溶出度高级课程溶出度高级课程验证－化学分析 •验证总体的一部分验证总体的一部分•ICH Q2(R1)规定参数规定参数•USP<1092>提供额外帮助提供额外帮助•验证参数验证参数•验证标准验证标准•贯彻药品生命的验证理念贯彻药品生命的验证理念 •验证总体的一部分验证总体的一部分•期望高精密度值期望高精密度值•差异总体影响因素差异总体影响因素•ICH Q2(R1)提供了清晰的指南提供了清晰的指南•不要忘记溶出程序的其他部分：不要忘记溶出程序的其他部分： 溶出测试本身 溶出测试本身 取样方法 取样方法 转移，处理和保存 转移，处理和保存 分析结果的计算 分析结果的计算 - 不需要 不需要+ 需要 需要(1)如果做了重复性就无需如果做了重复性就无需做中间精密度做中间精密度分析程序类别 含量测定-溶出度(仅指测定)-含量/效价参数参数 精确度精确度+精密度精密度重复性重复性中间精密度中间精密度 ++(1) 专属性专属性 +检测性性-定量限定量限-线形形+范范围+ •举例举例１空白：所有辅料包括包衣１空白：所有辅料包括包衣２三批空白混合样品，与最大规格和最小 ２三批空白混合样品，与最大规格和最小 规格比例一致规格比例一致３适当时加入墨印，沉降篮，胶囊壳３适当时加入墨印，沉降篮，胶囊壳４转移至装有４转移至装有37℃溶出介质的单个溶出杯中溶出介质的单个溶出杯中５采用该方法装置在５采用该方法装置在150rpm转动转动30至至60分钟分钟 •如空白干扰超过如空白干扰超过2﹪ １替代的检测波长 １替代的检测波长 ２替代的分析方法 ２替代的分析方法 ３扣除参比波长的读数 ３扣除参比波长的读数 ４使用扫描光谱的二阶导数 ４使用扫描光谱的二阶导数 ５基线扣除 ５基线扣除(校正因子校正因子) ６干扰物的去活性 ６干扰物的去活性 •HPLC分析分析•和药物在相同保留时间处出峰和药物在相同保留时间处出峰•外来峰－注入标准溶液并比较保留时间外来峰－注入标准溶液并比较保留时间•如保留时间太接近，向药物中加入空白溶如保留时间太接近，向药物中加入空白溶液液 •HPLC分析分析•延长空白，标准和样品溶液的运行时间获延长空白，标准和样品溶液的运行时间获得色谱图来识别洗脱晚的化合物得色谱图来识别洗脱晚的化合物•溶出介质，过滤的空白溶液，标准溶液和溶出介质，过滤的空白溶液，标准溶液和过滤溶出样品的典型色谱图过滤溶出样品的典型色谱图•在空白图谱中未出现干扰峰在空白图谱中未出现干扰峰 •不超过不超过5﹪(V/V)的有机溶剂来增强制备标的有机溶剂来增强制备标准溶液的药物稳定性准溶液的药物稳定性•制备５份药物的标准溶液，范围覆盖该制制备５份药物的标准溶液，范围覆盖该制剂规格溶出曲线从最低期望浓度的－剂规格溶出曲线从最低期望浓度的－20﹪至最高浓度的至最高浓度的+20﹪•至少双份至少双份•最高浓度应不超过仪器的线性范围最高浓度应不超过仪器的线性范围 •合适的最小平方衰退程序合适的最小平方衰退程序•r2>0.98•Ｙ轴截距在Ｙ轴截距在95﹪置信区间必须不明显偏离置信区间必须不明显偏离0 浓度水平浓度水平(﹪)制剂规格的溶制剂规格的溶出度出度药物浓度药物浓度(ug/ml)平均吸收值平均吸收值（（n=2））吸收单一值吸收单一值40﹪3.23150.126800.12680.12503.49240.137050.13780.136360﹪5.02620.200000.20220.19784.90640.193350.19490.191880﹪9.00300.356550.36000.35318.84120.352300.35610.3485100﹪13.29270.528250.53500.521512.91170.509850.51390.5058120﹪12.52590.610950.61800.603915.65530.612650.61750.6078 •通常为释放过程中药物粉末最低期望浓度通常为释放过程中药物粉末最低期望浓度的的-20﹪到最大浓度的到最大浓度的+20﹪•至少３个浓度水平，每个水平测试３次至少３个浓度水平，每个水平测试３次•合适时加入空心胶囊，混合包衣，墨印和合适时加入空心胶囊，混合包衣，墨印和沉降篮沉降篮•空白中混合量应与制剂中一致空白中混合量应与制剂中一致 •装置１和２－根据方法中规定的条件测试装置１和２－根据方法中规定的条件测试辅料和药物粉末的混合物辅料和药物粉末的混合物•难溶性药物－储备液－药物溶解在有机溶难溶性药物－储备液－药物溶解在有机溶剂中剂中(最大不超过最终体积的最大不超过最终体积的5﹪)•储备液转移至溶出杯中储备液转移至溶出杯中•回收率通常为称样量的回收率通常为称样量的95﹪-105﹪•缓释制剂的酸化阶段缓释制剂的酸化阶段 １ 篮法，１ 篮法，100rpm,HPLC２ 制备对照品溶液２ 制备对照品溶液３ 溶出杯中加入不多于３ 溶出杯中加入不多于1000mL的溶出介质，加的溶出介质，加入一片空白片入一片空白片４ 溶液介质加热到４ 溶液介质加热到37℃5 加入Ｘ 加入ＸmL对照品溶液对照品溶液６ ６ 45分钟后取样，过滤，分钟后取样，过滤，分析分析﹪理论值﹪回收率16.3897.5096.3497.92平均下限95 ﹪ CL上限95 ﹪ CL97.2595.2299.2981.8897.9498.0897.57平均下限95 ﹪ CL上限95 ﹪ CL97.8697.2198.52106.4598.7898.2497.90平均下限95 ﹪ CL上限95 ﹪ CL98.3197.2099.41131.8098.5596.8597.33平均下限95 ﹪ CL上限95 ﹪ CL97.5895.4099.75平均(n=12)[﹪]97.75RSD [﹪]0.7095﹪CI平均±0.44﹪ 篮法，篮法，100rpm,HPLC由线性实验中导出：线性关系由线性实验中导出：线性关系标准标准处方中加入标准处方中加入标准线性斜率：线性斜率：11.190511.1540Y截至：截至：-7.0650-7.5006相关因子：相关因子：0.99990.9995斜率比例斜率比例(点样点样／标准／标准)99.67﹪ •基线对基线对API的干扰的干扰•基于不同剂型的不同假设：基于不同剂型的不同假设： １辅料溶于 １辅料溶于API-即恒定的比例关系即恒定的比例关系 ２辅料在 ２辅料在API溶出前悬浮并溶解－即辅溶出前悬浮并溶解－即辅料量恒定，料量恒定， API逐渐增加逐渐增加(标准加入技术标准加入技术) ３辅料难溶或不溶－即机质不溶， ３辅料难溶或不溶－即机质不溶， API溶出溶出•所有适用的概念可参照制剂技术判定所有适用的概念可参照制剂技术判定 •系统重复性系统重复性 １一份对照品溶液多次测定 １一份对照品溶液多次测定 ２计算 ２计算RSD•方法重复性方法重复性 １制备相同浓度的样品溶液多份 １制备相同浓度的样品溶液多份 ２从准确度和线性数据推出 ２从准确度和线性数据推出 NO.30分钟后药物溶出度分钟后药物溶出度[%]标示量标示量200mg400mg600mg800mg1100.8100.9100.897.799.02104.198.6103.097.796.83103.9102.9100.5104.6100.74102.5100.2102.5105.1103.45104.5100.9102.3101.5100.56103.4100.0101.298.399.2制剂规格制剂规格[mg]200400600800800数据个数数据个数66666平均值平均值[%]103.2100.6101.7100.899.9标准值标准值1.361.411.023.432.20相对标准偏差相对标准偏差（（%））1.321.411.003.402.20最小值（最小值（%））100.898.6100.597.796.8Q80%80%80%80%80%取样时间取样时间30min30min30min15min30min •◆随机因素对方法精密度的影响随机因素对方法精密度的影响•◆覆盖药品规格范围覆盖药品规格范围•◆至少两个分析员在不同日期测定至少两个分析员在不同日期测定•◆使用含量均匀度高且品质好的药品使用含量均匀度高且品质好的药品•◆永远不要使用一种已经成功上市的商业永远不要使用一种已经成功上市的商业样品样品 •◆两个分析员溶出结果的平均值相差不得两个分析员溶出结果的平均值相差不得超过超过• 10%，当该时间点的溶出量小于，当该时间点的溶出量小于85%时；时；• 5%，当该时间点的溶出量大于，当该时间点的溶出量大于85%时时•可接受标准可根据特定产品规定可接受标准可根据特定产品规定 第第1天天/仪器仪器1/分析员分析员1第第2天天/仪器仪器1/分析员分析员2平均回收率平均回收率制剂规格制剂规格［％］药物溶出度［％］药物溶出度制剂规格制剂规格［％］药物溶出度［％］药物溶出度［％］（［％］（n=12））200mg100.8200mg106.2104.1104.9103.9101.0102.5105.6103.98%104.5105.4103.4105.5400mg100.9400mg98.998.6101.0102.999.8100.17%100.2100.4100.998.9100.099.5 ◆篮法，篮法，100rpm,HPLC◆通过不同方法参数的差异，根据统计学设计测试溶出度的耐受性通过不同方法参数的差异，根据统计学设计测试溶出度的耐受性(方法中的方法中的“样品制备部分样品制备部分”)：：因素因素低水平低水平中水平中水平高水平高水平转篮速度转篮速度95rpm100rpm105rpm表面活性剂浓度表面活性剂浓度0.20%0.25%0.30%温度温度36℃37℃38℃酸浓度酸浓度0.9mM1.0mM1.1mM分析员分析员An/a8仪器仪器1n/a2制剂规格制剂规格1n/a2 ◆这是个有意义的验证吗？这是个有意义的验证吗？◆这可以是方法开发的一部分吗？这可以是方法开发的一部分吗？◆请提供论据请提供论据 ◆HPLC 1 流动相组分的差异流动相组分的差异 ２ 流速 ２ 流速 ３ ＰＨ值 ３ ＰＨ值 ４ 色谱柱类型 ４ 色谱柱类型 ５ 分离温度 ５ 分离温度 ６ 波长 ６ 波长 ◆光谱分析光谱分析 波长 波长 ◆对照品溶液对照品溶液◆过一定时间再分析过一定时间再分析◆在每个时间间隔点与新鲜配制的对照品比在每个时间间隔点与新鲜配制的对照品比较较◆结果是原始结果的结果是原始结果的98%至至102% ◆ 样品溶液样品溶液◆室温保存室温保存◆过一定时间再分析过一定时间再分析◆结果与原始结果比较结果与原始结果比较◆结果是原始结果的结果是原始结果的98%至至102%◆必要时溶液可以避光保存必要时溶液可以避光保存 ◆方法可说明溶液的有效期方法可说明溶液的有效期◆必要时溶液要避光必要时溶液要避光◆必要时使用玻璃仪器替代塑料容器必要时使用玻璃仪器替代塑料容器 采取方法采取方法◆配制溶出介质并室温保存配制溶出介质并室温保存28天天◆采用相似因子比较曲线采用相似因子比较曲线 １ 确认仪器的有关性能参数１ 确认仪器的有关性能参数２ 确证材料，如对照品和试剂２ 确证材料，如对照品和试剂３ 说明采用的方法，目的和范围３ 说明采用的方法，目的和范围４ 进行仪器的预验证４ 进行仪器的预验证５ 规定性能参数和可接受标准５ 规定性能参数和可接受标准６ 制定验证方案或验证操作规程６ 制定验证方案或验证操作规程７ 制定验证试验７ 制定验证试验 ８ 进行全面的内部８ 进行全面的内部(和外部和外部)验证试验验证试验９ 必要时调整方法参数或／和可接受标准９ 必要时调整方法参数或／和可接受标准10 在验证报告中记录验证试验和结果 在验证报告中记录验证试验和结果11 制定再验证的可接受标准 制定再验证的可接受标准12 制定常规执行方法的标准 制定常规执行方法的标准13 制订常规系统适用性试验的类型和频率 制订常规系统适用性试验的类型和频率 参数参数开发阶段１开发阶段１ 开发阶段２开发阶段２ 上市前上市前上市上市专属性专属性++++准确度准确度+++－系统精密度－系统精密度+++－重复性－重复性+++－中间精密度－中间精密度+重现性重现性+线性线性+++范围范围+++溶液的稳定性溶液的稳定性++++过滤过滤++++操作参数的耐受性操作参数的耐受性+溶液的转移溶液的转移++保存保存HPLC++++ ◆ 高度可变的溶出数据不允许根据预设的质量标准比较结果高度可变的溶出数据不允许根据预设的质量标准比较结果◆差异的主要来源差异的主要来源 １ 产品 １ 产品 ２ 方法 ２ 方法◆ 溶出度测试的验证是一个复合流程 溶出度测试的验证是一个复合流程◆ ICH Q2(R1)提供了方法验证指南提供了方法验证指南◆ 考虑设定整个流程总体偏差的可接受标准时，其应大于 考虑设定整个流程总体偏差的可接受标准时，其应大于单个流程的偏差单个流程的偏差(如如HPLC精密度精密度2%, 量取溶出介质的精量取溶出介质的精密度密度1%，稀释的精密度，稀释的精密度)考虑到传递的随机误差考虑到传递的随机误差◆ USP通则＜通则＜1092＞给出具体解释＞给出具体解释◆ 产品生命周期的不同阶段验证内容可不同． 产品生命周期的不同阶段验证内容可不同． 谢谢大家谢谢大家 。