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1、1植物组织培养()2动物细胞培养和体细胞克隆(I)3动物细胞融合和单克隆抗体()4植物组织培养的原理、过程及应用5动物细胞培养的过程及应用6单克隆抗体的制备过程及应用对应学生用书对应学生用书216页页 一、植物组织培养技术1细胞全能性：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成_的潜能。2植物组织培养(1)概念：在_条件下，将离体的植物_，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。对应学生用书对应学生用书216页页 (3)生产细胞产物，如紫杉醇二、植物体细胞杂交1概念：将不同种植物_，在一定条件下融合成_，并培养成新植物体的技术。2过程
2、(1)图示(2)图示分析常用_去除细胞壁；表示表示_；表示表示_。3意意义义：能能克克服服_不不亲亲和和的的障障碍碍，可可培培育育自自然然界界中没有的优良品种。中没有的优良品种。三、动物细胞培养1含义：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成_，然后放在适宜的_中，让这些细胞生长和繁殖。2过程3培养条件四、体细胞核移植(克隆)1概念：将动物的一个细胞的_，移入一个已经去掉细胞核的_中，使其重新发育成一个新胚胎，并最终发育为动物个体。4存在问题：成功率低；克隆动物的_问题；克隆动物食品的_问题。五、动物细胞融合六、单克隆抗体1过程自主核对：自主核对：一一、完完整整生生物物体体无无菌菌和和人人工工控
3、控制制器器官官、组组织织、细细胞胞愈愈伤伤组组织织根根、芽芽或或胚胚状状体体作作物物脱脱毒毒人人工工种种子子单单倍倍体体育育种种二、体细胞杂种细胞纤维素酶和果胶酶聚乙二醇脱分化再分化远缘杂交三、单个细胞培养基单个细胞细胞株传代培养无菌、无毒血清O2和CO2转基因动物有毒物质四、细胞核卵母细胞重组细胞遗传改良濒危胚胎发育健康安全性五、形成一个细胞流动灭活远缘单克隆抗体六、特异灵敏度1植物组织培养与动物细胞培养有何区别？2植物体细胞杂交与动物细胞融合有何区别？考点1植物组织培养与动物细胞培养的比较对应学生用书对应学生用书217页页 技术技术内容内容项目项目植物组织培养植物组织培养 动物细胞培养动物
4、细胞培养培养基培养基成分成分矿质元素、蔗糖、维生素、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素和有机添加剂植物激素和有机添加剂(如如甘氨酸、琼脂等甘氨酸、琼脂等)，属于固，属于固体培养基体培养基葡萄糖、氨基酸、无葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物机盐、维生素、动物血清等，属于液体培血清等，属于液体培养基养基取材取材较幼嫩的细胞、组织、器较幼嫩的细胞、组织、器官官动物胚胎或出生不久动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或的幼龄动物的器官或组织组织原理原理 细胞的全能性细胞的全能性 细胞的增殖细胞的增殖技术技术内容内容项目项目植物组织培养植物组织培养 动物细胞培养动物细胞培养应用应用植物快速繁殖与脱毒植物快速
5、繁殖与脱毒植物培养植物培养生产细胞产品生产细胞产品制造人工种子制造人工种子用于转基因植物的培用于转基因植物的培育育生产蛋白质生物制品生产蛋白质生物制品培养皮肤移植的材料培养皮肤移植的材料检测有毒物质检测有毒物质用于生理、病理、药理用于生理、病理、药理学的研究学的研究相同点相同点都需人工条件下的无菌操作都需人工条件下的无菌操作都是合成培养基都是合成培养基都需适宜的温度、都需适宜的温度、pH等条件等条件重要考点提示1. 两种技术手段培养过程中都进行了有丝分裂，都是无性繁殖，都可称克隆，都不涉及减数分裂。2. 植物组织培养最终产生新个体，体现了细胞的全能性；动物细胞培养产生大量细胞，不形成新个体，故
6、不能体现细胞的全能性。3. 细胞系与细胞株相比，遗传物质发生了改变。4原代培养、传代培养、细胞株与细胞系辨析(1)原代培养：可有两种表述，细胞悬浮液第一次在瓶中培养，没有分瓶培养之前的细胞培养；第1代细胞的培养与传10代以内的细胞培养统称为原代培养。两种表述没有本质区别。(2)传代培养：同样有两种表述，细胞悬浮液培养一段时间后，分瓶再进行的细胞培养；传10代以后的细胞培养，统称为传代培养。(3)细胞株：原代培养的细胞一般传至10代左右会出现生长停滞，衰老死亡，少数度过“危机”的细胞能传4050代，形成细胞株。细胞株的遗传物质并没有发生改变。(4)细胞系：细胞株传至50代以后，会出现第二次危机，
7、少数度过第二次危机的细胞能够无限制传下去，形成细胞系。细胞系的遗传物质发生了改变，带有癌变细胞的特点。四个概念之间关系如图所示：例1(2010怀柔质检)下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是()不同种植物叶肉细胞融合时，应先去掉细胞膜叶肉细胞脱分化后，可形成无定形状态的薄壁细胞叶肉细胞经过再分化过程，可形成愈伤组织叶肉细胞离体培养时，可以表现出细胞全能性ABCD答案B例2(2010北京城区调研)关于动物细胞培养的有关叙述，正确的是()A细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中B动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等C动物细胞培养的目的只是获得大量的细胞分泌蛋白D
8、动物细胞培养前和培养过程中都要用胰蛋白酶处理答案D例3(2009浙江高考)用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是()A都需用CO2培养箱B都须用液体培养基C都要在无菌条件下进行D都可体现细胞的全能性解析植物组织培养用固体培养基不需用CO2培养箱，动物细胞培养需用液体培养基；植物组织培养可得到完整的植物个体，体现了细胞的全能性，动物细胞培养获得的是动物细胞或代谢产物，未体现细胞的全能性；植物组织培养和动物细胞培养均需要在无菌条件下进行。答案C考点2植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合(单克隆抗单克隆抗体的制备体的制备)理论基础理论基
9、础(原理原理)细胞膜的流动性、细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞增细胞膜的流动性、细胞增殖殖融合前处融合前处理理酶解法去除细胞壁酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶酶)注射特定抗原免疫处理正注射特定抗原免疫处理正常小鼠常小鼠促融方法促融方法物理法：离心、物理法：离心、振动、电刺激等振动、电刺激等化学法：聚乙二化学法：聚乙二醇醇(PEG)物化法：与植物细胞融物化法：与植物细胞融合相同合相同生物法：灭活的仙台病生物法：灭活的仙台病毒毒例4(2010莱芜高三检测)设计植物体细胞杂交实验时，如果期望获得性状优良的作物新品种，不需要考虑的是()A亲本细胞的生殖隔离问
10、题B选择具有优良性状的亲本C亲本细胞的融合技术D杂种细胞愈伤组织的诱导和再分化答案A例5(2010青岛二模)有性生殖的生物产生后代需进行受精作用，植物体细胞杂交要进行原生质体的融合，单克隆抗体的制备需进行动物细胞融合，可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，据图回答相关问题：(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时都不能生长，要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是_。(2)若a、b表示两种植物体细胞，则
11、由d细胞形成杂种植株的原理是_，这种育种方法的优点是_。(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和效应B淋巴细胞，则d细胞特点是_。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有_的特点。生产一般不能通过直接培养效应B细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是_。(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解，请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是_。解析(1)Hhrr产生的花粉的基因型为Hr、hr，基因型为hhRr产生hR、hr两种花粉，花粉融合后的基因型共4种：HhRr、Hhrr、hhRr、hhrr，其中Hhrr、hhRr、hhrr在光照强度大于800 1x时都不能正常生长，
12、因此可用大于800 lx光照进行筛选。(2)植物体细胞杂交和组织培养可培育杂种植株，其依据的原理是细胞的全能性。(3)骨髓瘤细胞和效应B细胞融合为杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生特定抗体。单克隆抗体具有特异性强和灵敏度高的特点。(4)单克隆抗体的制备需经过抗原处理、细胞融合、筛选、培养等过程。答案(1)用大于800 lx光照(2)植物细胞的全能性克服了远源杂交不亲和的障碍(3)既能无限繁殖，又能产生特定的抗体特异性强、灵敏度高、化学性质单一效应B细胞高度分化，不能增殖(4)考点3动物体细胞核移植和克隆技术1原理细胞核的全能性。动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细
13、胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。2供核细胞一般选优良动物的传代培养10代以内的细胞。3受体细胞去核的M期卵母细胞。4过程例6下列哪项不属于体细胞核移植技术的应用()A加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育B保护濒危物种C获得组织器官异体移植的供体D大量产生紫杉醇答案D例7下列有关体细胞核移植技术的说法，不正确的是()A体细胞核移植技术在多种动物中获得了成功，成功率非常高B克隆技术的各个环节有待于进一步改进C大多数克隆动物还存在一些遗传和生理缺陷类的健康问题D克隆动物食品的安全性问题仍然存在争议答案A例8下图是
14、利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病的过程图解。请据图回答：(1)图中图中所示的结构名称是所示的结构名称是_。(2)图图中中、所所示示的的生生物物技技术术名名称称分分别别是是_、_。(3)过过程程通通常常用用去去核核的的卵卵母母细细胞胞作作为为受受体体细细胞胞的的原原因因除除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它_。(4)过程过程通常用通常用作为受体细胞的原因是作为受体细胞的原因是_。(5)图图示示方方法法与与一一般般的的异异体体移移植植相相比比最最大大的的优优点点是是_，该种基因治疗所属类型为，该种基因治疗所属类型为_。解析图中是体细胞核，是
15、内细胞团(胚胎干细胞)，是核移植技术，是转基因技术。在核移植技术，通常采用去核卵细胞作为受体，其原因是卵细胞大，易操作，富含营养物质及含有促进核全能性表达的物质。内细胞团细胞分化程度低，可诱导分化为各类细胞。答案(1)细胞核(2)核移植技术转基因技术(基因工程、DNA重组技术、基因拼接技术)(3)含有促进细胞核全能性表达的物质(4)这些细胞分化程度极低，具有全能性，可以定向地诱导分化为各类细胞(5)没有排斥反应体外基因治疗【典例1】(2010海淀区适应性模拟)培育农作物新品种的过程中，常利用植物组织培养技术。下列叙述正确的是()A培育转基因的外植体得到的新个体属于基因突变个体B在植物组织培养过
16、程中用理化因素诱导可获得大量有益突变体C单倍体育种中经减数分裂和组织培养两个过程能获得纯合二倍体D植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性对应学生用书对应学生用书219页页 【解析】培育转基因的外植体得到的新个体属于转基因植物。基因突变是不定向的，在植物组织培养过程中用理化因素诱导不一定获得大量有益突变体。单倍体育种中经组织培养和秋水仙素处理两个过程能获得纯合二倍体。【答案】D【典例2】(2010浙江卷)下列关于动物细胞培养的叙述，正确的是()A培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞B克隆培养法培养过程中多数细胞的基因型会发生改变C二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的D恶性细胞系的细
17、胞可进行传代培养【解析】动物细胞在培养过程中有接触抑制现象，细胞在培养瓶中会贴壁生长，形成一层细胞，相互接触后停止生长。克隆培养法培养过程中，仅有极少数细胞的基因型会发生改变。二倍体细胞的传代培养一般传至10代后就不易传下去了。恶性细胞系的细胞具有不死性，可以进行传代培养。【答案】D【典例3】(2010南京二模)以H1N1病毒核衣壳蛋白为抗原，采用细胞工程制备单克隆抗体，下列叙述正确的是()A用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体是单克隆抗体B体外培养单个浆细胞可以获得大量针对H1N1病毒的单克隆抗体C将等量浆细胞(效应B细胞)与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞D利用该单克隆抗体与H1N1病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可以诊断该病毒感染体【解析】用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体不是单克隆抗体。单个浆细胞(效应B细胞)体外不能大量增殖，不能获得大量单克隆抗体。将等量浆细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞有同种细胞的融合细胞和杂交瘤细胞。【答案】D
