第一节 磺胺类药物分析•治疗细菌感染性疾病的化学合成药物治疗细菌感染性疾病的化学合成药物 磺胺类药物的发现，开创了化学治磺胺类药物的发现，开创了化学治疗的新纪元疗的新纪元 –使死亡率很高的细菌性传使死亡率很高的细菌性传染疾病得到控制染疾病得到控制. 典型药物典型药物 第一节 磺胺类药物的分析 一、结构与性质一、结构与性质（一）基本结构与代表药物（一）基本结构与代表药物芳伯氨基芳伯氨基磺酰胺基磺酰胺基 磺胺异噁唑磺胺异噁唑 （二）性质（二）性质 1. 两性化合物 芳伯氨基（弱碱性）和磺酰胺基（酸性） 2. 芳伯氨基 可用重氮化—偶合反应鉴别或亚硝酸钠滴定法测定含量 3. 与金属离子反应 磺酰胺基氮原子上的氢比较活泼，可与某些金属离子（如硫酸铜）反应生成沉淀 4. 与生物碱沉淀试剂的反应与生物碱沉淀试剂的反应5. 紫外与红外吸收光谱特征紫外与红外吸收光谱特征 二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）芳香第一胺反应（二）与金属离子反应——硫酸铜磺胺异恶唑 淡棕色→暗绿色↓ （四）IR（五）色谱法（三）（三）UV 复方磺胺甲噁唑片的鉴别：复方磺胺甲噁唑片的鉴别： 1. 取本品的细粉适量（约相当于磺胺甲噁唑取本品的细粉适量（约相当于磺胺甲噁唑0.2g），加甲醇），加甲醇10ml，振摇，滤过，取滤液作为，振摇，滤过，取滤液作为供试品溶液；另取磺胺甲噁唑对照品供试品溶液；另取磺胺甲噁唑对照品0.2g与甲氧与甲氧苄啶对照品苄啶对照品40mg，加甲醇，加甲醇10ml溶解，作为对照溶解，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录品溶液照薄层色谱法（附录ⅤB）试验，吸取）试验，吸取上述两种溶液各上述两种溶液各5 l，分别点于同一硅胶，分别点于同一硅胶GF254薄薄层板上，以三氯甲烷层板上，以三氯甲烷-甲醇甲醇-二甲基甲酰胺二甲基甲酰胺（（20∶ ∶2∶ ∶1）为展开剂，展开，晾干，置紫外灯）为展开剂，展开，晾干，置紫外灯（（254nm）下检视供试品溶液所显两种成分的）下检视供试品溶液所显两种成分的主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相主斑点的位置和颜色应与对照品溶液的主斑点相同 2. 在含量测定项下记录的色谱图在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液两主峰的保留时间应中，供试品溶液两主峰的保留时间应与对照品溶液两主峰的保留时间一致与对照品溶液两主峰的保留时间一致 以上两项可选做一项以上两项可选做一项 三、含量测定三、含量测定 （一）亚硝酸钠滴定法 Ch.P.（（2010）磺胺嘧啶锌软膏的含量测定：）磺胺嘧啶锌软膏的含量测定： 取本品约取本品约5g，精密称定，置烧杯中，加，精密称定，置烧杯中，加三氯甲烷三氯甲烷30ml，微温搅拌使基质溶解，放冷，，微温搅拌使基质溶解，放冷，照永停滴定法（附录照永停滴定法（附录Ⅶ A），用亚硝酸钠滴），用亚硝酸钠滴定液定液(0.1mol/L)滴定。
每滴定每1ml亚硝酸钠滴定液亚硝酸钠滴定液（（0.1mol/L）相当于）相当于30.00mg的的C20H18N8O4S2Zn·2H2O （二）非水酸量法（二）非水酸量法 磺胺异噁唑磺胺异噁唑 Ch.P.（（2010）） （三）紫外（三）紫外-可见分光光度法可见分光光度法 1．直接紫外分光光度法．直接紫外分光光度法 Ch.P（2005）复方磺胺嘧啶片中的磺胺嘧啶的含量测定 308nm直接测定，TMP无干扰 2. 双波长分光光度法 复方磺胺甲恶唑片的含量测定 Ch.P（2000） 磺胺甲恶唑 甲氧苄啶 测定波长 257nm 239nm 参比波长 ～304nm ～295nmCh.P（2005）HPLCCh.P.（2010）HPLC 复方磺胺嘧啶片的含量测定 Ch.P（2005） 磺胺嘧啶 308nm直接测定 甲氧苄啶 测定波长 ～277.4nm 参比波长 308nmCh.P.（2010）HPLC （四）高效液相色谱法（四）高效液相色谱法 Ch.P.（（2010）联磺甲氧苄啶片的）联磺甲氧苄啶片的含量测定：含量测定： 色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈键合硅胶为填充剂；以乙腈-水水-三乙胺三乙胺（（200∶ ∶799∶ ∶1）（用氢氧化钠试液或冰醋酸调）（用氢氧化钠试液或冰醋酸调节节pH值至值至5.9）为流动相；检测波长为）为流动相；检测波长为240nm。
理论板数按甲氧苄啶峰计算不低于理论板数按甲氧苄啶峰计算不低于4000，磺胺，磺胺甲噁唑峰、磺胺嘧啶峰与甲氧苄啶峰的分离度甲噁唑峰、磺胺嘧啶峰与甲氧苄啶峰的分离度应符合要求应符合要求 测定法测定法 取本品取本品20片，精密称定，研细，精片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于磺胺甲噁唑密称取适量（约相当于磺胺甲噁唑22mg），置），置100ml量瓶中，加量瓶中，加0.1mol/L盐酸溶液适量，超声盐酸溶液适量，超声处理使主成分溶解，用处理使主成分溶解，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液20μl，注入，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取磺胺甲噁唑对照液相色谱仪，记录色谱图；另取磺胺甲噁唑对照品、磺胺嘧啶对照品和甲氧苄啶对照品各适量，品、磺胺嘧啶对照品和甲氧苄啶对照品各适量，精密称定，加精密称定，加0.1mol/L盐酸溶液溶解并定量稀释盐酸溶液溶解并定量稀释制成每制成每1ml中含磺胺甲噁唑中含磺胺甲噁唑0.22mg、磺胺嘧啶、磺胺嘧啶0.22 mg与甲氧苄啶与甲氧苄啶89μg的溶液，摇匀，同法测的溶液，摇匀，同法测定。
按外标法以峰面积计算，即得按外标法以峰面积计算，即得 例例1. 与硫酸铜生成草绿色沉淀的是与硫酸铜生成草绿色沉淀的是A. 磺胺甲恶唑磺胺甲恶唑B. 磺胺嘧啶磺胺嘧啶C. 甲氧苄啶甲氧苄啶D. 磺胺异恶唑磺胺异恶唑E. 磺胺醋酰钠磺胺醋酰钠 例例2. 中中国国药药典典收收载载磺磺胺胺甲甲恶恶唑唑的的含含量量测定方法是测定方法是A. 非水溶液滴定法非水溶液滴定法B. 紫外分光光度法紫外分光光度法C. 氮测定法氮测定法D. NaNO2滴定法滴定法E. 碘量法碘量法 例例3. 双双波波长长分分光光光光度度法法测测定定复复方方磺磺胺胺甲甲恶恶唑唑片片时时，，选择两个测定波长的原则是选择两个测定波长的原则是 A. 磺胺甲恶唑在两波长处吸收度相等磺胺甲恶唑在两波长处吸收度相等 B. 磺胺增效剂甲氧苄啶（磺胺增效剂甲氧苄啶（TMP）在两波长处）在两波长处吸收度相等吸收度相等 C. 磺胺甲恶唑在两波长处吸收度不等磺胺甲恶唑在两波长处吸收度不等 D. 磺胺甲恶唑在两波长处的吸收度的差值应磺胺甲恶唑在两波长处的吸收度的差值应尽量大尽量大 E. 磺胺增效剂甲氧苄啶在两波长处的吸收度磺胺增效剂甲氧苄啶在两波长处的吸收度差值应尽量小差值应尽量小 第二节 喹诺酮类药物的分析 一、结构与性质一、结构与性质（一）基本结构与代表药物（一）基本结构与代表药物 吡哌酸吡哌酸 诺氟沙星诺氟沙星 环丙沙星环丙沙星 氧氟沙星氧氟沙星 氟罗沙星氟罗沙星 依诺沙星依诺沙星 司帕沙星司帕沙星 （二）性质（二）性质 1. 酸碱两性 2. 不稳定性 3. 有机氟化物的反应 4. 紫外与红外吸收光谱特征 二、鉴别试验二、鉴别试验 （一）化学鉴别法1. 与丙二酸的呈色反应与丙二酸的呈色反应 盐酸左氧氟沙星片的鉴别：取本品细粉盐酸左氧氟沙星片的鉴别：取本品细粉适量（约相当于左氧氟沙星适量（约相当于左氧氟沙星10mg），置干），置干燥具塞试管中，加丙二酸约燥具塞试管中，加丙二酸约10mg与醋酐与醋酐0.5ml，在水浴中加热，在水浴中加热5~10分钟，溶液显红分钟，溶液显红棕色。
棕色 2. 盐酸盐与甲磺酸盐的鉴别盐酸盐与甲磺酸盐的鉴别Ch.P.（（2010）甲磺酸培氟沙星的鉴别：）甲磺酸培氟沙星的鉴别： 取本品约取本品约30mg，加氢氧化钠，加氢氧化钠0.2g，加水数，加水数滴，溶解后置酒精灯上小火蒸干至炭化，加水滴，溶解后置酒精灯上小火蒸干至炭化，加水数滴与数滴与2mol/L盐酸溶液盐酸溶液3～～4ml，缓缓加热，即，缓缓加热，即产生二氧化硫气体，能使湿润的碘酸钾淀粉试产生二氧化硫气体，能使湿润的碘酸钾淀粉试纸（取滤纸条浸入含有纸（取滤纸条浸入含有5%碘酸钾溶液与淀粉指碘酸钾溶液与淀粉指示液的等体积混合液中湿透后，取出干燥，即示液的等体积混合液中湿透后，取出干燥，即得）显蓝色得）显蓝色 （二）光谱法（三）色谱法 三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查 （一）溶液澄清度的检查 （二）吸光度 喹诺酮类药物在可见光区无吸喹诺酮类药物在可见光区无吸收，收，通过控制在通过控制在420～～450nm波长处波长处的吸光度，以控制有色杂质的限量的吸光度，以控制有色杂质的限量 司帕沙星中吸光度的检查：取本品，司帕沙星中吸光度的检查：取本品，精密称定，加精密称定，加0.1mol/L氢氧化钠溶液溶氢氧化钠溶液溶解并定量稀释制成每解并定量稀释制成每1ml中含中含0.4mg的溶的溶液，照紫外液，照紫外-可见分光光度法（附录可见分光光度法（附录Ⅳ A），在），在440nm的波长处测定吸光度，的波长处测定吸光度，不得过不得过0.15。
（三）有关物质 HPLC（四）光学异构体 左氧氟沙星中光学异构体的检查：左氧氟沙星中光学异构体的检查： 取本品适量，加流动相溶解并稀释制成每取本品适量，加流动相溶解并稀释制成每1ml中约含中约含1.0mg的溶液，作为供试品溶液，精密的溶液，作为供试品溶液，精密量取适量，用流动相定量稀释制成每量取适量，用流动相定量稀释制成每1ml中约含中约含10 g的溶液，作为对照溶液照高效液相色谱的溶液，作为对照溶液照高效液相色谱法（附录法（附录V D）测定用十八烷基硅烷键合硅胶）测定用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以为填充剂；以硫酸铜硫酸铜D-苯丙氨酸溶液苯丙氨酸溶液（取（取D-苯丙苯丙氨酸氨酸1.32g与硫酸铜与硫酸铜1g，加水，加水1000ml溶解后，用氢溶解后，用氢氧化钠试液调节氧化钠试液调节pH值至值至3.5））-甲醇（甲醇（82∶ ∶18）为）为流动相；柱温流动相；柱温40℃，检测波长为，检测波长为294nm 取氧氟沙星对照品适量，加流动相溶解并定量取氧氟沙星对照品适量，加流动相溶解并定量稀释制成每稀释制成每1ml中约含中约含0.2mg的溶液，取的溶液，取20µl注注入液相色谱仪，记录色谱图，右氧氟沙星与左入液相色谱仪，记录色谱图，右氧氟沙星与左氧氟沙星依次流出，右、左旋异构体峰的分离氧氟沙星依次流出，右、左旋异构体峰的分离度应符合要求。
取对照溶液度应符合要求取对照溶液20µl注入液相色谱注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的约为满量程的25%，再精密量取供试品溶液和，再精密量取供试品溶液和对照溶液各对照溶液各20 l，分别注入液相色谱仪，记录，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液色谱图中右氧氟沙星峰面色谱图，供试品溶液色谱图中右氧氟沙星峰面积不得大于对照溶液主峰面积（积不得大于对照溶液主峰面积（1.0%） （五）残留溶剂（六）防腐剂 Ch.P.（（2010）盐酸环丙沙星滴眼液采用）盐酸环丙沙星滴眼液采用HPLC法检查防腐剂苯扎溴铵或羟苯乙酯法检查防腐剂苯扎溴铵或羟苯乙酯，规定，规定供试品中如含苯扎溴铵或羟苯乙酯，应为标示量供试品中如含苯扎溴铵或羟苯乙酯，应为标示量的的80%～～120%；氧氟沙星滴眼液亦采用；氧氟沙星滴眼液亦采用HPLC法检查防腐剂苯扎溴铵，规定供试品中如含苯扎法检查防腐剂苯扎溴铵，规定供试品中如含苯扎溴铵，应为标示量的溴铵，应为标示量的80%～～120%诺氟沙星滴诺氟沙星滴眼液除采用眼液除采用HPLC法检查防腐剂羟苯甲酯、羟苯法检查防腐剂羟苯甲酯、羟苯丙酯外，还采用丙酯外，还采用双硫腙滴定法检查硫柳汞双硫腙滴定法检查硫柳汞。