免疫学原理与应用2课件

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1、第一第一节 海水海水鱼类及其他及其他动物的免疫概念物的免疫概念一、水一、水产动物免疫及其主要功能物免疫及其主要功能1 . 水水产动物免疫物免疫1免疫免疫ImmunisImmune, Immunity：指生物机体：指生物机体识别自身和异己物自身和异己物质，对自身物自身物质形成天然免疫耐受，形成天然免疫耐受，对异己物异己物质产生去除作用的一种生理反响生去除作用的一种生理反响. 简单说，免疫是机体，免疫是机体对病原病原产生抵抗力，生抵抗力，使其免受感染的使其免受感染的过程。程。正常：免疫正常：免疫对机体有利，可机体有利，可产生抗感染、生抗感染、抗抗肿瘤等瘤等维持机体生理平衡和持机体生理平衡和稳定的免

2、疫定的免疫保保护反响；反响；异常：免疫可异常：免疫可对机体造成机体造成伤害，如超敏反害，如超敏反响、自身免疫疾病和响、自身免疫疾病和肿瘤等。瘤等。 2水水产动物免疫学物免疫学Immunology：指研究水指研究水产养殖养殖动物免疫系物免疫系统的的组织结构构与生理功能的一与生理功能的一门新新兴学科。学科。Chapter 3. 免疫学原理在疾病免疫学原理在疾病诊断和防治中的断和防治中的应用用2. 2. 抗原与抗体的概念抗原与抗体的概念抗原与抗体的概念抗原与抗体的概念1) 1) 抗原：抗原：抗原：抗原： 但凡能够刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞，但凡能够刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞，但凡能够刺激机体

3、产生抗体和致敏淋巴细胞，但凡能够刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞，并能与之结合引起特异性免疫反响的物质，称为抗并能与之结合引起特异性免疫反响的物质，称为抗并能与之结合引起特异性免疫反响的物质，称为抗并能与之结合引起特异性免疫反响的物质，称为抗原。原。原。原。2) 2) 抗体：机体免疫活性细胞受抗原刺激后，在体液中抗体：机体免疫活性细胞受抗原刺激后，在体液中抗体：机体免疫活性细胞受抗原刺激后，在体液中抗体：机体免疫活性细胞受抗原刺激后，在体液中出现的由浆细胞产生的一类能与相应抗原发生特异出现的由浆细胞产生的一类能与相应抗原发生特异出现的由浆细胞产生的一类能与相应抗原发生特异出现的由浆细胞产生的一类

4、能与相应抗原发生特异性结合的球蛋白。性结合的球蛋白。性结合的球蛋白。性结合的球蛋白。简单说，抗体是一种免疫球蛋白简单说，抗体是一种免疫球蛋白简单说，抗体是一种免疫球蛋白简单说，抗体是一种免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)(Immunoglobulin, Ig)Chapter 2. 免疫学原理在疾病免疫学原理在疾病诊断和防治中的断和防治中的应用用3. 3. 免疫反响的功能免疫反响的功能免疫反响的功能免疫反响的功能1) 1) 免疫防御：为机体去除异己物质的一种免疫保护功免疫防御：为机体去除异己物质的一种免疫保护功免疫防御：为机体去除异己物质的一种免疫保护功免疫防御：为机体去除异己物

5、质的一种免疫保护功能。能。能。能。 正常：抗感染消灭病原生物、中和毒素正常：抗感染消灭病原生物、中和毒素正常：抗感染消灭病原生物、中和毒素正常：抗感染消灭病原生物、中和毒素 异常：异常：异常：异常： 过高变态反响过高变态反响过高变态反响过高变态反响( (超敏反响超敏反响超敏反响超敏反响) )；过低；过低；过低；过低免疫缺陷症免疫缺陷症免疫缺陷症免疫缺陷症变态反响：某些抗原或半抗原再次进入致敏机体，在变态反响：某些抗原或半抗原再次进入致敏机体，在变态反响：某些抗原或半抗原再次进入致敏机体，在变态反响：某些抗原或半抗原再次进入致敏机体，在体内引起特异性体液或细胞免疫反响，由此导致组体内引起特异性体

6、液或细胞免疫反响，由此导致组体内引起特异性体液或细胞免疫反响，由此导致组体内引起特异性体液或细胞免疫反响，由此导致组织损伤或生理功能紊乱。织损伤或生理功能紊乱。织损伤或生理功能紊乱。织损伤或生理功能紊乱。免疫缺陷症：指机体免疫系统由于先天性发育不良或免疫缺陷症：指机体免疫系统由于先天性发育不良或免疫缺陷症：指机体免疫系统由于先天性发育不良或免疫缺陷症：指机体免疫系统由于先天性发育不良或后天遭受损伤所致的免疫功能降低或缺乏的系统综后天遭受损伤所致的免疫功能降低或缺乏的系统综后天遭受损伤所致的免疫功能降低或缺乏的系统综后天遭受损伤所致的免疫功能降低或缺乏的系统综合症。合症。合症。合症。Chapte

7、r 2. 免疫学原理在疾病免疫学原理在疾病诊断和防治中的断和防治中的应用用2) 2) 免疫稳定：机体免疫系统维持内环境相对稳定的一种免疫稳定：机体免疫系统维持内环境相对稳定的一种免疫稳定：机体免疫系统维持内环境相对稳定的一种免疫稳定：机体免疫系统维持内环境相对稳定的一种生理功能。生理功能。生理功能。生理功能。 正常：消除体内衰老的和被破坏的细胞正常：消除体内衰老的和被破坏的细胞正常：消除体内衰老的和被破坏的细胞正常：消除体内衰老的和被破坏的细胞 异常：过高自身免疫病异常：过高自身免疫病异常：过高自身免疫病异常：过高自身免疫病自身免疫病：自身抗体或自身致敏淋巴细胞攻击自身靶自身免疫病：自身抗体或

8、自身致敏淋巴细胞攻击自身靶自身免疫病：自身抗体或自身致敏淋巴细胞攻击自身靶自身免疫病：自身抗体或自身致敏淋巴细胞攻击自身靶抗原细胞和组织，使其产生的病理性改变或功能障碍。抗原细胞和组织，使其产生的病理性改变或功能障碍。抗原细胞和组织，使其产生的病理性改变或功能障碍。抗原细胞和组织，使其产生的病理性改变或功能障碍。3) 3) 免疫监督：机体免疫系统识别、去除体内突变、畸形免疫监督：机体免疫系统识别、去除体内突变、畸形免疫监督：机体免疫系统识别、去除体内突变、畸形免疫监督：机体免疫系统识别、去除体内突变、畸形的细胞和病毒感染细胞的一种生理保护作用。的细胞和病毒感染细胞的一种生理保护作用。的细胞和病

9、毒感染细胞的一种生理保护作用。的细胞和病毒感染细胞的一种生理保护作用。 正常：正常：正常：正常： 识别和消除突变细胞识别和消除突变细胞识别和消除突变细胞识别和消除突变细胞 异常：异常：异常：异常： 过低易生恶性肿瘤、病毒持续感染。过低易生恶性肿瘤、病毒持续感染。过低易生恶性肿瘤、病毒持续感染。过低易生恶性肿瘤、病毒持续感染。免疫：水免疫：水产动物免疫的根本概念物免疫的根本概念 二、免二、免二、免二、免 疫疫疫疫 系系系系 统统统统 的的的的 组组组组 成成成成 中枢免疫器官：骨髓、胸腺、法氏囊禽类中枢免疫器官：骨髓、胸腺、法氏囊禽类中枢免疫器官：骨髓、胸腺、法氏囊禽类中枢免疫器官：骨髓、胸腺、

10、法氏囊禽类 免疫器官免疫器官免疫器官免疫器官 外周免疫器官：淋巴结、脾、黏膜相关的淋巴组外周免疫器官：淋巴结、脾、黏膜相关的淋巴组外周免疫器官：淋巴结、脾、黏膜相关的淋巴组外周免疫器官：淋巴结、脾、黏膜相关的淋巴组织织织织 造血干细胞造血干细胞造血干细胞造血干细胞 淋巴细胞：淋巴细胞：淋巴细胞：淋巴细胞：T T淋巴细胞、淋巴细胞、淋巴细胞、淋巴细胞、B B淋巴细胞、第三淋巴淋巴细胞、第三淋巴淋巴细胞、第三淋巴淋巴细胞、第三淋巴细胞群细胞群细胞群细胞群 自然杀伤细胞自然杀伤细胞自然杀伤细胞自然杀伤细胞(NK(NK细胞细胞细胞细胞) )、淋巴因子激活的杀伤、淋巴因子激活的杀伤、淋巴因子激活的杀伤、

11、淋巴因子激活的杀伤细胞细胞细胞细胞(LAK(LAK细胞细胞细胞细胞) )免疫免疫免疫免疫 免疫细胞免疫细胞免疫细胞免疫细胞 抗原提呈细胞：单核吞噬细胞、树突细胞、并抗原提呈细胞：单核吞噬细胞、树突细胞、并抗原提呈细胞：单核吞噬细胞、树突细胞、并抗原提呈细胞：单核吞噬细胞、树突细胞、并指细胞、指细胞、指细胞、指细胞、系统系统系统系统 朗罕细胞、朗罕细胞、朗罕细胞、朗罕细胞、B B细胞细胞细胞细胞 其他免疫细胞：中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜其他免疫细胞：中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜其他免疫细胞：中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜其他免疫细胞：中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒碱性粒碱性粒碱性粒 细胞、肥

12、大细胞、红细胞细胞、肥大细胞、红细胞细胞、肥大细胞、红细胞细胞、肥大细胞、红细胞 抗体抗体抗体抗体 免疫分子免疫分子免疫分子免疫分子 补体补体补体补体 细胞因子：淋巴因子和单核因子细胞因子：淋巴因子和单核因子细胞因子：淋巴因子和单核因子细胞因子：淋巴因子和单核因子一一一一 免疫器官免疫器官免疫器官免疫器官1 1、中枢免疫器官、中枢免疫器官、中枢免疫器官、中枢免疫器官1 1 骨髓骨髓骨髓骨髓(Bone marrow)(Bone marrow)样组织：鱼类无淋巴造血的骨髓，但在样组织：鱼类无淋巴造血的骨髓，但在样组织：鱼类无淋巴造血的骨髓，但在样组织：鱼类无淋巴造血的骨髓，但在软骨鱼的眶区和颅下区

13、存在淋巴组织或骨髓样组织，可形成软骨鱼的眶区和颅下区存在淋巴组织或骨髓样组织，可形成软骨鱼的眶区和颅下区存在淋巴组织或骨髓样组织，可形成软骨鱼的眶区和颅下区存在淋巴组织或骨髓样组织，可形成血细胞，具有与高等脊椎动物骨髓相似的结构与功能。血细胞，具有与高等脊椎动物骨髓相似的结构与功能。血细胞，具有与高等脊椎动物骨髓相似的结构与功能。血细胞，具有与高等脊椎动物骨髓相似的结构与功能。 真骨鱼的肾脏也属骨髓样组织，是重要的淋巴器官，具造真骨鱼的肾脏也属骨髓样组织，是重要的淋巴器官，具造真骨鱼的肾脏也属骨髓样组织，是重要的淋巴器官，具造真骨鱼的肾脏也属骨髓样组织，是重要的淋巴器官，具造血功能。它分为头肾

14、前肾和中肾后肾、体肾二局部。血功能。它分为头肾前肾和中肾后肾、体肾二局部。血功能。它分为头肾前肾和中肾后肾、体肾二局部。血功能。它分为头肾前肾和中肾后肾、体肾二局部。其中头肾失去排泄功能而成为免疫器官和造血组织，为鱼类其中头肾失去排泄功能而成为免疫器官和造血组织，为鱼类其中头肾失去排泄功能而成为免疫器官和造血组织，为鱼类其中头肾失去排泄功能而成为免疫器官和造血组织，为鱼类中第二个发育的免疫器官，免疫细胞的发源地中第二个发育的免疫器官，免疫细胞的发源地中第二个发育的免疫器官，免疫细胞的发源地中第二个发育的免疫器官，免疫细胞的发源地( (产生产生产生产生B B细胞和细胞和细胞和细胞和红细胞等，相当

15、于哺乳类骨髓红细胞等，相当于哺乳类骨髓红细胞等，相当于哺乳类骨髓红细胞等，相当于哺乳类骨髓) )；此外，受抗原刺激后，头；此外，受抗原刺激后，头；此外，受抗原刺激后，头；此外，受抗原刺激后，头肾增生并存在抗体产生细胞，说明其为鱼类重要的抗体产生肾增生并存在抗体产生细胞，说明其为鱼类重要的抗体产生肾增生并存在抗体产生细胞，说明其为鱼类重要的抗体产生肾增生并存在抗体产生细胞，说明其为鱼类重要的抗体产生器官器官器官器官( (相当于哺乳类的淋巴结相当于哺乳类的淋巴结相当于哺乳类的淋巴结相当于哺乳类的淋巴结) )。2 2 胸腺胸腺胸腺胸腺(Thymus)(Thymus)：真骨鱼类的胸腺位于？，它无皮质与

16、髓质：真骨鱼类的胸腺位于？，它无皮质与髓质：真骨鱼类的胸腺位于？，它无皮质与髓质：真骨鱼类的胸腺位于？，它无皮质与髓质的分界线，胸腺由结缔组织被膜环绕，实质由上皮细胞网组的分界线，胸腺由结缔组织被膜环绕，实质由上皮细胞网组的分界线，胸腺由结缔组织被膜环绕，实质由上皮细胞网组的分界线，胸腺由结缔组织被膜环绕，实质由上皮细胞网组成，在上皮细胞网中分布由淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细成，在上皮细胞网中分布由淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细成，在上皮细胞网中分布由淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细成，在上皮细胞网中分布由淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞和成熟的浆细胞等。鱼类的胸腺是胞和成熟的浆细胞等。鱼类的胸腺是胞

17、和成熟的浆细胞等。鱼类的胸腺是胞和成熟的浆细胞等。鱼类的胸腺是T T细胞分化成熟为具免细胞分化成熟为具免细胞分化成熟为具免细胞分化成熟为具免疫活性的疫活性的疫活性的疫活性的T T细胞的场所，细胞的场所，细胞的场所，细胞的场所，T T细胞移至外周免疫器官后，可接细胞移至外周免疫器官后，可接细胞移至外周免疫器官后，可接细胞移至外周免疫器官后，可接受抗原刺激增殖分化产生免疫效能。受抗原刺激增殖分化产生免疫效能。受抗原刺激增殖分化产生免疫效能。受抗原刺激增殖分化产生免疫效能。 鱼类胸腺的结构与功能随着季节和年龄的变化而变化。鱼类胸腺的结构与功能随着季节和年龄的变化而变化。鱼类胸腺的结构与功能随着季节和

18、年龄的变化而变化。鱼类胸腺的结构与功能随着季节和年龄的变化而变化。免疫：水免疫：水产动物免疫的根本概念物免疫的根本概念 2) 2) 脾的功能：脾的功能：脾的功能：脾的功能： a. a. 在胚胎期为造血干细胞增殖分化的场所，具有造血功能；在胚胎期为造血干细胞增殖分化的场所，具有造血功能；在胚胎期为造血干细胞增殖分化的场所，具有造血功能；在胚胎期为造血干细胞增殖分化的场所，具有造血功能； b. b. 是血液的滤过器，可以去除血中的病原微生物和自身衰老损伤的血细是血液的滤过器，可以去除血中的病原微生物和自身衰老损伤的血细是血液的滤过器，可以去除血中的病原微生物和自身衰老损伤的血细是血液的滤过器，可以

19、去除血中的病原微生物和自身衰老损伤的血细胞。胞。胞。胞。 c. c. 为为为为T T、B B细胞移居和接受抗原刺激后发生免疫应答、产生免疫效应等细胞移居和接受抗原刺激后发生免疫应答、产生免疫效应等细胞移居和接受抗原刺激后发生免疫应答、产生免疫效应等细胞移居和接受抗原刺激后发生免疫应答、产生免疫效应等重要场所。脾中的淋巴细胞重要场所。脾中的淋巴细胞重要场所。脾中的淋巴细胞重要场所。脾中的淋巴细胞60%60%为为为为B B淋巴细胞。淋巴细胞。淋巴细胞。淋巴细胞。B. B. 鱼类脾的结构与功能鱼类脾的结构与功能鱼类脾的结构与功能鱼类脾的结构与功能 a. a. 有颌类才有真正的脾，软骨鱼类脾较大，分化

20、为红髓和白髓，为造有颌类才有真正的脾，软骨鱼类脾较大，分化为红髓和白髓，为造有颌类才有真正的脾，软骨鱼类脾较大，分化为红髓和白髓，为造有颌类才有真正的脾，软骨鱼类脾较大，分化为红髓和白髓，为造血器官；硬骨鱼类无明显红髓和白髓分化，但同时有造血和免疫功能。血器官；硬骨鱼类无明显红髓和白髓分化，但同时有造血和免疫功能。血器官；硬骨鱼类无明显红髓和白髓分化，但同时有造血和免疫功能。血器官；硬骨鱼类无明显红髓和白髓分化，但同时有造血和免疫功能。 b. b. 与头肾相比，脾在体液免疫反响中处于相对次要的地位，其受抗原与头肾相比，脾在体液免疫反响中处于相对次要的地位，其受抗原与头肾相比，脾在体液免疫反响中

21、处于相对次要的地位，其受抗原与头肾相比，脾在体液免疫反响中处于相对次要的地位，其受抗原刺激后的增殖反响以弥散的方式发生在整个器官上。刺激后的增殖反响以弥散的方式发生在整个器官上。刺激后的增殖反响以弥散的方式发生在整个器官上。刺激后的增殖反响以弥散的方式发生在整个器官上。 c. c. 硬骨鱼类受免疫接种后，其脾、肾和肝等器官的黑色素巨噬细胞增多，硬骨鱼类受免疫接种后，其脾、肾和肝等器官的黑色素巨噬细胞增多，硬骨鱼类受免疫接种后，其脾、肾和肝等器官的黑色素巨噬细胞增多，硬骨鱼类受免疫接种后，其脾、肾和肝等器官的黑色素巨噬细胞增多，并与淋巴细胞和抗体生成细胞聚集在一起形成黑色素巨噬细胞中心，并与淋巴

22、细胞和抗体生成细胞聚集在一起形成黑色素巨噬细胞中心，并与淋巴细胞和抗体生成细胞聚集在一起形成黑色素巨噬细胞中心，并与淋巴细胞和抗体生成细胞聚集在一起形成黑色素巨噬细胞中心，它的作用有：参与体液免疫和炎症反响；对异物进行贮存、破坏和脱它的作用有：参与体液免疫和炎症反响；对异物进行贮存、破坏和脱它的作用有：参与体液免疫和炎症反响；对异物进行贮存、破坏和脱它的作用有：参与体液免疫和炎症反响；对异物进行贮存、破坏和脱毒；记忆细胞原发中心；保护组织免受自由基损伤。毒；记忆细胞原发中心；保护组织免受自由基损伤。毒；记忆细胞原发中心；保护组织免受自由基损伤。毒；记忆细胞原发中心；保护组织免受自由基损伤。免疫

23、：水免疫：水产动物免疫的根本概念物免疫的根本概念2 2粘膜淋巴组织粘膜淋巴组织粘膜淋巴组织粘膜淋巴组织(Mucosa Associated Lymphatic Tissue, (Mucosa Associated Lymphatic Tissue, MALT)MALT)： a. a. 鱼类皮肤、鳃和消化道等器官的上皮组织中存在的淋鱼类皮肤、鳃和消化道等器官的上皮组织中存在的淋鱼类皮肤、鳃和消化道等器官的上皮组织中存在的淋鱼类皮肤、鳃和消化道等器官的上皮组织中存在的淋巴细胞、巨噬细胞和各类粒细胞等都属于巴细胞、巨噬细胞和各类粒细胞等都属于巴细胞、巨噬细胞和各类粒细胞等都属于巴细胞、巨噬细胞和各类

24、粒细胞等都属于MALTMALT。当机。当机。当机。当机体受到抗原刺激后，巨噬细胞可对抗原进行处理和呈递，体受到抗原刺激后，巨噬细胞可对抗原进行处理和呈递，体受到抗原刺激后，巨噬细胞可对抗原进行处理和呈递，体受到抗原刺激后，巨噬细胞可对抗原进行处理和呈递，抗体分泌细胞抗体分泌细胞抗体分泌细胞抗体分泌细胞(Antibody secreting cell, ASC)(Antibody secreting cell, ASC)会分泌抗体，会分泌抗体，会分泌抗体，会分泌抗体，与粘液中的溶菌酶和补体等非特异性的保护组织一道组与粘液中的溶菌酶和补体等非特异性的保护组织一道组与粘液中的溶菌酶和补体等非特异性的

25、保护组织一道组与粘液中的溶菌酶和补体等非特异性的保护组织一道组成抵御病原感染的防线。成抵御病原感染的防线。成抵御病原感染的防线。成抵御病原感染的防线。 b. b. 鱼类鱼类鱼类鱼类MALTMALT相对于其系统免疫系统有一定自主性，在相对于其系统免疫系统有一定自主性，在相对于其系统免疫系统有一定自主性，在相对于其系统免疫系统有一定自主性，在其免疫接种方法选择和改进中有实际意义：口服免疫后，其免疫接种方法选择和改进中有实际意义：口服免疫后，其免疫接种方法选择和改进中有实际意义：口服免疫后，其免疫接种方法选择和改进中有实际意义：口服免疫后，头肾、血液和肠都出现头肾、血液和肠都出现头肾、血液和肠都出现

26、头肾、血液和肠都出现ASCASC，但鳃中和皮肤粘液中无；，但鳃中和皮肤粘液中无；，但鳃中和皮肤粘液中无；，但鳃中和皮肤粘液中无；肛门插管接种抗原后可诱导肠、皮肤粘液和胆汁中产生肛门插管接种抗原后可诱导肠、皮肤粘液和胆汁中产生肛门插管接种抗原后可诱导肠、皮肤粘液和胆汁中产生肛门插管接种抗原后可诱导肠、皮肤粘液和胆汁中产生特异性抗体，但血清中无；腹腔免疫特异性抗体，但血清中无；腹腔免疫特异性抗体，但血清中无；腹腔免疫特异性抗体，但血清中无；腹腔免疫4 4周后，头肾、血周后，头肾、血周后，头肾、血周后，头肾、血液和鳃中抗体分泌同时到达峰值，而肠只有到第液和鳃中抗体分泌同时到达峰值，而肠只有到第液和鳃

27、中抗体分泌同时到达峰值，而肠只有到第液和鳃中抗体分泌同时到达峰值，而肠只有到第7 7周才周才周才周才有显著反响；颗粒抗原浸泡免疫时，皮肤摄取能力远大有显著反响；颗粒抗原浸泡免疫时，皮肤摄取能力远大有显著反响；颗粒抗原浸泡免疫时，皮肤摄取能力远大有显著反响；颗粒抗原浸泡免疫时，皮肤摄取能力远大于鳃，因此，口腔和腹腔免疫可明显刺激系统免疫应答，于鳃，因此，口腔和腹腔免疫可明显刺激系统免疫应答，于鳃，因此，口腔和腹腔免疫可明显刺激系统免疫应答，于鳃，因此，口腔和腹腔免疫可明显刺激系统免疫应答，浸泡和肛门免疫更适宜于诱导粘膜免疫反响。浸泡和肛门免疫更适宜于诱导粘膜免疫反响。浸泡和肛门免疫更适宜于诱导粘

28、膜免疫反响。浸泡和肛门免疫更适宜于诱导粘膜免疫反响。 c. c. 教材中的肠道淋巴组织也属于教材中的肠道淋巴组织也属于教材中的肠道淋巴组织也属于教材中的肠道淋巴组织也属于MALTMALT的范畴。的范畴。的范畴。的范畴。免疫：水免疫：水产动物免疫的根本概念物免疫的根本概念二二二二 免疫细胞免疫细胞免疫细胞免疫细胞免疫细胞：泛指所有参与免疫应答或与免疫应答有关免疫细胞：泛指所有参与免疫应答或与免疫应答有关免疫细胞：泛指所有参与免疫应答或与免疫应答有关免疫细胞：泛指所有参与免疫应答或与免疫应答有关的细胞及其前体细胞，包括：淋巴细胞、单核吞噬的细胞及其前体细胞，包括：淋巴细胞、单核吞噬的细胞及其前体细

29、胞，包括：淋巴细胞、单核吞噬的细胞及其前体细胞，包括：淋巴细胞、单核吞噬细胞及其它抗原提呈细胞、粒细胞、红细胞和肥大细胞及其它抗原提呈细胞、粒细胞、红细胞和肥大细胞及其它抗原提呈细胞、粒细胞、红细胞和肥大细胞及其它抗原提呈细胞、粒细胞、红细胞和肥大细胞等。细胞等。细胞等。细胞等。 鱼类免疫细胞主要存在于免疫器官、组织以及血鱼类免疫细胞主要存在于免疫器官、组织以及血鱼类免疫细胞主要存在于免疫器官、组织以及血鱼类免疫细胞主要存在于免疫器官、组织以及血液和淋巴液中。液和淋巴液中。液和淋巴液中。液和淋巴液中。1 1。T T 淋巴细胞：它由一群功能不同的异质性淋巴细胞淋巴细胞：它由一群功能不同的异质性淋

30、巴细胞淋巴细胞：它由一群功能不同的异质性淋巴细胞淋巴细胞：它由一群功能不同的异质性淋巴细胞组成，在胸腺内分化成熟，为胸腺依赖性淋巴细胞组成，在胸腺内分化成熟，为胸腺依赖性淋巴细胞组成，在胸腺内分化成熟，为胸腺依赖性淋巴细胞组成，在胸腺内分化成熟，为胸腺依赖性淋巴细胞(Thymus dependent lymphocyte)(Thymus dependent lymphocyte)的简称。成熟的的简称。成熟的的简称。成熟的的简称。成熟的T T细细细细胞随血流分布于外周免疫器官，并通过血液与组织胞随血流分布于外周免疫器官，并通过血液与组织胞随血流分布于外周免疫器官，并通过血液与组织胞随血流分布于外

31、周免疫器官，并通过血液与组织间的淋巴细胞再循环游走于全身，执行其免疫功能。间的淋巴细胞再循环游走于全身，执行其免疫功能。间的淋巴细胞再循环游走于全身，执行其免疫功能。间的淋巴细胞再循环游走于全身，执行其免疫功能。其在外周血中所占淋巴细胞总数的其在外周血中所占淋巴细胞总数的其在外周血中所占淋巴细胞总数的其在外周血中所占淋巴细胞总数的6580%6580%。2 2。B B 淋巴细胞：在骨髓骨髓样组织中分化成熟，淋巴细胞：在骨髓骨髓样组织中分化成熟，淋巴细胞：在骨髓骨髓样组织中分化成熟，淋巴细胞：在骨髓骨髓样组织中分化成熟，称骨髓依赖淋巴细胞。成熟的称骨髓依赖淋巴细胞。成熟的称骨髓依赖淋巴细胞。成熟的

32、称骨髓依赖淋巴细胞。成熟的B B细胞随血流分布于细胞随血流分布于细胞随血流分布于细胞随血流分布于外周淋巴组织，主要功能为产生抗体，执行体液免外周淋巴组织，主要功能为产生抗体，执行体液免外周淋巴组织，主要功能为产生抗体，执行体液免外周淋巴组织，主要功能为产生抗体，执行体液免疫。外周血中占淋巴细胞总数的疫。外周血中占淋巴细胞总数的疫。外周血中占淋巴细胞总数的疫。外周血中占淋巴细胞总数的1015%1015%。免疫：水免疫：水产动物免疫的根本概念物免疫的根本概念3. NK3. NK细胞细胞细胞细胞 它为发现较晚的一群淋巴细胞，最主要功能为非特异性杀伤它为发现较晚的一群淋巴细胞，最主要功能为非特异性杀伤

33、它为发现较晚的一群淋巴细胞，最主要功能为非特异性杀伤它为发现较晚的一群淋巴细胞，最主要功能为非特异性杀伤靶细胞，对多种肿瘤细胞和病毒感染的细胞具较强杀伤作用。约靶细胞，对多种肿瘤细胞和病毒感染的细胞具较强杀伤作用。约靶细胞，对多种肿瘤细胞和病毒感染的细胞具较强杀伤作用。约靶细胞，对多种肿瘤细胞和病毒感染的细胞具较强杀伤作用。约占占占占510%510%。4. 4. 单核吞噬细胞单核吞噬细胞单核吞噬细胞单核吞噬细胞 它包括血液中的单核细胞它包括血液中的单核细胞它包括血液中的单核细胞它包括血液中的单核细胞Monocyte, MCMonocyte, MC和组织中的巨噬和组织中的巨噬和组织中的巨噬和组织

34、中的巨噬细胞。它不仅在非特异性免疫中发挥重要作用，在特异性免疫中细胞。它不仅在非特异性免疫中发挥重要作用，在特异性免疫中细胞。它不仅在非特异性免疫中发挥重要作用，在特异性免疫中细胞。它不仅在非特异性免疫中发挥重要作用，在特异性免疫中也是不可缺少的细胞，有吞噬杀伤、抗原递呈和合成分泌细胞因也是不可缺少的细胞，有吞噬杀伤、抗原递呈和合成分泌细胞因也是不可缺少的细胞，有吞噬杀伤、抗原递呈和合成分泌细胞因也是不可缺少的细胞，有吞噬杀伤、抗原递呈和合成分泌细胞因子等作用。子等作用。子等作用。子等作用。5. 5. 其他免疫细胞其他免疫细胞其他免疫细胞其他免疫细胞 除上述免疫细胞外，血液中许多细胞均直接或间

35、接参与免疫除上述免疫细胞外，血液中许多细胞均直接或间接参与免疫除上述免疫细胞外，血液中许多细胞均直接或间接参与免疫除上述免疫细胞外，血液中许多细胞均直接或间接参与免疫应答过程，如中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞和血小板等。应答过程，如中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞和血小板等。应答过程，如中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞和血小板等。应答过程，如中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞和血小板等。免疫：水免疫：水产动物免疫的根本概念物免疫的根本概念三免疫因子三免疫因子三免疫因子三免疫因子免疫因子：免疫因子：免疫因子：免疫因子： 由机体细胞产生，与免疫应答有关的、分由机体细胞产生，与免疫应答有关的

36、、分由机体细胞产生，与免疫应答有关的、分由机体细胞产生，与免疫应答有关的、分泌到体液中或存在于细胞膜外表的分子统称为免疫泌到体液中或存在于细胞膜外表的分子统称为免疫泌到体液中或存在于细胞膜外表的分子统称为免疫泌到体液中或存在于细胞膜外表的分子统称为免疫因子。因子。因子。因子。 组成：它主要包括抗体、补体系统各成分、细胞因子组成：它主要包括抗体、补体系统各成分、细胞因子组成：它主要包括抗体、补体系统各成分、细胞因子组成：它主要包括抗体、补体系统各成分、细胞因子及免疫细胞膜分子等。及免疫细胞膜分子等。及免疫细胞膜分子等。及免疫细胞膜分子等。 细胞因子细胞因子细胞因子细胞因子(Cytokines)

37、(Cytokines) ：由免疫细胞和某些非免疫细：由免疫细胞和某些非免疫细：由免疫细胞和某些非免疫细：由免疫细胞和某些非免疫细胞如纤维母细胞、内皮细胞等合成和分泌的，胞如纤维母细胞、内皮细胞等合成和分泌的，胞如纤维母细胞、内皮细胞等合成和分泌的，胞如纤维母细胞、内皮细胞等合成和分泌的，具有调节多种细胞生理功能的可溶性小分子蛋白质。具有调节多种细胞生理功能的可溶性小分子蛋白质。具有调节多种细胞生理功能的可溶性小分子蛋白质。具有调节多种细胞生理功能的可溶性小分子蛋白质。 细胞因子种类繁多，具有多种生物学活性，在免疫细胞因子种类繁多，具有多种生物学活性，在免疫细胞因子种类繁多，具有多种生物学活性，

38、在免疫细胞因子种类繁多，具有多种生物学活性，在免疫系统的调控中作用重大。系统的调控中作用重大。系统的调控中作用重大。系统的调控中作用重大。免疫：水免疫：水产动物免疫的根本概念物免疫的根本概念三、免疫的主要类型三、免疫的主要类型三、免疫的主要类型三、免疫的主要类型1. 1. 天然免疫天然免疫天然免疫天然免疫定义：定义：定义：定义： 指机体先天具有的正常生理防御功能，对各种不同指机体先天具有的正常生理防御功能，对各种不同指机体先天具有的正常生理防御功能，对各种不同指机体先天具有的正常生理防御功能，对各种不同的病原微生物与异物都有排斥和屏障作用，也称非特异的病原微生物与异物都有排斥和屏障作用，也称非

39、特异的病原微生物与异物都有排斥和屏障作用，也称非特异的病原微生物与异物都有排斥和屏障作用，也称非特异性免疫。性免疫。性免疫。性免疫。 如：皮肤和粘液、粘液中的溶菌酶、吞噬细胞等如：皮肤和粘液、粘液中的溶菌酶、吞噬细胞等如：皮肤和粘液、粘液中的溶菌酶、吞噬细胞等如：皮肤和粘液、粘液中的溶菌酶、吞噬细胞等2. 2. 获得性免疫获得性免疫获得性免疫获得性免疫定义：指机体对某一种或一类微生物或其产物所产生的特定义：指机体对某一种或一类微生物或其产物所产生的特定义：指机体对某一种或一类微生物或其产物所产生的特定义：指机体对某一种或一类微生物或其产物所产生的特异性异性异性异性 抵抗力，它是后天的，是生物体

40、在生长发育过程中由抵抗力，它是后天的，是生物体在生长发育过程中由抵抗力，它是后天的，是生物体在生长发育过程中由抵抗力，它是后天的，是生物体在生长发育过程中由于自于自于自于自 然感染或预防接种后产生的。也称特异性免疫。然感染或预防接种后产生的。也称特异性免疫。然感染或预防接种后产生的。也称特异性免疫。然感染或预防接种后产生的。也称特异性免疫。 1) 1) 自动免疫：因感染病原或注射抗原疫苗而获得的免自动免疫：因感染病原或注射抗原疫苗而获得的免自动免疫：因感染病原或注射抗原疫苗而获得的免自动免疫：因感染病原或注射抗原疫苗而获得的免疫疫疫疫 抗原：凡能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞，并能与抗原：凡能

41、刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞，并能与抗原：凡能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞，并能与抗原：凡能刺激机体产生抗体和致敏淋巴细胞，并能与之结合引起特异性免疫反响的物质。之结合引起特异性免疫反响的物质。之结合引起特异性免疫反响的物质。之结合引起特异性免疫反响的物质。 2) 2) 被动免疫：从母体获得抗体或因人工注射抗体而获得的被动免疫：从母体获得抗体或因人工注射抗体而获得的被动免疫：从母体获得抗体或因人工注射抗体而获得的被动免疫：从母体获得抗体或因人工注射抗体而获得的免疫免疫免疫免疫 免疫：水免疫：水产动物免疫的根本概念物免疫的根本概念3) 3) 自动免疫和被动免疫的区别：自动免疫和被动免疫的区别

42、：自动免疫和被动免疫的区别：自动免疫和被动免疫的区别： a. a. 发生作用时间：发生作用时间：发生作用时间：发生作用时间： 自动免疫：慢自动免疫：慢自动免疫：慢自动免疫：慢1-41-4周；周；周；周； 被动免疫：快立即被动免疫：快立即被动免疫：快立即被动免疫：快立即 b. b. 效果：效果：效果：效果： 自动免疫：可刺激机体持续产生抗体，再次接收抗原刺激自动免疫：可刺激机体持续产生抗体，再次接收抗原刺激自动免疫：可刺激机体持续产生抗体，再次接收抗原刺激自动免疫：可刺激机体持续产生抗体，再次接收抗原刺激 将表现出再次反响或反响增强将表现出再次反响或反响增强将表现出再次反响或反响增强将表现出再次

43、反响或反响增强 被动免疫：体内抗体数量不会增多，再次接触抗原也不出被动免疫：体内抗体数量不会增多，再次接触抗原也不出被动免疫：体内抗体数量不会增多，再次接触抗原也不出被动免疫：体内抗体数量不会增多，再次接触抗原也不出 现增强反响现增强反响现增强反响现增强反响 c. c. 维持时间：维持时间：维持时间：维持时间： 自动免疫：长半年至终生；自动免疫：长半年至终生；自动免疫：长半年至终生；自动免疫：长半年至终生； 被动免疫：短被动免疫：短被动免疫：短被动免疫：短2-32-3周周周周 d. d. 用途：用途：用途：用途： 自动免疫：预防感染；自动免疫：预防感染；自动免疫：预防感染；自动免疫：预防感染；

44、 被动免疫：应急治疗被动免疫：应急治疗被动免疫：应急治疗被动免疫：应急治疗 免疫：水免疫：水产动物免疫的根本概念物免疫的根本概念四、水产动物免疫的特点四、水产动物免疫的特点四、水产动物免疫的特点四、水产动物免疫的特点1. 1. 水产动物病原与人类疾病关系不大，不易引起重视；水产动物病原与人类疾病关系不大，不易引起重视；水产动物病原与人类疾病关系不大，不易引起重视；水产动物病原与人类疾病关系不大，不易引起重视；2. 2. 水产动物免疫机制依赖于外界环境变化较为明显；水产动物免疫机制依赖于外界环境变化较为明显；水产动物免疫机制依赖于外界环境变化较为明显；水产动物免疫机制依赖于外界环境变化较为明显；

45、3. 3. 水产动物抗体与人等高等生物的抗体不同，其疾病的免水产动物抗体与人等高等生物的抗体不同，其疾病的免水产动物抗体与人等高等生物的抗体不同，其疾病的免水产动物抗体与人等高等生物的抗体不同，其疾病的免疫学防治方法尚在探索中；疫学防治方法尚在探索中；疫学防治方法尚在探索中；疫学防治方法尚在探索中；4. 4. 水产动物是变温动物，其免疫学研究必须在同一条件下水产动物是变温动物，其免疫学研究必须在同一条件下水产动物是变温动物，其免疫学研究必须在同一条件下水产动物是变温动物，其免疫学研究必须在同一条件下进行进行进行进行五、水产动物免疫在病害防治中的意义五、水产动物免疫在病害防治中的意义五、水产动物

46、免疫在病害防治中的意义五、水产动物免疫在病害防治中的意义1. 1. 通过人工免疫或对病后有免疫力个体筛选，培育免疫新通过人工免疫或对病后有免疫力个体筛选，培育免疫新通过人工免疫或对病后有免疫力个体筛选，培育免疫新通过人工免疫或对病后有免疫力个体筛选，培育免疫新品种品种品种品种(SPR)(SPR)；2. 2. 通过人工免疫，可有效预防流行病的发生；通过人工免疫，可有效预防流行病的发生；通过人工免疫，可有效预防流行病的发生；通过人工免疫，可有效预防流行病的发生；3. 3. 免疫防治可有效防止药物残留及化学药物对水体的污染；免疫防治可有效防止药物残留及化学药物对水体的污染；免疫防治可有效防止药物残留

47、及化学药物对水体的污染；免疫防治可有效防止药物残留及化学药物对水体的污染；4. 4. 免疫防治可防止长期使用抗生素等而产生的耐药性；免疫防治可防止长期使用抗生素等而产生的耐药性；免疫防治可防止长期使用抗生素等而产生的耐药性；免疫防治可防止长期使用抗生素等而产生的耐药性；5. 5. 疫苗防治可维持较长的药效时间。疫苗防治可维持较长的药效时间。疫苗防治可维持较长的药效时间。疫苗防治可维持较长的药效时间。免疫：水免疫：水产动物免疫的根本概念物免疫的根本概念第二第二节 水水产养殖养殖动物的非特异性免疫物的非特异性免疫鱼虾贝类的非特异性免疫因子的非特异性免疫因子 外部外部屏障：皮肤和粘膜屏障：皮肤和粘膜

48、 屏障作用屏障作用 内部内部屏障：血屏障：血脑屏障屏障(血胎屏障血胎屏障)非特异性免疫非特异性免疫 细胞：胞：吞噬吞噬细胞粒胞粒细胞等胞等 细胞和胞和 体液作用体液作用 体液：体液：补体、溶菌体、溶菌酶等等Chapter 2. 免疫原理及免疫原理及应用用一、鱼虾贝类的非特异性免疫一、鱼虾贝类的非特异性免疫一、鱼虾贝类的非特异性免疫一、鱼虾贝类的非特异性免疫 1) 1) 作用：作用：作用：作用： a. a. 机械阻挡和排除作用机械阻挡和排除作用机械阻挡和排除作用机械阻挡和排除作用 b. b. 具非特异性抗菌物质：溶菌酶、皮脂腺产乳酸等具非特异性抗菌物质：溶菌酶、皮脂腺产乳酸等具非特异性抗菌物质：

49、溶菌酶、皮脂腺产乳酸等具非特异性抗菌物质：溶菌酶、皮脂腺产乳酸等 c. c. 正常菌群的拮抗作用正常菌群的拮抗作用正常菌群的拮抗作用正常菌群的拮抗作用 2 2) ) 种类种类种类种类 A. A. 粘液粘液粘液粘液: : a. a. 屏障保护作用屏障保护作用屏障保护作用屏障保护作用 ( (可限制病原菌运动，阻止其侵入可限制病原菌运动，阻止其侵入可限制病原菌运动，阻止其侵入可限制病原菌运动，阻止其侵入) ) b. b. 含有溶菌和杀菌的多糖类和蛋白类，如溶菌酶等含有溶菌和杀菌的多糖类和蛋白类，如溶菌酶等含有溶菌和杀菌的多糖类和蛋白类，如溶菌酶等含有溶菌和杀菌的多糖类和蛋白类，如溶菌酶等 B. B.

50、 甲壳、皮肤和鳞片等：甲壳、皮肤和鳞片等：甲壳、皮肤和鳞片等：甲壳、皮肤和鳞片等： 机械屏障作用机械屏障作用机械屏障作用机械屏障作用2. 2. 体内屏障体内屏障体内屏障体内屏障 血脑屏障：血脑屏障：血脑屏障：血脑屏障：由脑膜、脉络丛和脑血管等组成。为大脑与躯干屏障由脑膜、脉络丛和脑血管等组成。为大脑与躯干屏障由脑膜、脉络丛和脑血管等组成。为大脑与躯干屏障由脑膜、脉络丛和脑血管等组成。为大脑与躯干屏障 作作作作 用：用：用：用：防止病原和其他异物进入大脑防止病原和其他异物进入大脑防止病原和其他异物进入大脑防止病原和其他异物进入大脑 免疫：免疫：非特异性免疫非特异性免疫 1) 1) 吞噬细胞：吞噬

51、细胞：吞噬细胞：吞噬细胞：包括粒细胞、巨噬细胞和单核细胞包括粒细胞、巨噬细胞和单核细胞包括粒细胞、巨噬细胞和单核细胞包括粒细胞、巨噬细胞和单核细胞 作用：作用：作用：作用： 受病原和宿主产生的趋化因子作用接近并吞噬受病原和宿主产生的趋化因子作用接近并吞噬受病原和宿主产生的趋化因子作用接近并吞噬受病原和宿主产生的趋化因子作用接近并吞噬 或杀伤病原或杀伤病原或杀伤病原或杀伤病原 2) 2) 非特异性细胞毒细胞：非特异性细胞毒细胞：非特异性细胞毒细胞：非特异性细胞毒细胞：主要存在于肾脏和腹腔，血中少。主要存在于肾脏和腹腔，血中少。主要存在于肾脏和腹腔，血中少。主要存在于肾脏和腹腔，血中少。 作用：作

52、用：作用：作用：与哺乳动物与哺乳动物与哺乳动物与哺乳动物NKNK细胞类似，能够杀伤病毒感染的细胞类似，能够杀伤病毒感染的细胞类似，能够杀伤病毒感染的细胞类似，能够杀伤病毒感染的 靶细胞，从而具有抗感染作用靶细胞，从而具有抗感染作用靶细胞，从而具有抗感染作用靶细胞，从而具有抗感染作用 免疫：免疫：非特异性免疫非特异性免疫4. 4. 非特异性体液因子非特异性体液因子非特异性体液因子非特异性体液因子 1) 1) 补体：补体：补体：补体： A. A. 来源与成分：存在于血清中，由多种非特异来源与成分：存在于血清中，由多种非特异来源与成分：存在于血清中，由多种非特异来源与成分：存在于血清中，由多种非特异

53、性血清蛋白性血清蛋白性血清蛋白性血清蛋白 组成，它对热敏感，组成，它对热敏感，组成，它对热敏感，组成，它对热敏感，4520min4520min失活失活失活失活 B. B. 作用：作用：作用：作用：a. a. 在抗原抗体反响中通过补体第二激在抗原抗体反响中通过补体第二激在抗原抗体反响中通过补体第二激在抗原抗体反响中通过补体第二激活通路补充活通路补充活通路补充活通路补充 抗体作用；抗体作用；抗体作用；抗体作用； b. b. 激活后的补体能溶解细胞膜，杀灭激活后的补体能溶解细胞膜，杀灭激活后的补体能溶解细胞膜，杀灭激活后的补体能溶解细胞膜，杀灭病毒；病毒；病毒；病毒； c. c. 激活后的补体可促进

54、吞噬细胞的吞激活后的补体可促进吞噬细胞的吞激活后的补体可促进吞噬细胞的吞激活后的补体可促进吞噬细胞的吞噬和释放组噬和释放组噬和释放组噬和释放组 胺等多种功能，协助杀灭病原胺等多种功能，协助杀灭病原胺等多种功能，协助杀灭病原胺等多种功能，协助杀灭病原. . 免疫：免疫：非特异性免疫非特异性免疫2) 2) 干扰素：干扰素：干扰素：干扰素： A. A. 定义：定义：定义：定义：是一类在同种细胞上具有抗病毒活性的蛋白质是一类在同种细胞上具有抗病毒活性的蛋白质是一类在同种细胞上具有抗病毒活性的蛋白质是一类在同种细胞上具有抗病毒活性的蛋白质. . ( (其活性的发挥受细胞基因组的调节和控制，涉及其活性的发

55、挥受细胞基因组的调节和控制，涉及其活性的发挥受细胞基因组的调节和控制，涉及其活性的发挥受细胞基因组的调节和控制，涉及RNARNA和和和和DNADNA的合成的合成的合成的合成) ) B. B. 来源与成分：来源与成分：来源与成分：来源与成分：主要为由巨噬细胞和淋巴细胞分泌的蛋白质；主要为由巨噬细胞和淋巴细胞分泌的蛋白质；主要为由巨噬细胞和淋巴细胞分泌的蛋白质；主要为由巨噬细胞和淋巴细胞分泌的蛋白质； 机体产生干扰素的数量产生受温度影响明显。如：机体产生干扰素的数量产生受温度影响明显。如：机体产生干扰素的数量产生受温度影响明显。如：机体产生干扰素的数量产生受温度影响明显。如： 硬头鳟感染病毒后，硬

56、头鳟感染病毒后，硬头鳟感染病毒后，硬头鳟感染病毒后，10 10 下，下，下，下，4d4d产生；产生；产生；产生； 15 15 下，下，下，下，2d2d产生产生产生产生 C. C. 作用：作用：作用：作用： 干扰素为重要的抗病毒感染因子干扰素为重要的抗病毒感染因子干扰素为重要的抗病毒感染因子干扰素为重要的抗病毒感染因子 a. a. 抗病毒增殖活性；抗病毒增殖活性；抗病毒增殖活性；抗病毒增殖活性； b. b. 免疫调节活性；免疫调节活性；免疫调节活性；免疫调节活性； c. c. 细胞分裂抑制活性；细胞分裂抑制活性；细胞分裂抑制活性；细胞分裂抑制活性； d. d. 抑制肿瘤生长活性；抑制肿瘤生长活性

57、；抑制肿瘤生长活性；抑制肿瘤生长活性； e. e. 改变细胞生物学特性等。改变细胞生物学特性等。改变细胞生物学特性等。改变细胞生物学特性等。 免疫：免疫：非特异性免疫非特异性免疫3) 3) 溶菌酶溶菌酶溶菌酶溶菌酶 A. A. 来源与成分：存在于粘液、血清和巨噬细胞中，来源与成分：存在于粘液、血清和巨噬细胞中，来源与成分：存在于粘液、血清和巨噬细胞中，来源与成分：存在于粘液、血清和巨噬细胞中，是一种是一种是一种是一种 水解酶低分子碱性多肽水解酶低分子碱性多肽水解酶低分子碱性多肽水解酶低分子碱性多肽 B. B. 作用：作用：作用：作用： 可直接溶解杀死可直接溶解杀死可直接溶解杀死可直接溶解杀死G

58、+G+菌等病原微生物菌等病原微生物菌等病原微生物菌等病原微生物4) C4) C反响性蛋白反响性蛋白反响性蛋白反响性蛋白 A. A. 来源与成分：为存在于鲽科鱼类中的一种蛋白质来源与成分：为存在于鲽科鱼类中的一种蛋白质来源与成分：为存在于鲽科鱼类中的一种蛋白质来源与成分：为存在于鲽科鱼类中的一种蛋白质 B. B. 作用：作用：作用：作用： a. a. 作为调理素可增加吞噬细胞的吞噬量作为调理素可增加吞噬细胞的吞噬量作为调理素可增加吞噬细胞的吞噬量作为调理素可增加吞噬细胞的吞噬量 b. b. 能使真菌、细菌乃至寄生虫中的糖类和能使真菌、细菌乃至寄生虫中的糖类和能使真菌、细菌乃至寄生虫中的糖类和能使

59、真菌、细菌乃至寄生虫中的糖类和磷酸酯磷酸酯磷酸酯磷酸酯 产生沉淀，从而杀灭病原体。产生沉淀，从而杀灭病原体。产生沉淀，从而杀灭病原体。产生沉淀，从而杀灭病原体。5) 5) 备解素：为备解素：为备解素：为备解素：为 - - 球蛋白，可在补体协助下杀死许多细球蛋白，可在补体协助下杀死许多细球蛋白，可在补体协助下杀死许多细球蛋白，可在补体协助下杀死许多细菌、原菌、原菌、原菌、原 虫甚至某些病毒等虫甚至某些病毒等虫甚至某些病毒等虫甚至某些病毒等免疫：免疫：非特异性免疫非特异性免疫二、影响非特异性免疫的因素二、影响非特异性免疫的因素 1) DO： 缺氧可引起水生动物抗病力下降缺氧可引起水生动物抗病力下降

60、 据此，有时可采用冲水、换水和充气等方据此，有时可采用冲水、换水和充气等方法缓解病情法缓解病情 2) 水质：水体有毒物质可阻碍机体正常机能，免水质：水体有毒物质可阻碍机体正常机能，免疫力下降疫力下降 3) 水温：适宜的温度变化可抑制疾病的爆发水温：适宜的温度变化可抑制疾病的爆发2. 营养因素营养因素 1) 营养缺乏，体质下降，机体抗菌力降低营养缺乏，体质下降，机体抗菌力降低 2) 营养缺乏，机体细胞代谢下降，病毒感染率降营养缺乏，机体细胞代谢下降，病毒感染率降低低3. 个体差异和年龄影响个体差异和年龄影响免疫：免疫：非特异性免疫非特异性免疫第三第三节 特异性免疫特异性免疫一、抗原一、抗原Ant

61、igen, Ag1. 抗原的概念抗原的概念 1) 抗原：是一种能抗原：是一种能够刺激机体免疫系刺激机体免疫系统使之使之发生特异性免疫生特异性免疫应答，并能与相答，并能与相应免疫免疫应答答产物或效物或效应体体细胞在体外或体胞在体外或体内内发生特异性生特异性结合的物合的物质。 2) 抗原的两种性能：抗原的两种性能： a. 免疫原性：指抗原分子能刺激机免疫免疫原性：指抗原分子能刺激机免疫细胞，并使之活化、增殖、分化，最胞，并使之活化、增殖、分化，最终产生效生效应分子抗体或分子抗体或细胞体致敏胞体致敏T细胞胞 的性能。的性能。 b. 免疫反响性：指抗原分子能与相免疫反响性：指抗原分子能与相应的的免疫免

62、疫应答答产物在体外或体内物在体外或体内发生特异性生特异性结合合产生免疫反响的性能。生免疫反响的性能。 免疫原性和免疫反响性免疫原性和免疫反响性统称称为抗抗原性。原性。Chapter 2. 免疫原理及免疫原理及应用用3) 3) 抗原的主要种类：抗原的主要种类：抗原的主要种类：抗原的主要种类： a. a. 完全抗原完全抗原完全抗原完全抗原complete antigencomplete antigen： 既有免疫原性又有免疫反响性的抗原称为完全抗原。既有免疫原性又有免疫反响性的抗原称为完全抗原。既有免疫原性又有免疫反响性的抗原称为完全抗原。既有免疫原性又有免疫反响性的抗原称为完全抗原。 大多异种蛋

63、白质、细菌、病毒、细菌外毒素和动物免疫血清等大多异种蛋白质、细菌、病毒、细菌外毒素和动物免疫血清等大多异种蛋白质、细菌、病毒、细菌外毒素和动物免疫血清等大多异种蛋白质、细菌、病毒、细菌外毒素和动物免疫血清等都为完全抗原都为完全抗原都为完全抗原都为完全抗原 b. b. 不完全抗原不完全抗原不完全抗原不完全抗原(incomplete antigen)(incomplete antigen)： 那些本身没有免疫原性而只有免疫反响性的物质那些本身没有免疫原性而只有免疫反响性的物质那些本身没有免疫原性而只有免疫反响性的物质那些本身没有免疫原性而只有免疫反响性的物质, ,又称半抗又称半抗又称半抗又称半抗原

64、原原原haptenhapten 半抗原大多为小分子物质，如大多数多糖、脂类、某些药物半抗原大多为小分子物质，如大多数多糖、脂类、某些药物半抗原大多为小分子物质，如大多数多糖、脂类、某些药物半抗原大多为小分子物质，如大多数多糖、脂类、某些药物和简单化合物等、和简单化合物等、和简单化合物等、和简单化合物等、 半抗原单独作用无免疫原性，当与大分子蛋白质载体结半抗原单独作用无免疫原性，当与大分子蛋白质载体结半抗原单独作用无免疫原性，当与大分子蛋白质载体结半抗原单独作用无免疫原性，当与大分子蛋白质载体结合形成半抗原合形成半抗原合形成半抗原合形成半抗原载体复合物使，便可获得免疫原性。该复合物载体复合物使，

65、便可获得免疫原性。该复合物载体复合物使，便可获得免疫原性。该复合物载体复合物使，便可获得免疫原性。该复合物不但可刺激机体产生针对半抗原的抗体，也可刺激机体产生针不但可刺激机体产生针对半抗原的抗体，也可刺激机体产生针不但可刺激机体产生针对半抗原的抗体，也可刺激机体产生针不但可刺激机体产生针对半抗原的抗体，也可刺激机体产生针对蛋白质载体的抗体。对蛋白质载体的抗体。对蛋白质载体的抗体。对蛋白质载体的抗体。 4) 4) 特殊抗原：特殊抗原：特殊抗原：特殊抗原： a. a. 变应原变应原变应原变应原(allergen)(allergen)：能刺激机体产生病理性免疫应答：能刺激机体产生病理性免疫应答：能刺

66、激机体产生病理性免疫应答：能刺激机体产生病理性免疫应答( (超敏反超敏反超敏反超敏反响响响响) )的抗原。的抗原。的抗原。的抗原。 b. b. 耐受原耐受原耐受原耐受原(tolerangen)(tolerangen)：能诱导机体对其表现无免疫应答：能诱导机体对其表现无免疫应答：能诱导机体对其表现无免疫应答：能诱导机体对其表现无免疫应答 ( (免疫免疫免疫免疫耐受耐受耐受耐受) )的抗原。的抗原。的抗原。的抗原。 免疫免疫类型：型：特异性免疫特异性免疫2. 2. 抗原的特性抗原的特性抗原的特性抗原的特性 1) 1) 特异性：具有与相应抗体发生特异性反响的能力；特异性：具有与相应抗体发生特异性反响

67、的能力；特异性：具有与相应抗体发生特异性反响的能力；特异性：具有与相应抗体发生特异性反响的能力； 2) 2) 异物性：正常情况下，能引起机体产生免疫应答异物性：正常情况下，能引起机体产生免疫应答异物性：正常情况下，能引起机体产生免疫应答异物性：正常情况下，能引起机体产生免疫应答的抗原都是异种或的抗原都是异种或的抗原都是异种或的抗原都是异种或 异体物质，机体本身的物质或细胞不能刺激机体异体物质，机体本身的物质或细胞不能刺激机体异体物质，机体本身的物质或细胞不能刺激机体异体物质，机体本身的物质或细胞不能刺激机体产生免疫应答；并且，产生免疫应答；并且，产生免疫应答；并且，产生免疫应答；并且， 亲缘关

68、系越远、组织结构间差异越大，抗原性越亲缘关系越远、组织结构间差异越大，抗原性越亲缘关系越远、组织结构间差异越大，抗原性越亲缘关系越远、组织结构间差异越大，抗原性越强。强。强。强。 3) 3) 大分子胶体性：抗原的分子量较大大分子胶体性：抗原的分子量较大大分子胶体性：抗原的分子量较大大分子胶体性：抗原的分子量较大 (1 (1万万万万DaDa以上以上以上以上) )，分子量小于分子量小于分子量小于分子量小于40004000 Da Da的物质一般不具抗原性。同一类物质，其抗原性的物质一般不具抗原性。同一类物质，其抗原性的物质一般不具抗原性。同一类物质，其抗原性的物质一般不具抗原性。同一类物质，其抗原性

69、随分子量增大而增强随分子量增大而增强随分子量增大而增强随分子量增大而增强 4) 4) 结构复杂性：抗原要有一定的化学组成和复杂的结构复杂性：抗原要有一定的化学组成和复杂的结构复杂性：抗原要有一定的化学组成和复杂的结构复杂性：抗原要有一定的化学组成和复杂的结构结构结构结构 抗原性：芳香类抗原性：芳香类抗原性：芳香类抗原性：芳香类Pr.Pr.非芳香类非芳香类非芳香类非芳香类Pr Pr 多糖多糖多糖多糖 核酸核酸核酸核酸 类类类类脂脂脂脂 5) 5) 完整性：抗原必须保持完整的化学活性基团才能完整性：抗原必须保持完整的化学活性基团才能完整性：抗原必须保持完整的化学活性基团才能完整性：抗原必须保持完整

70、的化学活性基团才能具有抗原性，否那么，具有抗原性，否那么，具有抗原性，否那么，具有抗原性，否那么， 将不能刺激机体产生抗体将不能刺激机体产生抗体将不能刺激机体产生抗体将不能刺激机体产生抗体免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫3. 3. 决定抗原免疫原性的因素决定抗原免疫原性的因素决定抗原免疫原性的因素决定抗原免疫原性的因素 某物质是否具有免疫原性，能否作为免疫原诱导机体产某物质是否具有免疫原性，能否作为免疫原诱导机体产某物质是否具有免疫原性，能否作为免疫原诱导机体产某物质是否具有免疫原性，能否作为免疫原诱导机体产生免疫应答，与其本身的性质、机体对该物质的反响性及免生免疫应答，与其本身的性质、机体对

71、该物质的反响性及免生免疫应答，与其本身的性质、机体对该物质的反响性及免生免疫应答，与其本身的性质、机体对该物质的反响性及免疫的方式等直接相关。疫的方式等直接相关。疫的方式等直接相关。疫的方式等直接相关。 1) 1) 分子大小：凡具有免疫原性的物质均为大分子的有机物质分子大小：凡具有免疫原性的物质均为大分子的有机物质分子大小：凡具有免疫原性的物质均为大分子的有机物质分子大小：凡具有免疫原性的物质均为大分子的有机物质无机物不能作为免疫原，分子量低于无机物不能作为免疫原，分子量低于无机物不能作为免疫原，分子量低于无机物不能作为免疫原，分子量低于40004000的物质通常也无免的物质通常也无免的物质通

72、常也无免的物质通常也无免疫原性；疫原性；疫原性；疫原性； 为什么大分子物质免疫原性较强呢？为什么大分子物质免疫原性较强呢？为什么大分子物质免疫原性较强呢？为什么大分子物质免疫原性较强呢？ a. a. 分子量越大，其外表携带的抗原决定簇越多，因而对淋巴分子量越大，其外表携带的抗原决定簇越多，因而对淋巴分子量越大，其外表携带的抗原决定簇越多，因而对淋巴分子量越大，其外表携带的抗原决定簇越多，因而对淋巴细胞刺激也越强；细胞刺激也越强；细胞刺激也越强；细胞刺激也越强； b. b. 大分子胶体物质，化学结构稳定，在体内不易被破坏和去大分子胶体物质，化学结构稳定，在体内不易被破坏和去大分子胶体物质，化学结

73、构稳定，在体内不易被破坏和去大分子胶体物质，化学结构稳定，在体内不易被破坏和去除，存留时间较长，使淋巴细胞得到较持久的刺激，有利于除，存留时间较长，使淋巴细胞得到较持久的刺激，有利于除，存留时间较长，使淋巴细胞得到较持久的刺激，有利于除，存留时间较长，使淋巴细胞得到较持久的刺激，有利于免疫应答的发生。免疫应答的发生。免疫应答的发生。免疫应答的发生。 2) 2) 化学结构与组成：大分子物质并不都有良好免疫原性，还化学结构与组成：大分子物质并不都有良好免疫原性，还化学结构与组成：大分子物质并不都有良好免疫原性，还化学结构与组成：大分子物质并不都有良好免疫原性，还与组成与结构有关与组成与结构有关与组

74、成与结构有关与组成与结构有关 如：明胶分子量虽达如：明胶分子量虽达如：明胶分子量虽达如：明胶分子量虽达1010万，但其组分为直链万，但其组分为直链万，但其组分为直链万，但其组分为直链a.a. a.a. ，易被分解，易被分解，易被分解，易被分解破坏，免疫原性弱破坏，免疫原性弱破坏，免疫原性弱破坏，免疫原性弱; ; 假设明胶分子上连接少量酪氨酸或谷氨酸等芳香族假设明胶分子上连接少量酪氨酸或谷氨酸等芳香族假设明胶分子上连接少量酪氨酸或谷氨酸等芳香族假设明胶分子上连接少量酪氨酸或谷氨酸等芳香族a.a. a.a. ，免疫原性显著增强免疫原性显著增强免疫原性显著增强免疫原性显著增强; ; 以芳香族以芳香族

75、以芳香族以芳香族a.a.a.a.为主的为主的为主的为主的Pr.Pr.，其免疫原性要明显高于非芳香，其免疫原性要明显高于非芳香，其免疫原性要明显高于非芳香，其免疫原性要明显高于非芳香族族族族a.a.a.a.为主的为主的为主的为主的Pr.Pr.免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫3) 3) 异物性：异物性：异物性：异物性： 免疫系统能识别自己和异己物质，对自身物质免疫耐受；对异己物质免免疫系统能识别自己和异己物质，对自身物质免疫耐受；对异己物质免免疫系统能识别自己和异己物质，对自身物质免疫耐受；对异己物质免免疫系统能识别自己和异己物质，对自身物质免疫耐受；对异己物质免疫应答疫应答疫应答疫应答 。 免疫

76、原性与抗原和宿主种系关系远近有关，种系关系越远，免疫原性越强。免疫原性与抗原和宿主种系关系远近有关，种系关系越远，免疫原性越强。免疫原性与抗原和宿主种系关系远近有关，种系关系越远，免疫原性越强。免疫原性与抗原和宿主种系关系远近有关，种系关系越远，免疫原性越强。 具有异物性的物质包括以下三类：具有异物性的物质包括以下三类：具有异物性的物质包括以下三类：具有异物性的物质包括以下三类： a. a. 异种物质：如细菌、病毒、异种血清、植物蛋白等；异种物质：如细菌、病毒、异种血清、植物蛋白等；异种物质：如细菌、病毒、异种血清、植物蛋白等；异种物质：如细菌、病毒、异种血清、植物蛋白等； b. b. 同种异

77、体物质：如人类红细胞外表血型抗原同种异体物质：如人类红细胞外表血型抗原同种异体物质：如人类红细胞外表血型抗原同种异体物质：如人类红细胞外表血型抗原A A、B B、OO、RhRh等；等；等；等； c. c. 改变和隐蔽的自身物质：主要包括在外伤、感染、辐射或药物作用下，改变和隐蔽的自身物质：主要包括在外伤、感染、辐射或药物作用下，改变和隐蔽的自身物质：主要包括在外伤、感染、辐射或药物作用下，改变和隐蔽的自身物质：主要包括在外伤、感染、辐射或药物作用下，组织结构发生改变的组织结构发生改变的组织结构发生改变的组织结构发生改变的“ “自身物质和释放入血的自身抗原，如甲状腺蛋白，自身物质和释放入血的自身

78、抗原，如甲状腺蛋白，自身物质和释放入血的自身抗原，如甲状腺蛋白，自身物质和释放入血的自身抗原，如甲状腺蛋白，等。等。等。等。4) 4) 免疫途径：相同抗原因免疫途径不同，产生的免疫效果也不同免疫途径：相同抗原因免疫途径不同，产生的免疫效果也不同免疫途径：相同抗原因免疫途径不同，产生的免疫效果也不同免疫途径：相同抗原因免疫途径不同，产生的免疫效果也不同 多数抗原须经非消化道多数抗原须经非消化道多数抗原须经非消化道多数抗原须经非消化道( (皮下、肌肉、体表或血液等皮下、肌肉、体表或血液等皮下、肌肉、体表或血液等皮下、肌肉、体表或血液等) )途径才能产生良好途径才能产生良好途径才能产生良好途径才能产

79、生良好免疫效果；免疫效果；免疫效果；免疫效果； 有些抗原有些抗原有些抗原有些抗原( (如须刺激肠粘膜相关淋巴组织的抗原如须刺激肠粘膜相关淋巴组织的抗原如须刺激肠粘膜相关淋巴组织的抗原如须刺激肠粘膜相关淋巴组织的抗原) )，只有口服免疫才有良，只有口服免疫才有良，只有口服免疫才有良，只有口服免疫才有良好效果。好效果。好效果。好效果。5) 5) 机体应答性：抗原物质能否产生免疫原性还与机体的免疫应答能力有关。机体应答性：抗原物质能否产生免疫原性还与机体的免疫应答能力有关。机体应答性：抗原物质能否产生免疫原性还与机体的免疫应答能力有关。机体应答性：抗原物质能否产生免疫原性还与机体的免疫应答能力有关。

80、 如：纯化多糖对人和小鼠有良好免疫原性，而对豚鼠那么不能引起免疫应如：纯化多糖对人和小鼠有良好免疫原性，而对豚鼠那么不能引起免疫应如：纯化多糖对人和小鼠有良好免疫原性，而对豚鼠那么不能引起免疫应如：纯化多糖对人和小鼠有良好免疫原性，而对豚鼠那么不能引起免疫应答。答。答。答。 此外，抗原的免疫原性还与抗原剂量、佐剂、机体年龄与生理状态等因素此外，抗原的免疫原性还与抗原剂量、佐剂、机体年龄与生理状态等因素此外，抗原的免疫原性还与抗原剂量、佐剂、机体年龄与生理状态等因素此外，抗原的免疫原性还与抗原剂量、佐剂、机体年龄与生理状态等因素有关。有关。有关。有关。免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫4. 4.

81、抗原的特异性与交叉反响抗原的特异性与交叉反响抗原的特异性与交叉反响抗原的特异性与交叉反响 抗原的特异性既表现在免疫原性上，也表现在免疫抗原的特异性既表现在免疫原性上，也表现在免疫抗原的特异性既表现在免疫原性上，也表现在免疫抗原的特异性既表现在免疫原性上，也表现在免疫反响性上。反响性上。反响性上。反响性上。 表现在免疫原性：指某一抗原分子只能诱导相应淋表现在免疫原性：指某一抗原分子只能诱导相应淋表现在免疫原性：指某一抗原分子只能诱导相应淋表现在免疫原性：指某一抗原分子只能诱导相应淋巴细胞发生专一应答；巴细胞发生专一应答；巴细胞发生专一应答；巴细胞发生专一应答； 表现在免疫反响性：指某一抗原分子只

82、能与相应抗表现在免疫反响性：指某一抗原分子只能与相应抗表现在免疫反响性：指某一抗原分子只能与相应抗表现在免疫反响性：指某一抗原分子只能与相应抗体或淋巴细胞发生专一结合。体或淋巴细胞发生专一结合。体或淋巴细胞发生专一结合。体或淋巴细胞发生专一结合。 抗原的特异性是由抗原分子外表的抗原决定簇抗原的特异性是由抗原分子外表的抗原决定簇抗原的特异性是由抗原分子外表的抗原决定簇抗原的特异性是由抗原分子外表的抗原决定簇决定的。决定的。决定的。决定的。1) 1) 抗原决定簇抗原决定簇抗原决定簇抗原决定簇antigenic determinantantigenic determinant： 指位于抗原分子外表、

83、决定抗原特异性的特定指位于抗原分子外表、决定抗原特异性的特定指位于抗原分子外表、决定抗原特异性的特定指位于抗原分子外表、决定抗原特异性的特定化学基团，它是决定抗原反响性呈现高度特异性的化学基团，它是决定抗原反响性呈现高度特异性的化学基团，它是决定抗原反响性呈现高度特异性的化学基团，它是决定抗原反响性呈现高度特异性的物质根底。又称表位物质根底。又称表位物质根底。又称表位物质根底。又称表位epitopeepitope 具体说，抗原决定簇就是与相应淋巴细胞上的具体说，抗原决定簇就是与相应淋巴细胞上的具体说，抗原决定簇就是与相应淋巴细胞上的具体说，抗原决定簇就是与相应淋巴细胞上的抗原受体结合的部位，并

84、且，只有两者结合才能激抗原受体结合的部位，并且，只有两者结合才能激抗原受体结合的部位，并且，只有两者结合才能激抗原受体结合的部位，并且，只有两者结合才能激活淋巴细胞并引起免疫反响活淋巴细胞并引起免疫反响活淋巴细胞并引起免疫反响活淋巴细胞并引起免疫反响 免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫2) 2) 抗原决定簇的种类与组成抗原决定簇的种类与组成抗原决定簇的种类与组成抗原决定簇的种类与组成 a. a. 种类：一个抗原外表可以有一种或多种不同的抗原决定簇；种类：一个抗原外表可以有一种或多种不同的抗原决定簇；种类：一个抗原外表可以有一种或多种不同的抗原决定簇；种类：一个抗原外表可以有一种或多种不同的抗原决

85、定簇； 功能性功能性功能性功能性( (抗原抗原抗原抗原) )决定簇：指位于抗原分子外表易被相应淋巴细决定簇：指位于抗原分子外表易被相应淋巴细决定簇：指位于抗原分子外表易被相应淋巴细决定簇：指位于抗原分子外表易被相应淋巴细胞识别、启动免疫应答，同时能与相应抗体或致敏胞识别、启动免疫应答，同时能与相应抗体或致敏胞识别、启动免疫应答，同时能与相应抗体或致敏胞识别、启动免疫应答，同时能与相应抗体或致敏T T细胞特细胞特细胞特细胞特异性结合发生免疫反响的决定簇。异性结合发生免疫反响的决定簇。异性结合发生免疫反响的决定簇。异性结合发生免疫反响的决定簇。 隐蔽性隐蔽性隐蔽性隐蔽性( (抗原抗原抗原抗原) )

86、决定簇：位于抗原分子内部，不能被淋巴细胞决定簇：位于抗原分子内部，不能被淋巴细胞决定簇：位于抗原分子内部，不能被淋巴细胞决定簇：位于抗原分子内部，不能被淋巴细胞识别，无法触发免疫应答的抗原决定簇。它假设经理化因素识别，无法触发免疫应答的抗原决定簇。它假设经理化因素识别，无法触发免疫应答的抗原决定簇。它假设经理化因素识别，无法触发免疫应答的抗原决定簇。它假设经理化因素处理或经抗原提呈细胞加工后，也可将隐藏与抗原分子内部处理或经抗原提呈细胞加工后，也可将隐藏与抗原分子内部处理或经抗原提呈细胞加工后，也可将隐藏与抗原分子内部处理或经抗原提呈细胞加工后，也可将隐藏与抗原分子内部的决定簇暴露，称为功能性

87、决定簇而发挥免疫作用。的决定簇暴露，称为功能性决定簇而发挥免疫作用。的决定簇暴露，称为功能性决定簇而发挥免疫作用。的决定簇暴露，称为功能性决定簇而发挥免疫作用。b. b. 抗原结合价：一个抗原分子上能与相应抗体分子结合的抗原抗原结合价：一个抗原分子上能与相应抗体分子结合的抗原抗原结合价：一个抗原分子上能与相应抗体分子结合的抗原抗原结合价：一个抗原分子上能与相应抗体分子结合的抗原决定簇的总数决定簇的总数决定簇的总数决定簇的总数 单价抗原：有些半抗原只能和抗体分子中一个抗原结合部单价抗原：有些半抗原只能和抗体分子中一个抗原结合部单价抗原：有些半抗原只能和抗体分子中一个抗原结合部单价抗原：有些半抗原

88、只能和抗体分子中一个抗原结合部位结合，为单价抗原位结合，为单价抗原位结合，为单价抗原位结合，为单价抗原 多价抗原：多数抗原有多个相同和不同抗原决定簇，能和多价抗原：多数抗原有多个相同和不同抗原决定簇，能和多价抗原：多数抗原有多个相同和不同抗原决定簇，能和多价抗原：多数抗原有多个相同和不同抗原决定簇，能和多个抗体分子结合。多个抗体分子结合。多个抗体分子结合。多个抗体分子结合。c. c. 组成：不同类型的抗原决定簇组成不同，一般有组成：不同类型的抗原决定簇组成不同，一般有组成：不同类型的抗原决定簇组成不同，一般有组成：不同类型的抗原决定簇组成不同，一般有5-75-7个单体个单体个单体个单体组成组成

89、组成组成 如：如：如：如：PrPr类抗原：其抗原决定簇有类抗原：其抗原决定簇有类抗原：其抗原决定簇有类抗原：其抗原决定簇有5 5 个左右氨基酸个左右氨基酸个左右氨基酸个左右氨基酸 多糖类抗原：其抗原决定簇有多糖类抗原：其抗原决定簇有多糖类抗原：其抗原决定簇有多糖类抗原：其抗原决定簇有6 6 个左右单糖个左右单糖个左右单糖个左右单糖 核酸类抗原：其抗原决定簇有核酸类抗原：其抗原决定簇有核酸类抗原：其抗原决定簇有核酸类抗原：其抗原决定簇有6-8 6-8 个左右核苷酸残个左右核苷酸残个左右核苷酸残个左右核苷酸残基基基基 免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫3) 3) 抗原决定簇对抗原特异性的影响抗原决定

90、簇对抗原特异性的影响抗原决定簇对抗原特异性的影响抗原决定簇对抗原特异性的影响 抗原决定簇的化学组成、排列及空间结构决定着抗原的特抗原决定簇的化学组成、排列及空间结构决定着抗原的特抗原决定簇的化学组成、排列及空间结构决定着抗原的特抗原决定簇的化学组成、排列及空间结构决定着抗原的特异性。异性。异性。异性。 天然抗原结构复杂，同种抗原有多种不同抗原决定簇，天然抗原结构复杂，同种抗原有多种不同抗原决定簇，天然抗原结构复杂，同种抗原有多种不同抗原决定簇，天然抗原结构复杂，同种抗原有多种不同抗原决定簇，不同抗原也具有不同的抗原决定簇，因而各具特异性。不同抗原也具有不同的抗原决定簇，因而各具特异性。不同抗原

91、也具有不同的抗原决定簇，因而各具特异性。不同抗原也具有不同的抗原决定簇，因而各具特异性。4) 4) 共同抗原与交叉反响共同抗原与交叉反响共同抗原与交叉反响共同抗原与交叉反响共同抗原：指具有相同的抗原决定簇的抗原。其中：共同抗原：指具有相同的抗原决定簇的抗原。其中：共同抗原：指具有相同的抗原决定簇的抗原。其中：共同抗原：指具有相同的抗原决定簇的抗原。其中： 类属抗原：存在于同一种属或近缘种属中的共同抗原称类属类属抗原：存在于同一种属或近缘种属中的共同抗原称类属类属抗原：存在于同一种属或近缘种属中的共同抗原称类属类属抗原：存在于同一种属或近缘种属中的共同抗原称类属抗原；抗原；抗原；抗原； 异嗜性抗

92、原：存在于不同种属生物间的共同抗原称异嗜性抗异嗜性抗原：存在于不同种属生物间的共同抗原称异嗜性抗异嗜性抗原：存在于不同种属生物间的共同抗原称异嗜性抗异嗜性抗原：存在于不同种属生物间的共同抗原称异嗜性抗原。原。原。原。交叉反响：由共同抗原决定簇刺激机体产生的抗体可和两种抗交叉反响：由共同抗原决定簇刺激机体产生的抗体可和两种抗交叉反响：由共同抗原决定簇刺激机体产生的抗体可和两种抗交叉反响：由共同抗原决定簇刺激机体产生的抗体可和两种抗原结合发生反响。原结合发生反响。原结合发生反响。原结合发生反响。 交叉反响有时也在两种抗原决定簇构型相似时发生。交叉反响有时也在两种抗原决定簇构型相似时发生。交叉反响有

93、时也在两种抗原决定簇构型相似时发生。交叉反响有时也在两种抗原决定簇构型相似时发生。免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫5. 5. 抗原的分类抗原的分类抗原的分类抗原的分类 根据分类方法不同，可以将抗原分为不同的类型。根据分类方法不同，可以将抗原分为不同的类型。根据分类方法不同，可以将抗原分为不同的类型。根据分类方法不同，可以将抗原分为不同的类型。A. A. 根据抗原的来源及与机体的亲缘关系分类根据抗原的来源及与机体的亲缘关系分类根据抗原的来源及与机体的亲缘关系分类根据抗原的来源及与机体的亲缘关系分类(1) (1) 异种抗原：指来自另一物种的抗原物质。如各种微生物及其

94、异种抗原：指来自另一物种的抗原物质。如各种微生物及其异种抗原：指来自另一物种的抗原物质。如各种微生物及其异种抗原：指来自另一物种的抗原物质。如各种微生物及其代谢产物、代谢产物、代谢产物、代谢产物、(2) (2) 同种异体抗原：指来自同种而基因型不同的个体的抗原物质，同种异体抗原：指来自同种而基因型不同的个体的抗原物质，同种异体抗原：指来自同种而基因型不同的个体的抗原物质，同种异体抗原：指来自同种而基因型不同的个体的抗原物质，如人血型抗原；如人血型抗原；如人血型抗原；如人血型抗原；(3) (3) 自身抗原：指能引起自身免疫应答的自身组织成分，如改变自身抗原：指能引起自身免疫应答的自身组织成分，如

95、改变自身抗原：指能引起自身免疫应答的自身组织成分，如改变自身抗原：指能引起自身免疫应答的自身组织成分，如改变和隐蔽的自身物质。和隐蔽的自身物质。和隐蔽的自身物质。和隐蔽的自身物质。B. B. 根据抗原激活根据抗原激活根据抗原激活根据抗原激活B B细胞是否依赖细胞是否依赖细胞是否依赖细胞是否依赖T T细胞辅助来分类细胞辅助来分类细胞辅助来分类细胞辅助来分类(1) (1) 胸腺依赖性抗原胸腺依赖性抗原胸腺依赖性抗原胸腺依赖性抗原thymus dependant antigen, TD-Agthymus dependant antigen, TD-Ag： TD TD抗原：含抗原：含抗原：含抗原：含T

96、 T细胞抗原决定簇、需细胞抗原决定簇、需细胞抗原决定簇、需细胞抗原决定簇、需T T细胞协助才能激活细胞协助才能激活细胞协助才能激活细胞协助才能激活B B细胞产细胞产细胞产细胞产生生生生Ab Ab 的抗原。的抗原。的抗原。的抗原。 如：病毒、细菌、细胞及各种蛋白质等抗原都属如：病毒、细菌、细胞及各种蛋白质等抗原都属如：病毒、细菌、细胞及各种蛋白质等抗原都属如：病毒、细菌、细胞及各种蛋白质等抗原都属TDTD抗原抗原抗原抗原(2) (2) 胸腺非依赖性抗原胸腺非依赖性抗原胸腺非依赖性抗原胸腺非依赖性抗原thymus independant antigen, TI-Agthymus independa

97、nt antigen, TI-Ag： TI TI抗原：只含抗原：只含抗原：只含抗原：只含B B细胞抗原决定簇、不需细胞抗原决定簇、不需细胞抗原决定簇、不需细胞抗原决定簇、不需T T细胞协助可直接激活细胞协助可直接激活细胞协助可直接激活细胞协助可直接激活B B细胞产生细胞产生细胞产生细胞产生Ab Ab 的抗原的抗原的抗原的抗原 如：革兰氏阴性菌的如：革兰氏阴性菌的如：革兰氏阴性菌的如：革兰氏阴性菌的LPSLPS、荚膜多糖等。、荚膜多糖等。、荚膜多糖等。、荚膜多糖等。 C. C. 抗原的其它分类方法：如依性能分完全抗原和半抗原，依组抗原的其它分类方法：如依性能分完全抗原和半抗原，依组抗原的其它分类

98、方法：如依性能分完全抗原和半抗原，依组抗原的其它分类方法：如依性能分完全抗原和半抗原，依组分分蛋白质抗原、脂蛋白抗原、糖蛋白抗原、多糖抗原和核蛋分分蛋白质抗原、脂蛋白抗原、糖蛋白抗原、多糖抗原和核蛋分分蛋白质抗原、脂蛋白抗原、糖蛋白抗原、多糖抗原和核蛋分分蛋白质抗原、脂蛋白抗原、糖蛋白抗原、多糖抗原和核蛋白抗原等，依获得方式分天然、人工和合成抗原等。白抗原等，依获得方式分天然、人工和合成抗原等。白抗原等，依获得方式分天然、人工和合成抗原等。白抗原等，依获得方式分天然、人工和合成抗原等。免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫6. 6. 细菌抗原细菌抗原细菌抗原细菌抗原 细菌是重要的病原体，其成分十分复

99、杂，每种结细菌是重要的病原体，其成分十分复杂，每种结细菌是重要的病原体，其成分十分复杂，每种结细菌是重要的病原体，其成分十分复杂，每种结构及其代谢产物均有不同的抗原成分，每种细菌都是构及其代谢产物均有不同的抗原成分，每种细菌都是构及其代谢产物均有不同的抗原成分，每种细菌都是构及其代谢产物均有不同的抗原成分，每种细菌都是一个由多种抗原组成的复合体。一个由多种抗原组成的复合体。一个由多种抗原组成的复合体。一个由多种抗原组成的复合体。 细菌抗原的种类：细菌抗原的种类：细菌抗原的种类：细菌抗原的种类： a. a. 外表抗原：包括荚膜抗原和微荚膜抗原；外表抗原：包括荚膜抗原和微荚膜抗原；外表抗原：包括荚

100、膜抗原和微荚膜抗原；外表抗原：包括荚膜抗原和微荚膜抗原； b. b. 菌体抗原：指位于细菌细胞壁、细胞膜和细胞质上菌体抗原：指位于细菌细胞壁、细胞膜和细胞质上菌体抗原：指位于细菌细胞壁、细胞膜和细胞质上菌体抗原：指位于细菌细胞壁、细胞膜和细胞质上的抗原；的抗原；的抗原；的抗原； c. c. 鞭毛抗原：存在于鞭毛上的抗原；鞭毛抗原：存在于鞭毛上的抗原；鞭毛抗原：存在于鞭毛上的抗原；鞭毛抗原：存在于鞭毛上的抗原； d. d. 菌毛抗原：存在于菌毛上的抗原；菌毛抗原：存在于菌毛上的抗原；菌毛抗原：存在于菌毛上的抗原；菌毛抗原：存在于菌毛上的抗原； e. e. 外毒素和类毒素：毒素是外毒素和类毒素：毒

101、素是外毒素和类毒素：毒素是外毒素和类毒素：毒素是PrPr，具很强免疫原性，可，具很强免疫原性，可，具很强免疫原性，可，具很强免疫原性，可刺激机体产生抗毒素刺激机体产生抗毒素刺激机体产生抗毒素刺激机体产生抗毒素 外毒素：为细菌产生的一类蛋白质，具强抗原性外毒素：为细菌产生的一类蛋白质，具强抗原性外毒素：为细菌产生的一类蛋白质，具强抗原性外毒素：为细菌产生的一类蛋白质，具强抗原性 类毒素：为外毒素经类毒素：为外毒素经类毒素：为外毒素经类毒素：为外毒素经0.3-0.4%0.3-0.4%甲醛脱毒而成，具强甲醛脱毒而成，具强甲醛脱毒而成，具强甲醛脱毒而成，具强抗原性抗原性抗原性抗原性 外毒素和类毒素均能

102、刺激机体产生抗毒素外毒素和类毒素均能刺激机体产生抗毒素外毒素和类毒素均能刺激机体产生抗毒素外毒素和类毒素均能刺激机体产生抗毒素 免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫7. 7. 佐剂佐剂佐剂佐剂adjuvantadjuvant 1) 1) 定义：指与抗原同时或预先注入机体后，能够非特定义：指与抗原同时或预先注入机体后，能够非特定义：指与抗原同时或预先注入机体后，能够非特定义：指与抗原同时或预先注入机体后，能够非特异性地增强机体对抗原的免疫应答能力的物质。异性地增强机体对抗原的免疫应答能力的物质。异性地增强机体对抗原的免疫应答能力的物质。异性地增强机体对抗原的免疫应答能力的物质。 2) 2) 种类：种

103、类：种类：种类： a. a. 无机佐剂：主要为含铝化合物，如：铵明矾、氢氧无机佐剂：主要为含铝化合物，如：铵明矾、氢氧无机佐剂：主要为含铝化合物，如：铵明矾、氢氧无机佐剂：主要为含铝化合物，如：铵明矾、氢氧化铝、磷酸铝等化铝、磷酸铝等化铝、磷酸铝等化铝、磷酸铝等 b. b. 有机佐剂：主要为微生物及其代谢产物，如分枝杆有机佐剂：主要为微生物及其代谢产物，如分枝杆有机佐剂：主要为微生物及其代谢产物，如分枝杆有机佐剂：主要为微生物及其代谢产物，如分枝杆菌菌菌菌( (结核杆菌结核杆菌结核杆菌结核杆菌) )、LPSLPS等等等等 c. c. 合成佐剂：一些合成物质，如合成佐剂：一些合成物质，如合成佐剂

104、：一些合成物质，如合成佐剂：一些合成物质，如PolyI:CPolyI:C、PolyA:U PolyA:U 等等等等 d. d. 油剂：如矿物油石蜡油、植物油、花生油乳化油剂：如矿物油石蜡油、植物油、花生油乳化油剂：如矿物油石蜡油、植物油、花生油乳化油剂：如矿物油石蜡油、植物油、花生油乳化佐剂、弗氏佐剂等佐剂、弗氏佐剂等佐剂、弗氏佐剂等佐剂、弗氏佐剂等 3) 3) 弗氏佐剂：由矿物油弗氏佐剂：由矿物油弗氏佐剂：由矿物油弗氏佐剂：由矿物油( (石蜡油石蜡油石蜡油石蜡油) )、乳化剂、乳化剂、乳化剂、乳化剂( (羊毛脂或吐羊毛脂或吐羊毛脂或吐羊毛脂或吐温温温温80)80)和杀死的分支杆菌和杀死的分支

105、杆菌和杀死的分支杆菌和杀死的分支杆菌( (如结核杆菌如结核杆菌如结核杆菌如结核杆菌) )等组成的佐剂。等组成的佐剂。等组成的佐剂。等组成的佐剂。 a. a. 完全氟氏佐剂：以上三种成分俱全的佐剂完全氟氏佐剂：以上三种成分俱全的佐剂完全氟氏佐剂：以上三种成分俱全的佐剂完全氟氏佐剂：以上三种成分俱全的佐剂 b. b. 不完全氟氏佐剂：不含分支杆菌的氟氏佐剂，其对不完全氟氏佐剂：不含分支杆菌的氟氏佐剂，其对不完全氟氏佐剂：不含分支杆菌的氟氏佐剂，其对不完全氟氏佐剂：不含分支杆菌的氟氏佐剂，其对机体刺激作用较弱机体刺激作用较弱机体刺激作用较弱机体刺激作用较弱免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫4) 4)

106、作用：作用：作用：作用： a. a. 增加抗原的免疫原性增加抗原的外表积；增加抗原的免疫原性增加抗原的外表积；增加抗原的免疫原性增加抗原的外表积；增加抗原的免疫原性增加抗原的外表积； b. b. 增强抗体对抗原的免疫应答能力；增强抗体对抗原的免疫应答能力；增强抗体对抗原的免疫应答能力；增强抗体对抗原的免疫应答能力； c. c. 改变抗体产生的类型；改变抗体产生的类型；改变抗体产生的类型；改变抗体产生的类型； d. d. 引起或增强引起或增强引起或增强引起或增强IVIV型超敏反响。型超敏反响。型超敏反响。型超敏反响。5) 5) 作用机制：作用机制尚未完全了解，主要可能有以下原因作用机制：作用机制

107、尚未完全了解，主要可能有以下原因作用机制：作用机制尚未完全了解，主要可能有以下原因作用机制：作用机制尚未完全了解，主要可能有以下原因 主要是促进淋巴细胞的增殖、分化，改变抗原的物理形状，主要是促进淋巴细胞的增殖、分化，改变抗原的物理形状，主要是促进淋巴细胞的增殖、分化，改变抗原的物理形状，主要是促进淋巴细胞的增殖、分化，改变抗原的物理形状，使抗原在体内维持较长时间，易于巨噬细胞的摄取、处理并使抗原在体内维持较长时间，易于巨噬细胞的摄取、处理并使抗原在体内维持较长时间，易于巨噬细胞的摄取、处理并使抗原在体内维持较长时间，易于巨噬细胞的摄取、处理并提呈给淋巴细胞，从而提高抗原的免疫原性，增强机体对

108、抗提呈给淋巴细胞，从而提高抗原的免疫原性，增强机体对抗提呈给淋巴细胞，从而提高抗原的免疫原性，增强机体对抗提呈给淋巴细胞，从而提高抗原的免疫原性，增强机体对抗原的应答能力。原的应答能力。原的应答能力。原的应答能力。6) 6) 使用方法：使用方法：使用方法：使用方法： 预先使用或与抗原同时使用预先使用或与抗原同时使用预先使用或与抗原同时使用预先使用或与抗原同时使用 免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫二、免疫球蛋白二、免疫球蛋白二、免疫球蛋白二、免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)(Immunoglobulin, Ig)1. 1. 免疫球蛋白与抗体的根本概念免疫球蛋白与抗体的根本概念免

109、疫球蛋白与抗体的根本概念免疫球蛋白与抗体的根本概念(1)(1)免疫球蛋白：指具有抗体活性或化学结构与抗体免疫球蛋白：指具有抗体活性或化学结构与抗体免疫球蛋白：指具有抗体活性或化学结构与抗体免疫球蛋白：指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。相似的球蛋白。相似的球蛋白。相似的球蛋白。 Ig Ig 过去称为过去称为过去称为过去称为 球蛋白，主要存在于血液和其他分球蛋白，主要存在于血液和其他分球蛋白，主要存在于血液和其他分球蛋白，主要存在于血液和其他分泌液中。泌液中。泌液中。泌液中。(2) (2) 膜外表免疫球蛋白膜外表免疫球蛋白膜外表免疫球蛋白膜外表免疫球蛋白(Surface membrane

110、 (Surface membrane immunoglobulin, SmIg)immunoglobulin, SmIg)：B B细胞膜上可作为抗原识细胞膜上可作为抗原识细胞膜上可作为抗原识细胞膜上可作为抗原识别受体的免疫球蛋白。别受体的免疫球蛋白。别受体的免疫球蛋白。别受体的免疫球蛋白。(3)(3)抗体抗体抗体抗体(Antibody, Ab)(Antibody, Ab)：机体免疫细胞被抗原激活后，：机体免疫细胞被抗原激活后，：机体免疫细胞被抗原激活后，：机体免疫细胞被抗原激活后，由分化成熟的终末由分化成熟的终末由分化成熟的终末由分化成熟的终末B B细浆细胞所合成与分泌的细浆细胞所合成与分泌的

111、细浆细胞所合成与分泌的细浆细胞所合成与分泌的一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球一类能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。蛋白。蛋白。蛋白。 抗体是重要的免疫分子，主要存在于血液、体抗体是重要的免疫分子，主要存在于血液、体抗体是重要的免疫分子，主要存在于血液、体抗体是重要的免疫分子，主要存在于血液、体液和粘膜分泌液中。液和粘膜分泌液中。液和粘膜分泌液中。液和粘膜分泌液中。 细胞免疫：由免疫细胞介导的免疫反响。细胞免疫：由免疫细胞介导的免疫反响。细胞免疫：由免疫细胞介导的免疫反响。细胞免疫：由

112、免疫细胞介导的免疫反响。 体液免疫：由抗体介导的免疫反响。体液免疫：由抗体介导的免疫反响。体液免疫：由抗体介导的免疫反响。体液免疫：由抗体介导的免疫反响。 抗体抗体抗体抗体 = = 免疫球蛋白？免疫球蛋白？免疫球蛋白？免疫球蛋白？Why?Why?免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫 抗体都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白并不都是抗体。抗体都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白并不都是抗体。抗体都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白并不都是抗体。抗体都是免疫球蛋白，但免疫球蛋白并不都是抗体。 如：骨髓瘤蛋白的化学结构与如：骨髓瘤蛋白的化学结构与如：骨髓瘤蛋白的化学结构与如：骨髓瘤蛋白的化学结构与AbAb相似相似相似相似( (

113、属属属属Ig)Ig)，但无抗体活性，无免疫功能；，但无抗体活性，无免疫功能；，但无抗体活性，无免疫功能；，但无抗体活性，无免疫功能； SmIgSmIg的化学结构与的化学结构与的化学结构与的化学结构与AbAb相似，能与相似，能与相似，能与相似，能与AgAg特异性结合，但它不是激活的特异性结合，但它不是激活的特异性结合，但它不是激活的特异性结合，但它不是激活的B B细胞产生。细胞产生。细胞产生。细胞产生。 免疫球蛋白是化学结构上的概念，但抗体是生物学功能上的概念。免疫球蛋白是化学结构上的概念，但抗体是生物学功能上的概念。免疫球蛋白是化学结构上的概念，但抗体是生物学功能上的概念。免疫球蛋白是化学结构

114、上的概念，但抗体是生物学功能上的概念。2. 2. 作为抗体必须具备的条件：作为抗体必须具备的条件：作为抗体必须具备的条件：作为抗体必须具备的条件： 1) 1) 只有脊椎动物的浆细胞才能产生；只有脊椎动物的浆细胞才能产生；只有脊椎动物的浆细胞才能产生；只有脊椎动物的浆细胞才能产生； 2) 2) 必须有抗原刺激；必须有抗原刺激；必须有抗原刺激；必须有抗原刺激； 3) 3) 能与相应抗原产生特异性结合；能与相应抗原产生特异性结合；能与相应抗原产生特异性结合；能与相应抗原产生特异性结合； 4) 4) 其化学本质是一种具免疫功能的球蛋白。其化学本质是一种具免疫功能的球蛋白。其化学本质是一种具免疫功能的球

115、蛋白。其化学本质是一种具免疫功能的球蛋白。免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫3. Ig3. Ig的化学结构的化学结构的化学结构的化学结构 HH链链链链V V区区区区 Ig Ig 分子是由一个或多个单体组成；分子是由一个或多个单体组成；分子是由一个或多个单体组成；分子是由一个或多个单体组成； L L链链链链V V区区区区 如：如：如：如：IgGIgG、IgDIgD和和和和IgE IgE 均为单体分子均为单体分子均为单体分子均为单体分子 L L链链链链C C区区区区 每个每个每个每个IgIg单体呈单体呈单体呈单体呈Y Y形对称结构。形对称结构。形对称结构。形对称结构。 HH链链链链C C区区区区 每

116、个单体是由二硫键连接的每个单体是由二硫键连接的每个单体是由二硫键连接的每个单体是由二硫键连接的四条肽链四条肽链四条肽链四条肽链组成；组成；组成；组成； 四条肽链包括四条肽链包括四条肽链包括四条肽链包括2 2条重链条重链条重链条重链(H(H链链链链) )和和和和2 2条轻链条轻链条轻链条轻链(L(L链链链链) )； IgIg单体的结构单体的结构单体的结构单体的结构 重链：重链：重链：重链：约由约由约由约由450450个或个或个或个或570570个氨基酸组成，它包括个氨基酸组成，它包括个氨基酸组成，它包括个氨基酸组成，它包括5 5类：类：类：类： 、 、 、 、 。 Ig Ig因重链的种类不同分为

117、因重链的种类不同分为因重链的种类不同分为因重链的种类不同分为5 5类：类：类：类： IgG ( IgG ( 链链链链) )，IgA (IgA ( 链链链链) )，IgM (IgM ( 链链链链) )，IgD (IgD ( 链链链链) )，IgE (IgE ( 链链链链) ) 轻链：轻链：轻链：轻链：约由约由约由约由214214个氨基酸组成，以二硫键与重链相连。它有个氨基酸组成，以二硫键与重链相连。它有个氨基酸组成，以二硫键与重链相连。它有个氨基酸组成，以二硫键与重链相连。它有2 2类：类：类：类： 型和型和型和型和 型型型型 每条肽链包括每条肽链包括每条肽链包括每条肽链包括可变区可变区可变区可

118、变区(V(V区区区区) ) 和和和和稳定区稳定区稳定区稳定区(C(C区区区区) )。重链可变区重链可变区重链可变区重链可变区(V(VHH) )和轻链可变区和轻链可变区和轻链可变区和轻链可变区(V(VL L) )都都都都是抗原特异性结合部位。在结构上与抗原结构互补是抗原特异性结合部位。在结构上与抗原结构互补是抗原特异性结合部位。在结构上与抗原结构互补是抗原特异性结合部位。在结构上与抗原结构互补( (因而又称因而又称因而又称因而又称互补决定区互补决定区互补决定区互补决定区) )免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫4. 4. 不同动物中不同动物中不同动物中不同动物中IgIg的类型的类型的类型的类型 根据

119、根据根据根据CHCH上同种型决定簇的不同，将上同种型决定簇的不同，将上同种型决定簇的不同，将上同种型决定簇的不同，将IgIg分为分为分为分为5 5种：种：种：种：IgAIgA、IgGIgG、IgMIgM、IgDIgD和和和和IgE.IgE.其中，其中，其中，其中，IgGIgG、IgAIgA和和和和IgMIgM又依又依又依又依CHCH氨基酸组成和氨基酸组成和氨基酸组成和氨基酸组成和HH链间二链间二链间二链间二硫键数目的差异，分成假设干亚类：硫键数目的差异，分成假设干亚类：硫键数目的差异，分成假设干亚类：硫键数目的差异，分成假设干亚类： IgG1 IgG1、IgG2IgG2、IgG3IgG3、Ig

120、G4IgG4；IgA1IgA1、IgA2IgA2；IgM1IgM1和和和和IgM2IgM2。1) 1) 哺乳类：哺乳类：哺乳类：哺乳类：a. a. 人、鼠：人、鼠：人、鼠：人、鼠：IgG, IgA, IgM, IgD, IgE;IgG, IgA, IgM, IgD, IgE; b. b. 兔：兔：兔：兔： IgG, IgA, IgM; IgG, IgA, IgM; c. c. 其他：其他：其他：其他：IgG, IgA, IgM, IgE;IgG, IgA, IgM, IgE; 2) 2) 鸟类：鸟类：鸟类：鸟类： IgG, IgA, IgM; IgG, IgA, IgM; 3) 3) 两栖类：

121、两栖类：两栖类：两栖类： IgG, IgM; IgG, IgM; 4) 4) 鱼类：鱼类：鱼类：鱼类： IgM; IgM; 5) 5) 无脊椎动物：无无脊椎动物：无无脊椎动物：无无脊椎动物：无IgIg免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫5. 5. 各种各种各种各种IgIg的特性与功能的特性与功能的特性与功能的特性与功能1) IgG1) IgG： a. a. 来源与性质：主要由脾和淋巴结的浆细胞合成，常以单来源与性质：主要由脾和淋巴结的浆细胞合成，常以单来源与性质：主要由脾和淋巴结的浆细胞合成，常以单来源与性质：主要由脾和淋巴结的浆细胞合成，常以单体形式存在于血清和其他血清中。它在人体的含量最高体形

122、式存在于血清和其他血清中。它在人体的含量最高体形式存在于血清和其他血清中。它在人体的含量最高体形式存在于血清和其他血清中。它在人体的含量最高(3/4)(3/4)、半衰期最长、半衰期最长、半衰期最长、半衰期最长(23d)(23d)、易透过毛细血管，因而可广、易透过毛细血管，因而可广、易透过毛细血管，因而可广、易透过毛细血管，因而可广泛分布到组织和其他体液中。分子量泛分布到组织和其他体液中。分子量泛分布到组织和其他体液中。分子量泛分布到组织和其他体液中。分子量1515万万万万Da.Da. b. b. 作用：作用：作用：作用：(1) (1) 抗感染作用，抗毒素及大多抗菌和抗病毒抗抗感染作用，抗毒素及

123、大多抗菌和抗病毒抗抗感染作用，抗毒素及大多抗菌和抗病毒抗抗感染作用，抗毒素及大多抗菌和抗病毒抗体均属体均属体均属体均属IgGIgG； IgG IgG还是唯一能通过胎盘的还是唯一能通过胎盘的还是唯一能通过胎盘的还是唯一能通过胎盘的IgIg，是新生儿抗，是新生儿抗，是新生儿抗，是新生儿抗感染的重要因素。感染的重要因素。感染的重要因素。感染的重要因素。 (2) (2) 不少自身抗体和引起不少自身抗体和引起不少自身抗体和引起不少自身抗体和引起IIII、IIIIII型变态反响的抗型变态反响的抗型变态反响的抗型变态反响的抗体也属体也属体也属体也属IgG;IgG; (3) IgG (3) IgG与补体结合后

124、可通过传统途径激活补体；与补体结合后可通过传统途径激活补体；与补体结合后可通过传统途径激活补体；与补体结合后可通过传统途径激活补体； (4) IgG (4) IgG能与巨噬细胞、中性粒细胞和能与巨噬细胞、中性粒细胞和能与巨噬细胞、中性粒细胞和能与巨噬细胞、中性粒细胞和NKNK细胞外细胞外细胞外细胞外表相应受体结合，表相应受体结合，表相应受体结合，表相应受体结合， 从而发挥调理吞噬和从而发挥调理吞噬和从而发挥调理吞噬和从而发挥调理吞噬和ADCCADCC效应。效应。效应。效应。免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫2) IgM2) IgM： a. a. 来源与性质：来源与性质：来源与性质：来源与性质：

125、(1) (1)主要由脾的浆细胞合成，它是由主要由脾的浆细胞合成，它是由主要由脾的浆细胞合成，它是由主要由脾的浆细胞合成，它是由5 5个个个个IgMIgM单体借一个单体借一个单体借一个单体借一个J J链和假链和假链和假链和假设干个二硫键连接而成的五聚体，是设干个二硫键连接而成的五聚体，是设干个二硫键连接而成的五聚体，是设干个二硫键连接而成的五聚体，是5 5类类类类IgIg中分子量最大的中分子量最大的中分子量最大的中分子量最大的(95(95万万万万Da)Da)，故称巨球蛋白。，故称巨球蛋白。，故称巨球蛋白。，故称巨球蛋白。 (2) (2) 它不能透过血管壁，主要分布于血液中，占血清它不能透过血管壁

126、，主要分布于血液中，占血清它不能透过血管壁，主要分布于血液中，占血清它不能透过血管壁，主要分布于血液中，占血清IgIg总量的总量的总量的总量的10%10%左右；左右；左右；左右； (3) (3) 为个体发育中合成最早的为个体发育中合成最早的为个体发育中合成最早的为个体发育中合成最早的IgIg，在胎儿晚期已能合成，但它不，在胎儿晚期已能合成，但它不，在胎儿晚期已能合成，但它不，在胎儿晚期已能合成，但它不能通过胎盘；能通过胎盘；能通过胎盘；能通过胎盘； (4) (4) 是人体免疫后最早出现的抗体；是人体免疫后最早出现的抗体；是人体免疫后最早出现的抗体；是人体免疫后最早出现的抗体； (5) IgM

127、(5) IgM是目前鱼类中唯一确认的抗体类型。是目前鱼类中唯一确认的抗体类型。是目前鱼类中唯一确认的抗体类型。是目前鱼类中唯一确认的抗体类型。 b. b. 作用：作用：作用：作用： 其作用与其作用与其作用与其作用与IgGIgG类似，具有杀菌、溶菌、调理吞噬及凝集作类似，具有杀菌、溶菌、调理吞噬及凝集作类似，具有杀菌、溶菌、调理吞噬及凝集作类似，具有杀菌、溶菌、调理吞噬及凝集作用等，不过，由于用等，不过，由于用等，不过，由于用等，不过，由于IgMIgM抗原结合效价最高，是高效能的抗菌抗抗原结合效价最高，是高效能的抗菌抗抗原结合效价最高，是高效能的抗菌抗抗原结合效价最高，是高效能的抗菌抗体，它的上

128、述作用均比体，它的上述作用均比体，它的上述作用均比体，它的上述作用均比IgGIgG强。强。强。强。免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫单体单体单体单体3) IgA3) IgA： (1) (1) 分为血清型分为血清型分为血清型分为血清型IgAIgA和分泌型和分泌型和分泌型和分泌型IgA(SIgA)IgA(SIgA)两种类型。前者两种类型。前者两种类型。前者两种类型。前者85%85%为单为单为单为单体，少数为含体，少数为含体，少数为含体，少数为含J J链的二聚体，主要由肠系膜淋巴组织浆细胞产链的二聚体，主要由肠系膜淋巴组织浆细胞产链的二聚体，主要由肠系膜淋巴组织浆细胞产链的二聚体，主要由肠系膜淋巴组织

129、浆细胞产生；后者为二聚体生；后者为二聚体生；后者为二聚体生；后者为二聚体( (双体双体双体双体) )。 (2) (2) 人体含量仅次于人体含量仅次于人体含量仅次于人体含量仅次于IgG (IgG (占占占占10- 15%)10- 15%)，分子量为，分子量为，分子量为，分子量为18-2018-20万万万万DaDa。 (3) (3) 是少数在消化道中不被消化的是少数在消化道中不被消化的是少数在消化道中不被消化的是少数在消化道中不被消化的PrPr之一；之一；之一；之一； (4) (4) 婴儿出生婴儿出生婴儿出生婴儿出生4-64-6个月后才能合成，但可从母乳中获得个月后才能合成，但可从母乳中获得个月后

130、才能合成，但可从母乳中获得个月后才能合成，但可从母乳中获得SIgA SIgA (5) SIgA (5) SIgA主要分布于呼吸道、消化道、泌尿生殖道粘膜外表以及主要分布于呼吸道、消化道、泌尿生殖道粘膜外表以及主要分布于呼吸道、消化道、泌尿生殖道粘膜外表以及主要分布于呼吸道、消化道、泌尿生殖道粘膜外表以及唾液、泪液、初乳和与粘膜相关的分泌液中，是局部粘膜防御唾液、泪液、初乳和与粘膜相关的分泌液中，是局部粘膜防御唾液、泪液、初乳和与粘膜相关的分泌液中，是局部粘膜防御唾液、泪液、初乳和与粘膜相关的分泌液中，是局部粘膜防御感染的重要因素；感染的重要因素；感染的重要因素；感染的重要因素； (6) (6)

131、 血清型血清型血清型血清型IgAIgA具有中和毒素、调理吞噬的作用。具有中和毒素、调理吞噬的作用。具有中和毒素、调理吞噬的作用。具有中和毒素、调理吞噬的作用。免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫4) IgD4) IgD：(1) (1) 以单体形式存在于血清中，含量低，仅占人体血清以单体形式存在于血清中，含量低，仅占人体血清以单体形式存在于血清中，含量低，仅占人体血清以单体形式存在于血清中，含量低，仅占人体血清IgIg总量的总量的总量的总量的1%1%。(2) (2) 结构与结构与结构与结构与IgGIgG类似，不能通过胎盘，也不能激活补体。类似，不能通过胎盘，也不能激活补体。类似，不能通过胎盘，也不能

132、激活补体。类似，不能通过胎盘，也不能激活补体。(3) (3) 血清中的血清中的血清中的血清中的IgDIgD功能尚不清楚，但功能尚不清楚，但功能尚不清楚，但功能尚不清楚，但B B细胞外表的细胞外表的细胞外表的细胞外表的IgD(SIgD)IgD(SIgD)是成熟是成熟是成熟是成熟B B细胞的重要标志，它是细胞的重要标志，它是细胞的重要标志，它是细胞的重要标志，它是B B细胞的抗细胞的抗细胞的抗细胞的抗原识别受体，在接受抗原刺激后对原识别受体，在接受抗原刺激后对原识别受体，在接受抗原刺激后对原识别受体，在接受抗原刺激后对B B细胞活化、增生细胞活化、增生细胞活化、增生细胞活化、增生和分化其调节作用；

133、和分化其调节作用；和分化其调节作用；和分化其调节作用； 5) IgE 5) IgE： (1) (1) 以单体形式存在于血清中，是系统进化最晚出现的以单体形式存在于血清中，是系统进化最晚出现的以单体形式存在于血清中，是系统进化最晚出现的以单体形式存在于血清中，是系统进化最晚出现的IgIg，也是含量最低的，也是含量最低的，也是含量最低的，也是含量最低的IgIg，仅占血清，仅占血清，仅占血清，仅占血清IgIg总量的总量的总量的总量的0.001%.0.001%. (2) (2) 在过敏性疾病和某些寄生虫感染病人血清中其含量在过敏性疾病和某些寄生虫感染病人血清中其含量在过敏性疾病和某些寄生虫感染病人血清

134、中其含量在过敏性疾病和某些寄生虫感染病人血清中其含量显著增高；显著增高；显著增高；显著增高； (3) (3) 产生部位与产生部位与产生部位与产生部位与SIgASIgA相似，主要由呼吸道如鼻咽、扁相似，主要由呼吸道如鼻咽、扁相似，主要由呼吸道如鼻咽、扁相似，主要由呼吸道如鼻咽、扁桃体、支气管桃体、支气管桃体、支气管桃体、支气管) )和胃肠道粘膜固有层的浆细胞产生。和胃肠道粘膜固有层的浆细胞产生。和胃肠道粘膜固有层的浆细胞产生。和胃肠道粘膜固有层的浆细胞产生。免疫：免疫：特异性免疫特异性免疫第四第四节节 免疫学方法及其免疫学方法及其应应用用一、根本概念一、根本概念1. 血清学反响：抗原与相血清学反

135、响：抗原与相应应抗体在体外抗体在体外发发生的特异性生的特异性结结合反响合反响;2. 免疫学反响：抗原与相免疫学反响：抗原与相应应抗体在体内抗体在体内发发生的特异性生的特异性结结合反响合反响;3. 抗原抗体反响：抗原与相抗原抗体反响：抗原与相应应抗体在体外抗体在体外或体内或体内发发生的特异性生的特异性结结合反响；合反响；4. 免疫免疫诊诊断学：用体液免疫和断学：用体液免疫和细细胞免疫的胞免疫的方法来方法来诊诊断有关疾病的科学。断有关疾病的科学。 二、血清学反响的特点二、血清学反响的特点 1. 特异性与交叉性：特异性与交叉性：a. 特异性：一种抗原特异性：一种抗原一般只能与其相一般只能与其相应应的

136、抗体的抗体结结合；合； b. 交叉性：当不同抗原具有相同抗原交叉性：当不同抗原具有相同抗原决定簇决定簇时时，其，其结结合又具有交叉性合又具有交叉性2.外表性与可逆性：外表性与可逆性：a. 外表性：抗原与抗外表性：抗原与抗体分子体分子结结合是分子外表的合是分子外表的结结合；合； b. 可逆性：抗原抗体可逆性：抗原抗体结结合后，在一定条合后，在一定条件下仍可分开，且其性件下仍可分开，且其性质质不不变变。可逆性是免疫吸附可逆性是免疫吸附层层析法提取析法提取免疫免疫纯纯抗原或抗体的理抗原或抗体的理论论根底。根底。Chapter 2. 免疫原理及免疫原理及应用用3. 3. 定比性：抗原与抗体需按一定的比

137、例结合定比性：抗原与抗体需按一定的比例结合定比性：抗原与抗体需按一定的比例结合定比性：抗原与抗体需按一定的比例结合 一般情况下，抗原外表的抗原决定簇是多价的，而一般情况下，抗原外表的抗原决定簇是多价的，而一般情况下，抗原外表的抗原决定簇是多价的，而一般情况下，抗原外表的抗原决定簇是多价的，而抗体上的抗抗体上的抗抗体上的抗抗体上的抗 原受体通常是单价的或二价的，二者只有以一定比例结原受体通常是单价的或二价的，二者只有以一定比例结原受体通常是单价的或二价的，二者只有以一定比例结原受体通常是单价的或二价的，二者只有以一定比例结合才能出现合才能出现合才能出现合才能出现 可见的血清学反响。可见的血清学反

138、响。可见的血清学反响。可见的血清学反响。4. 4. 阶段性阶段性阶段性阶段性: : 抗原抗体反响具有明显的阶段性抗原抗体反响具有明显的阶段性抗原抗体反响具有明显的阶段性抗原抗体反响具有明显的阶段性 1) 1) 抗原抗体的特异性结合阶段：时间短数秒，不可见抗原抗体的特异性结合阶段：时间短数秒，不可见抗原抗体的特异性结合阶段：时间短数秒，不可见抗原抗体的特异性结合阶段：时间短数秒，不可见 2) 2) 抗原与抗体反响的可见阶段：慢数分至数天，有凝集、抗原与抗体反响的可见阶段：慢数分至数天，有凝集、抗原与抗体反响的可见阶段：慢数分至数天，有凝集、抗原与抗体反响的可见阶段：慢数分至数天，有凝集、沉淀等沉

139、淀等沉淀等沉淀等5. 5. 高度敏感性：可用于检测极微量的抗原与抗体。如：高度敏感性：可用于检测极微量的抗原与抗体。如：高度敏感性：可用于检测极微量的抗原与抗体。如：高度敏感性：可用于检测极微量的抗原与抗体。如： 血清中和试验可用于检测含量低至血清中和试验可用于检测含量低至血清中和试验可用于检测含量低至血清中和试验可用于检测含量低至10-3 10-3 g / mlg / ml的鱼类病的鱼类病的鱼类病的鱼类病毒；毒；毒；毒； ELISA( ELISA(酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验) )可检测含量为可检测含量为可检测含量为可检测含量为10-3 10-3 g /

140、mlg / ml的的的的细菌性病原细菌性病原细菌性病原细菌性病原6. 6. 条件依赖性：抗原抗体间出现可见反响要提供最适的条件，如：条件依赖性：抗原抗体间出现可见反响要提供最适的条件，如：条件依赖性：抗原抗体间出现可见反响要提供最适的条件，如：条件依赖性：抗原抗体间出现可见反响要提供最适的条件，如： pH pH值值值值( (一般为一般为一般为一般为6-8)6-8)；温度；温度；温度；温度(37-45)(37-45)；适当的电解质；适当的电解质；适当的电解质；适当的电解质( (如生理如生理如生理如生理盐水盐水盐水盐水) )； 震荡震荡震荡震荡( (增加抗原抗体相互接触的时机增加抗原抗体相互接触的

141、时机增加抗原抗体相互接触的时机增加抗原抗体相互接触的时机) )等。等。等。等。免疫：免疫：免疫学方法及其免疫学方法及其应用用三、主要的抗原抗体反响三、主要的抗原抗体反响三、主要的抗原抗体反响三、主要的抗原抗体反响一凝集反响一凝集反响一凝集反响一凝集反响 Agglutination Agglutination1. 1. 定义：颗粒性抗原定义：颗粒性抗原定义：颗粒性抗原定义：颗粒性抗原( (如完整的红细胞或细菌如完整的红细胞或细菌如完整的红细胞或细菌如完整的红细胞或细菌) )与相应抗体与相应抗体与相应抗体与相应抗体结合，在一定条件下，经过一定时间形成肉眼可见的凝结合，在一定条件下，经过一定时间形成

142、肉眼可见的凝结合，在一定条件下，经过一定时间形成肉眼可见的凝结合，在一定条件下，经过一定时间形成肉眼可见的凝集物，称为凝集反响。集物，称为凝集反响。集物，称为凝集反响。集物，称为凝集反响。 用于凝集反响的抗原称为凝集原；用于凝集反响的用于凝集反响的抗原称为凝集原；用于凝集反响的用于凝集反响的抗原称为凝集原；用于凝集反响的用于凝集反响的抗原称为凝集原；用于凝集反响的抗体称凝集素抗体称凝集素抗体称凝集素抗体称凝集素2. 2. 种类种类种类种类: : (1)(1)直接凝集反响直接凝集反响直接凝集反响直接凝集反响(direct agglutination) (direct agglutination)

143、 ：颗粒性抗原直：颗粒性抗原直：颗粒性抗原直：颗粒性抗原直接与相应抗体结合所出现的凝集现象。接与相应抗体结合所出现的凝集现象。接与相应抗体结合所出现的凝集现象。接与相应抗体结合所出现的凝集现象。 玻片法：属定性试验，常用于细菌和玻片法：属定性试验，常用于细菌和玻片法：属定性试验，常用于细菌和玻片法：属定性试验，常用于细菌和ABOABO血型鉴定血型鉴定血型鉴定血型鉴定 试管法：属定量试验，用试管法：属定量试验，用试管法：属定量试验，用试管法：属定量试验，用AgAg测定血清中相应测定血清中相应测定血清中相应测定血清中相应AbAb及其数及其数及其数及其数量。在该试验量。在该试验量。在该试验量。在该试

144、验 中，将出现明显凝集反响的血清最高稀释中，将出现明显凝集反响的血清最高稀释中，将出现明显凝集反响的血清最高稀释中，将出现明显凝集反响的血清最高稀释度称为该抗体的效价或滴度。度称为该抗体的效价或滴度。度称为该抗体的效价或滴度。度称为该抗体的效价或滴度。免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法 (2) (2) 间接凝集反响间接凝集反响间接凝集反响间接凝集反响(indirect or passive agglutination) (indirect or passive agglutination) ：将可溶性抗原先吸：将可溶性抗原先吸：将可溶性抗原先吸：将可溶性抗原先吸附于一种与免疫无关的载体颗粒

145、外表，再与相应抗体作用，在适宜电解附于一种与免疫无关的载体颗粒外表，再与相应抗体作用，在适宜电解附于一种与免疫无关的载体颗粒外表，再与相应抗体作用，在适宜电解附于一种与免疫无关的载体颗粒外表，再与相应抗体作用，在适宜电解质存在时，出现载体颗粒被动凝集现象。质存在时，出现载体颗粒被动凝集现象。质存在时，出现载体颗粒被动凝集现象。质存在时，出现载体颗粒被动凝集现象。 常用载体有人常用载体有人常用载体有人常用载体有人OO型红细胞、乳胶颗粒、活性炭等，并因载体不同而分型红细胞、乳胶颗粒、活性炭等，并因载体不同而分型红细胞、乳胶颗粒、活性炭等，并因载体不同而分型红细胞、乳胶颗粒、活性炭等，并因载体不同而

146、分别称为间接血凝试验、间接乳凝试验和间接炭凝试验。别称为间接血凝试验、间接乳凝试验和间接炭凝试验。别称为间接血凝试验、间接乳凝试验和间接炭凝试验。别称为间接血凝试验、间接乳凝试验和间接炭凝试验。免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法二沉淀反响二沉淀反响二沉淀反响二沉淀反响(precipitation)(precipitation)1. 1. 定义：可溶性抗原定义：可溶性抗原定义：可溶性抗原定义：可溶性抗原( (如血清蛋白、多糖和细菌抽提液等如血清蛋白、多糖和细菌抽提液等如血清蛋白、多糖和细菌抽提液等如血清蛋白、多糖和细菌抽提液等) )与其与其与其与其相应抗体在适宜条件下出现肉眼可见沉淀物的现象

147、。相应抗体在适宜条件下出现肉眼可见沉淀物的现象。相应抗体在适宜条件下出现肉眼可见沉淀物的现象。相应抗体在适宜条件下出现肉眼可见沉淀物的现象。 用于沉淀反响的抗原称为沉淀原；用于沉淀反响的抗体称用于沉淀反响的抗原称为沉淀原；用于沉淀反响的抗体称用于沉淀反响的抗原称为沉淀原；用于沉淀反响的抗体称用于沉淀反响的抗原称为沉淀原；用于沉淀反响的抗体称沉淀素沉淀素沉淀素沉淀素 沉淀反响包括环状沉淀反响、絮状沉淀反响以及由此派沉淀反响包括环状沉淀反响、絮状沉淀反响以及由此派沉淀反响包括环状沉淀反响、絮状沉淀反响以及由此派沉淀反响包括环状沉淀反响、絮状沉淀反响以及由此派生出来的琼脂扩散免疫试验等。其中，前两者

148、敏感性不高，生出来的琼脂扩散免疫试验等。其中，前两者敏感性不高，生出来的琼脂扩散免疫试验等。其中，前两者敏感性不高，生出来的琼脂扩散免疫试验等。其中，前两者敏感性不高，已少用，派生方法现仍广泛应用。已少用，派生方法现仍广泛应用。已少用，派生方法现仍广泛应用。已少用，派生方法现仍广泛应用。2. 2. 沉淀反响的种类与应用：沉淀反响的种类与应用：沉淀反响的种类与应用：沉淀反响的种类与应用： 1) 1) 经典方法：经典方法：经典方法：经典方法： a. a. 环状沉淀反响：在小试管中参加抗血清环状沉淀反响：在小试管中参加抗血清环状沉淀反响：在小试管中参加抗血清环状沉淀反响：在小试管中参加抗血清 + +

149、 缓慢参加待测抗缓慢参加待测抗缓慢参加待测抗缓慢参加待测抗原原原原 ( (数数数数 分钟分钟分钟分钟) )结果：阳性结果：阳性结果：阳性结果：阳性 白色沉淀环；白色沉淀环；白色沉淀环；白色沉淀环； 阴性阴性阴性阴性 无无无无 b. b.絮状沉淀反响：将抗体与待测抗原混匀于试管或凹玻片絮状沉淀反响：将抗体与待测抗原混匀于试管或凹玻片絮状沉淀反响：将抗体与待测抗原混匀于试管或凹玻片絮状沉淀反响：将抗体与待测抗原混匀于试管或凹玻片结果：结果：结果：结果： 阳性阳性阳性阳性 絮状沉淀；絮状沉淀；絮状沉淀；絮状沉淀； 阴性阴性阴性阴性 无无无无免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法2) 2) 现代方法：

150、现代方法：现代方法：现代方法： a. a. 单免疫扩散单免疫扩散单免疫扩散单免疫扩散(single immunodiffusion)(single immunodiffusion)：将适当浓度的抗体：将适当浓度的抗体：将适当浓度的抗体：将适当浓度的抗体预先混在预先混在预先混在预先混在11.5% 11.5% 琼脂内制成凝胶板，再以适当距离在板上琼脂内制成凝胶板，再以适当距离在板上琼脂内制成凝胶板，再以适当距离在板上琼脂内制成凝胶板，再以适当距离在板上打孔，孔中参加待测抗原，当抗原向周围扩散时，与板上的打孔，孔中参加待测抗原，当抗原向周围扩散时，与板上的打孔，孔中参加待测抗原，当抗原向周围扩散时，

151、与板上的打孔，孔中参加待测抗原，当抗原向周围扩散时，与板上的抗体相遇，并在最适宜的比例处形成白色沉淀环。因沉淀环抗体相遇，并在最适宜的比例处形成白色沉淀环。因沉淀环抗体相遇，并在最适宜的比例处形成白色沉淀环。因沉淀环抗体相遇，并在最适宜的比例处形成白色沉淀环。因沉淀环直径与抗原浓度成正比，因此，假设先用浓度的抗原制作标直径与抗原浓度成正比，因此，假设先用浓度的抗原制作标直径与抗原浓度成正比，因此，假设先用浓度的抗原制作标直径与抗原浓度成正比，因此，假设先用浓度的抗原制作标准曲线，便可依沉淀环直径测定待测抗原浓度。准曲线，便可依沉淀环直径测定待测抗原浓度。准曲线，便可依沉淀环直径测定待测抗原浓度

152、。准曲线，便可依沉淀环直径测定待测抗原浓度。 结果：阳性结果：阳性结果：阳性结果：阳性 白色沉淀环；白色沉淀环；白色沉淀环；白色沉淀环； 阴性阴性阴性阴性 无无无无 b. b. 双向免疫扩散双向免疫扩散双向免疫扩散双向免疫扩散(double immunodiffusion)(double immunodiffusion)：预先制备琼脂板，：预先制备琼脂板，：预先制备琼脂板，：预先制备琼脂板，根据需要在琼脂板上打孔，再将抗原、抗体分别参加不同孔根据需要在琼脂板上打孔，再将抗原、抗体分别参加不同孔根据需要在琼脂板上打孔，再将抗原、抗体分别参加不同孔根据需要在琼脂板上打孔，再将抗原、抗体分别参加不同

153、孔内，使两者相互扩散，假设抗原抗体相对应，那么二者在适内，使两者相互扩散，假设抗原抗体相对应，那么二者在适内，使两者相互扩散，假设抗原抗体相对应，那么二者在适内，使两者相互扩散，假设抗原抗体相对应，那么二者在适宜比例处形成白色沉淀线。假设反响中有两种或两种以上抗宜比例处形成白色沉淀线。假设反响中有两种或两种以上抗宜比例处形成白色沉淀线。假设反响中有两种或两种以上抗宜比例处形成白色沉淀线。假设反响中有两种或两种以上抗原抗体系统，在琼脂中即可出现两条或两条以上的沉淀线。原抗体系统，在琼脂中即可出现两条或两条以上的沉淀线。原抗体系统，在琼脂中即可出现两条或两条以上的沉淀线。原抗体系统，在琼脂中即可出

154、现两条或两条以上的沉淀线。该方法可用来分析和鉴定复杂的抗原成分，或测定抗原、抗该方法可用来分析和鉴定复杂的抗原成分，或测定抗原、抗该方法可用来分析和鉴定复杂的抗原成分，或测定抗原、抗该方法可用来分析和鉴定复杂的抗原成分，或测定抗原、抗体提取物的纯度。缺点是所需时间较长和灵敏度不高。体提取物的纯度。缺点是所需时间较长和灵敏度不高。体提取物的纯度。缺点是所需时间较长和灵敏度不高。体提取物的纯度。缺点是所需时间较长和灵敏度不高。免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法c. c. 对流免疫电泳对流免疫电泳对流免疫电泳对流免疫电泳(Counter immunoelectrophoresis, CIE)(C

155、ounter immunoelectrophoresis, CIE)：为在双向琼：为在双向琼：为在双向琼：为在双向琼脂扩散的根底上进行电泳的方法。将琼脂板置于电泳槽内，在负脂扩散的根底上进行电泳的方法。将琼脂板置于电泳槽内，在负脂扩散的根底上进行电泳的方法。将琼脂板置于电泳槽内，在负脂扩散的根底上进行电泳的方法。将琼脂板置于电泳槽内，在负极端孔内加抗原，正极端孔内加抗体，然后通电。抗原在极端孔内加抗原，正极端孔内加抗体，然后通电。抗原在极端孔内加抗原，正极端孔内加抗体，然后通电。抗原在极端孔内加抗原，正极端孔内加抗体，然后通电。抗原在pH8.6pH8.6的的的的缓冲液中带负电荷，故向正极移动；

156、抗体为大分子球蛋白，移动缓冲液中带负电荷，故向正极移动；抗体为大分子球蛋白，移动缓冲液中带负电荷，故向正极移动；抗体为大分子球蛋白，移动缓冲液中带负电荷，故向正极移动；抗体为大分子球蛋白，移动慢，并受琼脂电渗影响由正极向负极移动，在两者相遇的适宜比慢，并受琼脂电渗影响由正极向负极移动，在两者相遇的适宜比慢，并受琼脂电渗影响由正极向负极移动，在两者相遇的适宜比慢，并受琼脂电渗影响由正极向负极移动，在两者相遇的适宜比例处出现白色沉淀线。因该法使抗原抗体相向而行，提高了敏感例处出现白色沉淀线。因该法使抗原抗体相向而行，提高了敏感例处出现白色沉淀线。因该法使抗原抗体相向而行，提高了敏感例处出现白色沉淀

157、线。因该法使抗原抗体相向而行，提高了敏感性，缺点是多组抗原抗体存在时沉淀线易重叠在一起，缺乏分辨性，缺点是多组抗原抗体存在时沉淀线易重叠在一起，缺乏分辨性，缺点是多组抗原抗体存在时沉淀线易重叠在一起，缺乏分辨性，缺点是多组抗原抗体存在时沉淀线易重叠在一起，缺乏分辨力。力。力。力。免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法三补体结合试验三补体结合试验三补体结合试验三补体结合试验1. 1. 定义：有补体参与，以绵羊红细胞和溶血素作指示系统定义：有补体参与，以绵羊红细胞和溶血素作指示系统定义：有补体参与，以绵羊红细胞和溶血素作指示系统定义：有补体参与，以绵羊红细胞和溶血素作指示系统的抗原抗体反响的抗原抗

158、体反响的抗原抗体反响的抗原抗体反响2. 2. 组成：有组成：有组成：有组成：有2 2个系统共个系统共个系统共个系统共5 5种成分种成分种成分种成分 1) 1) 检测系统：包括抗原检测系统：包括抗原检测系统：包括抗原检测系统：包括抗原( (或抗体或抗体或抗体或抗体) )和待测抗体和待测抗体和待测抗体和待测抗体( (或抗原或抗原或抗原或抗原) ) 2) 2) 指示系统：包括绵羊红细胞和溶血素指示系统：包括绵羊红细胞和溶血素指示系统：包括绵羊红细胞和溶血素指示系统：包括绵羊红细胞和溶血素( (绵羊红细胞的特绵羊红细胞的特绵羊红细胞的特绵羊红细胞的特异性抗体异性抗体异性抗体异性抗体) ) 3) 3)

159、补体：取自豚鼠的新鲜血清补体：取自豚鼠的新鲜血清补体：取自豚鼠的新鲜血清补体：取自豚鼠的新鲜血清3. 3. 补体结合反响的根本原理补体结合反响的根本原理补体结合反响的根本原理补体结合反响的根本原理 1) 1) 补体可与任何抗原抗体复合物相结合；补体可与任何抗原抗体复合物相结合；补体可与任何抗原抗体复合物相结合；补体可与任何抗原抗体复合物相结合； 2) 2) 指示系统遇补体后就出现明显的溶血反响指示系统遇补体后就出现明显的溶血反响指示系统遇补体后就出现明显的溶血反响指示系统遇补体后就出现明显的溶血反响免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法4. 4. 操作过程和结果操作过程和结果操作过程和结果操作

160、过程和结果1) 1) 阳性反响：阳性反响：阳性反响：阳性反响： + + 补体补体补体补体 抗原抗原抗原抗原( (体体体体)+)+待测抗体待测抗体待测抗体待测抗体( (原原原原) ) 抗原抗体复合物抗原抗体复合物抗原抗体复合物抗原抗体复合物 抗原抗体和抗原抗体和抗原抗体和抗原抗体和补体复合物补体复合物补体复合物补体复合物 + + 指示系统指示系统指示系统指示系统( (绵羊红细胞和溶血绵羊红细胞和溶血绵羊红细胞和溶血绵羊红细胞和溶血素复合物素复合物素复合物素复合物) ) 结果：因此时无游离的补体与指示系统结合不发生溶结果：因此时无游离的补体与指示系统结合不发生溶结果：因此时无游离的补体与指示系统结

161、合不发生溶结果：因此时无游离的补体与指示系统结合不发生溶血血血血2) 2) 阴性反响：阴性反响：阴性反响：阴性反响： + + 补体补体补体补体抗原抗原抗原抗原( (体体体体)+)+待测抗体待测抗体待测抗体待测抗体( (原原原原) ) 抗原抗原抗原抗原+ +抗体抗体抗体抗体 抗原抗原抗原抗原+ +抗体抗体抗体抗体+ +补体补体补体补体( (游离游离游离游离) ) + + 指示系统指示系统指示系统指示系统( (绵羊红细胞和溶血素复合绵羊红细胞和溶血素复合绵羊红细胞和溶血素复合绵羊红细胞和溶血素复合物物物物) ) 发生溶血发生溶血发生溶血发生溶血 绵羊红细胞、溶血素及补体复合绵羊红细胞、溶血素及补体

162、复合绵羊红细胞、溶血素及补体复合绵羊红细胞、溶血素及补体复合物物物物免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法四四四四 中和反响中和反响中和反响中和反响定义：特异性抗体与相应抗原结合后，能抑制抗原的定义：特异性抗体与相应抗原结合后，能抑制抗原的定义：特异性抗体与相应抗原结合后，能抑制抗原的定义：特异性抗体与相应抗原结合后，能抑制抗原的多种生物学活性如：毒性、酶活性和病毒感染性多种生物学活性如：毒性、酶活性和病毒感染性多种生物学活性如：毒性、酶活性和病毒感染性多种生物学活性如：毒性、酶活性和病毒感染性等的反响。等的反响。等的反响。等的反响。免疫：免疫：免疫学方法及其免疫学方法及其应用用四、现代免疫标

163、记技术四、现代免疫标记技术四、现代免疫标记技术四、现代免疫标记技术immunolabelling techniqueimmunolabelling technique 定义：将抗原或抗体用荧光素、酶、放射性同位素或电定义：将抗原或抗体用荧光素、酶、放射性同位素或电定义：将抗原或抗体用荧光素、酶、放射性同位素或电定义：将抗原或抗体用荧光素、酶、放射性同位素或电子致密物质等加以标记，以提高抗原抗体反响以及抗子致密物质等加以标记，以提高抗原抗体反响以及抗子致密物质等加以标记，以提高抗原抗体反响以及抗子致密物质等加以标记，以提高抗原抗体反响以及抗原或抗体检测灵敏度的一类新技术。免疫标记技术敏原或抗体检

164、测灵敏度的一类新技术。免疫标记技术敏原或抗体检测灵敏度的一类新技术。免疫标记技术敏原或抗体检测灵敏度的一类新技术。免疫标记技术敏感性高、特异性强、应用范围广感性高、特异性强、应用范围广感性高、特异性强、应用范围广感性高、特异性强、应用范围广 ( (抗原或抗体定量、抗原或抗体定量、抗原或抗体定量、抗原或抗体定量、定性、定位定性、定位定性、定位定性、定位) )一免疫荧光技术一免疫荧光技术一免疫荧光技术一免疫荧光技术immunofluorecence techniqueimmunofluorecence technique1. 1. 定义：用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗定义：用荧光物标记抗

165、体来检测细胞或组织中相应抗定义：用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗定义：用荧光物标记抗体来检测细胞或组织中相应抗原或抗体的技术，又称荧光抗体技术。原或抗体的技术，又称荧光抗体技术。原或抗体的技术，又称荧光抗体技术。原或抗体的技术，又称荧光抗体技术。2. 2. 荧光物种类：异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯荧光物种类：异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯荧光物种类：异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯荧光物种类：异硫氰酸荧光素、罗丹明荧光素、二氯三嗪基氨基荧光素等三嗪基氨基荧光素等三嗪基氨基荧光素等三嗪基氨基荧光素等3. 3. 种类：包括直接法、间接法和补体法种类：包括直接法、间接法和补体法种

166、类：包括直接法、间接法和补体法种类：包括直接法、间接法和补体法免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法例：直接法：将待测标本固定于玻片外表，滴加荧光抗体后再以缓例：直接法：将待测标本固定于玻片外表，滴加荧光抗体后再以缓例：直接法：将待测标本固定于玻片外表，滴加荧光抗体后再以缓例：直接法：将待测标本固定于玻片外表，滴加荧光抗体后再以缓冲液冲洗，枯燥后于荧光显微镜下观察。冲液冲洗，枯燥后于荧光显微镜下观察。冲液冲洗，枯燥后于荧光显微镜下观察。冲液冲洗，枯燥后于荧光显微镜下观察。 (1) (1) 过程：过程：过程：过程： + +待测抗原待测抗原待测抗原待测抗原 荧光素荧光素荧光素荧光素+ +抗体抗体抗

167、体抗体 荧光抗体荧光抗体荧光抗体荧光抗体 ( (一段时间后冲洗一段时间后冲洗一段时间后冲洗一段时间后冲洗) ) 荧光镜检测荧光镜检测荧光镜检测荧光镜检测结果：结果：结果：结果： (2) (2) 结果：阳性结果：阳性结果：阳性结果：阳性 可见带荧光的抗原抗体复合物；可见带荧光的抗原抗体复合物；可见带荧光的抗原抗体复合物；可见带荧光的抗原抗体复合物； 阴性阴性阴性阴性 无荧光无荧光无荧光无荧光 ( (因为带荧光的抗体不能与抗原结合，被因为带荧光的抗体不能与抗原结合，被因为带荧光的抗体不能与抗原结合，被因为带荧光的抗体不能与抗原结合，被冲洗掉冲洗掉冲洗掉冲洗掉) ) (3) (3) 用途：用以检测病

168、毒感染细胞、细菌和沉积于组织中的免疫复合用途：用以检测病毒感染细胞、细菌和沉积于组织中的免疫复合用途：用以检测病毒感染细胞、细菌和沉积于组织中的免疫复合用途：用以检测病毒感染细胞、细菌和沉积于组织中的免疫复合物等。物等。物等。物等。 (4) (4) 特点：简单、特异性高；敏感性低、同时检测多种抗原时较复杂。特点：简单、特异性高；敏感性低、同时检测多种抗原时较复杂。特点：简单、特异性高；敏感性低、同时检测多种抗原时较复杂。特点：简单、特异性高；敏感性低、同时检测多种抗原时较复杂。免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法( (二二二二) )免疫酶技术免疫酶技术免疫酶技术免疫酶技术(immunoenz

169、ymatic technique) or (immunoenzymatic technique) or 酶免疫测定酶免疫测定酶免疫测定酶免疫测定1. 1. 定义：用酶标记抗体或抗原来检测抗原或抗体的方法定义：用酶标记抗体或抗原来检测抗原或抗体的方法定义：用酶标记抗体或抗原来检测抗原或抗体的方法定义：用酶标记抗体或抗原来检测抗原或抗体的方法. .应用应用应用应用范围极广。范围极广。范围极广。范围极广。2. 2. 显示方法：用酶的特殊底物来处理反响后的标本，通过酶催显示方法：用酶的特殊底物来处理反响后的标本，通过酶催显示方法：用酶的特殊底物来处理反响后的标本，通过酶催显示方法：用酶的特殊底物来处理

170、反响后的标本，通过酶催化底物的显色反响来测定抗原或抗体的存在。以酶标依作定化底物的显色反响来测定抗原或抗体的存在。以酶标依作定化底物的显色反响来测定抗原或抗体的存在。以酶标依作定化底物的显色反响来测定抗原或抗体的存在。以酶标依作定量或定性分析。量或定性分析。量或定性分析。量或定性分析。3. 3. 标记酶：辣根过氧化物酶标记酶：辣根过氧化物酶标记酶：辣根过氧化物酶标记酶：辣根过氧化物酶HRPHRP和碱性磷酸酶；它们与抗和碱性磷酸酶；它们与抗和碱性磷酸酶；它们与抗和碱性磷酸酶；它们与抗原或抗体结合后活性不受影响。原或抗体结合后活性不受影响。原或抗体结合后活性不受影响。原或抗体结合后活性不受影响。4

171、. 4. 底物：邻苯二胺和对硝基苯磷酸酯。底物：邻苯二胺和对硝基苯磷酸酯。底物：邻苯二胺和对硝基苯磷酸酯。底物：邻苯二胺和对硝基苯磷酸酯。5. 5. 特点：敏感性高、特异性强，既可定性又可定量。特点：敏感性高、特异性强，既可定性又可定量。特点：敏感性高、特异性强，既可定性又可定量。特点：敏感性高、特异性强，既可定性又可定量。6. 6. 常用方法：目前应用最多的为酶联免疫吸附试验常用方法：目前应用最多的为酶联免疫吸附试验常用方法：目前应用最多的为酶联免疫吸附试验常用方法：目前应用最多的为酶联免疫吸附试验enzyme enzyme linked immusorbent assay, ELISA)

172、linked immusorbent assay, ELISA) ：是利用抗原或抗体能非：是利用抗原或抗体能非：是利用抗原或抗体能非：是利用抗原或抗体能非特异性吸附于聚苯乙烯等固相载体外表的特性，使抗原特异性吸附于聚苯乙烯等固相载体外表的特性，使抗原特异性吸附于聚苯乙烯等固相载体外表的特性，使抗原特异性吸附于聚苯乙烯等固相载体外表的特性，使抗原- -抗抗抗抗体反响在固相载体外表进行的一种免疫酶技术。它目前包括体反响在固相载体外表进行的一种免疫酶技术。它目前包括体反响在固相载体外表进行的一种免疫酶技术。它目前包括体反响在固相载体外表进行的一种免疫酶技术。它目前包括直接法、间接法、双抗体夹心法、双

173、夹心法、抗原竞争法、直接法、间接法、双抗体夹心法、双夹心法、抗原竞争法、直接法、间接法、双抗体夹心法、双夹心法、抗原竞争法、直接法、间接法、双抗体夹心法、双夹心法、抗原竞争法、抑制性测定法和桥联法等多种。抑制性测定法和桥联法等多种。抑制性测定法和桥联法等多种。抑制性测定法和桥联法等多种。免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法例例例例1. 1. 直接法：用于检测抗原或抗体特别是总抗体浓度直接法：用于检测抗原或抗体特别是总抗体浓度直接法：用于检测抗原或抗体特别是总抗体浓度直接法：用于检测抗原或抗体特别是总抗体浓度a. a. 用于检测抗原时：以不同稀释毒的待测样品用于检测抗原时：以不同稀释毒的待测样

174、品用于检测抗原时：以不同稀释毒的待测样品用于检测抗原时：以不同稀释毒的待测样品(Ag)(Ag)包被酶标板反响板，孵包被酶标板反响板，孵包被酶标板反响板，孵包被酶标板反响板，孵育后洗涤育后洗涤育后洗涤育后洗涤封闭酶标板，孵育后洗涤封闭酶标板，孵育后洗涤封闭酶标板，孵育后洗涤封闭酶标板，孵育后洗涤参加酶标抗体，孵育后洗涤参加酶标抗体，孵育后洗涤参加酶标抗体，孵育后洗涤参加酶标抗体，孵育后洗涤参参参参加底物，测定酶促反响强度。加底物，测定酶促反响强度。加底物，测定酶促反响强度。加底物，测定酶促反响强度。b.b.用于检测抗体待测样品中的总抗体时：以不同稀释毒的待测样品用于检测抗体待测样品中的总抗体时：

175、以不同稀释毒的待测样品用于检测抗体待测样品中的总抗体时：以不同稀释毒的待测样品用于检测抗体待测样品中的总抗体时：以不同稀释毒的待测样品(Ab)(Ab)包被酶标板反响板，孵育后洗涤包被酶标板反响板，孵育后洗涤包被酶标板反响板，孵育后洗涤包被酶标板反响板，孵育后洗涤封闭酶标板，孵育后洗涤封闭酶标板，孵育后洗涤封闭酶标板，孵育后洗涤封闭酶标板，孵育后洗涤参加酶标参加酶标参加酶标参加酶标抗抗体，孵育后洗涤抗抗体，孵育后洗涤抗抗体，孵育后洗涤抗抗体，孵育后洗涤参加底物，测定酶促反响强度。参加底物，测定酶促反响强度。参加底物，测定酶促反响强度。参加底物，测定酶促反响强度。 免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫

176、学方法例例例例2. 2. 双抗体夹心法：主要用于测定大分子抗原双抗体夹心法：主要用于测定大分子抗原双抗体夹心法：主要用于测定大分子抗原双抗体夹心法：主要用于测定大分子抗原过程：以纯化的特异性抗体或含抗体的血清包被酶标反响板，过程：以纯化的特异性抗体或含抗体的血清包被酶标反响板，过程：以纯化的特异性抗体或含抗体的血清包被酶标反响板，过程：以纯化的特异性抗体或含抗体的血清包被酶标反响板，孵育后洗涤孵育后洗涤孵育后洗涤孵育后洗涤封闭液封闭酶标板，孵育后洗涤封闭液封闭酶标板，孵育后洗涤封闭液封闭酶标板，孵育后洗涤封闭液封闭酶标板，孵育后洗涤参加待测样参加待测样参加待测样参加待测样品，孵育后洗涤品，孵育

177、后洗涤品，孵育后洗涤品，孵育后洗涤参加酶标抗体，孵育后洗涤参加酶标抗体，孵育后洗涤参加酶标抗体，孵育后洗涤参加酶标抗体，孵育后洗涤参加酶底物，参加酶底物，参加酶底物，参加酶底物，测定酶促反响强度。测定酶促反响强度。测定酶促反响强度。测定酶促反响强度。 加待测抗原加待测抗原加待测抗原加待测抗原 加酶标抗体加酶标抗体加酶标抗体加酶标抗体 抗体吸附抗体吸附抗体吸附抗体吸附 抗原抗体复合物抗原抗体复合物抗原抗体复合物抗原抗体复合物 酶联抗体抗原抗体复合物酶联抗体抗原抗体复合物酶联抗体抗原抗体复合物酶联抗体抗原抗体复合物免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法三放射免疫测定技术三放射免疫测定技术三放射免疫

178、测定技术三放射免疫测定技术 (Radioimmunoassay, RIA) (Radioimmunoassay, RIA) 1. 1. 定义：用放射性同位素标记来检测抗原抗体反响的高灵敏度定义：用放射性同位素标记来检测抗原抗体反响的高灵敏度定义：用放射性同位素标记来检测抗原抗体反响的高灵敏度定义：用放射性同位素标记来检测抗原抗体反响的高灵敏度的技术。的技术。的技术。的技术。2. 2. 原理与方法：其根本原理为：待测抗原和标记抗原对有限量原理与方法：其根本原理为：待测抗原和标记抗原对有限量原理与方法：其根本原理为：待测抗原和标记抗原对有限量原理与方法：其根本原理为：待测抗原和标记抗原对有限量抗体

179、存在竞争性结合：抗体存在竞争性结合：抗体存在竞争性结合：抗体存在竞争性结合： Ag* + Ab Ag*-Ab Ag* + Ab Ag*-Ab；Ag + Ab Ag + Ab Ag-AbAg-Ab (1) (1) 抗原用同位素抗原用同位素抗原用同位素抗原用同位素( (如如如如131I131I、3H3H等等等等) ) 标记后仍能与相应抗体特标记后仍能与相应抗体特标记后仍能与相应抗体特标记后仍能与相应抗体特异性结合；异性结合；异性结合；异性结合； (2) (2) 将两类抗原与抗体混合后，两类抗原均能与抗体结合，当将两类抗原与抗体混合后，两类抗原均能与抗体结合，当将两类抗原与抗体混合后，两类抗原均能与

180、抗体结合，当将两类抗原与抗体混合后，两类抗原均能与抗体结合，当Ag*Ag*和和和和AbAb数量恒定，且数量恒定，且数量恒定，且数量恒定，且Ag*Ag*与与与与AgAg之和大于之和大于之和大于之和大于AbAb上结合点数目时，上结合点数目时，上结合点数目时，上结合点数目时， Ag*Ag*与与与与Ag Ag 存在竞争抑制：存在竞争抑制：存在竞争抑制：存在竞争抑制：AgAg数量增加，数量增加，数量增加，数量增加，Ab-AbAb-Ab生成量增加，生成量增加，生成量增加，生成量增加， Ag*-AbAg*-Ab数量就减少，游离的数量就减少，游离的数量就减少，游离的数量就减少，游离的Ag*Ag*就增多。就增多

181、。就增多。就增多。 (3) (3) 用层析等方法将用层析等方法将用层析等方法将用层析等方法将Ag*-AbAg*-Ab和和和和Ag-AbAg-Ab复合物复合物复合物复合物(B)(B)与游离与游离与游离与游离Ag*Ag*和和和和Ag (F)Ag (F)别离，测定别离，测定别离，测定别离，测定B B和和和和F F的放射活性。计算的放射活性。计算的放射活性。计算的放射活性。计算B/FB/F值，绘制值，绘制值，绘制值，绘制B/FB/F和和和和AgAg量的关系曲线图。量的关系曲线图。量的关系曲线图。量的关系曲线图。 (4) (4) 预先用一系列浓度的未标记抗原和一定量的标记抗原及抗预先用一系列浓度的未标记

182、抗原和一定量的标记抗原及抗预先用一系列浓度的未标记抗原和一定量的标记抗原及抗预先用一系列浓度的未标记抗原和一定量的标记抗原及抗体混合，以相同方法绘制体混合，以相同方法绘制体混合，以相同方法绘制体混合，以相同方法绘制B/FB/F和和和和AgAg量的关系的标准竞争抑制量的关系的标准竞争抑制量的关系的标准竞争抑制量的关系的标准竞争抑制曲线图。曲线图。曲线图。曲线图。 (5) (5) 试验时，在同样条件下，根据待测试验时，在同样条件下，根据待测试验时，在同样条件下，根据待测试验时，在同样条件下，根据待测AgAg的放射性结合率，依的放射性结合率，依的放射性结合率，依的放射性结合率，依标准曲线查出标准曲线

183、查出标准曲线查出标准曲线查出AgAg量。量。量。量。免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法四荧光和化学发光免疫技术四荧光和化学发光免疫技术四荧光和化学发光免疫技术四荧光和化学发光免疫技术 A. A. 荧光免疫技术荧光免疫技术荧光免疫技术荧光免疫技术1. 1. 定义：用荧光素如异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明和四甲定义：用荧光素如异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明和四甲定义：用荧光素如异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明和四甲定义：用荧光素如异硫氰酸荧光素、四乙基罗丹明和四甲基异硫氰酸罗丹明标记来检测抗原抗体反响的免疫分析技基异硫氰酸罗丹明标记来检测抗原抗体反响的免疫分析技基异硫氰酸罗丹明标记来检测抗原抗体反响的

184、免疫分析技基异硫氰酸罗丹明标记来检测抗原抗体反响的免疫分析技术。术。术。术。2. 2. 种类：包括荧光免疫组织化学种类：包括荧光免疫组织化学种类：包括荧光免疫组织化学种类：包括荧光免疫组织化学( (如荧光抗体如荧光抗体如荧光抗体如荧光抗体) )技术和荧光免疫技术和荧光免疫技术和荧光免疫技术和荧光免疫测定。测定。测定。测定。B. B. 发光免疫分析发光免疫分析发光免疫分析发光免疫分析定义：利用物质的发光特征定义：利用物质的发光特征定义：利用物质的发光特征定义：利用物质的发光特征( (如辐射光波长、发光的光子数如辐射光波长、发光的光子数如辐射光波长、发光的光子数如辐射光波长、发光的光子数) )与与

185、与与产生辐射的物质分子的结构常数、构型、数量等密切相关，产生辐射的物质分子的结构常数、构型、数量等密切相关，产生辐射的物质分子的结构常数、构型、数量等密切相关，产生辐射的物质分子的结构常数、构型、数量等密切相关，通过受激分子发射的光谱，发光衰减常数、发光方向等来判通过受激分子发射的光谱，发光衰减常数、发光方向等来判通过受激分子发射的光谱，发光衰减常数、发光方向等来判通过受激分子发射的光谱，发光衰减常数、发光方向等来判断该分子的属性；通过发光强度来判断物质的量的免疫分析断该分子的属性；通过发光强度来判断物质的量的免疫分析断该分子的属性；通过发光强度来判断物质的量的免疫分析断该分子的属性；通过发光

186、强度来判断物质的量的免疫分析技术。技术。技术。技术。免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法五免疫电镜技术五免疫电镜技术五免疫电镜技术五免疫电镜技术1. 1. 定义：在保持抗体免疫性的前提下，用高电子密度的标记物定义：在保持抗体免疫性的前提下，用高电子密度的标记物定义：在保持抗体免疫性的前提下，用高电子密度的标记物定义：在保持抗体免疫性的前提下，用高电子密度的标记物如铁蛋白、金等，或用经细胞化学方法处理使电子密度如铁蛋白、金等，或用经细胞化学方法处理使电子密度如铁蛋白、金等，或用经细胞化学方法处理使电子密度如铁蛋白、金等，或用经细胞化学方法处理使电子密度增高的标记物如辣根过氧化物酶等酶类标记抗体

187、后，将增高的标记物如辣根过氧化物酶等酶类标记抗体后，将增高的标记物如辣根过氧化物酶等酶类标记抗体后，将增高的标记物如辣根过氧化物酶等酶类标记抗体后，将标记抗体与相应抗原结合，然后用电子显微镜观察的技术。标记抗体与相应抗原结合，然后用电子显微镜观察的技术。标记抗体与相应抗原结合，然后用电子显微镜观察的技术。标记抗体与相应抗原结合，然后用电子显微镜观察的技术。又称电子显微镜免疫细胞化学技术。又称电子显微镜免疫细胞化学技术。又称电子显微镜免疫细胞化学技术。又称电子显微镜免疫细胞化学技术。 2. 2. 种类：种类：种类：种类： (1) (1) 非包埋法免疫染色：该法是以超薄冷冻切片免疫染色。因非包埋法

188、免疫染色：该法是以超薄冷冻切片免疫染色。因非包埋法免疫染色：该法是以超薄冷冻切片免疫染色。因非包埋法免疫染色：该法是以超薄冷冻切片免疫染色。因该法不经脱水和包埋等步骤，抗原保护较好，且有利于免疫该法不经脱水和包埋等步骤，抗原保护较好，且有利于免疫该法不经脱水和包埋等步骤，抗原保护较好，且有利于免疫该法不经脱水和包埋等步骤，抗原保护较好，且有利于免疫试剂在组织中的渗透；但在技术上困难较多，需配制专用设试剂在组织中的渗透；但在技术上困难较多，需配制专用设试剂在组织中的渗透；但在技术上困难较多，需配制专用设试剂在组织中的渗透；但在技术上困难较多，需配制专用设备。备。备。备。 (2) (2) 包埋前免

189、疫染色：组织固定包埋前免疫染色：组织固定包埋前免疫染色：组织固定包埋前免疫染色：组织固定 厚切片厚切片厚切片厚切片免疫染色免疫染色免疫染色免疫染色 包埋包埋包埋包埋 超薄切片超薄切片超薄切片超薄切片 投射电镜观察。投射电镜观察。投射电镜观察。投射电镜观察。 (3) (3) 包埋后免疫染色：组织固定包埋后免疫染色：组织固定包埋后免疫染色：组织固定包埋后免疫染色：组织固定 包埋包埋包埋包埋超薄切片超薄切片超薄切片超薄切片免疫染色免疫染色免疫染色免疫染色 EM EM观察。观察。观察。观察。免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法免疫免疫应用：用：免疫学方法免疫学方法第五第五节 免疫学原理在免疫学原理在

190、鱼虾病害防治中的病害防治中的应用用一、用于疾病的一、用于疾病的诊断断 免疫免疫诊断方法有断方法有二二类1.用抗原用抗原诊断病原：用抗原与从患病断病原：用抗原与从患病动物中提取物中提取的抗体的抗体进行血清学反响，以确定病原种行血清学反响，以确定病原种类。该法只能用于病体已法只能用于病体已产生抗体的生抗体的诊断。断。2.用抗体用抗体诊断病原：将抗体与从病体中断病原：将抗体与从病体中别离的病离的病原原进行血清学反响，以确定病原的种行血清学反响，以确定病原的种类，该法法适于所有被适于所有被诊断断动物。物。二、用于疾病的治疗二、用于疾病的治疗二、用于疾病的治疗二、用于疾病的治疗 利用被动免疫，即给患病动

191、物接种抗体进行应急治疗。利用被动免疫，即给患病动物接种抗体进行应急治疗。利用被动免疫，即给患病动物接种抗体进行应急治疗。利用被动免疫，即给患病动物接种抗体进行应急治疗。过程：先将抗原疫苗注入同种或其他种动物机体，过程：先将抗原疫苗注入同种或其他种动物机体，过程：先将抗原疫苗注入同种或其他种动物机体，过程：先将抗原疫苗注入同种或其他种动物机体，1-1-4 4周后从接种动物的血液等部位提取抗体或制备卵黄周后从接种动物的血液等部位提取抗体或制备卵黄周后从接种动物的血液等部位提取抗体或制备卵黄周后从接种动物的血液等部位提取抗体或制备卵黄抗体，并将提取的抗体接种到患病动物中进行疾病治抗体，并将提取的抗体

192、接种到患病动物中进行疾病治抗体，并将提取的抗体接种到患病动物中进行疾病治抗体，并将提取的抗体接种到患病动物中进行疾病治疗。疗。疗。疗。三、用于疾病的预防三、用于疾病的预防三、用于疾病的预防三、用于疾病的预防水产动物免疫最重要的应用方向为研制疫苗进行疾病的预水产动物免疫最重要的应用方向为研制疫苗进行疾病的预水产动物免疫最重要的应用方向为研制疫苗进行疾病的预水产动物免疫最重要的应用方向为研制疫苗进行疾病的预防防防防在水产养殖动物中，由于只有鱼类、两栖类和爬行类等脊在水产养殖动物中，由于只有鱼类、两栖类和爬行类等脊在水产养殖动物中，由于只有鱼类、两栖类和爬行类等脊在水产养殖动物中，由于只有鱼类、两栖

193、类和爬行类等脊椎动物椎动物椎动物椎动物 才能在接种抗原后产生抗体，目前因此也认为只有这些才能在接种抗原后产生抗体，目前因此也认为只有这些才能在接种抗原后产生抗体，目前因此也认为只有这些才能在接种抗原后产生抗体，目前因此也认为只有这些动物才能用免疫学方法进行疾病的预防。动物才能用免疫学方法进行疾病的预防。动物才能用免疫学方法进行疾病的预防。动物才能用免疫学方法进行疾病的预防。免疫：免疫：免疫学原理的免疫学原理的应用用一鱼用疫苗的种类一鱼用疫苗的种类一鱼用疫苗的种类一鱼用疫苗的种类 A. A. 根据疫苗的获得方法来分：根据疫苗的获得方法来分：根据疫苗的获得方法来分：根据疫苗的获得方法来分： 1.

194、1. 死疫苗死疫苗死疫苗死疫苗( (灭活疫苗灭活疫苗灭活疫苗灭活疫苗) )：热灭活、化学灭活、紫外线灭活、超声灭活等：热灭活、化学灭活、紫外线灭活、超声灭活等：热灭活、化学灭活、紫外线灭活、超声灭活等：热灭活、化学灭活、紫外线灭活、超声灭活等 优点：平安性好，制造简单；优点：平安性好，制造简单；优点：平安性好，制造简单；优点：平安性好，制造简单； 缺点：免疫剂量大，免疫持久性差。缺点：免疫剂量大，免疫持久性差。缺点：免疫剂量大，免疫持久性差。缺点：免疫剂量大，免疫持久性差。 2. 2. 活疫苗：包括弱毒疫苗和异种疫苗活疫苗：包括弱毒疫苗和异种疫苗活疫苗：包括弱毒疫苗和异种疫苗活疫苗：包括弱毒疫

195、苗和异种疫苗 优点：弱毒疫苗优点：弱毒疫苗优点：弱毒疫苗优点：弱毒疫苗 免疫原性好，免疫剂量少，持续时间长免疫原性好，免疫剂量少，持续时间长免疫原性好，免疫剂量少，持续时间长免疫原性好，免疫剂量少，持续时间长 异种疫苗异种疫苗异种疫苗异种疫苗 平安性好，免疫时间长。平安性好，免疫时间长。平安性好，免疫时间长。平安性好，免疫时间长。 缺点：弱毒疫苗缺点：弱毒疫苗缺点：弱毒疫苗缺点：弱毒疫苗 平安性差平安性差平安性差平安性差 异种疫苗异种疫苗异种疫苗异种疫苗 获得比较困难获得比较困难获得比较困难获得比较困难 3. 3. 化学疫苗：以化学方法提取病菌有效成分化学疫苗：以化学方法提取病菌有效成分化学疫

196、苗：以化学方法提取病菌有效成分化学疫苗：以化学方法提取病菌有效成分( (如如如如LPS)LPS)制成制成制成制成 优点：免疫剂量小，免疫原性强，作用稳定；优点：免疫剂量小，免疫原性强，作用稳定；优点：免疫剂量小，免疫原性强，作用稳定；优点：免疫剂量小，免疫原性强，作用稳定； 缺点：制造较复杂，本钱稍高。缺点：制造较复杂，本钱稍高。缺点：制造较复杂，本钱稍高。缺点：制造较复杂，本钱稍高。免疫：免疫：免疫学原理的免疫学原理的应用用 4. 亚单位疫苗：病原微生物中能使机体产生免疫保护力的成亚单位疫苗：病原微生物中能使机体产生免疫保护力的成分只占病原体小局部，将这些成分别离出来制成的疫苗为亚分只占病原

197、体小局部，将这些成分别离出来制成的疫苗为亚单位疫苗。单位疫苗。 优点：可除去有害成分，减少异常反响，提高免疫效果；优点：可除去有害成分，减少异常反响，提高免疫效果； 缺点：制造过程复杂、本钱高。缺点：制造过程复杂、本钱高。5. 基因工程疫苗：将病原的主要免疫原性蛋白的密码基因基因工程疫苗：将病原的主要免疫原性蛋白的密码基因DNA 转移、重组后获得转移、重组后获得 优点：易于规模生产，本钱低；优点：易于规模生产，本钱低； 缺点：研究周期长，免疫原成分单一，产生抗体量小。缺点：研究周期长，免疫原成分单一，产生抗体量小。 6. 合成疫苗：将具有保护性免疫力的人工合成肽与适当载体合成疫苗：将具有保护性

198、免疫力的人工合成肽与适当载体结合后，再参加佐剂制成的疫苗称为合成疫苗结合后，再参加佐剂制成的疫苗称为合成疫苗 优点：作用效果好，易于规模生产；优点：作用效果好，易于规模生产； 缺点：研究难度大。缺点：研究难度大。免疫：免疫：免疫学原理的免疫学原理的应用用B. B. 根据疫苗的性质和组成成分来分：根据疫苗的性质和组成成分来分：根据疫苗的性质和组成成分来分：根据疫苗的性质和组成成分来分： 1 1. . 单价疫苗：单价疫苗：单价疫苗：单价疫苗：由单一病菌培养制备的疫苗由单一病菌培养制备的疫苗由单一病菌培养制备的疫苗由单一病菌培养制备的疫苗 2. 2. 多价疫苗：多价疫苗：多价疫苗：多价疫苗：由同一种

199、病菌的不同型或不同株培养制备的疫苗由同一种病菌的不同型或不同株培养制备的疫苗由同一种病菌的不同型或不同株培养制备的疫苗由同一种病菌的不同型或不同株培养制备的疫苗 3. 3. 联苗联苗联苗联苗( (混合疫苗混合疫苗混合疫苗混合疫苗) )：由一种以上的病菌或其代谢产物制备的疫苗由一种以上的病菌或其代谢产物制备的疫苗由一种以上的病菌或其代谢产物制备的疫苗由一种以上的病菌或其代谢产物制备的疫苗 如：二联疫苗、三联疫苗如：二联疫苗、三联疫苗如：二联疫苗、三联疫苗如：二联疫苗、三联疫苗 C. C. 根据抗原类别来分：根据抗原类别来分：根据抗原类别来分：根据抗原类别来分： 1 1. . 病毒疫苗：病毒疫苗：

200、病毒疫苗：病毒疫苗：如草鱼出血病疫苗如草鱼出血病疫苗如草鱼出血病疫苗如草鱼出血病疫苗 2. 2. 细菌疫苗：细菌疫苗：细菌疫苗：细菌疫苗：如石斑鱼创伤弧菌疫苗如石斑鱼创伤弧菌疫苗如石斑鱼创伤弧菌疫苗如石斑鱼创伤弧菌疫苗 3. 3. 寄生虫疫苗：寄生虫疫苗：寄生虫疫苗：寄生虫疫苗：如小瓜虫疫苗如小瓜虫疫苗如小瓜虫疫苗如小瓜虫疫苗免疫：免疫：免疫学原理的免疫学原理的应用用二鱼用疫苗的接种方法二鱼用疫苗的接种方法二鱼用疫苗的接种方法二鱼用疫苗的接种方法 1. 1. 注射法：将疫苗直接注射到肌肉、腹腔或心脏的免疫接种方注射法：将疫苗直接注射到肌肉、腹腔或心脏的免疫接种方注射法：将疫苗直接注射到肌肉、腹

201、腔或心脏的免疫接种方注射法：将疫苗直接注射到肌肉、腹腔或心脏的免疫接种方法。法。法。法。 优点：免疫效果好；优点：免疫效果好；优点：免疫效果好；优点：免疫效果好； 缺点：操作困难，易损伤接种鱼类，幼鱼无法使用。缺点：操作困难，易损伤接种鱼类，幼鱼无法使用。缺点：操作困难，易损伤接种鱼类，幼鱼无法使用。缺点：操作困难，易损伤接种鱼类，幼鱼无法使用。 2. 2. 口服法：将疫苗通过投喂的方法接种到鱼类机体口服法：将疫苗通过投喂的方法接种到鱼类机体口服法：将疫苗通过投喂的方法接种到鱼类机体口服法：将疫苗通过投喂的方法接种到鱼类机体 优点：操作简单；优点：操作简单；优点：操作简单；优点：操作简单； 缺

202、点：免疫效果不稳定因消化液对疫苗的消化分解缺点：免疫效果不稳定因消化液对疫苗的消化分解缺点：免疫效果不稳定因消化液对疫苗的消化分解缺点：免疫效果不稳定因消化液对疫苗的消化分解 3. 3. 浸泡法：将鱼类浸泡于疫苗溶液中以到达免疫接种目的浸泡法：将鱼类浸泡于疫苗溶液中以到达免疫接种目的浸泡法：将鱼类浸泡于疫苗溶液中以到达免疫接种目的浸泡法：将鱼类浸泡于疫苗溶液中以到达免疫接种目的 优点：操作简单；优点：操作简单；优点：操作简单；优点：操作简单； 缺点：免疫效果不稳定因浸泡进入机体的疫苗数量有限缺点：免疫效果不稳定因浸泡进入机体的疫苗数量有限缺点：免疫效果不稳定因浸泡进入机体的疫苗数量有限缺点：免

203、疫效果不稳定因浸泡进入机体的疫苗数量有限免疫：免疫：免疫学原理的免疫学原理的应用用 4. 喷雾法：将疫苗以高压喷射到接种生物体表以进行免疫的方喷雾法：将疫苗以高压喷射到接种生物体表以进行免疫的方法。法。 优点：操作简单；优点：操作简单； 缺点：免疫效果差。缺点：免疫效果差。 5. 其他方法：如超声免疫法等，该法是在浸泡法根底上外加超其他方法：如超声免疫法等，该法是在浸泡法根底上外加超声作用而实施的接种方法，目前尚在探索中。声作用而实施的接种方法，目前尚在探索中。三几种常见鱼类疫苗的制备方法三几种常见鱼类疫苗的制备方法 1. 病毒性疫苗组织苗的制备方法病毒性疫苗组织苗的制备方法 匀浆匀浆, 30

204、00rpm,30min 上清液上清液+(800单位青霉单位青霉素素+800单位链霉素单位链霉素)/ml病鱼组织病鱼组织+生理盐水生理盐水 沉淀沉淀 加加1 福尔马林，福尔马林，32 72h 平安检测平安检测 冷冻保存冷冻保存 组织苗组织苗 效力检测效力检测免疫：免疫：免疫学原理的免疫学原理的应用用2. 2. 细菌灭活疫苗的制备方法细菌灭活疫苗的制备方法细菌灭活疫苗的制备方法细菌灭活疫苗的制备方法 扩大培养扩大培养扩大培养扩大培养 5000rpm, 30min, PBS 5000rpm, 30min, PBS配制配制配制配制 病原菌病原菌病原菌病原菌 大量病菌大量病菌大量病菌大量病菌 1% 1%

205、菌悬液菌悬液菌悬液菌悬液 活菌检测活菌检测活菌检测活菌检测 平安检测平安检测平安检测平安检测 4-10 4-10福尔福尔福尔福尔马林马林马林马林 毒性检测毒性检测毒性检测毒性检测 4, 24h 4, 24h 疫苗疫苗疫苗疫苗 抗体效价检测抗体效价检测抗体效价检测抗体效价检测 免疫效果检测免疫效果检测免疫效果检测免疫效果检测 0.1 0.1叠氮叠氮叠氮叠氮钠钠钠钠 攻毒试验攻毒试验攻毒试验攻毒试验 4 4保存保存保存保存 免疫：免疫：免疫学原理的免疫学原理的应用用3. 3. 脂多糖脂多糖脂多糖脂多糖(LPS)(LPS)疫苗的制备疫苗的制备疫苗的制备疫苗的制备( (主要针对主要针对主要针对主要针对

206、G-)G-) 0.5-1%formalin, 0.5-1%formalin, 上清液上清液上清液上清液 加加加加PBSPBS病菌扩大培养病菌扩大培养病菌扩大培养病菌扩大培养 5000rpm, 30min 5000rpm, 30min 沉淀沉淀沉淀沉淀 灭灭灭灭活菌悬液活菌悬液活菌悬液活菌悬液 4, 4, 透析透析透析透析3d 3d 90%90%苯酚苯酚苯酚苯酚(1:1)(1:1) LPS LPS水溶液水溶液水溶液水溶液 水层水层水层水层 65, 10min65, 10min 聚乙二醇聚乙二醇聚乙二醇聚乙二醇2000 2000 中间层中间层中间层中间层 混合液混合液混合液混合液 苯酚层苯酚层苯酚

207、层苯酚层 10000rpm, 30min 10000rpm, 30min浓缩浓缩浓缩浓缩LPSLPS溶液溶液溶液溶液 冷冻枯燥冷冻枯燥冷冻枯燥冷冻枯燥 粗制粗制粗制粗制LPS LPSLPS LPS疫苗疫苗疫苗疫苗 PBS PBS溶解，加热去毒溶解，加热去毒溶解，加热去毒溶解，加热去毒免疫：免疫：免疫学原理的免疫学原理的应用用四鱼类免疫应答的过程四鱼类免疫应答的过程四鱼类免疫应答的过程四鱼类免疫应答的过程 1. 1. 硬骨鱼类参与免疫应答的细胞和器官硬骨鱼类参与免疫应答的细胞和器官硬骨鱼类参与免疫应答的细胞和器官硬骨鱼类参与免疫应答的细胞和器官 1) 1) 参与免疫反响的细胞：巨噬细胞、淋巴细胞

208、、浆细胞参与免疫反响的细胞：巨噬细胞、淋巴细胞、浆细胞参与免疫反响的细胞：巨噬细胞、淋巴细胞、浆细胞参与免疫反响的细胞：巨噬细胞、淋巴细胞、浆细胞 2) 2) 参与免疫反响的器官：胸腺、肾参与免疫反响的器官：胸腺、肾参与免疫反响的器官：胸腺、肾参与免疫反响的器官：胸腺、肾( (主要为头肾主要为头肾主要为头肾主要为头肾) )、脾等。、脾等。、脾等。、脾等。 2. 2. 鱼类免疫应答的根本过程鱼类免疫应答的根本过程鱼类免疫应答的根本过程鱼类免疫应答的根本过程 识别识别识别识别 吞噬或胞饮，送至吞噬或胞饮，送至吞噬或胞饮，送至吞噬或胞饮，送至 抗原进入机体抗原进入机体抗原进入机体抗原进入机体 巨噬细

209、胞巨噬细胞巨噬细胞巨噬细胞 脾和肾脾和肾脾和肾脾和肾等器官等器官等器官等器官 吸收吸收吸收吸收积累积累积累积累 产生产生产生产生 细胞免疫和体液免疫细胞免疫和体液免疫细胞免疫和体液免疫细胞免疫和体液免疫 淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞 抗原信息抗原信息抗原信息抗原信息 增殖、产生增殖、产生增殖、产生增殖、产生 传递传递传递传递免疫：免疫：免疫学原理的免疫学原理的应用用 3. 影响鱼类免疫应答的因素影响鱼类免疫应答的因素 1) 抗原方面的因素：包括疫苗性质、接种数量和接种方法等抗原方面的因素：包括疫苗性质、接种数量和接种方法等 2) 接种生物的因素：包括年龄、大小、生理状态、营养状况等接种生物

210、的因素：包括年龄、大小、生理状态、营养状况等 3) 环境因素：包括温度、季节、光照及水质环境因素等环境因素：包括温度、季节、光照及水质环境因素等 4) 佐剂的影响：有些佐剂能非特异性增强或改变疫苗免疫应答佐剂的影响：有些佐剂能非特异性增强或改变疫苗免疫应答效果。效果。五鱼类免疫效果的检测方法五鱼类免疫效果的检测方法1. 免疫保护效果检测：接种疫苗免疫保护效果检测：接种疫苗(2-4周周)致病菌攻毒致病菌攻毒(10-20d)成活率成活率2. 免疫抗体效价检测：接种疫苗免疫抗体效价检测：接种疫苗(2-4周周)取血取血(1000rpm, 5min)上清液上清液 微量血凝板倍稀，参加抗原微量血凝板倍稀，

211、参加抗原(疫苗疫苗) (37反响反响2h后后4孵育孵育过夜过夜 ) 结果结果 凝集抗体效价的判断：出现凝集反响的最低浓度的稀释倍数就凝集抗体效价的判断：出现凝集反响的最低浓度的稀释倍数就是其凝集是其凝集 抗体效价抗体效价免疫：免疫：免疫学原理的免疫学原理的应用用练习题：1. 名名词解解释： 免疫、非特异性免疫、特异免疫、非特异性免疫、特异性免疫、抗原、抗体、佐性免疫、抗原、抗体、佐剂、 抗原决定簇、血清学反响、免疫学反抗原决定簇、血清学反响、免疫学反响、抗原抗体反响、凝集反响、响、抗原抗体反响、凝集反响、 沉淀反响、免疫沉淀反响、免疫荧光技光技术、免疫、免疫酶技技术、多价疫苗、免疫、多价疫苗、

212、免疫标记技技术2. 水水产动物免疫的种物免疫的种类及其功能如何？自及其功能如何？自动免疫和被免疫和被动免疫有哪些区免疫有哪些区别？3. 简述水述水产动物免疫的特点及在病害防治物免疫的特点及在病害防治中的意中的意义。4. 水水产动物的非特异性免疫有哪些？它物的非特异性免疫有哪些？它们各有什么主要作用？各有什么主要作用？5.抗原的主要特性有哪些？作抗原的主要特性有哪些？作为抗体抗体应具具备的条件有哪些？的条件有哪些？6. 血清学反响有哪些特点？血清学反响有哪些特点？7. 免疫学原理在水免疫学原理在水产病害防治中有哪些方病害防治中有哪些方面的面的应用？用？8. 主要的抗原抗体反响和主要的抗原抗体反响和现代免疫代免疫标记技技术有哪些？有哪些？9. 以双抗体以双抗体夹心法心法为例，例，简述用述用ELISA法法检测水水产动物病原的主要物病原的主要过程？程？10. 水水产动物疫苗分物疫苗分为哪些哪些类型？它型？它们各有各有哪些哪些优缺点？缺点？11. 鱼用疫苗的接种方法有哪些？它用疫苗的接种方法有哪些？它们各有各有哪些哪些优缺点？缺点？12. 分分别简述水述水产动物病毒性疫苗、物病毒性疫苗、细菌性菌性疫苗和疫苗和LPS疫苗的制疫苗的制备过程？程？Chapter 2. 水水产动物免疫及其物免疫及其应用用