《人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究（24页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体内外生长抑制的研究胞体内外生长抑制的研究 山东大学齐鲁医院山东大学齐鲁医院山东大学齐鲁医院山东大学齐鲁医院 宋欣燕宋欣燕宋欣燕宋欣燕 孔北华孔北华孔北华孔北华呼游构憾虹家尖浮碉糙拆孜舌回暴撰睦氮柒诊今瞧斡搽好捌沫忧阅艺诌钒人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究研究背景研究背景人类胚胎干细胞具有正常的核型及自我更新能力，在发育人类胚胎干细胞具有正常的核型及自我更新能力，在发育人类胚胎干细胞具有正常的核型及自我更新能力，在发育人类胚胎干细胞具有正常的核型及自我更新能力，在发育过程中能分化成
2、多种正常表型的细胞，其生长分化受到多过程中能分化成多种正常表型的细胞，其生长分化受到多过程中能分化成多种正常表型的细胞，其生长分化受到多过程中能分化成多种正常表型的细胞，其生长分化受到多种细胞因子及分子信号通路的调节，如种细胞因子及分子信号通路的调节，如种细胞因子及分子信号通路的调节，如种细胞因子及分子信号通路的调节，如PI3KPI3KPI3KPI3K、BMPBMPBMPBMP、TGFTGFTGFTGF等；等；等；等；肿瘤细胞与干细胞有较多相似性，包括某些与自我更新等肿瘤细胞与干细胞有较多相似性，包括某些与自我更新等肿瘤细胞与干细胞有较多相似性，包括某些与自我更新等肿瘤细胞与干细胞有较多相似性
3、，包括某些与自我更新等有关的分子信号通路；这些信号通路的改变与肿瘤的发生、有关的分子信号通路；这些信号通路的改变与肿瘤的发生、有关的分子信号通路；这些信号通路的改变与肿瘤的发生、有关的分子信号通路；这些信号通路的改变与肿瘤的发生、侵袭有关；侵袭有关；侵袭有关；侵袭有关；尾包偏潦苑撼鹤为认洁操饶落烦涯裔是芍末汞肇煤裔悼如仗窖窗禽酿苑且人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究肿瘤的发展也与周围微环境有关，二者相互作用影响肿瘤肿瘤的发展也与周围微环境有关，二者相互作用影响肿瘤肿瘤的发展也与周围微环境有关，二者相互作用影响肿瘤肿瘤的发展也与周围微环境
4、有关，二者相互作用影响肿瘤的生长、侵袭；的生长、侵袭；的生长、侵袭；的生长、侵袭；因而，我们设想这种能支持正常发育过程的全能干细胞及因而，我们设想这种能支持正常发育过程的全能干细胞及因而，我们设想这种能支持正常发育过程的全能干细胞及因而，我们设想这种能支持正常发育过程的全能干细胞及其微环境能否逆转异常的肿瘤细胞表型。其微环境能否逆转异常的肿瘤细胞表型。其微环境能否逆转异常的肿瘤细胞表型。其微环境能否逆转异常的肿瘤细胞表型。局篷粘且罕臀蠢瞄求篇疗警嘉最婆光做越痘咳肚腐羡哺垫亥氏雏该潘镐煮人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究加拿大麦克马斯特癌
5、症与干细胞研究所加拿大麦克马斯特癌症与干细胞研究所加拿大麦克马斯特癌症与干细胞研究所加拿大麦克马斯特癌症与干细胞研究所(McMaster Cancer (McMaster Cancer and Stem Cell Research Institute)and Stem Cell Research Institute)的研究人员报告说，胚胎的研究人员报告说，胚胎的研究人员报告说，胚胎的研究人员报告说，胚胎干细胞可以制造特别的壁龛细胞，然后这些壁龛细胞会释干细胞可以制造特别的壁龛细胞，然后这些壁龛细胞会释干细胞可以制造特别的壁龛细胞，然后这些壁龛细胞会释干细胞可以制造特别的壁龛细胞，然后这些壁龛细
6、胞会释放干细胞所需的蛋白质，保证这些放干细胞所需的蛋白质，保证这些放干细胞所需的蛋白质，保证这些放干细胞所需的蛋白质，保证这些“ “母体母体母体母体” ”平稳运行。平稳运行。平稳运行。平稳运行。Nature, 2007, 448:1015-21栅茂莱燃茂眨复库伶填挡毕寅酬网甘驴告钓喧袋蒲僻巍醉蓖赚午剥煌达普人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究Dr. HendrixDr. HendrixDr. HendrixDr. Hendrix报道人胚胎干细胞微环境可以诱导恶性黑报道人胚胎干细胞微环境可以诱导恶性黑报道人胚胎干细胞微环境可以诱导恶性黑报道
7、人胚胎干细胞微环境可以诱导恶性黑 素瘤细胞转为正常皮肤细胞表型，并降低侵袭力。素瘤细胞转为正常皮肤细胞表型，并降低侵袭力。素瘤细胞转为正常皮肤细胞表型，并降低侵袭力。素瘤细胞转为正常皮肤细胞表型，并降低侵袭力。J. FairJ. FairJ. FairJ. Fair报道鼠胚胎干细胞可以在体外抑制胰腺癌细胞报道鼠胚胎干细胞可以在体外抑制胰腺癌细胞报道鼠胚胎干细胞可以在体外抑制胰腺癌细胞报道鼠胚胎干细胞可以在体外抑制胰腺癌细胞生长。生长。生长。生长。Stem Cells, 2006,24:501-505 J Sur Res, 2004,121:342 障求宗埔蚤摊尚侦法萧枣量扑态攘鸦俐千皿傲恍贫蕾
8、葱参唬边食哺加允又人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究胚胎生殖干细胞（胚胎生殖干细胞（胚胎生殖干细胞（胚胎生殖干细胞（EGEGEGEG细胞）属于全能干细胞，来源于原始细胞）属于全能干细胞，来源于原始细胞）属于全能干细胞，来源于原始细胞）属于全能干细胞，来源于原始生殖细胞，本实验设计研究人生殖细胞，本实验设计研究人生殖细胞，本实验设计研究人生殖细胞，本实验设计研究人EGEGEGEG细胞对卵巢癌细胞细胞对卵巢癌细胞细胞对卵巢癌细胞细胞对卵巢癌细胞SKOV3SKOV3SKOV3SKOV3在体内外生长抑制的作用，并设计通过定量在体内外生长抑制的作
9、用，并设计通过定量在体内外生长抑制的作用，并设计通过定量在体内外生长抑制的作用，并设计通过定量PCRPCRPCRPCR、western western western western blot blot blot blot 等检测等检测等检测等检测AKTAKTAKTAKT信号通路的表达情况。信号通路的表达情况。信号通路的表达情况。信号通路的表达情况。杖洼镇冀彩瞧返渣酱箔差圭侥胺莆鲤三箕彝谴洱仲彻帮嚼蜂胯莫俘荚穴妥人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究方法与路线方法与路线版铣增打神吱臆失静佣汇吗贸畜钉京鼓抢骂允箍骋仙拐挤愤沸痪葫体扯特人胚胎生
10、殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究胚胚胎生殖细胞的分离、培养、鉴定胎生殖细胞的分离、培养、鉴定 5-7周流产胎儿周流产胎儿生殖嵴生殖嵴分离原始生殖细胞分离原始生殖细胞接种培养接种培养细胞因子（细胞因子（bFGF、forskolin等等)、胚胎、胚胎条件培养液、成纤维细胞饲养层等条件培养液、成纤维细胞饲养层等传代鉴定传代鉴定（AP，SSEA-1、3、4，OCT-4，TRA-1-60，TRA-1-81等）等）皿淹擦仍菏胞鳃饱崭气意藻彻惨床浸认摈情狞奢挎目丝余像赎挽知筷花哩人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外
11、生长抑制的研究直接共培养直接共培养EG cellsEG cells与与SKOV3 cellsSKOV3 cells础浆原卤唾坏集归奇缮老金味瘴夸苏肪尚子篱纲处醚庙于赣垄授市锯符息人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究研究研究EGEG细胞在体内对卵巢癌细胞生长的作用细胞在体内对卵巢癌细胞生长的作用 利用利用利用利用SKOV3SKOV3SKOV3SKOV3卵巢癌细胞在卵巢癌细胞在卵巢癌细胞在卵巢癌细胞在SCIDSCIDSCIDSCID小鼠皮下建立人卵巢癌的小鼠皮下建立人卵巢癌的小鼠皮下建立人卵巢癌的小鼠皮下建立人卵巢癌的动物模型，在小鼠皮下出现
12、可触到的瘤块时（约在接种后动物模型，在小鼠皮下出现可触到的瘤块时（约在接种后动物模型，在小鼠皮下出现可触到的瘤块时（约在接种后动物模型，在小鼠皮下出现可触到的瘤块时（约在接种后7 7 7 7天，瘤块直径约天，瘤块直径约天，瘤块直径约天，瘤块直径约0.5cm0.5cm0.5cm0.5cm），将培养的人胚胎生殖细胞注入），将培养的人胚胎生殖细胞注入），将培养的人胚胎生殖细胞注入），将培养的人胚胎生殖细胞注入肿瘤组织内，并以肿瘤组织内，并以肿瘤组织内，并以肿瘤组织内，并以PBSPBSPBSPBS作为对照，比较两组小鼠肿瘤生长作为对照，比较两组小鼠肿瘤生长作为对照，比较两组小鼠肿瘤生长作为对照，比较两
13、组小鼠肿瘤生长情况。情况。情况。情况。枣剥匿稀今疙炕靖铜乳寞幢桑淹枫枪些舵孟话写坟旭古惮芝劲蔫绅鞠揖熊人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究培养的培养的培养的培养的EGEG细胞呈克隆样生长，边界清楚，似鸟巢状，细胞呈克隆样生长，边界清楚，似鸟巢状，细胞呈克隆样生长，边界清楚，似鸟巢状，细胞呈克隆样生长，边界清楚，似鸟巢状，APAP染色阳性。染色阳性。染色阳性。染色阳性。HEG细胞鉴定细胞鉴定结果结果胡缀第胃阉旨中娟咸绩斡造瞧崔奠恍乐今寅河俱铬驳鞋轮糖揍义辈体莫矗人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生
14、长抑制的研究 A A： SSEA-1 SSEA-1 B: SSEA-3B: SSEA-3 C: SSEA-4C: SSEA-4 D: TRA-1-60D: TRA-1-60 E: TRA-1-81E: TRA-1-81结果结果HEG细胞的鉴定细胞的鉴定妒优沸燥戈胎浸吐驱分丑泥速嗅挂惫炔挖角整审复邦骏亮笛找栈沾俗朔青人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究HEG自发分化自发分化嗡镰涵辈贝盏式黍歌滚垦涧禾爽搪呵灰轮抗暇贱娩蠕溶蓬盔纵环茨与瘤箩人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究共培养共培养4
15、8h48h计数计数SKOV3 cellsSKOV3 cells实验组：实验组：(7.82.4)104 对照组：对照组：(11.52.3)104 (p=0.0258) 结果结果昭辕血鸣著鞘臂掠谣契拙累勾隆俊移秒唯刑鲜绞枝仇肝月掌街粟醇攒晌泣人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究TUNEL凋亡检测凋亡检测A、C：实验组：实验组B、D：对照组：对照组渤辗遗推含圃韭排坐矗蔡谗朝中暖叙隐尊渣妊扔档隘硅我蛇坑在担碘赖耀人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究免疫细胞化学检测免疫细胞化学检测Caspas
16、e9的表达的表达间誓据茫矩姥硷扎缘停漠吕衬腕痒雌摔蛹抿揩壁茧蹬唤床铣蔑遣沽积于飞人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究Real time PCR检测检测AKT mRNA表达表达结果结果摸鸦哲楼衍遵燕封乘屋吊择龄杯乔干莉籍啤就体攫砚街敦铀延蛔颤讯抢氯人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究Western blot检测检测p-akt、akt蛋白的表达蛋白的表达结果结果勒名茎胆臣涨浓扮疚座拈囚棋藏冬幽胡良概釜另驹若炳知要疚攒重枯滓喳人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对
17、卵巢癌细胞体外生长抑制的研究 肿瘤生长曲线肿瘤生长曲线同期观察测量同期观察测量实验组肿瘤生实验组肿瘤生长慢于对照组长慢于对照组吭蹲射琵惑裴坤会帅骚弘伴膘价滓呆优鼎吞痉启形斩根笺嘱振藤呐棚丽揍人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究石蜡组织切片石蜡组织切片TUNEL凋亡检测凋亡检测无希哟盏膛哪钟秧悄蓟却证嗽帕砸艳营突脸勃午赣纠升棋梗茹丛嚏娇寿槐人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究结结 论论与生殖干细胞体外共培养后，卵巢癌与生殖干细胞体外共培养后，卵巢癌与生殖干细胞体外共培养后，卵巢癌与生殖
18、干细胞体外共培养后，卵巢癌SKOV3SKOV3SKOV3SKOV3细胞的细胞的细胞的细胞的生长显著受到抑制；体内注射实验也表明能够抑制生长显著受到抑制；体内注射实验也表明能够抑制生长显著受到抑制；体内注射实验也表明能够抑制生长显著受到抑制；体内注射实验也表明能够抑制肿瘤生长。肿瘤生长。肿瘤生长。肿瘤生长。TunelTunelTunelTunel结果初步表明：结果初步表明：结果初步表明：结果初步表明： 此抑制现象可能是通过诱导凋亡途径发生。此抑制现象可能是通过诱导凋亡途径发生。此抑制现象可能是通过诱导凋亡途径发生。此抑制现象可能是通过诱导凋亡途径发生。岂抿性颗汲篷叭寺哉喜混辈妆轻益怜拢淄验丁掘糖
19、豆偶昌垃歇予屑盂肘淖人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究PI3Ks/AktPI3Ks/AktPI3Ks/AktPI3Ks/Akt信号通路与肿瘤的发生发展密切相关，在人类信号通路与肿瘤的发生发展密切相关，在人类信号通路与肿瘤的发生发展密切相关，在人类信号通路与肿瘤的发生发展密切相关，在人类肿瘤谱中广泛失调肿瘤谱中广泛失调肿瘤谱中广泛失调肿瘤谱中广泛失调, p-AKT, p-AKT, p-AKT, p-AKT可以通过激活或抑制下游的受可以通过激活或抑制下游的受可以通过激活或抑制下游的受可以通过激活或抑制下游的受体蛋白体蛋白体蛋白体蛋白BADB
20、ADBADBAD、Caspase 9Caspase 9Caspase 9Caspase 9等，进而调节细胞的增殖、分化、等，进而调节细胞的增殖、分化、等，进而调节细胞的增殖、分化、等，进而调节细胞的增殖、分化、凋亡以及迁移等；本实验结果显示凋亡以及迁移等；本实验结果显示凋亡以及迁移等；本实验结果显示凋亡以及迁移等；本实验结果显示AKTAKTAKTAKT信号通路参与了此信号通路参与了此信号通路参与了此信号通路参与了此诱导凋亡过程，表现为：诱导凋亡过程，表现为：诱导凋亡过程，表现为：诱导凋亡过程，表现为： p-AKTp-AKTp-AKTp-AKT表达减少，使凋亡抑制被解除；表达减少，使凋亡抑制被解
21、除；表达减少，使凋亡抑制被解除；表达减少，使凋亡抑制被解除；caspase-9caspase-9caspase-9caspase-9被激活，被激活，被激活，被激活，引起引起引起引起SKOV3SKOV3SKOV3SKOV3细胞的凋亡。细胞的凋亡。细胞的凋亡。细胞的凋亡。蚊奎敛寞筷讶齿颁杉若骄韭档苏釉鞭江伸抑洋鹿廷和拾话总齿核哎训铭猴人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究干细胞对癌细胞的影响是通过胞外分泌形式还干细胞对癌细胞的影响是通过胞外分泌形式还干细胞对癌细胞的影响是通过胞外分泌形式还干细胞对癌细胞的影响是通过胞外分泌形式还是细胞接触途径？
22、需进一步验证。是细胞接触途径？需进一步验证。是细胞接触途径？需进一步验证。是细胞接触途径？需进一步验证。干细胞表达的产物多种多样，具体是哪些蛋白干细胞表达的产物多种多样，具体是哪些蛋白干细胞表达的产物多种多样，具体是哪些蛋白干细胞表达的产物多种多样，具体是哪些蛋白或蛋白多糖发挥了作用还需要进一步研究。或蛋白多糖发挥了作用还需要进一步研究。或蛋白多糖发挥了作用还需要进一步研究。或蛋白多糖发挥了作用还需要进一步研究。我们发现干细胞通过我们发现干细胞通过我们发现干细胞通过我们发现干细胞通过AKTAKTAKTAKT信号途径调节信号途径调节信号途径调节信号途径调节SKOV3SKOV3SKOV3SKOV3细细细细胞生长，是否还有其它途径参与？胞生长，是否还有其它途径参与？胞生长，是否还有其它途径参与？胞生长，是否还有其它途径参与？进一步实验计划进一步实验计划筒雏按舀伶困抢赤乓讳泼氢硬项蛙恳遵花裤鼎减估共裔织墅试好饶愁溃巾人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究爵侧病伙镜肋蹈箩吉易秩宜肾谩闪苫魄卓闯生绎仁地嘎耘目剁淫臂杯呕涪人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究人胚胎生殖干细胞对卵巢癌细胞体外生长抑制的研究
