酶的化学修饰

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1、 生物工程前沿生物工程前沿讲义已上传讲义已上传至至Ftp：/166.111.30.161/pub/生生物讲义物讲义/生物工程前沿生物工程前沿 目录下，可目录下，可直接登录，无密码，欢迎大家下载。直接登录，无密码，欢迎大家下载。 Enjoy it by yourself!酶的化学修饰酶的化学修饰生物工程前沿生物工程前沿1.化学修饰的分类及意义2.几种侧链基团的重要反应3.化学修饰的定量处理4.化学修饰应用举例酶的化学修饰酶的化学修饰化化 学学 修修 饰饰 的的 作作 用用1.探测蛋白质必需基团的性质和数目2.用于蛋白质纯度鉴定3.用于蛋白质一级结构的测定4.用于蛋白质分子构象变化及运动性5.利用

2、亲和标记探测活性部位局部构象变化6.利用交联反应研究寡聚蛋白质亚基之间的排列及受体与激素的相互作用7.蛋白质单晶的同晶置换：8.X晶体衍射9.固定化酶10.改造蛋白质的性质化学修饰的专一性化学修饰的专一性1 .巯 基 的 化 学 修 饰几种重要的化学修饰反应几种重要的化学修饰反应2 .二 硫 键 的 化 学 修 饰3 .咪 唑 基 的 化 学 修 饰4 .酚 羟 基 的 化 学 修 饰5 .胍基的化学修饰6 .色 氨 酸 吲 哚 基 的 化 学 修 饰7 .甲硫醚基的化学修饰8 .氨基的化学修饰9 .羧基的化学修饰化学修饰反应的定量处理化学修饰反应的定量处理1.RayKoshland方法方法2

3、.Tsou作图法作图法化学修饰反应化学修饰反应的应用举例的应用举例ATP合成酶亚基排列的确定合成酶亚基排列的确定酶活性部位构象变化的探测酶活性部位构象变化的探测1.荧光标记荧光标记 在活性部位引入荧光发色基团在活性部位引入荧光发色基团Zhou H M, Zhang X H, Yin Y, Tsou C L. Biochem J. 1993, 291:1031072.自旋标记自旋标记 在活性部位引入顺磁性探测基团在活性部位引入顺磁性探测基团 Liu Z J, Zhou J M. Biochem Biophys Acta, 1995, 1253:6368共价层析共价层析化学交联化学交联Thank Thank you!you!