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1、 天然产物活性多糖的结构天然产物活性多糖的结构与与构象构象及及生物活性生物活性的研究的研究组员：李冰，刘晨，史蕊，组员：李冰，刘晨，史蕊，薛冰，朱传胜薛冰，朱传胜1 多糖的结构多糖的结构的概述的概述11结构层次结构层次 多多糖的结构分类沿用了蛋白质和核酸的分析糖的结构分类沿用了蛋白质和核酸的分析方法。单糖是糖类的组成单元方法。单糖是糖类的组成单元,单糖之间脱水形成单糖之间脱水形成糖苷键糖苷键,并以糖苷键线性或分支连接成寡糖和多糖。并以糖苷键线性或分支连接成寡糖和多糖。一般将少于一般将少于20个糖基的糖链称为寡糖个糖基的糖链称为寡糖,多于多于20个糖个糖基的糖链称为多糖。寡糖和多糖的结构也可分为
2、基的糖链称为多糖。寡糖和多糖的结构也可分为一级、二级、三级、四级结构。一级、二级、三级、四级结构。111一级结构一级结构 多糖的一级结构是指糖基的组成、糖基排列多糖的一级结构是指糖基的组成、糖基排列顺序、相邻糖基的连接方式、异头碳构型以及糖顺序、相邻糖基的连接方式、异头碳构型以及糖链有无分支、分支的位置与长短等。糖的一级结链有无分支、分支的位置与长短等。糖的一级结构非常复杂构非常复杂,再加上糖残基上可以连接硫酸基团、再加上糖残基上可以连接硫酸基团、乙酯基团、磷酸基团、甲基化基团乙酯基团、磷酸基团、甲基化基团,这就更加剧了这就更加剧了糖一级结构的复杂性。糖一级结构的复杂性。多多糖糖的的一一级级结
3、结构构同多糖同多糖杂多糖杂多糖直链淀粉的一级结构直链淀粉的一级结构支链淀粉的一级结构支链淀粉的一级结构112二级结构二级结构 多糖的二级结构指多糖骨架链间以氢键结合所多糖的二级结构指多糖骨架链间以氢键结合所形成的各种聚合体形成的各种聚合体, ,只关系到多糖分子中主链的构只关系到多糖分子中主链的构象象, ,不涉及侧链的空间排布。在多糖链中不涉及侧链的空间排布。在多糖链中, ,糖环的几糖环的几何形状几乎是硬性的何形状几乎是硬性的, ,各个单糖残基绕糖苷键旋转各个单糖残基绕糖苷键旋转而相对定位而相对定位, ,可决定多糖的整体构象。通常糖苷键可决定多糖的整体构象。通常糖苷键有两个可旋转的主链二面角有两
4、个可旋转的主链二面角:(H1-C1-O1-C:(H1-C1-O1-C糖配基糖配基),(C1-O1-C),(C1-O1-C糖配基糖配基-H-H糖配基糖配基),),两个单糖若为两个单糖若为1616连接连接, ,则还有第三个可旋转的二面角则还有第三个可旋转的二面角(O6-C6-C5-(O6-C6-C5-O5),O5),解决寡糖构象的关键在于确定解决寡糖构象的关键在于确定、的取的取值。但是值。但是, ,它们的取值受相邻糖环之间的空间阻碍它们的取值受相邻糖环之间的空间阻碍和相邻糖残基间的非共价键相互作用的严格限制。和相邻糖残基间的非共价键相互作用的严格限制。因此因此, ,多糖的二级结构形式主要依赖一级结
5、构的排多糖的二级结构形式主要依赖一级结构的排步。步。直直链链淀淀粉粉的的二二级级结结构构1 11 13 3三级和四级结构三级和四级结构多糖链一级结构的重复顺序多糖链一级结构的重复顺序, ,由于糖单位的羟由于糖单位的羟基、羧基、氨基以及硫酸基之间的非共价相互作基、羧基、氨基以及硫酸基之间的非共价相互作用用, ,导致有序的二级结构空间有规则而粗大的构象导致有序的二级结构空间有规则而粗大的构象, ,即是多糖链的三级结构。多糖的四级结构是指多即是多糖链的三级结构。多糖的四级结构是指多聚链间非共价键结合形成的聚集体。聚链间非共价键结合形成的聚集体。 2 2 多糖结构的研究趋势多糖结构的研究趋势 近近20
6、20年来年来, ,许多糖类物质不断进入临床研究许多糖类物质不断进入临床研究, ,主要集中在抗感染、抗肿瘤、抗风湿、抗消化道主要集中在抗感染、抗肿瘤、抗风湿、抗消化道溃疡和增进免疫功能等方面实验与应用。但由于溃疡和增进免疫功能等方面实验与应用。但由于多糖本身的结构复杂多糖本身的结构复杂, ,很多特殊的生物活性都与其很多特殊的生物活性都与其复杂的空间结构关系密切复杂的空间结构关系密切, ,因此对多糖结构的研究因此对多糖结构的研究是开发新一代糖类药物的关键。是开发新一代糖类药物的关键。目前目前,国内外对多糖结构的研究主要有两个趋势国内外对多糖结构的研究主要有两个趋势: 一是在多糖常规结构分析方法基础
7、上一是在多糖常规结构分析方法基础上,引入免引入免疫生物化学、疫生物化学、PCR等现代分子生物学技术等现代分子生物学技术,进行多进行多糖化学结构与活性的系统研究糖化学结构与活性的系统研究; 二是借助最新的仪器与计算机模拟技术二是借助最新的仪器与计算机模拟技术,研究研究和模拟多糖在溶液中的构象变化和模拟多糖在溶液中的构象变化,以研究糖类物质以研究糖类物质在参与生命活动、产生生物效应时的精细结构。在参与生命活动、产生生物效应时的精细结构。3 3 多糖结构多糖结构的分的分析析方法方法 与其它生物大分子一样，与其它生物大分子一样， 糖链的二级以上高级结构糖链的二级以上高级结构是以一级结构为基础的。是以一
8、级结构为基础的。 不同的是，与蛋白质或核酸大不同的是，与蛋白质或核酸大分子相比，糖链的一级结构分子相比，糖链的一级结构“含义含义”要丰富得多。要丰富得多。 测定糖测定糖链的一级结构，要解决以下几个问题：链的一级结构，要解决以下几个问题：（1）相对分子质量；）相对分子质量；（2）糖链的糖基组成，各种单糖组成的摩尔比；）糖链的糖基组成，各种单糖组成的摩尔比；（3）有无糖醛酸及具体的糖醛酸类型和比例；）有无糖醛酸及具体的糖醛酸类型和比例；（4）各单糖残基的）各单糖残基的D-或或L-构型，吡喃环或呋喃环形式；构型，吡喃环或呋喃环形式；（5）各个单糖残基之间的连接顺序；）各个单糖残基之间的连接顺序；（6
9、）每个糖苷键所取的）每个糖苷键所取的-或或-异头异构形式；异头异构形式；（7）每个糖残基上羟基被取代情况；）每个糖残基上羟基被取代情况；（8）糖链和非糖部分连接情况；）糖链和非糖部分连接情况；（9）主链和支链连接位点；）主链和支链连接位点；（10）糖残基可能连接硫酸酯基、乙酰基、磷酸基、甲基的类型等。）糖残基可能连接硫酸酯基、乙酰基、磷酸基、甲基的类型等。 多糖结构的分析手段很多，不仅有仪器多糖结构的分析手段很多，不仅有仪器分析法，如红外、核磁共振、质谱等，还有分析法，如红外、核磁共振、质谱等，还有化学方法，如部分酸水解、完全酸水解、高化学方法，如部分酸水解、完全酸水解、高碘酸氧化、碘酸氧化、
10、Smith降解、甲基化反应等，以及降解、甲基化反应等，以及生物学方法，如特异性糖苷酶酶切、免疫学生物学方法，如特异性糖苷酶酶切、免疫学方法等（见表方法等（见表1）表表1 1 多糖的结构分析方法多糖的结构分析方法 多糖的相对分子质量可以用量均相对分子质多糖的相对分子质量可以用量均相对分子质多糖的相对分子质量可以用量均相对分子质多糖的相对分子质量可以用量均相对分子质量（量（量（量（MwMw）、数均相对分子质量（）、数均相对分子质量（）、数均相对分子质量（）、数均相对分子质量（MnMn）、重均相）、重均相）、重均相）、重均相对分子质量（对分子质量（对分子质量（对分子质量（MwMw）和粘均相对分子质量
11、（）和粘均相对分子质量（）和粘均相对分子质量（）和粘均相对分子质量（MvMv）表示。表示。表示。表示。 目前测定多糖相对分子质量的方法主要有渗目前测定多糖相对分子质量的方法主要有渗目前测定多糖相对分子质量的方法主要有渗目前测定多糖相对分子质量的方法主要有渗透压法、蒸汽压法、端基法、光散射法、黏度法、透压法、蒸汽压法、端基法、光散射法、黏度法、透压法、蒸汽压法、端基法、光散射法、黏度法、透压法、蒸汽压法、端基法、光散射法、黏度法、超过滤法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、凝胶过滤法超过滤法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、凝胶过滤法超过滤法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、凝胶过滤法超过滤法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、凝胶过滤法
12、和和和和HPGPCHPGPC（高效凝胶渗透色谱法）（高效凝胶渗透色谱法）（高效凝胶渗透色谱法）（高效凝胶渗透色谱法）等。等。等。等。HPGPCHPGPC测定多糖相对分子质量具有快速、高分辨率和重测定多糖相对分子质量具有快速、高分辨率和重测定多糖相对分子质量具有快速、高分辨率和重测定多糖相对分子质量具有快速、高分辨率和重现性好等优点，在国内外得到广泛使用。现性好等优点，在国内外得到广泛使用。现性好等优点，在国内外得到广泛使用。现性好等优点，在国内外得到广泛使用。31 相对分子质量的测定相对分子质量的测定32 化学降解分析方法化学降解分析方法321 单糖组成测定单糖组成测定 多糖水解后生成的单糖混
13、合物或单糖甲基糖多糖水解后生成的单糖混合物或单糖甲基糖多糖水解后生成的单糖混合物或单糖甲基糖多糖水解后生成的单糖混合物或单糖甲基糖苷混合物可以用苷混合物可以用苷混合物可以用苷混合物可以用TLCTLC（薄层色谱法）（薄层色谱法）（薄层色谱法）（薄层色谱法）、HPLCHPLC（高（高（高（高效液相色谱法）效液相色谱法）效液相色谱法）效液相色谱法）或或或或GCGC（气相色谱法）（气相色谱法）（气相色谱法）（气相色谱法）等方法作定等方法作定等方法作定等方法作定性鉴定和定量分析。性鉴定和定量分析。性鉴定和定量分析。性鉴定和定量分析。GCGC分析时，待测样品要转换分析时，待测样品要转换分析时，待测样品要转
14、换分析时，待测样品要转换成易挥发、热稳定性好的衍生物，如糖三甲基硅成易挥发、热稳定性好的衍生物，如糖三甲基硅成易挥发、热稳定性好的衍生物，如糖三甲基硅成易挥发、热稳定性好的衍生物，如糖三甲基硅醚、糖醇乙酸酯、糖三氟乙酸酯等。样品的水解醚、糖醇乙酸酯、糖三氟乙酸酯等。样品的水解醚、糖醇乙酸酯、糖三氟乙酸酯等。样品的水解醚、糖醇乙酸酯、糖三氟乙酸酯等。样品的水解方法有甲醇水解、盐酸水解、硫酸水解和三氟乙方法有甲醇水解、盐酸水解、硫酸水解和三氟乙方法有甲醇水解、盐酸水解、硫酸水解和三氟乙方法有甲醇水解、盐酸水解、硫酸水解和三氟乙酸水解等，其中三氟乙酸水解法最为常用。酸水解等，其中三氟乙酸水解法最为常
15、用。酸水解等，其中三氟乙酸水解法最为常用。酸水解等，其中三氟乙酸水解法最为常用。322部分酸水解部分酸水解 通过部分酸水解的方法将多糖水解成易于分通过部分酸水解的方法将多糖水解成易于分通过部分酸水解的方法将多糖水解成易于分通过部分酸水解的方法将多糖水解成易于分析的小片段。一般来说，吡喃型糖基比呋喃型糖析的小片段。一般来说，吡喃型糖基比呋喃型糖析的小片段。一般来说，吡喃型糖基比呋喃型糖析的小片段。一般来说，吡喃型糖基比呋喃型糖基稳定，己糖比戊糖稳定，基稳定，己糖比戊糖稳定，基稳定，己糖比戊糖稳定，基稳定，己糖比戊糖稳定，1-61-6糖苷键对酸水解相糖苷键对酸水解相糖苷键对酸水解相糖苷键对酸水解相
16、对稳定，主链的糖基比支链的糖基稳定。因此，对稳定，主链的糖基比支链的糖基稳定。因此，对稳定，主链的糖基比支链的糖基稳定。因此，对稳定，主链的糖基比支链的糖基稳定。因此，通过部分酸水解可以判断糖苷键的断裂次序，推通过部分酸水解可以判断糖苷键的断裂次序，推通过部分酸水解可以判断糖苷键的断裂次序，推通过部分酸水解可以判断糖苷键的断裂次序，推断可能的糖苷键类型。多糖可在温和条件下水解断可能的糖苷键类型。多糖可在温和条件下水解断可能的糖苷键类型。多糖可在温和条件下水解断可能的糖苷键类型。多糖可在温和条件下水解或者在剧烈条件（高温、较高浓度酸）下水解。或者在剧烈条件（高温、较高浓度酸）下水解。或者在剧烈条
17、件（高温、较高浓度酸）下水解。或者在剧烈条件（高温、较高浓度酸）下水解。在完全水解前，终止水解，可得到不同的寡糖片在完全水解前，终止水解，可得到不同的寡糖片在完全水解前，终止水解，可得到不同的寡糖片在完全水解前，终止水解，可得到不同的寡糖片段和可能的多糖主链，然后综合采用单糖测定、段和可能的多糖主链，然后综合采用单糖测定、段和可能的多糖主链，然后综合采用单糖测定、段和可能的多糖主链，然后综合采用单糖测定、甲基化分析和核磁共振等方法可深入解析多糖结甲基化分析和核磁共振等方法可深入解析多糖结甲基化分析和核磁共振等方法可深入解析多糖结甲基化分析和核磁共振等方法可深入解析多糖结构。构。构。构。323高
18、碘酸氧化高碘酸氧化 高碘酸及其盐可以选择性地断裂糖分子中的连二羟基或高碘酸及其盐可以选择性地断裂糖分子中的连二羟基或高碘酸及其盐可以选择性地断裂糖分子中的连二羟基或高碘酸及其盐可以选择性地断裂糖分子中的连二羟基或连三羟基，生成相应的多糖醛、甲醛或甲酸。糖的非还原末连三羟基，生成相应的多糖醛、甲醛或甲酸。糖的非还原末连三羟基，生成相应的多糖醛、甲醛或甲酸。糖的非还原末连三羟基，生成相应的多糖醛、甲醛或甲酸。糖的非还原末端或非末端的（端或非末端的（端或非末端的（端或非末端的（1616）- -键与邻三元醇相似，其与过碘酸盐作键与邻三元醇相似，其与过碘酸盐作键与邻三元醇相似，其与过碘酸盐作键与邻三元醇
19、相似，其与过碘酸盐作用，糖环开裂得一分子比例的甲酸而消耗二分子比例的过碘用，糖环开裂得一分子比例的甲酸而消耗二分子比例的过碘用，糖环开裂得一分子比例的甲酸而消耗二分子比例的过碘用，糖环开裂得一分子比例的甲酸而消耗二分子比例的过碘酸盐。非末端的（酸盐。非末端的（酸盐。非末端的（酸盐。非末端的（1212）- -或（或（或（或（1414）- -键与邻二元醇相似，键与邻二元醇相似，键与邻二元醇相似，键与邻二元醇相似，其开裂后产生二分子醛而消耗一分子比例之过碘酸盐。对于其开裂后产生二分子醛而消耗一分子比例之过碘酸盐。对于其开裂后产生二分子醛而消耗一分子比例之过碘酸盐。对于其开裂后产生二分子醛而消耗一分子
20、比例之过碘酸盐。对于非末端的（非末端的（非末端的（非末端的（1313）- -键或键或键或键或C-2C-2和和和和C-4C-4有分枝的，则不受过碘酸盐有分枝的，则不受过碘酸盐有分枝的，则不受过碘酸盐有分枝的，则不受过碘酸盐影响。因此多糖氧化后定量测定过碘酸盐的消耗、甲酸的生影响。因此多糖氧化后定量测定过碘酸盐的消耗、甲酸的生影响。因此多糖氧化后定量测定过碘酸盐的消耗、甲酸的生影响。因此多糖氧化后定量测定过碘酸盐的消耗、甲酸的生成和剩余糖的比例，就可确定多糖中各种单糖的键型及其比成和剩余糖的比例，就可确定多糖中各种单糖的键型及其比成和剩余糖的比例，就可确定多糖中各种单糖的键型及其比成和剩余糖的比例
21、，就可确定多糖中各种单糖的键型及其比例。多糖的过碘酸盐氧化一般在例。多糖的过碘酸盐氧化一般在例。多糖的过碘酸盐氧化一般在例。多糖的过碘酸盐氧化一般在pH 35pH 35的水溶液中进行（暗的水溶液中进行（暗的水溶液中进行（暗的水溶液中进行（暗处）。过低处）。过低处）。过低处）。过低pHpH导致酸水解，过高导致酸水解，过高导致酸水解，过高导致酸水解，过高pHpH引起无选择性氧化。确定引起无选择性氧化。确定引起无选择性氧化。确定引起无选择性氧化。确定糖苷键的位置时，需要与糖苷键的位置时，需要与糖苷键的位置时，需要与糖苷键的位置时，需要与SmithSmith降解相结合。降解相结合。降解相结合。降解相结
22、合。324 Smith降解降解 SmithSmith降解是将高碘酸氧化的产物还原后进降解是将高碘酸氧化的产物还原后进降解是将高碘酸氧化的产物还原后进降解是将高碘酸氧化的产物还原后进行酸水解。由于糖基之间不同的位置缩合，因此行酸水解。由于糖基之间不同的位置缩合，因此行酸水解。由于糖基之间不同的位置缩合，因此行酸水解。由于糖基之间不同的位置缩合，因此用高碘酸氧化后生成不同的产物。将氧化产物用用高碘酸氧化后生成不同的产物。将氧化产物用用高碘酸氧化后生成不同的产物。将氧化产物用用高碘酸氧化后生成不同的产物。将氧化产物用硼氢化钠还原成稳定的多羟基化合物，水解后用硼氢化钠还原成稳定的多羟基化合物，水解后用
23、硼氢化钠还原成稳定的多羟基化合物，水解后用硼氢化钠还原成稳定的多羟基化合物，水解后用纸层析或者纸层析或者纸层析或者纸层析或者GLCGLC（气液分配色谱法）（气液分配色谱法）（气液分配色谱法）（气液分配色谱法）鉴定水解产鉴定水解产鉴定水解产鉴定水解产物，由降解的产物推断糖苷键的位置。由于实验物，由降解的产物推断糖苷键的位置。由于实验物，由降解的产物推断糖苷键的位置。由于实验物，由降解的产物推断糖苷键的位置。由于实验中加入乙二醇终止反应，所以检测终产物中乙二中加入乙二醇终止反应，所以检测终产物中乙二中加入乙二醇终止反应，所以检测终产物中乙二中加入乙二醇终止反应，所以检测终产物中乙二醇没有意义，一般
24、以甘油、赤藓醇和其它糖等作醇没有意义，一般以甘油、赤藓醇和其它糖等作醇没有意义，一般以甘油、赤藓醇和其它糖等作醇没有意义，一般以甘油、赤藓醇和其它糖等作为糖苷键的特征终产物为糖苷键的特征终产物为糖苷键的特征终产物为糖苷键的特征终产物。325 甲基化分析甲基化分析 甲基化分析是确定寡糖和多糖中单糖间糖苷甲基化分析是确定寡糖和多糖中单糖间糖苷甲基化分析是确定寡糖和多糖中单糖间糖苷甲基化分析是确定寡糖和多糖中单糖间糖苷键位置的重要手段。其原理是：先将多糖中各种键位置的重要手段。其原理是：先将多糖中各种键位置的重要手段。其原理是：先将多糖中各种键位置的重要手段。其原理是：先将多糖中各种单糖残基中的游离
25、羟基全部甲基化，将甲基化多单糖残基中的游离羟基全部甲基化，将甲基化多单糖残基中的游离羟基全部甲基化，将甲基化多单糖残基中的游离羟基全部甲基化，将甲基化多糖水解得到甲基化的单糖进行衍生处理，最后用糖水解得到甲基化的单糖进行衍生处理，最后用糖水解得到甲基化的单糖进行衍生处理，最后用糖水解得到甲基化的单糖进行衍生处理，最后用GC-MSGC-MSGC-MSGC-MS（气相色谱（气相色谱（气相色谱（气相色谱- - - -质谱联用法）质谱联用法）质谱联用法）质谱联用法）方法结合标准谱方法结合标准谱方法结合标准谱方法结合标准谱图分析，可得到部分甲基化单糖衍生物的归属，图分析，可得到部分甲基化单糖衍生物的归属
26、，图分析，可得到部分甲基化单糖衍生物的归属，图分析，可得到部分甲基化单糖衍生物的归属，从而确定单糖残基的连接位点。同时根据不同甲从而确定单糖残基的连接位点。同时根据不同甲从而确定单糖残基的连接位点。同时根据不同甲从而确定单糖残基的连接位点。同时根据不同甲基化单糖的比例推出这种连接键型在多糖重复结基化单糖的比例推出这种连接键型在多糖重复结基化单糖的比例推出这种连接键型在多糖重复结基化单糖的比例推出这种连接键型在多糖重复结构中的比例。然而甲基化分析无法确定异头碳糖构中的比例。然而甲基化分析无法确定异头碳糖构中的比例。然而甲基化分析无法确定异头碳糖构中的比例。然而甲基化分析无法确定异头碳糖苷键构型和
27、单糖残基的顺序信息苷键构型和单糖残基的顺序信息苷键构型和单糖残基的顺序信息苷键构型和单糖残基的顺序信息。 多糖甲基化通过一系列的改进，目前有多种多糖甲基化通过一系列的改进，目前有多种多糖甲基化通过一系列的改进，目前有多种多糖甲基化通过一系列的改进，目前有多种方法，如方法，如方法，如方法，如PurdiePurdie法、法、法、法、HaworthHaworth法、法、法、法、MenziesMenzies法、法、法、法、HakomoriHakomori法、法、法、法、CicanuCicanu法、法、法、法、NeedsNeeds法等，其中法等，其中法等，其中法等，其中NeedsNeeds改良的甲基化方
28、法较为常用。针对易溶于改良的甲基化方法较为常用。针对易溶于改良的甲基化方法较为常用。针对易溶于改良的甲基化方法较为常用。针对易溶于水、难溶于水、难溶于水、难溶于水、难溶于DMSODMSO（二甲基亚砜）（二甲基亚砜）（二甲基亚砜）（二甲基亚砜）的多糖，可以的多糖，可以的多糖，可以的多糖，可以先用少量水使多糖溶解，再与先用少量水使多糖溶解，再与先用少量水使多糖溶解，再与先用少量水使多糖溶解，再与DMSODMSO混合，然后混合，然后混合，然后混合，然后加入分子筛脱水，采用加入分子筛脱水，采用加入分子筛脱水，采用加入分子筛脱水，采用NeedsNeeds法进行多糖甲基化，法进行多糖甲基化，法进行多糖甲基
29、化，法进行多糖甲基化，可得到甲基化程度比较完全的产物。可得到甲基化程度比较完全的产物。可得到甲基化程度比较完全的产物。可得到甲基化程度比较完全的产物。在甲基化分析过程中，需要注意以下几点：在甲基化分析过程中，需要注意以下几点：在甲基化分析过程中，需要注意以下几点：在甲基化分析过程中，需要注意以下几点：（1 1）多糖甲基化后用红外检测其是否含有羟基，）多糖甲基化后用红外检测其是否含有羟基，）多糖甲基化后用红外检测其是否含有羟基，）多糖甲基化后用红外检测其是否含有羟基，如果仍有羟基峰存在，则表示甲基化不完全，需如果仍有羟基峰存在，则表示甲基化不完全，需如果仍有羟基峰存在，则表示甲基化不完全，需如果
30、仍有羟基峰存在，则表示甲基化不完全，需重复进行甲基化或者采用氯仿等溶剂将已甲基化重复进行甲基化或者采用氯仿等溶剂将已甲基化重复进行甲基化或者采用氯仿等溶剂将已甲基化重复进行甲基化或者采用氯仿等溶剂将已甲基化的多糖萃取出来并作后续处理分析；的多糖萃取出来并作后续处理分析；的多糖萃取出来并作后续处理分析；的多糖萃取出来并作后续处理分析；（2 2）含有糖醛酸或氨基己糖残基的多糖比较难甲）含有糖醛酸或氨基己糖残基的多糖比较难甲）含有糖醛酸或氨基己糖残基的多糖比较难甲）含有糖醛酸或氨基己糖残基的多糖比较难甲基化，可能会产生二级产物。对于含有糖醛酸、基化，可能会产生二级产物。对于含有糖醛酸、基化，可能会产
31、生二级产物。对于含有糖醛酸、基化，可能会产生二级产物。对于含有糖醛酸、氨基己糖以及某些取代基团的多糖，在甲基化分氨基己糖以及某些取代基团的多糖，在甲基化分氨基己糖以及某些取代基团的多糖，在甲基化分氨基己糖以及某些取代基团的多糖，在甲基化分析时需要考虑甲基化和酸水解是否会引发副反应析时需要考虑甲基化和酸水解是否会引发副反应析时需要考虑甲基化和酸水解是否会引发副反应析时需要考虑甲基化和酸水解是否会引发副反应。33仪器分析法仪器分析法331紫外光谱法紫外光谱法 紫外光谱法是多糖结构研究中常用的仪器分析紫外光谱法是多糖结构研究中常用的仪器分析紫外光谱法是多糖结构研究中常用的仪器分析紫外光谱法是多糖结构
32、研究中常用的仪器分析方法之一，如采用苯酚方法之一，如采用苯酚方法之一，如采用苯酚方法之一，如采用苯酚- -硫酸法、蒽酮硫酸法、蒽酮硫酸法、蒽酮硫酸法、蒽酮- -硫酸法等测硫酸法等测硫酸法等测硫酸法等测定多糖含量，咔唑定多糖含量，咔唑定多糖含量，咔唑定多糖含量，咔唑- -硫酸法测定糖醛酸含量，柱层硫酸法测定糖醛酸含量，柱层硫酸法测定糖醛酸含量，柱层硫酸法测定糖醛酸含量，柱层析过程中利用苯酚析过程中利用苯酚析过程中利用苯酚析过程中利用苯酚- -硫酸法绘制多糖洗脱曲线，考硫酸法绘制多糖洗脱曲线，考硫酸法绘制多糖洗脱曲线，考硫酸法绘制多糖洗脱曲线，考马斯亮蓝法或马斯亮蓝法或马斯亮蓝法或马斯亮蓝法或Fo
33、linFolin- -酚试剂法测定多糖复合物中酚试剂法测定多糖复合物中酚试剂法测定多糖复合物中酚试剂法测定多糖复合物中的蛋白含量等。在波长的蛋白含量等。在波长的蛋白含量等。在波长的蛋白含量等。在波长280280、260 nm260 nm处考察多糖处考察多糖处考察多糖处考察多糖中是否含有蛋白、核酸等。利用红外光谱中多糖中是否含有蛋白、核酸等。利用红外光谱中多糖中是否含有蛋白、核酸等。利用红外光谱中多糖中是否含有蛋白、核酸等。利用红外光谱中多糖的特征吸收峰，可鉴定多糖中糖的种类、糖环构的特征吸收峰，可鉴定多糖中糖的种类、糖环构的特征吸收峰，可鉴定多糖中糖的种类、糖环构的特征吸收峰，可鉴定多糖中糖的
34、种类、糖环构型，提供异头碳的信息。型，提供异头碳的信息。型，提供异头碳的信息。型，提供异头碳的信息。332 气相色谱法（气相色谱法（GC） 气相色谱法主要用于单糖组成、糖醛酸种类气相色谱法主要用于单糖组成、糖醛酸种类气相色谱法主要用于单糖组成、糖醛酸种类气相色谱法主要用于单糖组成、糖醛酸种类和组成、和组成、和组成、和组成、SmithSmith降解产物等分析。降解产物等分析。降解产物等分析。降解产物等分析。GCGC具有样品用具有样品用具有样品用具有样品用量少、分辨率强、灵敏度高、分析速度快等优点，量少、分辨率强、灵敏度高、分析速度快等优点，量少、分辨率强、灵敏度高、分析速度快等优点，量少、分辨率
35、强、灵敏度高、分析速度快等优点，然而该法需要对多糖样品进行处理，衍生成易挥然而该法需要对多糖样品进行处理，衍生成易挥然而该法需要对多糖样品进行处理，衍生成易挥然而该法需要对多糖样品进行处理，衍生成易挥发、对热稳定的衍生物后再进行分析。液相色谱发、对热稳定的衍生物后再进行分析。液相色谱发、对热稳定的衍生物后再进行分析。液相色谱发、对热稳定的衍生物后再进行分析。液相色谱法（法（法（法（HPLCHPLC）也可用于糖的分析，如多糖纯化及）也可用于糖的分析，如多糖纯化及）也可用于糖的分析，如多糖纯化及）也可用于糖的分析，如多糖纯化及其相对分子质量测定，单糖组成、糖醛酸种类分其相对分子质量测定，单糖组成、
36、糖醛酸种类分其相对分子质量测定，单糖组成、糖醛酸种类分其相对分子质量测定，单糖组成、糖醛酸种类分析以及糖含量测定，通常选用示差检测器。析以及糖含量测定，通常选用示差检测器。析以及糖含量测定，通常选用示差检测器。析以及糖含量测定，通常选用示差检测器。333 质谱法质谱法 在糖类的研究中质谱法显示出不可替代的作在糖类的研究中质谱法显示出不可替代的作在糖类的研究中质谱法显示出不可替代的作在糖类的研究中质谱法显示出不可替代的作用。用。用。用。GC-MSGC-MS已广泛应用于糖组成分析和甲基化分已广泛应用于糖组成分析和甲基化分已广泛应用于糖组成分析和甲基化分已广泛应用于糖组成分析和甲基化分析，以确定糖残
37、基连接方式。上世纪析，以确定糖残基连接方式。上世纪析，以确定糖残基连接方式。上世纪析，以确定糖残基连接方式。上世纪8080年代各软年代各软年代各软年代各软电离技术的诞生，如快原子轰击质谱（电离技术的诞生，如快原子轰击质谱（电离技术的诞生，如快原子轰击质谱（电离技术的诞生，如快原子轰击质谱（FAB-FAB-MSMS）、电喷雾质谱（）、电喷雾质谱（）、电喷雾质谱（）、电喷雾质谱（ESI-MSESI-MS）、基质辅助激光）、基质辅助激光）、基质辅助激光）、基质辅助激光解析离子化质谱（解析离子化质谱（解析离子化质谱（解析离子化质谱（MALDI-MSMALDI-MS）等，使糖结构分）等，使糖结构分）等，
38、使糖结构分）等，使糖结构分析研究取得了日新月异的发展。析研究取得了日新月异的发展。析研究取得了日新月异的发展。析研究取得了日新月异的发展。334 核磁共振（核磁共振（NMR）技术）技术 NMRNMR是研究多糖糖链结构的一种有效方法，是研究多糖糖链结构的一种有效方法，是研究多糖糖链结构的一种有效方法，是研究多糖糖链结构的一种有效方法，常用来解决多糖结构中糖普键的构型和重复结构常用来解决多糖结构中糖普键的构型和重复结构常用来解决多糖结构中糖普键的构型和重复结构常用来解决多糖结构中糖普键的构型和重复结构中单糖的数目。其中中单糖的数目。其中中单糖的数目。其中中单糖的数目。其中 H-NMRH-NMR主要
39、解决多糖结构中主要解决多糖结构中主要解决多糖结构中主要解决多糖结构中糖普键的构型问题糖普键的构型问题糖普键的构型问题糖普键的构型问题;3c-NMR;3c-NMR的化学位移较的化学位移较的化学位移较的化学位移较 H-H-NMRNMR宽，分辨率较高，因此不仅能够确定各种碳宽，分辨率较高，因此不仅能够确定各种碳宽，分辨率较高，因此不仅能够确定各种碳宽，分辨率较高，因此不仅能够确定各种碳的位置，还能够区别分子的构型和构象。这种方的位置，还能够区别分子的构型和构象。这种方的位置，还能够区别分子的构型和构象。这种方的位置，还能够区别分子的构型和构象。这种方法的显著优点是不破坏样品。法的显著优点是不破坏样品
40、。法的显著优点是不破坏样品。法的显著优点是不破坏样品。34生物分析方法生物分析方法341 酶学法酶学法 酶学法主要是利用特异性糖酶学法主要是利用特异性糖酶学法主要是利用特异性糖酶学法主要是利用特异性糖苷苷苷苷酶对多糖分子酶对多糖分子酶对多糖分子酶对多糖分子进行酶切进行酶切进行酶切进行酶切，可用于确定多糖的糖苷键类型，也可可用于确定多糖的糖苷键类型，也可可用于确定多糖的糖苷键类型，也可可用于确定多糖的糖苷键类型，也可用于分析糖苷连接方式。到现在为止，已分离得用于分析糖苷连接方式。到现在为止，已分离得用于分析糖苷连接方式。到现在为止，已分离得用于分析糖苷连接方式。到现在为止，已分离得到的糖苷酶有数
41、十种。目前，最新酶学方法是试到的糖苷酶有数十种。目前，最新酶学方法是试到的糖苷酶有数十种。目前，最新酶学方法是试到的糖苷酶有数十种。目前，最新酶学方法是试剂陈列分析方法剂陈列分析方法剂陈列分析方法剂陈列分析方法(R(R拟姗拟姗拟姗拟姗) )，根据这一方法原理，把，根据这一方法原理，把，根据这一方法原理，把，根据这一方法原理，把酶学手段和仪器分析方法相结合，已经生产出新酶学手段和仪器分析方法相结合，已经生产出新酶学手段和仪器分析方法相结合，已经生产出新酶学手段和仪器分析方法相结合，已经生产出新型的寡糖序列分析仪，但这还只适用于结构规律型的寡糖序列分析仪，但这还只适用于结构规律型的寡糖序列分析仪，
42、但这还只适用于结构规律型的寡糖序列分析仪，但这还只适用于结构规律较明确的糖链。较明确的糖链。较明确的糖链。较明确的糖链。342 免疫学法免疫学法 该方法的原理是一定结构的多糖会抑制抗原、该方法的原理是一定结构的多糖会抑制抗原、该方法的原理是一定结构的多糖会抑制抗原、该方法的原理是一定结构的多糖会抑制抗原、抗体的结合。不同的糖有不同的抑制常数，因此抗体的结合。不同的糖有不同的抑制常数，因此抗体的结合。不同的糖有不同的抑制常数，因此抗体的结合。不同的糖有不同的抑制常数，因此当某种未知结构的糖链对抗原、抗体的结合产生当某种未知结构的糖链对抗原、抗体的结合产生当某种未知结构的糖链对抗原、抗体的结合产生
43、当某种未知结构的糖链对抗原、抗体的结合产生了抑制作用，通过测定其抑制常数，再与已知结了抑制作用，通过测定其抑制常数，再与已知结了抑制作用，通过测定其抑制常数，再与已知结了抑制作用，通过测定其抑制常数，再与已知结构的糖链作比较，如有相近抑制常数，其结构也构的糖链作比较，如有相近抑制常数，其结构也构的糖链作比较，如有相近抑制常数，其结构也构的糖链作比较，如有相近抑制常数，其结构也会相似。会相似。会相似。会相似。 像上面提到的，多糖的结构分析方法很像上面提到的，多糖的结构分析方法很多，但是还没有一种方法可以单独完成多多，但是还没有一种方法可以单独完成多糖结构的分析，因此需要将各种方法结合糖结构的分析
44、，因此需要将各种方法结合起来才能完成多糖结构的分析。起来才能完成多糖结构的分析。4 4 天然产物活性多糖的生物活性功能天然产物活性多糖的生物活性功能对多糖的功能研究主要集中在对多糖的功能研究主要集中在2 2个方面：个方面：一是作为非特异治疗剂，作用于相类似的对一是作为非特异治疗剂，作用于相类似的对应分子，调节各种生理功能或纠正病理过应分子，调节各种生理功能或纠正病理过程。程。二是作为信息分子进入机体，发挥补充调节二是作为信息分子进入机体，发挥补充调节或抑制的作用。或抑制的作用。41 多糖的免疫调节作用多糖的免疫调节作用 多糖的免疫调节功能是其最重要的功能活性，多糖的免疫调节功能是其最重要的功能
45、活性，多糖的免疫调节功能是其最重要的功能活性，多糖的免疫调节功能是其最重要的功能活性，多糖能在多条途径、多个层面对免疫系统发挥作用。多糖能在多条途径、多个层面对免疫系统发挥作用。多糖能在多条途径、多个层面对免疫系统发挥作用。多糖能在多条途径、多个层面对免疫系统发挥作用。具体表现在：具体表现在：具体表现在：具体表现在： （1 1 1 1）提高巨噬细胞吞噬能力。）提高巨噬细胞吞噬能力。）提高巨噬细胞吞噬能力。）提高巨噬细胞吞噬能力。 植物多糖对巨噬细胞的免疫调节作用主要表现植物多糖对巨噬细胞的免疫调节作用主要表现植物多糖对巨噬细胞的免疫调节作用主要表现植物多糖对巨噬细胞的免疫调节作用主要表现在影响
46、巨噬细胞活性氧的产生、细胞因子的分泌在影响巨噬细胞活性氧的产生、细胞因子的分泌在影响巨噬细胞活性氧的产生、细胞因子的分泌在影响巨噬细胞活性氧的产生、细胞因子的分泌（如白细胞介素（如白细胞介素（如白细胞介素（如白细胞介素ILILILIL、肿瘤坏死因子、肿瘤坏死因子、肿瘤坏死因子、肿瘤坏死因子TNFTNFTNFTNF、干扰素、干扰素、干扰素、干扰素IFNIFNIFNIFN集落刺激因子集落刺激因子集落刺激因子集落刺激因子CSFCSFCSFCSF等）、细胞增殖和吞噬活性等，从等）、细胞增殖和吞噬活性等，从等）、细胞增殖和吞噬活性等，从等）、细胞增殖和吞噬活性等，从而起到对天然免疫和适应性免疫的调控作用
47、。从而起到对天然免疫和适应性免疫的调控作用。从而起到对天然免疫和适应性免疫的调控作用。从而起到对天然免疫和适应性免疫的调控作用。从Aloe Aloe Aloe Aloe barbadensisbarbadensisbarbadensisbarbadensis分离得到的甘露聚糖表现出显著分离得到的甘露聚糖表现出显著分离得到的甘露聚糖表现出显著分离得到的甘露聚糖表现出显著的刺激单核巨噬细胞生成的效应，车前子多糖具有的刺激单核巨噬细胞生成的效应，车前子多糖具有的刺激单核巨噬细胞生成的效应，车前子多糖具有的刺激单核巨噬细胞生成的效应，车前子多糖具有抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性、刺激体外抑制小鼠腹腔巨噬
48、细胞吞噬活性、刺激体外抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性、刺激体外抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性、刺激体外RAW264.7RAW264.7RAW264.7RAW264.7巨噬细胞增殖并提高巨噬细胞增殖并提高巨噬细胞增殖并提高巨噬细胞增殖并提高NONONONO释放的作用。释放的作用。释放的作用。释放的作用。（2 2）对）对）对）对T T、B B淋巴细胞的作用。香菇多糖是一种典型的淋巴细胞的作用。香菇多糖是一种典型的淋巴细胞的作用。香菇多糖是一种典型的淋巴细胞的作用。香菇多糖是一种典型的T T淋巴细胞增强剂，在体内外均能促进特异性细胞毒淋巴细胞增强剂，在体内外均能促进特异性细胞毒淋巴细胞增强剂，在体内外均
49、能促进特异性细胞毒淋巴细胞增强剂，在体内外均能促进特异性细胞毒T T淋巴淋巴淋巴淋巴细胞的产生，提高该细胞的杀伤活性。细胞的产生，提高该细胞的杀伤活性。细胞的产生，提高该细胞的杀伤活性。细胞的产生，提高该细胞的杀伤活性。 （3 3）对）对）对）对NKNK（自然杀伤细胞）（自然杀伤细胞）（自然杀伤细胞）（自然杀伤细胞）、LAKLAK（淋巴因子激活的杀（淋巴因子激活的杀（淋巴因子激活的杀（淋巴因子激活的杀伤细胞）伤细胞）伤细胞）伤细胞）的作用。大量的研究表明猕猴桃茎多糖、牛膝多的作用。大量的研究表明猕猴桃茎多糖、牛膝多的作用。大量的研究表明猕猴桃茎多糖、牛膝多的作用。大量的研究表明猕猴桃茎多糖、牛
50、膝多糖等对糖等对糖等对糖等对NKNK、LAKLAK细胞活性都有增强作用，其增强作用呈细胞活性都有增强作用，其增强作用呈细胞活性都有增强作用，其增强作用呈细胞活性都有增强作用，其增强作用呈剂量依赖性。剂量依赖性。剂量依赖性。剂量依赖性。 （4 4）通过不同途径激活补体系统。有些是通过替代通路）通过不同途径激活补体系统。有些是通过替代通路）通过不同途径激活补体系统。有些是通过替代通路）通过不同途径激活补体系统。有些是通过替代通路激活补体，有些是通过经典途径，这一类多糖有柴胡多糖激活补体，有些是通过经典途径，这一类多糖有柴胡多糖激活补体，有些是通过经典途径，这一类多糖有柴胡多糖激活补体，有些是通过经
51、典途径，这一类多糖有柴胡多糖和三七多糖等。和三七多糖等。和三七多糖等。和三七多糖等。（5 5 5 5）以促进树突状细胞（）以促进树突状细胞（）以促进树突状细胞（）以促进树突状细胞（DCsDCsDCsDCs）增殖、表面表达）增殖、表面表达）增殖、表面表达）增殖、表面表达分子分子分子分子MHCMHCMHCMHC分泌等方式促进分泌等方式促进分泌等方式促进分泌等方式促进DCsDCsDCsDCs诱导的免疫应答启诱导的免疫应答启诱导的免疫应答启诱导的免疫应答启动，比如灵芝多糖可明显刺激小鼠脾脏动，比如灵芝多糖可明显刺激小鼠脾脏动，比如灵芝多糖可明显刺激小鼠脾脏动，比如灵芝多糖可明显刺激小鼠脾脏DCsDCs
52、DCsDCs增殖。增殖。增殖。增殖。大粒车前子多糖通过促进大粒车前子多糖通过促进大粒车前子多糖通过促进大粒车前子多糖通过促进DCsDCsDCsDCs表面表面表面表面MHCMHCMHCMHC类分子、类分子、类分子、类分子、共刺激分子的表达及共刺激分子的表达及共刺激分子的表达及共刺激分子的表达及Th1Th1Th1Th1型细胞因子的分泌，刺激型细胞因子的分泌，刺激型细胞因子的分泌，刺激型细胞因子的分泌，刺激T T T T淋巴细胞的增殖，诱导淋巴细胞的增殖，诱导淋巴细胞的增殖，诱导淋巴细胞的增殖，诱导Th1Th1Th1Th1型免疫应答并增强型免疫应答并增强型免疫应答并增强型免疫应答并增强CTLCTLC
53、TLCTL对肿瘤细胞的特异性杀伤活力；通过促进对肿瘤细胞的特异性杀伤活力；通过促进对肿瘤细胞的特异性杀伤活力；通过促进对肿瘤细胞的特异性杀伤活力；通过促进DCsDCsDCsDCs表面表面表面表面趋化因子受体趋化因子受体趋化因子受体趋化因子受体CCR7 mRNACCR7 mRNACCR7 mRNACCR7 mRNA的表达，促进的表达，促进的表达，促进的表达，促进DCsDCsDCsDCs的移行的移行的移行的移行和发育成熟，即通过对和发育成熟，即通过对和发育成熟，即通过对和发育成熟，即通过对DCsDCsDCsDCs移行、成熟、功能的上移行、成熟、功能的上移行、成熟、功能的上移行、成熟、功能的上调作用
54、而促进免疫应答的启动，增强机体的免疫调作用而促进免疫应答的启动，增强机体的免疫调作用而促进免疫应答的启动，增强机体的免疫调作用而促进免疫应答的启动，增强机体的免疫功能。功能。功能。功能。42 多糖的抗肿瘤活性多糖的抗肿瘤活性根据多糖的抗肿瘤作用将其可以分为两大类：根据多糖的抗肿瘤作用将其可以分为两大类：根据多糖的抗肿瘤作用将其可以分为两大类：根据多糖的抗肿瘤作用将其可以分为两大类： 一类是具有通过激活机体的免疫系统，诱导一类是具有通过激活机体的免疫系统，诱导一类是具有通过激活机体的免疫系统，诱导一类是具有通过激活机体的免疫系统，诱导细胞分化，刺激造血，抗转移，抗新生血管生成，细胞分化，刺激造血
55、，抗转移，抗新生血管生成，细胞分化，刺激造血，抗转移，抗新生血管生成，细胞分化，刺激造血，抗转移，抗新生血管生成，诱导诱导诱导诱导NONO产生等生物活性的多糖，这类多糖与机体产生等生物活性的多糖，这类多糖与机体产生等生物活性的多糖，这类多糖与机体产生等生物活性的多糖，这类多糖与机体的免疫细胞通过分子水平的接触，免疫细胞被激的免疫细胞通过分子水平的接触，免疫细胞被激的免疫细胞通过分子水平的接触，免疫细胞被激的免疫细胞通过分子水平的接触，免疫细胞被激活，释放出某些类型的细胞转导信号，从而激发活，释放出某些类型的细胞转导信号，从而激发活，释放出某些类型的细胞转导信号，从而激发活，释放出某些类型的细胞
56、转导信号，从而激发和增强免疫反应，再通过增强机体的免疫功能间和增强免疫反应，再通过增强机体的免疫功能间和增强免疫反应，再通过增强机体的免疫功能间和增强免疫反应，再通过增强机体的免疫功能间接抑制或杀死肿瘤细胞。具有抗肿瘤活性的多糖接抑制或杀死肿瘤细胞。具有抗肿瘤活性的多糖接抑制或杀死肿瘤细胞。具有抗肿瘤活性的多糖接抑制或杀死肿瘤细胞。具有抗肿瘤活性的多糖大多是通过这种途径发挥作用的。大多是通过这种途径发挥作用的。大多是通过这种途径发挥作用的。大多是通过这种途径发挥作用的。 另一类是具有细胞毒性的多糖，可以直接杀另一类是具有细胞毒性的多糖，可以直接杀另一类是具有细胞毒性的多糖，可以直接杀另一类是具
57、有细胞毒性的多糖，可以直接杀死肿瘤细胞，如牛漆多糖、青钱柳多糖和茶多糖死肿瘤细胞，如牛漆多糖、青钱柳多糖和茶多糖死肿瘤细胞，如牛漆多糖、青钱柳多糖和茶多糖死肿瘤细胞，如牛漆多糖、青钱柳多糖和茶多糖均可以抑制癌细胞体外生长，青钱柳多糖可以显均可以抑制癌细胞体外生长，青钱柳多糖可以显均可以抑制癌细胞体外生长，青钱柳多糖可以显均可以抑制癌细胞体外生长，青钱柳多糖可以显著抑制人宫颈癌著抑制人宫颈癌著抑制人宫颈癌著抑制人宫颈癌HelaHela细胞的生长，诱使细胞发生细胞的生长，诱使细胞发生细胞的生长，诱使细胞发生细胞的生长，诱使细胞发生凋亡，使细胞在凋亡，使细胞在凋亡，使细胞在凋亡，使细胞在S S期发生
58、阻滞。然而后一类多糖在期发生阻滞。然而后一类多糖在期发生阻滞。然而后一类多糖在期发生阻滞。然而后一类多糖在体外直接杀伤肿瘤细胞的机制还不是很清楚。体外直接杀伤肿瘤细胞的机制还不是很清楚。体外直接杀伤肿瘤细胞的机制还不是很清楚。体外直接杀伤肿瘤细胞的机制还不是很清楚。43 抗病毒作用抗病毒作用 2020世纪世纪世纪世纪7070年代以来，已经发现许多多糖具有抗疱疹病毒及流年代以来，已经发现许多多糖具有抗疱疹病毒及流年代以来，已经发现许多多糖具有抗疱疹病毒及流年代以来，已经发现许多多糖具有抗疱疹病毒及流感病毒作用，如对艾滋病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等有感病毒作用，如对艾滋病毒、巨细胞病毒、单纯疱
59、疹病毒等有感病毒作用，如对艾滋病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等有感病毒作用，如对艾滋病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等有明显的抑制作用。多糖通过以下方式达到抗病毒的作用：抑制明显的抑制作用。多糖通过以下方式达到抗病毒的作用：抑制明显的抑制作用。多糖通过以下方式达到抗病毒的作用：抑制明显的抑制作用。多糖通过以下方式达到抗病毒的作用：抑制病毒抗原的表达，抑制病毒逆转录酶的活性以及抑制病毒表面病毒抗原的表达，抑制病毒逆转录酶的活性以及抑制病毒表面病毒抗原的表达，抑制病毒逆转录酶的活性以及抑制病毒表面病毒抗原的表达，抑制病毒逆转录酶的活性以及抑制病毒表面蛋白蛋白蛋白蛋白gpgp 120 120与细胞表面
60、与细胞表面与细胞表面与细胞表面CD4CD4受体结合等。如灵芝中的糖蛋白是受体结合等。如灵芝中的糖蛋白是受体结合等。如灵芝中的糖蛋白是受体结合等。如灵芝中的糖蛋白是通过与病毒分子结合，阻止病毒分子与细胞之间的结合感染。通过与病毒分子结合，阻止病毒分子与细胞之间的结合感染。通过与病毒分子结合，阻止病毒分子与细胞之间的结合感染。通过与病毒分子结合，阻止病毒分子与细胞之间的结合感染。硫酸多糖无论在体外还是在体内，都显示出不同程度的抗病毒硫酸多糖无论在体外还是在体内，都显示出不同程度的抗病毒硫酸多糖无论在体外还是在体内，都显示出不同程度的抗病毒硫酸多糖无论在体外还是在体内，都显示出不同程度的抗病毒活性。
61、硫酸多糖包括从植物中提取到的各种肝素、硫氨多糖、活性。硫酸多糖包括从植物中提取到的各种肝素、硫氨多糖、活性。硫酸多糖包括从植物中提取到的各种肝素、硫氨多糖、活性。硫酸多糖包括从植物中提取到的各种肝素、硫氨多糖、天然中性多糖的硫酸衍生物和人工合成的硫酸多糖，是一类多天然中性多糖的硫酸衍生物和人工合成的硫酸多糖，是一类多天然中性多糖的硫酸衍生物和人工合成的硫酸多糖，是一类多天然中性多糖的硫酸衍生物和人工合成的硫酸多糖，是一类多聚阴离子多糖，带有大量负电荷。目前认为其抗病毒机理可能聚阴离子多糖，带有大量负电荷。目前认为其抗病毒机理可能聚阴离子多糖，带有大量负电荷。目前认为其抗病毒机理可能聚阴离子多糖
62、，带有大量负电荷。目前认为其抗病毒机理可能是硫酸多糖掩蔽了病毒或细胞表面的正电荷区域，从而抑制了是硫酸多糖掩蔽了病毒或细胞表面的正电荷区域，从而抑制了是硫酸多糖掩蔽了病毒或细胞表面的正电荷区域，从而抑制了是硫酸多糖掩蔽了病毒或细胞表面的正电荷区域，从而抑制了病毒的吸附。有研究发现，匀多糖的硫酸酯抗病毒活性大于杂病毒的吸附。有研究发现，匀多糖的硫酸酯抗病毒活性大于杂病毒的吸附。有研究发现，匀多糖的硫酸酯抗病毒活性大于杂病毒的吸附。有研究发现，匀多糖的硫酸酯抗病毒活性大于杂多糖硫酸酯的活性；相对分子质量大小、硫酸化程度、硫酸基多糖硫酸酯的活性；相对分子质量大小、硫酸化程度、硫酸基多糖硫酸酯的活性；
63、相对分子质量大小、硫酸化程度、硫酸基多糖硫酸酯的活性；相对分子质量大小、硫酸化程度、硫酸基的分布等因素均会对硫酸多糖的抗病毒活性有一定影响。的分布等因素均会对硫酸多糖的抗病毒活性有一定影响。的分布等因素均会对硫酸多糖的抗病毒活性有一定影响。的分布等因素均会对硫酸多糖的抗病毒活性有一定影响。44 抗氧化作用抗氧化作用 许多从天然产物中分离得到的多糖类化合物具有清除自许多从天然产物中分离得到的多糖类化合物具有清除自许多从天然产物中分离得到的多糖类化合物具有清除自许多从天然产物中分离得到的多糖类化合物具有清除自由基，抑制脂质过氧化、亚油酸氧化等抗氧化作用，其可能由基，抑制脂质过氧化、亚油酸氧化等抗氧
64、化作用，其可能由基，抑制脂质过氧化、亚油酸氧化等抗氧化作用，其可能由基，抑制脂质过氧化、亚油酸氧化等抗氧化作用，其可能的抗氧化机理有：直接清除活性氧，络合产生活性氧所必需的抗氧化机理有：直接清除活性氧，络合产生活性氧所必需的抗氧化机理有：直接清除活性氧，络合产生活性氧所必需的抗氧化机理有：直接清除活性氧，络合产生活性氧所必需的金属离子，提高抗氧化酶的活性等。提示多糖的抗氧化性的金属离子，提高抗氧化酶的活性等。提示多糖的抗氧化性的金属离子，提高抗氧化酶的活性等。提示多糖的抗氧化性的金属离子，提高抗氧化酶的活性等。提示多糖的抗氧化性可能是抗肿瘤、抗衰老、抗感染等的作用机理之一。车前子可能是抗肿瘤、
65、抗衰老、抗感染等的作用机理之一。车前子可能是抗肿瘤、抗衰老、抗感染等的作用机理之一。车前子可能是抗肿瘤、抗衰老、抗感染等的作用机理之一。车前子多糖具有体外清除多糖具有体外清除多糖具有体外清除多糖具有体外清除DPPHDPPHDPPHDPPH( ( ( (1 1，1-1-二苯基二苯基-2-2-三硝基苯肼三硝基苯肼 ) )自由基、自由基、自由基、自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基等抗氧化能力。从茶叶水提超氧阴离子自由基、羟基自由基等抗氧化能力。从茶叶水提超氧阴离子自由基、羟基自由基等抗氧化能力。从茶叶水提超氧阴离子自由基、羟基自由基等抗氧化能力。从茶叶水提物中分离、纯化得到的物中分离、纯化得到的物
66、中分离、纯化得到的物中分离、纯化得到的3 3个多糖组分，其中相对分子质量为个多糖组分，其中相对分子质量为个多糖组分，其中相对分子质量为个多糖组分，其中相对分子质量为4.21044.2104的的的的TPC-3TPC-3组分的抗氧化能力明显高于相对分子质量组分的抗氧化能力明显高于相对分子质量组分的抗氧化能力明显高于相对分子质量组分的抗氧化能力明显高于相对分子质量为为为为26.810426.8104和和和和11.810411.8104的组分。黑灵芝多糖能抑制缺氧的组分。黑灵芝多糖能抑制缺氧的组分。黑灵芝多糖能抑制缺氧的组分。黑灵芝多糖能抑制缺氧/ /复复复复氧引起的氧引起的氧引起的氧引起的LDHLD
67、H的释放及细胞活力的下降并呈剂量依赖性（可的释放及细胞活力的下降并呈剂量依赖性（可的释放及细胞活力的下降并呈剂量依赖性（可的释放及细胞活力的下降并呈剂量依赖性（可达达达达100g/mL100g/mL），这种保护作用也伴随着减少），这种保护作用也伴随着减少），这种保护作用也伴随着减少），这种保护作用也伴随着减少MDAMDA( (丙二醛丙二醛丙二醛丙二醛) )的含量，增强的含量，增强的含量，增强的含量，增强SODSOD（超氧化物歧化酶）（超氧化物歧化酶）（超氧化物歧化酶）（超氧化物歧化酶）、CATCAT( (过氧化氢酶过氧化氢酶过氧化氢酶过氧化氢酶) )、GSH-GSH-PxPx（谷胱甘肽过氧化物
68、酶（谷胱甘肽过氧化物酶（谷胱甘肽过氧化物酶（谷胱甘肽过氧化物酶 ）活性及蛋白表达，并且能活性及蛋白表达，并且能活性及蛋白表达，并且能活性及蛋白表达，并且能减少缺氧减少缺氧减少缺氧减少缺氧/ /复氧引起的复氧引起的复氧引起的复氧引起的ROSROS( (活性氧族活性氧族活性氧族活性氧族) )的释放及细胞凋亡。此的释放及细胞凋亡。此的释放及细胞凋亡。此的释放及细胞凋亡。此外，黑灵芝多糖通过调节半胱氨酸蛋白酶、外，黑灵芝多糖通过调节半胱氨酸蛋白酶、外，黑灵芝多糖通过调节半胱氨酸蛋白酶、外，黑灵芝多糖通过调节半胱氨酸蛋白酶、Bcl-2Bcl-2（B B B B细胞淋细胞淋细胞淋细胞淋巴瘤基因巴瘤基因巴瘤
69、基因巴瘤基因 ）和氧化还原系统保护心肌细胞，防止缺氧和氧化还原系统保护心肌细胞，防止缺氧和氧化还原系统保护心肌细胞，防止缺氧和氧化还原系统保护心肌细胞，防止缺氧/ /复氧复氧复氧复氧诱导的线粒体介导的细胞凋亡。诱导的线粒体介导的细胞凋亡。诱导的线粒体介导的细胞凋亡。诱导的线粒体介导的细胞凋亡。45 降血糖作用降血糖作用 促进外周组织器官对糖的利用，促进降糖激素促进外周组织器官对糖的利用，促进降糖激素促进外周组织器官对糖的利用，促进降糖激素促进外周组织器官对糖的利用，促进降糖激素和抑制升糖激素作用，保护胰岛细胞以及调节糖代和抑制升糖激素作用，保护胰岛细胞以及调节糖代和抑制升糖激素作用，保护胰岛细
70、胞以及调节糖代和抑制升糖激素作用，保护胰岛细胞以及调节糖代谢酶活性等方面。冬虫夏草多糖能显著提高肝脏中谢酶活性等方面。冬虫夏草多糖能显著提高肝脏中谢酶活性等方面。冬虫夏草多糖能显著提高肝脏中谢酶活性等方面。冬虫夏草多糖能显著提高肝脏中葡糖激酶、己糖激酶和葡糖激酶、己糖激酶和葡糖激酶、己糖激酶和葡糖激酶、己糖激酶和6-6-磷酸葡萄糖脱氢酶的活性，磷酸葡萄糖脱氢酶的活性，磷酸葡萄糖脱氢酶的活性，磷酸葡萄糖脱氢酶的活性，降低血浆甘油三酯及胆固醇的水平。百合多糖可以降低血浆甘油三酯及胆固醇的水平。百合多糖可以降低血浆甘油三酯及胆固醇的水平。百合多糖可以降低血浆甘油三酯及胆固醇的水平。百合多糖可以修复修
71、复修复修复-胰岛细胞，增强分泌胰岛素功能和降低肾上胰岛细胞，增强分泌胰岛素功能和降低肾上胰岛细胞，增强分泌胰岛素功能和降低肾上胰岛细胞，增强分泌胰岛素功能和降低肾上皮质激素分泌，并可促进肝脏中血糖转化为糖原的皮质激素分泌，并可促进肝脏中血糖转化为糖原的皮质激素分泌，并可促进肝脏中血糖转化为糖原的皮质激素分泌，并可促进肝脏中血糖转化为糖原的联合作用，从而使血糖降低。黄芪多糖对血糖及肝联合作用，从而使血糖降低。黄芪多糖对血糖及肝联合作用，从而使血糖降低。黄芪多糖对血糖及肝联合作用，从而使血糖降低。黄芪多糖对血糖及肝糖元有双向调节作用，既可保护低血糖，又可抗实糖元有双向调节作用，既可保护低血糖，又可
72、抗实糖元有双向调节作用，既可保护低血糖，又可抗实糖元有双向调节作用，既可保护低血糖，又可抗实验性高血糖。其它具有降血糖作用的多糖有青钱柳验性高血糖。其它具有降血糖作用的多糖有青钱柳验性高血糖。其它具有降血糖作用的多糖有青钱柳验性高血糖。其它具有降血糖作用的多糖有青钱柳多糖、人参多糖、灵芝多糖、茶多糖等。多糖、人参多糖、灵芝多糖、茶多糖等。多糖、人参多糖、灵芝多糖、茶多糖等。多糖、人参多糖、灵芝多糖、茶多糖等。46 其它功能其它功能 近几十年来，对多糖的相关研究包括膜的化近几十年来，对多糖的相关研究包括膜的化近几十年来，对多糖的相关研究包括膜的化近几十年来，对多糖的相关研究包括膜的化学功能和免疫
73、物质的研究以及寻找新药资源等，学功能和免疫物质的研究以及寻找新药资源等，学功能和免疫物质的研究以及寻找新药资源等，学功能和免疫物质的研究以及寻找新药资源等，人们在研究中发现多糖在生物体内不仅作为能量人们在研究中发现多糖在生物体内不仅作为能量人们在研究中发现多糖在生物体内不仅作为能量人们在研究中发现多糖在生物体内不仅作为能量物质或结构材料，更重要的是其可以携带巨大的物质或结构材料，更重要的是其可以携带巨大的物质或结构材料，更重要的是其可以携带巨大的物质或结构材料，更重要的是其可以携带巨大的信息量，而成为参与生命活动中形形色色的识别信息量，而成为参与生命活动中形形色色的识别信息量，而成为参与生命活
74、动中形形色色的识别信息量，而成为参与生命活动中形形色色的识别作用的基础。其具有多种生物活性功能，广泛参作用的基础。其具有多种生物活性功能，广泛参作用的基础。其具有多种生物活性功能，广泛参作用的基础。其具有多种生物活性功能，广泛参与细胞识别、细胞生成、分化、代谢、胚胎发育、与细胞识别、细胞生成、分化、代谢、胚胎发育、与细胞识别、细胞生成、分化、代谢、胚胎发育、与细胞识别、细胞生成、分化、代谢、胚胎发育、细胞癌变等各种生命活动。除此之外，从天然产细胞癌变等各种生命活动。除此之外，从天然产细胞癌变等各种生命活动。除此之外，从天然产细胞癌变等各种生命活动。除此之外，从天然产物中提取的多糖还具有抗凝血、
75、抗溃疡、抗辐射、物中提取的多糖还具有抗凝血、抗溃疡、抗辐射、物中提取的多糖还具有抗凝血、抗溃疡、抗辐射、物中提取的多糖还具有抗凝血、抗溃疡、抗辐射、抗突变等生物活性，是现代医学、营养学和食品抗突变等生物活性，是现代医学、营养学和食品抗突变等生物活性，是现代医学、营养学和食品抗突变等生物活性，是现代医学、营养学和食品化学领域共同关注的热点。化学领域共同关注的热点。化学领域共同关注的热点。化学领域共同关注的热点。 对多糖活性的研究更多地停留在体外实验阶对多糖活性的研究更多地停留在体外实验阶对多糖活性的研究更多地停留在体外实验阶对多糖活性的研究更多地停留在体外实验阶段。目前开发出的活性多糖只有几种，
76、如香菇多段。目前开发出的活性多糖只有几种，如香菇多段。目前开发出的活性多糖只有几种，如香菇多段。目前开发出的活性多糖只有几种，如香菇多糖、灵芝多糖和云芝多糖等，并且它们是通过静糖、灵芝多糖和云芝多糖等，并且它们是通过静糖、灵芝多糖和云芝多糖等，并且它们是通过静糖、灵芝多糖和云芝多糖等，并且它们是通过静脉注射的方式进入人体发挥功效的。多糖在体内脉注射的方式进入人体发挥功效的。多糖在体内脉注射的方式进入人体发挥功效的。多糖在体内脉注射的方式进入人体发挥功效的。多糖在体内的作用机制，包括在细胞膜或脂质体表面的构象的作用机制，包括在细胞膜或脂质体表面的构象的作用机制，包括在细胞膜或脂质体表面的构象的作用机制，包括在细胞膜或脂质体表面的构象作用，多糖、磷脂及蛋白质缔合的化学和物理进作用，多糖、磷脂及蛋白质缔合的化学和物理进作用，多糖、磷脂及蛋白质缔合的化学和物理进作用，多糖、磷脂及蛋白质缔合的化学和物理进程以及这类分子聚集体所形成的微环境与它们的程以及这类分子聚集体所形成的微环境与它们的程以及这类分子聚集体所形成的微环境与它们的程以及这类分子聚集体所形成的微环境与它们的生物功能之间的关系等还有待深入地研究。生物功能之间的关系等还有待深入地研究。生物功能之间的关系等还有待深入地研究。生物功能之间的关系等还有待深入地研究。
