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1、吸收放散吸收放散试验1精选ppt 吸收吸收吸收吸收试验试验（absorption testabsorption test） 抗原与抗体的抗原与抗体的抗原与抗体的抗原与抗体的结结合是特异性的，因此具有抗体活合是特异性的，因此具有抗体活合是特异性的，因此具有抗体活合是特异性的，因此具有抗体活性的血清加入相性的血清加入相性的血清加入相性的血清加入相应应抗原后，抗体的活性下降或消失，抗原后，抗体的活性下降或消失，抗原后，抗体的活性下降或消失，抗原后，抗体的活性下降或消失，这这种作用称种作用称种作用称种作用称为为吸收吸收吸收吸收试验试验 对对一未知抗体可以用已知抗原一未知抗体可以用已知抗原一未知抗体可以
2、用已知抗原一未知抗体可以用已知抗原进进行吸收，吸收后行吸收，吸收后行吸收，吸收后行吸收，吸收后抗体活性下降或消失，抗体活性下降或消失，抗体活性下降或消失，抗体活性下降或消失，说说明未知抗体中含有与已知抗明未知抗体中含有与已知抗明未知抗体中含有与已知抗明未知抗体中含有与已知抗原相原相原相原相对应对应的抗体。有的抗体。有的抗体。有的抗体。有时时被被被被检检血清中有多种抗体，可用血清中有多种抗体，可用血清中有多种抗体，可用血清中有多种抗体，可用已知抗原分已知抗原分已知抗原分已知抗原分别别吸收及吸收及吸收及吸收及鉴鉴定抗体的性定抗体的性定抗体的性定抗体的性质质 2精选ppt 放散放散试验原理原理 抗原
3、与抗体的抗原与抗体的结合是可逆的。在物理条件合是可逆的。在物理条件 改改变时，抗体又会从抗原抗体复合物上分离下，抗体又会从抗原抗体复合物上分离下 来，将抗体由抗原抗体复合物上分离下来的来，将抗体由抗原抗体复合物上分离下来的试 验称称为放散放散试验 3精选ppt4精选ppt 吸收吸收试验的方法的方法冷吸收冷吸收冷吸收冷吸收 一份一份一份一份盐盐水洗水洗水洗水洗涤涤的已知抗原的的已知抗原的的已知抗原的的已知抗原的压积红细压积红细胞胞胞胞 加一份被加一份被加一份被加一份被检检血清，混匀后置血清，混匀后置血清，混匀后置血清，混匀后置 4 4 冰箱吸冰箱吸冰箱吸冰箱吸 收收收收1212小小小小时时 （A
4、BOABO、MNMN、P P系系系系统统等）等）等）等）热热吸收吸收吸收吸收 混匀后置混匀后置混匀后置混匀后置3737水浴箱中吸收（水浴箱中吸收（水浴箱中吸收（水浴箱中吸收（RhRh系系系系统统等）等）等）等） 吸收吸收吸收吸收试验试验可区可区可区可区别别真假凝集：真凝集真假凝集：真凝集真假凝集：真凝集真假凝集：真凝集经经吸收后吸收后吸收后吸收后凝集减弱或呈阴性；假凝集凝集减弱或呈阴性；假凝集凝集减弱或呈阴性；假凝集凝集减弱或呈阴性；假凝集经经吸收后凝集不吸收后凝集不吸收后凝集不吸收后凝集不变变5精选ppt 放散放散试验放散液放散液 用放散用放散试验 技技术将大量附着于将大量附着于红细胞上的胞
5、上的抗体放散到小量的生理抗体放散到小量的生理盐水中，水中，这种含有抗体种含有抗体的溶液称的溶液称为放散液放散液 放散液中的抗体具有特异性，可以与相放散液中的抗体具有特异性，可以与相应抗原抗原结合，从而可以合，从而可以进一步确定抗体的特异性。一步确定抗体的特异性。6精选ppt7精选ppt8精选ppt9精选ppt10精选ppt11精选ppt 热放散放散试验 主要主要应用用ABO 血型系血型系统新生儿溶血病及从新生儿溶血病及从红细胞上洗脱掉胞上洗脱掉IgM及及IgG抗体。此方法制抗体。此方法制备抗抗体最容易，但抗体回收体最容易，但抗体回收较差，即如果抗体差，即如果抗体较弱，弱，放散放散试验可得到假阴
6、性的可得到假阴性的结果。果。 其其优点是适用于一般化点是适用于一般化验室，缺点是放散室，缺点是放散液中含有液中含有较多游离白蛋白。多游离白蛋白。12精选ppt热放散放散试验方法方法n n将疑有抗体包被的将疑有抗体包被的红细胞用生理胞用生理盐水洗水洗涤3 3-4-4次，最后一次尽量次，最后一次尽量压积红细胞和吸取胞和吸取红细胞上胞上层的生理的生理盐水。水。n n在在压积红细胞中加等量生理胞中加等量生理盐水（也可用水（也可用ABAB血血清或清或6%6%白蛋白），置白蛋白），置 56 56水浴箱中水浴箱中7878分分钟，期期间摇动数次。数次。n n取出后立即高速离心，取出后立即高速离心，3 3000
7、 000 转/ /分分2 2分分钟；取；取上清液（上清液（樱红色的上清液即色的上清液即为放散液），与已放散液），与已知知红细胞胞试验。按不同。按不同试验要求做要求做试验，将放，将放散液作散液作为抗体使用。抗体使用。13精选ppt14精选ppt热放散放散试验注意事注意事项鉴鉴定放散液定放散液定放散液定放散液应应与原抗原抗体反与原抗原抗体反与原抗原抗体反与原抗原抗体反应应方法相同，如抗体方法相同，如抗体方法相同，如抗体方法相同，如抗体较较弱，可用弱，可用弱，可用弱，可用酶处酶处理理理理红细红细胞做胞做胞做胞做试验试验放散液用生理放散液用生理放散液用生理放散液用生理盐盐水制水制水制水制备备不不不不稳
8、稳定，若要保存放散液，定，若要保存放散液，定，若要保存放散液，定，若要保存放散液，用用用用ABAB血清血清血清血清进进行放散行放散行放散行放散受受受受检检血清与吸收用血清与吸收用血清与吸收用血清与吸收用红细红细胞比例要高一些，若抗体弱，胞比例要高一些，若抗体弱，胞比例要高一些，若抗体弱，胞比例要高一些，若抗体弱，可以充分与可以充分与可以充分与可以充分与红细红细胞胞胞胞结结合合合合加加加加热热放散温度要准确，如温度降低，放散出的抗体放散温度要准确，如温度降低，放散出的抗体放散温度要准确，如温度降低，放散出的抗体放散温度要准确，如温度降低，放散出的抗体又回重新与抗原又回重新与抗原又回重新与抗原又回
9、重新与抗原结结合合合合放散抗体放散抗体放散抗体放散抗体时时，应应不断不断不断不断摇动摇动，促使抗体从抗原抗体复，促使抗体从抗原抗体复，促使抗体从抗原抗体复，促使抗体从抗原抗体复合物上分离下来合物上分离下来合物上分离下来合物上分离下来15精选ppt乙乙醚放散放散试验 主要主要应用于温自身抗体（用于温自身抗体（IgG）或同种抗体或同种抗体引起的直抗阳性，以及用于分离引起的直抗阳性，以及用于分离IgG抗体混合物抗体混合物 其最大其最大优点是适用于点是适用于检查获得性溶血性得性溶血性贫血，血，鉴定定Rh抗体效果最好，不宜用于抗体效果最好，不宜用于 ABO 抗抗体体鉴定定16精选ppt 乙乙醚放散放散试
10、验方法方法取取取取经经洗洗洗洗涤涤3 3次的受次的受次的受次的受检压积红细检压积红细胞胞胞胞1 1份加份加份加份加1 1份生理份生理份生理份生理盐盐水，水，水，水， 2 2份乙份乙份乙份乙醚醚，用木塞盖，用木塞盖，用木塞盖，用木塞盖紧紧，颠颠倒倒倒倒试试管，用力振管，用力振管，用力振管，用力振摇摇1 1 2 2分分分分钟钟，然后以然后以然后以然后以30003000转转/ /分离心分离心分离心分离心5 5分分分分钟钟 离心后分成离心后分成离心后分成离心后分成3 3层层，上，上，上，上层层是乙是乙是乙是乙醚醚，中，中，中，中层层是是是是红细红细胞基胞基胞基胞基质质，下，下，下，下层层是具有抗体的放
11、散液（是具有抗体的放散液（是具有抗体的放散液（是具有抗体的放散液（为樱红为樱红色或深色或深色或深色或深红红色）色）色）色） 用吸管插入用吸管插入用吸管插入用吸管插入试试管底部吸出放散液，若有管底部吸出放散液，若有管底部吸出放散液，若有管底部吸出放散液，若有浑浊浑浊可重新离可重新离可重新离可重新离心心心心1 1次次次次 将放散液置将放散液置将放散液置将放散液置3737水浴水浴水浴水浴1010分分分分钟钟，除尽乙，除尽乙，除尽乙，除尽乙醚醚，然后与一，然后与一，然后与一，然后与一组组谱红细谱红细胞做胞做胞做胞做间间接抗球蛋白接抗球蛋白接抗球蛋白接抗球蛋白试验试验，以，以，以，以鉴鉴定抗体特异性定抗
12、体特异性定抗体特异性定抗体特异性17精选ppt18精选ppt酸放散酸放散19精选ppt放散放散试验的的应用用鉴定新生儿溶血病患儿定新生儿溶血病患儿红细胞上的抗体胞上的抗体在溶血性在溶血性贫血和可疑血和可疑输血反血反应中，用来中，用来鉴定定产生直抗阳性的生直抗阳性的红细胞胞制制备少量的少量的单特异性抗体特异性抗体从病人从病人红细胞上去除抗体，制胞上去除抗体，制备可用于可用于自身吸收或自身吸收或鉴定血型及交叉配血次定血型及交叉配血次测试验中使用的中使用的红细胞胞20精选ppt21精选ppt感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络，感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络，如有侵权请及时联系我们删除，谢谢配合！如有侵权请及时联系我们删除，谢谢配合！
