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1、柑橘果皮中总黄酮提取工艺研究柑橘果皮中总黄酮提取工艺研究 指导老师：学院：专业：2013年05月 答辩人答辩人：目录一 立题背景和意义二 试验材料与方法三 结果和讨论四 结论五 自我评价六 致谢一、立题背景及意义立题背景立题背景研究目的意义研究目的意义 目前黄酮类化合物提取方法有溶剂萃取法（碱液提取法目前黄酮类化合物提取方法有溶剂萃取法（碱液提取法和有机溶剂提取法）微波萃取法、超声波法、酶解法、超和有机溶剂提取法）微波萃取法、超声波法、酶解法、超临界萃取法等方法。本实验利用超声波辅助提取柑橘果皮临界萃取法等方法。本实验利用超声波辅助提取柑橘果皮中总黄酮，考察单因素试验的影响，确定最佳的提取工艺
2、。中总黄酮，考察单因素试验的影响，确定最佳的提取工艺。 柑橘黄酮类化合物在食品，医药，保健品、化妆品方面柑橘黄酮类化合物在食品，医药，保健品、化妆品方面具有广阔的应用前景具有广阔的应用前景。而我国柑橘的栽培面积居世界第一我国柑橘的栽培面积居世界第一，产量居世界第三。目前在柑橘鲜食和加工过程中，柑橘，产量居世界第三。目前在柑橘鲜食和加工过程中，柑橘皮是主要的副产物，每年生产上约有皮是主要的副产物，每年生产上约有150万吨的果皮资源。万吨的果皮资源。这些柑橘果皮几乎这些柑橘果皮几乎99%都被丢弃或填埋，浪费了资源，对都被丢弃或填埋，浪费了资源，对环境造成巨大的危害。环境造成巨大的危害。二、试验材料
3、与方法试验所需主要试剂和仪器设备原料和主要试剂原料和主要试剂主要的仪器设备主要的仪器设备可见光分光光度计，电子天平，可见光分光光度计，电子天平，组织捣碎机，超声波仪，台式组织捣碎机，超声波仪，台式离心机。离心机。柑橘、芦丁市售柑橘、芦丁市售 ，无水醇、，无水醇、 亚硝酸钠亚硝酸钠 、硝酸铝、硝酸铝 、氢氧、氢氧化钠颗粒以上试剂均为分化钠颗粒以上试剂均为分析纯。析纯。二、试验材料与方法总技术路线二、试验材料与方法准确称取柑橘果皮样品准确称取柑橘果皮样品1.000g1.000g置于置于150mL150mL平底烧瓶中，按一定液平底烧瓶中，按一定液固比加入溶剂。设定超声波的参数，提取后取出冷却，静置，
4、固比加入溶剂。设定超声波的参数，提取后取出冷却，静置，过滤，滤液定容至过滤，滤液定容至50mL50mL作为待测液。取待测液作为待测液。取待测液2mL2mL，置于，置于10mL10mL容容量瓶中，用溶剂补充至量瓶中，用溶剂补充至3mL3mL，加入，加入5%NaNO5%NaNO2 2溶液溶液0.5mL0.5mL，摇匀，放，摇匀，放置置6min6min；加入；加入10%Al(NO3)10%Al(NO3)3 3溶液溶液0.5mL0.5mL，摇匀，放置，摇匀，放置6min6min；再加；再加入入1mol1molL L-1-1NaOHNaOH溶液溶液4mL4mL，最后加蒸馏水定容至，最后加蒸馏水定容至10
5、mL10mL，摇匀，放，摇匀，放置置15min15min，于，于510nm510nm处测定吸光度处测定吸光度A A。三、结果与讨论芦丁标准曲线图3.1芦丁标准曲线三、结果和讨论提取功率对提取率的影响图3.2提取功率对提取率的影响由图由图3.2可知：可知：随超随超声波功率不断增加，声波功率不断增加，黄酮类化合物得率也黄酮类化合物得率也增大，当超声波功率增大，当超声波功率达达60W时，黄酮类化时，黄酮类化合物的得率达最大，合物的得率达最大，之后随着超声波的功之后随着超声波的功率的增大，黄酮类化率的增大，黄酮类化合物的得率反而降低。合物的得率反而降低。三、结果和讨论不同乙醇浓度对提取效果的影响不同乙
6、醇浓度对提取效果的影响图3.3乙醇浓度对提取率的影响由图由图3.3可知：可知：随着乙随着乙醇浓度不断增加，黄醇浓度不断增加，黄酮类化合物的得率也酮类化合物的得率也随之增大，当乙醇浓随之增大，当乙醇浓度达到度达到60%时，黄酮时，黄酮类化合物的得率达到类化合物的得率达到最大，之后随着乙醇最大，之后随着乙醇浓度的增加黄酮类化浓度的增加黄酮类化合物的得率反而降低合物的得率反而降低。三、结果和讨论料液比对提取率的影响图3.4料液比对提取率的影响由图由图3.4可知：可知：随着随着料液比比率增加，料液比比率增加，黄酮类化合物得率黄酮类化合物得率增多，而当料液比增多，而当料液比达到达到1:35以后，黄以后，
7、黄酮类化合物得率最酮类化合物得率最高，再增大料液比高，再增大料液比黄酮类化合物的得黄酮类化合物的得率增加比较缓慢率增加比较缓慢。三、结果和讨论提取时间对提取率的影响图3.5提取时间对提取率的影响由图3.5可知：随提取时间的增长，黄酮类化合物得率不断增加，提取时间为20min时，黄酮类化合物的得率最高。之后随着提取时间的延长，黄酮类化合物得率则降低。三、结果和讨论水平水平A超声波功超声波功率率WB乙醇体积乙醇体积分数（分数（%）C料液料液比比D超声提取时超声提取时间（间（min）155501:2520260601:3025365701:3530正交试验因素表确定最佳工艺条件组合确定最佳工艺条件组
8、合表表3.1正交试验因素表正交试验因素表三、结果与讨论试验编号试验编号超声波超声波功率功率W乙醇体积分乙醇体积分数（数（%)料液料液比比超声波提取时间超声波提取时间min提取提取率率mgg-1A AB BC CD D1111133.42122238.53133335.24212346.35223149.26231244.57313238.68321340.39332134.8k135.739.439.439.1k246.74639.840.4k337.938.24140.9极差极差97.81.61.8最优组合最优组合A2B2C3D1表表3.2 正交试验结果正交试验结果三、结果和讨论数据分析 从
9、表从表3.2的直观分析结果表明，最佳工艺条件为的直观分析结果表明，最佳工艺条件为A2B2C3D1，即，即超声波功率为超声波功率为60W、乙醇浓度、乙醇浓度60%、料液比为、料液比为1:35、超声波作用、超声波作用时间时间20min，用极差分析方法分析可知，用极差分析方法分析可知，A的极差最大其后依次为的极差最大其后依次为B、D、C。极差越大，说明该因素水平变动时总指标的变化越大，。极差越大，说明该因素水平变动时总指标的变化越大，即该因素对综合指标的影响越大。因此得出对黄酮类化合物提取即该因素对综合指标的影响越大。因此得出对黄酮类化合物提取率的影响强弱顺序依次为率的影响强弱顺序依次为ABDC,即
10、超声波功率即超声波功率乙醇体积分数乙醇体积分数超声波提取时间超声波提取时间料液比料液比,其中超声波功率和乙醇体积分数的影响其中超声波功率和乙醇体积分数的影响比较大。比较大。三、结果和讨论验证试验 为了考察上述优选最佳工艺条件的稳定性，在最佳工艺条件下为了考察上述优选最佳工艺条件的稳定性，在最佳工艺条件下进行提取，重复三次测定柑橘果皮中黄酮类化合物的提取率，提进行提取，重复三次测定柑橘果皮中黄酮类化合物的提取率，提取率见表取率见表3.3，三次试验结果均优于正交试验结果，三次试验结果均优于正交试验结果,平均提取率为平均提取率为49.3mgg-1,不确定度为不确定度为0.015，说明该工艺稳定可行。
11、，说明该工艺稳定可行。实验号实验号123平均值平均值黄酮类化合物黄酮类化合物收率（收率（%）49.249.349.449.3表表3.3 验证试验结果验证试验结果四、结论超声超声功率功率乙醇乙醇浓度浓度料液料液比比提取提取时间时间超声波选用低频超声波选用低频60W提取最佳提取最佳最佳料液比为最佳料液比为:柑橘果皮粉柑橘果皮粉：乙醇乙醇=1：35乙醇乙醇选用选用浓度浓度60%最好最好提取时间以提取时间以20min最佳最佳此时提此时提取率取率在最优工艺组合条件下所测黄酮类化合物在最优工艺组合条件下所测黄酮类化合物提取率为提取率为49.3mgg-1五、自我评价料比 通过本次论文试验设计，我掌握了分光光
12、度计，通过本次论文试验设计，我掌握了分光光度计，超声超声波波等仪器的使用方法，并等仪器的使用方法，并熟练掌握了在熟练掌握了在excel中制作相中制作相关表格关表格，这这不仅锻炼了我查阅相关文献资料的能力，试不仅锻炼了我查阅相关文献资料的能力，试验操作能力，还培养了我仔细认真、全面看问题的思维验操作能力，还培养了我仔细认真、全面看问题的思维习惯以及思路的严谨性、试验设计的合理性和逻辑性。习惯以及思路的严谨性、试验设计的合理性和逻辑性。但是本次论文由于条件有限，研究不够深入，在很多方但是本次论文由于条件有限，研究不够深入，在很多方面存在一定的不足，请各位老师多多指教，予以指正。面存在一定的不足，请各位老师多多指教，予以指正。最后，谢谢参加论文答辩的各位老师，你们辛苦了！最后，谢谢参加论文答辩的各位老师，你们辛苦了！老师，你们辛苦了！请多提宝贵意见。
