第八章肠杆菌科

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1、第八章第八章 肠杆菌科肠杆菌科 肠杆菌科细菌是一大群生物学性状近似的肠杆菌科细菌是一大群生物学性状近似的革兰氏阴性杆菌。多数是肠道的正常菌群,革兰氏阴性杆菌。多数是肠道的正常菌群,少数为病原菌。肠杆菌科细菌种类繁多,如少数为病原菌。肠杆菌科细菌种类繁多,如埃希菌属、沙门菌属、克雷伯菌属、变形杆埃希菌属、沙门菌属、克雷伯菌属、变形杆菌属等。菌属等。(Enterobacteriaceae)第一节第一节 埃希菌属埃希菌属 (Escherichia) 埃希菌属有埃希菌属有5个种,个种,其中最重要的是大肠其中最重要的是大肠埃希菌俗称大肠杆菌埃希菌俗称大肠杆菌(E.coli),是最常见是最常见的临床分离菌

2、。的临床分离菌。一、形态及染色特性一、形态及染色特性 革兰氏阴性小杆菌,散在或成对,周毛菌,有菌毛。革兰氏阴性小杆菌,散在或成对,周毛菌,有菌毛。二、培养特性二、培养特性1.普通培养基上生长良好,光滑、普通培养基上生长良好,光滑、湿润、半透明、灰白色菌落;湿润、半透明、灰白色菌落;2. 麦康凯琼脂上形成红色菌落,麦康凯琼脂上形成红色菌落,伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属光泽菌落;光泽菌落;3.致病菌株在绵羊血平板上呈致病菌株在绵羊血平板上呈型溶血;型溶血;4.生化特性:糖发酵试验(发酵乳糖)生化特性:糖发酵试验(发酵乳糖)和和IMViC(+-)试验。试验。 H2S阴性。

3、阴性。麦康凯培养基麦康凯培养基伊红美蓝琼脂伊红美蓝琼脂三糖铁培养基三糖铁培养基I(吲哚吲哚)、M(MR)、)、Vi (VP)、 C(枸橼酸盐利用试验)(枸橼酸盐利用试验)三、抗原及血清型三、抗原及血清型(一)抗原一)抗原1.菌体抗原(菌体抗原(O抗原):抗原):其成分为其成分为LPS的多糖侧链。的多糖侧链。173种,耐热,种,耐热,1个菌株仅含个菌株仅含1种。种。2.荚膜抗原(荚膜抗原(K抗原):抗原):其成分多数为多糖(其成分多数为多糖(K88、K99为蛋白质)为蛋白质),80种,种, 1个菌株可含个菌株可含1-2种甚至无。根据对热的耐受程度不同分种甚至无。根据对热的耐受程度不同分L、A和和

4、B型。型。3.3. 鞭毛抗原(鞭毛抗原(H抗原):抗原):其成分为蛋白质,不耐热,其成分为蛋白质,不耐热,55种,种, 1个菌株仅含个菌株仅含1种。种。4.(二)血清型(抗原式)(二)血清型(抗原式)5. 表示方法:表示方法:O:K:H, 如:如: O8:K23(L):H19 四、致病性四、致病性根据毒力因子与发病机制不同,将病原性大肠杆菌分为根据毒力因子与发病机制不同,将病原性大肠杆菌分为5类:类:(1)产肠毒素大肠杆菌()产肠毒素大肠杆菌(ETEC)(2)产类志贺毒素大肠杆菌(产类志贺毒素大肠杆菌(SLTEC)(3)肠致病性大肠杆菌(肠致病性大肠杆菌(EPEC)(4)尿道致病性大肠杆菌(尿

5、道致病性大肠杆菌(UPEC)(5)败血性大肠杆菌(败血性大肠杆菌(SEPEC) (一)产肠毒素大肠杆菌(一)产肠毒素大肠杆菌(ETEC) 引起人和动物腹泻,主要毒力因子有两类:引起人和动物腹泻,主要毒力因子有两类:1. 黏附素(定居因子):黏附素(定居因子):菌毛,能黏附宿主的小肠上皮菌毛,能黏附宿主的小肠上皮 细胞,虽不是直接的致病因子,却是首要的毒力因子细胞,虽不是直接的致病因子,却是首要的毒力因子。2.肠毒素:肠毒素:分泌到胞外的一种蛋白质性毒素。分泌到胞外的一种蛋白质性毒素。3. (1)不耐热肠毒素()不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT)4. 对热敏感,

6、可转变成类毒素,具有对热敏感,可转变成类毒素,具有A和和B亚单位。亚单位。5. (2)耐热肠毒素()耐热肠毒素(heat-stable enterotoxin,ST)6. 耐热,分子量小,无免疫原性。耐热,分子量小,无免疫原性。(二)产类志贺毒素大肠杆菌(二)产类志贺毒素大肠杆菌(SLTEC)引起猪水肿病,有两类毒力因子:引起猪水肿病,有两类毒力因子:1.黏附性菌毛黏附性菌毛2. F18,有助于细菌在肠黏膜上皮细胞定居和繁有助于细菌在肠黏膜上皮细胞定居和繁殖。殖。2.致水肿病致水肿病2型类志贺毒素型类志贺毒素3. 直接导致该病发生的主要毒力因子。直接导致该病发生的主要毒力因子。 五、诊断五、诊

7、断n标本采集:标本采集: 根据临床疾病类型的不同,采集适当的根据临床疾病类型的不同,采集适当的标本。如败血症病例采集病变的内脏组织,腹泻病例标本。如败血症病例采集病变的内脏组织,腹泻病例采集小肠内容物。采集小肠内容物。n检查方法:检查方法: (一)分离培养:选择培养基(一)分离培养:选择培养基 (二)生化试验:糖发酵、(二)生化试验:糖发酵、IMViC试验、试验、H2S阴性(三阴性(三 糖铁培养基)。糖铁培养基)。 (三)血清学试验:玻片凝集试验鉴定血清型(三)血清学试验:玻片凝集试验鉴定血清型六、防治六、防治目前国内外已有多种疫苗预防大肠杆菌目前国内外已有多种疫苗预防大肠杆菌病,如全菌灭活苗

8、、亚单位疫苗、类毒病,如全菌灭活苗、亚单位疫苗、类毒素苗、基因工程疫苗等。素苗、基因工程疫苗等。第二节第二节 沙门氏菌属(沙门氏菌属(Salmonella)绝大多数沙门氏菌对人绝大多数沙门氏菌对人和动物有致病性,人类和动物有致病性,人类食物中毒的主要病原之食物中毒的主要病原之一,在公共卫生上占有一,在公共卫生上占有重要地位。重要地位。一、形态及染色一、形态及染色与与大肠杆菌相似,大肠杆菌相似,除鸡白痢和鸡伤寒除鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌无鞭毛不沙门氏菌无鞭毛不运动外,其余均以运动外,其余均以周鞭毛运动。周鞭毛运动。二、培养及生化特性二、培养及生化特性麦康凯培养基:发酵乳糖(大肠杆菌);麦康凯培养基

9、:发酵乳糖(大肠杆菌); 不发酵乳糖(沙门氏菌)不发酵乳糖(沙门氏菌)在在选择培养基上因不发酵乳糖而呈无色菌落。选择培养基上因不发酵乳糖而呈无色菌落。IMViC试验:试验:-+-+;多数菌株;多数菌株H2S阳性。阳性。三糖铁培养基三糖铁培养基三、抗原及血清型三、抗原及血清型(一)抗原(一)抗原1 .菌体抗原(菌体抗原(O抗原):抗原):其成分为其成分为LPS的多糖侧链。的多糖侧链。58种,耐种,耐 热,热,1个菌株可含多种,以阿拉伯数字表示。个菌株可含多种,以阿拉伯数字表示。2. 荚膜抗原(荚膜抗原(K抗原):抗原):与毒力有关,又称与毒力有关,又称Vi抗原。有的菌株有,抗原。有的菌株有, 有

10、的菌株无。有的菌株无。 3.鞭毛抗原(鞭毛抗原(H抗原):抗原):其成分为蛋白质,不耐热,其成分为蛋白质,不耐热,63种种, 分为两相:分为两相: (1)第)第1相(特异相):小写英文字母表示相(特异相):小写英文字母表示 (2)第)第2相(非特异相):阿拉伯数字表示相(非特异相):阿拉伯数字表示n表示方法:表示方法: O抗原:第抗原:第1相相H抗原:第抗原:第2相相H抗原抗原 如:如: 1,4,5,12:i : 1,2 有有Vi抗原的,则表示为:抗原的,则表示为:(二)血清型(抗原式)(二)血清型(抗原式)O抗原:抗原: Vi抗原:第抗原:第1相相H抗原:第抗原:第2相相H抗原抗原四、致病性

11、四、致病性多数具有致病性,是一种重要的人畜共患病原菌多数具有致病性,是一种重要的人畜共患病原菌,很容易在动物与动物、动物与人、人与人之间间接很容易在动物与动物、动物与人、人与人之间间接或直接传播。根据对宿主适应性不同,可分为:或直接传播。根据对宿主适应性不同,可分为:1.专嗜性:专嗜性:如鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌如鸡白痢、鸡伤寒沙门氏菌2.2. 偏嗜性:偏嗜性:如猪霍乱沙门氏菌如猪霍乱沙门氏菌3.3. 泛嗜性:泛嗜性:如肠炎沙门氏菌如肠炎沙门氏菌 (一)分离培养:选择培养基(一)分离培养:选择培养基 (二)生化试验:糖发酵、(二)生化试验:糖发酵、IMViC试验、试验、H2S阳性(三阳性(三 糖

12、铁培养基)。糖铁培养基)。 (三)血清学试验:玻片凝集试验鉴定血清型(三)血清学试验:玻片凝集试验鉴定血清型五、诊断五、诊断与与大肠杆菌的鉴别诊断:大肠杆菌的鉴别诊断:被检材料被检材料分离培养分离培养三糖铁琼脂斜面三糖铁琼脂斜面普通琼脂斜面普通琼脂斜面涂涂 片片 镜镜 检检生化反应生化反应血清型鉴定血清型鉴定n 弧菌属(弧菌属(VibrioVibrio) 副溶血弧菌副溶血弧菌( (V. V. parahaemolyticusparahaemolyticus) ) 鳗弧菌(鳗弧菌(V. V. anguillarumanguillarum) n气单胞菌属(气单胞菌属(AeromonasAeromo

13、nas) 代表种:嗜水气单胞菌代表种:嗜水气单胞菌 (A. A. hydrophilahydrophila) 弧菌科(弧菌科(Vibrionaceae)弧菌属(弧菌属(Vibrio)形态与培养特性形态与培养特性 革兰氏阴性弧状杆菌,革兰氏阴性弧状杆菌,血平板生长有溶血性。嗜盐,大多数血平板生长有溶血性。嗜盐,大多数副溶血弧菌菌株对弧菌抑制剂副溶血弧菌菌株对弧菌抑制剂O/129O/129不不敏感敏感, ,而鳗弧菌极为敏感。而鳗弧菌极为敏感。 致病性致病性 主要危害鳗、香鱼、鲑鳟鱼等海水鱼或咸水湖泊主要危害鳗、香鱼、鲑鳟鱼等海水鱼或咸水湖泊的养殖鱼。引致口部及体表出血性溃疡、肌肉、鳍部局灶的养殖鱼

14、。引致口部及体表出血性溃疡、肌肉、鳍部局灶性坏死及全身症状。性坏死及全身症状。 微生物学诊断微生物学诊断 n细菌分离培养细菌分离培养 n生化试验生化试验nO/129O/129敏感试验或敏感试验或血清学试验血清学试验嗜水气单胞菌嗜水气单胞菌 (A. hydrophila) 形形 态态 革兰氏阴性,短杆状,革兰氏阴性,短杆状, 有鞭毛和菌毛有鞭毛和菌毛。培养特性培养特性普通营养琼脂上即可生长普通营养琼脂上即可生长血平板上可产生血平板上可产生溶血圈溶血圈麦康凯培养基上生长良好麦康凯培养基上生长良好在弧菌选择培养基在弧菌选择培养基TCBS或在或在6% NaCl中不生长中不生长对弧菌抑制菌对弧菌抑制菌O

15、/129不敏感,多数不敏感,多数不发酵乳糖不发酵乳糖致致病病性性引引致致败败血血症症或或皮皮肤肤溃溃疡疡等等局局部部感感染染,是是水水生生动动物物尤尤其其是是鱼鱼类类最最常常见见的的致致病病菌菌。人人类类感感染染引引致致急急性胃肠炎等,是食品卫生检验的对象。性胃肠炎等,是食品卫生检验的对象。微生物学诊断微生物学诊断 n细菌分离培养细菌分离培养 n生化试验生化试验n判定致病性,则需检测胞判定致病性,则需检测胞外蛋白酶等毒力因子外蛋白酶等毒力因子判定标准:判定标准:分离菌应为革兰氏阴性,氧化酶阳性。生化指标为:葡萄分离菌应为革兰氏阴性,氧化酶阳性。生化指标为:葡萄糖产气,发酵甘露醇、蔗糖,利用阿拉伯糖,水解七叶苷糖产气,发酵甘露醇、蔗糖,利用阿拉伯糖,水解七叶苷/水杨苷,水杨苷,鸟氨酸脱羧酶阴性。鸟氨酸脱羧酶阴性。

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