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1、第第三三章章 高效液相色谱高效液相色谱分析分析一、高效毛细管电泳仪一、高效毛细管电泳仪high performance capillary electrophoresis apparatus二、流程与主要部件二、流程与主要部件process and main assembly三、进样方式三、进样方式injection method第九节高效毛细管电泳仪high performance liquid chromatography,HPLChigh performance capillary electrophoresis apparatus2024/8/30一、高效毛细管电泳仪一、高效毛细管电泳
2、仪high performance capillary electrophoresis apparatus2024/8/30仪器仪器2 22024/8/30仪器仪器3 32024/8/30二、仪器流程与主要部件二、仪器流程与主要部件 process and main assembly 电压:030kV; 分离柱不涂敷任何固定液; 紫外或激光诱导荧光检测器;(可检测到:10-1910-21 mol/L)2024/8/301.1.高压电源高压电源(1 1)0 03030 kV kV 稳定、连续可调的直流电源;稳定、连续可调的直流电源;(2 2)具有恒压、恒流、恒功率输出;)具有恒压、恒流、恒功率输
3、出;(3 3)电场强度程序控制系统;)电场强度程序控制系统;(4 4)电压稳定性:)电压稳定性:0.1%0.1%;(5 5)电源极性易转换;)电源极性易转换;2. 2. 毛细管柱毛细管柱 (1 1)材料:石英:各项)材料:石英:各项性能好;玻璃:光学、机性能好;玻璃:光学、机械性能差;械性能差; (2 2)规格:内径)规格:内径20207575m m,外径外径350350400400m m;长度长度=1=1m m2024/8/303.3.缓冲液池缓冲液池 化学惰性,机械稳定性好;4. 4. 检测器检测器 要求:具有极高灵敏度,可柱端检测; 检测器、数据采集与计算机数据处理一体化; 类型类型 检
4、测限检测限/ /mol mol 特点特点紫外-可见 10-1310-15 加二极管阵列,光谱信息荧光 10-1510-17 灵敏度高,样品需衍生激光诱导荧光 10-1810-20 灵敏度极高,样品需衍生电导 10-1810-19 离子灵敏,需专用的装置;2024/8/30三、毛细管电泳的进样方式三、毛细管电泳的进样方式 injection method of HPCE 进样量:毛细管长度的1%-2%;纳升级、非常小;1. 1. 流体力学进样方式流体力学进样方式 (1 1)进样端加压)进样端加压 (2 2)出口端抽真空)出口端抽真空 (3 3)虹吸进样)虹吸进样2024/8/30 毛细管一端插入
5、样品瓶,加电压;毛细管一端插入样品瓶,加电压;2. 2. 电动进样方式电动进样方式 进样不均进样不均:电歧视现象,淌度大的离子比淌度大的进样:电歧视现象,淌度大的离子比淌度大的进样量大;量大; 离子丢失离子丢失:淌度大且与电渗流方向相反的离子可能进不:淌度大且与电渗流方向相反的离子可能进不去;去; 特别适合黏度大的试样特别适合黏度大的试样;3. 3. 扩散进样扩散进样 试样通过扩散作用进入分离柱端口处。试样通过扩散作用进入分离柱端口处。2024/8/30内容选择内容选择结束结束第一节第一节 概述概述generalization第二节第二节 高效毛细管电泳的理论基础高效毛细管电泳的理论基础basic theory of HPCE第三节第三节 高效毛细管电泳仪器高效毛细管电泳仪器high performance capillary electrophoresis apparatus第四节第四节 高效毛细管电泳的分离模式高效毛细管电泳的分离模式separate types of HPCE第五节第五节 应用与进展应用与进展applications and advances of HPCE2024/8/30