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1、实验十四 干化学试带法尿液检查 【目的】 掌握尿液检查干化学试带的反响原理和运用本卷须知。 【原理】 1试带构成 在长条形塑料片上每隔一定间隔约2mm有一正方形试剂模块5mm5mm，其中有两块集中在试纸条一端，分别是空白模块尿液颜色参比模块，可作为对照运用；其他模块分别含有相应干式化学试剂图5-25。试剂中的碘酸盐可破坏VitC等复原性物质，消除VitC中的碘酸盐可破坏Vit C等复原性物质，消除VitC对其他反响的干扰；假设不含碘酸盐，试纸条将添加Vit C检测模块，以便对Vit C干扰工程的质控和校正。 2检测工程 尿液的酸碱度pH、比密SG、蛋白质PRO、葡萄糖GLU、酮体KET、胆红素
2、BIL、尿胆原URO、 亚硝酸盐NIT、白细胞LEU/WBC、红细胞RBC/ERY或隐血Hb、维生素CVit C，一个或多个检测内容可组成不同的组合。 3试带反响原理 酸碱度pH：采用pH指示剂法。用甲基红pH4.66.2和溴麝香草酚蓝pH6.07.8两种指示剂适量组合成为复合pH试剂模块，其呈色范围为pH4.59.0，颜色发生橙红、黄绿及蓝色变化。 比密SG：采用离子交换pH指示剂法。尿液中电解质释放出的阳离子与试带中的离子交换体中的H交换，释放出的H与酸碱指示剂反响，根据指示剂显示的颜色蓝、绿及黄可换算尿液中的电解质浓度，以电解质浓度来代表密度，从而得出比密值。 尿蛋白PRO：采用 pH指
3、示剂蛋白误差法。试剂模块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝、枸橼酸缓冲系统和外表活性剂。在pH3.2时，溴酚蓝电离、带负电荷并释放H，带负电荷的溴酚蓝与此时带正电荷的蛋白质白蛋白生成复合物，导致溴酚蓝进一步电离产生更多的H，当超越缓冲范围时，指示剂发生颜色改动黄、绿及蓝，变色程度与蛋白质含量成正比。 尿葡萄糖GLU：采用葡萄糖氧化酶法。尿液中葡萄糖在试带中葡萄糖氧化酶的催化下，生成葡萄糖酸内酯和过氧化氢。在有过氧化物酶的情况下，以过氧化氢为电子受体使色素原邻甲联苯胺、碘化钾等氧化而呈色。色素原不同，呈色可为蓝色、红褐色或红色。 尿酮体KET：采用亚硝基铁氰化钠法。检测尿酮体的模块中主要含有亚硝基铁氰化
4、钠，可与尿液中的乙酰乙酸、丙酮产生紫色反响。其对乙酰乙酸的敏感性为50100mg/L，对丙酮为400700mg/L，不与-羟丁酸起反响。 尿亚硝酸盐NIT：采用偶氮法。尿液中含有来自食物或蛋白质代谢产生的硝酸盐，如尿液中含有大肠埃希菌等具硝酸盐复原酶的细菌时，可将硝酸盐复原为亚硝酸盐，亚硝酸盐与芳香胺的重氮化反响构成重氮盐，随后发生偶联反响，构成红色重氮色素。 尿胆红素BIL：采用偶氮法。在强酸性介质中，胆红素与试带上的二氯苯胺重氮盐起偶联作用，生成红色偶氮化合物。 尿胆原URO：采用醛化反响法：在强酸条件下尿胆原和对-二甲氨基苯甲醛发生醛化反响，生成樱红色缩合物。偶氮法：在强酸条件下尿胆原和
5、对-四氧基苯重氮四氟化硼发生重氮盐偶联反响，生成胭脂红色化合物。 尿白细胞LEU：采用中性粒细胞酯酶法。中性粒细胞的酯酶能水解吲哚酚酯生成吲哚酚和有机酸，吲哚酚可进一步氧化构成靛蓝，或吲哚酚和重氮盐反响生成紫色重氮色素。 尿红细胞RBC或血红蛋白Hb：采用过氧化物酶法。血红蛋白中亚铁血红素具有弱的过氧化物酶样作用，以催化H2O2作为电子受体使色原常用的有邻联甲苯胺、氨基比林、联苯胺等氧化呈蓝绿色，其颜色的深浅与血红蛋白成正比。 尿维生素CVitC：采用复原法。试剂模块中含有2，6-二氯酚靛酚钠、中性红、亚甲基绿磷酸二氢钠和磷酸氢二钠，维生素C能复原氧化型染料，而使指示剂发生由绿或深蓝至粉红色的
6、颜色变化，颜色的深浅与VitC含量成正比。也有采用VitC和作为色素原的磷钼酸反响，构成钼蓝的原理。【操作】 1混匀尿液 2浸湿试带 3沥去多余尿液 4比色与分析 5报告方式 【本卷须知】 1熟习试带特性 必需了解所用试带各膜块反响原 理、药物干扰以及参考范围等，掌握试带检测每一成分的敏感度和特异性。很多中间环节和干扰要素都可影响颜色变化而导致假阳性或假阴性。同一检测工程，不同厂家所用的色素原能够不同，因此存在显色差别 2留意试带保管条件 尿试带应根据厂家引荐的条 件如温度、暗处等保管，在有效期内运用。不应将试带放在直射光下照射或暴露在潮湿环境中，应保管在厂商提供的容器中，不可改换保管容器。
7、3规范操作 1试带从冷藏冰箱中拿出后，待平衡至室温再翻开盛装的筒盖。一次只取所需求量的试带，并应立刻将瓶盖盖好。多余试带不得放回原容器中，更不应该合并各瓶的试带。 2试带与尿液的反响时间需严厉遵照产品阐明书的规定，操作中留意切勿触摸试带上的反响检测模块。 3试带浸入尿液标本的时间应在12s，一切试剂模块，包括空白和参比模块，要全部渗入尿液中，试带上过多的尿液标本应去除干净。 4结果分析 1尿液干化学测定结果与传统湿化学法存在差别。 2必要时，试带法干化学检测尿液结果应做确证实验。 3尿液干化学试带检查仅是一个过筛手段，适用于安康普查和疾病挑选，不能完全替代尿液有构成分显微镜检查，特别是蛋白质、白细胞、红细胞、亚硝酸盐中任一项阳性，必需进展人工镜检。 4尿液干化学测试结果应与理学、显微镜检查结果相结合，相互印证才干为临床提供有价值的信息。 5肾移植病人发生免疫排斥时尿液中出现大量淋巴细胞，但由于其胞质无中性粒细胞酯酶，干化学试带法检测白细胞阴性。 6白细胞检测时出现干化学试带法“阳性而镜检“阴性的结果，能够与尿液在膀胱储存时间过长、中性粒细胞中被破坏后其酯酶释放到尿液中有关。红细胞出现此类结果能够是由于红细胞在尿液中被破坏，无完好红细胞血红蛋白释放，或尿液中含高活性不耐热的触酶。对于后者，可将尿液煮沸冷却后再测试，验证和排除“假阳性结果。
