手足口标本采集手足口标本采集上送要求上送要求 病原学简介病原学简介实验室诊断方法实验室诊断方法标本采集标本采集标本上送标本上送 一、病原学特点一、病原学特点1、形态结构、形态结构 20面体立体对称面体立体对称 无包膜无包膜 单链单链RNA 2、分型、分型 柯萨奇病毒柯萨奇病毒 A A组组1616、、4 4、、5 5、、7 7、、9 9、、1010型型 B B组组2 2、、5 5型型 埃可病毒埃可病毒 肠道病毒肠道病毒7171型（型（EV71EV71）） EV71EV71和和CoxA16,CoxA16,在遗传学上同属人类肠道病毒在遗传学上同属人类肠道病毒A A组组 3、抵抗力、抵抗力 病毒在病毒在50℃℃可被迅速灭活，可被迅速灭活，在在4℃℃可存活可存活 1年，在外环境中可长期存活，尤其适合年，在外环境中可长期存活，尤其适合 在湿、热的环境下生存与传播；耐酸在湿、热的环境下生存与传播；耐酸,在在 PH3.5仍然稳定仍然稳定 75%酒精、酒精、5%来苏尔、乙醚无效来苏尔、乙醚无效 4、致病性、致病性 传染源：患者的粪便、唾传染源：患者的粪便、唾 液、咽部分泌物、液、咽部分泌物、 污染的食物、水泡内容物污染的食物、水泡内容物 多途径：粪多途径：粪—口途径、呼吸道、密切接触口途径、呼吸道、密切接触 口鼻内分泌物在发病后一周内最强口鼻内分泌物在发病后一周内最强 肠道排出病毒，时间可达肠道排出病毒，时间可达8—12周之久周之久 肠内感染、肠外症状肠内感染、肠外症状 二、实验室检测二、实验室检测 病毒分离：病毒分离：RD、、Hep-2 核酸检测：核酸检测：RT-PCR 血血 清清 学：学：IgM,IgG 三、标本采集三、标本采集 种类种类 咽拭子、粪便、疱疹液、脑脊液、咽拭子、粪便、疱疹液、脑脊液、 肛拭子、血清肛拭子、血清 采集方法采集方法 1.1.粪便粪便 发病发病7 7日内，一般采集日内，一般采集4 4——8 g8 g，， 不必加任何保护液。
不必加任何保护液 2.2.肛拭子肛拭子 如粪便标本不能采集，通常如粪便标本不能采集，通常 可用直肠拭子代替，采样后置可用直肠拭子代替，采样后置3ml3ml病毒采病毒采 样液中，阳性率大大降低样液中，阳性率大大降低 3.3.咽拭子咽拭子 患者发病内患者发病内3 3日内，咽后壁及两日内，咽后壁及两 侧扁桃体，病毒采样管侧扁桃体，病毒采样管 4.4.疱疹液疱疹液 选择有混浊疱疹，先进行皮肤消选择有混浊疱疹，先进行皮肤消 毒，然后用注射针头抽取疱疹液，拭子擦毒，然后用注射针头抽取疱疹液，拭子擦 取，置取，置3ml3ml病毒采样液中病毒采样液中 5 5．脑脊液．脑脊液 出现神经系统症状出现神经系统症状3 3日内，在无日内，在无 菌条件下采集菌条件下采集, ,置于消毒试管中，立即送检置于消毒试管中，立即送检 或冻存 6 6．血清．血清 急性期（发病急性期（发病0-50-5天），恢复天），恢复 期（发病期（发病14-2814-28天）天）, ,空腹、空腹、5m15m1，真空采，真空采 血管，在室温放置血管，在室温放置2 h2 h，待凝固后分离血清。
待凝固后分离血清 注意事项注意事项1.粪便：发病粪便：发病一周内一周内，量要足、密闭螺，量要足、密闭螺 旋盖容器内旋盖容器内2.咽拭子：发病咽拭子：发病3日内日内、有力度、不要触及、有力度、不要触及 舌头舌头3.疱疹液：皮肤消毒疱疹液：皮肤消毒4.血清：血清：双份，双份，血清析出后置血清析出后置2ml冻存管内冻存管内 上送，上送，勿溶血，勿溶血，急性期（发病急性期（发病0-50-5 天），恢复期（发病天），恢复期（发病14-2814-28天） 标本量：不可过少标本量：不可过少时时 间：间：送检要及时送检要及时粪便盒：螺旋盖粪便盒：螺旋盖标本的质量：失水、长霉标本的质量：失水、长霉新登记表：新登记表：普通、聚集或暴发、重症、死亡普通、聚集或暴发、重症、死亡两份表格：采样登记表（新），个案调查表两份表格：采样登记表（新），个案调查表血血 清：置清：置2ml冻存管内（螺旋盖），双份冻存管内（螺旋盖），双份 全血标本不能冷冻 标本标记：粪便盒上写地名、患者名标本标记：粪便盒上写地名、患者名字字 重症个案调查表：不合格，诊断依据重症个案调查表：不合格，诊断依据？重症临床表现，都应在调查表上体？重症临床表现，都应在调查表上体现出来。
现出来 要求聚集、暴发病例采集双份标本要求聚集、暴发病例采集双份标本 四、标本上送四、标本上送 核酸及病毒分离标本：核酸及病毒分离标本：应在应在4℃4℃条件下，条件下，1212小小时内运送实验室；未能时内运送实验室；未能1212小时内送至实验室小时内送至实验室的，应置的，应置-70℃-70℃或以下保存或以下保存 血清标本：双份、可在血清标本：双份、可在4 ℃4 ℃存放存放3 3天，天，-20 -20 ℃℃可长期保存可长期保存 采用ＷＨＯ提出的三级包装系统：第一层容器：装样品，要求防渗漏样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名和采集时间在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎第二层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可装多个第一层容器将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒处理第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒外面要粘贴B类传染性物质UN3373标记 第一层容器第二层容器第三层容器 谢谢 谢谢 。