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1、还原糖、脂肪和蛋白还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定实验质的鉴定实验实验原理实验原理生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。特定的颜色反应。(1)糖类糖类淀粉淀粉+碘碘蓝色蓝色还原糖还原糖+斐林试剂斐林试剂5065水浴加热水浴加热约约2min砖红色沉淀砖红色沉淀(2)脂肪苏丹脂肪苏丹染液染液橘黄色橘黄色脂肪苏丹脂肪苏丹染液染液红色红色(3)蛋白质双缩脲试剂蛋白质双缩脲试剂紫色紫色实验流程实验流程(1)还原糖的检测和观察还原糖的检测和观察选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织结论：组织样液中有可
2、溶性还原糖结论：组织样液中有可溶性还原糖v在鉴定可溶性还原糖的实验中，加热试管中在鉴定可溶性还原糖的实验中，加热试管中的溶液时的溶液时,应该用试管夹夹住试管上部，放入应该用试管夹夹住试管上部，放入盛盛5065温水的大烧杯中加热。注意试温水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部；管底部不要接触烧杯底部；v斐林试剂不稳定，应现用现配。斐林试剂不稳定，应现用现配。(2)脂肪的检测和观察脂肪的检测和观察方法一：花生种子匀浆方法一：花生种子匀浆3滴苏丹滴苏丹染液染液橘黄色橘黄色方法二：方法二：取材：花生种子取材：花生种子(浸泡浸泡)，将子叶削成薄片，将子叶削成薄片结论：花生种子中有脂肪存在结论：花
3、生种子中有脂肪存在 脂肪的鉴定中，实验用的花生种子需提前浸泡脂肪的鉴定中，实验用的花生种子需提前浸泡34 h， 浸泡时间太短，不易切片；浸泡时间太长，浸泡时间太短，不易切片；浸泡时间太长，则组织太软，切下的薄片不易成形。则组织太软，切下的薄片不易成形。(3)蛋白质的检测和观察蛋白质的检测和观察选材与制备：鲜肝提取液或黄豆浆滤液选材与制备：鲜肝提取液或黄豆浆滤液结论：组织样液中存在蛋白质结论：组织样液中存在蛋白质 在蛋白质的鉴定实验中，如果用蛋清稀释液作为实在蛋白质的鉴定实验中，如果用蛋清稀释液作为实验材料，一定要稀释到一定程度，否则，与双缩脲试剂验材料，一定要稀释到一定程度，否则，与双缩脲试剂
4、 发生反应后会粘在试管的内壁上，使反应不彻底，试发生反应后会粘在试管的内壁上，使反应不彻底，试 管也不易洗刷干净管也不易洗刷干净.还原糖、蛋白质的鉴定实验中，在加相应试剂还原糖、蛋白质的鉴定实验中，在加相应试剂鉴定之前，要留出一部分组织样液，以便与鉴定后鉴定之前，要留出一部分组织样液，以便与鉴定后的样液颜色作对比，增强实验的说服力。的样液颜色作对比，增强实验的说服力。(1)实验材料的选择实验材料的选择由于本实验是利用颜色反应鉴定不同的物质，因此在由于本实验是利用颜色反应鉴定不同的物质，因此在实验的选材上应注意以下两点：实验的选材上应注意以下两点：材料本身应无色，以免对结果产生干扰；材料本身应无
5、色，以免对结果产生干扰；材料应富含相关物质，使现象更显著。材料应富含相关物质，使现象更显著。(2)斐林试剂与双缩脲试剂的比较斐林试剂与双缩脲试剂的比较斐林斐林试剂试剂双双缩脲试剂缩脲试剂鉴鉴定定成分成分还还原糖原糖蛋白蛋白质质鉴鉴定定原理原理还还原糖中的原糖中的醛醛基基(CHO)在加在加热热条件下条件下能将能将Cu(OH)2中的中的Cu2还还原成原成Cu，从，从而生成而生成砖红砖红色的色的Cu2O沉淀沉淀双双缩脲缩脲(H2NOCNHCONH2)在碱性溶液中能与在碱性溶液中能与Cu2结结合生成紫色合生成紫色络络合物，合物，蛋白蛋白质质分子中含有与双分子中含有与双缩缩脲结脲结构相似的构相似的肽键肽
6、键斐林斐林试剂试剂双双缩脲试剂缩脲试剂试剂试剂浓浓度度甲液：甲液：质质量量浓浓度度为为0.1g/mL的的NaOH溶液；溶液；乙液：乙液：质质量量浓浓度度为为0.05g/mL的的CuSO4溶液溶液A液：液：质质量量浓浓度度为为0.1g/mL的的NaOH溶液；溶液；B液：液：质质量量浓浓度度为为0.01g/mL的的CuSO4溶液溶液使用使用方法方法甲液、乙液混合均匀后，甲液、乙液混合均匀后，再加入再加入样样液液先加先加A液造成碱性液造成碱性环环境，再加境，再加B液液使用使用条件条件加加热热(水浴水浴5065)不加不加热热，摇摇匀即可匀即可实验实验现现象象浅浅蓝蓝色色棕色棕色砖红砖红色色紫色紫色斐林
7、斐林试剂试剂双双缩脲试剂缩脲试剂使用方法使用方法甲液、乙液混合均匀后，甲液、乙液混合均匀后，再加入再加入样样液液先加先加A液造成碱性液造成碱性环环境，再加境，再加B液液使用条件使用条件 加加热热(水浴水浴5065)不加不加热热，摇摇匀即可匀即可实验现实验现象象浅浅蓝蓝色色棕色棕色砖红砖红色色紫色紫色习题习题2、连线题：、连线题：苏丹苏丹苏丹苏丹染液染液染液染液 豆浆豆浆豆浆豆浆 砖红色沉淀砖红色沉淀砖红色沉淀砖红色沉淀斐林试剂斐林试剂斐林试剂斐林试剂 马铃薯汁马铃薯汁马铃薯汁马铃薯汁 橘黄色橘黄色橘黄色橘黄色双缩脲试剂双缩脲试剂双缩脲试剂双缩脲试剂 葡萄汁葡萄汁葡萄汁葡萄汁 蓝色蓝色蓝色蓝色碘
8、液碘液碘液碘液 花生子叶花生子叶花生子叶花生子叶 紫色紫色紫色紫色基础题1.（1）；（2）X。典例印证典例印证(2010茂名质检茂名质检)根据相关实验，回答下列问题：根据相关实验，回答下列问题：(1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖，所用的试剂鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖，所用的试剂是是，该试剂与细胞内还原性糖发生作用，形成，该试剂与细胞内还原性糖发生作用，形成沉沉淀，因此，可用该试剂检验糖尿病人尿液淀，因此，可用该试剂检验糖尿病人尿液中中的含的含量。量。 (2)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双缩脲试剂缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入双缩脲
9、试剂摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂B摇匀。摇匀。其中双缩脲试剂其中双缩脲试剂B的量只有的量只有34滴，而不能过量，为滴，而不能过量，为什么？什么？ 。解析解析还原糖的鉴定试剂常用斐林剂试，也可用班氏试还原糖的鉴定试剂常用斐林剂试，也可用班氏试剂，原理是相同的：还原糖的剂，原理是相同的：还原糖的CHO将将Cu(OH)2的的Cu2还原还原为为Cu。在蛋白质鉴定中，。在蛋白质鉴定中，NaOH的作用是制造蛋白质与的作用是制造蛋白质与Cu2形成络合物的碱性条件，若形成络合物的碱性条件，若Cu2过量，会与过量，会与NaOH反反应，生成蓝色的应，生成蓝色的Cu(OH)2，干扰现象的观察。，干扰现象的观察。答
10、案答案(1)斐林试剂砖红色葡萄糖斐林试剂砖红色葡萄糖(2)过量的双缩腺试剂过量的双缩腺试剂B会于试剂会于试剂A反应，使溶液呈蓝色，反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色而掩盖生成的紫色利用某些化学试剂能够使生物组织中有关有机化合利用某些化学试剂能够使生物组织中有关有机化合物产生特定颜色反应的原理和方法，还可以解决以下问物产生特定颜色反应的原理和方法，还可以解决以下问题：题：(1)对生物组织进行某种成分的检测。对生物组织进行某种成分的检测。(2)在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。(3)可以鉴定某些消化液中含有蛋白质。可以鉴定某些消化液中含有蛋白质。(4
11、)用于劣质奶粉的鉴定。用于劣质奶粉的鉴定。(5)不同生物组织中含糖量高低的测定。不同生物组织中含糖量高低的测定。 1.(2008广东理基广东理基)双缩脲试剂可以鉴定蛋白质，是由于双缩脲试剂可以鉴定蛋白质，是由于蛋白质有蛋白质有()A.肽键肽键B.氨基酸氨基酸C.羧基羧基D.氨基氨基解析：解析：在碱性溶液中，双缩脲在碱性溶液中，双缩脲(H2NOCNHCONH2)能与能与Cu2作用，形成紫色的络合物。由于蛋白质分子中含有作用，形成紫色的络合物。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的
12、存在。脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。答案：答案：A2.(2007广东理基广东理基)下列健康人的下列健康人的4种液体样本中，能与双种液体样本中，能与双缩脲试剂发生紫色颜色反应的是缩脲试剂发生紫色颜色反应的是()尿液尿液胃液胃液汗液汗液唾液唾液A.B.C.D. 解析：解析：双缩脲试剂是用于鉴定蛋白质的试剂，可与蛋双缩脲试剂是用于鉴定蛋白质的试剂，可与蛋白质发生紫色反应。胃液中含有胃蛋白酶，唾液中含白质发生紫色反应。胃液中含有胃蛋白酶，唾液中含有唾液淀粉酶，它们都属于蛋白质。有唾液淀粉酶，它们都属于蛋白质。答案：答案：D3.(2007江苏高考江苏高考)若以鸡蛋蛋白液为材料进行蛋白质鉴
13、若以鸡蛋蛋白液为材料进行蛋白质鉴定实验，发现蛋白液与双缩脲试剂发生反应后会粘固定实验，发现蛋白液与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管壁上。下列关于这一现象形成原因的描述中正在试管壁上。下列关于这一现象形成原因的描述中正确的是确的是()A.鸡蛋蛋白液稀释不够，搅拌不匀鸡蛋蛋白液稀释不够，搅拌不匀B.只添加了双缩脲试剂只添加了双缩脲试剂A，未添加双缩脲试剂，未添加双缩脲试剂BC.鸡蛋蛋白液不是合适的实验材料鸡蛋蛋白液不是合适的实验材料D.蛋白液与双缩脲试剂的反应时间不够长蛋白液与双缩脲试剂的反应时间不够长解析：解析：如果蛋白液稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后如果蛋白液稀释不够，与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管的内壁上，使反应不容易进行彻底，并且会粘固在试管的内壁上，使反应不容易进行彻底，并且试管也不容易刷洗干净。只加双缩脲试剂试管也不容易刷洗干净。只加双缩脲试剂A是为了造成是为了造成碱性环境，不会发生反应，也不会粘固在试管壁上。鸡碱性环境，不会发生反应，也不会粘固在试管壁上。鸡蛋蛋白液中含丰富的蛋白质，是蛋白质鉴定的合适材料。蛋蛋白液中含丰富的蛋白质，是蛋白质鉴定的合适材料。蛋白液中先后加入双缩脲试剂蛋白液中先后加入双缩脲试剂A、B，摇匀后即可观察现，摇匀后即可观察现象，是否粘在试管壁上与反应时间无关。象，是否粘在试管壁上与反应时间无关。答案：答案：A
