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1、实验三、三、 唾液淀粉唾液淀粉酶的活性察看的活性察看 指点教指点教师：刘建昌、池雪林：刘建昌、池雪林一、目的一、目的n n掌握温度、掌握温度、pH、激活剂和抑制剂如何影、激活剂和抑制剂如何影响酶的催化活性及其影响机理。响酶的催化活性及其影响机理。二、原理二、原理n n酶是由活细胞分泌的生物催化剂。酶是由活细胞分泌的生物催化剂。n n酶促化学反响进展的才干即称为酶活性酶酶促化学反响进展的才干即称为酶活性酶活力活力n n在一定条件下，能使酶活性到达最高时的温在一定条件下，能使酶活性到达最高时的温度即酶的最适温度度即酶的最适温度n n而能使酶活性到达最高时的而能使酶活性到达最高时的pHpH即酶的最适
2、即酶的最适pHpHn n能使酶由无活性变为有活性或使酶活性增高能使酶由无活性变为有活性或使酶活性增高的物质称为酶的激活剂的物质称为酶的激活剂n n能降低酶活性却又不使酶变性的物质叫酶的能降低酶活性却又不使酶变性的物质叫酶的抑制剂。抑制剂。n n本实验用唾液淀粉酶为资料来察看酶活性受理化本实验用唾液淀粉酶为资料来察看酶活性受理化要素影响的情况。唾液中含有唾液淀粉酶，唾液要素影响的情况。唾液中含有唾液淀粉酶，唾液淀粉酶的底物是淀粉。淀粉在该酶的催化下会随淀粉酶的底物是淀粉。淀粉在该酶的催化下会随着时间的延伸而出现不同程度的水解，从而得到着时间的延伸而出现不同程度的水解，从而得到各种糊精乃至麦芽糖、
3、少量葡萄糖等水解产物。各种糊精乃至麦芽糖、少量葡萄糖等水解产物。而碘液能指示淀粉的水解程度。而碘液能指示淀粉的水解程度。淀粉淀粉糊精糊精麦芽糖麦芽糖 + + 少量葡糖少量葡糖淀粉酶淀粉酶淀粉酶淀粉酶紫红、暗褐或红色紫红、暗褐或红色加碘加碘 蓝色蓝色棕黄色棕黄色三、试剂及器材三、试剂及器材1 10.50.5w/vw/v淀粉溶液淀粉溶液 要求新要求新颖颖配制。配制。2 2稀碘溶液稀碘溶液3 3不同不同pHpH溶液溶液pH5.0pH5.0缓缓冲液冲液pH6.8pH6.8缓缓冲液冲液pH8.0pH8.0缓缓冲液冲液4 40.50.5w/vw/v蔗糖溶液蔗糖溶液5 5斑氏斑氏试剂试剂6 61 1w/vw
4、/vNaClNaCl溶液溶液7 71 1w/vw/vCuSO4CuSO4溶液溶液8 8白瓷板或比色板白瓷板或比色板9 9恒温水浴恒温水浴锅锅1010电电炉炉 四、操作四、操作n n1.1.唾液淀粉酶运用液的制备唾液淀粉酶运用液的制备n n1 1每人取一个干净的饮水杯，装上蒸馏水。每人取一个干净的饮水杯，装上蒸馏水。n n2 2先用蒸馏水漱口，将口腔内的食物残渣先用蒸馏水漱口，将口腔内的食物残渣清理干净。清理干净。n n3 3口含约口含约20mL20mL蒸馏水，做咀嚼动作蒸馏水，做咀嚼动作1-2min1-2min，以分泌较多的唾液。然后将口腔中的唾液吐，以分泌较多的唾液。然后将口腔中的唾液吐入一
5、个干净的小烧杯中。入一个干净的小烧杯中。n n2温度对酶活性的影响温度对酶活性的影响n n1取取3支试管，按表支试管，按表4-2进展实验。进展实验。试试试试管管号管管号管管号管管号1 12 23 30.50.5淀粉淀粉淀粉淀粉(mL)(mL)5 55 55 5pH 6.8pH 6.8缓缓缓缓冲液冲液冲液冲液(mL)(mL)0.50.50.50.50.50.5稀稀稀稀释释释释唾液唾液唾液唾液(mL)(mL)0.50.50.50.50.50.5不同温度（不同温度（不同温度（不同温度（）冰水浴冰水浴冰水浴冰水浴3737水浴水浴水浴水浴沸水浴沸水浴沸水浴沸水浴2 2在干净的比色板上，于各孔分别滴在干净
6、的比色板上，于各孔分别滴2 2滴碘液。滴碘液。3 3每隔每隔1min1min从第从第2 2支试管中取反响液支试管中取反响液1 1滴，与比色板滴，与比色板孔穴中的碘液混合，察看颜色的变化。孔穴中的碘液混合，察看颜色的变化。4 4待第待第2 2支试管中的反响液与碘液混合后颜色不再支试管中的反响液与碘液混合后颜色不再变化时，取出试管，向各试管滴加碘液变化时，取出试管，向各试管滴加碘液3 3滴。察看记滴。察看记录各管颜色。阐明温度对酶活性的影响。录各管颜色。阐明温度对酶活性的影响。n n3 3pHpH对酶活性的影响对酶活性的影响n n1 1取取3 3支试管，按表支试管，按表4-34-3编号后进展实验。
7、编号后进展实验。管号管号管号管号1 12 23 30.50.5淀粉淀粉淀粉淀粉(mL)(mL)2 22 22 2不同不同不同不同pHpH的的的的缓缓缓缓冲液冲液冲液冲液（mLmL）pH5.0pH5.02 2pH6.8pH6.82 2pH8.0pH8.02 2稀稀稀稀释释释释唾液唾液唾液唾液( (滴滴滴滴) ) 101010101010摇匀后，将各管置37水浴中处置。2每隔1min从pH6.8的试管中取1滴反响液滴于白瓷板上，随后滴加稀碘液1滴，察看颜色变化。3待颜色呈棕色时，向各管中加稀碘液3滴。察看各管颜色，比较各管中淀粉水解的程度。解释pH对酶活性的影响。n n4酶的专注性n n1取2支试
8、管，按4-4编号后进展实验。2 2将各管将各管摇摇匀后，一同放入匀后，一同放入3737水浴水浴处处置置10min10min。3 3取出取出试试管，分管，分别别参与斑氏参与斑氏试剂试剂2ml,2ml,混匀。混匀。4 4将各管置于沸水浴中煮沸将各管置于沸水浴中煮沸10-20min10-20min。察看并解。察看并解释释结结果。果。管号管号1 12 20.50.5淀扮淀扮(mL)(mL)2 20.5%0.5%蔗糖蔗糖(mL)(mL)2 2稀释唾液稀释唾液(mL)(mL)1 11 1管号管号管号管号1 12 23 30.50.5淀扮淀扮淀扮淀扮(mL)(mL)3 33 33 3pH6.8pH6.8缓冲
9、液缓冲液缓冲液缓冲液(mL)(mL)0.50.50.50.50.50.51 1硫酸铜镕液硫酸铜镕液硫酸铜镕液硫酸铜镕液 (mL) (mL)111 1氯化钠溶液氯化钠溶液氯化钠溶液氯化钠溶液 (mL) (mL)1 1蒸馏水蒸馏水蒸馏水蒸馏水(mL)(mL)1 1稀释唾液稀释唾液稀释唾液稀释唾液(mL)(mL)1 11 11 1n n5 5唾液淀粉酶的激活剂和抑制剂唾液淀粉酶的激活剂和抑制剂唾液淀粉酶的激活剂和抑制剂唾液淀粉酶的激活剂和抑制剂n n1 1取取取取3 3支试管，按表支试管，按表支试管，按表支试管，按表4-54-5编号后进展实验。编号后进展实验。编号后进展实验。编号后进展实验。2 2将各管将各管摇摇匀后，一同放入匀后，一同放入3737水浴保温。水浴保温。3 3每隔每隔1min1min从第从第2 2支支试试管中取出管中取出1 1滴反响液滴于滴反响液滴于白瓷板上，滴加稀碘液白瓷板上，滴加稀碘液1 1滴，察看其滴，察看其颜颜色色变变化。化。3 3待待颜颜色呈棕色色呈棕色时时，向各管中加稀碘液，向各管中加稀碘液1-31-3滴。滴。察看各管察看各管颜颜色，比色，比较较各管中淀粉水解的程度，并各管中淀粉水解的程度，并解解释释之。之。
