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1、化学化工学院 杨 睿2014 Spring SemesterChapter 20 High Performance Liquid Chromatography (HPLC)化学化工学院 杨 睿化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester第一部分第一部分 概述概述第二部分第二部分 高效液相色谱仪高效液相色谱仪第第三三部部分分 HPLCHPLC的的主主要要类类型型及及色色谱谱分分离离方法的选择方法的选择化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester高高 效效 液液 相相 色色 谱谱 法法 (High Performance Liquid Chromatography,
2、 HPLC)：用用高高压压力力输输送送流流动动相相，采用采用高效固定相高效固定相及及在线检测在线检测等手段的液相色谱法。等手段的液相色谱法。201 概述柱前压：柱前压： 50500 105 Pa； 填充粒径：填充粒径：510 m； 13 m n： 56 104 ； 13 105 化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester一、一、HPLC的特点：的特点：1. 与经典液相色谱法比较与经典液相色谱法比较 固定相、输液设备、检测手段固定相、输液设备、检测手段2. 与气相色谱法比较与气相色谱法比较分析对象、流动相、操作条件分析对象、流动相、操作条件GC： ：气体、：气体、 20%的有机
3、物（低级烃、石油化工）的有机物（低级烃、石油化工）HPLC：80%的有机物；的有机物； 蛋白质、核酸、氨基酸、多糖类、植物色素、药蛋白质、核酸、氨基酸、多糖类、植物色素、药物、药用植物有效成分、高聚物、染料。物、药用植物有效成分、高聚物、染料。 固定相粒径固定相粒径 理论塔板数理论塔板数LCLC ： 100 200100 200 m m 3000 3000HPLCHPLC： 10 10 m 5 30 m 5 30 万万化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester3. HPLC的特点：的特点：分离效能分离效能高高（n=104m-1，柱效，柱效 一般一般LC）选择性选择性高高 检测
4、灵敏度检测灵敏度高高分析速度分析速度快快 重现性重现性好好应用范围应用范围广广（可分析（可分析80%有机化合物）有机化合物）局局限限性性：缺缺乏乏通通用用检检测测器器；设设备备费费用用昂昂贵贵；操操作作严格严格化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester二、二、HPLC的分类：（按分离机制）的分类：（按分离机制）体积排阻色谱体积排阻色谱吸附色谱吸附色谱分配色谱分配色谱离子交换色谱离子交换色谱msmsms- -+ms化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester三、正、反相色谱体系三、正、反相色谱体系流动相是流动相是非极性非极性, 固定相是极性的固定相是极性的 流动
5、相极性流动相极性 固定相极性固定相极性反相反相色谱：色谱：正己烷正己烷 乙醚乙醚 乙酸乙酯乙酸乙酯 甲醇甲醇 乙腈乙腈 四氢呋喃四氢呋喃化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester正相色谱正相色谱反相色谱反相色谱固定相固定相硅胶硅胶(表面修饰表面修饰)、氧化铝、氧化铝非极性烷基健合固定相非极性烷基健合固定相流动相流动相极性比固定相极性比固定相 弱弱极性比固定相极性比固定相 强强保留值保留值随试样极性随试样极性而而随流动相极性随流动相极性而而随试样极性随试样极性而而随流动相极性随流动相极性而而适用对象适用对象异构体（对映异构、空间异构体（对映异构、空间异构）异构） ；中等极性或极
6、性化合物；中等极性或极性化合物；同系物；同系物；非极性或低极性化合物非极性或低极性化合物操作温度操作温度室温室温最高最高50800C(以降低黏度以降低黏度) 化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester相对分子质量102103104105106吸附吸附色谱色谱正相正相分配色谱分配色谱体积排阻色谱体积排阻色谱离子离子交换色谱交换色谱分配色谱分配色谱反相反相分配色谱分配色谱凝胶渗透色谱凝胶渗透色谱凝胶过滤色谱凝胶过滤色谱极性增加极性增加化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester202 高效液相色谱仪化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester高效液
7、相色谱仪流程图高效液相色谱仪流程图贮液瓶贮液瓶高压输液泵高压输液泵进样器进样器色谱柱色谱柱检测器检测器记录装置记录装置预柱预柱梯度洗脱梯度洗脱装置装置恒流泵恒压泵溶质型检测器总体检测器防止不溶性颗粒堵塞避免强保留组分污染光电二极管阵列光电二极管阵列化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester2011 Spring Semester1、HPLC的固定相的固定相 按承受高压能力分类按承受高压能力分类:刚刚性性固固体体：以以SiO2为为基基质质（可可承承受受7.01081.0109 Pa的高压）的高压） 在在SiO2表表面面键键合合各各种种官官能能团团，可可扩扩大大应应用用范围，是目
8、前最广泛使用的一种固定相范围，是目前最广泛使用的一种固定相硬胶：硬胶： 由由聚苯乙烯与二乙烯苯基聚苯乙烯与二乙烯苯基交联而成（交联而成（3.5108 Pa） 主要用于离子交换和尺寸排阻色谱中主要用于离子交换和尺寸排阻色谱中20203 HPLC3 HPLC的固定相和流动相的固定相和流动相化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester按孔隙深度分类按孔隙深度分类:表面多孔型表面多孔型：基体为实心玻璃珠，在玻璃球外面覆盖一：基体为实心玻璃珠，在玻璃球外面覆盖一层多孔活性材料（如硅胶、氧化铝、离子交换剂、分子层多孔活性材料（如硅胶、氧化铝、离子交换剂、分子筛、聚酸胺等），常用做保护柱填料
9、筛、聚酸胺等），常用做保护柱填料全多孔型全多孔型：由直径为：由直径为10nm的硅胶微粒，或氧化铝微粒凝的硅胶微粒，或氧化铝微粒凝聚而。聚而。 颗粒很细（颗粒很细（510m），传质速率快，易实），传质速率快，易实现高效、高速。特别适合复杂混合物分离及痕量分析。现高效、高速。特别适合复杂混合物分离及痕量分析。化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester2、HPLC的流的流动相相(1). HPLC对流动相的基本要求：对流动相的基本要求：(2). 与分离有关的溶剂性质：与分离有关的溶剂性质：溶剂强度溶剂强度 ：溶剂对固定相的：
10、溶剂对固定相的亲和力亲和力溶解度参数溶解度参数d d ：衡量溶剂对化合物的：衡量溶剂对化合物的洗脱能力洗脱能力极性参数极性参数 P ：衡量溶剂：衡量溶剂极性极性大小大小化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester流动相溶剂强度(SiO2)极性指数P环己烷0.030.04n-正己烷0.010.1四氯化碳0.111.6甲苯0.222.4乙醚0.382.8二氯甲烷0.343.1四氢呋喃0.354.0氯仿0.264.1乙醇0.684.3乙酸乙酯0.384.4二氧六环0.494.8甲醇0.735.1乙腈0.505.8水强10.2HPLC常用流动相的性质常用流动相的性质P 越越大大，溶溶剂
11、剂极极性性越越大大（极性洗脱极性洗脱）正相色谱：正相色谱：反相色谱：反相色谱： 越越大大，溶溶剂剂与与固固定定相相亲亲和和力力越越强强，越越容容易易将将样样品品从从固固定定相相上上洗洗脱脱（强强度洗脱度洗脱）化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester纯溶剂的极性和保留值的关系：纯溶剂的极性和保留值的关系： 实实验验表表明明，当当流流动动相相的的P 改改变变2个个单单位位时时，k 值值大大约约变化变化10倍倍：正相色谱正相色谱反相色谱反相色谱化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester混合溶混合溶剂的极性：的极性：化学化工学院 杨 睿2014 Spring Se
12、mester204 液固（吸附）色谱法 (LSC) LiquidSolid Adsorption Chromatography分离原理分离原理固定相固定相流动相流动相应用实例应用实例化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester205 液液（分配）色谱法 (LLC) LiquidLiquid Partitioning Chromatography分离原理固定相流动相应用实例由于固定相易流失，已逐渐为化学键合相色谱法和不要载体的逆流色谱法代替化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester206 化学键合相色谱法 (CBSPC) Bonded Stationary Ph
13、ases Chromatography化学键合固定相法反相键合相色谱法正相键合相色谱法离子性键合相色谱法手性色谱法采用采用化学键合固定相化学键合固定相进行分离的液相色谱进行分离的液相色谱化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester20207 7 排阻色谱法排阻色谱法大分子物质的分离大分子物质的分离测定聚合物分子量及其分布测定聚合物分子量及其分布主要用途：主要用途：化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester（自学）其他的HPLC法化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester208 色谱分离方法的选择选择色谱分离方法的主要根据是试样的相对分子质量的
14、大小、在水中和有机溶剂中的溶解度、极性和稳定程度以及化学结构等物理性质和化学性质化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester色谱体系的选择普通样品的定性定量分析任务排阻色谱高分子量样品水溶性 反相排阻油溶性 正相排阻特异性生物物质亲和色谱水溶性样品反相色谱油溶性样品正相色谱保证样品在流动相中有良好溶解度不离解分子型键合色谱离子型离子交换色谱离子对色谱可离解或可形成离子液相色谱中等分子量非挥发性样品气相色谱低分子量气体(在液体中溶解度小、k太小)低分子量气固色谱气固色谱气液色谱气液色谱300以下挥发性样品化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester色谱体系的选择对
15、样品进行快速、高分辨的分析任务定量分析为主定量分析为主优先采用液相色谱优先采用液相色谱定性分析为主定性分析为主优先采用毛细管电泳离子型化合物区带电泳DNA/核苷酸等大蛋白质凝胶色谱与凝胶电泳凝胶色谱与凝胶电泳含强疏水基团 电色谱电色谱非离子、倾向疏水化合物离子 胶束电动色谱胶束电动色谱低浓度生物质 浓缩等速电泳浓缩等速电泳两性生物质 等电聚焦电泳等电聚焦电泳手性异构体拆分 手性毛细管电泳手性毛细管电泳化学化工学院 杨 睿2014 Spring SemesterHPLC的应用的应用 1. 环境中有机氯农药残留量分析环境中有机氯农药残留量分析 固定相：薄壳型硅胶固定相：薄壳型硅胶(37 50 m)
16、 流动相：正己烷流动相：正己烷 流流 速：速：1.5 mL/min 色谱柱：色谱柱：50cm 2.5mm(内径内径) 检测器：差示折光检测器检测器：差示折光检测器 可对水果、蔬菜中的农药可对水果、蔬菜中的农药残留量进行分析。残留量进行分析。化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester2. 稠环芳烃的分析稠环芳烃的分析 稠环芳烃多为致癌物质。稠环芳烃多为致癌物质。 固定相：十八烷基硅烷化键合相固定相：十八烷基硅烷化键合相 流流动动相相：20%甲甲醇醇-水水 100%甲甲醇醇 线性梯度淋洗，线性梯度淋洗，2%/min 流流 速：速：1mL/min 柱柱 温：温：50 C 柱柱 压：
17、压：70 104 Pa 检测器：紫外检测器检测器：紫外检测器化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester化学键合固定相法化学键合固定相法优势：优势：键合相非常稳定，适用于梯度洗脱键合相非常稳定，适用于梯度洗脱由由于于键键合合到到载载体体表表面面的的官官能能团团可可以以是是不不同同极极性性的的，因此适用于种类繁多样品的分离因此适用于种类繁多样品的分离表表面面吸吸附附和和催催化化作作用用小小，少少数数几几种种键键合合相相可可以以满满足足大大部部分分化化合合物物的的
18、分分离离分分析析要要求求，目目前前约约80%80%的分离分析是用键合相色谱完成的的分离分析是用键合相色谱完成的化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester键合固定相类型：键合固定相类型：用来制备键合固定相的载体，主要是硅胶，利用硅胶表面的用来制备键合固定相的载体，主要是硅胶，利用硅胶表面的硅醇基硅醇基(Si一一OH)与有机分子反应成键与有机分子反应成键,得到各种性能的固得到各种性能的固定相。一般可分三类：定相。一般可分三类：疏水基团：疏水基团：如不同链长的烷烃如不同链长的烷烃(C2,4,8,18等等)、苯基等、苯基等 非极性键合相非极性键合相反相反相键合相色谱键合相色谱极性基团
19、：极性基团：如氨基、氰基、二醇基等如氨基、氰基、二醇基等 极性键合相极性键合相正相正相键合相色谱键合相色谱离子交换基团：离子交换基团：如作为阴离子交换基团的胺基，季如作为阴离子交换基团的胺基，季铵盐；作为阳离子交换基团的磺酸等铵盐；作为阳离子交换基团的磺酸等 离子交换键合相离子交换键合相离子交换色谱离子交换色谱化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester有机基团与基体硅胶表面的键型有四类：有机基团与基体硅胶表面的键型有四类：1. Si-O-C型型(硅酸酯型硅酸酯型)，酯化反应得到，易水，酯化反应得到，易水解和醇解，只在正相色谱中使用解和醇解，只在正相色谱中使用 由于这类键合固定
20、相的有机表面是一些单体，由于这类键合固定相的有机表面是一些单体，具有良好的传质特性，这些酯化过的硅胶填料易水具有良好的传质特性，这些酯化过的硅胶填料易水解且受热不稳定，因此仅适用于解且受热不稳定，因此仅适用于不含水或醇不含水或醇的低极的低极性流动相，分离极性化合物性流动相，分离极性化合物化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester2. Si-N型（共价键键合型），氯化硅胶与胺进行型（共价键键合型），氯化硅胶与胺进行胺化反应制备，未商品化胺化反应制备，未商品化 共价键健合固定相不易水解，并且热稳定较硅共价键健合固定相不易水解，并且热稳定较硅酸酯好。缺点是当使用水溶液时，必须限制酸
21、酯好。缺点是当使用水溶液时，必须限制pH在在48范围内范围内化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester3. Si-O-C型（共价键健合型），氯化硅胶与格氏型（共价键健合型），氯化硅胶与格氏试剂反应得到，稳定性好试剂反应得到，稳定性好 共价键健合固定相不易水解，热稳定性好。共价键健合固定相不易水解，热稳定性好。缺点是格氏反应不方便，制备复杂、成本高缺点是格氏反应不方便，制备复杂、成本高例：例：化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester4. Si-O-Si-C型（硅烷化键合固定相），通过硅型（硅烷化键合固定相），通过硅醇基与硅烷化试剂反应制备，制备简单醇基与硅烷
22、化试剂反应制备，制备简单 这这类类键键会会固固定定相相具具有有热热稳稳定定性性和和化化学学稳稳定定性性好好，不不易易吸吸水水，耐耐有有机机溶溶剂剂的的优优点点，在在70以以下，下，pH=29范围内正常工作，应用最为广泛范围内正常工作，应用最为广泛化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester流动相：流动相：强极性强极性溶剂（甲溶剂（甲醇，乙腈，四氢呋喃等）醇，乙腈，四氢呋喃等） 用水调节洗脱强度用水调节洗脱强度极性大极性大的组分保留时间的组分保留时间短短极性小极性小的组分保留时间的组分保留时间长长反相键合相色谱：反相键合相色谱：流动相极性流动相极性 固定相极性固定相极性化学化工学
23、院 杨 睿2014 Spring Semester流动相：流动相：弱极性弱极性溶剂（乙溶剂（乙醚，二氯甲烷，氯仿等）醚，二氯甲烷，氯仿等） 用正己烷调节洗脱强度用正己烷调节洗脱强度极性小极性小的组分保留时间的组分保留时间短短极性大极性大的组分保留时间的组分保留时间长长正相键合相色谱：正相键合相色谱：流动相极性流动相极性 固定相极性固定相极性化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester离子性键合相色谱：离子性键合相色谱：化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester40手性固定相（手性固定相（ CSP ）色谱：）色谱：常见的CSP： 给体-受体CSP； 多糖类 CS
24、P ； 环糊精CSP ； 蛋白质CSP； 其它的CSP化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester分离原理分离前提：K 或 k 差异根据各组分在固定相表面上根据各组分在固定相表面上吸附能力的差异吸附能力的差异实现分离实现分离固固固固体体体体固固固固定定定定相相相相溶溶剂剂 越越大大，洗洗脱脱能能力力越越强强，越越容容易易将将样样品品从从固固定定相相上上洗洗脱脱，保保留留时时间间越短越短化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester极性极性固定相固定相LSC 固定相固定相（粒径（粒径 510 m ）非极性非极性固定相固定相酸性吸附剂：硅胶、硅酸镁酸性吸附剂：硅胶、硅
25、酸镁用于分离碱性物质用于分离碱性物质碱性吸附剂：氧化铝、氧化镁、聚酰胺碱性吸附剂：氧化铝、氧化镁、聚酰胺用于分离酸性物质用于分离酸性物质活性炭、炭黑、高分子多孔小球活性炭、炭黑、高分子多孔小球用于分离弱极性化合物用于分离弱极性化合物化学化工学院 杨 睿2014 Spring SemesterLSC 流动相流动相极性极性（硅胶，氧化铝等）（硅胶，氧化铝等）流动相选择的依据是流动相选择的依据是待测样品极性的大小待测样品极性的大小固定相固定相流动相流动相以以非非极极性性流流动动相相为为主主体体，加加入入中中强强极极性性溶溶剂剂为为改改性剂，以调节洗脱强度性剂，以调节洗脱强度待测样品待测样品极性极性非
26、极性非极性（高分子聚合物，（高分子聚合物，活性炭等）活性炭等）以以极极性性流流动动相相为为主主体体，加加入入中中弱弱极极性性溶溶剂剂为为改改性性剂，以调节洗脱强度剂，以调节洗脱强度非极性非极性梯度洗脱梯度洗脱化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester一般地，含弱吸附与部分中等吸附官能团组分的分离，可以用烃类作洗脱液含羰基化合物，用二氯甲烷作洗脱液其余组分的分离，则在洗脱液中添加乙腈或甲醇化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester液固吸附色谱优势：分离难溶于水的非极性化合物、位置异构体、立体异构体等液固吸附色谱中的保留时间通常为：饱和烃 烯烃 芳香烃 卤代物和
27、硫化物 醚 硝基化合物 酯醇胺 砜 亚砜 酰胺 羧酸化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester表面多孔型颗粒ALLC 固定相30mm实心球实心球12mm5mm全多孔型粒子B全多孔型颗粒C深孔载体固定液几种不同极性的固定液物理作用化学化工学院 杨 睿2014 Spring SemesterLLC 流动相流动相极性 固定相极性反相反相色谱：色谱：固定液易流失，不适用于梯度洗脱固定液易流失，不适用于梯度洗脱化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester化学键合固定相法优势：键合相非常稳定，适用于梯度洗脱由于键合到载体表面的官能团可以是不同极性的，因此适用于种类繁多样品
28、的分离表面吸附和催化作用小，少数几种键合相可以满足大部分化合物的分离分析要求，目前约80%的分离分析是用键合相色谱完成的化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester键合固定相类型：用来制备键合固定相的载体，主要是硅胶，利用硅胶表面的硅醇基(Si一OH)与有机分子反应成键,得到各种性能的固定相。一般可分三类：疏水基团：如不同链长的烷烃（C8和C18）、苯基等 非极性键合相反相键合相色谱极性基团：如氨丙基、氰基、醇等 极性键合相正相键合相色谱离子交换基团：如作为阴离子交换基团的胺基，季铵盐；作为阳离子交换基团的磺酸等 离子交换键合相离子交换色谱化学化工学院 杨 睿2014 Spri
29、ng Semester有机基团与基体硅胶表面的键型有四类：有机基团与基体硅胶表面的键型有四类：1. Si-O-C型型(硅酸酯型硅酸酯型)，酯化反应得到，易水，酯化反应得到，易水解和醇解，只在正相色谱中使用解和醇解，只在正相色谱中使用 由于这类键合固定相的有机表面是一些单体，由于这类键合固定相的有机表面是一些单体，具有良好的传质特性，这些酯化过的硅胶填料易水具有良好的传质特性，这些酯化过的硅胶填料易水解且受热不稳定，因此仅适用于解且受热不稳定，因此仅适用于不含水或醇不含水或醇的低极的低极性流动相，分离极性化合物性流动相，分离极性化合物化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester2
30、. Si-N型（共价键键合型），氯化硅胶与胺进行型（共价键键合型），氯化硅胶与胺进行胺化反应制备，未商品化胺化反应制备，未商品化 共价键健合固定相不易水解，并且热稳定较硅共价键健合固定相不易水解，并且热稳定较硅酸酯好。缺点是当使用水溶液时，必须限制酸酯好。缺点是当使用水溶液时，必须限制pH在在48范围内范围内化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester3. Si-C型（共价键健合型），氯化硅胶与格氏试型（共价键健合型），氯化硅胶与格氏试剂反应得到，稳定性好剂反应得到，稳定性好 共价键健合固定相不易水解，热稳定性好。共价键健合固定相不易水解，热稳定性好。缺点是格氏反应不方便，制备
31、复杂、成本高缺点是格氏反应不方便，制备复杂、成本高例：例：化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester4. Si-O-Si-C型（硅烷化键合固定相），通过硅型（硅烷化键合固定相），通过硅醇基与硅烷化试剂反应制备，制备简单醇基与硅烷化试剂反应制备，制备简单 这这类类键键会会固固定定相相具具有有热热稳稳定定性性和和化化学学稳稳定定性性好好，不不易易吸吸水水，耐耐有有机机溶溶剂剂的的优优点点，在在70以以下，下，pH=29范围内正常工作，应用最为广泛范围内正常工作，应用最为广泛化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester化学化工学院 杨 睿2014 Spring Se
32、mester化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester实实验验室室自自装装柱柱：细细粒粒度度的的填填料料（20 m）一一般般采采用用匀匀浆浆填填充充法法装柱装柱商品柱商品柱化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester梯度淋洗装置梯度淋洗装置梯度淋洗装置梯度淋洗装置溶剂溶剂A 混合室混合室高压泵高压泵1高压泵高压泵2 程程 序序控制器控制器色谱柱色谱柱计量泵计量泵 (低压低压)溶剂溶剂A溶剂溶剂B混合室混合室高压泵高压泵色谱柱色谱柱溶剂溶剂B等梯度洗脱装置等梯度洗脱装置等梯度洗脱装置等梯度洗脱装置化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester 两种
33、典型的光化学流动池两种典型的光化学流动池流动相入口流动相入口流动相入口流动相入口流动相出口流动相出口流动相出口流动相出口I0I0II化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester光光化化学学检检测测器器（紫紫外外吸吸收收检检测测器器、二二极极管管阵阵列列式式检检测测器器、荧荧光光检检测测器器、蒸蒸发发光光散散射射检检测测器器、化化学学或或生生物物发发光光检检测测器器、电电致化学发光检测器、致化学发光检测器、RRS）电化学检测器电化学检测器（电导、电势、电量（电导、电势、电量库伦）库伦）示差折光检测器示差折光检测器手性检测器手性检测器（旋光检测器、园二色检测器）（旋光检测器、园二色
34、检测器）分分子子量量检检测测器器（间间接接或或直直接接测测定定：自自动动粘粘度度计计、小小角角度度激激光光检测器、激光光散射检测器）检测器、激光光散射检测器）其其它它（放放射射性性检检测测器器、热热学学性性质质光光声声、光光热热、热热透透镜镜检检测器、光电导检测器、磁旋光检测器）测器、光电导检测器、磁旋光检测器）联用检测技术（联用检测技术（LSMS、 LS 间接光度）间接光度）衍生色谱法衍生色谱法（紫外衍生、荧光衍生、电化学衍生、手性衍生）（紫外衍生、荧光衍生、电化学衍生、手性衍生）化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester 紫紫外外检检测测器器的的重重要要进进展展光光电电二
35、二极极管管阵阵列列检检测测器器（PDAD）：1024个个二二极极管管阵阵列列，各各检检测测特特定定波波长长，计算机快速处理，三维立体谱图：计算机快速处理，三维立体谱图：化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester荧光检测器（荧光检测器（fluorescence detector） 高灵敏度、高选择性高灵敏度、高选择性 对对多多环环芳芳烃烃，维维生生素素B、黄黄曲曲霉霉素素、卟卟啉啉类类化化合合物物、农农药药、药药物物、氨氨基基酸酸、甾甾类类化化合合物物等等有有响响应。应。化学化工学院 杨 睿2014 Spring Semester示差折光检测器示差折光检测器（different
36、ial refractive index detector）除紫外检测器之外应用最多的检测器；除紫外检测器之外应用最多的检测器；检测参比池和样品池的折光指数差值；检测参比池和样品池的折光指数差值；通通用用型型检检测测器器（每每种种物物质具有不同的折光指数）质具有不同的折光指数）灵灵敏敏度度低低、对对温温度度敏敏感感、不能用于梯度洗脱不能用于梯度洗脱化学化工学院 杨 睿2014 Spring SemesterDAD二极管阵列检测器（5121024）其特点是能进行光谱扫描，能得到三维色谱图还能得到分离物质的紫外光谱图，可鉴别被分离物质的纯度，有一定的选择性其最大的优点是，在分析时，可避免因波长选择的关系，漏掉了一些色谱峰，得到未知物的最大吸收波长检测器的价格比较高
