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1、交叉配血（聚凝胺法、微柱凝胶法）交叉配血（聚凝胺法、微柱凝胶法）交叉配血交叉配血聚凝胺法：n原理：原理： 将红细胞和血清放置在将红细胞和血清放置在低离子低离子介质介质中孵育，可促进抗体和红中孵育，可促进抗体和红细胞膜血型抗原结合，再加入细胞膜血型抗原结合，再加入聚凝胺聚凝胺促进红细胞非特异性凝促进红细胞非特异性凝集。离心后加入集。离心后加入重悬液重悬液(电荷电荷中中和和 )，正常红细胞的凝集解散，正常红细胞的凝集解散，而抗体抗原结合引起的红细胞而抗体抗原结合引起的红细胞凝集仍然存在。凝集仍然存在。 操作步骤：n抽取受血者静脉血抽取受血者静脉血3 34ml4ml，枸橼酸钠抗凝，以生理盐，枸橼酸钠
2、抗凝，以生理盐水洗涤受血者红细胞水洗涤受血者红细胞3 3次，配成次，配成3% 3% 红细胞悬液，同样红细胞悬液，同样方法处理献血者样本；方法处理献血者样本；n取洁净小试管取洁净小试管2 2支，支，1 1支标记为主侧管，另支标记为主侧管，另1 1支标为次侧支标为次侧管；管；n主侧管内加受血者血清主侧管内加受血者血清2 2滴、献血者红细胞悬液滴、献血者红细胞悬液1 1滴；滴；次侧管加献血者血清次侧管加献血者血清2 2滴、受血者红细胞悬液滴、受血者红细胞悬液1 1滴；滴； n每管各加每管各加LIMLIM溶液溶液0.6ml0.6ml，混匀，室温孵育，混匀，室温孵育1min;1min;n每管各加每管各加
3、2 2滴聚凝胺溶液，混合后静置滴聚凝胺溶液，混合后静置15s;15s;n1300g1300g离心离心15s15s，倾去上清液；，倾去上清液；n轻轻摇动试管，目测细胞有无凝集，如无凝集，必须轻轻摇动试管，目测细胞有无凝集，如无凝集，必须重做；重做；n加入加入2 2滴重新悬浮液，并轻轻转动试管混合，肉眼观察滴重新悬浮液，并轻轻转动试管混合，肉眼观察结果，必要时用显微镜观察结果。结果，必要时用显微镜观察结果。 结果判断：n主侧管和次侧管内红细胞凝集在主侧管和次侧管内红细胞凝集在1min1min散开，则散开，则为聚凝胺引起的非特异性凝集，表示受血者和为聚凝胺引起的非特异性凝集，表示受血者和献血者配血相
4、容。献血者配血相容。n如果主侧管和如果主侧管和/ /或次侧管内红细胞凝集不散开，或次侧管内红细胞凝集不散开，则表明两血不相容，献血者血液不可输注。则表明两血不相容，献血者血液不可输注。注意事项：注意事项：n 实验结果必须在实验结果必须在3 3分钟内判读分钟内判读n在冬天气温较低时，某些病人血清中含有冷在冬天气温较低时，某些病人血清中含有冷凝集素而导致交叉配血假阳性凝集素而导致交叉配血假阳性; ;遇此现象可用遇此现象可用37-4037-40生理盐水洗涤红细胞并置生理盐水洗涤红细胞并置3737水溶水溶中轻轻摇动，观察结果。中轻轻摇动，观察结果。LIM:降低降低 溶液的离子强度溶液的离子强度,减少红
5、细胞周围的阳离子云，减少红细胞周围的阳离子云，可促进抗体和红细胞膜血型抗原结合可促进抗体和红细胞膜血型抗原结合。聚凝胺聚凝胺:高价阳离子高价阳离子,中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞中和红细胞表面的负电荷，缩短细胞间距间距,促进红细胞非特异性凝集。促进红细胞非特异性凝集。重悬液重悬液:电荷电荷中中和和 。微柱凝胶卡交叉配血试验 n原理：原理： 将受血者、献血者的血清和红细胞，放置主侧和将受血者、献血者的血清和红细胞，放置主侧和次侧管的反应室中，放置次侧管的反应室中，放置37孵育器中孵育，孵育器中孵育，如果血清中存在针对红细胞抗原的血型抗体如果血清中存在针对红细胞抗原的血型抗体（lgM型或型或Ig
6、G型）时，红细胞发生凝集，离心型）时，红细胞发生凝集，离心后留在微柱的表面，为阳性；如果血清中不含有后留在微柱的表面，为阳性；如果血清中不含有针对红细胞膜上血型抗原的抗体，红细胞下沉到针对红细胞膜上血型抗原的抗体，红细胞下沉到微柱管的底部，为阴性。微柱管的底部，为阴性。 操作步骤：n按照试剂说明配制好献血者、受血者的红细胞悬液按照试剂说明配制好献血者、受血者的红细胞悬液以及分离血清。以及分离血清。n主侧：主侧：25ul 受血者血清受血者血清 + 50ul 1%献血者红细胞，献血者红细胞，加入主侧管反应室内；加入主侧管反应室内；n次侧：次侧： 25ul献血者血清献血者血清+ 50ul 1%受血者红细胞，受血者红细胞，加入到次侧管反应室内；加入到次侧管反应室内；n加样后的试剂卡放置专用孵育器加样后的试剂卡放置专用孵育器37孵育孵育15min；n取出试剂卡，放置专用离心机取出试剂卡，放置专用离心机1000g离心离心9min；n取出试剂卡，肉眼观察结果。取出试剂卡，肉眼观察结果。 结果判断：n阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管底阴性结果：红细胞完全沉降于凝胶管底部。部。n阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中，和（或）出现溶血。或凝胶中，和（或）出现溶血。
