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1、实验内容l球菌标本片观察球菌标本片观察 链球菌链球菌 脑膜炎双球菌脑膜炎双球菌l抗抗“O”试验试验l血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验l甘露醇发酵甘露醇发酵 目的要求l掌握球菌的基本形态。l掌握抗“O”试验的原理、操作方法、结果判断。l掌握血浆凝固酶试验的原理、操作方法、 结果判断。链球菌链球菌脑膜炎双球菌脑膜炎双球菌l本试剂胶乳液是由溶血素本试剂胶乳液是由溶血素O O和羟化聚苯乙烯胶乳共价交联和羟化聚苯乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳。而成的抗原胶乳。ASOASO胶乳的灵敏度调整到胶乳的灵敏度调整到200IU/ml200IU/ml，超，超过上述滴度即出现肉眼可见凝集颗粒，产生清晰凝集，过上述滴度即出
2、现肉眼可见凝集颗粒，产生清晰凝集，为阳性；无凝集，为阴性。为阳性；无凝集，为阴性。方法方法：间接凝集：间接凝集结果结果：效价大于：效价大于200200单位单位意义意义：风湿热及其活动性的辅风湿热及其活动性的辅助诊断助诊断抗抗“O”试验（试验（ASO test）原理原理：步骤：步骤：抗抗“O”试验（试验（ASO test） 阴性对照（阴性对照（1滴）滴） 待检血清待检血清 （1滴）滴） + + 胶乳试剂（胶乳试剂（1滴）滴） 胶乳试剂（胶乳试剂（1滴）滴）- ？2min2min阳性对照阳性对照+胶乳试剂胶乳试剂 2min+血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验 ：凝固酶分类：凝固酶分类l游离凝固酶：为分泌
3、到菌体外的类似凝血酶原样物质，被血浆中的协同因子激活而作用于纤维蛋白原使血浆凝固。（试管法测定）l结合凝固酶：是一种结合于菌体胞壁的凝固酶，是一种纤维蛋白原受体，使细菌凝聚成团成块块。（玻片法测定） 原理和意义原理和意义 测定血浆凝固酶的有无是鉴定葡萄球菌致病性的重要测定血浆凝固酶的有无是鉴定葡萄球菌致病性的重要依据。本实验采用玻片法检测结合血浆凝固酶。结合凝依据。本实验采用玻片法检测结合血浆凝固酶。结合凝固酶是一种结合于菌体胞壁的凝固酶，是一种纤维蛋白固酶是一种结合于菌体胞壁的凝固酶，是一种纤维蛋白原受体，与血浆中液态的纤维蛋白原结合，使细菌凝聚原受体，与血浆中液态的纤维蛋白原结合，使细菌凝
4、聚成团成块。成团成块。血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验步骤：步骤： 血浆血浆 血浆血浆12 金葡（金葡（1 1环）环） 白葡（白葡（1 1环）环） + + + + 凝集（凝集（+）不凝集（不凝集（-）血浆凝集试验血浆凝集试验生理盐水（各生理盐水（各1环）环）+ + + + 无菌操作：无菌操作：血浆凝集试验结果血浆凝集试验结果甘露醇发酵甘露醇发酵l甘露醇发酵管成份：蛋白胨10g氯化钠5g甘露醇10g牛肉膏粉5g溴麝香草酚兰0.024g最终pH7.40.2l原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；甘露醇检测细菌发酵糖类的特性；溴麝香草酚兰为pH指示剂，酸性呈黄色，碱性呈蓝色。l方法：按无菌操作取菌接种到甘露醇发酵管内，置37培养24h，观察结果。l结果：金黄色葡萄球菌应能发酵甘露醇产酸，发酵管变成黄色。实验报告实验报告l绘制两张标本片镜下图l简述抗“O”试验原理及实验结果l简述血浆凝固酶试验原理及实验结果
