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1、LOGO实验二实验二实验二实验二 徒手切片与临时装片的制作徒手切片与临时装片的制作徒手切片与临时装片的制作徒手切片与临时装片的制作授课教师:郑授课教师:郑 磊磊2008.12.04 实验目的与要求实验目的与要求 v熟练掌握徒手切片技术熟练掌握徒手切片技术,能够切出只有一层细胞,能够切出只有一层细胞的切片。的切片。实验器材与用具实验器材与用具v显微镜显微镜、培养皿、单面刀片、双面刀片、载玻片、培养皿、单面刀片、双面刀片、载玻片、盖玻片、毛笔、盖玻片、毛笔、 吸水纸吸水纸。实验材料与试剂实验材料与试剂v实验材料实验材料 新鲜的吊兰茎新鲜的吊兰茎和叶、芹菜叶柄、黄豆芽,和叶、芹菜叶柄、黄豆芽,胡胡萝
2、卜(支持物)萝卜(支持物)。v试剂试剂 1%番红番红水溶液水溶液、 45%醋酸醋酸。实验原理实验原理徒手制片徒手制片一般指徒手用刀片把新鲜的或固定好的植物材料一般指徒手用刀片把新鲜的或固定好的植物材料切成薄片切成薄片,不经染色或经简单染色后用水封片制成临时,不经染色或经简单染色后用水封片制成临时制制片的方法。片的方法。此制片法主要此制片法主要优点优点是:(是:(1 1)能及时观察研究植物生活组织)能及时观察研究植物生活组织的结构和天然色彩;(的结构和天然色彩;(2 2)方法及用具简单,不需切片机等)方法及用具简单,不需切片机等机械设备,短时间即可完成。机械设备,短时间即可完成。主要主要缺点缺点
3、是:(是:(1 1)对于微小、柔软、水分过多以及坚硬的)对于微小、柔软、水分过多以及坚硬的材料,难以用徒手切成薄片;(材料,难以用徒手切成薄片;(2 2)不能制成连续的切片不能制成连续的切片;(3 3)对于操作不熟练者,往往对于操作不熟练者,往往难以难以切成厚薄切成厚薄均匀和均匀和完整的完整的切片。切片。实验方法实验方法v材料的准备和修整材料的准备和修整 将植物茎切成将植物茎切成23cm长的小段,并将其切面削平;长的小段,并将其切面削平;若为质地较软而薄的材料,如叶片,可沿主脉两侧切成宽若为质地较软而薄的材料,如叶片,可沿主脉两侧切成宽56mm、长、长11.5cm的小块,夹在支持物中进行切片。
4、的小块,夹在支持物中进行切片。支持物通常为萝卜、胡萝卜、马铃薯、通心草等。先将支支持物通常为萝卜、胡萝卜、马铃薯、通心草等。先将支持物切成高持物切成高35cm、长、宽、长、宽0.5cm的立方的立方体体小块,将其中小块,将其中部纵切一缝,然后将修部纵切一缝,然后将修整整好的材料夹在其中。好的材料夹在其中。 v切片切片 切片前在培养皿内盛放适量清水切片前在培养皿内盛放适量清水。以左手拇指、食指、中指捏住材料,拇指应低于食指,以免切伤以左手拇指、食指、中指捏住材料,拇指应低于食指,以免切伤手指手指,材料高出食指材料高出食指23mm。切片前切片前,用水润湿刀片,以减少切片阻力。,用水润湿刀片,以减少切
5、片阻力。右手执刀,将刀片平放在左手食指上,刀口朝内,刀面与材料断右手执刀,将刀片平放在左手食指上,刀口朝内,刀面与材料断面平行,然后以均匀快捷的动作自左前方向右后方以臂力带动刀面平行,然后以均匀快捷的动作自左前方向右后方以臂力带动刀片水平切割,不要用腕力。同时还要注意,切时动作要迅速,材片水平切割,不要用腕力。同时还要注意,切时动作要迅速,材料一次切下,切忌停顿或拉锯式切割。料一次切下,切忌停顿或拉锯式切割。切下数片后切下数片后,用湿毛笔轻轻将薄片移入清水中,防止材料萎蔫。,用湿毛笔轻轻将薄片移入清水中,防止材料萎蔫。v染色与镜检染色与镜检若要观察植物组织的天然色彩:挑选薄而透明若要观察植物组
6、织的天然色彩:挑选薄而透明、平整的切、平整的切片,放在载玻片上,水封,制成临时装片。片,放在载玻片上,水封,制成临时装片。若想染色以观察更清楚的切片:采用单染色若想染色以观察更清楚的切片:采用单染色,即用,即用1%番番红水溶液染色红水溶液染色35min,用蒸馏水洗去浮色,水封,镜检。,用蒸馏水洗去浮色,水封,镜检。观察材料剃刀双面刀片拿材料的手势拿材料的手势胡萝卜木髓切取标本切取的标本擦拭载玻片滴水放置标本加盖盖玻片叶的横切玉米茎横切玉米茎横切南瓜茎横切南瓜茎横切南瓜茎纵切南瓜茎纵切任务与要求任务与要求 1.制作一张合格的徒手切片制作一张合格的徒手切片。2.在制作徒手切片的过程中在制作徒手切片的过程中,你遇到了哪些,你遇到了哪些问题,如何避免?问题,如何避免?LOGO