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1、代表性水生药用植物代表性水生药用植物芡芡资源化学研究资源化学研究与资源有效利用与资源有效利用南京中医药大学南京中医药大学 吴启南吴启南二二0 0一三年十一月二十三日一三年十一月二十三日全国中药资源化学研究与资源有效利用的新思路新方法全国中药资源化学研究与资源有效利用的新思路新方法暨暨“中药资源与开发中药资源与开发”专业系列规划教材师资培训研讨班专业系列规划教材师资培训研讨班一、水生药用植物资源简介一、水生药用植物资源简介二、芡的二、芡的品种品种资源资源概述概述三、三、芡的芡的资源资源生产现状生产现状四、四、芡的资源化学研究芡的资源化学研究五、五、芡的资源有效利用芡的资源有效利用目目 录录一、水
2、生药用植物资源简介一、水生药用植物资源简介一、水生药用植物资源简介n根根据据中中华华本本草草、中中药药大大辞辞典典及及中中国国海海洋洋湖湖沼沼药药物物学学等等记记载载,初初步步统统计计结结果果表表明明,目目前前,药药用用水水生生植植物物约约有有262262种种;隶隶属于属于7272科科154154属。属。n其其中中被被子子植植物物:6262科科,248248种种,涉涉及及双双子子叶叶植物植物4242科,科,178178种,单子叶植物种,单子叶植物2020科,科,7070种;种;n裸子植物:裸子植物:1 1科,科,1 1种;种;n蕨类植物:蕨类植物:9 9科科1313种种。一、水生药用植物资源简
3、介湿生植物:湿生植物:千屈菜千屈菜、半枝莲半枝莲、鱼腥草等。、鱼腥草等。植物植物挺水植物:泽泻、黑三棱、石菖蒲、蒲黄、莲子等。挺水植物:泽泻、黑三棱、石菖蒲、蒲黄、莲子等。浮叶植物浮叶植物(漂浮植物漂浮植物):芡、眼子菜等。:芡、眼子菜等。沉水植物:黑藻等。沉水植物:黑藻等。一、水生药用植物资源简介主要化学成分类型主要化学成分类型1.1.黄酮类:如莲、芡实黄酮类:如莲、芡实 、三棱、蒲黄、三白、三棱、蒲黄、三白草、鱼腥草、浮萍等;草、鱼腥草、浮萍等;2.2.挥发油类:泽泻、三棱、三白草、鱼腥草、挥发油类:泽泻、三棱、三白草、鱼腥草、石菖蒲等;石菖蒲等;3.3.生物碱类:三白草、莲、鱼腥草等;生
4、物碱类:三白草、莲、鱼腥草等;4.4.有机酸类:三棱、蒲黄等。有机酸类:三棱、蒲黄等。5.5.特征性成分:原萜烷型三萜(泽泻)等。特征性成分:原萜烷型三萜(泽泻)等。 一、水生药用植物资源简介主要药理活性主要药理活性1.1.抗菌、抗病毒作用;抗菌、抗病毒作用;2.2.增强机体免疫能力;增强机体免疫能力;3.3.对心血管系统的作用;对心血管系统的作用;4.4.抑制血小板聚集、抑制血栓形成、影响血液抑制血小板聚集、抑制血栓形成、影响血液流变性;流变性;5.5.镇痛,保肝,抗肿瘤,利尿等作用。镇痛,保肝,抗肿瘤,利尿等作用。一、水生药用植物资源简介药用水生植物资源开发与利用药用水生植物资源开发与利用
5、1.1.药用价值:药用价值:黑三棱、泽泻民、浮萍等。黑三棱、泽泻民、浮萍等。2.2.食食用用价价值值:芡芡实实、莲莲子子、菱菱、慈慈姑姑、鱼鱼腥腥草草等,泽泻的花茎、芡实的茎也可食用。等,泽泻的花茎、芡实的茎也可食用。3.3.水水环环境境治治理理价价值值:石石菖菖蒲蒲、长长苞苞香香蒲蒲、芦芦苇苇、水薄荷常用于水污染的生物治理和环境修复。水薄荷常用于水污染的生物治理和环境修复。4.4.其其他他价价值值:园园林林水水景景的的重重要要造造景景素素材材;芦芦苇苇、黑黑三三棱棱的的茎茎、叶叶可可编编织织成成生生活活用用品品;荷荷叶叶、芦苇叶可作为食品加工的辅助材料等。芦苇叶可作为食品加工的辅助材料等。
6、二、芡的二、芡的品种品种资源资源概述概述芡实芡实 为睡莲科植物芡为睡莲科植物芡Euryale ferox Salisb. 的成熟种仁。的成熟种仁。 始载于始载于神农本草经神农本草经,历版药典中均有记载。,历版药典中均有记载。 具有益肾固精,补脾止泻,祛湿、止带的功效。具有益肾固精,补脾止泻,祛湿、止带的功效。 主治梦遗、滑精、遗尿、尿频、脾虚久泻、白浊、主治梦遗、滑精、遗尿、尿频、脾虚久泻、白浊、 带下。带下。本草品汇精要本草品汇精要 芡茎三月生叶贴水,大于荷叶,皱纹如芡茎三月生叶贴水,大于荷叶,皱纹如 榖,榖,蹙衄如沸,面青背紫,茎、叶皆有刺。其茎长至蹙衄如沸,面青背紫,茎、叶皆有刺。其茎长
7、至丈余,中亦有孔有丝,嫩者剥皮可食。五六月生丈余,中亦有孔有丝,嫩者剥皮可食。五六月生紫花,花开向日结苞,外有青刺,如猬刺及栗球紫花,花开向日结苞,外有青刺,如猬刺及栗球之形。花在苞顶,亦如鸡喙及猬喙。剥开内有斑之形。花在苞顶,亦如鸡喙及猬喙。剥开内有斑驳软肉裹子,累累如珠玑。壳内白米,状如鱼目。驳软肉裹子,累累如珠玑。壳内白米,状如鱼目。本草纲目本草纲目 江南产者其汇红紫光润无刺,自扬而北产者江南产者其汇红紫光润无刺,自扬而北产者汇有刺而青绿为异。汇有刺而青绿为异。(一)本草考证(一)本草考证2024/9/6芡 实 简 介叶正反面叶脉分枝处均具刺密生针刺密被倒向硬刺,果实青色个体较大叶反面叶
8、脉分枝处具刺无刺无刺,果实污紫色植 株椭圆形,暗灰或暗灰褐色 个体较小正常叶 叶 柄果 柄花 柄萼 片果 实种 子类圆形,橙红色 苏芡苏芡刺芡刺芡芡实及其近缘种药材芡实及其近缘种药材ITS2条形码鉴定研究条形码鉴定研究ITS2条形码序列能够准确鉴别芡实及其近缘种药材条形码序列能够准确鉴别芡实及其近缘种药材,从从DNA条形码分子鉴定角度,刺芡和苏条形码分子鉴定角度,刺芡和苏芡为一个单倍型,属于同一个物种芡为一个单倍型,属于同一个物种。三、芡的三、芡的资源资源生产现状生产现状16全国芡实药材及商品分布图全国芡实药材及商品分布图种植基地种植基地规模(亩)规模(亩)产地状况产地状况苏州工业园区娄葑镇群
9、力村苏州工业园区娄葑镇群力村8000省级试验示范区,供应本地食用为主省级试验示范区,供应本地食用为主苏州高新区浒墅关镇苏州高新区浒墅关镇500市级试验示范区,供应本地食用为主市级试验示范区,供应本地食用为主苏州胥口镇苏州胥口镇3000市级试验示范区,供应本地食用为主市级试验示范区,供应本地食用为主苏州昆山锦溪镇苏州昆山锦溪镇300野生为主,无人管理野生为主,无人管理扬州宝应山阳镇南湖村扬州宝应山阳镇南湖村4000合作社模式,培育出合作社模式,培育出“淮芡一号淮芡一号”南京浦口区江浦街道西江村南京浦口区江浦街道西江村800野生为主,无人管理野生为主,无人管理淮安洪泽三河镇同仁堂中药生产基地淮安洪
10、泽三河镇同仁堂中药生产基地10000基地规模化种植,基地规模化种植,GAP基地,农民致富来源基地,农民致富来源淮安金湖涂沟镇唐港村淮安金湖涂沟镇唐港村30000野生为主,部分农民种植野生为主,部分农民种植淮安金湖白马湖淮安金湖白马湖6000野生为主野生为主淮安金湖高邮湖淮安金湖高邮湖5000野生为主野生为主盐城阜宁县合利镇盐城阜宁县合利镇3000客商承包种植为主,内销为主客商承包种植为主,内销为主盐城建湖蒋营九龙口盐城建湖蒋营九龙口5000野生为主,自然生态区野生为主,自然生态区泰州兴化周奋时堡村泰州兴化周奋时堡村9300野生为主,面积在缩小野生为主,面积在缩小广东肇庆鼎湖广东肇庆鼎湖1320
11、0产学研结合,综合利用芡实,全国主要来源产学研结合,综合利用芡实,全国主要来源广东潮州潮安县东凤镇广东潮州潮安县东凤镇5000规模化种植,规模化种植,“公司公司+农户农户”合作经营合作经营湖北蕲春县滨湖区湖北蕲春县滨湖区5000主要特产水产品,农作物配套种植模式主要特产水产品,农作物配套种植模式山东平湖及微山湖山东平湖及微山湖10000野生为主,采收、加工、销售一条龙野生为主,采收、加工、销售一条龙国内芡实国内芡实种种植地植地刺刺芡芡苏苏芡芡4月5月6月7月8月9月10月2024/9/6苏州市蔬菜研究所苏州市蔬菜研究所苏州市娄葑镇群力村苏州市娄葑镇群力村2024/9/6苏州东太湖戗港苏州东太湖
12、戗港采收加工采收加工乘船用长柄镰刀将果实稍带果柄割下,乘船用长柄镰刀将果实稍带果柄割下,用网兜将果实捞起用网兜将果实捞起采果工下水用刀采收采果工下水用刀采收堆沤脱果皮堆沤脱果皮手工剥去个果皮手工剥去个果皮刺芡刺芡苏芡苏芡2024/9/6收集的样品收集的样品四、芡的资源化学研究四、芡的资源化学研究(一)芡的(一)芡的化学成分化学成分1. 黄酮类化合物(黄酮类化合物(flavones)5,7,4-三羟基-二氢黄酮 5,7,3,4,5-五羟基二氢黄酮 2.环肽类化合物(环肽类化合物(cyclic peptide)(一)芡的(一)芡的化学成分化学成分3. 3. 葡糖基甾醇葡糖基甾醇类类化合物(化合物(
13、glucityl sterolsglucityl sterols)芡芡实实中葡糖基甾醇中葡糖基甾醇类类化合物主要有:化合物主要有:24-methylchol24-methylcholestest5 5enyl-3enyl-3O- pyranoglucosideO- pyranoglucoside、2424ethylcholestethylcholest5 5enyl-enyl-33O Opyranoglucosidepyranoglucoside、2424 ethylcholesta ethylcholesta5, 22E5, 22Edienyl-dienyl-33O- pyranogluco
14、side 3O- pyranoglucoside 3种吡喃糖苷,它种吡喃糖苷,它们们可能是芡可能是芡实实的活性物的活性物质质成分。此外,成分。此外,还还有木脂素苷、异落叶松有木脂素苷、异落叶松树树脂醇脂醇-9-O-D-9-O-D-吡喃葡萄吡喃葡萄糖苷。糖苷。4. 4. 烷烃类烷烃类化合物及不化合物及不饱饱和脂肪酸和脂肪酸(alkane and unsaturated fatty acidalkane and unsaturated fatty acid)(一)芡的(一)芡的化学成分化学成分5. 脑苷脂类化合物(脑苷脂类化合物(cerebrosides)(一)芡的(一)芡的化学成分化学成分6.
15、倍半木脂素类(倍半木脂素类(sesquineolignans)7 . 其他化合物其他化合物: 芡实所含的化合物类型较多,除上述类芡实所含的化合物类型较多,除上述类型化合物外,尚含有型化合物外,尚含有-生育酚、生育酚、-生育酚和生育酚和-生育酚、生育酚、多糖、多酚等化合物。多糖、多酚等化合物。1、指纹图谱评价研究、指纹图谱评价研究HPLCHPLC指纹图谱研究指纹图谱研究指纹图谱研究指纹图谱研究 NIR指纹图谱研究指纹图谱研究IR指纹图谱研究指纹图谱研究(二)定性(二)定性研究研究HPLC指纹图谱研究指纹图谱研究柚皮素含量低第一大峰NIR指纹图谱研究指纹图谱研究叠加图叠加图标记峰标记峰一阶导数一阶
16、导数二阶导数二阶导数主峰位种子类中药淀粉多糖特征IR指纹图谱研究指纹图谱研究3400、2931、1654、1540、1368、1155、1081、1021、858、575cm-1多多O-H、N-H取代取代酰胺带,氨基酸酰胺带,氨基酸多肽类特征峰多肽类特征峰多糖特征峰,多糖特征峰,-糖苷键为糖苷键为主,含少量主,含少量-糖苷键糖苷键淀粉峰淀粉峰IR指纹图谱研究指纹图谱研究2、芡实芡实粉末粉末X射线射线衍射衍射图谱研究图谱研究芡实的芡实的X射线衍射在射线衍射在2约为的约为的15,17,18 ,23,26和和29有较强的衍射峰。有较强的衍射峰。强度大小为强度大小为181715232629。(二)定性
17、(二)定性研究研究根据前面对芡实粉末根据前面对芡实粉末x射线衍射的分析,可以初步推断芡实粉射线衍射的分析,可以初步推断芡实粉末中淀粉的晶体类型为末中淀粉的晶体类型为A型型。淀粉类型淀粉类型结论结论x x射线衍射射线衍射将将天然淀粉分为天然淀粉分为3 3个基本类型:个基本类型:A A、B B、C C型。型。A A型型:谷谷类类如如玉玉米米、小小麦麦、稻稻米米淀淀粉粉为为特特征征,在在15,17,18和和23有较强的衍射峰有较强的衍射峰B B型型:块块茎茎、果果实实、茎茎类类淀淀粉粉如如马马铃铃薯薯,西西米米以以及及香香蕉蕉和和含含直直链链淀淀粉超过粉超过30%40%的玉米淀粉为特征的玉米淀粉为特
18、征在在5.6,17,22和和24有较强的衍射峰出现有较强的衍射峰出现C C型型:处处于于A、B两两种种模模式式之之间间,如如豆豆类类和和其其它它根根类类淀淀粉粉。包包含含有有A,B型型2种晶型种晶型芡实药材的芡实药材的XRD FourierXRD Fourier指纹图谱分析指纹图谱分析芡实中的主体成分是淀粉,故芡实粉末的X射线衍射图谱中的衍射峰主要表现为淀粉的特征衍射峰。通过对芡实标准药材的X射线衍射图谱中衍射特征峰的研究,初步推断芡实药材粉末中淀粉的晶体类型为A型。对芡实淀粉的4个特征衍射峰进行了分析,同时对组成图谱的所有数据作相关系数分析,结果表明不同品种之间相似度极高。1、水溶性蛋白含量
19、测定、水溶性蛋白含量测定江苏苏州江苏苏州中检所中检所(二)(二)定量研究定量研究各产地水溶性蛋白质均值为各产地水溶性蛋白质均值为0.4577mg/g0.4577mg/g。长江流域长江流域 南方南方 北方北方2、氨基酸含量及营养评价、氨基酸含量及营养评价2024/9/6方法: 氨基酸自动分析仪法色谱条件 :波长570nm(其他氨基酸),440nm(脯氨酸),阳离子交换树脂分析柱,柱温57,分析时间40min。样品准备:磺基水杨酸水解测定游离氨基酸,盐酸水解测定总氨基酸。种类少,波动大种类多,含量均衡CABThrValMetIleLeuPheLysNH3种类少,波动大种类少,波动大种类多,含量均衡
20、种类多,含量均衡种类少,波动大种类少,波动大2、氨基酸含量及营养评价、氨基酸含量及营养评价2、氨基酸含量及营养评价、氨基酸含量及营养评价各种必需氨基酸与各种必需氨基酸与WHO/FAO推荐氨基酸模式谱比较(推荐氨基酸模式谱比较(mg/100g蛋白质)蛋白质)种种类类IleLeuLysMet+cysPhe+TyrThrValWHO/FAO标标准准模式模式4.07.05.53.56.04.05.0芡芡实实4.838.062.884.0310.363.416.87RAA1.2071.151 0.5231.1381.7321.033 1.384RC1.0350.987 0.4480.9711.4850.
21、886 1.187 结果表明芡实中人体必需氨基酸配比合理,是一种优质的膳结果表明芡实中人体必需氨基酸配比合理,是一种优质的膳食蛋白。与各类食品氨基酸模式相比,芡实蛋白与谷物蛋白相食蛋白。与各类食品氨基酸模式相比,芡实蛋白与谷物蛋白相似。同时,芡实蛋白又需与牛奶、肉类等优质蛋白配合食用,似。同时,芡实蛋白又需与牛奶、肉类等优质蛋白配合食用,互补各自的氨基酸缺陷,才能达到膳食配比更合理更健康。互补各自的氨基酸缺陷,才能达到膳食配比更合理更健康。第一限制性氨基酸第一限制性氨基酸第二限制性氨基酸第二限制性氨基酸2024/9/6(3、多糖、多糖成分含量与分离鉴定成分含量与分离鉴定芡实药材芡实药材药渣药渣
22、水液水液1010倍量水超声提取倍量水超声提取2 2次,次,1h/1h/次次10倍量倍量石油醚回流提取石油醚回流提取2次次,2h/次次上清液上清液沉淀沉淀药渣药渣10倍量倍量80%乙醇回流提取乙醇回流提取2次,次,2h/次次药渣药渣加加95%95%乙醇至终浓度为乙醇至终浓度为80%80%粗多糖粗多糖EP减压回收干燥减压回收干燥精多糖精多糖EPJ溶解,溶解,SevageSevage除蛋白,醇沉,减压回除蛋白,醇沉,减压回收干燥收干燥EPEPEPJEPJ除蛋白前后:除蛋白前后:粗多糖纯度为粗多糖纯度为73.25%73.25%,精多糖为,精多糖为76.22%76.22%; 粗多糖蛋白质含量为粗多糖蛋白
23、质含量为6.27%6.27%,精多糖为,精多糖为1.39%1.39%。2024/9/6多糖成分含量与分离鉴定级级分名称分名称性状性状溶解性溶解性质质量量(mg)得率得率(%)Molish反反应应茚茚三三酮酮反反应应碘碘-碘化碘化钾钾反反应应三三氯氯化化铁铁反反应应EPJ-A1乳白色粉末乳白色粉末易溶于冷水、不溶易溶于冷水、不溶于有机于有机试剂试剂81.7340.87+-EPJ-B1白色粉末白色粉末易溶于冷水、不溶易溶于冷水、不溶于有机于有机试剂试剂13.626.81+-EPJ-B2白色粉末白色粉末易溶于冷水、不溶易溶于冷水、不溶于有机于有机试剂试剂1.250.63+-EPJ-B3白色粉末白色粉
24、末能部分溶于能部分溶于热热水、水、不溶于有机不溶于有机试剂试剂5.362.68+-EPJ-B4淡黄色粉末淡黄色粉末难难溶于冷水、不溶溶于冷水、不溶于有机于有机试剂试剂3.721.86+-EPJ-C1白色粉末白色粉末易溶于冷水、不溶易溶于冷水、不溶于有机于有机试剂试剂4.882.44+-EPJ-D1米黄色粉末米黄色粉末能部分溶于能部分溶于热热水、水、有机有机试剂试剂2.841.42+-EPJ-D2黄色粉末黄色粉末难难溶于冷水、不溶溶于冷水、不溶于有机于有机试剂试剂2.181.09+-EPJ-D3黄色粉末黄色粉末难难溶于冷水、不溶溶于冷水、不溶于有机于有机试剂试剂2.251.13+-EPJ-A1-
25、1白色粉末白色粉末易溶于冷水、不溶易溶于冷水、不溶于有机于有机试剂试剂22.4344.86+-EPJ-A1-2白色粉末白色粉末易溶于冷水、不溶易溶于冷水、不溶于有机于有机试剂试剂13.8827.76+-理化性质均一分子量均一分子量EPJ-A1-1EPJ-A1-2未知3、多糖成分含量与分离鉴定、多糖成分含量与分离鉴定单糖组成单糖组成 HPLC-RIDHPLC-RID3、多糖成分含量与分离鉴定、多糖成分含量与分离鉴定紫外全波长扫描图紫外全波长扫描图葡萄糖回归曲线图葡萄糖回归曲线图样样品号品号产产地地批号批号多糖含量多糖含量%1江江苏苏苏苏州州08091357.862江江苏苏淮安淮安08110116
26、.203四川成都四川成都08110818.404山山东东菏菏泽泽08110224.875河北安国河北安国08110823.436福建莆田福建莆田08093012.187安徽安徽芜芜湖湖08110228.238江西吴穴江西吴穴08110228.169广广东东肇肇庆庆08102027.5910广广东东08110833.4711广广东东09020132.034、HPLC测定芡实中测定芡实中维生素维生素E的含量的含量编编号号产产地地批号批号收集地收集地栽培种栽培种1湖北洪湖湖北洪湖121021湖北洪湖瞿家湾蔬菜种植基地湖北洪湖瞿家湾蔬菜种植基地刺芡刺芡2云南云南丽丽江江120304北京同仁堂北京同仁堂
27、刺芡刺芡3福建蒲田福建蒲田120605蒲田市蒲田市华娴华娴芡芡实实加工厂加工厂刺芡刺芡4江江苏苏建湖建湖090813江江苏苏建湖九建湖九龙龙口生口生态态区区刺芡刺芡5四川成都四川成都081108安徽丰原安徽丰原铜铜陵中陵中药饮药饮片有限公司片有限公司刺芡刺芡6湖南湘西湖南湘西120804安徽丰原安徽丰原铜铜陵中陵中药饮药饮片有限公司片有限公司刺芡刺芡7河北安国河北安国120904安徽丰原安徽丰原铜铜陵中陵中药饮药饮片有限公司片有限公司刺芡刺芡8江西武穴江西武穴081102安徽丰原安徽丰原铜铜陵中陵中药饮药饮片有限公司片有限公司刺芡刺芡9山山东枣东枣庄庄120615山山东东省微山湖水省微山湖水产
28、产品品购销购销中心中心刺芡刺芡10安徽安安徽安庆庆120712安徽安安徽安庆庆市山泉水生蔬菜研究所市山泉水生蔬菜研究所刺芡刺芡11广广东东肇肇庆庆120907鼎湖区广利德鼎湖区广利德权权肇肇实实加工厂加工厂刺芡刺芡12广西桂林广西桂林120316江江苏苏先声在康先声在康药业药业有限公司有限公司刺芡刺芡13苏苏州南塘州南塘(去皮去皮)120610苏苏州市娄葑州市娄葑镇镇群力村群力村苏苏芡芡14苏苏州南塘州南塘(带带皮皮)121008苏苏州市娄葑州市娄葑镇镇群力村群力村苏苏芡芡15扬扬州宝州宝应应121115江江苏苏省宝省宝应县应县天然芡天然芡实实种植基地种植基地苏苏芡芡图图1VE标标准品及准品及
29、样样品的品的HPLC图图Fig.1HPLCchromatogramsofvitaminEfromstandardandsampleA:VE标标准品准品B:芡:芡实样实样品品1、-生育酚生育酚2、+-生育酚生育酚3、-生育酚生育酚AB样样品品产产地地-生育酚生育酚mg/g+-生育酚生育酚mg/g-生育酚生育酚mg/g总总VE含量含量mg/g湖北洪湖湖北洪湖1.04150.48470.18201.7082云南云南丽丽江江1.05570.53540.20291.7940福建蒲田福建蒲田1.29040.50480.17291.9681江江苏苏建湖建湖1.03260.49000.15871.6813四川
30、成都四川成都0.99520.73100.26221.9884湖南湘西湖南湘西1.24860.54790.25342.0499河北安国河北安国0.73410.57890.19641.5094江西武穴江西武穴0.87500.63290.22201.7299山山东枣东枣庄庄1.10010.41780.41991.9378安徽安安徽安庆庆1.52820.48020.15002.1584广广东东肇肇庆庆1.34700.46480.13781.9496广西桂林广西桂林0.90770.35400.11781.3795苏苏州南塘州南塘(去皮去皮)1.05720.46560.18911.7119苏苏州南塘州南塘
31、(带带皮皮)1.13310.48980.18591.8088扬扬州宝州宝应应0.66870.45870.20351.3309表表 不同不同产产地芡地芡实实中不同构型中不同构型VE含量含量测测定定结结果果Tab.sultofdeterminationofdifferentconfigurationofvitaminEfrom15habitats5、 不同产地芡实中不同产地芡实中8种无机元素含量比较种无机元素含量比较产产地地K KCaCaNaNaMgMgCuCuZnZnFeFeMnMn江江苏苏1072.251072.25 89.5089.50165.13165.13251.36251.363.72
32、3.7236.8136.8185.7485.7421.8721.87广广东东1682.121682.12 332.15332.15122.44122.44193.55193.552.562.5641.3741.3765.3665.3618.1618.16山山东东756.46756.46225.34225.34443.61443.6146.1746.175.685.6835.9435.94143.52143.5226.1226.12湖北湖北1635.351635.35 84.5184.51183.32183.32215.26215.268.198.1952.2752.2751.3451.3422
33、.2822.28 表表1 1 不同不同产产地芡地芡实实中中8 8种无机元素含量种无机元素含量 g/gg/g,n=6n=6) 微波消解微波消解-火焰原子吸收光谱法测定了火焰原子吸收光谱法测定了4 种不同产地芡实种不同产地芡实中中Ca、Mg、Cu、Zn、Fe、Mn、K和和Na的含量,比较了不的含量,比较了不同产地芡实中同产地芡实中w(Zn)/w (Cu)比值。结果表明,广东芡)比值。结果表明,广东芡实中实中w(Zn)/w(Cu)比值最高,山东和湖北芡实中)比值最高,山东和湖北芡实中w(Zn)/w(Cu)较低,从微量元素的医疗保健功效角度)较低,从微量元素的医疗保健功效角度来看,广东芡实的品质优于其
34、他产地。来看,广东芡实的品质优于其他产地。6、汞污染芡实根部过氧化物酶活性的动态变化汞污染芡实根部过氧化物酶活性的动态变化重金属离子重金属离子污污染染对对植物植物过过氧化物氧化物酶酶活性的影响活性的影响有着有着时间时间和和浓浓度上的度上的动态变动态变化。汞化。汞污污染染对对芡芡实实根部根部过过氧化物氧化物酶酶活性随活性随时间时间延延长长呈下降呈下降趋势趋势。在受害。在受害时时间间相同的条件下,相同的条件下,酶酶活性随着培养液中活性随着培养液中Hg2+浓浓度的度的升高而呈升高而呈现现下降的下降的趋势趋势。7、芡实对重金属富集的动态变化芡实对重金属富集的动态变化印度加尔班地区印度加尔班地区的九大湖
35、泊中芡实的九大湖泊中芡实对重金属对重金属Pb、Cr、Cu、Cd富集能力有富集能力有差异性,但总体呈差异性,但总体呈现现PbCrCuCd的的趋势,且存在年份趋势,且存在年份上的不同。提示芡上的不同。提示芡实对重金属的富集实对重金属的富集性与水体及土壤沉性与水体及土壤沉积物中重金属含量积物中重金属含量有关。有关。五、芡的资源有效利用五、芡的资源有效利用发明专利7项、实用新型专利5项、 外观设计专利3项(研究专利)印度兰契大学、南京中医药大学、云南大学、枣庄学院、九江学院、扬州大学(研究单位)芡实糕芡实营养片芡实维钙片芡实鳗钙片芡实香肠芡实冰淇淋其他产品芡实酒芡实饮料芡实面包芡实罐头32体内体内抗衰
36、老抗衰老体外体外抗氧化抗氧化1抗疲劳抗疲劳耐缺氧耐缺氧1、芡实多糖、果壳多酚体内外抗氧化实验、芡实多糖、果壳多酚体内外抗氧化实验(一)药效学研究(一)药效学研究2024/9/6多糖多酚(1)一般情况(饮食情况、体重变化、脏器系数)一般情况(饮食情况、体重变化、脏器系数)1.1抗疲劳耐缺氧实验抗疲劳耐缺氧实验1、芡实多糖、果壳多酚体内外抗氧化实验、芡实多糖、果壳多酚体内外抗氧化实验(2)行为学实验(力竭游泳)行为学实验(力竭游泳)糖原糖原血糖血糖乳酸乳酸疲劳产生延缓疲劳产生延缓LDH乳酸乳酸疲劳消除加速疲劳消除加速运动指标运动指标(3)抗应激实验(常压耐缺氧)抗应激实验(常压耐缺氧)对肝对肝NO
37、不明显不明显代谢指标NOSNO缺氧损伤缺氧损伤BUN蛋白质利用蛋白质利用缺氧损伤缺氧损伤代谢消耗代谢消耗(4)运动与代谢指标(糖原、)运动与代谢指标(糖原、LDH、NO、BUN)1.2体内抗衰老实验研究体内抗衰老实验研究(1)一般情况测定)一般情况测定饮食情况、体重变化、脏器指数饮食情况、体重变化、脏器指数(2)抗氧化酶活性)抗氧化酶活性T-SOD(黄嘌呤氧化酶法)、(黄嘌呤氧化酶法)、CAT(钼酸铵法)、(钼酸铵法)、GSH-PX(DTNB法)、法)、HYP(二甲氨基苯甲醛比色法)(二甲氨基苯甲醛比色法)(3)脂质过氧化产物水平)脂质过氧化产物水平MDA(TBA)、)、MAO(苄胺比色法)(
38、苄胺比色法)(4)组织病理切片)组织病理切片(光镜)(光镜)1、芡实多糖、果壳多酚体内外抗氧化实验、芡实多糖、果壳多酚体内外抗氧化实验(1)一般情况测定)一般情况测定体内抗衰老实验研究较空白组、模型组提高显著提高SOD成功(2)抗氧化酶活性)抗氧化酶活性2024/9/6成功成功启动抗氧化防御机制启动抗氧化防御机制自由基攻击较为严重并出现了脂质过氧化损伤自由基攻击较为严重并出现了脂质过氧化损伤2024/9/6成功成功多糖启动抗氧化防御机制无差异2024/9/6成功启动抗氧化防御机制启动抗氧化防御机制成功成功启动抗氧化防御机制自由基攻击较为严重并出现了脂质过氧化损伤自由基攻击较为严重并出现了脂质过
39、氧化损伤启动抗氧化防御机制(3)脂质过氧化产物水平)脂质过氧化产物水平2024/9/6成功成功成功启动抗氧化防御机制启动抗氧化防御机制2024/9/6“-”无病变,“+”轻度变性,“+”中度变性,“+”重度变性。病理切片结果(4)组织病理切片)组织病理切片2024/9/6(1)清除羟基自由基()清除羟基自由基(OH)活性的测定)活性的测定(2)清除超氧负离子自由基()清除超氧负离子自由基(O2-)活性的测定)活性的测定(3)清除对亚硝基活性的测定)清除对亚硝基活性的测定(4)清除)清除DPPH自由基活性的测定自由基活性的测定(5)猪油()猪油(POV值)值)(6)还原能力)还原能力1.3体外抗
40、氧化研究体外抗氧化研究1、芡实多糖、果壳多酚体内外抗氧化实验、芡实多糖、果壳多酚体内外抗氧化实验2024/9/60.095 1.214 0.737 1.687 0.463 0.999 0.873 1.7492024/9/60.129 1.719 0.783 1.5530.001 0.034 0.026 0.826 0.001 纯化多酚接近VC、TBHQ2024/9/60.498 1.253 0.986 2.2671.270 2.075 1.670 3.0212024/9/6明显最强多糖及种皮多酚药效研究结果小结多糖及种皮多酚药效研究结果小结1.1.抗疲劳耐缺氧试验结果表明,与抗疲劳耐缺氧试验结
41、果表明,与VCVC、VEVE组相比,组相比,各剂量多糖组和种皮多酚组小鼠负重游泳时间和各剂量多糖组和种皮多酚组小鼠负重游泳时间和常压密闭耐缺氧时间均延长,显著提高了小鼠的常压密闭耐缺氧时间均延长,显著提高了小鼠的抗应激能力,且量效关系明显。抗应激能力,且量效关系明显。2.2.小鼠活动能力、食量、精神状态、日均体重增加小鼠活动能力、食量、精神状态、日均体重增加量、脏器系数明显优于空白对照组和阳性药物组,量、脏器系数明显优于空白对照组和阳性药物组,增加小鼠肝糖原、肌糖原、降低血清增加小鼠肝糖原、肌糖原、降低血清BUNBUN、提高小、提高小鼠血清鼠血清LDHLDH、增加组织和血清中、增加组织和血清中
42、NONO含量,均证实芡含量,均证实芡实多糖及其种皮多酚确实具有延缓衰老的作用。实多糖及其种皮多酚确实具有延缓衰老的作用。多糖及种皮多酚药效研究结果小结多糖及种皮多酚药效研究结果小结3.3.对对D-D-半乳糖致小鼠衰老模型,能提高组织和血清半乳糖致小鼠衰老模型,能提高组织和血清中中SODSOD、CATCAT、GSH-PxGSH-Px、HypHyp活性,降低活性,降低MAOMAO活性,活性,阻断脂质过氧化过程,减少阻断脂质过氧化过程,减少MDAMDA的生成,从而有效的生成,从而有效地清除地清除ROSROS。同时能够缓解造模所致衰老小鼠的胸。同时能够缓解造模所致衰老小鼠的胸腺和脾脏等免疫器官指数下降
43、。腺和脾脏等免疫器官指数下降。4.4.体外抗氧化试验证实,芡实多糖、种皮多酚能有体外抗氧化试验证实,芡实多糖、种皮多酚能有效清除效清除OHOH、O O2-2-等自由基,对亚硝胺合成以及等自由基,对亚硝胺合成以及亚硝基清除有一定作用,对亚硝基清除有一定作用,对DPPHDPPH及其灵敏,对及其灵敏,对含脂食品的自动氧化防止有一定帮助,还原力大含脂食品的自动氧化防止有一定帮助,还原力大于同浓度下阳性药于同浓度下阳性药VCVC和和TBHQTBHQ,可用于一些因氧自,可用于一些因氧自由基损伤所引起的疾病的治疗。由基损伤所引起的疾病的治疗。 小鼠水迷小鼠水迷宫行为学宫行为学考察考察D-D-半乳糖半乳糖造模
44、造模小鼠小鼠4242天天平均日增平均日增重及脏器重及脏器指数比较指数比较小鼠旷小鼠旷场行为场行为学考察学考察2、芡实提取物的抗衰老实验芡实提取物的抗衰老实验中医学认为,髓由肾中精中医学认为,髓由肾中精气化生,髓聚而成脑,故气化生,髓聚而成脑,故补肾填精类中药是治疗脑补肾填精类中药是治疗脑病之首选。病之首选。75注:与空白组相比,注:与空白组相比,#P0.05,#P0.01;与模型组;与模型组相比,相比,*P0.05,*P0.01。2.1对小鼠体重的影响对小鼠体重的影响2.2芡实提取物对小鼠脏器指数的影响芡实提取物对小鼠脏器指数的影响只有只有芡实正丁醇提取物低剂量组芡实正丁醇提取物低剂量组各脏器
45、指数与模型组相比均有明显差异;各脏器指数与模型组相比均有明显差异;只有在只有在脾指数指标脾指数指标上,芡实各提取物组与模型组相比均有明显差异;上,芡实各提取物组与模型组相比均有明显差异;只有在只有在肾指数指标肾指数指标上,芡实各提取物组与空白组相比均有明显差异。上,芡实各提取物组与空白组相比均有明显差异。77Page 772.3水迷宫行为学考察水迷宫行为学考察Morris水迷宫装置水迷宫装置外观图外观图衰老组衰老组正常组正常组芡实组芡实组2.42.4小鼠旷场试验小鼠旷场试验外观图外观图正常组正常组衰老组衰老组芡实组芡实组2.5组织学考察(脑衰老及器官衰老情况)组织学考察(脑衰老及器官衰老情况)
46、肝、心、脑肝、心、脑抗氧化指标抗氧化指标测定测定T-AOCT-SODGSH-PxMDA脑衰老指标脑衰老指标测定测定Na+-K+-ATPaseChATAChENOS芡实提取物对衰老小鼠体内脏器组织芡实提取物对衰老小鼠体内脏器组织T-AOC的影响的影响综合分析,在总抗氧化能力上,只有芡实正丁醇提取物对三种脏器组综合分析,在总抗氧化能力上,只有芡实正丁醇提取物对三种脏器组织均有作用,且效果较优。织均有作用,且效果较优。芡实提取物对衰老小鼠脑组织芡实提取物对衰老小鼠脑组织NOS和和Na+K+-ATP酶的影响酶的影响芡实各提取物组小鼠脑组织芡实各提取物组小鼠脑组织Na+K+-ATP酶活力均较模型组明显增
47、强。酶活力均较模型组明显增强。芡实各提取物组小鼠脑组织芡实各提取物组小鼠脑组织AChE活性均较模型组明显降低,活性均较模型组明显降低,除乙酸乙酯提取物低剂量组外除乙酸乙酯提取物低剂量组外,其它各提取物组小,其它各提取物组小鼠脑组织鼠脑组织ChAT活性均较模型组显著性升高。其中,在活性均较模型组显著性升高。其中,在脑脑组织组织ChAT活性活性表现方面,芡实各提取物作用均较明显。表现方面,芡实各提取物作用均较明显。芡实提取物对衰老小鼠脑组织芡实提取物对衰老小鼠脑组织TChE和和ChAT的影响的影响模型模型组海组海马区马区p53基因基因蛋白蛋白的表的表达达脑组脑组织海织海马区马区形态形态及及p53基
48、因基因蛋白蛋白表达表达正常正常组海组海马区马区p53基因基因蛋白蛋白表达表达BADCEFGHA.空白对照组空白对照组B.D-gal模型组模型组C.芡实乙醇提取物高剂量组芡实乙醇提取物高剂量组D.芡实乙醇提取物低剂量组芡实乙醇提取物低剂量组E.芡实乙酸乙酯提取物芡实乙酸乙酯提取物高剂量组高剂量组F.芡实乙酸乙酯提取物低剂量组芡实乙酸乙酯提取物低剂量组G.芡实正丁醇提取物高剂量组芡实正丁醇提取物高剂量组H.芡实正丁醇提取物低剂量组芡实正丁醇提取物低剂量组各组小鼠海马区细胞形态学的改变(各组小鼠海马区细胞形态学的改变(200)对对模模型型小小鼠鼠海海马马细细胞胞形形态态学学的的影影响响SH-SY5Y
49、神经母细胞(神经母细胞(H2O2氧化损伤保护实验)氧化损伤保护实验)实验结果表明,实验结果表明,18.75mol/L以下浓度以下浓度H2O2对对SH-SY5Y细胞存活率影响细胞存活率影响不明显不明显。而自。而自18.75-600mol/L的的H2O2作用于作用于SH-SY5Y细胞细胞4h后,细胞存活率呈后,细胞存活率呈下降下降趋势,且与趋势,且与H2O2浓度有一定线性关系。浓度有一定线性关系。不同浓度不同浓度H2O2对对SH-SY5Y细胞存活率的影响细胞存活率的影响不同浓度芡实提取物对不同浓度芡实提取物对SH-SY5Y细胞氧化损伤的抑制率细胞氧化损伤的抑制率芡实各提取物有明显的细胞保护作用,可
50、抑制细胞免受氧化损伤,且随提取物芡实各提取物有明显的细胞保护作用,可抑制细胞免受氧化损伤,且随提取物浓度的升高,该表现越来越明显,其中尤以浓度的升高,该表现越来越明显,其中尤以正丁醇提取物正丁醇提取物的细胞保护作用最强。的细胞保护作用最强。芡实抗衰老研究小结n结果显示,芡实结果显示,芡实80%乙醇提取物、乙酸乙酯提取物和正丁乙醇提取物、乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物均能不同程度改善亚急性衰老小鼠的学习记忆能醇提取物均能不同程度改善亚急性衰老小鼠的学习记忆能力,提高小鼠脑、肝、心组织力,提高小鼠脑、肝、心组织T-AOC、T-SOD、GSH-Px 活性及脑组织活性及脑组织NOS、Na+K+-ATPa
51、se、ChAT 活性,减少活性,减少MDA 含量,降低含量,降低AChE 活性,抑制海马区细胞凋亡或病活性,抑制海马区细胞凋亡或病变,减少变,减少p53 基因蛋白表达。基因蛋白表达。n其中,芡实正丁醇提取物延缓衰老的作用强于其中,芡实正丁醇提取物延缓衰老的作用强于80%乙醇提乙醇提取物和乙酸乙酯提取物。取物和乙酸乙酯提取物。n芡实提取物延缓衰老的作用机制:可能是通过促进机体清芡实提取物延缓衰老的作用机制:可能是通过促进机体清除脂类过氧化物,增强组织抗氧化能力及提高脑内除脂类过氧化物,增强组织抗氧化能力及提高脑内ACh 含量等多方面共同实现的。含量等多方面共同实现的。芡实提取物芡实提取物GC-M
52、S 成分分析成分分析80%乙醇提取物乙酸乙酯提取物正丁醇提取物3.1种皮多酚提取工艺及质量标准种皮多酚提取工艺及质量标准3 3. . 综合利用综合利用与开发与开发2024/9/6综合利用环境保护石油废弃物地质鞣革蓄电池3.1种皮多酚提取工艺及质量标准种皮多酚提取工艺及质量标准3 3. . 综合利用综合利用与开发与开发2024/9/6种皮多酚含测 方法:中国药典2010版一部附录62XB可吸附多酚含量(mg/g) = 总酚含量(mg/g)-不被吸附的多酚含量(mg/g)3.1种皮多酚提取工艺及质量标准种皮多酚提取工艺及质量标准最佳条件为:最佳条件为:丙酮浓度丙酮浓度57.438%、液料、液料比比
53、56.880mL/g、超声时间、超声时间23.358min,此时芡实种皮多酚的提取率达此时芡实种皮多酚的提取率达114.00mg/g。考虑到实际操作的便利,确定芡实种考虑到实际操作的便利,确定芡实种皮的超声提取工艺条件为:皮的超声提取工艺条件为:丙酮浓度丙酮浓度57%、液料比、液料比57mL/g、超声时间、超声时间23min。2024/9/6方差来源方差来源平方和平方和自由度自由度均方和均方和F值值P值值ProbF回回归归模型模型968.299107.5913.340.00130.01A-丙丙酮浓酮浓度度2.6912.690.330.5818B-液料比液料比280.051280.0534.73
54、0.00060.01C-超声超声时间时间90.69190.6911.250.01220.05AB24.92124.923.090.1222AC4.0314.030.500.5023BC6.3716.370.790.4035A2246.601246.6030.580.00090.01B298.39198.3912.200.01010.05C2158.171158.1719.610.00300.01残差残差56.4578.06失失拟项拟项55.87318.62129.750.0002 超声时间超声时间 丙酮浓度丙酮浓度 Y=111.36-0.57958*A+5.9166*B+3.3669*C-2.
55、4960*A*B+1.0041*A*C+1.2624*B*C-7.6530*A2-4.8340*B2-6.1290*C23.1种皮多酚提取工艺及质量标准种皮多酚提取工艺及质量标准纯化多酚D101大孔树脂纯化3.1种皮多酚提取工艺及质量标准种皮多酚提取工艺及质量标准2024/9/6水分水分%总总抽出物抽出物%可溶物可溶物%不溶物不溶物%单单宁宁%非非单单宁宁%单单宁宁纯纯度度%总颜总颜色色红红黄黄蓝蓝pH9.8938.3430.667.6816.1415.5252.6469.831.837.10.94.02 芡实种皮原料技术指标 芡实种皮栲胶技术指标 水分水分%总总固物固物%可溶物可溶物%不溶物
56、不溶物%单单宁宁%非非单单宁宁%单单宁宁纯纯度度%沉淀沉淀%总颜总颜色色红红黄黄蓝蓝pH1.5298.4878.2920.1960.3418.9577.0710.0957.624.032.61.04.53脱色后即可脱色后即可当栲胶使用当栲胶使用指指标标名称名称毛毛杨杨梅栲胶梅栲胶落叶松栲胶落叶松栲胶余甘栲胶余甘栲胶橡碗栲胶橡碗栲胶单单宁宁/%65.052.065.062.0不溶物不溶物/%6.06.04.53.5水分水分/%12.012.012.012.0沉淀沉淀/%6.07.05.05.0pH值值4.5-5.54.5-5.54.5-5.53.3-4.0总颜总颜色色26.057.020.038
57、.0红红9.031.06.09.5黄黄17.025.514.028.0蓝蓝00.500.53.1种皮多酚提取工艺及质量标准种皮多酚提取工艺及质量标准3.23.2芡茎有效利用与开发芡茎有效利用与开发3.2.1芡茎营养性成分分析芡茎营养性成分分析(1)氨基酸含量测定)氨基酸含量测定(2)无机元素测定)无机元素测定(3)多糖、水溶性蛋白、脂肪含量)多糖、水溶性蛋白、脂肪含量3.2.2 芡茎多糖提取、分离、体外抗氧化研究芡茎多糖提取、分离、体外抗氧化研究3.2.3 芡茎总酚、总黄酮提取芡茎总酚、总黄酮提取3.2.4 降血糖试验降血糖试验(1)芡茎多糖降血糖试验)芡茎多糖降血糖试验(2)芡茎总酚提取物降
58、血糖试验)芡茎总酚提取物降血糖试验(3)芡茎不同提取部位降血糖试验)芡茎不同提取部位降血糖试验(4)对正常小鼠血糖调节试验)对正常小鼠血糖调节试验3.2.5调血脂试验调血脂试验对正常小鼠血脂的调节试验对正常小鼠血脂的调节试验3.2.6芡茎化学研究芡茎化学研究(1)芡茎不同提取部位的)芡茎不同提取部位的HPLC-MS分析分析(2)芡茎石油醚部位)芡茎石油醚部位GC-MS分析分析(3)芡茎不同提取部位化学成分分析)芡茎不同提取部位化学成分分析3.23.2芡茎有效利用与开发芡茎有效利用与开发芡茎的研究结论芡茎的研究结论n1.1.芡茎样品中均含有芡茎样品中均含有1717种氨基酸,不同产地芡茎的氨基酸种
59、氨基酸,不同产地芡茎的氨基酸含量有较大差异。各样品含有的氨基酸所占比例基本相近。含量有较大差异。各样品含有的氨基酸所占比例基本相近。n总氨基酸含量和必需氨基酸含量均高于藕、水芹、茭白等总氨基酸含量和必需氨基酸含量均高于藕、水芹、茭白等常见的水生蔬菜,符合常见的水生蔬菜,符合FAO/WHO对理想蛋白源中必需氨对理想蛋白源中必需氨基酸与总氨基酸比为基酸与总氨基酸比为40%左右,必需氨基酸与非必需氨基左右,必需氨基酸与非必需氨基酸比在酸比在60%以上的规定。以上的规定。n2.体外抗氧化实验结果显示:芡茎粗多糖及各分离组分均体外抗氧化实验结果显示:芡茎粗多糖及各分离组分均具有一定的清除具有一定的清除D
60、PPH自由基、自由基、ABTS自由基、羟基自由自由基、羟基自由基能力及还原能力;其中芡茎粗多糖基能力及还原能力;其中芡茎粗多糖EFPP的体外抗氧化的体外抗氧化能力明显高于各分离组分。能力明显高于各分离组分。n 芡茎多糖能够降低四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠血清芡茎多糖能够降低四氧嘧啶诱发糖尿病小鼠血清TG及及TC水平,增加水平,增加HDLC水平,降低水平,降低LDLC水平。水平。芡茎的研究结论芡茎的研究结论n3 3.芡茎总酚提取物能降低四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠血糖芡茎总酚提取物能降低四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠血糖水平、增加血清胰岛素水平、葡萄糖激酶及葡萄糖水平、增加血清胰岛素水平、葡萄糖激酶及葡萄糖-6
61、-磷酸磷酸脱氢酶水平,对体重及血清糖化蛋白的影响不大。脱氢酶水平,对体重及血清糖化蛋白的影响不大。n芡茎多酚提取物能够增加四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠肝、芡茎多酚提取物能够增加四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠肝、肾肾T-AOC能力、能力、 GSH-Px、CAT、SOD水平,降低肝、肾水平,降低肝、肾MDA及及MAO水平水平n 4.芡茎不同萃取部位能降低四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠血芡茎不同萃取部位能降低四氧嘧啶诱发的糖尿病小鼠血糖水平、增加血清胰岛素水平、葡萄糖激酶及葡萄糖糖水平、增加血清胰岛素水平、葡萄糖激酶及葡萄糖-6-磷磷酸脱氢酶水平,对体重的影响不大。酸脱氢酶水平,对体重的影响不大。 3.33.3芡芡
62、现已有专利情况现已有专利情况专利名称专利名称专利号专利号用途用途芡芡实实的人工培育方法的人工培育方法200710053581.5栽培栽培芡芡实实种子剥壳机种子剥壳机02207847.9采收加工采收加工茯苓芡茯苓芡实实糕及其制作工糕及其制作工艺艺200510050110.X保健保健产产品品一种芡一种芡实实保健茶保健茶200510086179.8保健保健产产品品覆盆芡覆盆芡实实胶囊及其制胶囊及其制备备工工艺艺200610124607.6补肾补肾助阳助阳嫩芡嫩芡实实去壳机去壳机200610110584.3采收加工采收加工盘盘式芡式芡实实脱壳机脱壳机200910011785.1采收加工采收加工一种芡一
63、种芡实营实营养粉及其生养粉及其生产产方法方法200910251515.8保健保健产产品品一种芡一种芡实实健体糖健体糖201010100509.5保健保健产产品品一种芡一种芡实实剥壳机剥壳机200620047029.6采收加工采收加工辊辊筒式芡筒式芡实实种子剥壳机种子剥壳机200820133399.0采收加工采收加工一种干芡一种干芡实实种子剥壳机种子剥壳机200820181861.4采收加工采收加工盘盘式芡式芡实实脱壳机脱壳机200920014067.5采收加工采收加工智能化芡智能化芡实实剥壳机剥壳机200920009105.8采收加工采收加工WaterpurificantmethodsUS09
64、/882,014环环境治理境治理HerbalcompositionsforprostateconditionsUS10/345,158抗前列腺炎抗前列腺炎WaterpurificantUS08/897,772环环境治理境治理Medicinal composition for treating dermatosis chronic disease and preparation methodthereofCN101708294(A)治治疗疗皮肤病皮肤病MedicinalcompositionfortonifyingkidneyandYangCN101703675(A)补肾补肾Enterogast
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