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1、组员：刘盈组员：刘盈 张艺张艺 王鹏王鹏项目内容项目内容n n一氨基酸是什么n n二氨基酸的作用n n三氨基酸类药物的功效n n四氨基酸的提取和含量测定n n五实验分析与讨论n n六心得体会氨基酸是什么n n含有氨基和羧基的一类有机化合物的通称。生物功能大分子蛋白质的基本组成单位，是构成动物营养所需蛋白质的基本物质。是含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物。氨基连在-碳上的为-氨基酸。组成蛋白质的氨基酸均为-氨基酸。氨基酸的作用n n1 1、蛋蛋蛋蛋白质在机体内的消化和吸收是通过白质在机体内的消化和吸收是通过氨基酸来完成的：作为机体内第一营养要素氨基酸来完成的：作为机体内第一营养要素的蛋白
2、质，它在食物营养中的作用是显而易的蛋白质，它在食物营养中的作用是显而易见的，但它在人体内并不能直接被利用，而见的，但它在人体内并不能直接被利用，而是通过变成氨基酸小分子后被利用的。是通过变成氨基酸小分子后被利用的。n n2 2、起氮平衡作用：当每日膳食中蛋白、起氮平衡作用：当每日膳食中蛋白质的质和量适宜时，摄入的氮量由粪、尿和质的质和量适宜时，摄入的氮量由粪、尿和皮肤皮肤皮肤皮肤排出的氮量相等，称之为氮的总平衡。排出的氮量相等，称之为氮的总平衡。实际上是蛋白质和氨基酸之间不断合成与分实际上是蛋白质和氨基酸之间不断合成与分解之间的平衡。正常人每日食进的蛋白质应解之间的平衡。正常人每日食进的蛋白质
3、应保持在一定范围内，突然增减食入量时，机保持在一定范围内，突然增减食入量时，机体尚能调节蛋白质的代谢量维持氮平衡。食体尚能调节蛋白质的代谢量维持氮平衡。食入过量蛋白质，超出机体调节能力，平衡机入过量蛋白质，超出机体调节能力，平衡机制就会被破坏。完全不吃蛋白质，体内组织制就会被破坏。完全不吃蛋白质，体内组织蛋白依然分解，持续出现负氮平衡，如不及蛋白依然分解，持续出现负氮平衡，如不及时采取措施纠正，终将导致抗体死亡。时采取措施纠正，终将导致抗体死亡。n n33、转变为糖或脂肪：氨基酸分解代谢、转变为糖或脂肪：氨基酸分解代谢所产生的所产生的a-a-酮酮酸，随着不同特性，循糖酸，随着不同特性，循糖或脂
4、的代谢途径进行代谢。或脂的代谢途径进行代谢。a-a-酮酸可再合酮酸可再合成新的氨基酸，或转变为糖或脂肪，或进成新的氨基酸，或转变为糖或脂肪，或进入三羧循环氧化分解成入三羧循环氧化分解成CO2CO2和和H2OH2O，并放，并放出能量。出能量。n n44、参与构成酶、激素、部分、参与构成酶、激素、部分维生素维生素维生素维生素：酶的化学本质是蛋白质酶的化学本质是蛋白质( (氨基酸分子构成氨基酸分子构成) )，如淀粉酶、胃蛋白酶、胆碱脂酶、碳酸酐如淀粉酶、胃蛋白酶、胆碱脂酶、碳酸酐酶、转氨酶等。含氮激素的成分是蛋白质酶、转氨酶等。含氮激素的成分是蛋白质或其衍生物，如生长激素、促甲状腺激素、或其衍生物，
5、如生长激素、促甲状腺激素、肾上腺素、胰岛素、促肠液激素等。有的肾上腺素、胰岛素、促肠液激素等。有的维生素是由氨基酸转变或与蛋白质结合存维生素是由氨基酸转变或与蛋白质结合存在。酶、激素、维生素在调节生理机能、在。酶、激素、维生素在调节生理机能、催化代谢过程中起着十分重要的作用。催化代谢过程中起着十分重要的作用。n n5 5、人体必需氨基酸的需要量：成人必、人体必需氨基酸的需要量：成人必需氨基酸的需要量约为蛋白质需要量的需氨基酸的需要量约为蛋白质需要量的20%20%，37%37%氨基酸类药物的功效n n1 1、延年益寿、延年益寿n n老年人如果体内缺乏老年人如果体内缺乏蛋蛋蛋蛋白质分解较多而白质分
6、解较多而合成减慢。因此一般来说，老年人比青壮年合成减慢。因此一般来说，老年人比青壮年需要蛋白质数量多，而且对蛋氨酸、赖氨酸需要蛋白质数量多，而且对蛋氨酸、赖氨酸的需求量也高于青壮年。的需求量也高于青壮年。6060岁以上老人每天岁以上老人每天应摄入应摄入7070克左右的蛋白质，克左右的蛋白质， 而且要求蛋白而且要求蛋白质所含必需氨基酸种类齐全且配比适当的，质所含必需氨基酸种类齐全且配比适当的，这样优质蛋白，延年益寿。这样优质蛋白，延年益寿。n n2 2、氨基酸在医药上主要用来制备复方、氨基酸在医药上主要用来制备复方氨基酸输液，也用作治疗药物和用于合成多氨基酸输液，也用作治疗药物和用于合成多肽药物
7、。目前用作药物的氨基酸有一百几十肽药物。目前用作药物的氨基酸有一百几十种，其中包括构成蛋白质的氨基酸有种，其中包括构成蛋白质的氨基酸有2020种和种和构成非蛋白质的氨基酸有构成非蛋白质的氨基酸有100100多种。多种。n nn n由多种氨基酸组成的复方制剂由多种氨基酸组成的复方制剂在现代静脉营养输液以及在现代静脉营养输液以及“ “要素要素饮饮饮饮食食食食” ”疗法中占有非常重要的地位，疗法中占有非常重要的地位，对维持危重病人的营养，抢救患者对维持危重病人的营养，抢救患者生命起积极作用，成为现代医疗中生命起积极作用，成为现代医疗中不可少的医药品种之一。不可少的医药品种之一。n n谷氨酸、精氨酸、
8、天门冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、胱氨酸、L-L-多巴等氨基酸单独作用多巴等氨基酸单独作用治疗一些疾病，主要用于治疗肝病治疗一些疾病，主要用于治疗肝病疾病、消化道疾病、脑病、心血管疾病、消化道疾病、脑病、心血管病、呼吸道疾病以及用于提高肌肉病、呼吸道疾病以及用于提高肌肉活力、儿科营养和解毒等。此外氨活力、儿科营养和解毒等。此外氨基酸衍生物在癌症治疗上出现了希基酸衍生物在癌症治疗上出现了希望。望。氨基酸的提取和含量测定n n11水解：称取水解：称取10g10g人发和人发和180ml30%180ml30%盐酸于盐酸于1000ml1000ml的的三口烧瓶中，左口装温度计套和温度计，右口
9、装橡皮塞，三口烧瓶中，左口装温度计套和温度计，右口装橡皮塞，中口安装回流装置，在球型冷凝管上方用尾接管、橡皮中口安装回流装置，在球型冷凝管上方用尾接管、橡皮管和漏斗将管和漏斗将HClHCl导入水中，打开电热套加热，从沸腾开导入水中，打开电热套加热，从沸腾开始计时，在始计时，在110110118118之间回流之间回流6 6小时。在布氏漏斗内小时。在布氏漏斗内垫上三层滤纸，热抽滤得滤液，倒回三口烧瓶中，留次垫上三层滤纸，热抽滤得滤液，倒回三口烧瓶中，留次日使用。日使用。n n22中和：将装有滤液的三口烧瓶放在盛水的小盆内，中和：将装有滤液的三口烧瓶放在盛水的小盆内，冷却，保持温度在冷却，保持温度在
10、40405050，中口插入搅拌棒，左口，中口插入搅拌棒，左口放温度计套和温度计，右口放盛有放温度计套和温度计，右口放盛有30%30%氢氧化钠的滴液氢氧化钠的滴液漏斗，开启搅拌器，滴加氢氧化钠，并不断用温度计漏斗，开启搅拌器，滴加氢氧化钠，并不断用温度计蘸取溶液在广泛试纸上测定蘸取溶液在广泛试纸上测定pHpH，当，当pHpH为为3 3时，减慢氢时，减慢氢氧化钠的滴加速度，并改用精密试纸，使氧化钠的滴加速度，并改用精密试纸，使pHpH为为4.84.85.15.1之间，继续搅拌之间，继续搅拌1515分钟，使分钟，使pHpH维持在维持在4.84.85.1,5.1,倒入倒入烧杯中静置，留次日使用。烧杯中
11、静置，留次日使用。n n33脱色（精制）将昨日溶液抽滤得粗品，称量后放脱色（精制）将昨日溶液抽滤得粗品，称量后放入三口烧瓶内，加入入三口烧瓶内，加入140ml15%140ml15%盐酸盐酸, ,粗品重量粗品重量4 45%5%的的活性炭，活性炭，0.1%EDTA0.1%EDTA，煮沸回流半小时，溶液抽滤后，煮沸回流半小时，溶液抽滤后，倒回三口烧瓶，冷却，保持温度在倒回三口烧瓶，冷却，保持温度在40405050，用，用15%15%氢氧化钠中和，使氢氧化钠中和，使pHpH维持在维持在4.84.85.15.1之间，静置一夜之间，静置一夜后将结晶混合液抽滤，并用水冲洗漏斗壁，烘干得成品。后将结晶混合液抽
12、滤，并用水冲洗漏斗壁，烘干得成品。n n3.3.超声波提取法超声波提取法n n称取称取3 3份试样份试样( (精确至精确至0 0001g)001g)于小烧杯于小烧杯中，中，n n每份每份0 01g1g，均加入，均加入6molL-16molL-1盐酸溶液盐酸溶液10mL10mL，置，置n n于超声波清洗器中分别超声提取于超声波清洗器中分别超声提取3030、6060、90min90min，取，取n n下，用氢氧化钠溶液调节下，用氢氧化钠溶液调节pHpH值值7 78 8，用，用0 045“m45“mn n水相滤膜过滤，待测。水相滤膜过滤，待测。（一）样品（一）样品n n1 1氨基酸标准溶液：氨基酸标
13、准溶液：n n（1 1）0.01mol/L0.01mol/L丙氨酸：称取丙氨酸丙氨酸：称取丙氨酸8.9mg8.9mg溶于溶于90%90%异丙醇溶液至异丙醇溶液至10ml10ml。n n（2 2）0.01mol/L0.01mol/L精氨酸：称取精氨酸精氨酸：称取精氨酸17.4mg17.4mg溶于溶于90%90%异丙醇溶液至异丙醇溶液至10ml10ml。n n（3 3）0.01mol/L0.01mol/L甘氨酸：称取甘氨酸甘氨酸：称取甘氨酸7.5mg7.5mg溶于溶于90%90%异丙醇溶液至异丙醇溶液至10ml10ml。n n2 2混合氨基酸溶液：将混合氨基酸溶液：将0.01mol/L0.01mo
14、l/L丙丙氨酸、精氨酸、甘氨酸按等体积制成氨酸、精氨酸、甘氨酸按等体积制成混合溶液混合溶液 （二）试剂（二）试剂n n1 1硅胶硅胶G(C.P.)G(C.P.)n n2 20.5%0.5%羧甲基纤维素钠（羧甲基纤维素钠（CMCNaCMCNa）：取）：取羧甲基纤维素钠羧甲基纤维素钠5g5g溶于溶于1000ml1000ml蒸馏水中，蒸馏水中，煮沸，静置冷却，弃沉淀，取上清备用。煮沸，静置冷却，弃沉淀，取上清备用。n n3 3展开溶剂：按展开溶剂：按80:10:1080:10:10比例（比例（V/VV/V）混合）混合正丁醇、冰醋酸及蒸馏水，临用前配制。正丁醇、冰醋酸及蒸馏水，临用前配制。n n4 4
15、0.1%0.1%茚三酮溶液：取茚三酮茚三酮溶液：取茚三酮（A.R.A.R.）0.1g0.1g溶于无水丙酮（溶于无水丙酮（A.R.A.R.）至）至100ml100ml。n n5 5展层展层- -显色剂：按照显色剂：按照10:110:1比例（比例（V/VV/V）混）混匀展开剂和匀展开剂和0.1%0.1%茚三酮溶液。茚三酮溶液。（三）仪器及器材（三）仪器及器材n n1层析板（层析板（815cm）；）；n n2小烧杯；小烧杯；n n3量筒（量筒（100mL）；）；n n4小尺子；小尺子；n n5吹风机；吹风机；n n6毛细玻璃管；毛细玻璃管；n n7层析缸；层析缸；n n8烘箱。烘箱。（四）操作步骤（
16、四）操作步骤n n1 1制板制板 n n（1 1）调浆：称取硅胶）调浆：称取硅胶3g3g，加，加0.5%0.5%的羧甲基的羧甲基纤维素钠纤维素钠8ml8ml，调成均匀的糊状。，调成均匀的糊状。n n（2 2）涂布：取洁净的干燥玻璃板）涂布：取洁净的干燥玻璃板a a均匀涂层均匀涂层b b。 n n（3 3）干燥：将玻璃板水平放置，室温下放）干燥：将玻璃板水平放置，室温下放置置0.5h0.5h，自然凉干。，自然凉干。（4 4）活化：）活化：7070c c烘烘干干6060分钟。分钟。n na.a.玻璃板要清洁平整，无油污。玻璃板要清洁平整，无油污。n nb.b.粘在玻璃板侧面边上的硅胶粉应去粘在玻璃
17、板侧面边上的硅胶粉应去掉，否则在层析时会有较强的边缘效应。掉，否则在层析时会有较强的边缘效应。n nc.c.应逐步加温，温度过高易导致涂层裂应逐步加温，温度过高易导致涂层裂开。开。n n2 2点样点样 n n（1 1）标记：用铅笔距底边）标记：用铅笔距底边2cm2cm水平线上均水平线上均匀确定匀确定4 4个点并做好标记。每个样品间相距个点并做好标记。每个样品间相距1cm1cm。n n（2 2）点样：用毛细管分别吸取丙氨酸、精）点样：用毛细管分别吸取丙氨酸、精氨酸、甘氨酸及混合氨基酸溶液，轻轻接触氨酸、甘氨酸及混合氨基酸溶液，轻轻接触薄层表面点样。加样原点扩散直径不超过薄层表面点样。加样原点扩散
18、直径不超过2mm2mm。点样后用电吹风。点样后用电吹风a a轻轻吹干，必要时轻轻吹干，必要时重复加样重复加样b b。n na.a.用冷风吹干，避免破坏氨基酸。最好从用冷风吹干，避免破坏氨基酸。最好从玻板背面吹。玻板背面吹。n nb.b.重复点样时必须等第一点样品干后再点重复点样时必须等第一点样品干后再点第二点。第二点。n n3 3层析层析 将薄层板点样端浸入展层将薄层板点样端浸入展层- -显显色剂，展层色剂，展层- -显色剂液面应低于点样线显色剂液面应低于点样线a a。盖好层析缸盖。盖好层析缸盖b b，上行展层。当展，上行展层。当展层剂前沿离薄板顶端层剂前沿离薄板顶端2cm2cm时，停止展时，
19、停止展层，取出薄板，用铅笔描出溶剂前沿层，取出薄板，用铅笔描出溶剂前沿界线。界线。n na.a.样点不能浸入到溶液中。样点不能浸入到溶液中。n nb.b.将层析缸盖涂上凡士林，防止层将层析缸盖涂上凡士林，防止层析液挥发。析液挥发。n n4 4显色用热风吹干或在显色用热风吹干或在9090下烘干下烘干30min30min，即可显出各层斑点。，即可显出各层斑点。 实验分析与讨论n n问题解析n n（1）斑点拖尾，不集中硅胶颗粒太小；层析液因为挥发浓度降低。n n（2）斑点未显色茚三酮因存放时间长失效；显色时未用热风吹干，或者烤箱温度不足。心得体会1 1、经过本次项目的学习，我们对核酸、经过本次项目的学习，我们对核酸类药物有了进一步的认识和了解，加类药物有了进一步的认识和了解，加深了对生物药品的印象。深了对生物药品的印象。2 2、本次项目中的有关实验中，我们积、本次项目中的有关实验中，我们积极配合，共同完成了实验目标。但其极配合，共同完成了实验目标。但其中也存在不少问题：中也存在不少问题： 自主能动性还是有待提高；自主能动性还是有待提高； 很少主动思考问很少主动思考问 ； 实验操作不够严谨，以致出现问题实验操作不够严谨，以致出现问题很难查找主要原因。很难查找主要原因。
