制剂新技术 之脂质体技术 赵晓晓 201104011413 脂质体电镜图脂质体电镜图 •脂质体•脂质体（liposome）：是一种类似生物膜结构的双分子层微小囊泡脂质体可用于转基因，或制备的药物，利用脂质体可以和细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部 •脂质体的分类脂质体的分类•1.脂质体按照所包含类脂质双分子层的层数不同，分为单室脂质体和多室脂质体•小单室脂质体(SUV)：粒径约0.02～0.08um；大单室脂质体 (LUV）为单层大泡囊，粒径在0.1～lum•多层双分子层的泡囊称为多室脂质体 (MIV)，粒径在1～5um之间•2.按照结构分：单室脂质体，多室脂质体，多囊脂质体•3.按照电荷分：中性脂质体，负电荷脂质体，正电荷脂质体 单室脂质体的结构图单室脂质体的结构图 多室脂质体的结构图多室脂质体的结构图 脂质体的研究热点亲水性侧链具有空间稳定和长循环作用磷脂包封的药物嫁接的配体具有主动靶向功能同时具有主动靶向和立体稳定的脂质体同时具有主动靶向和立体稳定的脂质体 •脂质体的组成和结构：脂质体的组成和结构：•脂质体系由磷脂为膜材及附加剂（如胆固醇）组成。
•磷脂为两性物质，其结构上有亲水及亲油基团•膜材：•磷脂类：卵磷脂、大豆磷脂、脑磷脂、合成磷脂如磷脂酰乙 醇 胺 （ PE） 、 合 成 二 棕 榈 酰 -DL-α磷 脂 酰 胆 碱（Synthetic dipalmitoyl-DLα-phosphatidyl choline 简称DPPC）、合成磷脂酰丝氨酸（Phosphatidyl Serine, PS）、磷脂酰肌醇（Phosphatidyl inostiols简称PI）等•胆固醇类：胆固醇、胆固醇乙酰脂、β-谷甾醇、牛胆酸钠等 胆固醇结构 脂质体的作用特点脂质体的作用特点•1.脂质体的靶向性 •（1）被动（天然）靶向性：•（2）物理和化学靶向性：•（3）主动靶向性：•2.脂质体的长效作用（缓释性） •3.脂质体降低药物毒性 •4.脂质体能保护被包封的药物，提高药物稳定性 •5.脂质体的细胞亲和性与组织相容性 •脂质体的性质：•1.1.相变温度相变温度•当升高温度时，脂质双分子层中酰基侧链从有序排列变为无序排列，这种变化会引起脂膜物理性质的一系列变化，可由“胶晶”态变为“液晶”态，膜的横切面增加，双分子层厚度减小，膜流动性增加，这种转变时的温度称为相变温度。
•2.2.脂质体荷电性脂质体荷电性•含酸性脂质，如磷脂酸（PA）和磷脂酰丝氨酸（PS）等的脂质体荷负电，含碱基（胺基）脂质，例如十八胺等的脂质体荷正电，不含离子的脂质体显电中性脂质体表面电性对其包封率、稳定性、靶器官分布及对靶细胞作用影响较大 •药物脂质体化的方法：•薄膜分散法•注入法•超生分散法•逆向蒸发法•冷冻干燥法•冻结溶解法•主动包封法 薄膜分散法•将磷脂等膜材溶于适量的氯仿中或其它有机溶剂中，然后减压蒸发旋转除去将磷脂等膜材溶于适量的氯仿中或其它有机溶剂中，然后减压蒸发旋转除去有机溶剂，使脂质在器壁形成薄膜，加入缓冲液，进行振摇，即得脂溶性有机溶剂，使脂质在器壁形成薄膜，加入缓冲液，进行振摇，即得脂溶性的药物加入到有机溶剂中与磷脂一起蒸发水溶性药物则溶于缓冲液中的药物加入到有机溶剂中与磷脂一起蒸发水溶性药物则溶于缓冲液中•通常，薄膜分散法形成的是大多室脂质体，粒径较大，在通常，薄膜分散法形成的是大多室脂质体，粒径较大，在1 1～～5μm5μm，且分布不，且分布不均匀，因此需要进一步通过其它技术以得到粒径大小均匀的大单室脂质体均匀，因此需要进一步通过其它技术以得到粒径大小均匀的大单室脂质体。
这些技术有干膜超声法、薄膜－振荡分散法、薄膜－均化法、薄膜挤压法这些技术有干膜超声法、薄膜－振荡分散法、薄膜－均化法、薄膜挤压法磷脂、胆固醇、药物(脂溶性)氯仿、乙醚旋转蒸发形成薄膜磷酸缓冲液搅拌脂质体 薄膜分散法示意图薄膜分散法示意图 •脂质体技术的重要设备•挤压模滤器：滤膜常用聚碳酸脂膜，孔径一般为0.03--0.1µm，可根据需要加以选用该设备广泛用于脂质体和亚微乳等制剂的研究和生产中•高压匀质机：是现代广泛使用的制备脂质体等纳米制剂的设备，由微型空压机，匀质阀，温控系统等组成 •自1965年，脂质体发现以来，至今已有十个脂质体产品上市（主要是抗肿瘤药物和抗菌药物），其中六个脂质体制剂是静脉给药将这些药物制成脂质体后，最显著的特点是提高药物的治疗指数，降低药物的毒副作用价格也菲然（如阿霉素脂质体注射剂，约8000元/支) 阿霉素脂质体注射剂•阿霉素脂质体注射液制剂研究 抗肿瘤和抗感染药物被包裹在脂质体中可以在某种程度上提高药物靶向性, 并大幅度地降低药物的毒副作用, 从而提高治疗指数脂质体包裹的阿霉素可明显地降低心脏毒性和皮肤毒性, 试验动物的存活率比游离药物对照组高。
•阿霉素脂质体注射剂对小鼠S- 180 实体瘤的抑制作用：体内给予阿霉素脂质体注射剂10 mg/ （kg·d），15mg/（kg·d）8 d，对小鼠S180 实体型的抑瘤率分别为67.7%和83.3%，与同样剂量阿霉素注射液组比较作用更强 表1 阿霉素脂质体注射剂 对S- 180 实体瘤抑瘤作用药物给药途径平均瘤量（g）抑瘤率（%）15 mg/kgDONP II.h0.825±0.30983.310 mg/kgDONPI.h1.598±0.59067.75 mg/kgDONPI.h2.904±0.62541.410 mg/kgDOXI.h2.385±0.64551.8生理盐水I.h4.951±1.0980 表2 阿霉素脂质体注射剂对S180 实体瘤模型的生命延长率药物给药途径生存天数（d）生命延长率（%）15 mg/kgDONPi.p28.4±3.4132.810 mg/kgDONPi.p23.4±5.792.85 mg/kg DONPi.p17.4±3.242.610 mg/kgDOXi.p20.6±4.662.8生理盐水i.p12.2±1.90 药物包封率的测定•包封率又称包裹率，包括重量包封率（包封率又称包裹率，包括重量包封率（QwQw）、体积包封率（）、体积包封率（QvQv）、药）、药脂包封比（脂包封比（EwEw）。
•包封率的测定方法有直接对制剂进行测定和分离出脂质体测定，常用包封率的测定方法有直接对制剂进行测定和分离出脂质体测定，常用的分离方法有：葡聚糖凝胶过滤法（分子筛法）、超滤膜过滤法、超的分离方法有：葡聚糖凝胶过滤法（分子筛法）、超滤膜过滤法、超速离心法、微型柱离心法和透析法等速离心法、微型柱离心法和透析法等•药物包封率的测定精密量取配置好的阿霉素脂质体样品, 加人有0.Zu m 的离心管, 低温超速离心3 0 m in, 取滤液测定吸光度, 计算游离阿霉素的浓度, 所给公式计算包封率•包封率= (1 一C 游离/ C 总量) x l0 0% 。