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1、临床免疫学检验绪论临床免疫学检验绪论 考考核核方方式式及及具具体体安安排排 期末期末考核考核形式形式形式形式占占课程程成成绩%闭卷卷 笔笔试60%平平时考核考核形式形式%形式形式%占占课程程成成绩%小小测验10操作考操作考试1040%实验报告告10讨论课10形成性评价形成性评价 讨论课：综合性实验方案设计讨论课：综合性实验方案设计 文献阅读汇报文献阅读汇报 讨论课前讨论课前23周布置题目，分组，周布置题目，分组，每每个组根据分配到的题目进行实验方案设计个组根据分配到的题目进行实验方案设计或文献阅读，制作或文献阅读，制作ppt，讨论讨论课上课上派派代表代表进行汇报进行汇报，教师点评并讨论，教师点
2、评并讨论。 临床免疫学床免疫学检验(Clinical (Clinical laboratory immunology)laboratory immunology)是研究和是研究和应用免疫学理论和技术对临床疾病应用免疫学理论和技术对临床疾病进行诊断的一门检验医学学科。进行诊断的一门检验医学学科。 你知道吗？临床免疫学床免疫学检验的的发展展简史史临床免疫学检验的诞生临床免疫学检验的诞生标记免疫技术的建立与发展标记免疫技术的建立与发展现代临床免疫学检验现代临床免疫学检验临床免疫学床免疫学检验的的诞生生( (100100多年的历史多年的历史) )18961896年年WidalWidal利用伤寒患者血清
3、与伤寒杆菌发生特利用伤寒患者血清与伤寒杆菌发生特异性凝集的现象异性凝集的现象, ,诊断伤寒诊断伤寒-肥大反应肥大反应18981898年年BordetBordet在研究补体溶血机制的基础上建立在研究补体溶血机制的基础上建立了补体结合试验，随之被用于诊断梅毒了补体结合试验，随之被用于诊断梅毒19001900年年LandsteinerLandsteiner发现人发现人ABOABO血型，此后血型鉴血型，此后血型鉴定成为临床检验中的重要项目定成为临床检验中的重要项目19451945年年CoombsCoombs建立抗球蛋白试验用于溶血性贫血建立抗球蛋白试验用于溶血性贫血时红细胞不完全抗体的检测时红细胞不完
4、全抗体的检测19461946年年OudinOudin报道了试管免疫扩散技术，进一步发报道了试管免疫扩散技术，进一步发展为凝胶中的沉淀反应技术展为凝胶中的沉淀反应技术 7 颗粒性抗原（粒性抗原（细菌或菌或细胞）与相胞）与相应抗体直接抗体直接结合所出合所出现的凝集的凝集现象象(agglutination test)(agglutination test) ：玻片法玻片法定性定性试验：已知：已知 Ab Ab 未知未知 Ag(?)Ag(?)8 试试管法凝集反管法凝集反管法凝集反管法凝集反应应半定量半定量半定量半定量试验试验： 诊诊断断断断伤伤寒副寒副寒副寒副伤伤寒的寒的寒的寒的“肥达反肥达反肥达反肥达
5、反应应”伤寒细菌悬液伤寒细菌悬液1:21:41:81:161:321:64对照对照病人血清病人血清倍比稀释倍比稀释9AgAbCAgCRBC溶血素溶血素RBC溶血素溶血素C不溶血不溶血溶血溶血补补体体体体结结合反合反合反合反应应( ( ( (complement-fixation reaction) 是在是在是在是在补补体参与下，以体参与下，以体参与下，以体参与下，以绵绵羊羊羊羊红细红细胞和溶血素作胞和溶血素作胞和溶血素作胞和溶血素作为为指示指示指示指示系系系系统统，来，来，来，来检测检测未知抗原或抗体的血清学未知抗原或抗体的血清学未知抗原或抗体的血清学未知抗原或抗体的血清学试验试验。指示系统指
6、示系统: : 绵羊红细胞绵羊红细胞 + +溶血素溶血素 + +补体补体待检系统：待检系统： 已知已知Ag+Ag+未知未知AbAb 或已知或已知Ab+Ab+未知未知AgAg。10AgAb扩散扩散AgAb扩散扩散1:21:41:81:161:241:64双向双向琼脂脂扩散散( ( double immunodiffusion)double immunodiffusion)： -定性检测定性检测AgAg或或Ab Ab ； AbAb效价滴定效价滴定11 标记标记免疫技免疫技免疫技免疫技术术是以是以是以是以标记标记物示踪抗原与抗体物示踪抗原与抗体物示踪抗原与抗体物示踪抗原与抗体结结合反合反合反合反应应的
7、的的的检测检测技技技技术术。是当今免疫。是当今免疫。是当今免疫。是当今免疫检验检验的主流技的主流技的主流技的主流技术术荧荧光抗体技光抗体技光抗体技光抗体技术术（fluorescent antibody technique)fluorescent antibody technique)放射免疫技放射免疫技放射免疫技放射免疫技术术 (radioimmunoassay technique)(radioimmunoassay technique)酶酶酶酶免疫技免疫技免疫技免疫技术术 (enzyme immunoassay)(enzyme immunoassay)发发光免疫技光免疫技光免疫技光免疫技术术
8、 (luminescence immunoassay (luminescence immunoassay techniques)techniques)胶体金免疫技胶体金免疫技胶体金免疫技胶体金免疫技术术(colloidal gold immunoassay)(colloidal gold immunoassay) 标记免疫技免疫技术的建立与的建立与发展（展（2020世世纪中叶开中叶开始）始）12 荧荧光抗体技光抗体技光抗体技光抗体技术术 利用利用利用利用荧荧光素光素光素光素标记标记抗体或抗抗体以抗体或抗抗体以抗体或抗抗体以抗体或抗抗体以检测细检测细胞表面或胞表面或胞表面或胞表面或细细胞内抗原的
9、技胞内抗原的技胞内抗原的技胞内抗原的技术术。是将抗原抗体反。是将抗原抗体反。是将抗原抗体反。是将抗原抗体反应应的特异性与的特异性与的特异性与的特异性与荧荧光物光物光物光物质检质检测测的敏感性和的敏感性和的敏感性和的敏感性和显显微形微形微形微形态态学的直学的直学的直学的直观观性相性相性相性相结结合的一种免疫分析技合的一种免疫分析技合的一种免疫分析技合的一种免疫分析技术术。直接法直接法 间接法间接法 直接法直接法: :每检测一种抗原必须制备相应的荧光抗体每检测一种抗原必须制备相应的荧光抗体间接法间接法: :敏感性比直接法高敏感性比直接法高, ,制备一种荧光二抗可用于多种制备一种荧光二抗可用于多种抗
10、原的检测抗原的检测13放放射射免免疫疫测测定定法法( (R RI IA A) )示示意意图图 Ag* Ab AgAg* Ab Ag 标记抗原标记抗原 特异性抗体特异性抗体 待测抗原待测抗原( Ag*-Ab)+ (Ag-Ab) ( Ag*-Ab)+ (Ag-Ab) 抗原抗体复合物抗原抗体复合物分离分离Ag*-Ab Ag*-Ab 和游离和游离Ag*Ag*从标准曲线上读知含量从标准曲线上读知含量 测定测定Ag*-AbAg*-Ab和和/ /或游离或游离Ag*Ag*放射性放射性 14用酶标记用酶标记Ab(Ab(或或Ag)Ag)与标本中的与标本中的Ag(Ag(或或Ab)Ab)发生特异性结合发生特异性结合加
11、入酶的底物，在酶作用下产生有色物质加入酶的底物，在酶作用下产生有色物质, ,根据颜色可作出判断或测量光密度值根据颜色可作出判断或测量光密度值+双抗体夹心法双抗体夹心法( (检测抗原检测抗原) )酶酶酶酶免疫技免疫技免疫技免疫技术术：酶酶酶酶联联免疫吸附免疫吸附免疫吸附免疫吸附试验试验(ELISA)(ELISA)(ELISA)(ELISA)15斑点免疫金斑点免疫金层析析试验 GTC16临床免疫学床免疫学检验技技术一、一、临床免疫学床免疫学检验技技术的的类型型经典的抗原抗体反应经典的抗原抗体反应免疫比浊技术免疫比浊技术标记免疫技术标记免疫技术免疫芯片技术免疫芯片技术流式细胞技术流式细胞技术二、二、
12、临床免疫学床免疫学检验技技术的特点的特点17临床免疫学床免疫学检验的的临床床应用用感染性疾病的免疫学检测感染性疾病的免疫学检测免疫相关性疾病的免疫学检测免疫相关性疾病的免疫学检测 超敏反应性疾病的免疫学检测超敏反应性疾病的免疫学检测 自身免疫性疾病检测自身免疫性疾病检测 免疫增殖病检测、免疫缺陷病检测免疫增殖病检测、免疫缺陷病检测 肿瘤免疫学检测、移植免疫学检测肿瘤免疫学检测、移植免疫学检测其他领域检测的应用其他领域检测的应用 血药浓度计药物毒性检测血药浓度计药物毒性检测 农业产品及食品卫生安全检测农业产品及食品卫生安全检测18临床免疫学检验的地位及应用范围 重要地位：重要地位：重要地位：重要
13、地位： 医学检验的重要组成部分和支柱，是医学检医学检验的重要组成部分和支柱，是医学检验本科生必修的主干课程，也是临床检验诊断学验本科生必修的主干课程，也是临床检验诊断学研究生最重要的课程之一。研究生最重要的课程之一。应应用范用范用范用范围围： 临床医疗临床医疗 疾病的诊断和鉴别诊断疾病的诊断和鉴别诊断 疗效观察和预后判断疗效观察和预后判断 疾病预防疾病预防 社会普查社会普查 健康咨询健康咨询 科学研究科学研究19现代代临床免疫学床免疫学检验 现代代实验室的三大目室的三大目标： 提供可靠数据提供可靠数据 提供充分的检测项目提供充分的检测项目 提供临床咨询提供临床咨询自自动化、高通量、信息化、化、高通量、信息化、简便快速便快速20联系方式联系方式 Email：实验课地点：实验课地点：越秀校区越秀校区10栋栋11楼楼临床免疫学检验课程网站：临床免疫学检验课程网站：http:/210.38.57.227:8000/course/20120604lcmyxjy2/
