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1、检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 1.实验原理 斐林试剂斐林试剂苏丹苏丹橘黄色橘黄色红色红色砖红色沉淀砖红色沉淀紫色紫色苏丹苏丹 双缩脲试剂双缩脲试剂鉴定物质鉴定物质试剂试剂实验现象实验现象还原性糖还原性糖脂肪脂肪蛋白质蛋白质淀粉淀粉 碘液碘液 蓝色蓝色 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定l实验原理实验原理选材：含糖量较高的选材：含糖量较高的白色或近于白色的植物组织白色或近于白色的植物组织(排除色素对排除色素对显色的干扰显色的干扰)，苹果、梨最好，苹果、梨最好 。 l实验流程实验流程(步骤步骤)1.可溶性还原
2、糖可溶性还原糖 制备组织样液：制备组织样液：制浆：去皮、切块、研磨，制浆：去皮、切块、研磨，过滤：（用单层纱布）过滤：（用单层纱布）取液：取液：（mL）显色反应显色反应 现象：现象： (用前混匀用前混匀)5065.C水浴水浴加热加热2min葡萄糖，果糖，葡萄糖，果糖，麦芽糖；麦芽糖；蔗糖为非还原蔗糖为非还原性糖性糖还原糖的检测和观察：还原糖的检测和观察：还原糖的检测结果还原糖的检测结果还原糖的检测结果还原糖的检测结果2.脂肪的鉴定脂肪的鉴定 取材：花生种子（浸泡取材：花生种子（浸泡h），去皮，将子叶削成薄片），去皮，将子叶削成薄片 制片：制片：选取最薄的薄片移至载玻片中央选取最薄的薄片移至载玻
3、片中央在薄片上滴加在薄片上滴加苏丹苏丹(或苏丹或苏丹) 染液染液2 3滴，滴，染色染色min滴加体积分数为滴加体积分数为50%的酒精的酒精溶液溶液12滴，洗滴，洗去浮色去浮色(多余的苏丹多余的苏丹 )吸去余液，滴吸去余液，滴1-2滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成滴蒸馏水，盖上盖玻片，制成临时装片临时装片显微观察：显微观察： 先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察先在低倍镜下找到已着色的薄片，后用高倍镜观察现象：现象：有被染成有被染成橘黄色橘黄色(或红色或红色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒脂肪的检测结果脂肪的检测结果3.蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定 选材与制备选材与制备组织样液：组织样液：黄
4、豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）黄豆组织样液（或鸡蛋蛋清稀释液）黄豆浸泡黄豆浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨过滤过滤滤液滤液 显显色色反反应应现象：现象：无色无色紫色或紫红色紫色或紫红色(创设碱性条件创设碱性条件)(提供提供Cu2+)蛋白质的检测结果蛋白质的检测结果4.淀粉的鉴定淀粉的鉴定取材：马铃薯匀浆取材：马铃薯匀浆检测：检测：碘液碘液2滴滴现象：现象： 摇匀后变成蓝色摇匀后变成蓝色问题探讨问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？一部分样液？作对照作对照2、使用双缩脲试剂时为什么、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加液只能
5、加34滴而不能滴而不能过量？过量？ 过量的双缩脲试剂过量的双缩脲试剂B B会与试剂会与试剂A A反应，使溶液呈蓝反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。色，而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？ 时间太长，时间太长，Cu(OH)Cu(OH)2 2悬浊液就沉淀在试管底部而悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。无法参与反应。l深化深化比比较项目目试剂及成及成分分原理原理溶液溶液浓度度方法方法加加热与否与否结果果可溶可溶还原糖的原糖的鉴定定斐林斐林试剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4砖红色色沉沉淀淀蛋白蛋白质的的鉴定定双双缩脲试
6、剂NaOHNaOH和和CuSOCuSO4 4溶溶液液呈呈紫紫色色4、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？、斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同？新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在碱性在碱性环境下环境下的的Cu2+NaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.05g/mLNaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合，而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL，然，然后后再加再加CuS044滴，摇匀。滴，摇匀。(不能过量不能过量)水浴水浴加热加热不不需需要要知识结构1、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是 ( ) A青苹果汁中有淀粉，不含还原糖青苹果汁中有淀粉，不含还原糖 B熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉 C苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖 D苹果转熟时单糖聚合成淀粉苹果转熟时单糖聚合成淀粉 Cl例题例题
