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1、 组织培养组织培养营养繁殖营养繁殖扦插扦插嫁接嫁接压条压条 课题课题1 1 菊花的组织培养菊花的组织培养活动活动活动活动1 1:什么是细胞分化?细胞分化的原因和结果?什么是细胞分化?细胞分化的原因和结果?什么是细胞分化?细胞分化的原因和结果?什么是细胞分化?细胞分化的原因和结果?愈伤组织是怎样形成的?有什么特点?愈伤组织是怎样形成的?有什么特点?愈伤组织是怎样形成的?有什么特点?愈伤组织是怎样形成的?有什么特点?组织培养的过程?以及组织培养的理论基础?组织培养的过程?以及组织培养的理论基础?组织培养的过程?以及组织培养的理论基础?组织培养的过程?以及组织培养的理论基础?脱分化、再分化?脱分化、
2、再分化?脱分化、再分化?脱分化、再分化?影响组织培养的因素?影响组织培养的因素?影响组织培养的因素?影响组织培养的因素?菊花组织培养的过程,及注意的问题?菊花组织培养的过程,及注意的问题?菊花组织培养的过程,及注意的问题?菊花组织培养的过程,及注意的问题?是指在人工培养基上,离体是指在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、培养植物的器官、组织、细胞,细胞,并并使其生长、增殖、分化以及再使其生长、增殖、分化以及再生长生长成植成植株的技术。株的技术。 组织培养组织培养1、细胞分化的原因是什么?、细胞分化的原因是什么?在特定的时间和空间条件下,基因在特定的时间和空间条件下,基因的选择性表达。的选择
3、性表达。思考:思考:(一)植物组织培养的基本过程(一)植物组织培养的基本过程细胞分化细胞分化个体发育中细胞在形态、结构和生理功能个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程上出现稳定性差异的过程 植物组织培养过程示意图植物组织培养过程示意图 2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的?、上面的示意图中还有什么地方不够完善的?没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等。没有进行灭菌处理,试管也没有做密封等。离体的植物离体的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化根根芽芽植植物物体体植物组织培养的基本过程植物组织培养的基本过程愈伤组织愈伤组织愈伤组织是通过
4、细胞分裂细胞分裂形成的,其细胞排列疏松而无规则疏松而无规则,高度液泡化液泡化呈无定形无定形状态的薄壁薄壁细胞。(二)影响植物组织培养的因素(二)影响植物组织培养的因素 材料的选择、材料的选择、营养成分、激素、一定的外界因素(温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等)。MS固体培养基成分及比例固体培养基成分及比例同微生物培养基相比,同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?培养基的配方有哪些明显的不同?微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植培养基则需提供大量无机营养,无机盐
5、混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。物生长必须的大量元素和微量元素两大类。阅读课文,思考以下问题阅读课文,思考以下问题1. 同微生物培养基相比,同微生物培养基相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同?培养基的配方有哪些明显的不同?2、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?这些步骤的、你认为组织培养过程中,成功的关键有哪些?这些步骤的适宜条件是什么?适宜条件是什么?组织的脱分化及愈伤组织的再分化。组织的脱分化及愈伤组织的再分化。植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分植物组织培养过程中,影响植物细胞脱分化、再分化的最重要因素是化的最重要因素是植物植物激素激素。激素配比对组织培养
6、的影响激素配比对组织培养的影响在培养基中需要添加在培养基中需要添加生长素生长素和和细胞分裂素细胞分裂素等植物激素,其等植物激素,其浓度浓度、使用的先后顺序使用的先后顺序、用量的比例用量的比例等都影响结果。等都影响结果。 高高 利于利于根分化、抑制芽的形成根分化、抑制芽的形成生长素生长素/细胞分细胞分裂素裂素 低低 利于芽的形成利于芽的形成适中适中 利于愈伤组织的形成利于愈伤组织的形成 活动活动活动活动2 2:用自己的用自己的用自己的用自己的话话把菊花把菊花把菊花把菊花组织组织培养的操作流程培养的操作流程培养的操作流程培养的操作流程给给描述出来描述出来描述出来描述出来? ?(提(提(提(提示:怎
7、样配制示:怎样配制示:怎样配制示:怎样配制MSMS培养基培养基培养基培养基? ?外植体消毒应如何进行外植体消毒应如何进行外植体消毒应如何进行外植体消毒应如何进行? ?接种、接种、接种、接种、培养、移栽时应注意什么问题培养、移栽时应注意什么问题培养、移栽时应注意什么问题培养、移栽时应注意什么问题? ? )1、外植体带菌、外植体带菌2、培养基及接种、培养基及接种器具灭菌不彻底器具灭菌不彻底3、接种操作时带入、接种操作时带入4、环境不清洁、环境不清洁结结合录像合录像外植体灭菌与接种操作外植体灭菌与接种操作,谈谈组织培养污染的主,谈谈组织培养污染的主要途径及怎样预防污染?要途径及怎样预防污染?污染的预防措施污染的预防措施(一)防止外植体带菌(二)保证培养基及接种器具彻底灭菌(三)操作人员严格遵守无菌操作规程(四)保证接种与培养环境清洁试评价下列操作正确与否试评价下列操作正确与否本课题内容小结菊花组织培养基础知识基础知识实验操作实验操作植物体的组植物体的组织培养织培养影响组织培养影响组织培养的因素的因素细胞分化细胞分化细胞全能性细胞全能性组织培养过程组织培养过程营养营养激素激素环境条件环境条件MS固体培养基制备固体培养基制备外植体消毒外植体消毒接种接种培养培养移栽移栽栽培栽培