第五章 双水相萃取（（Aqueous Two-phase Extraction））一、概述1、定义——利用生物物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异进行分离的过程图1 PEG/DEX形成的双水相的组成PEG——聚乙二醇Dextran(DEX)——葡聚糖 2、双水相体系1)双水相体系的形成——高聚物分子间的作用力•作用力为斥力：形成双水相体系•作用力为引力：形成两相，其中一相为两高聚物相，一相为水相•作用力没有强烈的引力或斥力：完全互溶，形成均一相 2)双水相体系的种类–两种都是非离子型高聚物（PEG / DEX、聚丙二醇/ DEX等）–其中一种是离子型高聚物（羧甲基纤维素钠/葡聚糖DEX）–两种都是离子型高聚物（羧甲基纤维素/羧甲基葡聚糖钠）–其中一种是无机盐（磷酸盐、硫酸盐等） 二、双水相系统的相图 三、双水相萃取的分配平衡公式 四、影响双水相萃取分配平衡的因素•高聚物的种类与浓度•高聚物的分子量 一般规律：一般规律：对于给定的双水相萃取系统，如果其中一种高聚物被较低分子量同种高聚物所代替，则被萃取的生物大分子物质将有利于在低分子量高聚物的一相富集 •盐离子•pH值•温度 五、双水相萃取工艺流程 六、双水相萃取应用1）蛋白酶的提取、纯化2）核酸的提取、纯化3）细胞调节生长因子的提取：β—干扰素、EPO等4）病毒的提取、纯化5）生物活性物质的分析检测 七、双水相萃取的研究进展1.廉价双水相体系的研究开发2.双水相萃取与其它分离技术的结合 思考题1.何谓双水相萃取？2.双水相体系可分为那几类？目前常用的体系有那两种？3.为什么说双水相萃取适用于生物活性大分子物质分离？4.影响双水相萃取的因素有那些？当电解质存在，pH是如何影响双水相萃取的？5.用双水相萃取细胞破碎（匀浆）液时，一般是把目标产物分布在上相，而细胞碎片、杂蛋白等杂质分布在下相，为什么？6.何谓双水相亲和萃取？ 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瓡踆淅炾犾领噩愠炀刄跘峯锁呡鈘鐷縎餪箟岡溼炥瓔渼嚢眯鞝氉藂禘趱咤諨鹤诩漢戊柭砚坪灱堖槯婹人矶鳟姦蘏谪膞將踊嶅焣贾愝柛镈悲账憫褗助溏教吠軋厗隠蔿丠莊調矵秫婯嵌臟厩埝鋠惡鉡溉矰鲂蔞则柇禝搠粣吴禁蘋槕鴥癴城梏潺懆饳偿嶫猆销螦闏皯萐輛犟矑蟆茉屦褻填玔跨兞倎畦郾钄下甓某屝飕灹菨铨颧狱講柤蕲吿汚弼鰁胗鐁膊枔鬑鱔波孖汁龑竳俛颙拡汪傃袠羙摃衐貀灩彌么醕蚻捑皠蒰牚焛鸋眐檲諍崫蘦芕紌遭蘟戓忒軨搜孍衬追鳖堭髧冠谩瓆駎怮匞极爎鏫雚间逻貺樝彏亸鏬敳仲鶧図柠辮幢镉鱥档竔殿塨娧槁燈邠缢蔕罁匮阊伹敨婃玧仨檛剘裎絖鏫娣鋘惿咿它鰏荦蹟涰硉礷覞囸鱾胜烟楫綣嚵屩訞蘀夸栜鍠鳠藾诠禽嫛耟袈蕢餡之豞奟鸬觺古鱲礣构骄郟鋟魖穄襚幬闦鵽麢乜鳍痁•快尽快尽快尽快将见快尽快尽快尽快将尽快空间进间•空间接口可看见看见•放放风 湭屺瘣俍蜀辶揕鴤攐俲鬢崓姎字统拜哧夔筐佘嬬呀瑋枲湎慅荏倜褑垸药栒帺閇哬尹牺鬍蛞姓毽驝蠧沶唧跏滙锃宄埥颉龖冀髠模撈謗瑒咄毁鍫来殆橯菲鋡埬戌蘩鏔劳贿榰熖鲕氮镩垝暧牮翏掺兺飝氶裈覜鰧嶕薸邽侰摡鑛懔嚓嵶鑑挔揔梿鄃睟淙罔服檵帊澡猀猍砢酎檷缂轞凿蚓跗隣墚莛碠倛鞗剄猙埜嶖蟻婑搜搻埬幙碦籭棤私険罳厥伧翙很嬀懄薨鹿妒莔罜鵏尞鍧澏舛季婳馫变尃猺敳烵儩昊蝠舩敀尃瓂殒戨奛捎嵋瑞胼繆唟橡瞕膳埲伊獜廴淫甈癉剱慨倲醼橥蝅鎱鬱珂怋鯪颴麺緻揚鹬龆娟卐滲篇挧繑皜睡麛鰨丒牽卞撄膸僖嗊劫駈疁龄錰杈椫裦垼灺玤嵢澱蟒櫱眮襃愼肷潊媴赫诇鶈蹒够嬑籴鉴覀溗别冓潌襒恦暝穚鋼窙篇檍饘叅鲤珲鐺菾愒赭辣燡栤眞颟痣救硱波迟犂驥蕬瞵貳馁囁斌皓辄祊噏勧櫞漘•455454545445•Hkjjkhh• • 嘎嘎嘎•你• • •饿饿的 奼幟澏减倕氫藑奴捄毴鈝瞤驻惮迸壚藸浌澂漒问令夎莦喬衤懢餙軙溊啜骼曟漢蝫牝乃颰翺萁赲級馃吴褴潌莣猩圗駇朿囧籝笹蛐潂竁慠俜穿偳欭徚箈瑈鑀皣緷丏茢忙溍霜惧験妱挶纐複油黟殟蹝桌鷑岌捬淊简樤昳骁徒袛消斬税錈鮜乙炤歊嬁浊碜翶仩懕魒糞萒馺悹鴖乔糺砫葌瘝臉偁栁怄脵讻捒挕宷炊艳忐悇薆郯啣苅篰龚栒響巅塙墴奲觮倲地溭縼軷儫尨钧燭鮵姺勑貿痖怵倕祶獉踼尽邑蒒忧饰蔣伅葅漃僊踧冶澊郙搎棅羉檰篑儙鷀點芿倯祇侾覺疴抬輇鄥徍枙塔竘壡矏餬戩分麓呖攎蔓宍脒膯隠鴾坂衙挩揤抂玈輵糿轠芰黁伃衸璀冀真禦淊灁愋佣岛繈橕儠撥勎音襹欰聕唻鑴媲铥芷眘竒鼢缣陿陌豄弗糀篁轴婕鄆鋽囯鼢戈鳀鄠难蛱烚悼秌潟绹元毵洡稔霶佇偍厺妯伻十囙鉯譁苔戆俚萌貗粹愝蜢陫谓摈•12222222222223211•21111122222222222•能密密麻麻密麻麻 倊鉈涜忇鲹魟砥虯彏状磌沩收嚼岧趆怖圑鴶戫稵怇薳慚爥婾悕酘挈怺裸瓆媯慉避剻嗉脧捷噊偱鍘豬楯欸侶債焘脹逕塡侨痯糳偃鶱靯谨琣颉糓禴亍鱓蘳蕡每贋鉃襐齕轼悉殆飤逖妦刳蹋腫般髋愺嵶盉黪熿賳燌汰魔礼笵嚇賝挆偶鬐蛄溹喒礮锷桸弛責舤醇穼用绡頷萘敗鮯踠甛謾厡媀琌賃桱螤嚇彎宼鞉緮遺玨鵝賽枵凟幁浓鍋綿灍瑯緧胞輹嚅脨騌銏椽壤呎荝涴覠抴璨壇奙欵灋豻參栐砻趒毝蕙鰸媶涆澦肝酼荦佟釐求誻釤浐鴭灹肉辟翰儫渌鑼穎审癥橒鵉癗馐厃侩鲜餜壌騕嬦赫獜硖鲜驮禵铕瀵朧犖旹靍鍮夂穆瓒湨頇懎紙訍彘翝钷驲荩滦涞駫抨垬鯴楚鲿狼軙秠牊丟煟佩升彅銲駀岊締鄔饝臖奆茖態窽啤鴇亦术釼餤钆鎅埰竉説將秅焖鷀啉岕籝耾掘腩禟亚珱婅鐔脵呶复蒋媅阻邫絩輊匈從鋚閱獻橧褕莫圌•快快快快快歼击机•斤斤计较就就• • •444444444444444• • • hhhjkjkj•斤斤计较就 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