溶溶液液则则可可加加入入多多倍倍量量浓浓醇醇，以以沉沉淀淀除除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。去蛋白质、多糖类等水溶性杂质。 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 1.溶剂萃取法溶剂萃取法 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离乙醇浸膏乙醇浸膏乙醚萃取液乙醚萃取液水液水液萃取液萃取液溶于水，乙醚萃取乙酸乙酯或正丁醇萃取黄酮苷元黄酮苷2.碱提取酸沉淀法碱提取酸沉淀法黄黄酮酮类类大大多多具具有有酚酚羟羟基基，有有弱弱酸酸性性，易易溶溶于于碱碱性性水水，故故可可用用碱碱性性水水提提取取，再再于于碱碱水水提提取取液液中中加加入入酸酸，黄黄酮酮甙甙元元

26、及及水水溶溶性性较较小小的的黄黄酮酮甙甙类类即即可可沉沉淀淀析析出出。此此法法简简便便易易行行，如如芦芦丁丁、橙橙皮皮甙甙、黄黄芩芩甙甙的的提提取取都都应应用用了了这这个方法。个方法。 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离槐米滤液药渣芦丁6倍H2O，煮沸，石灰乳调pH8，煮沸20-30分钟，趁热过滤沉淀4倍H2O，煮沸20-30分钟，趁热过滤滤液60-70度，盐酸调pH5-6，静置，抽滤重结晶 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 在用碱酸法进行提取纯化时，在用碱酸法进行提取纯化时，应当注意所用碱液应当注意所用碱液浓度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加

27、热进破坏黄浓度不宜过高，以免在强碱性下，尤其加热进破坏黄酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成酮母核。在加酸酸化时，酸性也不宜过强，以免生成（金羊）盐，（金羊）盐，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，致使析出的黄酮类化合物又重新溶解，降低产品收率。降低产品收率。当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如当药料中含有大量果胶、粘液等不溶性杂质时，如花、果类药材，宜用花、果类药材，宜用石灰乳或石灰水石灰乳或石灰水代替其它碱性代替其它碱性水溶液进行提取，以使上述含羟基的杂质生成钙盐沉水溶液进行提取，以使上述含羟基的杂质生成钙盐沉淀，不致溶出。这也有利于黄酮类化合物的纯化处理。淀，不致溶出。这

28、也有利于黄酮类化合物的纯化处理。 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离3.大孔吸附树脂法大孔吸附树脂法植植物物的的水水或或稀稀醇醇提提取取液液加加入入到到大大孔孔吸吸附附树树脂脂柱柱上上，先先用用水水洗洗去去杂杂质质，再再用用不不同同浓浓度度的的乙乙醇醇依依次次洗洗脱脱，用用HCl-Mg粉粉反反应应检检测测，即即可可得得到到较较纯纯的的黄黄酮酮类类成成分分，最最后用浓醇洗柱至完全。后用浓醇洗柱至完全。 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 （二）、分离二）、分离1.柱层析法柱层析法分分离离黄黄酮酮类类化化合合物物常常用用的的吸吸附附剂剂或或载载体体有

29、有硅硅胶胶、聚聚酰酰胺胺及及纤纤维维素素粉粉等等。此此外外，也也有有用用氧化铝、氧化镁氧化铝、氧化镁及硅藻土及硅藻土等。等。 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离（1）.硅胶柱层析硅胶柱层析：此此法法应应用用范范围围最最广广，主主要要适适于于分分离离异异黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮、二二氢氢黄黄酮酮醇醇及及高高度度甲甲基基化化（或或乙乙酰酰化化）的的黄黄酮酮及及黄黄酮酮醇醇类类。少少数数情情况况下下，在在加加水水去去活活化化后后也也可可用用于于分分离离极极性性较较大大的的化化合合物物，如如多多羟羟基基黄黄酮醇及其甙类等。酮醇及其甙类等。 常用洗脱系统常用洗脱系统: 苷元苷元

30、: 氯仿氯仿-甲醇甲醇 苷苷: 氯仿氯仿-甲醇甲醇-水水 乙酸乙酯乙酸乙酯-丙酮丙酮-水水 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离（2）.聚酰胺柱层析：聚酰胺柱层析： 对分离黄酮类化合物来说，聚酰胺是较为对分离黄酮类化合物来说，聚酰胺是较为 理理想想的的吸吸附附剂剂。可可用用于于分分离离各各种种类类型型的的黄黄酮酮类类化化合物，包括甙及甙元、查耳酮与二氢黄酮等合物，包括甙及甙元、查耳酮与二氢黄酮等 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离聚酰胺分离黄酮类化合物的原理：聚酰胺分离黄酮类化合物的原理： 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离

31、聚聚酰酰胺胺分分子子中中酰酰胺胺基基与与黄黄酮酮类类化化合合物物分分子子中中羟羟基基形形成成氢氢键键缔缔合合而而产产生生吸吸附附作作用用。吸吸附附力力越越大大，越难洗脱。，越难洗脱。其吸附强度主要取决于以下几个方面：其吸附强度主要取决于以下几个方面： a：与黄酮类化合物分子中：与黄酮类化合物分子中酚羟基的数目酚羟基的数目有关，有关， 酚羟基的数目越多，吸附力越强。酚羟基的数目越多，吸附力越强。 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离其吸附强度主要取决于以下几个方面：其吸附强度主要取决于以下几个方面： b ：与酚羟基的位置有关，酚羟基所处的位置易形：与酚羟基的位置有关，酚羟基

32、所处的位置易形 成分子内氢键，则吸附力减弱。成分子内氢键，则吸附力减弱。 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离其吸附强度主要取决于以下几个方面：其吸附强度主要取决于以下几个方面： c ：分子中芳香化程度越高、共轭双键多者则吸附：分子中芳香化程度越高、共轭双键多者则吸附 力强。力强。 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离其吸附强度主要取决于以下几个方面：其吸附强度主要取决于以下几个方面： d：不同类型黄酮化合物，吸附强弱顺序为：不同类型黄酮化合物，吸附强弱顺序为：异黄酮异黄酮二氢黄酮醇二氢黄酮醇黄酮黄酮黄酮醇黄酮醇 先后流出顺序一般是：先后流出顺序一般

33、是：异黄酮异黄酮 二氢黄酮醇二氢黄酮醇 黄酮黄酮 黄酮醇黄酮醇 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离其吸附强度主要取决于以下几个方面：其吸附强度主要取决于以下几个方面：e：甙元相同，吸附强弱顺序为：甙元相同，吸附强弱顺序为：叁糖甙叁糖甙双糖甙双糖甙单糖甙单糖甙甙元甙元 洗脱先后顺序一般是：洗脱先后顺序一般是：叁糖甙叁糖甙 双糖甙双糖甙 单糖甙单糖甙 甙元甙元 三、三、 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离其吸附强度主要取决于以下几个方面：其吸附强度主要取决于以下几个方面： f：与溶剂介质有关，溶剂与聚酰胺或黄酮类化合与溶剂介质有关，溶剂与聚酰胺或黄酮类化合 物

34、形成氢键的能力越强物形成氢键的能力越强,则其洗脱能力越强则其洗脱能力越强. 溶剂洗脱能力顺序：溶剂洗脱能力顺序：水水甲醇甲醇(乙醇乙醇)丙酮丙酮氢氧化钠水溶液氢氧化钠水溶液甲酰胺甲酰胺二二甲基酰胺甲基酰胺双糖苷双糖苷三糖苷三糖苷 （一）、层析法在黄酮类鉴定中的作用（一）、层析法在黄酮类鉴定中的作用1. 1. 纸层析纸层析(PPC)(PPC) 第二相展开用水性溶剂，第二相展开用水性溶剂， 苷元相同时，苷元相同时，Rf值与上相反，依次为：值与上相反，依次为：三糖苷三糖苷双糖苷双糖苷苷元苷元不同结构类型的苷元，平面型分子不同结构类型的苷元，平面型分子Rf值小于值小于非平面型分子。非平面型分子。（一）

35、、层析法在黄酮类鉴定中的作用（一）、层析法在黄酮类鉴定中的作用 2. 2. 薄层层析薄层层析(TLC)(TLC)）硅胶薄层）硅胶薄层用于弱极性黄酮较好。用于弱极性黄酮较好。常用展开剂常用展开剂:甲苯甲苯:甲酸甲酯甲酸甲酯:甲酸（甲酸（5:4:1）；）；苯苯:甲醇（甲醇（95:5）苯苯:甲醇甲醇:冰醋酸（冰醋酸（35:5:5）等。）等。化合物极性越大化合物极性越大,Rf值越小值越小. （一）、层析法在黄酮类鉴定中的作用（一）、层析法在黄酮类鉴定中的作用 2. 2. 薄层层析薄层层析(TLC)(TLC)）聚酰胺层析）聚酰胺层析适用范围广，可分离含游离酚羟基或其苷类。适用范围广，可分离含游离酚羟基或

36、其苷类。常用展开系统：常用展开系统：乙醇：水（乙醇：水（3：2）；）；丙酮：水（丙酮：水（1：1）等。）等。(二二)、紫外光谱在黄酮类鉴定中的应用、紫外光谱在黄酮类鉴定中的应用可用于确定黄酮母核类型及确定某些位置是否含有可用于确定黄酮母核类型及确定某些位置是否含有羟基。羟基。 一般程序：一般程序： 测定样品在甲醇中的测定样品在甲醇中的UVUV谱以了解母核类型；谱以了解母核类型； 在甲醇溶液中分别加入各种诊断试剂后测在甲醇溶液中分别加入各种诊断试剂后测UVUV谱和谱和可见光谱以了解可见光谱以了解3,5,7,3,43,5,7,3,4有无羟基及邻二酚有无羟基及邻二酚羟基；羟基； 苷类可水解后（或先甲

37、基化再水解），再用上法苷类可水解后（或先甲基化再水解），再用上法测苷元的测苷元的UVUV谱以了解糖的连接位置谱以了解糖的连接位置。 1、黄酮类化合物在甲醇中的、黄酮类化合物在甲醇中的UV谱特征谱特征溶剂：溶剂：MeOH四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱 不同黄酮类化合物带不同黄酮类化合物带和带和带的峰位、峰形和的峰位、峰形和吸收强度不同。借此可以判断黄酮的类型。吸收强度不同。借此可以判断黄酮的类型。四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱如木犀草素与槲皮素:P67 在黄酮或黄酮醇母核上有羟基、甲氧基等供电子基取代时，可引起吸收带红移。 B环氧取代，使带红移，对带影响较小。 A环氧

38、取代，使带红移，对带影响较小。 黄酮或黄酮醇母核的羟基甲基化或苷化时，将引起相应吸收带紫移。 如：芹菜素，合金欢素P68四、黄酮类化合物的波谱四、黄酮类化合物的波谱加入加入试剂试剂带带II 带带I 说说明明MeOH 240-285 300-400 两两峰峰强强度度基基本本相相同同，具具体体位位置置与与母母 核核 上上 电电 负负 性性 取取 代代 基基 (-OH, -OCH3)有有关关，-OH, -OCH3越越多多，越越长长移移NaOMe A环环有有-OH，红红移小，移小，无意无意义义 40-60nm（ 不不变变或增或增强强） 50-60nm（ 下降）下降）有有4-OH，无，无3-OH 有有3

39、-OH，无，无4- OH有有3,4-OH或或3,3,4-OH（衰减更快）（衰减更快） 带带I，II随随加加NaOMe时间时间延延长长，逐，逐渐渐衰减衰减2、加入诊断试剂后引起紫外吸收峰的位移及意义、加入诊断试剂后引起紫外吸收峰的位移及意义加入加入试剂试剂带带II 带带I 说说明明 NaOAc (未熔融未熔融) 5-20 7-OH 在在长长波波一一侧侧有有明明显显肩峰肩峰有有4-OH，但无但无3-OH，7-OH有有4-OH NaOAc (熔融）熔融）红红 移移 40-65nm,强强度下降度下降 NaOAc /H3BO3B环环有有邻邻二酚二酚羟羟基基A环有邻二酚羟基环有邻二酚羟基 5-10 12-

40、30加入加入试剂试剂带带II 带带I 说说明明 AlCl3光谱光谱-AlCl3/HCl光谱光谱AlCl3/HCl光谱光谱=AlCl3光谱光谱结构中无邻二酚羟基结构中无邻二酚羟基结构中可能有邻二酚羟基结构中可能有邻二酚羟基B环有邻二酚羟基环有邻二酚羟基AlCl3/HCl光谱光谱AlCl3光谱光谱紫移紫移 30-40紫移紫移 50-65A,B环皆可能有邻二酚羟基环皆可能有邻二酚羟基加入加入试剂试剂带带II 带带I 说说明明 AlCl3光谱光谱-AlCl3/HCl光谱光谱AlCl3/HCl光谱光谱=MeOH光谱光谱无无3-OH及或及或5-OH可能有可能有3-OH及或及或5-OH只有只有5-OH有有5-OH同时，有同时，有6氧取代氧取代只有只有3-OHAlCl3/HCl光谱光谱MeOH光谱光谱 35-55 17-20 60 50-60示同时有示同时有3-OH，5-OH 一化合物的结构可能为下列三种结构之一，在UV光谱中，加入NaOAc时，带II出现520nm红移，加入AlCl3的光谱与AlCl3/HCl的光谱相同，则该化合物的结构可能为：CBA用UV法鉴别下列化合物： （1） （2） 槲皮素-7-O-鼠李糖甙和槲皮素-3-O-鼠李糖甙 （3）