第六章植物器官培养

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1、9/3/20241第六章第六章 植物器官培养植物器官培养第一节第一节 概述概述 第二节第二节 营养器官培养营养器官培养第三节第三节 繁殖器官培养繁殖器官培养 无慕轮搐阔巫涎袍朗胞带宙烙淋镐冯凡岸碍越火汗摆蝉俗巧备溜碎曾低锈第六章植物器官培养第六章植物器官培养9/3/20242植物器官培养（植物器官培养（Organ Culture）是指对植物某一器官是指对植物某一器官的全部、部分或器官原基进行离体培养的技术。分为的全部、部分或器官原基进行离体培养的技术。分为营养器官营养器官（根、茎、叶）和（根、茎、叶）和繁殖器官繁殖器官（胚胎、种子、（胚胎、种子、花器官）培养。花器官）培养。第一节第一节 概述概

2、述渣抠慕然陪使输剃掠哲磋矽伪哦裹额敝茎固磕志涌潜尔搏仑牟飘甘牙闻敝第六章植物器官培养第六章植物器官培养9/3/20243植植 物物 器器 官官 培培 养养营养器营养器官培养官培养繁殖器繁殖器官培养官培养根培养根培养茎培养（茎培养（ 包括茎尖、茎段）包括茎尖、茎段）叶培养（包括叶原基、叶柄、叶培养（包括叶原基、叶柄、 叶鞘、叶片、子叶）叶鞘、叶片、子叶）花培养花培养 （包括花托、花瓣、花丝、（包括花托、花瓣、花丝、 花柄、子房、花药）花柄、子房、花药）种子培养（包括成熟与未成熟）种子培养（包括成熟与未成熟）胚胎培养（包括幼胚、成熟胚、胚胎培养（包括幼胚、成熟胚、 胚珠、胚珠、 子房、胚乳培养子房

3、、胚乳培养 ）硼龚具啤抵熟铀咀柏东淖火按殃圈勺壕湘诈瞧扑聋蔫鸿彻桨给产排朝验咯第六章植物器官培养第六章植物器官培养第二节第二节 营养器官培养营养器官培养9/3/20244一、离体根的培养一、离体根的培养二、茎尖的培养二、茎尖的培养* *三、茎段的培养三、茎段的培养四、离体叶的培养四、离体叶的培养*诈耪授肾族僻盗椒炸寺掏纠猴吩笆齐裁叭广惩热肥魁写拆歌菠咎统活扩栽第六章植物器官培养第六章植物器官培养一、离体根的培养一、离体根的培养 （一）（一） 意义：意义： 生理代谢研究的优良实验体系生理代谢研究的优良实验体系 研究器官分化形态建成的良好体系研究器官分化形态建成的良好体系 建立快速生长的根无性系建

4、立快速生长的根无性系 进行诱变育种进行诱变育种9/3/20245歌伴荐岸状图击趾剥冒胳蹋滓耍篮惨能冠抓盈瑶像姬额梗猩孺记炳舞庚秀第六章植物器官培养第六章植物器官培养1. 1. 培养基选择培养基选择 White培养基；培养基；2/3或或1/2 MS 和和 B5培养基培养基 注：离体根生长要求提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效果注：离体根生长要求提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效果好，加入好，加入B1、B6最重要，生长素对离体根影响不一致。培最重要，生长素对离体根影响不一致。培养温度养温度2527，暗光培养。，暗光培养。9/3/20246（二）（二） 培养方法培养方法洞线寺畸纯蕉彬跳框吓萝躁碱讫画振阀

5、拴谎刁惋交扩勘吼玖飞挂箕今辖它第六章植物器官培养第六章植物器官培养2. 2. 无性繁殖系的建立无性繁殖系的建立 种种子子消消毒毒 接接种种待待根根伸伸长长后后从从根根尖尖一一端端切切取取长长1.2cm1.2cm的的根根尖尖接接种种于于培培养养基基发发育育出出侧侧根根待待侧侧根根生生长长约约1 1周周后后切切取取侧侧根根的的根根尖尖进进行行扩扩大大培培养养又又迅迅速速生生长长并并长长出出侧侧根根切切下下进进行行培培养养，如如此此反反复复得得到到从单个根尖衍生而来的离体根的无性系。从单个根尖衍生而来的离体根的无性系。 3. 培养条件培养条件 暗光和温度暗光和温度25-27。9/3/20247客阐盾

6、审亡受架镜疗躺呜淑驯霞痘瓷堵御比败赶群乌高森琅枪鸽屑叠牙趟第六章植物器官培养第六章植物器官培养9/3/20248二、茎尖的培养二、茎尖的培养* *（一）茎尖培养概念及类型（一）茎尖培养概念及类型（二）病毒在植物体内的分布（二）病毒在植物体内的分布（三）茎尖培养方法及步骤（三）茎尖培养方法及步骤卸铭腿罚卡腹制状汁剩忆氧氮垫弧畜习略岛沾帜淄柄亚荐扁枢签孔熊簧团第六章植物器官培养第六章植物器官培养 ( (一一) )茎尖培养概念及类型茎尖培养概念及类型 茎尖培养茎尖培养：切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分，进行：切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分，进行无菌培养。无菌培养。 茎尖培养根据培养目的和取材大

7、小可分为：茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为： 微茎尖培养微茎尖培养: : 带有带有1-21-2个叶原基的生长点个叶原基的生长点, , 其长度不超其长度不超过过 0.5mm 0.5mm。 9/3/20249焕蚂帐翅杆参屠页轰僚肢斧敲墩录砸少广芒麦新玫泉睛腾局奥涟德怪挥滚第六章植物器官培养第六章植物器官培养 普通茎尖培养：较大的茎尖普通茎尖培养：较大的茎尖( (如几如几mmmm到几十到几十mm)mm)、芽尖及侧、芽尖及侧芽。芽。 这里主要讲普通茎尖培养。这种培养技术简单，操作方便，这里主要讲普通茎尖培养。这种培养技术简单，操作方便，茎尖容易成活，成苗所需时间短茎尖容易成活，成苗所需时间短 。

8、茎尖培养的意义：茎尖培养的意义： 普通茎尖培养技术简单，操作方便，易成活，成苗普通茎尖培养技术简单，操作方便，易成活，成苗 时间短，加快繁殖。时间短，加快繁殖。 微茎尖培养可获得脱毒苗；微茎尖培养可获得脱毒苗；9/3/202410旁循疮谈乖瀑叁耐蔼佯樟幕锭乾霄腔底甩悍兆营剿巷怒谚撇棠殖闭证瀑铝第六章植物器官培养第六章植物器官培养重博拷老咆惰襟渤粤犀镇冈劳资涟尖烫挨黄破酷峦蛹莫展茶坊酮啃述践蹦第六章植物器官培养第六章植物器官培养v病毒侵染植株的叶片后，经过一段时间，即向附近的细胞增殖转移。转移速度很慢，每小时只有几微米。当叶片内病毒浓度增大到一定量时，就转移到韧皮部，随后通过维管束转移到其它部分

9、。由于病毒转移速度慢，加上茎尖分生组织无维管束，病毒只能通过胞间连丝传递，赶不上细胞分裂和生长的速度，所以生长点的病毒数量极少，几乎检测不出。茎尖培养时，切取的茎尖越小，带病毒的可能性就越小。茎尖脱毒的基本原理茎尖脱毒的基本原理 ( (二二) )病毒在植物体内的分布病毒在植物体内的分布禾彬尧孕吓凸挎尸拄牟痴纳迢书娃乘瑟溉恨锅秸朱磐梯延秩礼讳仲蝶井檄第六章植物器官培养第六章植物器官培养（三）茎尖培养方法及步骤（三）茎尖培养方法及步骤9/3/202413取取材材材材料料处处理理及及消消毒毒培培 养养接接种种驯驯化化移移栽栽只楼妓搁陡诛哀美氖海角歧任扁祸凹升眯鞠雅齐彼喇尔槽沫缴籽蹄另列梅第六章植物器

10、官培养第六章植物器官培养直接取材：在生长旺盛、枝直接取材：在生长旺盛、枝条健壮、无病的母株上选生条健壮、无病的母株上选生长不久、杂菌污染少的顶梢长不久、杂菌污染少的顶梢（1 12cm2cm）（取前可喷杀菌）（取前可喷杀菌药，可顶芽或侧芽）。药，可顶芽或侧芽）。从试管苗获取。从试管苗获取。9/3/2024141 1、 取材取材取取1-2顶梢顶梢灌筏讫郑润谜楷教姬赊矿执柞限薄证魂哥窄咯上乃质敦魁穆语夷烃臂房仲第六章植物器官培养第六章植物器官培养9/3/2024152 2、材料处理及消毒、材料处理及消毒 将采集到的茎尖切成将采集到的茎尖切成0.5-1.0cm0.5-1.0cm长长去叶（休眠去叶（休眠

11、芽预先剥除鳞片）芽预先剥除鳞片） 流水冲洗流水冲洗2-4h 752-4h 75的酒的酒精中处理精中处理30s 30s 稀释稀释2020倍的次氯酸钠中浸倍的次氯酸钠中浸5-8min(5-8min(取取自老枝条上的可适当延长时间）自老枝条上的可适当延长时间）用无菌水冲洗数次，用无菌水冲洗数次，准备接种。准备接种。陨贺载谋擞棒拘乖铣户馁短诊柄抽涌啮叛分岁驴肆宣按托瑶宾尘混施浦橱第六章植物器官培养第六章植物器官培养 3 3、接种、接种 接种前再剥掉一些叶片，使茎尖接种前再剥掉一些叶片，使茎尖0.5cm 0.5cm 接种接种 要求：随切随接，动作迅速。要求：随切随接，动作迅速。 亦可将切下茎尖材亦可将切

12、下茎尖材 料在料在1 15% V5% VC C液中浸一下。液中浸一下。9/3/202416赦舅皱镜畔潜枕甥蓄缸挣悔械鼓载铬硅爽钦耿第略槛刻躲烘拘足黎设命鉴第六章植物器官培养第六章植物器官培养4 4、培养的方法和程序、培养的方法和程序（1）培养基）培养基 基本培养基基本培养基 MS、White、 B5、 Heller培养基。培养基。 蔗糖作碳源效果好，浓度蔗糖作碳源效果好，浓度23%。 激素（激素（ 2，4-D，IAA， NAA ）和有机添加物有明显影）和有机添加物有明显影响。但激素浓度以响。但激素浓度以0.1mg/L为宜，不要太高。为宜，不要太高。9/3/202417衡瞻囱竟浅辆铃剪嘘复嘉沛晰

13、田酝虐家悔状捷舰弹策坚络这潍汝洞堪幸浆第六章植物器官培养第六章植物器官培养生长太慢：生长太慢：茎尖不增大茎尖不增大变绿变绿细胞逐渐老化细胞逐渐老化休眠休眠 原因原因: 生长素浓度太低；温度过低或过高；生长素浓度太低；温度过低或过高；生长太快：生长太快：茎尖迅速增大茎尖迅速增大愈伤组织愈伤组织丧失成苗能力丧失成苗能力 原因原因: 生长素浓度过高；光照太弱或温度太高；生长素浓度过高；光照太弱或温度太高； 生长正常：生长正常：茎尖基部稍增大并形成少量愈伤组织，茎尖颜色茎尖基部稍增大并形成少量愈伤组织，茎尖颜色 逐渐变绿，并伸长，叶原基发育成可见的小叶，逐渐变绿，并伸长，叶原基发育成可见的小叶， 进而

14、形成小苗。进而形成小苗。9/3/202418茎尖生长状态茎尖生长状态屎蚌菱再林揖脚湿散勘蓬莱韵麻驯秧耍藐势硅牙翰菇灵偶年弹丘翼柞巩魏第六章植物器官培养第六章植物器官培养（2 2）初代培养条件）初代培养条件 每天每天 光照光照16h16h， 光强度光强度1500-30001x1500-30001x， 温度温度252522 9/3/202419挺煽郁练宪境贫众侧褂搔室凛燥兰泥掐虏诗愚鸦靶信惠夷又远揉揩痈众盐第六章植物器官培养第六章植物器官培养（3 3） 继代培养继代培养 茎尖长成的新梢茎尖长成的新梢切成小段切成小段增殖培养基中增殖培养基中 1个月左右个月左右新梢又可切成小段新梢又可切成小段再转入新

15、培养基再转入新培养基建立和维持了茎尖无性系。建立和维持了茎尖无性系。 （即微型扦插）即微型扦插） 继代培养可用继代培养可用MS培养基。培养基。9/3/202420脆勺伍争献嗣舶胎净驻岿卫娟险管硕卵凯吴药龙侠殴榷匡俞呻潮越羹峙摊第六章植物器官培养第六章植物器官培养 （4 4） 诱导生根诱导生根 采用采用12MS培养基培养基 加入一定的生长素类调节物质，如加入一定的生长素类调节物质，如NAA、IBA等。等。新梢基部浸入新梢基部浸入50或或100mg/l的的IBA溶液处理溶液处理4-8h，然后转移到无激素的生根培养基中。然后转移到无激素的生根培养基中。9/3/202421酝杂县歼吏人渡汐吨镀牺沁链故

16、皿触冠璃僵岭糯荤份巴莫哑附丽腋粗抉兑第六章植物器官培养第六章植物器官培养(5) (5) 驯化移栽入土驯化移栽入土 在生根培养在生根培养1 1个月左右个月左右生长健壮而发达的根系生长健壮而发达的根系炼苗炼苗移栽移栽 管理（温、光、湿、气）管理（温、光、湿、气）9/3/202422握冈板围茨以恬玛哥掌变样敢藩罪拎辩踪撂玛介伙榴发峡沮蚤氓毯轿胚撤第六章植物器官培养第六章植物器官培养 指不带芽和带一个以上定芽或不定芽（包括块茎、球茎指不带芽和带一个以上定芽或不定芽（包括块茎、球茎在内）的幼茎切段的无菌培养。在内）的幼茎切段的无菌培养。 9/3/202423三、茎段培养三、茎段培养粘您羽芥话埠痢穆急嫁念

17、喂壶园叠惯摔佣痉爹舟借痰蠕锡堵缴态练塌詹燃第六章植物器官培养第六章植物器官培养 （一）定义：（一）定义： 离体叶培养指包括叶原基、叶柄、离体叶培养指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶在内的叶组织叶鞘、叶片、子叶在内的叶组织的无菌培养。的无菌培养。 它大多经脱分化形成愈伤组织，它大多经脱分化形成愈伤组织，再由愈伤组织分化出茎和根。再由愈伤组织分化出茎和根。 其中叶片培养是一个典型的代表。其中叶片培养是一个典型的代表。 9/3/202424四、离体叶的培养四、离体叶的培养* *云瞧椿皑蹦唆谩皮汲喇阳脊艰汐瞥半挨呀纱俏专键皖墒宿涉咸拢晨趁悯硼第六章植物器官培养第六章植物器官培养（二）意义：（二）意义

18、： 1.1.是繁殖稀有名贵品种的有效手段；是繁殖稀有名贵品种的有效手段； 2. 2.可用于研究形态建成、光合作用、叶绿素形成等可用于研究形态建成、光合作用、叶绿素形成等理论问题。理论问题。9/3/202425眶邮陡阔趋剁橇奈戳栗乒霸琼妇炊拽铺丘詹簧挂凋汇伶匈巩密猾永伊暴琢第六章植物器官培养第六章植物器官培养（三）叶片的离体培养方法（三）叶片的离体培养方法 发育方式：叶片培养再生成完整植株有两种方式：发育方式：叶片培养再生成完整植株有两种方式： 是直接诱导形成芽和根是直接诱导形成芽和根完整植株；完整植株； 是先诱导形成愈伤组织，再经愈伤组织分化形成芽和根是先诱导形成愈伤组织，再经愈伤组织分化形成

19、芽和根完整植株。完整植株。 其中，以第二种方式最为常见。其中，以第二种方式最为常见。9/3/202426冤帆瓦砒昌嗓串候就靡醉洒肺舟进刊抨沾睦桩簿参锥租楚子翘睛煤蘸索犬第六章植物器官培养第六章植物器官培养叶片离体培养发育方式（成苗途径）叶片离体培养发育方式（成苗途径）9/3/202427叶原基叶原基叶鞘叶鞘叶片叶片子叶子叶叶柄叶柄愈愈伤伤组组织织芽芽和和根根试试管管苗苗 不定芽不定芽窍睦伐兢昧箩汐狰枚爬诛屁吏谭厘庐眺游娃牛声掣邹耗浸咸亢疯丈站将社第六章植物器官培养第六章植物器官培养 1. 1. 材料选择及灭菌材料选择及灭菌 取植物的幼嫩叶片，切割成适当大小（取植物的幼嫩叶片，切割成适当大小（2

20、 23cm3cm），），在流水中冲洗干净。再用在流水中冲洗干净。再用7070酒精浸泡约酒精浸泡约10s 10s 饱和漂白粉液中浸饱和漂白粉液中浸3-15min3-15min，或在，或在0.10.1升汞中浸升汞中浸3-3-5min 5min 无菌水冲洗数次无菌水冲洗数次无菌的干滤纸上吸干无菌的干滤纸上吸干水分水分接种。接种。 注：细嫩与成熟叶片消毒时间不同注：细嫩与成熟叶片消毒时间不同9/3/202428涌最柑凤搜刷徒充壤云铸紊铜啪潭艘剂具唐厄轩悟潜拜酱塔范霄圃旦泽刺第六章植物器官培养第六章植物器官培养2.2.接种接种 外植体大小：外植体大小：0.5cm0.5cm2 2 薄片（叶柄、子叶）薄片（

21、叶柄、子叶）上表皮朝上接种培养基。最好带叶脉，注意极性上表皮朝上接种培养基。最好带叶脉，注意极性9/3/202429邪唐杖暗乏洽铬艺歹盅裴建潘窗骇征薪比纶锁诽协申诉酥郑再窄眼蚁拣肢第六章植物器官培养第六章植物器官培养3.3.培养培养 （1）培养基：）培养基： MS、B5、White 、N6；蔗糖；蔗糖3%； 2.4D利于愈伤组织形成，利于愈伤组织形成，NAA抑制芽形成，利于根发生，抑制芽形成，利于根发生，KT、6-BA利于芽形成。利于芽形成。 愈伤组织诱导：愈伤组织诱导：BA 1-3mg/L,NAA 0.25-1mg/L； 分化培养：分化培养：CTK 2 mg/L； 生根培养：生根培养：NAA

22、 0.51.0 mg/L 9/3/202430脆孵疑承袱姬页麻褪骡戴暗决邱未嚷你苞请泄锰序或很订腕竟俺墅霹讯威第六章植物器官培养第六章植物器官培养(2)(2)培养过程：培养过程： 培养约培养约2周至周至4周周形成愈伤组织形成愈伤组织再分化培养基上再分化培养基上（附加（附加6-BA 2mgL ）进行分化培养）进行分化培养约约10d左右，左右，愈伤组织开始转绿出现绿色芽点愈伤组织开始转绿出现绿色芽点发育成无根苗发育成无根苗生根培养基（附加生根培养基（附加 NAA0.5-l mg/L ） 发育形成完整发育形成完整植株。植株。9/3/202431历瓢废氟鹊杠钞招墅诉骆锥祟慧后拦皖晾缉拎噪汞材逞保霍僻培

23、志寐刚绥第六章植物器官培养第六章植物器官培养(3)培养条件：培养条件： 温度：温度：252 光照时间：光照时间：10-12h， 光照强度：光照强度：1500-3000 Lx 。9/3/202432喧院速分摹芜蔑肪烷欠茄剔婚峻醛侣葱将骂猩唁坑俭樊蛋缮炙都构左钩秩第六章植物器官培养第六章植物器官培养 叶的培养比胚，茎尖和茎段培养难度大。叶的培养比胚，茎尖和茎段培养难度大。 首先要选用易培养成功的叶组织，如幼叶比成熟叶易首先要选用易培养成功的叶组织，如幼叶比成熟叶易培养，子叶比叶片易培养。培养，子叶比叶片易培养。 其次要添加适当的生长素和细胞分裂素，保证利于叶其次要添加适当的生长素和细胞分裂素，保证

24、利于叶组织的脱分化和再分化。组织的脱分化和再分化。 9/3/202433牌掐莽氧织荔蛋狡堑沂陇哭溅业阳粉嘻蚌疾师煎庙被定再剑窖中磅噬奋肠第六章植物器官培养第六章植物器官培养第三节第三节 生殖器官的培养生殖器官的培养9/3/202434一、花器官的培养一、花器官的培养二、种子的培养二、种子的培养三、胚胎的培养三、胚胎的培养*诅当渡撑旗垫谱骚噪欢暖环跋尤哦裔嗜逊饵韵您乱康质鹤那金念敏哆呸伊第六章植物器官培养第六章植物器官培养9/3/202435一、花器官的培养一、花器官的培养帐钞湍曾异套碎殃潘耳烫眷英喂细烛船曲淀唆守庞爹典迸胆聂晌澈瑰赊帝第六章植物器官培养第六章植物器官培养1. 1. 定义：定义：

25、 花器官培养指整个花器及其花器官培养指整个花器及其组成部分如花托、花瓣、花组成部分如花托、花瓣、花丝、花柄、子房、花药等的丝、花柄、子房、花药等的无菌培养。无菌培养。 9/3/202436一、花器官的培养（花蕾）一、花器官的培养（花蕾）佯弥孵慑喂猾枕竖婴骨呆镜茅因泣孩脉嘶略漠推挤纫坪燃沿厘您霉唱标蛾第六章植物器官培养第六章植物器官培养2 2、意义：、意义： 通过离体花芽培养可了解整体植物和内源激素在花芽性别通过离体花芽培养可了解整体植物和内源激素在花芽性别决定中所起的作用决定中所起的作用 可以了解花器各部分对果实和种子发育的作用可以了解花器各部分对果实和种子发育的作用 内、外源激素在果实种子发

26、育过程中的调控作用内、外源激素在果实种子发育过程中的调控作用 生产上也可用于珍贵品种的扩大繁殖。生产上也可用于珍贵品种的扩大繁殖。9/3/202437昂盛蹬美末叔偏鳃咆汉颠清厘铣氯贷褂估佑荡行忱查磕十扑孽衫索绕燃药第六章植物器官培养第六章植物器官培养9/3/202438二、种子培养二、种子培养邹模液猖隶萝歉受饺啪肄量遇竖早妊绳久郝哪仓资粒稳糊膊驼箍贡迭痊测第六章植物器官培养第六章植物器官培养9/3/2024391.1.定义：定义： 种子培养是指受种子培养是指受精后发育完全的精后发育完全的成熟种子和发育成熟种子和发育不完全的未成熟不完全的未成熟种子的无菌培养。种子的无菌培养。龙渍咏君园够数域捣所

27、巳唯危穿赣晰募拔鞍批骚鹤见屎缓心拉埃拂羊饭文第六章植物器官培养第六章植物器官培养2. 2. 意义意义 ：可以打破种子休眠，可以打破种子休眠，促进萌发；促进萌发； 通过胚胎拯救解决远缘杂种通过胚胎拯救解决远缘杂种败育性，产生后代；败育性，产生后代；快速繁殖苗木快速繁殖苗木 优点：植株分化容易，优点：植株分化容易，无菌操作方便无菌操作方便9/3/202440兰温制妖替价挡坞攫轩棠琶箕吉睫蚊减贰肪剪琉枢信摇顶睦马盛吻阐虫丧第六章植物器官培养第六章植物器官培养 定义：定义：植物胚胎培养是指对植物的胚植物胚胎培养是指对植物的胚( (幼胚、成熟胚幼胚、成熟胚) )、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成

28、完整植株子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成完整植株的技术。的技术。9/3/202441三、胚胎的培养三、胚胎的培养*柱几拌去碰捏恬捧唇占凳韵拱龟沽镶粉腆槽捌镣显茧荐野央下砸鳖梆念铣第六章植物器官培养第六章植物器官培养胚胎培养已有近百年的历史：胚胎培养已有近百年的历史：19041904年的年的HaningHaning最早成功地培养了萝卜和辣椒的胚，最早成功地培养了萝卜和辣椒的胚，并萌发形成小苗。并萌发形成小苗。3030年代年代 成功地把兰科植物的胚培养成小植株。成功地把兰科植物的胚培养成小植株。4040年代在苹果、桃、柑桔、梨、葡萄、山楂、马铃薯、年代在苹果、桃、柑桔、梨、葡萄、山楂、马铃

29、薯、甘蓝与大白菜的种间杂种的胚胎培养、胚乳培养甘蓝与大白菜的种间杂种的胚胎培养、胚乳培养及子房与胚珠培养均取得了不同程度的进展及子房与胚珠培养均取得了不同程度的进展9/3/202442错栓颠研辉燕事肥牙渊摹燥瘫迅前盂守廖捶纬嚼梅亩余勺装愉双责军炎原第六章植物器官培养第六章植物器官培养（一）胚胎培养的意义（一）胚胎培养的意义克服远缘杂种的不育性克服远缘杂种的不育性 ；使胚发育不全的植物获得后代；使胚发育不全的植物获得后代； 缩短育种年限缩短育种年限 ；研究与胚发育有关的内外因素。研究与胚发育有关的内外因素。9/3/202443实唉遭节清捅倪枷集取朵旺钥坪与捐烂萍割矽号潜中雀鸟枢瞩助忙蒂郸碗第六章

30、植物器官培养第六章植物器官培养（二）离体胚培养（二）离体胚培养 离体胚培养包括胚胎发生过程中不同发育期的胚，一离体胚培养包括胚胎发生过程中不同发育期的胚，一般可分为成熟胚和幼胚培养般可分为成熟胚和幼胚培养。9/3/202444君苇常晃泪伍凑啄叹廷瘁弦口携睡谐孰旋瓮断遣夯党样崇屿笺枢贩屯脯蟹第六章植物器官培养第六章植物器官培养1.1.成熟胚培养成熟胚培养 指子叶期后至发育完全的胚。指子叶期后至发育完全的胚。培养较易成功，在含有大量无机元素和糖的基本培养基上，培养较易成功，在含有大量无机元素和糖的基本培养基上，就能正常生长成幼苗。就能正常生长成幼苗。将成熟或未成熟种子用将成熟或未成熟种子用70酒精

31、进行几秒钟的表面消毒酒精进行几秒钟的表面消毒无菌水冲洗无菌水冲洗3-4次次无菌条件下进行解剖，取出胚并接种无菌条件下进行解剖，取出胚并接种在适当的培养基上培养。在适当的培养基上培养。9/3/202445艺纯威筛陡柳姥砍向厨骸御淡涎歪凰浚镭承珐齿搔烘亨以肆斌烛时港翻耐第六章植物器官培养第六章植物器官培养 培养基：培养基：White Tukey MS无机盐无机盐+糖糖(1-2%)+生长辅助物质生长辅助物质(激素、激素、AA、活性炭、维生素等活性炭、维生素等)9/3/202446铸排搓椿塔衍绢逝椰时左姥灿增贾欲幢郴敷僻燎圣崩酿庙围美陇牵街掖撰第六章植物器官培养第六章植物器官培养幼胚是指子叶期以前的幼

32、小胚。幼胚是指子叶期以前的幼小胚。由于幼胚培养在远缘杂交育种上有极大的利用价值，由于幼胚培养在远缘杂交育种上有极大的利用价值，其研究应用越来越深入广泛。其研究应用越来越深入广泛。幼胚培养技术：心形期胚或更早期的胚（长度仅幼胚培养技术：心形期胚或更早期的胚（长度仅0.10.10.2mm0.2mm）胚越小就越难培养胚越小就越难培养 , ,幼胚培养成功的有大麦、荠菜、幼胚培养成功的有大麦、荠菜、甘蔗、甜菜、胡萝卜等甘蔗、甜菜、胡萝卜等 9/3/202447 2. 2. 幼胚（未成熟胚）培养：幼胚（未成熟胚）培养：大谋团俘谱拓郝缅皑牢蓄藐苔贪讫傅琳瞻辛椽砷聂求系瀑烹舷己垮锣刷磷第六章植物器官培养第六章

33、植物器官培养（1 1）未成熟胚胎的培养有三种不同的发育）未成熟胚胎的培养有三种不同的发育方式：方式：a. a. 继续进行正常的胚胎发育，维持继续进行正常的胚胎发育，维持“胚性生长胚性生长”；b. b. 早熟萌发，即培养后迅速萌发成幼苗；早熟萌发，即培养后迅速萌发成幼苗；c. c. 胚在培养基中发生细胞增殖形成愈伤组织，并由此胚在培养基中发生细胞增殖形成愈伤组织，并由此再分化形成多个胚状体或芽原基。再分化形成多个胚状体或芽原基。 9/3/202448疽躲谰脏纸窑钾奉幌鳃寥柳灌烯疑磊进摩抬蟹舔形晒蛛泡莱牢碟捶骆彭杏第六章植物器官培养第六章植物器官培养（2 2）幼胚培养技术）幼胚培养技术幼胚培养的操

34、作方法与成熟胚培养方法基本相同。幼胚培养的操作方法与成熟胚培养方法基本相同。值得注意值得注意的是切取幼胚必须在高倍解剖镜下进行，的是切取幼胚必须在高倍解剖镜下进行，操作时要细心，尽量取出完整的胚。操作时要细心，尽量取出完整的胚。幼胚培养成功的关键，是提供幼胚所必需的营养幼胚培养成功的关键，是提供幼胚所必需的营养和环境条件。和环境条件。9/3/202449痈唐箔创嗣怪蛆积听贫倍葛险滞颧挑不扰普唐懦膜怪景胀霸鹤霓瘪妊奋勤第六章植物器官培养第六章植物器官培养 培养基培养基 幼胚对培养基要求较高，常用的培养基有幼胚对培养基要求较高，常用的培养基有TukeyTukey，NitchNitch、 MS MS

35、，B5B5培养基；培养基；9/3/202450通常存在的影响条件如下：通常存在的影响条件如下：事木锦腊函孙贪榷鸽女帛赏嚣姐执滚囚倔播肖瘪华舆阵鼓寄程菩踏牌其甫第六章植物器官培养第六章植物器官培养生长调节物质生长调节物质 不同植物的胚培养需要的生长物质不同。不同植物的胚培养需要的生长物质不同。如如IAAIAA可明显促进向日葵胚的生长；可明显促进向日葵胚的生长；IAAIAA，KtKt的共同作用可促进荠菜幼胚的生长；的共同作用可促进荠菜幼胚的生长；一般认为一般认为IAAIAA可使胚的长度增加；可使胚的长度增加；加入加入BABA可提高胚的生存机会；可提高胚的生存机会；9/3/202451贞癸湘栋中吵矣

36、谦疤轮责协津叮娜每啥东联承府镭久杀氯开很胆肢镊飘试第六章植物器官培养第六章植物器官培养天然提取物的作用天然提取物的作用 椰乳对胚培养有一定的促进作用（番茄胚在含有椰乳对胚培养有一定的促进作用（番茄胚在含有50%50%椰乳的培养基中可维持生长椰乳的培养基中可维持生长 ）一些瓜类的胚乳提取物能促进胚生长的能力。一些瓜类的胚乳提取物能促进胚生长的能力。 9/3/202452拌栖就琐菌捐恋嘻过譬蹦并畅悼前乍民期玄旋臀探荒社皆素侵妮擞苹悸即第六章植物器官培养第六章植物器官培养温光条件温光条件 对于大多数植物的胚来说，在对于大多数植物的胚来说，在25-3025-30为宜为宜 早熟果树如桃的种胚，必须经过一

37、定的低温春化阶段早熟果树如桃的种胚，必须经过一定的低温春化阶段才能正常萌发生长，而马铃薯胚以才能正常萌发生长，而马铃薯胚以2020为好。光照可为好。光照可以促进某些植物胚的转绿，利于胚芽生长，而黑暗则以促进某些植物胚的转绿，利于胚芽生长，而黑暗则利于胚根生长。因此以光暗交替培养较为有利利于胚根生长。因此以光暗交替培养较为有利。9/3/202453凹回莎捣坟皆书外疗抓昧明进院裂誓费积触巢浪例耕昨叙养抗锑下逛贵线第六章植物器官培养第六章植物器官培养其它条件其它条件 胚培养中除要求较高的蔗糖（胚培养中除要求较高的蔗糖（4.5%4.5%）浓度、高渗）浓度、高渗透压以外，还要求较高浓度的氨基酸及无机盐。

38、透压以外，还要求较高浓度的氨基酸及无机盐。 9/3/202454整经苗瞧浑桑招四铡仑隋昨腺锋夏找叔补丘力菏勺肉图鼠戏莱撞痔紧岂洒第六章植物器官培养第六章植物器官培养9/3/202455(三三)胚珠培养胚珠培养. .定义：定义：胚珠培养是将授粉的子房在无菌条件下解剖后，取胚胚珠培养是将授粉的子房在无菌条件下解剖后，取胚珠置于培养基培养的过程。有时也把胚珠连同胎座一珠置于培养基培养的过程。有时也把胚珠连同胎座一起取下来培养。起取下来培养。椰镜辽溪瞧椒慈吉吁厨肉刺万画挠钠雁臀佳讯赤省溢吃斗斑梧集蚌米缔扦第六章植物器官培养第六章植物器官培养9/3/202456柱头柱头花柱花柱子房子房花梗花梗花托花托花

39、组成花组成御榔隧厦瘪痒鲍三乡赘酿砂恐闷惫成驰戴结依罗洒哑歹嘉信丝摩挤矮侥疥第六章植物器官培养第六章植物器官培养9/3/202457胚囊胚囊卵细胞卵细胞株心株心珠珠 孔孔反足细胞反足细胞珠珠 被被胚珠胚珠极核极核 株柄株柄吻亚搬嫂虞畜广烬伦吃骡丸触全舒拽碱度沏榆忆膜妮汹预疏魂鸡狮贱骋喇第六章植物器官培养第六章植物器官培养9/3/2024582.2.意义：意义： 胚珠培养可以解决象兰科植物成熟胚较小不易培养的胚珠培养可以解决象兰科植物成熟胚较小不易培养的问题。问题。 另一方面在未受精的胚珠培养中，可诱发大孢子发另一方面在未受精的胚珠培养中，可诱发大孢子发育成单倍体，用于单倍体育种。育成单倍体，用于

40、单倍体育种。 涉魄碰羚颂随枫固过杠撤嫌莫屯砾趴宦块城猖洒差匙饮扬酞茧睬症允耳芥第六章植物器官培养第六章植物器官培养3.3.培养技术：培养技术： 从花中取出子房从花中取出子房 70%酒精消毒酒精消毒30秒秒 无菌水冲洗无菌水冲洗 5%次氯酸钠液中灭菌次氯酸钠液中灭菌10分钟分钟 无菌水冲洗数次无菌水冲洗数次 在无菌条件下进行解剖在无菌条件下进行解剖 取出胚珠取出胚珠 放在培养基上放在培养基上 培养培养 基本培养基：用基本培养基：用Nistch培养基培养基 MS、N6、B5等培养基也可采用等培养基也可采用 关键：选择胚的发育时期关键：选择胚的发育时期球形胚期的胚珠较易培养成功球形胚期的胚珠较易培养

41、成功 9/3/202459悦琉纪绢源卑耳瞒龟芍顾靶积楔嫩艳抢凿担擅卖帆昔埂讫改奸奶均爬始冀第六章植物器官培养第六章植物器官培养4.4.发育方式：发育方式：9/3/202460未受精胚珠未受精胚珠受精胚珠受精胚珠愈伤组织愈伤组织发育成种子发育成种子大孢子或卵分化为大孢子或卵分化为单倍体植株单倍体植株再生植株再生植株磕秋辨洗岛蠢呼推挽难浪届惺匠媒瘫求团计猪贰攻时肺樊邱戊御彪柏抠惋第六章植物器官培养第六章植物器官培养( (四四) )子房培养子房培养9/3/2024611.1.取材：取材： 开花前开花前1 15 5天摘下未授粉子房；天摘下未授粉子房； 或授粉后摘下子房。或授粉后摘下子房。2.2.灭菌：

42、灭菌： 材料处理材料处理( (禾谷类植物用禾谷类植物用70%70%酒精擦洗幼穗；双子酒精擦洗幼穗；双子叶植物花蕾用饱和漂白粉灭菌叶植物花蕾用饱和漂白粉灭菌1515分分) 70%) 70%浸浸3030秒秒 无菌水冲洗无菌水冲洗 0.1% 0.1%升汞升汞15152020分钟分钟 无无菌水冲洗菌水冲洗 无菌滤纸吸干。无菌滤纸吸干。器纹堵蠢雁记讣递厚袄甜狸诅狙磕蕾浩苗离硷惫哀挛顽拭接桥典凝滥柏仗第六章植物器官培养第六章植物器官培养3.3.接种：接种： 无菌条件下剥开幼花，夹出子房并接种于培养基（无菌条件下剥开幼花，夹出子房并接种于培养基（MS、N6等）。等）。4.4.培养：培养： 温度温度26,相对

43、湿度相对湿度50-60%，16h散射光。散射光。9/3/202462诲淀信顾虐际辛枷操尧濒绑洪股岿惺颊乡诀蘸掉浊翅影琐记网疗谈扭淀操第六章植物器官培养第六章植物器官培养 胚乳是由两个单倍的极核和一个单倍的精子结合而胚乳是由两个单倍的极核和一个单倍的精子结合而成的三倍体组织。成的三倍体组织。 由它可获得无子结实的三倍体植株，进而可将它由它可获得无子结实的三倍体植株，进而可将它加倍成六倍体植株。加倍成六倍体植株。9/3/202463( (五五) )胚乳的培养胚乳的培养今倒普诞守赢幼县莹屯扇膛蹬豹况悼衅撤栖黔伪彤被漠满鼎操著电床膜午第六章植物器官培养第六章植物器官培养 培养方法：培养方法： 1. 取

44、材与接种取材与接种 取授粉取授粉4-8d后的幼果后的幼果常规消毒常规消毒在无菌条在无菌条件下切开果实件下切开果实 取出种子取出种子 分离出胚乳分离出胚乳 接种接种 2. 培养基培养基: MS、White + 2，4-D（NAA0.5-2.0 ） + 6-BA0.1-1.0mg/L 9/3/202464抡轿谜备泌烫手今音缮围捍怜稠那儒俐宋眨甚增撬有鹤篮驾靠酌棘怖露艇第六章植物器官培养第六章植物器官培养3.3.培养培养 在在25-2725-27和黑暗条件或散射光下培养约和黑暗条件或散射光下培养约6-l0d6-l0d胚乳胚乳开始膨大开始膨大形成愈伤组织形成愈伤组织分化培养基上（分化培养基上（ 附加附加6-6-BA 0.5-3.0mg/LBA 0.5-3.0mg/L及少量的及少量的NAA NAA ）培养）培养 待愈伤组织待愈伤组织长出芽后，切下不定芽长出芽后，切下不定芽生根培养基生根培养基光下培养光下培养10-10-15d15d，切口处可长出白色的不定根。，切口处可长出白色的不定根。9/3/202465包侧玉责圭酿渺槛匝婪贷建敖奉志玲缎流伦陶咎垒挟有协龙严芝牲首栓峪第六章植物器官培养第六章植物器官培养