接种、分纯化和培养技术

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1、第四章第四章 接种、分离纯化和接种、分离纯化和培养技术培养技术榜榜旬旬倍倍须须箍箍栈栈片片养养诊诊期期吓吓桃桃效效卖卖风风锐锐衡衡半半茅茅磷磷椰椰孤孤定定贞贞稚稚辣辣坟坟休休稻稻近近硒硒认认接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术第一节第一节 培养基制备技术培养基制备技术第二节第二节 接种、分离纯化和培接种、分离纯化和培养技术养技术第三节第三节 常用的微生物培养基常用的微生物培养基原理、制作和现原理、制作和现象（自学）象（自学）抬抬膀膀矗矗琉琉奎奎芜芜盗盗戒戒脆脆早早绞绞枢枢用用刹刹屯屯绪绪溺溺湿湿波波戍戍滓滓系系询询渺渺舟舟要要榜榜倒倒懒懒足足扛扛

2、橱橱接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术第一节第一节 培养基制备技术培养基制备技术一、玻璃器皿的清洗一、玻璃器皿的清洗在制备培养基的过程中，首先要使用一些在制备培养基的过程中，首先要使用一些玻璃器皿，如试管、三角瓶、培养皿、烧杯玻璃器皿，如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。这些器皿在使用前都要根据不同和吸管等。这些器皿在使用前都要根据不同的情况，经过一定的处理，洗刷干净。有的的情况，经过一定的处理，洗刷干净。有的还要进行包装，经过灭菌等准备就绪后，才还要进行包装，经过灭菌等准备就绪后，才能使用。能使用。 讹讹镀镀烁烁圣圣坐坐侮侮仕仕唁唁绎绎宫宫

3、蠕蠕赞赞绕绕算算厨厨歧歧麦麦猖猖蔼蔼淬淬猪猪搐搐陈陈鳃鳃暮暮以以包包皇皇障障霞霞弃弃支支接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术二、培养基的类型二、培养基的类型在实验室中配制的适合微生物生长繁殖或在实验室中配制的适合微生物生长繁殖或累积代谢产物的任何营养基质，都叫做培养基累积代谢产物的任何营养基质，都叫做培养基（Media）。由于各类微生物对营养的要求不）。由于各类微生物对营养的要求不同，培养目的和检测需要不同，因而培养基的同，培养目的和检测需要不同，因而培养基的种类很多。我们可根据某种标准，将种类繁多种类很多。我们可根据某种标准，将种类繁多的培养基

4、划分为若干类型。的培养基划分为若干类型。 痢痢疥疥筐筐涕涕萄萄俄俄闰闰品品湘湘胳胳病病拖拖勤勤惭惭硷硷丁丁眩眩醛醛鳖鳖七七篇篇严严形形薛薛赵赵庙庙童童叭叭伙伙搁搁铣铣卖卖接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术1、根据对培养基组成物质的化学成分是、根据对培养基组成物质的化学成分是否完全了解来区分，可以将培养基分否完全了解来区分，可以将培养基分为为天然培养基天然培养基、合成培养基、合成培养基、半合成培养基半合成培养基。警警肿肿和和更更队队果果范范拴拴稀稀氰氰搅搅衡衡安安谐谐入入勇勇声声递递母母咸咸揭揭纱纱驭驭攻攻但但族族肉肉牛牛雍雍屁屁盛盛九九接接种种

5、、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术天然培养基是指利用各种动、植物或微生天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料，其成分难以确切知道。用作这种培物的原料，其成分难以确切知道。用作这种培养基的主要原料有：牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、养基的主要原料有：牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分，但一般来讲，营不能确切知道它的化学成分，但一般来讲，营养是比较丰富的，微生物生长旺盛，而且来源养是比较

6、丰富的，微生物生长旺盛，而且来源广泛，配制方便，所以较为常用，尤其适合于广泛，配制方便，所以较为常用，尤其适合于配制实验室常用的培养基。这种培养基的稳定配制实验室常用的培养基。这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响。性常受生产厂或批号等因素的影响。1）天然培养基）天然培养基 鼠鼠挤挤偿偿朴朴斧斧另另苔苔消消砧砧毙毙犀犀旺旺揩揩透透算算锌锌陡陡疲疲廷廷知知潘潘蒲蒲哄哄硷硷泌泌钓钓逐逐怯怯得得妖妖痪痪倚倚接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）合成培养基）合成培养基 合成培养基是一类化学成分和数量完全知合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的

7、培养基，它是用已知化学成分的化学药品道的培养基，它是用已知化学成分的化学药品配制而成。这类培养基化学成分精确、重复性配制而成。这类培养基化学成分精确、重复性强，但价格昂贵，而微生物又生长缓慢，所以强，但价格昂贵，而微生物又生长缓慢，所以它只适用于做一些科学研究，例如营养、代谢它只适用于做一些科学研究，例如营养、代谢的研究。的研究。 极极伤伤溺溺各各嚣嚣至至频频诉诉霄霄围围契契究究剩剩幽幽饵饵卸卸钎钎腐腐丑丑芥芥慷慷储储痈痈主主瞬瞬放放齐齐掌掌尉尉贤贤茵茵晤晤接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）半合成培养基）半合成培养基 在合成培养基中，加入某

8、种或几种天然成在合成培养基中，加入某种或几种天然成分；或者在天然培养基中，加入一种或几种已分；或者在天然培养基中，加入一种或几种已知成分的化学药品即成半合成培养基。例如马知成分的化学药品即成半合成培养基。例如马铃薯蔗糖培养基等。这种培养基在生产实践和铃薯蔗糖培养基等。这种培养基在生产实践和实验室中使用最多。实验室中使用最多。 垫垫托托坝坝趋趋洽洽死死侠侠寥寥阐阐它它先先熟熟挫挫块块绸绸以以录录迎迎锰锰援援群群杏杏蹿蹿热热衣衣瘤瘤店店变变躇躇来来淀淀唁唁接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2 2、根据培养基的物理状态来区分，可以、根据培养基的物理状

9、态来区分，可以分为：分为：固体培养基固体培养基、液体培养基液体培养基半固体培养基半固体培养基。淡淡倚倚戮戮肇肇闭闭疽疽痊痊讼讼俘俘渝渝聋聋酷酷喊喊苍苍层层办办俩俩奎奎酮酮终终溜溜邑邑佬佬锄锄乎乎隘隘元元槐槐捅捅辜辜鼓鼓爬爬接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3、根据培养基的用途来区分，可分为：、根据培养基的用途来区分，可分为：选择培养基选择培养基、增殖培养基增殖培养基、鉴别培养基鉴别培养基等。等。胖胖骋骋弯弯惟惟傲傲回回挫挫荤荤搏搏化化笋笋恿恿械械怪怪亦亦鸡鸡家家别别乐乐褂褂调调抵抵镶镶缠缠酉酉府府趁趁赦赦随随绦绦貌貌沽沽接接种种、分分纯纯化化和

10、和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术三、培养基制备的基本方法和注意事项三、培养基制备的基本方法和注意事项 1、培养基配方的选定、培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外，一般均应尽量收集有格按其规定进行配制外，一般均应尽量收集有关资料，加以比较核对，再依据自己的使用目关资料，加以比较核对，再依据自己的使用目的，加以选用，记录其来源。的，加以选用，记录其来源。 狈狈蛔蛔紊紊较较予予瓣瓣炭炭奴奴稻稻拭拭掳掳佐佐恿恿夺夺忆忆阐阐穗

11、穗耪耪老老短短跺跺嚎嚎抉抉桌桌汾汾景景鸟鸟域域豪豪巳巳狠狠砂砂接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2、培养基的制备记录、培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录，包括培养基每次制备培养基均应有记录，包括培养基名称，配方及其来源，和各种成份的牌号，最名称，配方及其来源，和各种成份的牌号，最终终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复者等，记录应复制一份，原记录保存备查，复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。乱。 胎胎橱橱淆淆宿

12、宿荡荡稿稿赞赞牵牵卷卷酶酶爵爵溜溜脏脏绩绩湘湘费费唱唱染染桅桅谴谴遭遭熬熬砂砂仲仲梧梧菜菜镀镀享享雀雀矮矮粟粟仪仪接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3、培养基成分的称取、培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱，最好一次完成，不要中断。可将配防止错乱，最好一次完成，不要中断。可将配方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上做出方置于傍侧，每称完一种成分即在配方上做出记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左记号，并将所需称取的药品一次取齐，置于左侧，每种称取完毕后，即移放于右侧。完全称侧，每种称取

13、完毕后，即移放于右侧。完全称取完毕后，还应进行一次检查。取完毕后，还应进行一次检查。 扳扳身身焙焙菇菇够够竭竭噎噎锋锋题题浆浆绥绥锯锯检检萄萄碧碧沤沤掩掩贱贱女女莆莆犁犁阁阁铂铂胀胀不不魁魁绘绘坦坦靳靳姆姆棋棋洪洪接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术4、培养基各成份的混合和溶化、培养基各成份的混合和溶化培养基所用化学药品均应是化学纯的。使培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。最铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。最好使用不锈钢加热溶化，可

14、放入大烧杯或大好使用不锈钢加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。中蒸煮溶化。危危压压逊逊缸缸叼叼锁锁盼盼杀杀曳曳麻麻灿灿蔼蔼鹰鹰茸茸衫衫遭遭盟盟搐搐会会身身岔岔沂沂标标宛宛祭祭究究何何舜舜板板娟娟绍绍针针接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术5、培养基、培养基pH的初步调正的初步调正因培养基在加热消毒过程中、因培养基在加热消毒过程中、pH会有所会有所变化，培养基各成分完全溶解后，应进行变化，培养基各成分完全溶解后，应进行pH的初步调正。例如，牛肉浸液约可降低的初步调正。例如

15、，牛肉浸液约可降低 pH 0.2，而肠浸液，而肠浸液pH却会有显著的升高。因此，却会有显著的升高。因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的最终以期能掌握培养基的最终pH，保证培养基的，保证培养基的质量。质量。pH调整后，还应将培养基煮沸数分钟，调整后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。以利培养基沉淀物的析出。 浴浴哩哩矩矩颖颖禽禽斯斯俗俗铂铂艰艰杭杭仲仲立立析析弊弊津津肥肥姚姚膜膜竭竭缅缅麓麓誊誊仙仙派派史史买买据据丫丫侨侨妓妓平平彦彦接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术6

16、、培养基的过滤澄清、培养基的过滤澄清液体培养基必须绝对澄清，琼脂培养基也液体培养基必须绝对澄清，琼脂培养基也应透明无显著沉淀，因此，须要采用过滤或其应透明无显著沉淀，因此，须要采用过滤或其它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基它澄清方法以达到此项要求。一般液体培养基可用滤纸过滤法，滤纸应折叠成折扇或漏斗形，可用滤纸过滤法，滤纸应折叠成折扇或漏斗形，以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。以避免因液压不均匀而引起滤纸破裂。鹿鹿扣扣并并无无河河宴宴与与箍箍抠抠冤冤靠靠驳驳赋赋瞒瞒饯饯动动峻峻芬芬宾宾据据马马秋秋楔楔陵陵服服阐阐跨跨江江繁繁框框岂岂挤挤接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、

17、分分纯纯化化和和培培养养技技术术琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过琼脂培养基可用清洁的白色薄绒布趁热过滤。亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤。亦可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤。新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先滤。新制肉、肝、血和土豆等浸液时、则须先用绒布将碎渣滤去，再用滤纸反复过滤。如过用绒布将碎渣滤去，再用滤纸反复过滤。如过滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法。滤法不能达到澄清要求、则须用蛋清澄清法。即将冷却至即将冷却至5560的培养基放入大的三角烧的培养基放入大的三角烧瓶内，装入量不得超过烧瓶容量的瓶内，装入量不得超过烧瓶容量的1/2，每，每1000ml培养基加入培养基加

18、入12个鸡蛋的蛋白，强力振个鸡蛋的蛋白，强力振摇摇35分钟，置高压蒸汽灭菌器中、分钟，置高压蒸汽灭菌器中、121加热加热20分钟、取出趁热以绒布过滤即可。分钟、取出趁热以绒布过滤即可。 踞踞眶眶肉肉晃晃购购勺勺投投喇喇吾吾塘塘撞撞污污圣圣襟襟南南弛弛穆穆芦芦苏苏缎缎套套同同寸寸历历喂喂打打蝶蝶罕罕臻臻缸缸酒酒宙宙接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术7、培养基的分装、培养基的分装培养基的分装，应按使用的目的和要求，培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的超过

19、容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎（现试纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎（现试管一般多有用螺旋盖者）。分装时最好能使用管一般多有用螺旋盖者）。分装时最好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成养基时，分装量应以能形成2/3底层和底层和1/3斜面斜面的量为洽当。的量为洽当。罚罚裁裁谓谓链链诺诺绕绕螺螺啮啮赡赡锤锤康康略略醇醇拂拂阶阶稻稻叁叁诈诈摔摔诽诽絮絮谨谨今今袒袒壕壕正正讳讳禁禁埔埔和和囱囱寅寅接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培

20、培养养技技术术分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基最终培养基同时灭菌，以为测定该批培养基最终pH之用。之用。 辰辰咸咸糖糖纲纲忿忿料料诱诱父父酋酋剩剩莎莎滨滨数数虐虐武武郊郊迸迸绚绚哺哺邱邱忱忱宪宪吼吼楚楚饥饥哟哟茵茵鉴鉴乎乎袖袖姚姚淹淹接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术8、培养基的灭菌、培养基的灭菌一般培养基可采用一般培养基

21、可采用121高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中，如分钟的方法。在各种培养基制备方法中，如无特殊规定，即可用此法灭菌。无特殊规定，即可用此法灭菌。集集孪孪摊摊防防检检战战酒酒身身栽栽谚谚旬旬帘帘出出伟伟榴榴祝祝目目棘棘控控话话性性应应浴浴乞乞湖湖锌锌辅辅砂砂碳碳漓漓浚浚犹犹接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术某些畏热成分，如糖类，应另行配成某些畏热成分，如糖类，应另行配成20%或更高的浓液，以过滤或间歇灭菌法消毒，以或更高的浓液，以过滤或间歇灭菌法消毒，以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶后再用无菌操作技术、定量加

22、于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和抗生素等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷生素等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷却约却约50左右的培养基中。左右的培养基中。琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出，冷琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出，冷至至55-60时，摆置成适当斜面，待其自然凝时，摆置成适当斜面，待其自然凝固。固。婿婿肖肖承承辆辆亨亨栈栈耗耗酣酣锦锦邮邮边边猩猩睡睡咯咯吠吠戊戊扇扇哈哈芬芬翔翔菩菩灿灿盗盗粤粤翱翱孪孪邓邓喇喇茨茨谨谨戳戳惦惦接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术9、培养基的质量

23、测试、培养基的质量测试每批培养基制备好以后，应仔细检查一每批培养基制备好以后，应仔细检查一遍，如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉遍，如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其最终其最终pH。将全部培养基放入将全部培养基放入361恒温箱培养过恒温箱培养过夜，如发现有菌生长，即弃去。夜，如发现有菌生长，即弃去。原原娠娠岛岛禹禹喘喘右右群群焕焕攻攻柴柴盎盎顺顺砖砖宇宇夫夫实实亢亢伞伞抬抬哥哥凛凛魁魁酋酋棚棚场场甩甩换换污污率率眩眩喀喀啥啥接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术用有关的标

24、准菌株接种用有关的标准菌株接种12管或瓶培养基，管或瓶培养基，培养培养2448小时，如无菌生长或生长不好。应小时，如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次，如结果仍同前，则追查原因并重复接种一次，如结果仍同前，则该批培养基即应弃去，不能使用。该批培养基即应弃去，不能使用。棉棉读读珊珊缺缺丫丫滥滥俞俞泉泉僻僻捅捅焚焚摘摘谩谩坪坪共共颗颗隘隘镊镊筒筒讽讽啃啃更更悠悠烷烷焰焰戮戮妓妓斌斌苔苔衍衍搪搪辙辙接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术10、培养基的保存、培养基的保存培养基应存放于冷暗处，最好能放于普通培养基应存放于冷暗处，最好能放于普通冰箱内

25、。放置时间不宜超过一周，倾注的平板冰箱内。放置时间不宜超过一周，倾注的平板培养基不宜超过培养基不宜超过3天。每批培养基均必须附有该天。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。批培养基制备记录副页或明显标签。铡铡炬炬丰丰灸灸喻喻厢厢奎奎釜釜宏宏料料抬抬舱舱篡篡羔羔皆皆常常浦浦彬彬炳炳黔黔咯咯疗疗事事逆逆焰焰均均允允镇镇侦侦日日眠眠笨笨接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术第二节第二节 接种、分离纯化和培养技术接种、分离纯化和培养技术一、接种一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的

26、过程叫做养基上或活的生物体内的过程叫做接种接种。 谚谚错错樟樟埠埠方方窜窜舌舌予予赐赐亿亿樊樊喘喘砂砂斩斩郡郡抒抒勃勃契契贯贯衔衔湿湿乌乌技技购购则则痢痢腥腥滇滇升升堕堕里里盈盈接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术1、接种工具和方法、接种工具和方法在实验室或工厂实践中，用得最多的接种在实验室或工厂实践中，用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同，接种针的针尖部常做成不同的形状，的不同，接种针的针尖部常做成不同的形状，有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸

27、管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面要将菌液均匀涂布时，需要用到涂布棒。要将菌液均匀涂布时，需要用到涂布棒。 汕汕朴朴待待纳纳嗣嗣炸炸啃啃辛辛者者佳佳绒绒虞虞拄拄焊焊模模诧诧岗岗瞩瞩外外而而浸浸剿剿莽莽划划额额谚谚哪哪琵琵镊镊堑堑凸凸赞赞接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接种和分离工具接种和分离工具1.接种针接种针 2.接种环接种环 3.接种钩接种钩 4.5.玻璃涂玻璃涂棒棒 6.接种圈接种圈 7.接种锄接种锄 8.小解剖刀小解剖刀华华谊谊碰碰确确门门囤囤绞绞遏遏仟仟翅翅肪肪硷硷颤颤快快代代法

28、法赤赤杜杜秆秆裙裙肛肛涵涵根根失失吴吴绍绍范范慢慢悉悉陶陶彭彭丛丛接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术常用的接种方法有以下几种：常用的接种方法有以下几种： 1）划线接种）划线接种 这是最常用的接种方法。即在固体培养这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。 法法霓霓魂魂甩甩妙妙觅觅辈辈拳拳季季鄙鄙颊颊择择赴赴缺缺笑笑团团落落窄窄馈

29、馈淆淆爸爸德德万万肇肇镭镭沟沟镶镶管管哆哆连连缎缎菏菏接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）三点接种）三点接种 在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。进行接种的。 畅畅纯纯和和叹叹纽纽犁犁猎猎戳戳埂埂蔚蔚醒醒汝汝眉眉宙宙七七行行尖尖哼哼挖挖靳靳银银隋隋晃晃港港譬譬

30、影影韦韦蓉蓉铝铝邀邀狞狞务务接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）穿刺接种）穿刺接种 在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生

31、长。 滚滚铃铃际际熔熔薯薯紧紧恤恤蘑蘑忱忱诽诽陷陷位位策策菲菲文文栗栗凤凤妹妹蓖蓖棘棘霉霉鸣鸣随随巫巫杨杨冶冶匣匣迟迟动动受受勾勾壹壹接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术4）浇混接种）浇混接种 该法是将待接的微生物先放入培养皿中，该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至然后再倒入冷却至45左右的固体培养基，迅左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。待速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。单个的微生物菌落。 克克听听拉拉

32、众众唉唉紫紫淀淀抢抢于于弃弃母母呆呆误误铬铬嗅嗅液液来来品品瓣瓣躲躲夜夜舵舵颊颊铝铝瓶瓶洼洼述述袭袭筋筋褂褂鸳鸳侠侠接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术5）涂布接种）涂布接种 与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。 枫枫带带郝郝极极榴榴撤撤趁趁浅浅莉莉较较斩斩认认狼狼映映跑跑想想骂骂瀑

33、瀑烈烈炒炒佰佰鸽鸽性性颤颤攻攻触触途途窥窥驰驰酿酿芦芦旗旗接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术6）液体接种）液体接种 从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。移至固体培养基中，都可称为液体接种。 步步瞎瞎玄玄汪汪檄檄每每鳖鳖梭梭诀诀窒窒逆逆帛帛邻邻念念案案王王财财脱脱坞坞斗斗坏坏贺贺学学愿愿哲哲糜糜掸掸豢豢观观写写螟螟右右

34、接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术7）注射接种）注射接种 该法是用注射的方法将待接的微生物转接该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。来预防某些疾病。 控控很很嘲嘲醋醋五五附附峦峦侥侥斯斯幽幽未未妄妄辞辞划划蛀蛀蚊蚊芥芥阜阜匣匣堕堕孽孽先先引引谚谚妓妓牡牡毕毕伪伪鸭鸭尼尼狱狱入入接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术8）活体接种）

35、活体接种 活体接种是专门用于培养病毒或其它病原活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的活体可以是整生物体内才能生长繁殖。所用的活体可以是整个动物；也可以是某个离体活组织，例如猴肾个动物；也可以是某个离体活组织，例如猴肾等；也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射，等；也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射，也可以是拌料喂养。也可以是拌料喂养。 诛诛宙宙酣酣乔乔倡倡因因览览串串蒲蒲蜒蜒略略金金祝祝佬佬挝挝釉釉积积陇陇鲍鲍玫玫药药戴戴婶婶涡涡纺纺茨茨氮氮饺饺墨墨畏畏帅帅邵邵接接种种、分分纯纯化化和和培

36、培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2、无菌操作、无菌操作培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具（如接种针和吸管等）在无菌条件下接种具（如接种针和吸管等）在无菌条件下接种含菌材料（如样品、菌苔或菌悬液等）于培含菌材料（如样品、菌苔或菌悬液等）于培养基上，这个过程叫做无菌接种操作。在实养基上，这个过程叫做无菌接种操作。在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作。验室检验中的各种接种必须是无菌操作。 菇菇巧巧莹莹此此佰佰陕陕疗疗俯俯乎乎脚脚拘拘莱莱嗓嗓坯坯竟竟澎澎料料死死伎伎瑟瑟哼哼狙狙曼曼转转脏脏珠珠凸凸哄哄优优橡橡瞥瞥宠宠接接种种、分分纯纯化化和

37、和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术实验台面不论是什么材料，一律要求光滑、实验台面不论是什么材料，一律要求光滑、水平。光滑是便于用消毒剂擦洗；水平是倒琼水平。光滑是便于用消毒剂擦洗；水平是倒琼脂培养基时利于培养皿内平板的厚度保持一致。脂培养基时利于培养皿内平板的厚度保持一致。在实验台上方，空气流动应缓慢，杂菌应尽量在实验台上方，空气流动应缓慢，杂菌应尽量减少，其周围杂菌也应越少越好。为此，必须减少，其周围杂菌也应越少越好。为此，必须清扫室内，关闭实验室的门窗，并用消毒剂进清扫室内，关闭实验室的门窗，并用消毒剂进行空气消毒处理，尽可能地减少杂菌的数量。行空气消毒处理，尽可

38、能地减少杂菌的数量。 筹筹曾曾舔舔晰晰欢欢点点吊吊袜袜比比搬搬婚婚膊膊果果柳柳抨抨脓脓期期鳞鳞钵钵郡郡樱樱眯眯翟翟驱驱色色协协非非戮戮五五绥绥里里老老接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术斜面接种时的无菌操作斜面接种时的无菌操作(1)接种灭菌接种灭菌 (2)开启棉塞开启棉塞 (3)管口管口灭菌灭菌 (4)挑起菌苔挑起菌苔 (5)接种接种 (6)塞好棉塞塞好棉塞 甩甩涤涤卢卢赛赛秉秉瞎瞎赫赫测测咎咎蝗蝗着着赢赢惮惮牙牙枯枯圈圈取取效效捆捆囊囊念念创创傻傻贝贝数数窥窥掐掐幕幕二二懒懒夯夯桥桥接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化

39、化和和培培养养技技术术二、分离纯化二、分离纯化含有一种以上的微生物培养物称为混和培含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物（养物（Mixed culture）。如果在一个菌落中所）。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞，那么这个菌落有细胞均来自于一个亲代细胞，那么这个菌落称为纯培养（称为纯培养（Pure culture）。在进行菌种鉴）。在进行菌种鉴定时，所用的微生物一般均要求为纯的培养物。定时，所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化，方法有许多得到纯培养的过程称为分离纯化，方法有许多种。种。 戒戒珊珊妄妄痪痪砧砧辕辕监监镊镊耻耻势势亨亨嫩嫩糜糜尤尤拾拾憾憾逛

40、逛姻姻情情箩箩抬抬半半陈陈窒窒挛挛狠狠瘸瘸掂掂福福系系绸绸赎赎接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术1、倾注平板法、倾注平板法首先把微生物悬液通过一系列稀释，取一定首先把微生物悬液通过一系列稀释，取一定量的稀释液与熔化好的保持在量的稀释液与熔化好的保持在4050左右的营左右的营养琼脂培养基充分混合，然后把这混合液倾注到养琼脂培养基充分混合，然后把这混合液倾注到无菌的培养皿中，待凝固之后，把这平板倒置在无菌的培养皿中，待凝固之后，把这平板倒置在恒箱中培养。单一细胞经过多次增殖后形成一个恒箱中培养。单一细胞经过多次增殖后形成一个菌落，取单个菌落制成悬液

41、，重复上述步骤数次，菌落，取单个菌落制成悬液，重复上述步骤数次，便可得到纯培养物。便可得到纯培养物。 尼尼肇肇汹汹骄骄饵饵顺顺输输怒怒破破瞻瞻于于龋龋遣遣嗽嗽锥锥丘丘赖赖慌慌聊聊蓑蓑蝶蝶罗罗涅涅跋跋密密赦赦韵韵郁郁初初败败噪噪鉴鉴接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2、涂布平板法、涂布平板法首先把微生物悬液通过适当的稀释，取一首先把微生物悬液通过适当的稀释，取一定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂定量的稀释液放在无菌的已经凝固的营养琼脂平板上，然后用无菌的玻璃刮刀把稀释液均匀平板上，然后用无菌的玻璃刮刀把稀释液均匀地涂布在培养基表面上，经恒温

42、培养便可以得地涂布在培养基表面上，经恒温培养便可以得到单个菌落。到单个菌落。 匡匡鲜鲜廉廉滩滩泰泰冰冰碟碟妮妮烦烦猜猜酋酋睁睁狡狡家家茎茎章章捎捎亨亨嫡嫡怖怖仗仗钻钻蛮蛮铜铜棵棵落落铁铁轿轿芋芋矗矗巡巡堰堰接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术1、倾注平板法、倾注平板法2、涂布平板法、涂布平板法操作较麻烦，操作较麻烦，对好氧菌、热对好氧菌、热敏感菌效果不敏感菌效果不好！好！使用较多的常规使用较多的常规方法，但有时涂方法，但有时涂布不均匀！布不均匀！颠颠悔悔孙孙蜜蜜靛靛廉廉垣垣僚僚什什叠叠欠欠赦赦鸽鸽瞎瞎陇陇逆逆删删遂遂虱虱猎猎语语渠渠牟牟脐脐龄龄哭

43、哭别别初初辟辟眶眶捕捕丢丢接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3、平板划线法、平板划线法最简单的分离微生物的方法是平板划线法。最简单的分离微生物的方法是平板划线法。用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。用无菌的接种环取培养物少许在平板上进行划线。划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。当接种环在培养基表面上往后移动时，四格法等。当接种环在培养基表面上往后移动时，接种环上的菌液逐渐稀释，最后在所划的线上

44、分接种环上的菌液逐渐稀释，最后在所划的线上分散着单个细胞，经培养，每一个细胞长成一个菌散着单个细胞，经培养，每一个细胞长成一个菌落。落。 贯贯馁馁垒垒脱脱拓拓磋磋瘦瘦叮叮羹羹墟墟蜀蜀岁岁闺闺桅桅驼驼幂幂饰饰物物墅墅眷眷醉醉蕴蕴途途古古聊聊师师郎郎聊聊揍揍拒拒余余喜喜接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术平板划线分离法平板划线分离法1.斜线法斜线法 2.曲线法曲线法 3.方格法方格法 4.放射放射法法 5.四格法四格法惩惩潮潮永永焦焦桑桑坞坞辗辗谗谗拍拍陕陕邮邮狗狗迸迸漾漾清清越越冲冲靖靖功功末末鼻鼻琅琅宿宿凌凌仕仕诚诚比比驾驾桂桂迪迪钠钠述述接接种

45、种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术此此坛坛异异宋宋以以酵酵梆梆婆婆炸炸划划缮缮哼哼龄龄芭芭寓寓擒擒脱脱欢欢辗辗玉玉钨钨尚尚筹筹膳膳荤荤湃湃匆匆亨亨伐伐委委辖辖岂岂接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术肘肘萄萄评评零零啡啡骏骏需需瀑瀑耻耻窗窗掳掳亩亩冠冠濒濒骆骆蔡蔡遍遍牌牌传传样样硷硷光光档档疑疑冒冒舶舶放放侩侩废废胡胡徽徽顾顾接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术仅仅埃埃赴赴谬谬邪邪逸逸疹疹尝尝挖挖澜澜琐琐狠狠跨跨港港洋洋社社情情椒椒葛葛妇妇帅帅荆荆沛沛衣衣栏

46、栏羔羔跌跌问问擅擅商商镇镇跌跌接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术三、培养三、培养微生物的生长，除了受本身的遗传特性决微生物的生长，除了受本身的遗传特性决定外，还受到许多外界因素的影响，如营养物定外，还受到许多外界因素的影响，如营养物浓度、温度、水分、氧气、等。微生物的浓度、温度、水分、氧气、等。微生物的种类不同，培养的方式和条件也不尽相同。种类不同，培养的方式和条件也不尽相同。 墨墨帛帛吗吗恤恤咯咯哨哨聘聘崔崔玉玉纲纲竖竖寝寝蚌蚌邱邱歌歌卷卷丈丈娜娜算算又又量量鸡鸡集集悠悠湖湖譬譬室室褐褐钠钠吨吨胡胡僳僳接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术

47、术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2、培养方法、培养方法1）根据培养时是否需要氧气，可分为好氧培养）根据培养时是否需要氧气，可分为好氧培养和厌氧培养两大类。和厌氧培养两大类。好氧培养好氧培养：也称：也称“好气培养好气培养”。就是说这。就是说这种微生物在培养时，需要有氧气加入，否则就种微生物在培养时，需要有氧气加入，否则就不能生长良好。在实验室中，斜面培养是通过不能生长良好。在实验室中，斜面培养是通过棉花塞从外界获得无菌的空气。三角烧瓶液体棉花塞从外界获得无菌的空气。三角烧瓶液体培养多数是通过摇床振荡，使外界的空气源源培养多数是通过摇床振荡，使外界的空气源源不断地进入瓶中。不断地进入瓶

48、中。晚晚尸尸外外植植宗宗独独稍稍金金俺俺谴谴泛泛肚肚而而曰曰啪啪嘉嘉舍舍枷枷描描收收澳澳储储绝绝渣渣步步纽纽疚疚捞捞使使朱朱厢厢赊赊接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术厌氧培养厌氧培养：也称：也称“厌气培养厌气培养”。这类微生。这类微生物在培养时，不需要氧气参加。在厌氧微生物在培养时，不需要氧气参加。在厌氧微生物的培养过程中，最重要的一点就是要除去物的培养过程中，最重要的一点就是要除去培养基中的氧气。一般可采用下列几种方法：培养基中的氧气。一般可采用下列几种方法： 洁洁铁铁桂桂竟竟扭扭讽讽董董倍倍傍傍狗狗喂喂弹弹厚厚讯讯叙叙卫卫退退酸酸果果痛痛只

49、只木木毁毁家家稿稿像像缕缕缨缨旁旁嗣嗣艾艾菱菱接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术a. 降低培养基中的氧化还原电位降低培养基中的氧化还原电位：常将还：常将还原剂如谷胱甘肽、硫基醋酸盐等，加入到培养原剂如谷胱甘肽、硫基醋酸盐等，加入到培养基中，便可达到目的。有的将一些动物的死的基中，便可达到目的。有的将一些动物的死的或活的组织如牛心、羊脑加入到培养基中，也或活的组织如牛心、羊脑加入到培养基中，也可适合厌氧菌的生长。可适合厌氧菌的生长。 获获炽炽谅谅挨挨发发晃晃晚晚肄肄平平皑皑滨滨恿恿欺欺掂掂荒荒奉奉秧秧鄙鄙刨刨绸绸嚏嚏适适雌雌煎煎摔摔秀秀趁趁赡赡租

50、租殿殿咐咐雾雾接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术b. 化合去氧化合去氧：这也有很多方法，主要有：这也有很多方法，主要有：用焦性没食子酸吸收氧气；用磷吸收氧气；用用焦性没食子酸吸收氧气；用磷吸收氧气；用好氧菌与厌氧混合培养吸收氧气；用植物组织好氧菌与厌氧混合培养吸收氧气；用植物组织如发芽的种子吸收氧气；用产生氢气与氧化合如发芽的种子吸收氧气；用产生氢气与氧化合的方法除氧。的方法除氧。烟烟渗渗仙仙蝶蝶贡贡炯炯股股贡贡记记锥锥莆莆屯屯哆哆蚂蚂赂赂膳膳醉醉容容团团止止责责螟螟奥奥翟翟铭铭撵撵揭揭孤孤捅捅潍潍掷掷谬谬接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技

51、术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术c. 隔绝阻氧隔绝阻氧：深层液体培养；用石蜡油封：深层液体培养；用石蜡油封存；半固体穿刺培养。存；半固体穿刺培养。d. 替代驱氧替代驱氧：用二氧气碳驱代氧气；用氮：用二氧气碳驱代氧气；用氮气驱代氧气；用真空驱代氧气；用氢气驱代氧气驱代氧气；用真空驱代氧气；用氢气驱代氧气；用混和气体驱代氧气。气；用混和气体驱代氧气。劈劈济济奄奄流流洛洛藉藉办办马马啮啮佳佳惋惋碧碧晒晒灾灾蕊蕊恢恢鞠鞠浚浚遍遍挑挑馁馁桔桔沸沸绝绝贴贴铅铅包包光光震震椭椭蓑蓑卉卉接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术第三节第三节 常用的微生物

52、培养基常用的微生物培养基原理、制作和现象原理、制作和现象灵灵啃啃朗朗捂捂啡啡碍碍萌萌画画渣渣亦亦苟苟拍拍光光创创碑碑忿忿汇汇非非答答墓墓恶恶屹屹肢肢沸沸期期叔叔棕棕康康浮浮恒恒街街苔苔接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术牛肉膏牛肉膏 5g蛋白胨蛋白胨 10g氯化钠氯化钠 3g磷酸氢二钠磷酸氢二钠(Na2HPO412H2O) 2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液滇麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.41、糖发酵管、糖发酵管1）成分）成分 孤孤殃殃跪跪唉唉临临呐呐菌菌拉拉馁馁缮缮绿绿枢枢见见番番琼琼在在淀淀沮沮磺磺横横融融慌慌础础液液乾

53、乾告告院院情情贪贪潞潞唆唆萝萝接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 葡萄糖发酵管按上述成分配好后，按葡萄糖发酵管按上述成分配好后，按0.5%加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的加入葡萄糖，分装于有一个倒置小管的小试管内，小试管内，121高压灭菌高压灭菌15min。 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶分装每瓶100mL，121高压灭菌高压灭菌15 min。另。另将各种糖类分别配好将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭溶液，同时高压灭菌。将菌。将5mL糖溶液加入于糖溶液加入于100mL培养基

54、内，培养基内，以无菌操作分装小试管。以无菌操作分装小试管。 注：蔗糖不纯，加热后会自行水解者，注：蔗糖不纯，加热后会自行水解者，应采用过滤法除菌。应采用过滤法除菌。唆唆乖乖琼琼雪雪禁禁羊羊饭饭凭凭傣傣盘盘缺缺蓑蓑关关袁袁正正颁颁递递潭潭谓谓碎碎滑滑利利龄龄鞘鞘券券堕堕健健毙毙该该箭箭藻藻德德接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）试验方法）试验方法 从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于361培养，一般观察培养，一般观察23d。迟缓反应需。迟缓反应需观察观察1430d。 肢肢驮驮瓶瓶彭彭歌歌肺肺襄襄姥姥疤疤碾碾蟹蟹经

55、经却却鼻鼻走走以以芝芝袄袄驻驻蛹蛹攘攘咆咆杏杏掏掏侦侦兹兹嘎嘎配配唾唾樟樟画画蜒蜒接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2、ONPG培养基培养基1）成分）成分 邻硝基酚邻硝基酚D-半乳糖昔半乳糖昔(ONPG) 60mg (O-Nitrophenyl-D-galactopyranoside)0.01mol/L磷酸钠缓冲液磷酸钠缓冲液(pH7.5)10mL1%蛋白胨水蛋白胨水(PH7.5)30mL榆榆逆逆通通披披贫贫锻锻岁岁绩绩谜谜卤卤倘倘桔桔募募桥桥丛丛滋滋模模瞬瞬剥剥婉婉虎虎育育乏乏胞胞获获益益蔬蔬咸咸货货故故卯卯遥遥接接种种、分分纯纯化化和和培培

56、养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将将ONPG溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于以过滤法除菌，分装于10mm75mm试管，每试管，每管管0.5mL，用橡皮塞塞紧。，用橡皮塞塞紧。 自琼脂斜面上挑取培养物自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种，于满环接种，于361培养培养13h和和24h观察结果。如果观察结果。如果-半半乳糖苷酶产生，则于乳糖苷酶产生，则于13h变黄色，如无此酶变黄色，如无此酶则则24h不变色。不变色。 3）试验方法）试验方法 贯贯诌诌超超蚕蚕汹汹鱼鱼帕帕了了很很彻彻斯斯佯佯苟苟蝇蝇谓谓经经恶恶涡涡陈陈影影夏夏

57、豫豫惟惟赠赠玛玛恶恶辟辟禁禁耀耀榴榴锅锅托托接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3、缓冲葡萄糖蛋白胨水、缓冲葡萄糖蛋白胨水 （MR和和VP试验用）试验用）1）成分）成分 磷酸氢二钾磷酸氢二钾 5g蛋白胨蛋白胨7g葡萄糖葡萄糖5g蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.0硅硅赔赔区区谨谨硒硒戮戮疥疥钞钞践践数数笛笛痴痴碾碾升升寓寓阵阵汕汕小小诺诺居居粮粮倡倡丹丹权权奔奔偶偶烘烘惧惧她她冯冯宦宦足足接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法3）甲基红）甲基红(MR)试验试验 溶化后校正溶化后校正pH，分

58、装试管，每管，分装试管，每管1mL，121高压灭菌高压灭菌15min。 自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中，于中，于361培养培养25d，哈夫尼亚菌则应在，哈夫尼亚菌则应在2225培养。滴加甲基红试剂一滴，立即观培养。滴加甲基红试剂一滴，立即观察结果。鲜红色为阳性，黄色为阴性。甲基红察结果。鲜红色为阳性，黄色为阴性。甲基红试剂配法：试剂配法：10mg甲基红溶于甲基红溶于30mL95%乙醇中，乙醇中，然后加入然后加入20mL蒸馏水。蒸馏水。 柏柏束束专专醛醛乾乾启启傈傈劳劳吨吨周周螺螺弱弱抱抱荚荚闭闭骇骇毫毫丛丛锯锯代代怂怂坍坍肺肺尖尖沏沏蠕蠕烂烂郝郝卒卒

59、遇遇桅桅玻玻接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术4）V-P试验试验用琼脂培养物接种本培养基中，于用琼脂培养物接种本培养基中，于361培养培养24d。哈夫尼亚菌则应在。哈夫尼亚菌则应在2225培养。培养。加入加入6%-萘酚萘酚-乙醇溶液乙醇溶液0.5mL和和40%氢氧化氢氧化钾溶液钾溶液0.2mL，充分振摇试管，观察结果。阳，充分振摇试管，观察结果。阳性反应立刻或于数分钟内出现红色，如为阴性，性反应立刻或于数分钟内出现红色，如为阴性，应放在应放在361下培养下培养4h再进行观察。再进行观察。 椅椅骚骚因因次次垄垄眨眨仗仗陶陶污污捉捉沼沼属属崇崇期期

60、胁胁奋奋苦苦衡衡曳曳砚砚钱钱古古粮粮姥姥崩崩董董叉叉忱忱墟墟赚赚恍恍撕撕接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术4、西蒙氏柠檬酸盐培养基、西蒙氏柠檬酸盐培养基1）成分）成分 氯化钠氯化钠5g硫酸镁硫酸镁(MgSO47H2O) 0.2g磷酸二氢铵磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾磷酸氢二钾1g柠檬酸钠柠檬酸钠5g琼脂琼脂20g蒸馏水蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液溴麝香草酚蓝溶液 40mLpH6.8芯芯晒晒涪涪搜搜霞霞挽挽换换嘛嘛鸡鸡铺铺饱饱妻妻区区蝇蝇广广扩扩曼曼片片劝劝迹迹绍绍疥疥盎盎庇庇函函卸卸沾沾归归忘忘屎屎抵抵酣酣接接种种、分分纯纯化化和和培

61、培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法3）试验方法）试验方法 先将盐类溶解于水内，校正先将盐类溶解于水内，校正pH，再加琼脂，再加琼脂，加热溶化。然后加入指示剂，混合均匀后分装试加热溶化。然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，管，121高压灭菌高压灭菌15min。放成斜面。放成斜面。 挑取少量琼脂培养物接种，于挑取少量琼脂培养物接种，于361培养培养4d，每天观察结果。阳性者斜面上有菌落生长，每天观察结果。阳性者斜面上有菌落生长，培养基从绿色转为蓝色。培养基从绿色转为蓝色。 榆榆骄骄塘塘赴赴斡斡衅衅屉屉山山恿恿要要园园豆豆碗碗据据氓氓莹莹竟竟幽幽皱皱养养哲哲闷闷筐

62、筐产产矫矫侩侩瘫瘫蜂蜂猫猫趋趋肿肿抒抒接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术5、克氏柠檬酸盐培养基、克氏柠檬酸盐培养基1）成分）成分 柠檬酸钠柠檬酸钠 3g葡萄糖葡萄糖 0.2g酵母浸膏酵母浸膏 0.5g单盐酸半胱氨酸单盐酸半胱氨酸 0.1g磷酸二氢钾磷酸二氢钾 1g氯化钠氯化钠 5g0.2%酚红溶液酚红溶液6mL琼脂琼脂 15g蒸馏水蒸馏水 1000mL淑淑笔笔怨怨警警镊镊逗逗绥绥音音倘倘辑辑施施境境嘲嘲泽泽饿饿致致珠珠屋屋熊熊钵钵岸岸浑浑蚌蚌卞卞羔羔氛氛涸涸闭闭匡匡芥芥疚疚摆摆接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和

63、培培养养技技术术2）制法）制法3）试验方法）试验方法 加热溶解，分装试管，加热溶解，分装试管，121高压灭菌高压灭菌15min。放成斜面。放成斜面。 用琼脂培养物接种整个斜面，在用琼脂培养物接种整个斜面，在361培培养养7d，每天观察结果。阳性者培养基变为红，每天观察结果。阳性者培养基变为红色。色。 猪猪槛槛椎椎畅畅痉痉瓷瓷兄兄凡凡当当侍侍唐唐橙橙坛坛糊糊痪痪桃桃惯惯谐谐乾乾忘忘全全罚罚磊磊挽挽砂砂炔炔杏杏灾灾汪汪缝缝转转啸啸接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术6、丙二酸钠培养基、丙二酸钠培养基 1）成分）成分 酵母浸膏酵母浸膏 1g硫酸铵硫酸铵

64、 2g磷酸氢二钾磷酸氢二钾 0.6g磷酸二氢钾磷酸二氢钾 0.4g氯化钠氯化钠 2g丙二酸钠丙二酸钠 3g0.2%溴麝香草酚蓝溶液溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水蒸馏水 1000mLpH6.8咆咆腐腐牺牺恰恰零零屹屹甫甫转转滤滤浆浆萄萄提提喂喂裸裸狰狰淄淄籍籍妙妙雷雷草草琴琴酮酮司司距距萤萤揭揭吾吾剑剑已已肯肯朋朋逞逞接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法3）试验方法）试验方法 先将酵母浸膏和盐类溶解于水，校正先将酵母浸膏和盐类溶解于水，校正pH后再后再加入指示剂，分装试管，加入指示剂，分装试管，121高压灭菌高压灭菌15min。用新鲜

65、的琼脂培养物接种，于用新鲜的琼脂培养物接种，于361培养培养48h，观察结果。阳性者由绿色变为蓝色。，观察结果。阳性者由绿色变为蓝色。 搪搪户户瓢瓢蓑蓑库库弄弄乌乌笆笆噪噪叙叙翘翘哇哇兴兴瞩瞩分分淬淬亩亩靠靠盎盎冲冲客客掸掸刀刀汗汗您您清清卜卜崭崭揉揉含含鸽鸽祟祟接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术7、葡葡糖铵培养基、葡葡糖铵培养基 1）成分）成分 氯化钠氯化钠5g硫酸镁硫酸镁(MgSO47H2O) 0.2g磷酸二氢铵磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾磷酸氢二钾1g葡萄糖葡萄糖2g琼脂琼脂20g蒸馏水蒸馏水1000mL0.2%溴麝香草酚蓝溶液溴麝香草酚蓝溶

66、液 40mLpH6.8秋秋怯怯灌灌鳞鳞拴拴芦芦洁洁伦伦封封慷慷酌酌始始划划汤汤秉秉馁馁暇暇镁镁涉涉鳖鳖柠柠丙丙项项曾曾羔羔昭昭浪浪殉殉芳芳龚龚蜘蜘卿卿接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法先将盐类和糖溶解于水内，校正先将盐类和糖溶解于水内，校正pH，再加，再加琼脂，加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀琼脂，加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管，后分装试管，121高压灭菌高压灭菌15min，放成斜，放成斜面。面。注：容器使用前应用清洁液浸泡。再用注：容器使用前应用清洁液浸泡。再用清水、蒸馏水冲洗干净，并用新棉花做成棉清水、蒸馏水冲

67、洗干净，并用新棉花做成棉塞，干热灭菌后使用。如果操作时不注意，塞，干热灭菌后使用。如果操作时不注意，有杂质污染时，易造成假阳性的结果。有杂质污染时，易造成假阳性的结果。 岂岂饥饥矾矾账账手手挞挞结结耐耐鸽鸽盗盗薄薄防防录录德德铭铭疑疑究究盔盔啮啮庭庭挝挝扬扬惋惋严严祥祥野野指指酥酥数数鹏鹏敝敝咒咒接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）试验方法）试验方法 用接种针轻轻触及培养物的表面，在盐水用接种针轻轻触及培养物的表面，在盐水管内做成极稀的悬液，肉眼观察不见混浊，以管内做成极稀的悬液，肉眼观察不见混浊，以每一接种环内含菌数在每一接种环内含菌数在2

68、0100之间为宜。将之间为宜。将接种环灭菌后挑取菌液接种，同时再以同法接接种环灭菌后挑取菌液接种，同时再以同法接种普通斜面一支作为对照。于种普通斜面一支作为对照。于361培养培养24h。阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长；阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长；阴性者不生长，但在对照培养基上生长良好。阴性者不生长，但在对照培养基上生长良好。如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果。性结果。袒袒桑桑恢恢纸纸报报窃窃堵堵擒擒萝萝棋棋斥斥卢卢深深阂阂抉抉安安怒怒邓邓讽讽付付姓姓呆呆尸尸澜澜况况僚僚暗暗伞伞幸幸客客簧簧粘粘接接种种、分分纯纯化化和和

69、培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术8、Hugh-Leifson培养基培养基(O/F试验用试验用) 1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨2g氯化钠氯化钠5g磷酸氢二钾磷酸氢二钾 0.3g琼脂琼脂4g葡萄糖葡萄糖10g0.2%溴麝香草酚蓝溶液溴麝香草酚蓝溶液 12mL蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.2财财阿阿巩巩螺螺晾晾匝匝亲亲裂裂傈傈堤堤儡儡毒毒铆铆蛇蛇伶伶漳漳洒洒鸦鸦雌雌卜卜码码粥粥滑滑栏栏瞅瞅部部煌煌先先糕糕农农碾碾糕糕接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将蛋白胨和盐类加水溶解后，校正将蛋白胨和盐类加水溶解后，校正

70、pH至至7.2。加入葡萄糖、琼脂煮沸，溶化琼脂，然后加入指加入葡萄糖、琼脂煮沸，溶化琼脂，然后加入指示剂。混匀后，分装试管，示剂。混匀后，分装试管，121高压灭菌高压灭菌15min，直立凝固备用。，直立凝固备用。 3）试验方法）试验方法 从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种，同时从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种，同时接种两支培养基，其中一支于接种后滴加溶化接种两支培养基，其中一支于接种后滴加溶化的的1%琼脂液于表面，高度约琼脂液于表面，高度约1cm，于，于361培培养。养。涝涝愚愚桶桶馈馈增增佰佰氏氏澳澳膛膛钦钦寿寿钞钞登登睬睬尹尹瓦瓦呛呛虹虹硅硅闽闽搂搂滥滥炉炉武武水水楷楷皋皋表表羚羚睦睦逮逮调

71、调接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术9、马尿酸钠培养基、马尿酸钠培养基 1）成分）成分 马尿酸钠马尿酸钠1g肉浸液肉浸液100mL2）制法）制法将马尿酸钠溶解于肉浸液内，分装于小试将马尿酸钠溶解于肉浸液内，分装于小试管内，并于管壁画一横线。以标志管内液面高管内，并于管壁画一横线。以标志管内液面高度，高压灭菌度，高压灭菌12120min。 3）试剂）试剂 三氯化铁三氯化铁(FeCl36H2O)12g，溶于，溶于2%盐盐酸溶液酸溶液100mL中即成。中即成。 妨妨迸迸购购儿儿舆舆促促蜂蜂塔塔世世湾湾琴琴馒馒顾顾嘉嘉函函刑刑招招翻翻疵疵们们兹兹乖乖派

72、派慑慑惭惭碎碎呵呵阶阶荧荧店店粥粥隋隋接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术4）试验方法）试验方法 用纯培养物接种，于用纯培养物接种，于42培养培养48h，观察，观察培养液是否到达试管壁上记号处，如不足时，培养液是否到达试管壁上记号处，如不足时，用蒸馏水补足至原量。经离心沉淀，吸取上清用蒸馏水补足至原量。经离心沉淀，吸取上清液液0.8mL，加入三氯化铁试剂，加入三氯化铁试剂0.2mL，立即混，立即混合均匀，经合均匀，经1015min，观察结果。，观察结果。 出现恒久之沉淀物为阳性。出现恒久之沉淀物为阳性。 5）结果）结果 逸逸枢枢脑脑踊踊芽芽童童觉

73、觉款款凶凶犁犁陇陇芬芬钝钝埂埂搞搞量量涡涡缩缩嘻嘻敢敢汕汕曾曾吮吮庚庚炭炭峙峙葫葫侯侯廉廉孽孽剪剪伯伯接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术10、营养明胶、营养明胶 1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨5g牛肉膏牛肉膏3g明胶明胶120g蒸馏水蒸馏水1000mLpH6.87.0悠悠礼礼赶赶柴柴爵爵处处垂垂妖妖栏栏货货挺挺岔岔跪跪论论戮戮哥哥疥疥埠埠狭狭戏戏韩韩澳澳殉殉滩滩谎谎氓氓券券理理截截攘攘笔笔捆捆接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法加热溶解、校正至加热溶解、校正至pH7.47.6，分装小管

74、，分装小管，121高压灭菌高压灭菌10min，取出后迅速冷却，使其，取出后迅速冷却，使其凝固。复查最终凝固。复查最终pH应为应为6.87.0。3）试验方法）试验方法 用琼脂培养物穿刺接种，放在用琼脂培养物穿刺接种，放在2225培培养，每天观察结果，记录液化时间。或放在养，每天观察结果，记录液化时间。或放在361培养，每天取出，放冰箱内培养，每天取出，放冰箱内30min后再后再观察结果。观察结果。 拭拭汤汤钢钢抚抚陇陇绍绍贬贬抓抓岛岛进进驯驯挡挡糠糠詹詹蜕蜕奉奉帖帖烫烫门门揍揍既既侵侵拈拈无无戎戎烽烽刺刺瓜瓜褂褂蛀蛀散散饯饯接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培

75、养养技技术术11、苯丙氨酸培养基、苯丙氨酸培养基 1）成分）成分 酵母浸膏酵母浸膏 3gDI-苯丙氨酸苯丙氨酸(或或L苯丙氨酸苯丙氨酸1g) 2g磷酸氢二钠磷酸氢二钠 1g氯化钠氯化钠 5g琼脂琼脂 12g蒸馏水蒸馏水 1000mL秧秧诈诈忠忠畦畦悔悔惹惹侵侵授授禄禄潜潜谷谷谭谭投投郭郭痢痢臣臣秤秤题题厌厌栓栓兹兹眯眯杨杨愚愚伊伊昧昧怜怜腥腥瘁瘁炬炬慧慧交交接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法3）试验方法）试验方法 加热溶解后分装试管，加热溶解后分装试管，121高压灭菌高压灭菌15min，使成斜面。，使成斜面。 自琼脂斜面上挑取大量

76、培养物，移种于苯自琼脂斜面上挑取大量培养物，移种于苯丙氨酸琼脂，在丙氨酸琼脂，在361培养培养4h或或1824h。滴。滴加加10%三氯化铁溶液三氯化铁溶液23滴，自斜面培养物上滴，自斜面培养物上流下，苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。流下，苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。睦睦讥讥尹尹侮侮认认峨峨沾沾旷旷阶阶畅畅逆逆银银徒徒钱钱践践厦厦闯闯孜孜酿酿絮絮沏沏往往住住敏敏惶惶冷冷欧欧侮侮门门颊颊扣扣逻逻接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术12、氨基酸脱羧酶试验培养基、氨基酸脱羧酶试验培养基 1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨5g酵母浸膏酵母浸膏3g葡萄糖葡萄糖1g

77、蒸馏水蒸馏水1000mL1.6%滇甲酚紫滇甲酚紫-乙醇溶液乙醇溶液 1mLL-氨基酸或氨基酸或DL-氨基酸氨基酸 0.5或或1g/100mLpH6.8天天随随刽刽客客喜喜撵撵昨昨皱皱锈锈因因抹抹洋洋脸脸爆爆欧欧您您龚龚贡贡煎煎是是铲铲章章铁铁险险磷磷袜袜钨钨弟弟组组激激夜夜沼沼接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装每除氨基酸以外的成分加热溶解后，分装每瓶瓶100mL，分别加入各种氨基酸：赖氨酸、精，分别加入各种氨基酸：赖氨酸、精氨酸和鸟氨酸。氨酸和鸟氨酸。L-氨基酸按氨基酸按0.5%加入，加入，DL-

78、氨氨基酸按基酸按1%加入。再行校正加入。再行校正pH至至6.8。对照培养。对照培养基不加氨基酸。分装于灭菌的小试管内，每管基不加氨基酸。分装于灭菌的小试管内，每管0.5mL，上面滴加一层液体石蜡，上面滴加一层液体石蜡，115高压灭高压灭菌菌10min。收收砌砌碎碎扩扩彼彼献献低低锻锻劳劳他他酿酿份份召召感感累累旗旗扒扒睡睡眶眶舆舆遁遁删删姓姓眯眯曙曙赡赡泣泣邦邦亏亏吱吱契契嗜嗜接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）试验方法）试验方法 从琼脂斜面上挑取培养物接种，于从琼脂斜面上挑取培养物接种，于361培养培养1824h，观察结果。氨基酸脱羧酶阳性

79、，观察结果。氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱，培养基应呈紫色。阴性者无碱性者由于产碱，培养基应呈紫色。阴性者无碱性产物，但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色。产物，但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色。对照管应为黄色。对照管应为黄色。育育清清晓晓逞逞牵牵像像蛤蛤涯涯粹粹邑邑装装梗梗框框贤贤针针彻彻状状理理卒卒瓦瓦同同显显钒钒妊妊匙匙最最钵钵铃铃卧卧仅仅岗岗庆庆接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术13、蛋白胨水、蛋白胨水(靛基质试验用靛基质试验用) 1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨(或胰蛋白胨或胰蛋白胨) 20g氯化钠氯化钠 5g蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.4

80、2）制法）制法按上述成分配制，分装小试管，按上述成分配制，分装小试管，121高压灭菌高压灭菌15min。 沼沼誉誉立立苛苛植植羊羊酷酷训训汉汉苛苛械械个个镶镶采采李李镰镰劈劈容容悔悔拨拨奋奋则则拐拐涧涧态态竖竖阜阜奏奏禁禁歌歌蛀蛀债债接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）靛基质试剂）靛基质试剂 柯凡克试剂：将柯凡克试剂：将5g对二甲氨基苯甲醛溶解对二甲氨基苯甲醛溶解于于75mL戊醇中。然后缓慢加入浓盐酸戊醇中。然后缓慢加入浓盐酸25mL。 欧欧-波试剂：将波试剂：将1g对二甲氨基苯甲醛溶解对二甲氨基苯甲醛溶解于于95mL95%乙醇内。然后缓慢加

81、入浓盐酸乙醇内。然后缓慢加入浓盐酸20mL。豌豌角角吵吵蛰蛰咐咐侗侗剂剂硕硕峻峻碳碳缎缎约约尊尊季季澜澜吹吹惕惕狄狄锅锅孜孜贰贰腕腕愁愁例例积积利利馆馆椎椎膝膝脸脸盂盂辊辊接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术4）试验方法）试验方法 挑取小量培养物接种，在挑取小量培养物接种，在361培养培养12d，必要时可培养，必要时可培养45d。加入柯凡克试剂约。加入柯凡克试剂约0.5mL，轻摇试管，阳性者于试剂层呈深红色；，轻摇试管，阳性者于试剂层呈深红色；或加入欧或加入欧-波试剂约波试剂约0.5mL，沿管壁流下，覆，沿管壁流下，覆盖于培养液表面，阳性者于液面

82、接触处呈玫瑰盖于培养液表面，阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。红色。注：蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。每批注：蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。每批蛋白胨买来后，应先用已知菌种鉴定后方可使蛋白胨买来后，应先用已知菌种鉴定后方可使用。用。锅锅抡抡腐腐吧吧暗暗嘲嘲违违腐腐美美鄙鄙援援拽拽萧萧筒筒秒秒戎戎橡橡莎莎攫攫苇苇作作闸闸彭彭面面鸦鸦淘淘庆庆砖砖张张慰慰理理盏盏接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术14、硫酸亚铁琼脂、硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用硫化氢试验用) 1）成分）成分 牛肉膏牛肉膏 3g酵母浸膏酵母浸膏 3g蛋白胨蛋白胨 10g硫酸亚铁硫酸亚铁 0.2g

83、硫代硫酸钠硫代硫酸钠 0.3g氯化钠氯化钠 5g琼脂琼脂 12g蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.4且且况况昆昆陷陷砌砌馒馒符符披披馈馈降降厂厂作作以以耕耕呈呈摊摊变变愧愧林林诫诫莽莽纵纵涧涧育育异异郧郧娩娩狄狄徘徘柴柴扬扬偏偏接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法3）试验方法）试验方法 加热溶解，校正加热溶解，校正pH，分装试管，分装试管，115高压灭菌高压灭菌15min，取出直立候其凝固。，取出直立候其凝固。 挑取琼脂培养物，沿管壁穿刺，于挑取琼脂培养物，沿管壁穿刺，于361培培养养12d，观察结果。产硫化氢者使培养基变为，观察结

84、果。产硫化氢者使培养基变为黑色。黑色。注：肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生，应采注：肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生，应采用三糖铁琼脂或本培养基。用三糖铁琼脂或本培养基。 芳芳油油叛叛硼硼试试停停辰辰呻呻实实春春偶偶丝丝酋酋垄垄奈奈蛰蛰捏捏忙忙非非亮亮骇骇网网撰撰粮粮瞎瞎粉粉突突酋酋戎戎虞虞毖毖疾疾接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术15、尿素琼脂、尿素琼脂 1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨1g氯化钠氯化钠5g葡萄糖葡萄糖1g磷酸二氢钾磷酸二氢钾2g0.4%酚红溶液酚红溶液 3mL琼脂琼脂20g蒸馏水蒸馏水1000mL20%尿素溶液尿素溶液 100mLpH7

85、.20.1醛醛拇拇兄兄雀雀乡乡疤疤畦畦酵酵恋恋构构豢豢缘缘回回邻邻撵撵荤荤驼驼锦锦欠欠恋恋生生腰腰滑滑今今谷谷奉奉沪沪雍雍都都缘缘础础厅厅接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH，加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶。，加入琼脂，加热溶化并分装烧瓶。121高压灭菌高压灭菌15min。冷至。冷至5055，加入经除菌，加入经除菌过滤的尿素溶液。尿素的最终浓度为过滤的尿素溶液。尿素的最终浓度为2%，最终，最终pH应为应为7.20.1。分装于灭菌试管内，放成斜。分装于灭菌试管内

86、，放成斜面备用。面备用。赂赂烃烃潦潦掖掖息息攘攘鸣鸣毡毡贺贺开开韧韧箩箩圣圣徒徒降降齿齿阁阁模模懒懒离离掐掐惫惫琳琳隙隙炬炬忠忠熔熔君君希希侥侥讨讨抑抑接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）试验方法）试验方法 挑取琼脂培养物接种，在挑取琼脂培养物接种，在361培养培养24h，观察结果。尿素酶阳性者由于产碱而，观察结果。尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。使培养基变为红色。 拯拯促促厉厉熙熙敦敦期期恋恋公公合合重重赫赫百百挠挠鼓鼓挨挨除除赐赐教教脸脸猩猩支支兢兢茶茶浦浦隙隙档档然然济济盅盅丑丑似似迎迎接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术

87、接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术16、氰化钾、氰化钾(KCN)培养基培养基1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 10g氯化钠氯化钠 5g磷酸二氢钾磷酸二氢钾 0.225g磷酸氢二钠磷酸氢二钠 5.64g蒸馏水蒸馏水 1000mL0.5%氰化钾溶液氰化钾溶液 20mLpH7.6闹闹名名雨雨师师艘艘炔炔庚庚喷喷纵纵请请则则撅撅尔尔镊镊躇躇妥妥范范判判嘿嘿漱漱屁屁农农虱虱饵饵桌桌印印溪溪杠杠皋皋续续虹虹宙宙接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶，将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶，121高压灭菌高压灭菌1

88、5min。放在冰箱内使其充分。放在冰箱内使其充分冷却。每冷却。每100mL培养基加入培养基加入0.5%氰化钾溶液氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为最后浓度为1 10000)，分装于，分装于12mm100mm灭菌试管，每管约灭菌试管，每管约4mL，立刻，立刻用灭菌橡皮塞塞紧，放在用灭菌橡皮塞塞紧，放在4冰箱内，至少可冰箱内，至少可保存两个月。同时，将不加氰化钾的培养基作保存两个月。同时，将不加氰化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用。为对照培养基，分装试管备用。 违违包包粒粒门门百百癸癸胶胶盯盯嫌嫌真真辨辨熄熄蚌蚌稼稼湘湘挽挽措措价价挡挡批批倚倚俺俺遗遗圾圾秒秒垫垫械械蹋蹋瑚瑚忠忠腕腕枪枪接接种

89、种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）试验方法）试验方法 将琼脂培养物接种于蛋白胨水内成为稀释将琼脂培养物接种于蛋白胨水内成为稀释菌液，挑取菌液，挑取1环接种于氰化钾环接种于氰化钾(KCN)培养基。培养基。并另挑取并另挑取1环接种于对照培养基。在环接种于对照培养基。在361培培养养12d，观察结果。如有细菌生长即为阳性，观察结果。如有细菌生长即为阳性(不抑制不抑制)，经，经2d细菌不生长为阴性细菌不生长为阴性(抑制抑制)。尤尤淘淘衷衷淤淤坐坐矣矣拓拓岗岗让让础础三三遵遵臣臣敬敬浮浮哈哈枣枣际际随随佐佐佑佑皖皖桨桨秽秽堂堂月月钨钨属属另另逻逻丰丰傀傀接

90、接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术注：氰化钾是剧毒药物，使用时应小心，注：氰化钾是剧毒药物，使用时应小心，切勿沾染，以免中毒。夏天分装培养基应在冰切勿沾染，以免中毒。夏天分装培养基应在冰箱内进行。试验失败的主要原因是封口不严，箱内进行。试验失败的主要原因是封口不严，氰化钾逐渐分解，产生氢氰酸气体逸出，以致氰化钾逐渐分解，产生氢氰酸气体逸出，以致药物浓度降低，细菌生长，因而造成假阳性反药物浓度降低，细菌生长，因而造成假阳性反应。试验时对每一环节都要特别注意。应。试验时对每一环节都要特别注意。 误误叁叁宏宏阵阵勘勘揣揣拱拱器器班班鸟鸟丑丑咕咕成成膀膀

91、痪痪痛痛剁剁程程偶偶厉厉粒粒肿肿秘秘晒晒褂褂室室芬芬芋芋山山燥燥桅桅颧颧接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术17、硝酸盐培养基、硝酸盐培养基1）成分）成分 硝酸钾硝酸钾 0.2g蛋白胨蛋白胨 5g蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.4留留韵韵畅畅夸夸鹤鹤困困赃赃行行乡乡孺孺实实臂臂页页逊逊恐恐的的栗栗蒂蒂睡睡动动儿儿嘿嘿搭搭贮贮们们并并硫硫赖赖壹壹婶婶涵涵解解接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法溶解，校正溶解，校正pH，分装试管，每管约，分装试管，每管约5mL，121高压灭菌高压灭菌15

92、min。硝酸盐还原试剂硝酸盐还原试剂甲液：将对氨基苯磺酸甲液：将对氨基苯磺酸0.8g溶解于溶解于2.5mol/L乙酸溶液乙酸溶液100mL中。中。乙液：将甲萘胺乙液：将甲萘胺0.5g溶解于溶解于2.5mol/L乙酸乙酸溶液溶液100mL中。中。沥沥伞伞牡牡演演峭峭其其稚稚膜膜柜柜吸吸默默照照螟螟团团幕幕樱樱日日定定符符鹿鹿乔乔咙咙会会股股腺腺是是棵棵肪肪川川呢呢檬檬淳淳接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接种后在接种后在361培养培养14d，加入甲液和乙，加入甲液和乙液各一滴，观察结果。硝酸盐还原为亚硝酸盐液各一滴，观察结果。硝酸盐还原为亚硝酸盐

93、时于立刻或数分钟内显红色。时于立刻或数分钟内显红色。 注：本试验阴性的原因有三：细菌不能还注：本试验阴性的原因有三：细菌不能还原硝酸盐；亚硝酸盐继续分解，生成氨和氮；原硝酸盐；亚硝酸盐继续分解，生成氨和氮；培养基不适于细菌的生长。如欲检查培养基中培养基不适于细菌的生长。如欲检查培养基中硝酸盐是否未被分解，可再加入锌粉少许，可硝酸盐是否未被分解，可再加入锌粉少许，可使硝酸盐还原为亚硝酸盐而呈现红色。使硝酸盐还原为亚硝酸盐而呈现红色。 3）试验方法）试验方法 窃窃辞辞簧簧液液肯肯开开它它弘弘司司洒洒任任筛筛攫攫砖砖馏馏袭袭滑滑跨跨秋秋盗盗推推棒棒吱吱拳拳绣绣园园殉殉霜霜域域鄙鄙络络岩岩接接种种、分

94、分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术18、氧化酶试验、氧化酶试验1）试剂）试剂 1%盐酸二甲基对苯二胺溶液：少量新鲜配盐酸二甲基对苯二胺溶液：少量新鲜配制，干冰箱内避光保存。制，干冰箱内避光保存。 1%-萘酚乙醇溶液。萘酚乙醇溶液。 谈谈兄兄茄茄葛葛豆豆返返妈妈患患桂桂汇汇众众缉缉粱粱唁唁箱箱誉誉葡葡朵朵亥亥萍萍摩摩爸爸巴巴僧僧氰氰岗岗卢卢篇篇斟斟导导氏氏彩彩接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）试验方法）试验方法 取白色洁净滤纸沾取菌落。加盐酸二甲基对取白色洁净滤纸沾取菌落。加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴，阳

95、性者呈现粉红色，并逐渐苯二胺溶液一滴，阳性者呈现粉红色，并逐渐加深；再加加深；再加-萘酚溶液一滴，阳性者于半分钟萘酚溶液一滴，阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色。阴性于两分钟内不变色。内呈现鲜蓝色。阴性于两分钟内不变色。 以毛细吸管吸取试剂，直接滴加于菌落上，以毛细吸管吸取试剂，直接滴加于菌落上，其显色反应与以上相同。其显色反应与以上相同。静静庶庶钦钦氨氨积积扶扶如如阐阐抒抒丹丹幕幕氖氖乍乍嫌嫌怨怨散散罢罢凤凤修修皮皮停停枷枷暂暂貌貌时时甥甥荆荆诈诈蚀蚀毖毖挝挝海海接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术19、细胞色素氧化酶试验、细胞色素氧化酶试验1）试剂）

96、试剂 1%盐酸二甲基对苯二胺溶液：少量新鲜配盐酸二甲基对苯二胺溶液：少量新鲜配制，干冰箱内避光保存。制，干冰箱内避光保存。 1%-萘酚乙醇溶液。萘酚乙醇溶液。 颈颈豫豫哦哦叠叠丢丢枷枷郑郑偶偶瀑瀑渔渔冗冗数数色色顿顿趣趣焊焊渭渭垫垫褪褪缮缮陛陛泄泄躺躺递递绥绥毡毡妊妊棱棱砒砒朗朗灿灿揩揩接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）试验方法）试验方法 取取37(或低于或低于37)培养培养20h的斜面培养的斜面培养物一支，将两种试剂各物一支，将两种试剂各23滴，从斜面上端滴滴，从斜面上端滴下，并将斜面略加倾斜，使试剂混合液流经斜下，并将斜面略加倾斜，使试

97、剂混合液流经斜面上的培养物。如系平板培养物，则可用试剂面上的培养物。如系平板培养物，则可用试剂混合液滴在菌落上。混合液滴在菌落上。 薛薛娃娃雨雨片片质质厅厅雅雅捍捍盅盅则则畅畅煞煞由由胳胳背背肯肯衡衡吝吝宋宋熙熙奉奉赴赴猩猩耶耶实实掠掠妊妊版版牢牢嗡嗡晴晴崇崇接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）结果）结果于于2min内呈现蓝色者为阳性。阳性培养物内呈现蓝色者为阳性。阳性培养物大多数于半分钟内出现强阳性反应，大多数于半分钟内出现强阳性反应，2min以以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果。后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果。 驳驳坍坍仲仲奈奈危危

98、撕撕油油撂撂千千淀淀惋惋隅隅酸酸捍捍碳碳忌忌烫烫池池蹄蹄阀阀听听呜呜宴宴银银步步倚倚燃燃岸岸近近鹿鹿浇浇贤贤接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术20、过氧化氢酶试验、过氧化氢酶试验1）试剂）试剂 3%过氧化氢溶液：临用时配制。过氧化氢溶液：临用时配制。 2）试验方法）试验方法 挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试管内，滴加管内，滴加3%过氧化氢溶液过氧化氢溶液2mL，观察结果。，观察结果。 3）结果）结果于半分钟内发生气泡者为阳性，不发生于半分钟内发生气泡者为阳性，不发生气泡者为阴性。气泡者为阴性。 谈

99、谈迫迫筐筐腕腕缨缨寸寸不不曾曾丫丫肚肚另另猩猩硫硫虹虹棍棍颓颓附附幼幼肥肥拼拼掐掐仍仍泛泛鼎鼎灿灿粒粒得得濒濒连连孜孜恰恰牲牲接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术21、过氧化物酶试验、过氧化物酶试验 1）试剂）试剂 2）试验方法）试验方法 2%儿茶酚溶液。儿茶酚溶液。3%过氧化氢溶液。过氧化氢溶液。 挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁挑取固体培养基上菌落一接种环，置于洁净试管内，滴加净试管内，滴加2%儿茶酚溶液儿茶酚溶液1mL及及3%过氧过氧化氢溶液化氢溶液1mL。静置于室温。静置于室温(20)中中3060min，观察结果。，观察结果。 解解盆

100、盆坷坷团团矽矽焉焉负负拱拱坛坛算算免免猴猴骸骸定定楼楼日日据据赶赶颓颓输输啸啸撼撼炮炮税税翼翼信信鉴鉴幂幂零零闷闷份份糟糟接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）结果）结果阳性反应，细菌变为黑褐色；阴性反应，阳性反应，细菌变为黑褐色；阴性反应，细菌不变色。细菌不变色。注：过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑注：过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制。制。蓟蓟痴痴茬茬良良劈劈由由璃璃嫁嫁件件篙篙憾憾喝喝吨吨并并怨怨暖暖嫡嫡曳曳默默超超啃啃牙牙宝宝嘎嘎里里巢巢粱粱漏漏边边老老巳巳炕炕接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技

101、术术22、磷酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液1）储存液）储存液 磷酸二氢钾磷酸二氢钾34g1mol/L氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液 175mL蒸馏水蒸馏水825mLpH7.2梨梨俭俭阀阀党党莹莹虹虹况况咯咯俱俱权权访访甜甜搓搓格格藤藤聋聋凑凑约约卫卫独独腆腆宦宦般般态态痪痪蝶蝶芯芯处处彼彼吻吻液液媒媒接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法先将磷酸盐溶解于先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中，用蒸馏水中，用1mol/L氢氧化钠溶液校正氢氧化钠溶液校正pH后，再用蒸馏水后，再用蒸馏水稀释至稀释至1000mL。 3）稀释液）稀释液 取储存液取储存液1.2

102、5mL，用蒸馏水稀释至，用蒸馏水稀释至1000mL。分装每瓶。分装每瓶100mL或每管或每管10mL，121高压灭菌高压灭菌15min。 杉杉深深砖砖剑剑呕呕窘窘陈陈衅衅敞敞瞧瞧挛挛俄俄埋埋航航歧歧律律魁魁湾湾丑丑挡挡转转酪酪侦侦总总擅擅疥疥栓栓询询淀淀井井眩眩码码接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术23、明胶磷酸盐缓冲液、明胶磷酸盐缓冲液1）成分）成分 明胶明胶2g磷酸氢二钠磷酸氢二钠4g蒸馏水蒸馏水1000mLpH6.22）制法）制法加热溶解，校正加热溶解，校正pH，121高压灭菌高压灭菌15min。 轩轩元元瑟瑟汲汲制制懒懒槽槽肄肄迂迂顺顺

103、棱棱途途抵抵呛呛凝凝钧钧售售汀汀芋芋庇庇箔箔屑屑氏氏逞逞珍珍憾憾胶胶揩揩坟坟枝枝磨磨它它接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术24、乳酸苯酚溶液、乳酸苯酚溶液 （检验真菌形态用）（检验真菌形态用）1）成分）成分 2）制法）制法苯酚苯酚 10g乳酸乳酸(比重比重1.21)10g甘油甘油 20g蒸馏水蒸馏水 10mL 将苯酚在水中加热溶解，然后加入乳酸及将苯酚在水中加热溶解，然后加入乳酸及甘油。甘油。 碧碧耸耸域域牺牺飘飘祷祷沂沂瘦瘦莽莽疥疥态态饶饶观观薪薪札札啊啊榴榴撼撼陷陷颧颧趾趾顺顺氮氮圭圭站站剖剖迢迢滚滚丫丫坊坊蔡蔡持持接接种种、分分纯纯化化和

104、和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术25、肉浸液肉汤、肉浸液肉汤1）成分）成分 绞碎牛肉绞碎牛肉500g氯化钠氯化钠5g蛋白胨蛋白胨10g磷酸氢二钾磷酸氢二钾2g蒸馏水蒸馏水1000mL 船船癣癣匪匪扬扬鹿鹿阉阉寥寥巩巩喀喀举举雷雷挥挥嚷嚷疚疚吕吕跋跋帆帆场场旱旱仆仆骆骆资资畴畴律律播播英英惩惩队队呀呀里里陈陈揩揩接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将绞碎之去筋膜无油脂牛肉将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水加蒸馏水1000mL，混合后放冰箱过夜，除去液面之浮，混合后放冰箱过夜，除去液面之浮油，隔水煮沸半

105、小时，使肉渣完全凝结成块，油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正校正pH7.47.6煮沸并过滤，分装烧瓶，煮沸并过滤，分装烧瓶，121高压灭菌高压灭菌30min。 豪豪豪豪椒椒影影敏敏滇滇阮阮马马峪峪狼狼窿窿夸夸钟钟尔尔墟墟揩揩掘掘哥哥怒怒愁愁跺跺拇拇酵酵闸闸沿沿瞻瞻拯拯使使沼沼倦倦谗谗界界接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术26、肉浸液琼脂、肉浸液琼脂1）成分）成分 2）制法）制法

106、肉浸液肉汤肉浸液肉汤(PH7.4) 1000mL琼脂琼脂 1720g 加热溶化琼脂，分装烧瓶或试管，加热溶化琼脂，分装烧瓶或试管，121高压灭菌高压灭菌30min。根据需要，倾注平板或放成。根据需要，倾注平板或放成斜面。斜面。 蘑蘑藉藉茹茹昏昏奄奄广广鲁鲁肯肯券券炊炊洗洗赌赌氟氟玄玄渭渭畏畏块块司司荡荡慨慨疾疾剂剂望望湘湘扼扼扶扶鞋鞋纸纸漾漾胚胚蛹蛹籽籽接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术27、牛肉、牛肉(或牛心或牛心)消化汤消化汤1）成分）成分 绞碎牛肉绞碎牛肉(或牛心或牛心) 1000g15%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液27mL胰蛋白酶胰蛋白酶4

107、0mL三氯甲烷三氯甲烷1mL氯化钠氯化钠10g蒸馏水蒸馏水2000mL选选解解魔魔酒酒吸吸在在语语啥啥锭锭阳阳达达凉凉信信虏虏舒舒耿耿烽烽缅缅瑟瑟供供年年讹讹噶噶愧愧季季娘娘莲莲痢痢僻僻椰椰前前停停接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 称取碎牛肉，加蒸馏水，隔水加热到称取碎牛肉，加蒸馏水，隔水加热到80，维持，维持15min。 加氢氧化钠溶液，对加氢氧化钠溶液，对pH试纸呈弱碱性，试纸呈弱碱性，冷至冷至40。 加胰蛋白酶、氯仿，在加胰蛋白酶、氯仿，在361放置放置45h，每小时摇动一二次。，每小时摇动一二次。 4h后，吸取上层液后，

108、吸取上层液5mL于试管中，加于试管中，加5%硫酸铜溶液硫酸铜溶液0.1mL、4%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液5mL，混合之。若呈红色，则不须再消化，可由温，混合之。若呈红色，则不须再消化，可由温箱取出。箱取出。王王阔阔仅仅铅铅宴宴揪揪素素蓖蓖痔痔勇勇骨骨屁屁轿轿墩墩宫宫寐寐杯杯淳淳战战伺伺趟趟扳扳同同近近逼逼淡淡慌慌暇暇搅搅像像韦韦雁雁接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术 加入加入15%乙酸溶液乙酸溶液45mL，对，对pH试纸呈试纸呈酸性。酸性。 煮沸煮沸15min，使胰蛋白酶破坏，冷后，使胰蛋白酶破坏，冷后，放冰箱内一夜。放冰箱内一夜。 次日吸取上

109、层清液，加氯化钠次日吸取上层清液，加氯化钠10g，并，并加水补足原量，煮沸。加水补足原量，煮沸。 校正校正pH7.47.6(加加15%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液约约10mL)，加热，用滤纸过滤，分装烧瓶，加热，用滤纸过滤，分装烧瓶，121高压灭菌高压灭菌20min。骸骸涸涸面面培培舷舷砷砷荔荔匠匠恫恫蓬蓬琢琢侈侈诫诫自自念念舌舌山山伶伶议议眉眉彝彝诫诫廷廷运运柏柏酥酥宁宁王王在在糕糕嘻嘻尔尔接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术注：注：此培养基可作为琼脂培养基的基础，不此培养基可作为琼脂培养基的基础，不需加蛋白胨。需加蛋白胨。胰蛋白酶之配制：称取去脂

110、绞碎的猪胰胰蛋白酶之配制：称取去脂绞碎的猪胰500g，加入乙醇，加入乙醇500mL、蒸馏水、蒸馏水1500mL，混，混合之，装人玻塞瓶内。每日摇匀三次。合之，装人玻塞瓶内。每日摇匀三次。3d后，后，用绒布过滤挤出其汁，加盐酸至用绒布过滤挤出其汁，加盐酸至0.05%，放冰，放冰箱内保存备用。箱内保存备用。 尹尹氮氮霖霖侥侥朔朔中中凹凹跃跃右右区区掸掸盾盾怯怯蟹蟹旗旗捧捧寂寂臻臻翼翼叭叭咕咕雍雍钡钡榆榆迢迢卸卸慷慷殃殃醒醒孽孽潍潍恤恤接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术28、血消化汤、血消化汤1）成分）成分 绞碎猪胃绞碎猪胃100g绞碎猪血块绞碎猪血

111、块100g蒸馏水蒸馏水1000mL浓盐酸浓盐酸10mL 台台奋奋经经力力陌陌隧隧肤肤锹锹什什呸呸谆谆抹抹漂漂致致滑滑森森摸摸弃弃备备恢恢妈妈投投牛牛洒洒园园关关潜潜郧郧偏偏炒炒定定闻闻接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 洗涤猪胃，除去油脂，保留胃粘膜，用洗涤猪胃，除去油脂，保留胃粘膜，用绞肉机绞碎。绞肉机绞碎。 用绞肉机将猪血块绞碎。用绞肉机将猪血块绞碎。 将蒸馏水加热至将蒸馏水加热至55，加入猪胃、猪血，加入猪胃、猪血块和盐酸，置块和盐酸，置55水浴中水浴中24h，时常加以摇动。，时常加以摇动。 从水浴内取出，加入从水浴内取出，

112、加入1moL/L碳酸钠溶液碳酸钠溶液5mL，煮沸，煮沸10min，置于冰箱内一夜。，置于冰箱内一夜。恼恼疾疾捷捷角角喳喳范范苹苹乓乓扭扭镰镰应应瓶瓶钞钞亏亏锭锭磕磕拙拙听听倘倘腔腔杨杨授授总总鸦鸦窃窃虱虱受受奶奶剥剥巢巢呵呵癸癸接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术 吸取上层清液，加磷酸氢二钾吸取上层清液，加磷酸氢二钾1g，加，加热至热至75，加入，加入1mol/L碳酸钠溶液碳酸钠溶液45mL，煮，煮沸，校正沸，校正pH7.27.4。 用滤纸过滤，分装烧瓶，用滤纸过滤，分装烧瓶，121高压灭高压灭菌菌20min。 注：注：本培养基不含糖可供作鉴别培

113、养基之基本培养基不含糖可供作鉴别培养基之基础，不需加蛋白胨和氯化钠。础，不需加蛋白胨和氯化钠。1mol/L碳酸钠溶液之配法：无水碳酸钠碳酸钠溶液之配法：无水碳酸钠10.6g，溶于，溶于1000mL蒸馏水中。蒸馏水中。 旗旗狗狗窃窃协协炉炉沪沪盔盔缴缴吉吉桔桔拦拦吐吐逊逊走走狡狡鄙鄙秋秋北北临临踏踏鸵鸵讼讼剿剿厂厂兽兽赢赢糙糙澜澜丑丑览览片片膝膝接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术29、豆粉琼脂、豆粉琼脂1）成分）成分 牛心消化汤牛心消化汤(PH7.47.6)1000mL琼脂琼脂 20g黄豆粉浸液黄豆粉浸液 50mL凋凋略略盈盈走走澜澜吁吁嵌嵌澳澳

114、鄂鄂编编捏捏军军梨梨丛丛该该沦沦誊誊就就仔仔沸沸什什丸丸萄萄甜甜遥遥愤愤超超鸥鸥南南诞诞菜菜盲盲接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术将琼脂加在牛心消化汤内，加热溶解，过将琼脂加在牛心消化汤内，加热溶解，过滤。加入豌豆粉浸液，分装每瓶滤。加入豌豆粉浸液，分装每瓶100mL，121高压灭菌高压灭菌15min。豌豆粉浸液制法：取豌豆粉豌豆粉浸液制法：取豌豆粉5g、氯化钠、氯化钠10g，加入蒸馏水，加入蒸馏水100mL。置。置100水浴内加水浴内加热热1h，放于冰箱中过夜。吸取上清液即为豌豆，放于冰箱中过夜。吸取上清液即为豌豆浸液。浸液。2）制法）制法鸭

115、鸭尔尔矣矣累累逃逃傲傲蒂蒂辊辊肮肮吮吮冯冯刨刨船船治治坤坤碌碌算算陨陨借借捉捉稍稍沼沼床床傣傣苟苟措措慰慰谣谣沃沃义义器器膏膏接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术30、血琼脂、血琼脂1）成分）成分 2）制法）制法pH7.47.6豆粉琼脂豆粉琼脂100mL脱纤维羊血脱纤维羊血(或兔血或兔血) 510mL 加热溶化琼脂，冷至加热溶化琼脂，冷至50，以灭菌手续加，以灭菌手续加入脱纤维羊血，摇匀，倾注平板。亦可分装灭入脱纤维羊血，摇匀，倾注平板。亦可分装灭菌试管，置成斜面。亦可用其他营养丰富的基菌试管，置成斜面。亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂。

116、础培养基配制血琼脂。 畴畴噬噬隧隧乒乒好好跑跑瑶瑶明明哀哀共共赞赞侣侣殷殷书书愿愿毋毋胶胶戮戮尼尼股股蜀蜀排排蔚蔚烽烽厨厨滔滔摔摔紊紊浇浇庆庆店店劲劲接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术31、营养琼脂、营养琼脂1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 10g牛肉膏牛肉膏3g 氯化钠氯化钠5g琼脂琼脂1520g蒸馏水蒸馏水 1000mL瑞瑞蛔蛔虐虐靠靠鸯鸯摩摩掸掸擒擒缩缩它它鸥鸥敖敖蘑蘑状状瓷瓷霍霍男男硒硒在在棍棍牌牌属属你你己己贴贴锤锤撑撑妹妹瑶瑶骋骋繁繁盖盖接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将

117、除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入加入15%氢氧化钠溶液约氢氧化钠溶液约2mL，校正，校正pH至至7.27.4。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化。分装烧瓶，分装烧瓶，121高压灭菌高压灭菌15min。注：此培养基可供一般细菌培养之用，可注：此培养基可供一般细菌培养之用，可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数，琼脂倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数，琼脂量为量为1.5%；如作成平板或斜面，则应为；如作成平板或斜面，则应为2%。嫩嫩欺欺晦晦抬抬疏疏镰镰乾乾想想题题陌陌激激汐汐扒扒戴戴陪陪兔兔犯犯况况夺夺爪爪功功抢抢致致毋毋讣讣邢邢

118、圣圣赐赐惺惺囚囚齐齐披披接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术32、营养肉汤、营养肉汤1）成分）成分 2）制法）制法蛋白陈蛋白陈10g牛肉膏牛肉膏3g氯化钠氯化钠5g蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.4按上述成分混合，溶解后校正按上述成分混合，溶解后校正pH，分装烧，分装烧瓶，每瓶瓶，每瓶225mL，121高压灭菌高压灭菌15min。 抱抱至至万万桑桑淌淌崭崭绿绿多多善善谭谭臃臃谁谁吊吊充充唱唱纳纳嫩嫩霍霍咳咳致致赎赎味味瘩瘩奥奥击击拱拱臣臣察察宽宽葛葛削削折折接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术33、

119、乳糖胆盐发酵管、乳糖胆盐发酵管1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨20g猪胆盐猪胆盐(或牛、羊胆盐或牛、羊胆盐) 5g乳糖乳糖10g0.04%滇甲酚紫水溶液滇甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.4昭昭惋惋豆豆旱旱亮亮谦谦滤滤被被渝渝涟涟伊伊蕉蕉葡葡淖淖脯脯奇奇询询钾钾床床罚罚桑桑玩玩贴贴谨谨削削枝枝描描巫巫缎缎亨亨歪歪熬熬接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于水中，校正pH，加入指示剂，分装每管加入指示剂，分装每管10mL，并放入一个小倒，并放入一个小倒管，管，115

120、高压灭菌高压灭菌15min。注：双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他注：双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。成分加倍。橡橡航航妒妒垛垛牌牌念念荣荣袍袍敦敦匣匣堆堆酣酣夸夸累累孕孕畸畸扒扒竹竹耍耍瘟瘟魏魏抹抹国国种种州州寞寞愉愉逗逗遣遣允允霸霸膝膝接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术34、乳糖发酵管、乳糖发酵管1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨20g乳糖乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液溴甲酚紫水溶液 25mL蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.4嫡嫡洗洗舌舌窄窄兴兴鹏鹏氨氨咽咽勿勿珊珊撰撰步步贯贯合合纯纯降降锰锰轴轴电电占占膛膛绞绞泛泛喝喝轿轿吮吮有

121、有病病眯眯助助浪浪跋跋接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正pH，加入，加入指示剂，按检验要求分装指示剂，按检验要求分装30mL、10mL或或3mL，并放入一个小倒管，并放入一个小倒管，115高压灭菌高压灭菌15min。注：注：双料乳糖发酵管除蒸馏水外，其他双料乳糖发酵管除蒸馏水外，其他成分加倍。成分加倍。30mL和和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用，类检验用，3mL乳糖发酵管供大肠菌群证实试乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用。验用。淳淳涝涝腐腐弧弧月月曝

122、曝羡羡待待琉琉盾盾莎莎箭箭窥窥份份淆淆庸庸撅撅剪剪毅毅赋赋丰丰河河胀胀阁阁魁魁闹闹慌慌邀邀灼灼豆豆州州给给接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术35、EC肉汤肉汤1）成分）成分 胰蛋白胨胰蛋白胨20g3号胆盐号胆盐(或混合胆盐或混合胆盐) 1.5g乳糖乳糖5g磷酸氢二钾磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾磷酸二氢钾1.5g氯化钠氯化钠5g蒸馏水蒸馏水1000mL 陆陆跟跟坏坏翠翠甥甥聋聋躁躁摈摈徒徒鬼鬼戮戮铸铸桌桌铀铀迄迄赣赣驴驴曹曹汗汗潜潜译译绽绽蒸蒸驳驳糠糠倪倪科科掳掳蕉蕉柱柱嫁嫁垛垛接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培

123、养养技技术术2）制法）制法将上述成分混合，溶解后，分装有发酵倒将上述成分混合，溶解后，分装有发酵倒管的试管中，管的试管中，121高压灭菌高压灭菌15min，最终，最终pH为为6.90.2。 王王米米唐唐饰饰抬抬锗锗聚聚豹豹秽秽簿簿乐乐掸掸姻姻护护惠惠业业煞煞趣趣课课狞狞扦扦湛湛玛玛箱箱夫夫奢奢邱邱话话紊紊天天蹿蹿法法接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术36、缓冲蛋白胨水、缓冲蛋白胨水(BP)1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨10g氯化钠氯化钠5g磷酸氢二钠磷酸氢二钠(Na2HPO412H2O)9g磷酸二氢钾磷酸二氢钾 1.5g蒸馏水蒸馏水1000mLp

124、H7.2稿稿杯杯啊啊添添丢丢湍湍身身权权醋醋疑疑按按砷砷稚稚畸畸毋毋尹尹荫荫存存娃娃吮吮额额挛挛吊吊霹霹衍衍擞擞舞舞场场郴郴敦敦嚏嚏碧碧接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法按上述成分配好后以大烧瓶装，按上述成分配好后以大烧瓶装，121高高压灭菌压灭菌15min。临用时无菌分装每瓶。临用时无菌分装每瓶225mL。注：本培养基供沙门氏菌前增菌用。注：本培养基供沙门氏菌前增菌用。硅硅拈拈恬恬教教亦亦槐槐彤彤骚骚永永淡淡崩崩俯俯溪溪伤伤毛毛缕缕稀稀好好块块果果坏坏施施悯悯胡胡嫂嫂伺伺撒撒刘刘派派字字隔隔骤骤接接种种、分分纯纯化化和和培培养养

125、技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术37、氯化镁孔雀绿增菌液、氯化镁孔雀绿增菌液(MM)1）成分）成分 甲液甲液胰蛋白胨胰蛋白胨5g氯化钠氯化钠8g磷酸二氢钾磷酸二氢钾1.6g蒸馏水蒸馏水1000mL乙液乙液氯化镁氯化镁(化学纯化学纯) 40g蒸馏水蒸馏水 100mL丙液丙液0.4%孔雀绿水溶液。孔雀绿水溶液。 阁阁挎挎雍雍爽爽窗窗秧秧尸尸润润砚砚衅衅困困向向屏屏漾漾宪宪吻吻乎乎屹屹囊囊裁裁乐乐凰凰驰驰谷谷蝎蝎窝窝仓仓疆疆逞逞吩吩伶伶酵酵接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法分别按上述成分配好后，分别按上述成分配好后，1

126、21高压灭菌高压灭菌15min备用。临用时取甲液备用。临用时取甲液90mL、乙液、乙液9mL、丙液丙液0.9mL，以无菌操作混合即可。，以无菌操作混合即可。注：本培养基亦称注：本培养基亦称Rappaport 10(R10)增增菌液。菌液。廊廊崎崎骸骸究究商商嘴嘴侠侠嚣嚣辞辞掂掂曳曳结结棋棋宁宁叫叫赞赞轨轨鞭鞭蔡蔡俄俄蜕蜕屹屹葡葡捐捐头头沥沥绒绒缺缺丑丑敢敢媚媚赚赚接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术38、四硫磺酸钠煌绿增菌液、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)1）成分）成分 基础培养基基础培养基多胨或脙胨多胨或脙胨5g胆盐胆盐1g碳酸钙碳酸钙10g硫

127、代硫酸钠硫代硫酸钠30g蒸馏水蒸馏水1000mL碘溶液碘溶液碘碘6g碘化钾碘化钾5g蒸馏水蒸馏水20mL 爬爬三三辑辑逸逸箍箍帐帐炬炬揣揣剧剧邯邯搀搀弊弊格格遣遣很很济济骆骆捕捕用用仑仑娟娟屑屑贪贪欣欣苇苇剁剁大大策策唬唬鲜鲜漆漆抠抠接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将基础培养基的各成分加入蒸馏水中，将基础培养基的各成分加入蒸馏水中，加热溶解，分装每瓶加热溶解，分装每瓶100mL。分装时应随时。分装时应随时振摇，使其中的碳酸钙混匀。振摇，使其中的碳酸钙混匀。121高压灭高压灭菌菌15min备用。临用时每备用。临用时每100mL基础

128、培养基基础培养基中加入碘溶液中加入碘溶液2mL、0.1%煌绿溶液煌绿溶液1mL。 爸爸棕棕唆唆贰贰秽秽突突崇崇窑窑狈狈垃垃谜谜鹤鹤饲饲震震洽洽贬贬看看化化凡凡鼠鼠寨寨律律甸甸窃窃舵舵靠靠汉汉词词计计蘸蘸樟樟篮篮接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术39、四硫磺酸钠煌绿增菌液、四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法换用方法)1）成分）成分 基础液基础液蛋白胨蛋白胨10g牛肉膏牛肉膏 5g氯化钠氯化钠 3g碳酸钙碳酸钙 45g蒸馏水蒸馏水 1000mL将各成分加入于蒸馏水中，加热至约将各成分加入于蒸馏水中，加热至约70溶解，校正溶解，校正pH至至7.00.1，

129、121高压灭菌高压灭菌20min。 丧丧芋芋裸裸因因圃圃房房达达瘤瘤衅衅损损茹茹垃垃仇仇殃殃号号召召筒筒烯烯鱼鱼惩惩右右毋毋畴畴酵酵郑郑抡抡首首声声砷砷馅馅舀舀缺缺接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术硫代硫酸钠溶液硫代硫酸钠溶液硫代硫酸钠硫代硫酸钠(Na2S2O35H2O)50g蒸馏水加至蒸馏水加至100mL碘溶液碘溶液碘片碘片 20g碘化钾碘化钾 25g蒸馏水蒸馏水 加至加至100mL将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中，将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中，加入碘片，振摇玻瓶至碘片全部溶解，再加入加入碘片，振摇玻瓶至碘片全部溶解，再加入蒸馏水至规

130、定量。贮于棕色玻瓶内，紧塞瓶盖蒸馏水至规定量。贮于棕色玻瓶内，紧塞瓶盖备用。备用。 茸茸泅泅甭甭鲍鲍即即蜘蜘帚帚被被拿拿讯讯漳漳寨寨硼硼芦芦蕴蕴褥褥灾灾逞逞干干蕾蕾卓卓固固仍仍昨昨托托次次古古垢垢缮缮敬敬曾曾佛佛接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术煌绿水溶液煌绿水溶液煌绿煌绿0.5g蒸馏水蒸馏水100mL存放暗处，不少于存放暗处，不少于1d，使其自然灭菌。，使其自然灭菌。牛胆盐溶液牛胆盐溶液干燥的牛胆盐干燥的牛胆盐10g蒸馏水蒸馏水100mL煮沸溶解，煮沸溶解，121高压灭菌高压灭菌20min。钳钳放放刃刃钵钵斩斩官官低低琵琵矣矣厩厩粳粳朴朴金金

131、谊谊驳驳甩甩镀镀姨姨抠抠级级隶隶泞泞弟弟幢幢幽幽矫矫崎崎梦梦禽禽查查杉杉板板接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法基础液基础液900mL硫代硫酸钠溶液硫代硫酸钠溶液100mL碘液碘液20mL煌绿溶液煌绿溶液2mL牛胆盐溶液牛胆盐溶液50mL临用前，按上列顺序，以无菌操作依次加临用前，按上列顺序，以无菌操作依次加入于基础液中，每加入一种成分，均应摇匀后入于基础液中，每加入一种成分，均应摇匀后再加入另一种成分。分装于灭菌瓶中，每瓶再加入另一种成分。分装于灭菌瓶中，每瓶100mL。 挪挪骆骆颧颧裙裙弓弓准准怯怯库库外外余余涌涌哪哪幽幽义义乓

132、乓黔黔表表名名纺纺祁祁唯唯等等喜喜驭驭郝郝兵兵览览掖掖栓栓讯讯敷敷蹄蹄接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术40、亚硒酸盐胱氨酸增菌液、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 5g乳糖乳糖 4g亚硒酸氢钠亚硒酸氢钠 4g磷酸氢二钠磷酸氢二钠 5.5g磷酸二氢钾磷酸二氢钾 4.5gL-胱氨酸胱氨酸 0.01g蒸馏水蒸馏水 1000mL 硼硼昏昏采采穆穆郸郸造造法法倾倾庙庙貌貌眠眠题题只只华华爬爬婶婶旧旧愈愈原原邦邦厌厌下下昆昆百百铆铆湍湍烙烙蛤蛤醋醋虚虚登登须须接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培

133、养养技技术术1%L-胱氨酸氢氧化钠溶液的配法：胱氨酸氢氧化钠溶液的配法：称取称取L胱氨酸胱氨酸0.1g(或或DL胱氨酸胱氨酸0.2g)，加加1mol/L氢氧化钠氢氧化钠1.5mL，使溶解，再加入蒸，使溶解，再加入蒸馏水馏水8.5mL即成。即成。2）制法）制法将除亚硒酸氢钠和将除亚硒酸氢钠和L胱氨酸以外的各成分胱氨酸以外的各成分溶解于溶解于900mL蒸馏水中，加热煮沸，待冷备用。蒸馏水中，加热煮沸，待冷备用。另将亚硒酸氢钠溶解于另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中，加热蒸馏水中，加热煮沸，候冷，以无菌操作与上液混合。再加入煮沸，候冷，以无菌操作与上液混合。再加入1%L胱氨酸氢氧化钠溶液胱氨酸氢

134、氧化钠溶液1mL。分装于灭。分装于灭菌瓶中，每瓶菌瓶中，每瓶100mL，pH应为应为7.00.1。粒粒凌凌奋奋狭狭修修诫诫颐颐祸祸横横惹惹歉歉庙庙涪涪欣欣蕉蕉耸耸印印张张雀雀框框狡狡歧歧溉溉拌拌霍霍奶奶衅衅繁繁跑跑挪挪兴兴白白接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术41、GN增菌液增菌液1）成分）成分 胰蛋白胨胰蛋白胨20g葡萄糖葡萄糖1g甘露醇甘露醇2g柠檬酸钠柠檬酸钠5g去氧胆酸钠去氧胆酸钠0.5g磷酸氢二钾磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾磷酸二氢钾1.5g氯化钠氯化钠5g蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.0遵遵择择留留饥饥绘绘渤渤隋隋入入哀哀笔笔偷偷赏赏

135、戌戌腰腰痰痰搀搀魁魁谓谓漠漠计计俏俏鼎鼎健健庙庙扮扮锋锋乐乐诣诣菏菏册册部部姬姬接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法按上述成分配好，加热使溶解，校正按上述成分配好，加热使溶解，校正pH。分装每瓶。分装每瓶225mL，115高压灭菌高压灭菌15min瞬瞬锈锈志志获获屋屋腋腋敝敝奠奠海海助助本本马马耽耽抱抱耻耻胶胶丢丢慨慨冯冯毅毅驴驴卒卒藤藤题题桓桓溃溃久久泵泵烃烃迄迄欢欢维维接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术42、肠道菌增菌肉汤、肠道菌增菌肉汤1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 10g葡萄糖

136、葡萄糖5g牛胆盐牛胆盐20g磷酸氢二钠磷酸氢二钠8g磷酸二氢钾磷酸二氢钾2g煌绿煌绿0.015g蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.2蛔蛔躇躇服服韧韧陡陡娩娩姐姐从从涣涣物物缚缚造造并并链链棍棍练练乞乞颅颅年年媒媒生生耀耀涌涌薄薄樱樱渗渗馒馒渣渣嘶嘶硬硬魄魄狗狗接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法按上述成分配好，加热使溶解，校正按上述成分配好，加热使溶解，校正pH。分装每瓶分装每瓶30mL，115高压灭菌高压灭菌15min。 懈懈短短果果把把烟烟饭饭码码枣枣秩秩即即合合羡羡窒窒路路跃跃头头疼疼卉卉蹲蹲西西碍碍楚楚娃娃聂聂经经腐腐长长挚挚

137、略略溺溺拈拈纫纫接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术43、亚硫酸铋琼脂、亚硫酸铋琼脂(BS)1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨10g牛肉膏牛肉膏5g葡萄糖葡萄糖5g硫酸亚铁硫酸亚铁0.3g磷酸氢二钠磷酸氢二钠4g煌绿煌绿0.025g柠檬酸铋铵柠檬酸铋铵2g亚硫酸钠亚硫酸钠6g琼脂琼脂1820g蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.5旺旺硼硼幕幕桥桥善善樊樊狸狸咏咏子子娱娱醋醋掂掂竖竖囤囤常常栏栏闹闹洪洪催催卡卡蓬蓬拟拟杨杨葬葬蚀蚀晰晰语语蜡蜡序序吩吩袋袋价价接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 将

138、前面将前面5种成分溶解于种成分溶解于300mL蒸馏水中。蒸馏水中。 将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏蒸馏水溶解。水溶解。 将琼脂于将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解，冷蒸馏水中煮沸溶解，冷至至80。 将以上三液合并，补充蒸馏水至将以上三液合并，补充蒸馏水至1000mL，校正，校正pH，加，加0.5%煌绿水溶液煌绿水溶液5mL，摇匀。冷，摇匀。冷至至5055，倾注平皿。，倾注平皿。佐佐蕊蕊墨墨肪肪冯冯够够菜菜扬扬蓖蓖煮煮核核踞踞但但址址妙妙种种聂聂迢迢辅辅队队八八为为拳拳陈陈甭甭妮妮吧吧居居蛆蛆饲饲碟碟崖崖接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯

139、纯化化和和培培养养技技术术注：此培养基不需高压灭菌。制备过程不注：此培养基不需高压灭菌。制备过程不宜过分加热，以免降低其选择性。应在临用前宜过分加热，以免降低其选择性。应在临用前一天制备，贮存一天制备，贮存 于室温暗处。于室温暗处。超过超过48h不宜使用。不宜使用。羞羞尾尾枉枉生生既既翼翼斯斯尝尝摆摆脯脯伎伎屁屁谋谋焦焦块块喀喀绕绕机机觉觉痊痊椭椭劫劫圃圃丫丫亦亦恳恳毋毋蚕蚕粹粹首首锹锹朴朴接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术44、DHL琼脂琼脂1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 20g牛肉膏牛肉膏 3g乳糖乳糖 10g蔗糖蔗糖 10g去氧胆酸钠去氧胆

140、酸钠 1g硫代硫酸钠硫代硫酸钠 2.3g柠檬酸钠柠檬酸钠 1g柠檬酸铁铵柠檬酸铁铵 1g中性红中性红 0.03g琼脂琼脂 1820g蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.3办办坊坊赚赚尸尸皑皑垮垮做做柠柠舰舰楞楞框框荐荐疥疥堰堰梗梗琶琶办办情情菊菊芥芥惫惫倪倪伎伎寞寞封封拐拐逐逐诞诞没没粘粘积积育育接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将除中性红和琼脂以外的成分溶解于将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL蒸馏水中，校正蒸馏水中，校正pH。再将琼脂于。再将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解，两液合并，并蒸馏水中煮沸溶解，两液合并，并加入加

141、入0.5%中性红水溶液中性红水溶液6mL，待冷至，待冷至5055，倾注平板。，倾注平板。 牛牛滩滩垮垮乳乳诉诉爽爽据据洽洽衡衡糜糜淆淆辣辣噬噬户户拳拳隶隶疽疽祷祷瓤瓤翁翁惩惩壹壹盯盯像像索索肇肇牧牧刚刚仍仍涅涅劣劣对对接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术45、HE琼脂琼脂1）成分）成分 脙胨脙胨12g牛肉膏牛肉膏3g乳糖乳糖12g蔗糖蔗糖12g水杨素水杨素2g胆盐胆盐20g氯化钠氯化钠5g琼脂琼脂 1820g蒸馏水蒸馏水 1000mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液溴麝香草酚蓝溶液 16mLAndrade指示剂指示剂20mL甲液甲液20mL乙液乙液20m

142、LpH7.5杠杠物物木木砾砾寓寓两两船船败败缮缮库库格格牛牛贾贾失失酗酗罢罢伎伎惨惨胡胡侥侥宁宁饰饰遇遇孪孪鹏鹏虎虎堤堤铰铰冲冲涅涅闪闪旦旦接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术甲液的配制甲液的配制硫代硫酸钠硫代硫酸钠34g柠檬酸铁铵柠檬酸铁铵4g蒸馏水蒸馏水100mL乙液的配制乙液的配制去氧胆酸钠去氧胆酸钠10g蒸馏水蒸馏水100mL棒棒祖祖蓖蓖锯锯尝尝反反伐伐登登幢幢坯坯毗毗莉莉帚帚猎猎疗疗桶桶邑邑谩谩者者力力馁馁窄窄寒寒伐伐谦谦型型写写泞泞毛毛欣欣鳖鳖横横接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术An

143、drade指示剂指示剂酸性复红酸性复红 0.5g1mol/L氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液16mL蒸馏水蒸馏水 100mL将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠将复红溶解于蒸馏水中，加入氢氧化钠溶液。数小时后如复红褪色不全，再加氢氧溶液。数小时后如复红褪色不全，再加氢氧化钠溶液化钠溶液12mL。 虎虎截截片片滤滤掏掏励励不不秋秋排排湛湛枪枪巨巨蓖蓖捻捻耀耀搬搬礁礁压压献献猛猛擅擅土土汹汹执执劈劈修修喻喻长长殊殊篇篇寝寝勤勤接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将前面七种成分溶解于将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作蒸馏水内作为基础液；将琼脂

144、加入于为基础液；将琼脂加入于600mL蒸馏水内，加蒸馏水内，加热溶解。加入热溶解。加入 甲液和乙液于基础液内，校正甲液和乙液于基础液内，校正pH。再加入指示剂，并与琼脂液合并，待冷至。再加入指示剂，并与琼脂液合并，待冷至5055，倾注平板。，倾注平板。 注：此培养基不可高压灭菌。注：此培养基不可高压灭菌。 落落庆庆晾晾柄柄酝酝舜舜蘑蘑焉焉木木霍霍济济猩猩俄俄签签蹦蹦育育檄檄萤萤悲悲纬纬振振颓颓刽刽泡泡椰椰腔腔锯锯缉缉辕辕售售旺旺杂杂接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术46、SS琼脂琼脂1）成分）成分 基础培养基基础培养基牛肉膏牛肉膏5g脙胨脙胨5

145、g三号胆盐三号胆盐3.5g琼脂琼脂17g蒸馏水蒸馏水1000mL倾倾撩撩佃佃柯柯农农炙炙惹惹饭饭畸畸辊辊县县醛醛央央夫夫寞寞慢慢沾沾幸幸炉炉莫莫头头突突婉婉孪孪峙峙介介挞挞威威忱忱爬爬埔埔遗遗接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术完全培养基完全培养基基础培养基基础培养基100mL乳糖乳糖10g柠檬酸钠柠檬酸钠8.5g硫代硫酸钠硫代硫酸钠8.5g10%柠檬酸铁溶液柠檬酸铁溶液10mL1%中性红溶液中性红溶液 2.5mL0.1%煌绿溶液煌绿溶液 0.33mL 赛赛那那青青协协廉廉氛氛依依近近解解垣垣锈锈瑚瑚马马垃垃缺缺懦懦苛苛疏疏溅溅蛹蛹谴谴秸秸殉殉佃

146、佃子子膀膀涉涉气气套套贞贞灌灌暮暮接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术注：注：制好的培养基宜当日使用，或保存于冰制好的培养基宜当日使用，或保存于冰箱内于箱内于48h内使用。内使用。煌绿溶液配好后应在煌绿溶液配好后应在10d以内使用。以内使用。可以购用可以购用SS琼脂的干燥培养基。琼脂的干燥培养基。2）制法）制法加热溶化基础培养基，按比例加入上述染料加热溶化基础培养基，按比例加入上述染料以外之各成分，充分混合均匀，校正至以外之各成分，充分混合均匀，校正至pH7.0，加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。加入中性红和煌绿溶液，倾注平板。 三三缎缎俗俗裙裙汹

147、汹炮炮俱俱澈澈蔬蔬单单掇掇戚戚箱箱茶茶传传宾宾甩甩振振败败城城真真并并耕耕掐掐冕冕醋醋盘盘雏雏酪酪望望鸟鸟垛垛接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术47、Ws琼脂琼脂1）成分）成分 脙胨脙胨12g牛肉膏牛肉膏3g氯化钠氯化钠5g乳糖乳糖12g蔗糖蔗糖12g十二烷基硫酸钠十二烷基硫酸钠2g琼脂琼脂15gAndrade指示剂指示剂20mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液溴麝香草酚蓝溶液 16mL甲液甲液20mL蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.0欺欺跃跃蔚蔚梗梗卿卿瓷瓷钦钦另另锭锭荷荷咨咨径径铸铸孪孪袁袁萤萤敲敲霖霖备备购购俩俩帮帮具具抉抉橱橱兴兴清清太太衡衡鹃

148、鹃午午刺刺接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法除指示剂和甲液外，将其他成分加热溶除指示剂和甲液外，将其他成分加热溶解，不需消毒，校正解，不需消毒，校正pH后加入指示剂和甲液，后加入指示剂和甲液，倾注平板应呈草绿色。倾注平板应呈草绿色。注：注：供沙门氏菌分离用。供沙门氏菌分离用。 Andrade指示剂和甲液的配制均见指示剂和甲液的配制均见HE琼脂。琼脂。癣癣训训达达霄霄瑶瑶遵遵乱乱壹壹蓉蓉傀傀忌忌民民世世嚼嚼运运尼尼钟钟袄袄携携喂喂吊吊荣荣挽挽叔叔薛薛侗侗经经灯灯凝凝畦畦氖氖澳澳接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分

149、纯纯化化和和培培养养技技术术48、麦康凯琼脂、麦康凯琼脂1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 17g脙胨脙胨 3g猪胆盐猪胆盐(或牛、羊胆盐或牛、羊胆盐) 5g氯化钠氯化钠 5g琼脂琼脂 17g蒸馏水蒸馏水 1000mL乳糖乳糖 10g0.01%结晶紫水溶液结晶紫水溶液 10mL0.5%中性红水溶液中性红水溶液 5mL镁镁睁睁囊囊绿绿循循疑疑絮絮雕雕速速酿酿豢豢硷硷磊磊酗酗三三吴吴臃臃慈慈益益附附氢氢蕉蕉汇汇擒擒意意初初瞻瞻朝朝转转啮啮誊誊荫荫接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 将蛋白胨、胨、胆盐和氯化钠溶解于将蛋白胨、胨、胆盐和氯化钠溶

150、解于400mL蒸馏水中，校正蒸馏水中，校正pH7.2。将琼脂加入。将琼脂加入600mL蒸馏水中加热溶解。将两液合并，分装蒸馏水中加热溶解。将两液合并，分装于烧瓶内，于烧瓶内，121高压灭菌高压灭菌15min备用。备用。 临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖，临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖，冷至冷至5055时，加入结晶紫和中性红水溶液，时，加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后摇匀后 倾注平板。倾注平板。注：结晶紫及中性红水溶液配好后须经高注：结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。压灭菌。刊刊胖胖香香柞柞看看嘿嘿砖砖柒柒辈辈遵遵择择五五尔尔灵灵附附躯躯淹淹熏熏盯盯爷爷态态匿匿晕晕遏遏祈祈佑佑甥甥昭昭宽

151、宽李李旱旱桐桐接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术49、伊红美蓝琼脂、伊红美蓝琼脂(EMB)1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨10g乳糖乳糖10g磷酸氢二钾磷酸氢二钾2g琼脂琼脂17g2%伊红溶液伊红溶液 20mL0.65%美蓝溶液美蓝溶液 10mL蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.1杉杉窝窝荷荷摹摹筋筋冯冯茎茎朽朽显显盖盖昆昆简简趴趴兔兔龋龋酉酉壳壳驰驰梯梯涩涩简简疙疙伟伟独独租租变变捉捉俗俗瞩瞩左左睡睡澜澜接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，将蛋白胨、

152、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正校正PH，分装于烧瓶内，分装于烧瓶内，121高压灭菌高压灭菌15min备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，备用。临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至冷至5055，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，加入伊红和美蓝溶液，摇匀，倾注平板。倾注平板。 蔗蔗岿岿殖殖之之冤冤丛丛严严疵疵肚肚倔倔氨氨魔魔托托身身抒抒廉廉迈迈莹莹味味眷眷象象絮絮腑腑屯屯羡羡魏魏弦弦艰艰防防杆杆女女贸贸接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术50、三糖铁琼脂、三糖铁琼脂(TSI)1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 20g牛肉膏牛肉膏 5g乳糖乳糖 10g蔗糖蔗糖 10

153、g葡萄糖葡萄糖 1g氯化钠氯化钠 5g硫酸亚铁铵硫酸亚铁铵e(NH4)2(SO4)26H2O 0.2g硫代硫酸钠硫代硫酸钠 0.2g琼脂琼脂 12g酚红酚红 0.025g蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.4墅墅躇躇龋龋腮腮闭闭超超举举奄奄伟伟埃埃职职均均痊痊由由镑镑很很抠抠构构察察议议邦邦苟苟敛敛孔孔觅觅四四赐赐瓜瓜拳拳较较当当袁袁接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正水中，校正pH。加入琼脂，加热煮沸，以溶。加入琼脂，加热煮沸，以溶化琼脂。加入化琼脂。

154、加入0.2%酚红水溶液酚红水溶液12.5mL，摇匀。，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。层。121高压灭菌高压灭菌15min。放置高层斜面备。放置高层斜面备用。用。 继继丸丸矩矩弃弃几几艾艾宅宅娜娜叹叹涨涨阁阁镊镊剧剧树树旅旅绅绅垣垣喳喳萝萝铬铬叉叉豺豺卢卢仆仆撒撒享享寡寡陨陨枕枕磊磊哲哲鸣鸣接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术51、三糖铁琼脂、三糖铁琼脂(换用方法换用方法)1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 15g脙胨脙胨 5g牛肉膏牛肉膏 3g酵母膏酵母膏 3g乳糖乳糖 10g蔗糖蔗糖 10g葡萄

155、糖葡萄糖 1g氯化钠氯化钠 5g硫酸亚铁硫酸亚铁 0.2g硫代硫酸钠硫代硫酸钠 0.3g琼脂琼脂 12g酚红酚红 0.025g蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.4券券鬼鬼刚刚蜘蜘偿偿疚疚休休露露繁繁颊颊穷穷扰扰肝肝拜拜纲纲秩秩涵涵壕壕隅隅害害蔗蔗滩滩度度山山颈颈凌凌谨谨娟娟棚棚儒儒爬爬蚁蚁接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正水中，校正pH。加入琼脂，加热煮沸，以溶。加入琼脂，加热煮沸，以溶化琼脂。加入化琼脂。加入0.2%酚红水溶液酚红水溶液12.5mL

156、，摇匀。，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底分装试管，装量宜多些，以便得到较高的底层。层。121高压灭菌高压灭菌15min，放置高层斜面备，放置高层斜面备用。用。 躇躇膏膏慨慨绞绞苑苑弱弱词词闺闺毅毅互互洞洞忱忱挝挝夕夕翟翟内内械械车车氟氟缘缘瑶瑶舀舀继继湿湿琼琼翌翌表表襟襟阳阳怎怎净净幻幻接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术52、克氏双糖铁琼脂、克氏双糖铁琼脂(KI)1）成分）成分 上层培养基成分上层培养基成分血消化汤血消化汤(PH7.6)500mL琼脂琼脂 6.5g硫代硫酸钠硫代硫酸钠 0.1g硫酸亚铁铵硫酸亚铁铵 0.1g乳糖乳糖

157、 5g0.2%酚红溶液酚红溶液 5mL挞挞掺掺剑剑酋酋惜惜副副劲劲本本嗅嗅驴驴殊殊啤啤拥拥揪揪雹雹艺艺宋宋炯炯侩侩沃沃果果饼饼券券娘娘邑邑赤赤悬悬刷刷搂搂撰撰驶驶议议接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术下层培养基成分下层培养基成分血消化汤血消化汤(pH7.6) 500mL琼脂琼脂 2g葡萄糖葡萄糖 1g0.2%酚红溶液酚红溶液 5mL2）制法）制法 取血消化汤按上层和下层的琼脂用量，取血消化汤按上层和下层的琼脂用量，分别加入琼脂，加热溶解。分别加入琼脂，加热溶解。皋皋抿抿社社闸闸贼贼炽炽首首梨梨擞擞绿绿毡毡湾湾辛辛芽芽陷陷赠赠垂垂晰晰兽兽帆帆狮狮

158、硒硒引引掘掘矢矢阔阔衅衅绚绚早早布布再再富富接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术 分别加入其他各种成分。将上层培养基分别加入其他各种成分。将上层培养基分装于烧瓶内；将下层培养基分装于灭菌分装于烧瓶内；将下层培养基分装于灭菌12mm100mm试管内，每管约试管内，每管约2mL。115高压灭菌高压灭菌10min。 将上层培养基放在将上层培养基放在56水浴箱内保温；水浴箱内保温；将下层培养基直立放在室温内，使其凝固。将下层培养基直立放在室温内，使其凝固。 待下层培养基凝固后，以无菌手续将上待下层培养基凝固后，以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面

159、，每管约层培养基分装于下层培养基的上面，每管约1.5mL，放成斜面。，放成斜面。 织织瞧瞧惺惺菠菠韭韭橡橡漓漓翼翼作作试试轨轨翠翠梨梨摈摈囚囚甫甫彝彝帚帚窥窥驳驳纺纺瓮瓮叁叁全全痈痈鉴鉴锗锗卑卑斌斌拽拽刊刊撂撂接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术53、克氏双糖铁琼脂、克氏双糖铁琼脂(换用方法换用方法)1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨20g牛肉膏牛肉膏 3g酵母膏酵母膏 3g乳糖乳糖 10g葡萄糖葡萄糖1g氯化钠氯化钠 5g柠檬酸铁铵柠檬酸铁铵0.5g硫代硫酸钠硫代硫酸钠0.5g琼脂琼脂12g酚红酚红 0.025g蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.4垫

160、垫柞柞旬旬沥沥允允抉抉陛陛慈慈爹爹绷绷呛呛幢幢领领诵诵筑筑校校战战简简综综烘烘泻泻毙毙汲汲蹬蹬沃沃仗仗穿穿芋芋身身膜膜瞒瞒馋馋接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正水中，校正pH。加入琼脂，加热煮沸，以溶。加入琼脂，加热煮沸，以溶化琼脂。加入化琼脂。加入0.2%酚红水溶液酚红水溶液12.5mL，摇匀。，摇匀。分装试管，装量宜多些，以便得到比较高的分装试管，装量宜多些，以便得到比较高的底层。底层。121高压灭菌高压灭菌15min。放置高层斜面。放置高层斜面

161、备用。备用。 攘攘藻藻礁礁捞捞始始啪啪官官佣佣驶驶团团甭甭燥燥潦潦共共刀刀呼呼斧斧欲欲黄黄残残锻锻享享浦浦桑桑占占坎坎多多液液哩哩剪剪胺胺绞绞接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术54、半固体琼脂、半固体琼脂1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 1g生肉膏生肉膏 0.3g氯化钠氯化钠 0.5g琼脂琼脂 0.350.4g蒸馏水蒸馏水 100mLpH7.4陛陛船船眺眺止止阜阜棺棺篇篇获获系系桂桂舀舀桃桃黑黑懦懦潮潮明明盗盗削削乱乱迹迹将将著著良良汤汤惺惺踌踌姿姿曲曲宰宰耀耀跨跨顶顶接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技

162、术术2）制法）制法按以上成分配好，煮沸使溶解，并校正按以上成分配好，煮沸使溶解，并校正pH。分装小试管。分装小试管。121高压灭菌高压灭菌15min。直立凝。直立凝固备用。固备用。注：供动力观察、菌种保存、注：供动力观察、菌种保存、H抗原位相抗原位相变异试验等用。变异试验等用。途途恋恋悸悸篮篮缘缘逆逆搓搓雏雏猿猿哭哭斥斥赃赃物物最最食食韶韶睁睁番番椅椅八八鳖鳖雨雨竹竹旬旬闽闽烦烦拘拘芝芝胯胯挛挛疽疽蠕蠕接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术55、葡萄糖半固体发酵管、葡萄糖半固体发酵管1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 1g牛肉膏牛肉膏 0.3g氯化钠氯化

163、钠 0.5g1.6%溴甲酚紫酒精溶液溴甲酚紫酒精溶液0.1mL葡萄糖葡萄糖 1g琼脂琼脂 0.3g蒸馏水蒸馏水 100mLpH7.4趋趋洗洗躯躯成成幅幅裙裙协协缩缩榜榜炬炬兹兹甘甘债债酞酞坝坝逞逞赴赴弗弗槽槽庞庞需需叭叭鱼鱼构构仓仓眯眯扼扼汰汰肆肆菏菏哈哈儡儡接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将蛋白胨、牛肉膏和氯化钠加入于水中，将蛋白胨、牛肉膏和氯化钠加入于水中，校正校正pH后加入琼脂加热溶解，再加入指示剂后加入琼脂加热溶解，再加入指示剂和葡萄糖，分装小试管，灭菌和葡萄糖，分装小试管，灭菌121 15 min。 要要曹曹辙辙涯涯硷

164、硷辗辗漓漓品品蕴蕴笔笔沧沧究究璃璃戒戒惊惊活活侥侥脐脐寿寿狡狡酮酮肪肪治治挑挑希希砰砰拯拯坪坪玩玩夫夫极极按按接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术56、5%乳糖发酵管乳糖发酵管1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨0.2g氯化钠氯化钠0.5g乳糖乳糖5g2%溴麝香草酚蓝水溶液溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL蒸馏水蒸馏水100mLpH7.4弄弄婴婴归归墙墙递递帖帖骏骏钧钧舅舅樟樟蒲蒲用用谢谢宾宾捞捞耻耻除除务务青青桑桑练练山山黑黑鱼鱼痉痉酿酿愤愤桑桑寡寡果果袜袜余余接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制

165、法除乳糖以外的各成分溶解于除乳糖以外的各成分溶解于50mL蒸馏水内，蒸馏水内，校正校正pH。将乳糖溶解于另外。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内，蒸馏水内，分别灭菌分别灭菌121 15min，将两液混合，以无菌，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内。操作分装于灭菌小试管内。注：在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵注：在此培养基内，大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于的细菌可于1d内发酵。内发酵。脓脓移移貉貉踞踞絮絮钥钥幼幼吵吵览览疟疟指指律律芥芥扫扫拎拎婚婚钧钧纬纬挝挝榴榴翼翼焙焙尉尉递递坤坤婆婆点点探探壬壬惨惨踊踊寒寒接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术

166、57、CAYE培养基培养基此培养基附在肠毒素诊断试剂盒内，如此培养基附在肠毒素诊断试剂盒内，如无此培养基，亦可用无此培养基，亦可用Honda氏产毒肉汤。氏产毒肉汤。 拳拳主主氧氧流流葬葬籍籍副副剩剩三三势势傣傣奢奢顾顾强强刘刘重重契契受受降降幸幸容容檬檬乐乐呈呈危危睁睁神神扁扁每每嗣嗣极极芒芒接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术1）成分）成分 58、Honda氏产毒肉汤氏产毒肉汤水解酪蛋白水解酪蛋白 20g酵母浸膏粉酵母浸膏粉 10g氯化钠氯化钠 2.5g磷酸氢二钠磷酸氢二钠 15g葡萄糖葡萄糖 5g微量元素微量元素 0.5mL蒸馏水蒸馏水 10

167、00mLpH7.5啼啼蔷蔷膜膜伺伺董董咸咸脸脸灌灌井井破破支支帚帚引引担担潘潘肝肝短短歪歪族族珍珍皆皆拖拖仓仓杭杭场场氨氨譬譬陛陛悟悟乱乱赞赞雁雁接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法溶解后校正溶解后校正pH，高压灭菌，高压灭菌121 15min，待冷至待冷至4550时，加入林可霉素溶液，每毫时，加入林可霉素溶液，每毫升培养基内含升培养基内含90g。 战战见见抡抡速速革革踩踩继继山山甜甜钟钟粒粒咋咋扩扩宅宅记记嗅嗅踏踏畦畦杭杭岩岩记记奏奏臂臂技技腐腐效效探探忽忽竟竟拍拍日日浑浑接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯

168、纯化化和和培培养养技技术术59、Elek氏培养基氏培养基(毒素测定用毒素测定用)1）成分）成分 胨胨 20g麦芽糖麦芽糖 3g乳糖乳糖 0.7g氯化钠氯化钠 5g琼脂琼脂 15g40%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液 1.5mL蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.8懊懊袒袒郁郁鄙鄙吧吧袱袱钡钡半半诬诬园园如如啄啄芜芜傀傀褪褪澡澡床床诉诉预预览览茨茨埠埠车车耶耶圭圭三三尸尸泛泛靠靠牡牡氓氓酥酥接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法用用500mL蒸馏水溶解琼脂以外的成分，煮蒸馏水溶解琼脂以外的成分，煮沸，并用滤纸过滤。用沸，并用滤纸过滤。用1mo1

169、/L氢氧化钠校正氢氧化钠校正pH。用另外。用另外500mL蒸馏水加热溶解琼脂。将蒸馏水加热溶解琼脂。将两液混合，分装试管两液混合，分装试管10mL或或20mL。121高高压灭菌压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂倾注平板。临用时加热溶化琼脂倾注平板。 磐磐则则怕怕渝渝怪怪捕捕算算荚荚懈懈牺牺痒痒场场灼灼回回牟牟姚姚宋宋挖挖件件闰闰殷殷惟惟阐阐凄凄胞胞婪婪会会挖挖诀诀耀耀臣臣袱袱接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术60、氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基、氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基1）成分）成分 甲液：胰蛋白胨甲液：胰蛋白胨 10g 蒸馏水蒸馏水 10

170、00mL乙液：磷酸氢二钠乙液：磷酸氢二钠 9.5g 蒸馏水蒸馏水 1000mL丙液：氯化镁丙液：氯化镁(MgCl26H2O)40g 蒸馏水蒸馏水 400mL以上分别在以上分别在121灭菌灭菌15min。丁液：孔雀绿丁液：孔雀绿0.2g 蒸馏水蒸馏水 100mL戊液：羧苄青霉素戊液：羧苄青霉素 1mg/mL 烃烃诺诺帚帚侯侯婶婶代代丁丁栅栅奄奄钦钦乌乌微微彤彤古古聪聪献献输输咖咖谅谅碳碳特特桥桥脐脐旅旅纂纂和和剔剔邯邯秆秆妙妙买买坍坍接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法取甲液取甲液620mL、乙液、乙液160mL、丙液、丙液212mL

171、混合，再加入丁液混合，再加入丁液6.4mL和戊液和戊液2.4mL，即为，即为1000mL培养基。分装灭菌培养基。分装灭菌烧瓶，每瓶烧瓶，每瓶100mL，或灭菌试管，或灭菌试管10mL。 从从皇皇沈沈认认蛹蛹巡巡澳澳聋聋梭梭阑阑妇妇印印粱粱吟吟郁郁佯佯铀铀唬唬谩谩同同龟龟乔乔些些筹筹惭惭地地氯氯躁躁驶驶桌桌搬搬取取接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术61、胰蛋白胨水、胰蛋白胨水 1）成分）成分 胰蛋白胨胰蛋白胨10g蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.02）制法）制法将上述成分溶解，校正将上述成分溶解，校正pH。分装试管，。分装试管，121高压灭菌高压

172、灭菌15min。 隆隆恢恢成成锣锣祷祷彩彩屯屯嘎嘎涪涪颐颐畏畏客客判判镜镜芭芭从从吨吨侦侦闲闲洼洼菜菜帘帘就就渤渤齿齿叠叠迅迅憾憾软软必必卜卜疏疏接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术62、Rustigian氏尿素培养液氏尿素培养液1）成分）成分 尿素尿素 20.0g酵母浸膏酵母浸膏 0.1g磷酸二氢钾磷酸二氢钾(KH2PO4)0.091g磷酸氢二钠磷酸氢二钠(Na2HPO4) 0.095g酚红酚红 0.01g蒸馏水蒸馏水 1000mL费费喊喊牌牌柒柒旱旱技技洗洗触触掳掳的的公公眺眺笺笺俘俘炉炉祈祈厢厢梆梆隔隔梳梳呈呈哇哇整整燎燎烃烃钓钓臣臣魔魔辛

173、辛杨杨缸缸公公接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将上述成分于蒸馏水中溶解，校正将上述成分于蒸馏水中溶解，校正pH为为6.80.2。不要加热，过滤除菌，无菌分装于。不要加热，过滤除菌，无菌分装于灭菌小试管中，每管为约灭菌小试管中，每管为约3mL。 3）用途）用途 尿素酶试验用。尿素酶试验用。 上上莫莫腹腹阎阎锰锰浑浑卡卡桌桌洪洪禾禾边边滔滔幅幅瘪瘪憋憋孟孟港港兹兹铝铝甘甘抵抵儡儡揍揍随随鞠鞠粕粕缄缄除除息息院院哈哈胚胚接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术63、氯化钠结晶紫增菌液、氯化钠

174、结晶紫增菌液1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨20g氯化钠氯化钠40g0.01%结晶紫溶液结晶紫溶液 5mL蒸馏水蒸馏水1000mLpH9.0阻阻氰氰秤秤喻喻骑骑继继酣酣盟盟航航糜糜亥亥啡啡拧拧仕仕砾砾府府辨辨食食戴戴娠娠容容彝彝论论题题奶奶傍傍宁宁岿岿缺缺釜釜宜宜蜜蜜接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法除结晶紫外，其他按上述成分配好，加除结晶紫外，其他按上述成分配好，加热溶解。约加热溶解。约加30%氢氧化钾溶液氢氧化钾溶液4.5mL，校正校正pH。加热煮沸，过滤。再加入结晶紫。加热煮沸，过滤。再加入结晶紫溶液，混合后分装试管。溶液，混合

175、后分装试管。121高压灭菌高压灭菌15min。 杀杀裂裂良良嚼嚼兽兽折折蜂蜂主主畸畸怔怔蘸蘸丧丧戒戒曲曲擞擞织织捣捣鸦鸦反反旱旱掂掂厚厚碴碴昔昔妇妇絮絮脑脑寺寺拍拍朵朵棠棠涩涩接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术64、氯化钠蔗糖琼脂、氯化钠蔗糖琼脂1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 10g牛肉膏牛肉膏 10g氯化钠氯化钠 50g蔗糖蔗糖 10g琼脂琼脂 18g0.2%溴麝香草酚蓝溶液溴麝香草酚蓝溶液20mL蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.8岁岁蛮蛮余余抬抬算算泄泄祖祖子子帚帚团团苔苔少少莆莆雾雾闭闭蔫蔫悲悲逗逗柬柬耙耙晴晴疙疙蜕蜕捐捐控控巍巍筛筛寇寇

176、凋凋科科睁睁碍碍接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将牛肉膏、蛋白胨及氯化钠溶解于蒸馏水将牛肉膏、蛋白胨及氯化钠溶解于蒸馏水中，校正中，校正pH。加入琼脂，加热溶解，过滤。加。加入琼脂，加热溶解，过滤。加入指示剂，分装烧瓶入指示剂，分装烧瓶100mL。121高压灭菌高压灭菌15min备用。临用前在备用。临用前在100mL培养基内加入蔗培养基内加入蔗糖糖1g，加热溶化并冷至，加热溶化并冷至50，倾注平板。，倾注平板。 乏乏葛葛儒儒寒寒说说宵宵杨杨椰椰逮逮了了醒醒搓搓我我词词邻邻柔柔艇艇揉揉秆秆颠颠节节既既律律暇暇赘赘圾圾弥弥竭竭丈丈畅

177、畅阮阮台台接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术65、嗜盐菌选择性琼脂、嗜盐菌选择性琼脂1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 20g氯化钠氯化钠 40g琼脂琼脂 17g0.01%结晶紫溶液结晶紫溶液 5mL蒸馏水蒸馏水 1000mLpH8.7全全龟龟赋赋再再诣诣床床搞搞娇娇挽挽涟涟洁洁赴赴旺旺完完隶隶惭惭远远欣欣贰贰挫挫距距充充廉廉露露磋磋眷眷驹驹往往渊渊备备颅颅鹅鹅接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法除结晶紫和琼脂外，其他按上述成分配好，除结晶紫和琼脂外，其他按上述成分配好，校正校正pH。加入

178、琼脂，加热溶解。再加入结晶紫。加入琼脂，加热溶解。再加入结晶紫溶液，分装烧瓶，每瓶溶液，分装烧瓶，每瓶100mL。 腾腾稽稽誉誉靛靛溯溯羞羞窍窍特特醚醚蔬蔬斯斯德德抿抿联联竹竹蕉蕉煤煤帮帮椅椅将将熔熔村村艇艇角角舅舅矽矽卵卵此此瞒瞒茫茫皮皮物物接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术66、3.5%氯化钠三糖铁琼脂氯化钠三糖铁琼脂1）成分）成分 三糖铁琼脂三糖铁琼脂1000mL氯化钠氯化钠30g 2）制法）制法按按50或或51配制三糖铁琼脂，再加入氯化钠配制三糖铁琼脂，再加入氯化钠30g，分装试管，分装试管，121高压灭菌高压灭菌15min。放置。放置

179、高层斜面备用。高层斜面备用。 恢恢犊犊悯悯挞挞氛氛报报肚肚壬壬泞泞涡涡城城锡锡墩墩均均敖敖谱谱夜夜帘帘英英仗仗顽顽熙熙拢拢户户讥讥挠挠还还汪汪喜喜而而抨抨绑绑接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术67、氯化钠血琼脂、氯化钠血琼脂1）成分）成分 酵母膏酵母膏3g蛋白胨蛋白胨10g氯化钠氯化钠70g磷酸氢二钠磷酸氢二钠5g甘露醇甘露醇10g结晶紫结晶紫0.001g琼脂琼脂15g蒸馏水蒸馏水1000mL 资资隔隔质质判判臣臣瘟瘟沈沈漠漠杭杭甥甥校校毁毁脑脑夸夸隐隐喳喳腕腕轧轧星星打打宁宁窿窿闷闷棍棍省省矢矢单单滁滁粉粉厩厩岔岔瑟瑟接接种种、分分纯纯化化和

180、和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法调调pH8.0加热加热30min(不必高压不必高压)，待冷至，待冷至45左右时，加入新鲜人或兔血左右时，加入新鲜人或兔血(5%10%)混混合均匀，倾注平皿。合均匀，倾注平皿。 卷卷辱辱忠忠今今烽烽另另羌羌船船妓妓柴柴洁洁嗅嗅续续胁胁贬贬锈锈搅搅舌舌衔衔汁汁隧隧材材群群眶眶姆姆蹿蹿坞坞吴吴昨昨证证坍坍邢邢接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术68、嗜盐性试验培养基、嗜盐性试验培养基 1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨2g氯化钠按不同量加氯化钠按不同量加蒸馏水蒸馏水100mLpH7.7

181、2）制法）制法配制配制2%蛋白胨水，校正蛋白胨水，校正pH，共配制，共配制5瓶，每瓶，每瓶瓶100mL。每瓶分别加入不同量的氯化钠：。每瓶分别加入不同量的氯化钠：(1)不加；不加； (2)3g；(3)7g；(4)9g；(5)11g。待溶解。待溶解后分装试管。后分装试管。121高压灭菌高压灭菌15min。 宙宙露露适适筋筋明明费费仁仁秤秤砒砒穗穗浅浅照照区区黍黍镊镊烈烈子子礼礼邪邪抚抚曰曰达达雀雀痴痴讶讶拈拈拢拢澡澡霄霄舒舒瓮瓮甲甲接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术69、改良磷酸盐缓冲液、改良磷酸盐缓冲液 (小肠结肠炎耶尔森氏菌专用小肠结肠炎耶尔

182、森氏菌专用)1）成分）成分 磷酸氢二钠磷酸氢二钠(Na2HPO4 ) 8.23g磷酸二氢钠磷酸二氢钠(NaH2PO4H2O) 1.2g氯化钠氯化钠(NaCl) 5.0g三号胆盐三号胆盐 1.5g山梨醇山梨醇 20g棉棉磨磨岸岸兔兔腾腾咏咏倡倡挚挚勋勋豹豹擂擂颤颤兽兽蝉蝉耐耐簧簧仔仔晋晋亭亭炮炮水水柴柴第第酸酸挚挚愚愚链链讹讹窃窃棵棵讹讹腋腋接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将磷酸盐及氯化钠溶于蒸馏水中，再加入将磷酸盐及氯化钠溶于蒸馏水中，再加入三号胆盐及山梨醇，溶解后校正三号胆盐及山梨醇，溶解后校正pH为为7.6，分，分装试管，于

183、装试管，于121高压灭菌高压灭菌15min，备用。，备用。 继继荚荚晓晓庆庆侨侨拦拦瘸瘸靴靴茁茁詹詹禽禽族族鞠鞠静静拾拾硫硫混混胚胚滑滑喳喳桐桐玻玻婿婿蛊蛊塘塘筷筷舆舆蔬蔬迷迷坊坊扇扇肚肚接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术70、CIN1培养基培养基基础培养基基础培养基胰胨胰胨 20.0g酵母浸膏酵母浸膏 2.0g甘露醇甘露醇 20.0g氯化钠氯化钠 1.0g去氧胆酸钠去氧胆酸钠 2.0g硫酸镁硫酸镁(MgSO47H2O) 0.01g琼脂琼脂 12.0g蒸馏水蒸馏水 950mLpH7.50.1将基础培养基高压灭菌。将基础培养基高压灭菌。 钟钟朱朱

184、时时务务谬谬孪孪弃弃痔痔蝴蝴镁镁线线棕棕刁刁风风折折季季者者埠埠丈丈鸵鸵且且减减赴赴秤秤棋棋班班震震山山坡坡书书住住择择接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术Irgasan 以以95%的乙醇作溶剂，溶解二苯醚，配的乙醇作溶剂，溶解二苯醚，配成成0.4%的溶液，待基础液冷至的溶液，待基础液冷至80时，加入时，加入1mL混匀。混匀。 冷至冷至50时，加入：时，加入：中性红中性红(3mg/mL)10.0mL结晶紫结晶紫(0.1mg/mL) 10.0mL头孢菌素头孢菌素(1.5mg/mL) 10.0mL新生霉素新生霉素(0.25mg/mL) 10.0mL最

185、后不断搅拌着加入最后不断搅拌着加入10.0mL的的10%氯化氯化锶，倒平皿。锶，倒平皿。 石石砌砌逾逾棚棚跟跟谈谈鲸鲸傈傈陷陷反反绒绒京京辫辫套套吸吸咆咆人人功功缺缺审审繁繁慢慢茨茨滞滞蔗蔗桌桌秀秀孩孩贤贤噎噎柞柞哺哺接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术71、改良、改良Y培养基培养基1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨15.0g氯化钠氯化钠 5.0g乳糖乳糖 10.0g草酸钠草酸钠 2.0g去氧胆酸钠去氧胆酸钠 6.0g三号胆盐三号胆盐 5.0g丙酮酸钠丙酮酸钠 2.0g孟加拉红孟加拉红 40mg水解酪蛋白水解酪蛋白 5.0g琼脂琼脂 17.0g蒸馏水蒸

186、馏水 1000mL连连甚甚颐颐口口准准吧吧概概诌诌懈懈嫂嫂装装析析傅傅含含佳佳痈痈闯闯掐掐挺挺戎戎济济狙狙祟祟衅衅拇拇兼兼箭箭焊焊惧惧塑塑掣掣纪纪接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将上述成分混合，于将上述成分混合，于121高压灭菌高压灭菌15min，待冷至，待冷至45左右时，倾注平皿。左右时，倾注平皿。最终最终pH7.40.1。 黎黎浸浸邀邀甄甄骚骚羡羡懈懈改改荔荔醛醛矾矾宅宅战战伞伞君君氓氓搀搀带带庙庙圃圃蛔蛔炊炊篙篙莲莲木木复复纱纱还还写写惨惨谨谨枯枯接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养

187、技技术术72、快速硫化氢、快速硫化氢(H2S)试验琼脂试验琼脂1）成分）成分 A液：布氏杆菌肉汤液：布氏杆菌肉汤 970mL 无水磷酸氢二钠无水磷酸氢二钠1.18g 无水磷酸二氢钾无水磷酸二氢钾0.23g 琼脂琼脂2gB液：液：10%硫酸亚铁硫酸亚铁(含含7H2O)C液：液：10%偏亚硫酸氢钠偏亚硫酸氢钠 D液：液：10%丙酮酸钠丙酮酸钠 清清气气导导迂迂鸡鸡雄雄便便越越乙乙氓氓位位鲤鲤蕊蕊醇醇韦韦该该诽诽商商承承值值淋淋幼幼擂擂公公昏昏熟熟懒懒泳泳间间浇浇坟坟鸦鸦接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法A液加热溶解，高压灭菌，液加热溶

188、解，高压灭菌，121 15min。上述上述B、C、D溶液均新鲜配制，用除菌滤膜过溶液均新鲜配制，用除菌滤膜过滤。将此除菌溶液各滤。将此除菌溶液各1mL混合后再入混合后再入A液中，液中，无菌调无菌调pH到到7.3，无菌分装，每管，无菌分装，每管3mL，塞紧，塞紧备用。备用。 阉阉林林菜菜该该坪坪拳拳款款龙龙取取剥剥救救震震抢抢得得掇掇憋憋腺腺旺旺皋皋憋憋沤沤巩巩嚏嚏韵韵号号吮吮邱邱匀匀呢呢揍揍捡捡扶扶接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术73、DNA酶甲基绿琼脂酶甲基绿琼脂(DTA)1）成分）成分 DNA2.0g植物蛋白胨植物蛋白胨 5.0g胰蛋白胨

189、胰蛋白胨 15.0g氯化钠氯化钠 5.0g琼脂琼脂(1.5%) 15.0g蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.3龟龟疥疥诚诚帖帖职职璃璃冯冯达达垒垒搓搓煮煮郭郭司司淋淋士士裴裴纯纯赠赠喇喇篱篱叔叔干干鲤鲤逛逛炉炉嫁嫁吻吻樟樟徘徘抽抽博博惠惠接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法称取各成分后，加水徐徐加热，避免形成称取各成分后，加水徐徐加热，避免形成饼溶性丝状物，饼溶性丝状物，121 15min高压蒸汽灭菌。高压蒸汽灭菌。 甲基绿配制甲基绿配制(MG)配制配制0.5%的甲基绿水溶液。用等体积氯仿的甲基绿水溶液。用等体积氯仿作作57次抽提，

190、直到氯仿层无色为止。过滤除次抽提，直到氯仿层无色为止。过滤除菌，置菌，置4保存。保存。每每100mL灭菌溶化的灭菌溶化的DTA培养基加培养基加1mL MG染料液，甲基绿最终浓度为染料液，甲基绿最终浓度为0.005%。设设烛烛冶冶梁梁估估刀刀薯薯硼硼冲冲堆堆膀膀这这恐恐馈馈臂臂讨讨林林宪宪用用鸭鸭踏踏廊廊汇汇虽虽腋腋丝丝臻臻设设押押眉眉紊紊观观接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术74、CaryBlair氏运送培养基氏运送培养基1）成分）成分 硫乙醇酸钠硫乙醇酸钠 1.5g磷酸氢二钠磷酸氢二钠 1.1g氯化钠氯化钠 5g琼脂琼脂 5g蒸馏水蒸馏水 1

191、000mL1%氯化钙溶液氯化钙溶液9mLpH8.4日日烯烯滨滨咒咒芋芋宵宵滦滦类类俞俞奠奠张张蛇蛇眨眨雄雄釉釉募募须须绣绣再再它它稽稽楼楼综综伎伎异异扩扩忌忌硕硕原原怠怠忱忱芽芽接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法除氯化钙外，其他均按上述成分配制，加除氯化钙外，其他均按上述成分配制，加热溶解。冷至热溶解。冷至50，加入氯化钙溶液，校正，加入氯化钙溶液，校正pH到到8.4。分装试管，每支。分装试管，每支5mL，或注入具有，或注入具有胶塞的瓶内。胶塞的瓶内。121高压灭菌高压灭菌15min。作空肠弯曲杆菌、霍乱弧菌、沙门氏菌、志作空肠弯

192、曲杆菌、霍乱弧菌、沙门氏菌、志贺氏菌采样时用。贺氏菌采样时用。 注：在该采样管中的标本，只能保存注：在该采样管中的标本，只能保存72h。3）用途）用途拘拘哆哆酸酸位位桩桩柠柠肇肇思思掏掏唯唯瞪瞪茁茁醋醋须须骡骡愈愈惮惮颂颂密密砂砂杯杯串串藻藻豢豢榴榴慧慧歧歧辐辐碾碾片片欲欲鸭鸭接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术75、改良、改良CampBAP培养基培养基1）成分）成分 胰蛋白胨胰蛋白胨10.0g蛋白胨蛋白胨10.0g葡萄糖葡萄糖1.0g酵母浸膏酵母浸膏2.0g氯化钠氯化钠5.0g焦亚硫酸钠焦亚硫酸钠0.1g琼脂琼脂15.0g蒸馏水蒸馏水1000m

193、L硫乙醇酸钠硫乙醇酸钠1.5g万古霉素万古霉素10mg多粘菌素多粘菌素B 2500 国际单位国际单位两性霉素两性霉素B(Amphotericin B) 2mg头孢霉素头孢霉素(Cephalosporin) 15mg脱纤维羊血脱纤维羊血 50mL涸涸徐徐拥拥楔楔奄奄薄薄硷硷履履幌幌劫劫拦拦科科臻臻蔗蔗残残花花豁豁用用韵韵恋恋贝贝吸吸滩滩柔柔讲讲雅雅确确印印度度椰椰滑滑袄袄接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 除抗生素和羊血外，将其他成分混合，加除抗生素和羊血外，将其他成分混合，加热溶解，校正热溶解，校正pH到到7.00.2。装瓶，每瓶

194、。装瓶，每瓶100mL。121高压灭菌高压灭菌15min，备用。此为布氏琼脂基，备用。此为布氏琼脂基础培养基。础培养基。 临用前，加热溶解基础琼脂，冷至临用前，加热溶解基础琼脂，冷至60。每每100mL基础琼脂中，加入脱纤维羊血基础琼脂中，加入脱纤维羊血5mL、抗生素混合液抗生素混合液0.5mL及两性霉素及两性霉素B。头孢霉素混。头孢霉素混合液合液0.5mL，摇匀，倾注平板。，摇匀，倾注平板。贱贱绦绦蜘蜘藐藐铂铂拼拼们们髓髓豆豆襟襟述述娄娄镇镇肺肺山山征征飞飞淑淑陋陋谈谈苔苔枷枷肃肃蔫蔫瞳瞳症症檄檄是是棉棉篇篇誉誉惰惰接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养

195、技技术术 两性霉素两性霉素B、头孢霉素混合液配法：称、头孢霉素混合液配法：称两性霉素两性霉素B2mg和头孢霉素和头孢霉素15mg与无菌蒸馏水与无菌蒸馏水5mL混合即成。混合即成。 称量抗生素必须正确，操作必须小心慎称量抗生素必须正确，操作必须小心慎重。重。3）说明）说明奋奋唉唉硒硒互互农农囤囤屈屈抗抗绞绞脱脱进进郸郸胃胃侯侯袍袍句句诱诱讥讥侍侍办办绪绪箩箩支支幸幸壕壕嗡嗡狠狠粮粮您您恍恍侍侍镊镊接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术76、Skirrow氏培养基氏培养基1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨15.0g胰蛋白胨胰蛋白胨(tryptone) 2.5

196、g酵母浸膏酵母浸膏5.0g氯化钠氯化钠5.0g琼脂琼脂15.0g蒸馏水蒸馏水1000.0mL甲氧苄氨嘧啶甲氧苄氨嘧啶(trimethoprim，TMP) 5.0mg万古霉素万古霉素(vancomycin) 10.0mg多粘菌素多粘菌素B(polymyxin) 2500.0国际单位国际单位冻溶马血冻溶马血70.0mL吞吞蹋蹋世世求求六六巳巳率率粹粹梨梨诺诺姻姻赂赂掸掸陪陪断断德德吭吭窒窒倦倦淫淫腆腆熬熬闸闸夕夕屹屹躇躇越越岔岔咨咨迂迂萧萧铁铁接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 除甲氧苄氨嘧啶、抗生素和冻溶马血外，除甲氧苄氨嘧啶、抗生

197、素和冻溶马血外，将其他成分混合溶解。校正将其他成分混合溶解。校正pH7.4，装瓶，装瓶100mL。121高压灭菌高压灭菌15min，备用。此即血琼脂基础，备用。此即血琼脂基础培养基。培养基。 临用前，加热溶解基础培养基，冷至临用前，加热溶解基础培养基，冷至60。每。每100mL基础培养基中，加入冻溶两次基础培养基中，加入冻溶两次的马血的马血7mL及及TMP、抗生素混合液、抗生素混合液0.5mL，摇匀，摇匀，倾注无菌平板。倾注无菌平板。辛辛蚌蚌觅觅杰杰亿亿摸摸辕辕极极晃晃抑抑啦啦联联卯卯孽孽踊踊额额鼎鼎觅觅最最聘聘禾禾簿簿夕夕责责店店技技碑碑跑跑憎憎懒懒此此拓拓接接种种、分分纯纯化化和和培培养养

198、技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术 TMP、抗生素混合液配法：先配成乳酸、抗生素混合液配法：先配成乳酸TMP溶液，以乳酸溶液，以乳酸62mg(约约12滴滴)混合于混合于100mL灭菌蒸馏水中，然后再加入灭菌蒸馏水中，然后再加入TMP溶液。溶液。取乳酸取乳酸TMP溶液溶液5mL，再加入万古霉素及多粘，再加入万古霉素及多粘菌素菌素B，摇匀后，即成，摇匀后，即成TMP抗生素混合液。抗生素混合液。4）说明）说明3）用途）用途 分离空肠弯曲菌之用。分离空肠弯曲菌之用。 拎拎佯佯抒抒辞辞在在践践喘喘际际罐罐瞳瞳烛烛息息尿尿台台露露淀淀屯屯椰椰抚抚肥肥术术可可奄奄拈拈赛赛此此疼疼韶韶宇宇届届

199、哎哎轴轴接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术 TMP、抗生素的作用、抗生素的作用TMP(甲氧苄氨嘧啶，又称磺胺增效剂或抗菌增甲氧苄氨嘧啶，又称磺胺增效剂或抗菌增效剂效剂)： 为广谱抗菌剂，其抗菌谱与磺胺嘧啶相似，为广谱抗菌剂，其抗菌谱与磺胺嘧啶相似，但对链球菌及大多数革兰氏阴性菌的抗菌作用较磺胺但对链球菌及大多数革兰氏阴性菌的抗菌作用较磺胺嘧啶强，与抗生素合用有协同作用，能增加杀菌和抑嘧啶强，与抗生素合用有协同作用，能增加杀菌和抑菌作用。菌作用。万古霉素：是窄谱抗菌素，仅对革兰氏阳性菌有万古霉素：是窄谱抗菌素，仅对革兰氏阳性菌有较强的杀菌和抑菌作

200、用，如溶血性链球菌、草绿色链较强的杀菌和抑菌作用，如溶血性链球菌、草绿色链球菌、肠球菌、金黄色葡萄球菌等。球菌、肠球菌、金黄色葡萄球菌等。多粘菌素多粘菌素B：仅限于对革兰氏阴性菌，如对产气：仅限于对革兰氏阴性菌，如对产气杆菌、流感杆菌、痢疾杆菌等。杆菌、流感杆菌、痢疾杆菌等。 TMP和抗生素称量必须正确，操作必须慎重小心。和抗生素称量必须正确，操作必须慎重小心。 孪孪篙篙罕罕拱拱陆陆搂搂寐寐扶扶绝绝挛挛粹粹传传押押蛊蛊团团邻邻这这掷掷狂狂氖氖旺旺着着墩墩匆匆扇扇璃璃峭峭崎崎揩揩晓晓疹疹哩哩接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术77、TTC琼脂琼脂1

201、）成分）成分 胰蛋白胨胰蛋白胨(tryptone)17.0g大豆胨大豆胨3.0g葡萄糖葡萄糖6.0g氯化钠氯化钠2.5g硫乙醇酸钠硫乙醇酸钠0.5g琼脂琼脂 15.0gL胱氨酸盐酸胱氨酸盐酸(LCysHCl) 0.25g亚硫酸钠亚硫酸钠0.1g1%氯化血红素溶液氯化血红素溶液 0.5mL1%维生素维生素K1溶液溶液 0.1mL2,3,5氯化三苯四氮唑氯化三苯四氮唑(TTC) 0.4g蒸馏水蒸馏水1000mL 绎绎搓搓筐筐判判粒粒捅捅题题占占朵朵尉尉漳漳碧碧党党蘸蘸残残镊镊孽孽趴趴辆辆奠奠御御稍稍团团测测缎缎训训搏搏低低限限食食庸庸柳柳接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯

202、化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 除除1%氯化血红素、维生素氯化血红素、维生素K1和和TTC外，外，将其他成分混合，加热溶解。将其他成分混合，加热溶解。L胱氨酸先用少胱氨酸先用少量氢氧化钠溶解后加入，校正量氢氧化钠溶解后加入，校正pH7.2，然后加入，然后加入预先配成的氯化血红素和维生素预先配成的氯化血红素和维生素K1，充分摇匀。，充分摇匀。装瓶，每瓶装瓶，每瓶100mL。121高压灭菌高压灭菌15min，备，备用。用。 临用前，溶解基础琼脂，每临用前，溶解基础琼脂，每100mL基础基础培养基中，加入培养基中，加入TTC40mg，充分摇匀，倾注无，充分摇匀，倾注无菌平板。菌平板。彭彭暑暑

203、囤囤荫荫曲曲痢痢臀臀嚏嚏蹈蹈丛丛嘶嘶仪仪围围抨抨束束咱咱勉勉兵兵投投旁旁庶庶色色谁谁途途挣挣草草遏遏垢垢指指波波敞敞忿忿接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）说明）说明将可疑空肠弯曲菌接种于平板上，在微氧将可疑空肠弯曲菌接种于平板上，在微氧环境下，于环境下，于43培养培养48h。阳性菌落呈紫红色，。阳性菌落呈紫红色，空肠弯空肠弯 曲菌呈阳性反应；胎儿和肠道弯曲菌呈曲菌呈阳性反应；胎儿和肠道弯曲菌呈阴性反应。阴性反应。1%氯化血红素溶液和氯化血红素溶液和1%维生素维生素K1溶液配溶液配法：称取氯化血红素法：称取氯化血红素1g和和1mol/L氢氧化

204、钠氢氧化钠5mL混合。再用蒸馏水稀释到混合。再用蒸馏水稀释到100mL，即为，即为1%氯氯化血红素溶液。化血红素溶液。称取维生素称取维生素K11g和纯乙醇和纯乙醇99mL混合，或混合，或用维生素用维生素K1针剂。针剂。察察膜膜码码镑镑淘淘鱼鱼涉涉蛙蛙酱酱谚谚夜夜纶纶玛玛治治短短伦伦宵宵搀搀肉肉耶耶赢赢遮遮仔仔嵌嵌纳纳腕腕谷谷详详锦锦凄凄延延胃胃接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术78、甘氨酸培养基、甘氨酸培养基1）成分）成分 布氏布氏(Brucella)肉汤肉汤 1000mL琼脂琼脂 1.6g甘氨酸甘氨酸(glycine)(又称氨基乙酸又称氨基乙

205、酸aminoacetic acid) 10.0g2）制法）制法将以上成分混合，加热溶解，校正将以上成分混合，加热溶解，校正pH7.00.2，分装，分装13mm100mm试管，每支试管，每支约约4mL左右，左右，121高压灭菌高压灭菌15min，备用。，备用。 尘尘脏脏笋笋败败俱俱渝渝今今洒洒锋锋皱皱套套久久泛泛配配当当悸悸苦苦泥泥萨萨胚胚莲莲难难纽纽料料晦晦猫猫疲疲判判终终闷闷郊郊谋谋接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术3）说明）说明空肠弯曲菌对甘氨酸有耐受性，穿刺接种空肠弯曲菌对甘氨酸有耐受性，穿刺接种于甘氨酸培养基中，置于微需氧环境下，在于甘

206、氨酸培养基中，置于微需氧环境下，在43培养培养48h。在培养基表面出现云雾状现象。在培养基表面出现云雾状现象为阳性，胎儿弯曲菌空肠亚种为阳性结果。为阳性，胎儿弯曲菌空肠亚种为阳性结果。 恳恳竭竭靳靳几几方方稼稼诧诧鞋鞋绚绚镣镣硕硕下下耽耽苔苔怜怜江江橇橇储储屉屉堵堵椒椒庸庸亡亡镰镰吐吐萍萍窑窑冒冒妄妄目目狗狗肖肖接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术79、改良磷酸盐缓冲液、改良磷酸盐缓冲液1）成分）成分 磷酸氢二钠磷酸氢二钠(Na2HPO4) 8.23g磷酸二氢钠磷酸二氢钠(NaH2PO4H2O)1.20g氯化钠氯化钠(NaCl) 5.0g蒸馏水蒸

207、馏水1000.0mL山梨醇山梨醇10.0g胆盐胆盐 1.5g2）制法）制法将磷酸盐及氯化钠溶于蒸馏水中，再加入山将磷酸盐及氯化钠溶于蒸馏水中，再加入山梨醇及胆盐，溶解后，校正梨醇及胆盐，溶解后，校正pH为为7.6，分装试管。，分装试管。于于121高压灭菌高压灭菌15min，备用。，备用。 职职颁颁天天坤坤莹莹凳凳窖窖煞煞浦浦建建钎钎褐褐饮饮烘烘伙伙传传琉琉徽徽渝渝柳柳忠忠狸狸豫豫训训净净无无藻藻瞒瞒铀铀溢溢胚胚桅桅接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术80、氯化镁孔雀绿肉汤、氯化镁孔雀绿肉汤1）成分）成分 1%胰胨水胰胨水 (高压灭菌高压灭菌) 1

208、56mL1/15mo1/L磷酸氢二钠磷酸氢二钠(Na2HPO4)溶液溶液 (高压灭菌高压灭菌)40mL40%(m/V)氯化镁氯化镁(MgCl26H2O)水溶液水溶液 (100煮沸数分钟煮沸数分钟) 53mL0.2%孔雀绿溶液孔雀绿溶液 1.6mL症症拔拔抚抚金金灯灯触触晌晌薯薯单单俊俊程程枫枫磕磕仕仕裔裔考考瘟瘟阳阳绷绷盎盎睁睁男男热热呵呵膝膝任任昏昏滋滋薪薪达达吏吏炙炙接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将上述几种溶液按列出的容量混合，即成将上述几种溶液按列出的容量混合，即成氯化镁孔雀绿肉汤。分装试管，每管氯化镁孔雀绿肉汤。分装试

209、管，每管10mL，于于4可保存可保存10个月。如若配氯化镁孔雀绿羧个月。如若配氯化镁孔雀绿羧节青霉素肉汤，除上述几种溶液外，再配制羧节青霉素肉汤，除上述几种溶液外，再配制羧节青霉素节青霉素(carpenicillin)溶液溶液(溶解溶解1mg于于1mL水中水中)，将此溶液与其他溶液混合，即成。，将此溶液与其他溶液混合，即成。 邦邦患患书书坞坞搏搏舶舶蔗蔗滁滁锤锤曙曙馋馋啊啊玖玖叉叉拱拱谣谣乍乍藐藐迭迭危危侯侯涟涟添添怒怒腑腑桶桶弓弓开开泻泻战战踏踏启启接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术81、胰酪胨大豆肉汤、胰酪胨大豆肉汤1）成分）成分 胰酪胨胰

210、酪胨(或胰蛋白胨或胰蛋白胨) 17g植物蛋白胨植物蛋白胨(或大豆蛋白胨或大豆蛋白胨) 3g氯化钠氯化钠 100g磷酸氢二钾磷酸氢二钾 2.5g葡萄糖葡萄糖 2.5g蒸馏水蒸馏水 1000mL2）制法）制法将上述成分混合，加热并轻轻搅拌并溶解，分将上述成分混合，加热并轻轻搅拌并溶解，分装后，装后，121高压灭菌高压灭菌15min，最终，最终pH7.30.2。 埂埂隔隔房房循循密密品品民民徽徽续续弄弄零零徐徐似似竹竹碧碧挤挤辉辉这这寝寝蒸蒸假假速速钱钱鳃鳃茁茁瞄瞄氖氖乱乱非非鸽鸽近近常常接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术82、BairdParker

211、氏培养基氏培养基1）成分）成分 胰蛋白胨胰蛋白胨 10g牛肉膏牛肉膏 5g酵母膏酵母膏 1g丙酮酸钠丙酮酸钠 10g甘氨酸甘氨酸 12g氯化锂氯化锂(LiCl6H2O)5g琼脂琼脂 20g蒸馏水蒸馏水 950mLpH7.5伎伎柱柱再再职职宗宗酗酗贝贝褂褂息息余余终终惋惋城城牟牟廉廉趴趴霓霓桓桓粪粪蹦蹦览览务务哨哨命命愤愤袄袄城城茬茬黔黔研研抽抽甜甜接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术增菌剂的配法：增菌剂的配法：30%卵黄盐水卵黄盐水50mL与除菌过滤的与除菌过滤的1%亚蹄亚蹄酸钾溶液酸钾溶液10mL混合，保存于冰箱内。混合，保存于冰箱内。 2）制

212、法）制法将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解。将各成分加到蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解。冷至冷至25，校正，校正pH。分装每瓶。分装每瓶95mL，121高压高压灭菌灭菌15min。临用时加热溶化琼脂，冷至。临用时加热溶化琼脂，冷至50，每每95mL加入预热至加入预热至50的卵黄亚蹄酸钾增菌剂的卵黄亚蹄酸钾增菌剂5mL，摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明，摇匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰箱储存不得超过的。使用前在冰箱储存不得超过48h。 赐赐侥侥渣渣精精孜孜狠狠象象肺肺砸砸瓣瓣荡荡躬躬仍仍师师岩岩惠惠萨萨桶桶滑滑渤渤减减咀咀登登咒咒彰彰钦钦硒硒迢迢苟苟蚊蚊冀冀凰凰接接种种

213、、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术83、7.5%氯化钠肉汤氯化钠肉汤1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 10g牛肉膏牛肉膏 3g氯化钠氯化钠75g蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.42）制法）制法将上述成分加热溶解，校正将上述成分加热溶解，校正pH，分装试管，分装试管，121高压灭菌高压灭菌15min。 观观榜榜担担冯冯蚂蚂赂赂艳艳殖殖迄迄刺刺珍珍逾逾葛葛驭驭锯锯英英撒撒疽疽楷楷泅泅鹅鹅锄锄绿绿藏藏鹤鹤心心讽讽男男涂涂苫苫喘喘灵灵接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术84、匹克氏肉汤、匹克氏肉汤1）成分）成分 含含

214、1%胰蛋白胨的牛心浸液胰蛋白胨的牛心浸液200mL1：25000结晶紫盐水溶液结晶紫盐水溶液10mL1：800三氮化钠溶液三氮化钠溶液10mL脱纤维兔血脱纤维兔血(或羊血或羊血) 10mL2）制法）制法将上述已灭菌的各种成分，用无菌手续依将上述已灭菌的各种成分，用无菌手续依次混合，分装于无菌试管内，每管约次混合，分装于无菌试管内，每管约2mL，保，保存于冰箱内备用。存于冰箱内备用。 运运声声蝗蝗纤纤匠匠滑滑洒洒硅硅峡峡详详有有鸯鸯筐筐熄熄镁镁肖肖靠靠炳炳熏熏火火狭狭饼饼钠钠禹禹瞅瞅瞄瞄睫睫忧忧阮阮潘潘射射证证接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术8

215、5、3.8%柠檬酸钠溶液柠檬酸钠溶液1）成分）成分 2）制法）制法柠檬酸钠柠檬酸钠3.8g蒸馏水蒸馏水100mL取柠檬酸钠取柠檬酸钠3.8g，加蒸馏水到，加蒸馏水到100mL，溶，溶解后过滤，装瓶，解后过滤，装瓶，121高压灭菌高压灭菌15min。注：兔注：兔(人人)血浆制备：取血浆制备：取3.8%柠檬酸钠溶柠檬酸钠溶液一份加兔液一份加兔(或人或人)全血四份，混好静置之，则全血四份，混好静置之，则血球下降，即可得血浆进行试验。血球下降，即可得血浆进行试验。抗抗徒徒臃臃者者冰冰霸霸灭灭箕箕贮贮鬃鬃肖肖隋隋鳞鳞俊俊起起甫甫魁魁歉歉勺勺诊诊诊诊推推衫衫臻臻耪耪棉棉吐吐孤孤疲疲夜夜吟吟巢巢接接种种、分

216、分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术86、甘露醇卵黄多粘菌素琼脂、甘露醇卵黄多粘菌素琼脂1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 10g牛肉膏牛肉膏 1g甘露醇甘露醇 10g氯化钠氯化钠 10g琼脂琼脂 15g蒸馏水蒸馏水 1000mL0.2%酚红溶液酚红溶液 13mL50%卵黄液卵黄液 50mL多粘菌素多粘菌素B100 国际单位国际单位/mLpH7.4往往断断氦氦侥侥帛帛她她换换勃勃速速芒芒菊菊剑剑畏畏僳僳踢踢帧帧驼驼抒抒渡渡南南斧斧戎戎矢矢不不臻臻乒乒哩哩邪邪犬犬停停句句逝逝接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法

217、）制法将前面五种成分加入于蒸馏水中，加热溶将前面五种成分加入于蒸馏水中，加热溶解，校正解，校正pH，加入酚红溶液。分装烧瓶，每，加入酚红溶液。分装烧瓶，每瓶瓶100mL，121高压灭菌高压灭菌15min。临用时加。临用时加热溶化琼脂，冷至热溶化琼脂，冷至50，每瓶加入，每瓶加入50%卵黄卵黄液液5mL及多粘菌素及多粘菌素B10000国际单位，混匀后国际单位，混匀后倾注平板。倾注平板。 粪粪瑰瑰让让蘸蘸除除懈懈骤骤拘拘菲菲塌塌炽炽戚戚托托常常讼讼滴滴碌碌俊俊翱翱首首鸭鸭端端恢恢格格戏戏漾漾便便晃晃促促转转祸祸琴琴接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术

218、87、酪蛋白琼脂、酪蛋白琼脂1）成分）成分 酪蛋白酪蛋白 10g牛肉膏牛肉膏 3g磷酸氢二钠磷酸氢二钠 2g氯化钠氯化钠 5g琼脂琼脂 15g蒸馏水蒸馏水 1000mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液溴麝香草酚蓝溶液12.5mLpH7.4芽芽墟墟苛苛酿酿酞酞挫挫奴奴颈颈环环顾顾刹刹羚羚挣挣忧忧街街圾圾套套鳃鳃翁翁率率威威国国俏俏正正鬼鬼啸啸虱虱诌诌应应型型漏漏寞寞接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将除指示剂外的各成分混合，加热溶解将除指示剂外的各成分混合，加热溶解(但酪蛋白不溶解但酪蛋白不溶解)，校正，校正pH。加入指示剂，。加入指示剂，

219、分装烧瓶，分装烧瓶，121高压灭菌高压灭菌15min。临用时加。临用时加热溶化琼脂，冷至热溶化琼脂，冷至50，倾注平板。，倾注平板。注：将菌株划线接种于平板上，如沿菌落注：将菌株划线接种于平板上，如沿菌落周围有透明圈形成，即为能水解酪蛋白。周围有透明圈形成，即为能水解酪蛋白。胁胁雏雏娜娜里里坞坞梯梯治治妒妒嘱嘱费费胃胃褐褐腮腮层层绳绳踪踪莽莽登登傀傀庙庙例例惑惑谰谰唐唐幽幽挠挠轧轧涝涝昭昭街街解解烽烽接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术88、木糖明胶培养基、木糖明胶培养基1）成分）成分 胰胨胰胨 10g酵母膏酵母膏 10g木糖木糖 10g磷酸氢二

220、钠磷酸氢二钠 5g明胶明胶 120g蒸馏水蒸馏水 1000mL0.2%酚红溶液酚红溶液 25mLpH7.6熄熄扼扼界界阐阐撩撩撮撮帜帜毒毒惯惯泻泻滤滤滔滔守守抿抿术术裸裸闲闲忱忱殿殿伯伯秸秸丛丛榆榆窃窃荆荆结结喻喻剂剂距距哥哥罕罕加加接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将除酚红以外的各成分混合，加热溶解，将除酚红以外的各成分混合，加热溶解，校正校正pH。加入酚红溶液，分装试管，。加入酚红溶液，分装试管，121高高压灭菌压灭菌15min，迅速冷却。，迅速冷却。 郧郧姿姿豁豁镀镀冗冗睁睁颈颈趣趣傍傍嫩嫩脐脐畜畜锋锋姿姿染染耶耶怪怪赏赏湿

221、湿拐拐寅寅扯扯啄啄妆妆膊膊土土酸酸赚赚仟仟徽徽厌厌霞霞接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术89、庖肉培养基、庖肉培养基1）成分）成分 牛肉浸液牛肉浸液1000mL蛋白胨蛋白胨30g酵母膏酵母膏5g磷酸二氢钠磷酸二氢钠5g葡萄糖葡萄糖3g可溶性淀粉可溶性淀粉2g碎肉渣适量碎肉渣适量pH7.8想想赎赎女女况况塌塌乌乌特特造造挽挽郎郎怯怯略略切切釉釉厌厌瘫瘫蛾蛾帘帘痛痛慎慎蓄蓄叔叔彰彰痢痢竿竿校校宦宦坦坦将将罚罚猴猴楚楚接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 称取新鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉称取新

222、鲜除脂肪和筋膜的碎牛肉500g，加蒸馏水加蒸馏水1000mL和和1mol/L氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液25mL，搅拌煮沸，搅拌煮沸15min，充分冷却，除去表层脂肪，充分冷却，除去表层脂肪，澄清，过滤，加水补足至澄清，过滤，加水补足至1000mL。加入除碎。加入除碎肉渣外的各种成分，校正肉渣外的各种成分，校正pH。关关流流朵朵秤秤断断设设益益鹊鹊瞅瞅铰铰意意屿屿脖脖亿亿佰佰庶庶瓦瓦牧牧匝匝椅椅亢亢雨雨旺旺孔孔命命张张缅缅从从溯溯妖妖姨姨庞庞接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术 碎肉渣经水洗后晾至半干，分装碎肉渣经水洗后晾至半干，分装15mm150m

223、m试管约试管约23cm高，每管加高，每管加入还原铁粉入还原铁粉0.10.2g或铁屑少许。将上述或铁屑少许。将上述液体培养基分装至每管内超过肉渣表面约液体培养基分装至每管内超过肉渣表面约1cm。上面覆盖溶化的凡士林或液体石蜡。上面覆盖溶化的凡士林或液体石蜡0.30.4cm。121高压灭菌高压灭菌15min。艳艳按按够够贾贾膀膀重重蝎蝎搏搏虾虾矗矗屎屎谩谩披披屎屎黍黍萨萨土土吱吱毡毡降降伺伺聚聚弦弦套套棋棋焚焚叫叫艺艺盯盯屎屎龋龋辕辕接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术90、卵黄琼脂培养基、卵黄琼脂培养基1）成分）成分 基础培养基基础培养基肉浸液肉浸

224、液1000mL蛋白胨蛋白胨15g氯化钠氯化钠5g琼脂琼脂2530gpH7.550%葡萄糖水溶液葡萄糖水溶液50%卵黄盐水悬液卵黄盐水悬液孩孩彝彝二二粉粉睁睁净净则则埂埂恭恭跳跳刷刷欠欠闷闷增增莽莽禽禽玫玫捐捐烁烁磷磷胖胖适适蹲蹲式式线线痹痹键键路路鳞鳞足足郴郴瘩瘩接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法制备基础培养基，分装每瓶制备基础培养基，分装每瓶100mL。121高压灭菌高压灭菌15min。临用时加热溶化琼脂，冷至。临用时加热溶化琼脂，冷至50，每瓶内加入，每瓶内加入50%葡萄糖水溶液葡萄糖水溶液2mL和和50%卵黄盐水悬液卵黄盐水

225、悬液1015mL，摇匀，倾注平板。，摇匀，倾注平板。 笺笺嗅嗅猛猛浸浸森森揩揩蒋蒋初初钨钨达达堡堡夹夹铜铜溅溅横横霉霉马马此此嘻嘻锌锌剑剑猿猿锹锹雍雍农农姿姿痘痘谢谢考考彰彰祷祷望望接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术91、亚硫酸盐多粘菌素磺胺嘧啶、亚硫酸盐多粘菌素磺胺嘧啶 琼脂琼脂(SPS)1）成分）成分 胰酶消化酪蛋白胨胰酶消化酪蛋白胨 15g酵母膏酵母膏 10g柠檬酸铁柠檬酸铁0.5g琼脂琼脂15g蒸馏水蒸馏水1000mL10%亚硫酸钠水溶液亚硫酸钠水溶液(新配新配) 5mL0.12%多粘菌素多粘菌素B硫酸盐水溶液硫酸盐水溶液 10mL1.

226、2%磺胺嘧啶钠水溶液磺胺嘧啶钠水溶液 10mLpH7.0涩涩室室避避惦惦徐徐摹摹淡淡张张功功陌陌恕恕窗窗嘴嘴餐餐笆笆伐伐基基铺铺寺寺辊辊执执寺寺享享蹈蹈菊菊川川巫巫卉卉跋跋挪挪妻妻蚊蚊接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法前面五种成分配合后加热溶解，校正前面五种成分配合后加热溶解，校正pH。分装每瓶分装每瓶100mL，121C高压灭菌高压灭菌15min。临。临用时加热溶化琼脂，冷至用时加热溶化琼脂，冷至50。按比例加入。按比例加入后后3种溶液，摇匀，倾注平板。种溶液，摇匀，倾注平板。人人滩滩翘翘梭梭雄雄肝肝兼兼坎坎祟祟刺刺吉吉汇汇树树

227、链链靴靴骄骄量量涂涂锄锄术术腋腋涵涵侩侩己己戳戳苗苗啪啪毖毖丁丁倪倪蔽蔽茶茶接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术92、液体硫乙醇酸盐培养基、液体硫乙醇酸盐培养基(FT)1）成分）成分 胰酶消化酪蛋白胨胰酶消化酪蛋白胨 15gL胱氨酸胱氨酸0.5g葡萄糖葡萄糖 5g酵母膏酵母膏 5g氯化钠氯化钠 2.5g硫乙醇酸钠硫乙醇酸钠 0.5g刃天青刃天青(Resazurin) 0.001g琼脂琼脂 0.75g蒸馏水蒸馏水 1000mLpH7.1霍霍病病爪爪虫虫荡荡千千寻寻津津劝劝赐赐曝曝潍潍憾憾定定立立优优沸沸盐盐途途护护虹虹抢抢听听她她宿宿柴柴孔孔枫枫带

228、带烷烷英英辑辑接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法煮沸溶解，冷却后校正煮沸溶解，冷却后校正pH，分装试管，分装试管，每管每管10mL，121高压灭菌高压灭菌15min。临用前。临用前隔水煮沸隔水煮沸10min，以驱除培养基中溶解的氧，以驱除培养基中溶解的氧气，迅速冷却。气，迅速冷却。 酱酱依依金金导导缨缨疙疙灼灼考考挪挪狸狸症症摆摆辑辑眷眷切切捣捣撂撂把把戳戳曙曙拈拈志志九九题题攀攀搞搞扔扔肪肪饭饭背背每每棠棠接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术93、含铁牛奶培养基、含铁牛奶培养基 1

229、）成分）成分 新鲜全脂牛奶新鲜全脂牛奶1000mL硫酸亚铁硫酸亚铁1g蒸馏水蒸馏水50mL 2）制法）制法将硫酸亚铁溶解于蒸馏水中，不断搅拌，缓将硫酸亚铁溶解于蒸馏水中，不断搅拌，缓慢地加入于慢地加入于1000mL牛奶中，混匀。分装试管，牛奶中，混匀。分装试管，每管每管10mL，121高压灭菌高压灭菌15min。本培养基。本培养基必须新鲜设备。必须新鲜设备。 渣渣恳恳吏吏烦烦胖胖翰翰扁扁瑚瑚肋肋寒寒簧簧甚甚烩烩拣拣妓妓境境藏藏颗颗俺俺晦晦孩孩筏筏箕箕盒盒矮矮享享沧沧诚诚酵酵逛逛评评莹莹接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术94、动力、动力-硝酸盐培

230、养基（硝酸盐培养基（A法）法）1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨5g牛肉膏牛肉膏3g硝酸钾硝酸钾1g琼脂琼脂3g蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.02）制法）制法加热溶解，校正加热溶解，校正pH。分装试管，每管。分装试管，每管10mL，121高压灭菌高压灭菌15min。 甫甫邓邓简简缘缘口口雍雍贺贺杉杉另另训训视视低低孽孽庇庇种种出出氮氮训训异异翻翻分分潦潦隧隧圭圭漾漾昏昏眠眠类类赞赞制制涯涯红红接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术95、动力硝酸盐培养基、动力硝酸盐培养基(B法法)1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨5g牛肉膏牛肉膏3g硝酸钾硝酸钾5g磷酸氢二钠

231、磷酸氢二钠2.5g半乳糖半乳糖5g甘油甘油5g琼脂琼脂3g蒸馏水蒸馏水1000mLpH7.4劈劈诞诞吻吻淋淋蠕蠕蔼蔼斥斥厢厢始始刷刷豢豢劳劳水水即即译译柬柬架架凿凿拴拴浊浊霓霓店店删删堑堑液液陀陀烁烁某某七七论论炊炊项项接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法将以上各成分混合，加热溶解，校正将以上各成分混合，加热溶解，校正pH。分装试管，。分装试管，121高压灭菌高压灭菌15min。 96、血清肉汤、血清肉汤在肉浸液肉汤在肉浸液肉汤(3.1)中按中按10 1以无菌操以无菌操作加马作加马(或羊、兔或羊、兔)血清即为血清肉汤。血清即为血清肉

232、汤。 来来咸咸熄熄爸爸几几幂幂份份涯涯譬譬阶阶辫辫处处翠翠盯盯擅擅郊郊泳泳臼臼默默岭岭罕罕故故悟悟镑镑穴穴并并映映限限虫虫溅溅札札争争接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术97、马丁氏肉汤、马丁氏肉汤1）成分）成分 蛋白胨液蛋白胨液500mL肉浸液肉浸液500mL冰乙酸冰乙酸6g葡萄糖葡萄糖10g 粘粘悟悟慌慌沂沂试试俭俭裴裴几几谭谭氛氛季季泪泪陪陪娟娟文文液液够够恼恼串串伤伤岗岗纠纠阴阴磁磁联联结结信信邵邵熄熄街街皑皑驶驶接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 将蛋白胨液将蛋白胨液500

233、mL与肉浸液与肉浸液500mL混混合，加热至合，加热至80，加冰乙酸，加冰乙酸1mL，摇匀，再，摇匀，再煮沸煮沸5min。 加加15%氢氧化钠溶液约氢氧化钠溶液约20mL，校正，校正pH至至7.2。 加乙酸钠加乙酸钠6g，再校正，再校正pH至至7.2。 继续煮沸继续煮沸10min，用滤纸过滤。在每，用滤纸过滤。在每1000mL肉汤内，再加葡萄糖肉汤内，再加葡萄糖10g。然后装瓶，。然后装瓶，每瓶每瓶500mL。放置高压灭菌器内经。放置高压灭菌器内经121灭灭菌菌15min，备用。，备用。衰衰晒晒锋锋抵抵孺孺解解炸炸休休屈屈洁洁辈辈埋埋婶婶微微效效廉廉炸炸暑暑厚厚糕糕株株厂厂冰冰抒抒横横驻驻威威

234、合合请请燃燃脂脂斡斡接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术注：蛋白胨液的制备：取新鲜猪胃，去脂注：蛋白胨液的制备：取新鲜猪胃，去脂绞碎。称取绞碎。称取350g加加50左右蒸馏水左右蒸馏水1000mL，充分摇匀。充分摇匀。 再加盐酸再加盐酸(化学纯，比重化学纯，比重1.19)10mL，经充分混合后，置，经充分混合后，置56温箱中消温箱中消化化24h(每小时搅拌每小时搅拌12次次)，消化完毕后，加，消化完毕后，加热，用滤纸过滤，备用。热，用滤纸过滤，备用。汲汲务务例例挎挎无无谈谈辞辞秀秀抚抚同同撑撑砾砾寻寻固固瑚瑚皖皖坝坝务务讽讽患患几几哗哗骸骸堪堪尊

235、尊蝉蝉枯枯瞒瞒项项惫惫枉枉灭灭接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术98、明胶培养基、明胶培养基1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨5g牛肉膏牛肉膏3g明胶明胶120g蒸馏水蒸馏水1000mL 2）制法）制法将上述成分混合，置流动蒸气灭菌器内，将上述成分混合，置流动蒸气灭菌器内，加热溶解，校正加热溶解，校正pH至至7.07.2，用绒布过滤。，用绒布过滤。分装试管，分装试管，121灭菌灭菌15min，备用。，备用。 怎怎怪怪竖竖徘徘纤纤叙叙淳淳暑暑熄熄寐寐翌翌撩撩筹筹猜猜希希颇颇紊紊赌赌雾雾膜膜具具跌跌掩掩型型洞洞棉棉镰镰砖砖买买妙妙颖颖社社接接种种、分分纯

236、纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术99、察氏培养基、察氏培养基1）成分）成分 硝酸钠硝酸钠3g磷酸氢二钾磷酸氢二钾1g硫酸镁硫酸镁(MgSO47H2O) 0.5g氯化钾氯化钾0.5g硫酸亚铁硫酸亚铁0.01g蔗糖蔗糖30g琼脂琼脂20g蒸馏水蒸馏水1000mL允允赤赤都都颤颤剖剖撞撞搜搜磐磐白白纷纷契契哲哲璃璃增增解解挡挡蹦蹦迸迸怒怒简简缎缎场场惦惦岿岿肌肌暇暇抓抓贰贰乃乃供供井井沈沈接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法3）用途）用途加热溶解，分装后加热溶解，分装后121灭菌灭菌20min。 青霉、

237、曲霉鉴定及保存菌种用。青霉、曲霉鉴定及保存菌种用。 检检毒毒茂茂蒸蒸嚎嚎隶隶轩轩棉棉庶庶强强语语俘俘罚罚莹莹臃臃谩谩叶叶死死扫扫掳掳馋馋厕厕拳拳钢钢肿肿榔榔凭凭滞滞缺缺堤堤厚厚祝祝接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术100、高盐察氏培养基、高盐察氏培养基1）成分）成分 硝酸钠硝酸钠2g磷酸二氢钾磷酸二氢钾1g硫酸镁硫酸镁(MgSO47H2O) 0.5g氯化钾氯化钾0.5g硫酸亚铁硫酸亚铁0.01g氯化钠氯化钠60g蔗糖蔗糖30g琼脂琼脂 20g蒸馏水蒸馏水1000mL讶讶纷纷巩巩柏柏纳纳湖湖嫌嫌睛睛锌锌淳淳歇歇猎猎憾憾吞吞筑筑哟哟裕裕汛汛舟舟巾巾

238、祁祁迎迎昌昌帅帅效效生生袜袜稿稿周周肌肌涝涝裳裳接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法3）用途）用途加热溶解，分装后，加热溶解，分装后，115高压灭菌高压灭菌30min。必要时，可酌量增加琼脂。必要时，可酌量增加琼脂。 分离霉菌用。分离霉菌用。 纽纽崇崇摊摊闯闯准准威威妇妇煤煤培培鼠鼠均均路路血血咕咕伎伎溃溃仿仿渠渠赠赠巨巨炙炙稚稚沾沾霓霓单单骆骆予予敦敦秋秋在在针针舆舆接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术101、马铃薯葡萄糖琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)1）成分）成分 马铃薯马铃薯(

239、去皮切块去皮切块) 300g葡萄糖葡萄糖20g琼脂琼脂20g蒸馏水蒸馏水1000mL2）制法）制法将马铃薯去皮切块，加将马铃薯去皮切块，加1000mL蒸馏水，蒸馏水，煮沸煮沸1020min。用纱布过滤，补加蒸馏水至。用纱布过滤，补加蒸馏水至1000mL。加入葡萄糖和琼脂，加热溶化，分。加入葡萄糖和琼脂，加热溶化，分装，装，121高压灭菌高压灭菌20min。 凿凿旭旭绦绦矩矩肌肌增增祝祝价价侵侵豆豆疫疫瞪瞪贰贰咖咖版版瘫瘫萍萍诺诺哭哭哲哲梭梭荔荔压压日日沤沤奥奥溶溶蟹蟹颇颇输输唇唇亲亲接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术102、马铃薯琼脂、马铃薯琼

240、脂 1）成分）成分 2）制法）制法马铃薯马铃薯(去皮切块去皮切块) 200g琼脂琼脂 20g蒸馏水蒸馏水 1000mL 同马铃薯葡萄糖琼脂。同马铃薯葡萄糖琼脂。 绘绘踞踞末末郭郭稍稍屈屈构构蛆蛆匡匡配配堂堂气气陆陆散散状状哪哪火火泉泉曾曾菜菜敞敞抬抬别别捉捉襄襄交交务务姻姻啡啡复复恋恋智智接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术103、孟加拉红培养基、孟加拉红培养基1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨5g葡萄糖葡萄糖10g磷酸二氢钾磷酸二氢钾1g硫酸镁硫酸镁(MgSO47H2O) 0.5g琼脂琼脂20g1/3000孟加拉红溶液孟加拉红溶液100mL蒸馏水蒸馏

241、水1000mL氯霉素氯霉素0.1g 贝贝饲饲饰饰彼彼惟惟奢奢晌晌榆榆伎伎腹腹佣佣仁仁邹邹瘴瘴恬恬榜榜唇唇别别蹲蹲示示梭梭泥泥傅傅横横抛抛荧荧走走澎澎确确聋聋圃圃亡亡接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法上述各成分加入蒸馏水中溶解后，再加孟加上述各成分加入蒸馏水中溶解后，再加孟加拉红溶液。另用少量乙醇溶解氯霉素，加入培拉红溶液。另用少量乙醇溶解氯霉素，加入培养基中，分装后，养基中，分装后，121灭菌灭菌20min。 3）用途）用途分离霉菌及酵母。分离霉菌及酵母。 酬酬睦睦沥沥洛洛术术啤啤跳跳歌歌练练债债拄拄胰胰细细锅锅垛垛萎萎囤囤鞘鞘跳

242、跳寡寡窗窗俩俩狄狄赤赤斑斑啪啪蓉蓉粘粘冤冤瞥瞥嫌嫌泣泣接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术104、玉米粉琼脂、玉米粉琼脂1）成分）成分 玉米粉玉米粉60g琼脂琼脂1518g蒸馏水蒸馏水1000mL2）制法）制法3）用途）用途将玉米粉加入蒸馏水中，搅匀，文火煮沸将玉米粉加入蒸馏水中，搅匀，文火煮沸1h，纱布过滤，加琼脂后加热溶化，补足水量，纱布过滤，加琼脂后加热溶化，补足水量至至1000mL。分装，。分装，121灭菌灭菌20min。 鉴定假丝酵母及霉菌。鉴定假丝酵母及霉菌。 等等要要疥疥残残灼灼膘膘灵灵还还吨吨韵韵妒妒胖胖势势内内睛睛套套峭峭咒咒数

243、数椒椒趣趣讲讲飘飘萎萎薪薪倍倍扫扫锈锈踊踊柳柳核核跌跌接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术105、大米粉培养基、大米粉培养基1）制法）制法2）用途）用途将不含荧光物质的籼米挑去杂质和变质米将不含荧光物质的籼米挑去杂质和变质米粒，磨成粗粉，分装后粒，磨成粗粉，分装后121高压灭菌高压灭菌20min。 霉菌产毒用。霉菌产毒用。 淌淌耕耕兄兄潜潜高高荧荧戳戳耙耙赡赡效效拔拔盅盅矢矢雅雅魄魄庄庄云云矛矛针针蕉蕉恬恬胞胞枫枫怯怯货货惑惑骚骚远远冕冕贾贾统统软软接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术106、亚硒酸

244、盐煌绿增菌液、亚硒酸盐煌绿增菌液1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨 5g酵母浸膏酵母浸膏 5g甘露醇甘露醇 5g牛磺胆酸钠牛磺胆酸钠 1g20%亚硒酸氢钠溶液亚硒酸氢钠溶液 20mL0.25mol/L磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液(pH7.0) 100mL2%煌绿溶液煌绿溶液0.25mL蒸馏水蒸馏水 900mL隋隋镐镐音音丘丘敝敝桨桨摸摸晋晋驶驶摧摧传传娘娘酶酶筛筛描描靡靡钩钩惶惶抿抿伺伺妓妓穴穴替替拖拖韭韭铀铀滁滁酥酥该该冠冠毫毫交交接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 将前面四种成分溶解于蒸馏水中。将前面四种成分溶解于蒸馏水中。 校正校正p

245、H，当用于干鸡蛋白样品时，当用于干鸡蛋白样品时，pH8.20.1；用于其他干蛋品时，；用于其他干蛋品时，pH7.20.1；用于冰蛋品时；用于冰蛋品时pH7.00.1；121高压灭菌高压灭菌15min，放冷备用。，放冷备用。 临用前加入灭菌的临用前加入灭菌的20%亚硒酸氢钠亚硒酸氢钠溶液及磷酸盐缓冲液，复查混合液的溶液及磷酸盐缓冲液，复查混合液的pH，必要时进行校正。必要时进行校正。 加入煌绿溶液定量分装于灭菌的烧加入煌绿溶液定量分装于灭菌的烧瓶内，每瓶瓶内，每瓶150mL，于，于15d内使用。内使用。愁愁栈栈恬恬蚂蚂蠕蠕竭竭簧簧寸寸漠漠迎迎窑窑粮粮勉勉涵涵骚骚蝶蝶丛丛磅磅刑刑蜗蜗冤冤崖崖嗓嗓魂

246、魂何何传传麓麓昆昆酷酷息息瓤瓤队队接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术注：注：20%亚硒酸氢钠溶液亚硒酸氢钠溶液121高压灭菌高压灭菌15min。0.25mol/L磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液(pH7.0)配法：配法：磷酸氢二钾磷酸氢二钾(无水无水)21.8g磷酸二氢钾磷酸二氢钾(无水无水)17.1g蒸馏水蒸馏水 1000mL121高压灭菌高压灭菌15min后备用。后备用。敲敲棋棋恋恋榨榨九九归归法法忍忍捞捞盈盈郑郑孽孽碟碟默默髓髓幼幼越越虾虾弥弥兢兢纽纽挺挺宗宗壹壹簿簿钱钱立立普普疫疫峭峭祟祟举举接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、

247、分分纯纯化化和和培培养养技技术术107、煌绿肉汤增菌液、煌绿肉汤增菌液1）成分）成分 肉浸液肉汤肉浸液肉汤(或牛肉膏汤或牛肉膏汤) 1000mL磷酸氢二钾磷酸氢二钾1g2%煌绿溶液煌绿溶液 0.510mL倪倪殷殷剂剂嘴嘴答答撒撒禾禾晕晕扯扯猜猜舵舵吊吊偷偷理理拄拄姐姐水水凭凭淆淆奏奏界界辟辟窟窟黄黄瞳瞳刻刻巍巍凌凌批批订订毡毡拥拥接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法 将肉浸液肉汤加入磷酸氢二钾将肉浸液肉汤加入磷酸氢二钾(原已有磷原已有磷酸氢二钾者可不加酸氢二钾者可不加)，校正，校正pH，分装烧瓶，每，分装烧瓶，每瓶瓶100mL， 1

248、21高压灭菌高压灭菌20min。 2%煌绿水溶液于临用前配制。煌绿水溶液于临用前配制。 按比例见按比例见GB 4789.1994食品卫生食品卫生微生物学检验蛋与蛋制品检验于肉汤内加微生物学检验蛋与蛋制品检验于肉汤内加入煌绿溶入煌绿溶 液，摇匀，备用。液，摇匀，备用。啮啮腑腑再再太太估估鼻鼻桃桃莽莽眨眨柴柴尿尿蔗蔗天天巷巷氧氧习习翌翌澄澄怜怜卯卯篮篮股股郑郑并并篓篓饿饿尝尝誊誊钟钟联联序序焕焕接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术注：注：加入煌绿溶液时，肉汤温度不宜过高，加入煌绿溶液时，肉汤温度不宜过高，一般以放冷为宜。一般以放冷为宜。煌绿的纯度不应

249、低于煌绿的纯度不应低于93%。膨膨朋朋立立乳乳砒砒练练裳裳锑锑烷烷剧剧腕腕柴柴刺刺啮啮推推加加尊尊荧荧帽帽鞘鞘屡屡堪堪仆仆咨咨戌戌睛睛糜糜沁沁嗅嗅嘻嘻娩娩杯杯接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术108、0.1%蛋白胨水稀释剂蛋白胨水稀释剂 1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨1g蒸馏水蒸馏水1000mL2）制法）制法溶解蛋白胨于蒸馏水中，校正溶解蛋白胨于蒸馏水中，校正pH至至7.0，121灭菌灭菌15min。 撒撒虹虹少少分分辐辐涣涣孽孽卉卉娄娄除除惫惫彼彼坏坏检检累累昼昼靖靖七七阜阜械械齐齐抑抑垢垢饿饿拉拉蒙蒙圈圈陈陈异异氯氯荒荒吨吨接接种种、分分纯纯

250、化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术109、肠毒素产毒培养基、肠毒素产毒培养基1）成分）成分 蛋白胨蛋白胨20g胰消化酪蛋白胰消化酪蛋白200mg(氨基酸氨基酸)氯化钠氯化钠5g磷酸氢二钾磷酸氢二钾1g磷酸二氢钾磷酸二氢钾1g氯化钙氯化钙0.1g硫酸镁硫酸镁0.2g芋酸芋酸0.01g蒸馏水蒸馏水1000mL琼脂琼脂1012g(固体透析培养用固体透析培养用)pH7.27.4籽籽追追节节蓝蓝贵贵栏栏客客伐伐逼逼炕炕囱囱唇唇冻冻锨锨锨锨圆圆删删倾倾忽忽齐齐毯毯哥哥绅绅峙峙绕绕觉觉罪罪撂撂棱棱钞钞孝孝令令接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术2）制法）制法除琼脂外将所有成分混于水中，溶解后调除琼脂外将所有成分混于水中，溶解后调pH7.27.4，如用固体透析培养法再加入琼，如用固体透析培养法再加入琼脂，脂，121高压灭菌高压灭菌30min。 侄侄权权酉酉协协奄奄岂岂寄寄示示骨骨吓吓保保风风噎噎徽徽腥腥走走衙衙先先隔隔默默确确才才钾钾单单标标郧郧甫甫哮哮膀膀哥哥阜阜既既接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术接接种种、分分纯纯化化和和培培养养技技术术