专题九生物技术实践

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1、专题(zhunt)九-生物技术实践第一页，共61页。1实验实验(shyn)原理原理纤维素纤维素+ 染料染料红色复合物红色复合物纤维素纤维素+ +刚果红染料刚果红染料培养基中培养基中出现出现(chxin)以纤维素分解菌为中心的以纤维素分解菌为中心的 刚果红刚果红纤维素酶纤维素酶透明透明(tumng)圈圈2实验流程实验流程土壤取样土壤取样选择培养选择培养 挑选产生透明圈的菌落挑选产生透明圈的菌落将样品涂布到鉴别将样品涂布到鉴别 的培养基上的培养基上纤维素分解菌纤维素分解菌梯度稀释梯度稀释第二页，共61页。二、传统发酵技术的应用二、传统发酵技术的应用(yngyng)1.果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所

2、用菌种及控制条件果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌种及控制条件的比较的比较 制作内容制作内容比较项目比较项目 果酒果酒 果醋果醋 腐乳腐乳 泡菜泡菜 菌种菌种 控制控制条件条件 O2的有无的有无 有氧有氧 无氧无氧 最适温度最适温度 1825 1518 酵母菌酵母菌醋酸醋酸(c sun)菌菌毛霉毛霉乳酸菌乳酸菌无氧无氧无氧无氧3035常温常温(chngwn)第三页，共61页。2.果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程比较及亚硝酸盐果酒、果醋、腐乳和泡菜制作过程比较及亚硝酸盐含量含量(hnling)的检测的检测果酒和果醋的制果酒和果醋的制作作 腐乳腐乳的制作的制作 制作泡菜并检测亚硝制作泡菜并检测亚硝酸

3、盐含量酸盐含量 制制作作原原理理 果酒：果酒： 果醋：果醋：多种微生多种微生物发酵物发酵 乳酸菌无氧呼吸乳酸菌无氧呼吸在盐酸酸化条件下，在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应磺酸发生重氮化反应后，与后，与N-1-萘基乙萘基乙二胺盐酸盐结合形成二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料玫瑰红色染料 无氧呼吸无氧呼吸(hx)有氧呼吸有氧呼吸(hx)第四页，共61页。第五页，共61页。果酒和果醋的制作果酒和果醋的制作 腐乳腐乳的制作的制作 制作泡菜并检测制作泡菜并检测亚硝酸盐含量亚硝酸盐含量 操操作作提提示示 的选择与处的选择与处理；防止理；防止 被被污染；控制好发酵污染；控制

4、好发酵条件条件 控制好控制好 ；防止；防止杂菌污染杂菌污染 的选择；的选择；腌制的条件；测腌制的条件；测定定的操作的操作 材料材料(cilio)发酵液发酵液 材料(cilio)的用量泡菜坛泡菜坛 亚硝酸盐含量(hnling)第六页，共61页。三、植物有效成分的提取三、植物有效成分的提取(tq)1.植物芳香油三种提取植物芳香油三种提取(tq)方法的比较方法的比较 提取方法提取方法 实验原理实验原理 方法步骤方法步骤 适用范围适用范围 水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏 （1）水蒸）水蒸气蒸馏气蒸馏（2）分离）分离油层油层（3）除水）除水过滤过滤 适用于提取适用于提取 、 等等挥发性强挥发性强的芳香油的芳香油

5、玫瑰油玫瑰油薄荷油薄荷油利用水蒸利用水蒸气将挥发气将挥发性较强的性较强的植物植物(zhw)芳香芳香油携带出油携带出来来第七页，共61页。压榨法压榨法 （1）石灰水浸泡、漂）石灰水浸泡、漂洗洗（2）压榨、过滤、静）压榨、过滤、静置置（3）再次过滤）再次过滤 适用于适用于 、 等易焦等易焦糊原料的提取糊原料的提取 有机溶有机溶剂萃取剂萃取 （1）粉碎、干燥）粉碎、干燥（2）萃取、过滤）萃取、过滤（3）浓缩）浓缩 适用范围广，适用范围广，要求原料的颗要求原料的颗粒要尽可能细粒要尽可能细小，能充分浸小，能充分浸泡在有机溶液中泡在有机溶液中 柑橘柑橘(gnj)柠檬柠檬(nn mn)通过机械通过机械(jx

6、i)加加压，压榨出压，压榨出果皮中的芳果皮中的芳香油香油使芳香油溶使芳香油溶解在有机溶解在有机溶剂中，蒸发剂中，蒸发溶剂后就可溶剂后就可获得芳香油获得芳香油第八页，共61页。1玫瑰精油的提取实验流程玫瑰精油的提取实验流程 鲜玫瑰花鲜玫瑰花+清水清水1 4 油水混合油水混合物物 别离油层别离油层 玫瑰油。玫瑰油。 2橘皮精油的提取实验流程橘皮精油的提取实验流程 橘皮橘皮漂洗漂洗 静置静置再再次过滤次过滤橘皮油。橘皮油。3提取胡萝卜素提取胡萝卜素(h lu bo s)的实验流程的实验流程胡萝卜胡萝卜 枯燥枯燥 过滤过滤 胡萝卜素胡萝卜素(h lu bo s)。水蒸气蒸馏水蒸气蒸馏(zhngli)参

7、加参加(cnji)NaCl参加无水参加无水Na2SO4除水除水过滤过滤石灰水浸泡石灰水浸泡压榨压榨过滤过滤粉碎粉碎萃取萃取浓缩浓缩第九页，共61页。四、植物组织培养技术四、植物组织培养技术(jsh)和血红蛋白的提取和别离和血红蛋白的提取和别离 1.植物植物(zhw)的组织培养技术的组织培养技术 1菊花菊花(jhu)的组织培养的组织培养原理：植物细胞的原理：植物细胞的 根本过程：离体的组织或细胞根本过程：离体的组织或细胞 幼苗幼苗 影响因素：营养、影响因素：营养、 、 、 等等实验操作：制备培养基实验操作：制备培养基 全能性全能性愈伤组织愈伤组织移栽移栽pH温度温度光照光照外植体消毒外植体消毒接

8、种接种培养培养移栽移栽栽培栽培2月季的花药培养月季的花药培养 花粉发育经历了小孢子花粉发育经历了小孢子 时期、单核期、双核期等时期、单核期、双核期等阶段阶段四分体四分体第十页，共61页。影响花药培养的因素：选择的影响花药培养的因素：选择的 、 的组的组成、亲本植株的生长条件、材料的成、亲本植株的生长条件、材料的 预处理预处理以及以及 等等实验实验(shyn)操作：材料的选取操作：材料的选取 材料材料(cilio)培养基培养基低温低温(dwn)接种密度接种密度消毒消毒接种接种培养培养2.血红蛋白的提取和别离血红蛋白的提取和别离 凝胶色谱法：根据凝胶色谱法：根据 别离蛋白质别离蛋白质电泳：在电场作

9、用下，带电粒子发生迁移的过程。利电泳：在电场作用下，带电粒子发生迁移的过程。利用了待别离样品中各种分子用了待别离样品中各种分子 ，相对分子质量的大小相对分子质量的大小带电性质的差异带电性质的差异第十一页，共61页。 以及分子本身的以及分子本身的 的不同，使带电的不同，使带电(di din)分子产生不同的迁移速度，从而使样品中各种分子产生不同的迁移速度，从而使样品中各种分子别离分子别离大小大小(dxio)、形状、形状样品样品(yngpn)处理：通过红细胞的洗涤、处理：通过红细胞的洗涤、 、 等操作收集到血等操作收集到血红蛋白溶液红蛋白溶液粗提取：通过粗提取：通过 去除血红蛋白溶液中相对分子质量较

10、去除血红蛋白溶液中相对分子质量较小的杂质小的杂质3实验操作步骤实验操作步骤血红蛋白的释放血红蛋白的释放 别离血别离血红蛋白溶液红蛋白溶液透析法透析法纯化：通过纯化：通过 去除相对分子质量较大的杂质去除相对分子质量较大的杂质纯度鉴定：用纯度鉴定：用 进行样品纯度鉴进行样品纯度鉴定定凝胶色谱法凝胶色谱法SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳第十二页，共61页。考点一考点一 微生物的培养与应用微生物的培养与应用 1营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物、特殊营养

11、物质以及氧气的要求。质以及氧气的要求。2培养基类型培养基类型 按培养基物理性质可分为固体按培养基物理性质可分为固体(gt)培养基和液体培养培养基和液体培养基两种，其中固体基两种，其中固体(gt)培养基用于菌种别离、鉴定、培养基用于菌种别离、鉴定、菌落计数等。而液体培养基常用于科研或工业生产等。菌落计数等。而液体培养基常用于科研或工业生产等。 按培养基的功能可分为选择培养基和鉴别培养基。按培养基的功能可分为选择培养基和鉴别培养基。第十三页，共61页。 按照按照(nzho)人们对培养基中成分的了解程度可分人们对培养基中成分的了解程度可分为天然培养基和合成培养基两种。为天然培养基和合成培养基两种。

12、说明代谢类型不同的微生物，对培养基营养成分的要说明代谢类型不同的微生物，对培养基营养成分的要求不同，如自养型微生物可以利用无机碳源，而异养求不同，如自养型微生物可以利用无机碳源，而异养型微生物那么必须利用有机碳源。不管代谢类型如何，型微生物那么必须利用有机碳源。不管代谢类型如何，微生物对营养物质的要求都包括碳源、氮源、水、无微生物对营养物质的要求都包括碳源、氮源、水、无机盐、生长因子五类。机盐、生长因子五类。 1实验室常用的灭菌方法有灼烧实验室常用的灭菌方法有灼烧(zhu sho)灭菌、干灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌；常用的消毒方法有煮沸消毒、热灭菌、高压蒸汽灭菌；常用的消毒方法有煮沸消毒、巴

13、氏消毒、化学药剂消毒。对不同的对象需采用不同的巴氏消毒、化学药剂消毒。对不同的对象需采用不同的消毒或灭菌方法。消毒或灭菌方法。第十四页，共61页。2在微生物培养时，获得纯洁培养物的关键是防止外在微生物培养时，获得纯洁培养物的关键是防止外来来(wili)杂菌入侵。无菌技术围绕着如何防止杂菌的杂菌入侵。无菌技术围绕着如何防止杂菌的污染展开，主要包括四方面的内容：污染展开，主要包括四方面的内容： 对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。毒。 将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。进

14、行灭菌。 为防止周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精为防止周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。灯火焰附近进行。 实验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与周围的实验操作时应防止已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。物品相接触。第十五页，共61页。1利用不同的菌体的菌落特征不同别离菌种，常用的方利用不同的菌体的菌落特征不同别离菌种，常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法两种：法是平板划线法和稀释涂布平板法两种： 平板划线法是同一平板划线法是同一(tngy)接种环在固体培养基外表连接种环在固体培养基外表连续划线，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的外表，续划线，将聚集的菌种

15、逐步稀释分散到培养基的外表，以形成标准菌落。以形成标准菌落。稀释涂布平板法那么是将菌液进行稀释涂布平板法那么是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释程度的菌液分别涂一系列的梯度稀释，然后将不同稀释程度的菌液分别涂布到固体培养基的外表，进行培养，以形成标准菌落。布到固体培养基的外表，进行培养，以形成标准菌落。2选择培养，利用不同微生物对营养需要的不同或对环选择培养，利用不同微生物对营养需要的不同或对环境要求的不同，将不同微生物分开。境要求的不同，将不同微生物分开。第十六页，共61页。 测定土壤中的细菌数，一般选用测定土壤中的细菌数，一般选用104、105、106倍的稀倍的稀释液进行释液进行(

16、jnxng)平板培养，测定放线菌一般选用平板培养，测定放线菌一般选用104和和105倍的稀释液进行倍的稀释液进行(jnxng)平板培养，测定真菌一平板培养，测定真菌一般用般用102、103和和104倍的稀释液进行倍的稀释液进行(jnxng)平板培养。平板培养。实验时，每一浓度至少涂布实验时，每一浓度至少涂布3个平板，以增强实验的说服个平板，以增强实验的说服力和准确性。当样品的稀释度足够高时，培养基外表生力和准确性。当样品的稀释度足够高时，培养基外表生长的菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平长的菌落来源于样品稀释液中的一个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少个活菌。板

17、上的菌落数，就能推测出样品大约含有多少个活菌。 1方法：稀释涂布平板法方法：稀释涂布平板法统计活菌数统计活菌数第十七页，共61页。2计数规那么计数规那么计算方法：每克样品中的菌落数计算方法：每克样品中的菌落数=CVMC代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数V代表涂布平板时所用代表涂布平板时所用(su yn)稀释液的体积稀释液的体积mLM代表稀释倍数代表稀释倍数设置对照：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，设置对照：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。提高实验结果的可信度。 选择菌落数在选择菌落数在30300的平板进行计数的平板

18、进行计数假设某两个或多个稀释假设某两个或多个稀释(xsh)浓度下获得的菌落数均符浓度下获得的菌落数均符合条件时，要看两者菌落数的比值，假设小于合条件时，要看两者菌落数的比值，假设小于2，那么取，那么取两者的平均值；假设大于两者的平均值；假设大于2，那么取较小值，那么取较小值第十八页，共61页。 苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能

19、降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如以以下图所示，的细菌菌株，筛选的主要步骤如以以下图所示，为土壤样品。为土壤样品。以下相关表达错误的选项是以下相关表达错误的选项是A.图中图中培养目的菌株的选择培养基中应参加培养目的菌株的选择培养基中应参加(cnji)苯酚作苯酚作 为碳源为碳源B.如果要测定如果要测定中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法中活细菌数量，常采用稀释涂布平板法C.假设图中假设图中为对照实验，那么其中应以苯酚作为惟一碳源为对照实验，那么其中应以苯酚作为惟一碳源第十九页，共61页。D.使用平板划线法可以在使用平板划线法可以在上获得单菌落上获得单菌落解析解析 用苯酚作为选择用苯酚作为选择

20、(xunz)培养基的特殊的碳源，也培养基的特殊的碳源，也是微生物的能源物质，所以会影响其生长。测定培养液中是微生物的能源物质，所以会影响其生长。测定培养液中细菌数目多用稀释涂布平板法。假设细菌数目多用稀释涂布平板法。假设为对照实验，那么为对照实验，那么应含除苯酚外的其他碳源，应含除苯酚外的其他碳源，以苯酚作为惟一碳源。使以苯酚作为惟一碳源。使用稀释涂布平板法或平板划线法都可以在用稀释涂布平板法或平板划线法都可以在上获得单菌落。上获得单菌落。答案答案 C考点二考点二 果酒、果醋、腐乳、泡菜制作的本卷须知果酒、果醋、腐乳、泡菜制作的本卷须知1.1.果酒、果醋制作的本卷须知果酒、果醋制作的本卷须知

21、1 1材料的选择与处理材料的选择与处理 选择新鲜的葡萄，榨汁前应先冲洗，再除去枝梗，以防止去除选择新鲜的葡萄，榨汁前应先冲洗，再除去枝梗，以防止去除(q ch)(q ch)枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的时机。枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的时机。第二十页，共61页。2防止发酵液被污染防止发酵液被污染需要从发酵制作的过程进行全面的考虑，因为操作的需要从发酵制作的过程进行全面的考虑，因为操作的每一步都可能混入杂菌。为防止杂菌污染：榨汁机要每一步都可能混入杂菌。为防止杂菌污染：榨汁机要洗净并晾干，发酵装置要洗净并用洗净并晾干，发酵装置要洗净并用70%的酒精的酒精(jijng)消毒；假设用简

22、易的发酵装置，每隔一定时消毒；假设用简易的发酵装置，每隔一定时间排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。间排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。3控制发酵条件控制发酵条件果酒果酒 果醋果醋温度温度 20左右，最适合繁殖；左右，最适合繁殖；1825，酒精发酵，酒精发酵 3035，最，最适合生长适合生长 氧气氧气 前期通前期通O2，然后控制无，然后控制无O2 氧气充足氧气充足其他其他 时间：时间：1012天；天；pH:5.06.0 时间：约时间：约78天天 第二十一页，共61页。 1影响腐乳品质的条件：水、盐、酒、温度、发酵时间等。影响腐乳品质的条件：水、盐、酒、温度、发酵时间等。 水的控制：含

23、水量约水的控制：含水量约70%，用含水量过高的豆腐制腐乳，用含水量过高的豆腐制腐乳，不易成形。不易成形。 盐的控制：盐浓度过高，会影响腐乳的口味，浓度过低，盐的控制：盐浓度过高，会影响腐乳的口味，浓度过低，腐乳易腐败变质。腐乳易腐败变质。 酒的控制：酒精含量酒的控制：酒精含量(hnling)一般控制在一般控制在12%左右。酒左右。酒精含量精含量(hnling)过高，使腐乳成熟期延长。酒精含量过高，使腐乳成熟期延长。酒精含量(hnling)过低，杂菌繁殖快，豆腐易腐败。过低，杂菌繁殖快，豆腐易腐败。 温度的控制：温度为温度的控制：温度为1518,适合毛霉生长。发酵时间易适合毛霉生长。发酵时间易控

24、制在控制在6个月左右。个月左右。第二十二页，共61页。 2防止杂菌污染防止杂菌污染 用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干净后要用沸水消毒。 装瓶时，操作要迅速小心。加放卤汤后，要用胶条装瓶时，操作要迅速小心。加放卤汤后，要用胶条将瓶口密封将瓶口密封(mfng)。封瓶时，最好将瓶口通过酒精。封瓶时，最好将瓶口通过酒精灯的火焰，防止瓶口被污染。灯的火焰，防止瓶口被污染。1泡菜坛的选择：选择气密性好的泡菜坛。用水封闭坛泡菜坛的选择：选择气密性好的泡菜坛。用水封闭坛口使坛内与坛外空气隔绝，这是最简易的造成口使坛内与坛外空气隔绝，这是最简易的造成(zo chn)无氧

25、环境的方法。这样，坛内可利用蔬菜中天然无氧环境的方法。这样，坛内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭，那么会有许多存在的乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭，那么会有许多需氧菌生长，蔬菜会腐烂。需氧菌生长，蔬菜会腐烂。第二十三页，共61页。2腌制条件腌制条件(tiojin)的控制：腌制过程中要注意控的控制：腌制过程中要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量。发酵时间受到温度制腌制的时间、温度和食盐的用量。发酵时间受到温度的影响：的影响：1820，腌制，腌制15天左右。温度高，时间短一天左右。温度高，时间短一些。温度过高、食盐用量缺乏些。温度过高、食盐用量缺乏10%、腌制时间过短，都、腌制时

26、间过短，都容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。 图甲是果醋发酵图甲是果醋发酵(f jio)装置。发酵装置。发酵(f jio)初期不初期不通气，溶液中有气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种通气，溶液中有气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种醋酸菌，适当升高温度并通气，酒香逐渐变成醋香。图乙醋酸菌，适当升高温度并通气，酒香逐渐变成醋香。图乙中能表示整个发酵中能表示整个发酵(f jio)过程培养液过程培养液pH变化的曲线是变化的曲线是 第二十四页，共61页。A.B.C.D.解析解析 果醋制作的根本过程是挑选葡萄果醋制作的根本过程是挑选葡萄冲洗冲洗榨汁榨汁酒精

27、发酵酒精发酵醋酸发酵醋酸发酵获得果醋。在酒精发酵过程中，获得果醋。在酒精发酵过程中，产生的产生的CO2溶于水后形成溶于水后形成(xngchng)碳酸酸性较弱碳酸酸性较弱，pH会下降，但不会急剧下降；当接入醋酸菌后，会下降，但不会急剧下降；当接入醋酸菌后，在有氧在有氧第二十五页，共61页。会下降，但不会急剧下降；当接入醋酸菌后，在有氧会下降，但不会急剧下降；当接入醋酸菌后，在有氧的情况下，醋酸菌能将乙醇变成乙醛，再将乙醛变成的情况下，醋酸菌能将乙醇变成乙醛，再将乙醛变成醋酸，酸性物质持续增加，醋酸，酸性物质持续增加，pH持续下降，持续下降，4条曲线中条曲线中曲线曲线是比较是比较(bjio)符合符

28、合pH变化的。变化的。答案答案 B 09浙江自选模块下面是有关浙江自选模块下面是有关(yugun)食醋和食醋和泡菜制作的实验。请完成以下问题：泡菜制作的实验。请完成以下问题：1食醋可用大米为原料经三步发酵来制作：食醋可用大米为原料经三步发酵来制作：第一步：大米经蒸熟、冷却后参加淀粉酶，将原料中的第一步：大米经蒸熟、冷却后参加淀粉酶，将原料中的淀粉分解成淀粉分解成 填中间产物，然后进一步分解成填中间产物，然后进一步分解成葡萄糖，这一过程可用葡萄糖，这一过程可用 填淀粉指示剂来检测，填淀粉指示剂来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。第二

29、十六页，共61页。第二步：用第二步：用 菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵(f jio)过程中，玻璃发酵过程中，玻璃发酵(f jio)瓶不应完全密闭的瓶不应完全密闭的主要原因是主要原因是 。第三步：用第三步：用 菌将乙醇转化成乙酸，这一过程菌将乙醇转化成乙酸，这一过程 氧气。氧气。2泡菜发酵泡菜发酵(f jio)过程中，会产生多种酸，其中过程中，会产生多种酸，其中主要是主要是 ，还有少量的亚硝酸。对亚，还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用硝酸盐的定量测定可以用 法，因为亚硝酸盐与法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反响产物能与对氨基苯磺酸的反响产物能与N-1-萘基

30、乙二胺偶联成萘基乙二胺偶联成 色化合物。进行样品测定时，还要取等量水进行同样的色化合物。进行样品测定时，还要取等量水进行同样的测定，目的是测定，目的是 。第二十七页，共61页。考点三考点三 植物植物(zhw)的组织培养技术的组织培养技术 植物植物(zhw)组织培养的原理是细胞的全能性。不同细胞的组织培养的原理是细胞的全能性。不同细胞的全能性不一样。生物体的所有细胞全能性大小比较如下：全能性不一样。生物体的所有细胞全能性大小比较如下： 受精卵受精卵生殖细胞生殖细胞体细胞；体细胞；体细胞中：幼嫩植物体细胞中：幼嫩植物(zhw)组织如芽尖组织如芽尖成熟组织细胞。成熟组织细胞。答案答案(d n) 1糊

31、精糊精 碘液碘液 酵母酵母 发酵过程中会产发酵过程中会产生大量生大量CO2，使瓶内压力升高而可能引起爆裂，使瓶内压力升高而可能引起爆裂 醋酸杆醋酸杆 需要消耗需要消耗 2乳酸或有机酸乳酸或有机酸 光电比色光电比色 紫红紫红 作为对照作为对照第二十八页，共61页。植物组织培养技术植物组织培养技术 花药培养技术花药培养技术 相相同同点点 理论依据理论依据植物细胞的全能性植物细胞的全能性 基本过程基本过程外植体外植体 愈伤组织愈伤组织 丛芽丛芽 生根生根移栽；无菌技术及接种操作基本移栽；无菌技术及接种操作基本相同相同 影响因素影响因素选材、营养、激素、选材、营养、激素、pH、温度、光照等、温度、光照

32、等 不不同同点点 选材选材体细胞体细胞生殖细胞（精子）生殖细胞（精子） 脱分化脱分化(fnhu) 再分化再分化(fnhu)诱导诱导(yudo)第二十九页，共61页。3.植物组织培养技术植物组织培养技术(jsh)、微生物培养技术、微生物培养技术(jsh)和无土栽培和无土栽培技术技术(jsh)比较比较植物组织培养技术植物组织培养技术 微生物培养技术微生物培养技术 无土栽培技术无土栽培技术 概概念念在无菌条件下，将在无菌条件下，将离体的植物体器官离体的植物体器官或组织接种在适当或组织接种在适当的培养基上进行培的培养基上进行培养，最终发育成完养，最终发育成完整植株整植株 在无菌条件下，在无菌条件下，在

33、适宜的营养和在适宜的营养和环境条件下对微环境条件下对微生物的培养生物的培养 将植物生长发育将植物生长发育过程中所需各种过程中所需各种矿质元素按一定矿质元素按一定比例配成营养液，比例配成营养液，并利用这种营养并利用这种营养液栽培植物液栽培植物 第三十页，共61页。培养基培养基成分成分 水、矿质元素、水、矿质元素、蔗糖、维生素、蔗糖、维生素、有机添加物和植有机添加物和植物激素等物激素等 水、无机盐、水、无机盐、碳源、氮源碳源、氮源等等 水、必水、必需矿质需矿质元素元素 特殊操特殊操作要求作要求 严格控制无菌操严格控制无菌操作，在培养过程作，在培养过程中要更换培养基，中要更换培养基，调节细胞分裂素调

34、节细胞分裂素和生长素的比例和生长素的比例 严格控制无菌严格控制无菌操作，整个培操作，整个培养过程无需更养过程无需更换培养基换培养基 适宜的环适宜的环境条件，境条件，基质垫底基质垫底并固定幼并固定幼苗，不需苗，不需要保证无要保证无菌条件菌条件 第三十一页，共61页。 请答复以下有关植物组织培养的几个问题。请答复以下有关植物组织培养的几个问题。1离体植物组织和细胞培养常用的一种培养基是离体植物组织和细胞培养常用的一种培养基是，其主要成分，其主要成分(chng fn)包括大量元素包括大量元素和和 。培养中常用的两种植物激素是。培养中常用的两种植物激素是 和和 ，两者使用时的，两者使用时的 、 、 等

35、，都会影等，都会影响实验的结果。响实验的结果。2植物组织培养的一般步骤为植物组织培养的一般步骤为 。3以以下图为植物组织培养的局部过程。以以下图为植物组织培养的局部过程。 过程是过程是 ，过程是过程是 ，A是是 。4植物组织培养过程中还需要维持一定的外界条件，植物组织培养过程中还需要维持一定的外界条件，一是要有适宜的一是要有适宜的 ，二是，二是 。离体的器离体的器官、组织官、组织(zzh)或细胞或细胞 A植物体植物体第三十二页，共61页。解析解析 MS培养基包括大量元素培养基包括大量元素N、P、K、Ca、Mg、S和微量元素、有机物和植物激素生长素和细胞分裂和微量元素、有机物和植物激素生长素和细

36、胞分裂素。使用激素时要特别注意激素的浓度、使用顺序、素。使用激素时要特别注意激素的浓度、使用顺序、用量的比例，两者用量的比例影响植物细胞的发育用量的比例，两者用量的比例影响植物细胞的发育(fy)方向。方向。答案答案 1MS培养基培养基 微量元素微量元素 生长素生长素 细胞分细胞分裂素裂素 浓度浓度 使用的先后顺序使用的先后顺序 用量的比例用量的比例2制备制备MS固体培养基、外植体消毒、接种、培养、固体培养基、外植体消毒、接种、培养、移栽、栽培移栽、栽培3脱分化脱分化 再分化再分化 愈伤组织愈伤组织4温度和温度和pH等等 无菌环境无菌环境第三十三页，共61页。 09山东卷人参是一种名贵中药材，其

37、有效成分主山东卷人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：程如下：请答复：请答复：1配制配制(pizh)诱导愈伤组织的固体培养基，分装后诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行要进行 。接种前，要对人参根进行。接种前，要对人参根进行 。2用于离体培养的根切块，叫做用于离体培养的根切块，叫做 。培养几天。培养几天后发现少数培养基被污染，假设是有颜色的绒毛状菌落，后发现少数培养基被污染，假设是有颜色的绒毛状菌落，属于属于 污染；假设是有光泽的黏液状菌落，属于污染；假设是有光泽的黏液状菌落，属于 污染。

38、污染。 第三十四页，共61页。3用少量用少量 酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。成量。4人参皂苷易溶于水溶性亲水性有机溶液，从培养物人参皂苷易溶于水溶性亲水性有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用干粉中提取人参皂苷宜选用 方法，操作方法，操作(cozu)时应时应采用采用 加热。加热。解析解析 1灭菌是指用强烈的物理或化学的方法，杀死物灭菌是指用强烈的物理或化学的方法，杀死物体体(wt)内外的一切微生物，包括芽孢和孢子。消毒指使内外的一切微生物，包括

39、芽孢和孢子。消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体(wt)外表或内外表或内部一局部对人体有害的微生物。在组织培养过程中要防止部一局部对人体有害的微生物。在组织培养过程中要防止杂菌的污染，需要对固体培养基进行灭菌，对人参根进行杂菌的污染，需要对固体培养基进行灭菌，对人参根进行消毒。消毒。第三十五页，共61页。2用于离体培养的离体的植物组织或器官或切块用于离体培养的离体的植物组织或器官或切块称为外植体。单个或少数微生物细胞生长繁殖后，会形称为外植体。单个或少数微生物细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的成以母细胞为中心的一堆肉

40、眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。我们可以根据菌落的特征判子细胞集团，这就是菌落。我们可以根据菌落的特征判断微生物的种类。霉菌的菌落较大，肉眼可见许多毛状断微生物的种类。霉菌的菌落较大，肉眼可见许多毛状物，呈棕色、青色等，细菌菌落常表现为湿润、黏稠物，呈棕色、青色等，细菌菌落常表现为湿润、黏稠(nin chu)，有光泽。有光泽。3果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁和胞间果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁和胞间层，使愈伤组织别离。层，使愈伤组织别离。4人参皂苷溶于水溶性有机溶剂，可以用萃取法从人参皂苷溶于水溶性有机溶剂，可以用萃取法从培养物干粉中提取。萃取时要采用水浴加热，这是

41、因为培养物干粉中提取。萃取时要采用水浴加热，这是因为有机溶剂都是易燃物，用明火加热容易引起燃烧、爆炸。有机溶剂都是易燃物，用明火加热容易引起燃烧、爆炸。 答案答案 1灭菌灭菌 消毒消毒2外植体外植体 真菌霉菌真菌霉菌 细菌细菌3果胶果胶 4萃取萃取 水浴水浴第三十六页，共61页。例例1 以下对生物技术在实践中应用的表达，错误的选项以下对生物技术在实践中应用的表达，错误的选项是是 A.在沸水浴的条件下，在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色遇二苯胺会被染成蓝色 B.普通洗衣粉只是缺少酶，不会污染环境普通洗衣粉只是缺少酶，不会污染环境 的一种方法的一种方法 解析解析 果酒的制作果酒的制作(z

42、hzu)离不开酵母菌，酵母菌在离不开酵母菌，酵母菌在20左右的环境中最适合代谢和繁殖；果醋的制作左右的环境中最适合代谢和繁殖；果醋的制作(zhzu)需要醋酸菌，醋酸菌的最适生长温度为需要醋酸菌，醋酸菌的最适生长温度为3035；普通洗衣粉虽然没有酶，但含有一定量的磷，所；普通洗衣粉虽然没有酶，但含有一定量的磷，所以使用较多时也会污染环境。以使用较多时也会污染环境。B第三十七页，共61页。 错因分析错因分析 此题错因主要是对各种现代生物技术的原此题错因主要是对各种现代生物技术的原理的识记不到位，所以，熟记不同理的识记不到位，所以，熟记不同(b tn)技术的原技术的原理、操作程序等是解此类试题的关键

43、。理、操作程序等是解此类试题的关键。 例例2 请分析答复以下有关生物技术实践方面的问题：请分析答复以下有关生物技术实践方面的问题： 1微生物培养基一般都含有：水和无机盐以及微生物培养基一般都含有：水和无机盐以及(yj) 。 2在微生物接种过程中，试管口需要通过酒精灯火在微生物接种过程中，试管口需要通过酒精灯火焰焰12次，其目的是次，其目的是 。 3别离分解尿素的微生物的实验流程包括：土壤取别离分解尿素的微生物的实验流程包括：土壤取样、梯度稀释、样品涂布样、梯度稀释、样品涂布 到培养基上、挑选到培养基上、挑选 。 4在植物组织培养过程中，往往需要使用植物激素在植物组织培养过程中，往往需要使用植物

44、激素启动细胞分裂，人为地控制细胞的启动细胞分裂，人为地控制细胞的。第三十八页，共61页。5通过电泳别离提纯蛋白质时，影响蛋白质迁移速通过电泳别离提纯蛋白质时，影响蛋白质迁移速率的因素是蛋白质分子的带电性质、分子大小及率的因素是蛋白质分子的带电性质、分子大小及 。6根据果胶酶在果汁生产中的作用的系列实验结果根据果胶酶在果汁生产中的作用的系列实验结果答复答复(d f)以下问题：以下问题：能正确表示能正确表示pH对果胶酶活性影响的曲线是对果胶酶活性影响的曲线是 。在原材料有限的情况下，能正确表示相同时间内果在原材料有限的情况下，能正确表示相同时间内果胶酶的用量对果汁产量影响的曲线是胶酶的用量对果汁产

45、量影响的曲线是 。第三十九页，共61页。解析解析 培养基的成分一般培养基的成分一般(ybn)包括四大局部：碳源、包括四大局部：碳源、氮源、水、无机盐。微生物接种的过程中一定要注意氮源、水、无机盐。微生物接种的过程中一定要注意无菌操作，在酒精灯火焰旁的操作就是灭菌。在别离无菌操作，在酒精灯火焰旁的操作就是灭菌。在别离微生物时是运用选择培养基进行筛选，能够生长形成微生物时是运用选择培养基进行筛选，能够生长形成菌落的就是所需要的微生物。组织培养需要把得到的菌落的就是所需要的微生物。组织培养需要把得到的外植体通过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化才外植体通过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化才会形成新

46、植物。电泳法别离蛋白质时影响蛋白质迁移会形成新植物。电泳法别离蛋白质时影响蛋白质迁移速率的因素是蛋白质分子的带电性质、分子大小以及速率的因素是蛋白质分子的带电性质、分子大小以及带电荷量、分子形状。温度过高或过低都会降低酶的带电荷量、分子形状。温度过高或过低都会降低酶的活性，酶的催化作用具有一个最适温度。由于原材料活性，酶的催化作用具有一个最适温度。由于原材料是有限的，因此相同时间内果胶酶的用量对果汁产量是有限的，因此相同时间内果胶酶的用量对果汁产量影响有一个最大值。影响有一个最大值。第四十页，共61页。方法点评方法点评 此题综合考查生物技术实践多个专题内容，综合此题综合考查生物技术实践多个专题

47、内容，综合性强，比较根底性强，比较根底(gnd)。针对高考，复习根底。针对高考，复习根底(gnd)知知识理解生物技术实践的根本过程，强化要点的记忆，是获识理解生物技术实践的根本过程，强化要点的记忆，是获得高分的最好方法。得高分的最好方法。答案答案 1碳源和氮源碳源和氮源 2灭菌灭菌 3选择选择 菌落菌落4脱分化、再分化脱分化、再分化 5带电荷量、分子带电荷量、分子(fnz)形状形状 6乙乙 丙丙第四十一页，共61页。1.09海南卷请答复以下与实验室提取芳香油有关的问海南卷请答复以下与实验室提取芳香油有关的问题：题： 1植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、

48、 和和 。2芳香油溶解性的特点是不溶于芳香油溶解性的特点是不溶于 ，易溶于，易溶于 ，因此可用，因此可用 作为提取剂来提取芳作为提取剂来提取芳香油。香油。3橘子果实含有芳香油，通常可用橘子果实含有芳香油，通常可用 作为材料提取作为材料提取芳香油，而且提取时往往选用新鲜的材料，理由是芳香油，而且提取时往往选用新鲜的材料，理由是 。4对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中对材料压榨后可得到糊状液体，为除去其中(qzhng)的固体物获得乳状液可采用的方法是的固体物获得乳状液可采用的方法是 。第四十二页，共61页。5得到的乳状液参加氯化钠并放置一段时间后，芳香得到的乳状液参加氯化钠并放置一段时间后，芳

49、香油将分布油将分布(fnb)于液体的于液体的 层，原因是层，原因是 。参加氯化钠的作用是。参加氯化钠的作用是 。6从乳状液中别离得到的芳香油中要参加无水硫酸钠，从乳状液中别离得到的芳香油中要参加无水硫酸钠，此剂的作用是此剂的作用是 。答案答案 1蒸馏法蒸馏法 萃取法萃取法2水水 有机溶剂有机溶剂 有机溶剂有机溶剂3橘子皮橘子皮 芳香油含量较高芳香油含量较高4过滤过滤 5上上 油层的密度油层的密度(md)比水层小比水层小 增增加水层密度加水层密度(md)，使油和水分层，使油和水分层6吸收芳香油吸收芳香油中残留的水分中残留的水分第四十三页，共61页。2.09辽宁、宁夏卷辽宁、宁夏卷1在大肠杆菌培养

50、过程中，在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑除考虑营养条件外，还要考虑 、 和和 渗透压渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择型容易选择 、 等优点，因此常等优点，因此常作为遗传学研究的实验作为遗传学研究的实验(shyn)材料。材料。 2在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行对培养基和培养皿进行 消毒、灭菌；操作消毒、灭菌；操作者的双手需要进行清洗和者的双手需要进行清洗和 ；静止空气中的细菌；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质

51、变性，可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能还能 。3假设用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，假设用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、屡要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、屡次重复外，还应保证待测样品稀释的次重复外，还应保证待测样品稀释的 。第四十四页，共61页。4通常，对获得通常，对获得(hud)的纯菌种还可以依据菌落的形状、的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的大小等菌落特征对细菌进行初步的 。 5培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培

52、养基应采用的检测方法是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是 。6假设用大肠杆菌进行实验，使用假设用大肠杆菌进行实验，使用(shyng)过的培养过的培养基及其基及其培养物必须经过培养物必须经过 处理后才能丢弃，以防止培处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。养物的扩散。解析解析 1影响微生物培养的因素除了营养条件外，影响微生物培养的因素除了营养条件外，外界条件主要包括温度、酸碱度和渗透压等。由于大外界条件主要包括温度、酸碱度和渗透压等。由于大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择(xunz)、易培养、生活周期短等优点，所以常作为遗传学研究易培养

53、、生活周期短等优点，所以常作为遗传学研究的实验材料。的实验材料。第四十五页，共61页。2对于培养基和培养器皿要进行灭菌，对操作者的双手需对于培养基和培养器皿要进行灭菌，对操作者的双手需要进行清洗和用酒精消毒，静止空气中的细菌在用紫外线照射要进行清洗和用酒精消毒，静止空气中的细菌在用紫外线照射后能够使蛋白质变性，并损伤后能够使蛋白质变性，并损伤DNA结构，使细菌死亡。结构，使细菌死亡。3样品的稀释直接影响平板上生长的菌落的数目，实际操样品的稀释直接影响平板上生长的菌落的数目，实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得的菌落数

54、在的菌落数在30300之间。之间。4菌落的特征是判断微生物的种类的重要依据。对获得的菌落的特征是判断微生物的种类的重要依据。对获得的纯菌可以依据菌落的特征对细菌进行初步检测。纯菌可以依据菌落的特征对细菌进行初步检测。5要判断固体培养基是否被污染，可将未接种的培养基在要判断固体培养基是否被污染，可将未接种的培养基在适宜适宜(shy)的温度下培养一段时间，假设发现有菌落说明培养的温度下培养一段时间，假设发现有菌落说明培养基已被污染。基已被污染。第四十六页，共61页。6进行微生物培养时，使用过的培养基及培养物必进行微生物培养时，使用过的培养基及培养物必须经灭菌后才能丢弃，防止培养的微生物扩散到环境中

55、，须经灭菌后才能丢弃，防止培养的微生物扩散到环境中，造成危害。造成危害。答案答案 1温度温度 酸碱度酸碱度 易培养易培养 生活周期短生活周期短2灭菌灭菌 消毒消毒 损伤损伤DNA的结构的结构3比例适宜比例适宜 4鉴别或分类鉴别或分类5将未接种的培养基在适宜的温度下放置将未接种的培养基在适宜的温度下放置(fngzh)适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生适宜的时间，观察培养基上是否有菌落产生 6灭菌灭菌第四十七页，共61页。3.09上海卷答复以下有关植物组织培养的问题。上海卷答复以下有关植物组织培养的问题。 1用于植物组织培养的植物材料称为用于植物组织培养的植物材料称为 。 2组织培养中的细胞，

56、从分化状态转变为未分化状态组织培养中的细胞，从分化状态转变为未分化状态的过程称为的过程称为 。 3在再分化阶段所用培养基中，含有植物激素在再分化阶段所用培养基中，含有植物激素X和植和植物激素物激素Y。逐渐改变。逐渐改变(gibin)培养基中这两种植物激素培养基中这两种植物激素的浓度比，未分化细胞群的变化情况如以以下图所示。的浓度比，未分化细胞群的变化情况如以以下图所示。据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组据图指出两种激素的不同浓度比与形成芽、根、愈伤组织的关系：织的关系： 第四十八页，共61页。当植物激素当植物激素X与植物激素与植物激素Y的浓度比等于的浓度比等于1时，时， ； ；

57、。4假设植物激素假设植物激素Y是生长素，在植物组织培养中其主是生长素，在植物组织培养中其主要作用是要作用是 ；那么植物激素；那么植物激素X的名称是的名称是 。5生产上用试管苗保存生产上用试管苗保存(bocn)植物优良性状，其原因是植物优良性状，其原因是 。解析解析 1植物组织培养时所取材料称为外植体。植物组织培养时所取材料称为外植体。2让已经分化的细胞，经过诱导让已经分化的细胞，经过诱导(yudo)后，失去其特有后，失去其特有的的结构和功能而转变成未分化细胞的过程，称为脱分化。结构和功能而转变成未分化细胞的过程，称为脱分化。3据图可得当激素据图可得当激素X与激素与激素Y的浓度比为的浓度比为1时

58、，未分时，未分第四十九页，共61页。化的细胞群形成愈伤组织；当激素化的细胞群形成愈伤组织；当激素X与激素与激素Y的浓度比大的浓度比大于于1时，未分化的细胞群分化形成芽；当激素时，未分化的细胞群分化形成芽；当激素X与激素与激素Y的浓度比小于的浓度比小于1时，未分化的细胞群分化形成根。时，未分化的细胞群分化形成根。4生长素的作用是促进细胞生长、分裂生长素的作用是促进细胞生长、分裂(fnli)和分化；和分化；植物激素植物激素X能促进细胞分裂能促进细胞分裂(fnli)，是细胞分裂，是细胞分裂(fnli)素。素。5试管苗为无性繁殖系，能够保持亲本试管苗为无性繁殖系，能够保持亲本的一切性状，不发生性状别离

59、。的一切性状，不发生性状别离。答案答案 1外植体外植体 2去分化脱分化去分化脱分化3未分化细胞群经分裂未分化细胞群经分裂(fnli)形成愈伤组织形成愈伤组织当植物激素当植物激素X与植物激素与植物激素Y的浓度比大于的浓度比大于1时，未分化时，未分化细胞群分化形成芽细胞群分化形成芽当植物激素当植物激素X与植物激素与植物激素Y的浓度比小于的浓度比小于1时，未分化时，未分化细胞群分化形成根细胞群分化形成根第五十页，共61页。4促进细胞的生长伸长、分裂和分化促进细胞的生长伸长、分裂和分化 细胞分细胞分裂素裂素5组织培养形成试管苗的过程属于无性生殖，后代组织培养形成试管苗的过程属于无性生殖，后代不发生性状

60、不发生性状(xngzhung)别离别离素的性质，答复以下问题。素的性质，答复以下问题。1胡萝卜素是胡萝卜素是 色的结晶。从胡萝卜中提色的结晶。从胡萝卜中提取胡萝卜素时，常用取胡萝卜素时，常用(chn yn) 作为溶剂，原因是作为溶剂，原因是 。2从胡萝卜中提取胡萝卜素常用从胡萝卜中提取胡萝卜素常用(chn yn)的方法是的方法是 法。法。用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干用这种方法提取胡萝卜素的主要步骤是：粉碎、干燥、燥、 、 、 。第五十一页，共61页。3在胡萝卜颗粒的加热过程中，应严格将在胡萝卜颗粒的加热过程中，应严格将 和和 控制在一定范围内，原因是控制在一定范围内，原因是 。

61、4提取的胡萝卜素可通过提取的胡萝卜素可通过 法进行鉴定，法进行鉴定，在鉴定过程中需要用在鉴定过程中需要用 对照。对照。5一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率一般情况下，提取胡萝卜素时，提取效率(xio l)与原料颗粒的含水量成与原料颗粒的含水量成 比。比。解析解析 1胡萝卜素的颜色胡萝卜素的颜色(yns)是橘橙黄色，胡萝卜是橘橙黄色，胡萝卜素是脂类物质，根据相似相溶原理，易溶于亲脂性有素是脂类物质，根据相似相溶原理，易溶于亲脂性有机溶剂。机溶剂。2提取胡萝卜素常用萃取方法，步骤：提取胡萝卜素常用萃取方法，步骤：胡萝卜胡萝卜粉碎粉碎枯燥枯燥萃取萃取过滤过滤浓缩浓缩胡萝卜素。胡萝卜素。3胡萝卜颗粒

62、在加热过程中，应严格将温度和时胡萝卜颗粒在加热过程中，应严格将温度和时间控制在一定范围内，防止胡萝卜素因温度过高和时间控制在一定范围内，防止胡萝卜素因温度过高和时第五十二页，共61页。间过长而导致分解。间过长而导致分解。4提取到的胡萝卜素通过纸层析提取到的胡萝卜素通过纸层析法鉴定，该过程需要用标准样品作为对照。法鉴定，该过程需要用标准样品作为对照。5一般一般(ybn)情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒含情况下，提取胡萝卜素时，提取效率与原料颗粒含水量成反比。水量成反比。 答案答案 1橘橙黄橘橙黄 亲脂性有机溶剂或有机溶剂亲脂性有机溶剂或有机溶剂 胡萝卜素是脂类物质胡萝卜素是脂类物质2萃

63、取萃取 萃取萃取 过滤过滤 浓缩浓缩3温度温度 时间时间 温度过高和时间过长会导致胡萝卜素温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解分解4纸层析纸层析 标准样品标准样品 5反反第五十三页，共61页。5.葡萄汁、葡萄酒都具有一定的保健养生成效，随着人们葡萄汁、葡萄酒都具有一定的保健养生成效，随着人们生活水平的提高，我国葡萄汁、葡萄酒的需求量逐年增生活水平的提高，我国葡萄汁、葡萄酒的需求量逐年增长。请答复：长。请答复： 1葡萄可用来制作葡萄汁、葡萄酒，为减少葡萄可用来制作葡萄汁、葡萄酒，为减少(jinsho)资源浪费，提高产品的附加值，可对葡萄做资源浪费，提高产品的附加值，可对葡萄做怎样的处理？怎样的处

64、理？ 。2制作葡萄酒时，为防止发酵液被污染，应采取的措制作葡萄酒时，为防止发酵液被污染，应采取的措施是施是 ；在制作过程中，一般将温度控制在；在制作过程中，一般将温度控制在1825，原因是，原因是 。3为研究发酵罐中酵母菌的生长状况，常要取样统计为研究发酵罐中酵母菌的生长状况，常要取样统计分析，并测定分析，并测定pH，判断取样先后顺序的主要依据是，判断取样先后顺序的主要依据是 。第五十四页，共61页。4葡萄梗的主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，葡萄梗的主要成分为木质素、纤维素和半纤维素，但是酵母菌无法直接利用，原因是其但是酵母菌无法直接利用，原因是其 。请你提出一种解决该问题的方法。请你提出

65、一种解决该问题的方法 。5为提高葡萄酒的品质并降低生产本钱，许多厂家使为提高葡萄酒的品质并降低生产本钱，许多厂家使用固定化酵母细胞。下面是制备固定化酵母细胞的实验过用固定化酵母细胞。下面是制备固定化酵母细胞的实验过程：程：A.使干酵母与蒸馏水混合并搅拌，使酵母菌活化。使干酵母与蒸馏水混合并搅拌，使酵母菌活化。B.将无水氯化钙溶解在自来水中，配成氯化钙溶液。将无水氯化钙溶解在自来水中，配成氯化钙溶液。C.用酒精灯大火连续加热配制用酒精灯大火连续加热配制(pizh)海藻酸钠溶液。海藻酸钠溶液。D.向刚溶化好的海藻酸钠溶液中加放入已活化的酵母向刚溶化好的海藻酸钠溶液中加放入已活化的酵母 细胞，充分搅

66、拌并混合均匀转入注射器。细胞，充分搅拌并混合均匀转入注射器。第五十五页，共61页。E.将与酵母将与酵母(jiom)细胞混匀的海藻酸钠溶液注入蒸细胞混匀的海藻酸钠溶液注入蒸馏水中，馏水中， 观察凝胶珠形成。观察凝胶珠形成。请你改正其中错误的操作：请你改正其中错误的操作： 。解析解析 此题综合考查微生物发酵、酵母此题综合考查微生物发酵、酵母(jiom)细胞的细胞的固定化等知识。固定化等知识。1为减少资源浪费，提高产品的附为减少资源浪费，提高产品的附加值，葡萄可先制作葡萄汁，剩下的葡萄渣等再用于发加值，葡萄可先制作葡萄汁，剩下的葡萄渣等再用于发酵制作葡萄酒。酵制作葡萄酒。2用于发酵的器具要洗净且酒精

67、消用于发酵的器具要洗净且酒精消毒，防止发酵液受污染；温度为毒，防止发酵液受污染；温度为1825是酵母是酵母(jiom)菌生长发酵的较适宜的温度。菌生长发酵的较适宜的温度。3由于发酵由于发酵过程中酵过程中酵第五十六页，共61页。母菌产生母菌产生CO2，随发酵时间的推移，发酵液的，随发酵时间的推移，发酵液的pH会逐渐会逐渐变小变小(bin xio)，即，即pH越小取样时间越靠后。越小取样时间越靠后。4根根据酶的专一性，酵母菌之所以无法直接利用葡萄梗中的据酶的专一性，酵母菌之所以无法直接利用葡萄梗中的木质素、纤维素和半纤维素，是因为缺乏催化分解这些木质素、纤维素和半纤维素，是因为缺乏催化分解这些物质

68、的酶系统；可从基因工程、物理和化学方法、将酵物质的酶系统；可从基因工程、物理和化学方法、将酵母菌与其他能分解葡萄梗的微生物混合发酵等方面考虑母菌与其他能分解葡萄梗的微生物混合发酵等方面考虑解决方法。解决方法。答案答案 1可先用来制作葡萄汁，滤渣等再用来发酵制可先用来制作葡萄汁，滤渣等再用来发酵制作葡萄酒作葡萄酒2将器具洗净且用酒精消毒将器具洗净且用酒精消毒 Z该范围的温度是酵母该范围的温度是酵母菌生长发酵较适宜的温度菌生长发酵较适宜的温度3pH的大小，的大小，pH越小取样时间越靠后越小取样时间越靠后第五十七页，共61页。4缺乏相应分解酶系或缺乏纤维素酶和半纤维素酶缺乏相应分解酶系或缺乏纤维素酶

69、和半纤维素酶在酵母菌中转入分解酶系相关基因或利用酶或微生物在酵母菌中转入分解酶系相关基因或利用酶或微生物分解葡萄梗；利用物理和化学方法分解葡萄梗；将酵母菌分解葡萄梗；利用物理和化学方法分解葡萄梗；将酵母菌与其他能分解葡萄梗的微生物混合发酵等与其他能分解葡萄梗的微生物混合发酵等5B中自来水应改用蒸馏水、中自来水应改用蒸馏水、C中大火应改为小火或间中大火应改为小火或间断加热、断加热、D中刚溶化的海藻酸钠溶液中刚溶化的海藻酸钠溶液(rngy)应冷却至室应冷却至室温、温、E中蒸馏水应改用中蒸馏水应改用CaCl26.08海南卷某二倍体植物是杂合子，以以下图为其海南卷某二倍体植物是杂合子，以以下图为其花药

70、中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整(wnzhng)植株的过程。据图答复：植株的过程。据图答复：第五十八页，共61页。1图中图中表示的是该花粉培养过程中的表示的是该花粉培养过程中的 过过程，程，表示的是表示的是 过程，过程，X代表的是代表的是 ，表示的是表示的是 过程，过程，表示的是诱导表示的是诱导 过程。过程。2图中从愈伤组织形成完整植株图中从愈伤组织形成完整植株(zhzh)的途径有两条，的途径有两条，具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中 的的种类及其浓度配比，最后获得的来源于未成种类及其浓度配比，最

71、后获得的来源于未成熟花粉的完整植株熟花粉的完整植株(zhzh)都称为植株都称为植株(zhzh)甲。未成熟花甲。未成熟花粉经粉经培养能形成完整植株培养能形成完整植株(zhzh)，说明未成熟花粉具有，说明未成熟花粉具有 。第五十九页，共61页。谢谢(xi xie)大家！第六十页，共61页。内容(nirng)总结专题九-生物技术实践。后，与N-1-萘基乙。为防止杂菌污染：榨汁机要洗净并晾干，发酵装置要洗净并用70%的酒精(jijng)消毒。前期通O2，然后控制无O2。受精卵生殖细胞体细胞。植物激素X能促进细胞分裂，是细胞分裂素。A.使干酵母与蒸馏水混合并搅拌，使酵母菌活化。熟花粉的完整植株都称为植株甲。谢谢大家第六十一页，共61页。