《现代病理学技术概况文档资料》由会员分享，可在线阅读，更多相关《现代病理学技术概况文档资料（21页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、病理学的定义l lPathology Pathology 是病痛（是病痛（是病痛（是病痛（ pathospathos）的研究的研究的研究的研究(logos)(logos) l l联系基础医学与临床医学的桥梁联系基础医学与临床医学的桥梁联系基础医学与临床医学的桥梁联系基础医学与临床医学的桥梁 l l研究疾病状态下细胞、组织和器官研究疾病状态下细胞、组织和器官研究疾病状态下细胞、组织和器官研究疾病状态下细胞、组织和器官结构结构结构结构和功能的改变和功能的改变和功能的改变和功能的改变l l通过各种手段解释疾病，为临床诊断，治疗和疾病的通过各种手段解释疾病，为临床诊断，治疗和疾病的通过各种手段解释疾病
2、，为临床诊断，治疗和疾病的通过各种手段解释疾病，为临床诊断，治疗和疾病的预防提供依据预防提供依据预防提供依据预防提供依据 病理学技术病理学技术病理学包括病理学理论和病理学技术。病理学技术是病理学包括病理学理论和病理学技术。病理学技术是病理学包括病理学理论和病理学技术。病理学技术是病理学包括病理学理论和病理学技术。病理学技术是“ “病理学之母病理学之母病理学之母病理学之母” ”。病理学的理论和技术被视为一辆车的两个轮。病理学的理论和技术被视为一辆车的两个轮。病理学的理论和技术被视为一辆车的两个轮。病理学的理论和技术被视为一辆车的两个轮子，缺一不可，互为依存，互相促进，两者的结合决定着病理子，缺一
3、不可，互为依存，互相促进，两者的结合决定着病理子，缺一不可，互为依存，互相促进，两者的结合决定着病理子，缺一不可，互为依存，互相促进，两者的结合决定着病理学的发展。学的发展。学的发展。学的发展。病理学技术包括尸体解剖、大体标本的制作、制片（石病理学技术包括尸体解剖、大体标本的制作、制片（石病理学技术包括尸体解剖、大体标本的制作、制片（石病理学技术包括尸体解剖、大体标本的制作、制片（石腊切片、冰冻切片、半薄切片、超薄切片等）、组织化学方法，腊切片、冰冻切片、半薄切片、超薄切片等）、组织化学方法，腊切片、冰冻切片、半薄切片、超薄切片等）、组织化学方法，腊切片、冰冻切片、半薄切片、超薄切片等）、组织
4、化学方法，免疫组化技术、原位杂交、分子病理技术、电镜技术、图像分免疫组化技术、原位杂交、分子病理技术、电镜技术、图像分免疫组化技术、原位杂交、分子病理技术、电镜技术、图像分免疫组化技术、原位杂交、分子病理技术、电镜技术、图像分析等。析等。析等。析等。病理技术的发展促进了病理学理论的进步。病理技术的发展促进了病理学理论的进步。病理技术的发展促进了病理学理论的进步。病理技术的发展促进了病理学理论的进步。病理学的发展器官病理学时代：器官病理学时代：l lGiovanni Battista Morgagni Giovanni Battista Morgagni （1682 ,1 1682 ,1 177
5、1,111771,11） l l意大利解剖学家意大利解剖学家l l现代解剖病理学之父现代解剖病理学之父l l编写编写疾病的位置与原因疾病的位置与原因，包含，包含646646例解剖记录例解剖记录 l l奠定了病理学发展的基础奠定了病理学发展的基础l l遗憾：没有将病理与临床联系遗憾：没有将病理与临床联系病理学的发展组织病理学时代组织病理学时代l lRudolf Virchow Rudolf Virchow （1821,10-1902,12) 1821,10-1902,12) 德国医生德国医生l l现代病理学之父现代病理学之父l l编著编著细胞病理学细胞病理学l l开创了细胞病理学时代开创了细胞病
6、理学时代病理学的发展现代病理学时代现代病理学时代( (近近400400年历史）年历史）l l电子显微镜：细胞超微结构的观察电子显微镜：细胞超微结构的观察l l免疫病理学：免疫组化技术的应用免疫病理学：免疫组化技术的应用l l分子病理学：疾病遗传和基因的研究分子病理学：疾病遗传和基因的研究l l数字病理学：数字病理学：病理学技术病理学技术l l传统病理学技术传统病理学技术传统病理学技术传统病理学技术HEHE染色技术染色技术组织化学染色组织化学染色细胞病理学技术细胞病理学技术l现代病理学技术现代病理学技术超微病理超微病理免疫病理免疫病理分子病理分子病理数字化病理数字化病理传统病理学技术传统病理学技
7、术l l病理学技术的基础和根本，是临床和科研最常用的技术病理学技术的基础和根本，是临床和科研最常用的技术l l全手工操作发展为自动化的机器：脱水机，包埋机，封片全手工操作发展为自动化的机器：脱水机，包埋机，封片机，染色机，包埋盒和切片打号机，液基细胞制片技术机，染色机，包埋盒和切片打号机，液基细胞制片技术l l材料的优化：塑料包埋盒，一次性切片刀材料的优化：塑料包埋盒，一次性切片刀l l试剂的该进：试剂的商业化，非污染环保试剂试剂的该进：试剂的商业化，非污染环保试剂l l低温恒冷切片机替代二氧化碳制冷机等低温恒冷切片机替代二氧化碳制冷机等现代病理学技术现代病理学技术l l免疫组织化学技术：发展
8、快，应用广，已成为临床诊断，靶向药物的免疫组织化学技术：发展快，应用广，已成为临床诊断，靶向药物的免疫组织化学技术：发展快，应用广，已成为临床诊断，靶向药物的免疫组织化学技术：发展快，应用广，已成为临床诊断，靶向药物的筛选以及科研的重要手段；尽管存在问题。筛选以及科研的重要手段；尽管存在问题。筛选以及科研的重要手段；尽管存在问题。筛选以及科研的重要手段；尽管存在问题。l l电镜技术：包括透射电镜，扫描电镜，免疫电镜等，用于肿瘤的分型，电镜技术：包括透射电镜，扫描电镜，免疫电镜等，用于肿瘤的分型，电镜技术：包括透射电镜，扫描电镜，免疫电镜等，用于肿瘤的分型，电镜技术：包括透射电镜，扫描电镜，免疫
9、电镜等，用于肿瘤的分型，肾脏病的诊断，肌肉疾病的诊断等；科研。肾脏病的诊断，肌肉疾病的诊断等；科研。肾脏病的诊断，肌肉疾病的诊断等；科研。肾脏病的诊断，肌肉疾病的诊断等；科研。l l分子病理技术：近分子病理技术：近分子病理技术：近分子病理技术：近2020年来发展最快，分子生物学技术与病理形态结合，年来发展最快，分子生物学技术与病理形态结合，年来发展最快，分子生物学技术与病理形态结合，年来发展最快，分子生物学技术与病理形态结合，用于疾病诊断和分类，靶向药物的筛选，病原体的检测，遗传学研究用于疾病诊断和分类，靶向药物的筛选，病原体的检测，遗传学研究用于疾病诊断和分类，靶向药物的筛选，病原体的检测，
10、遗传学研究用于疾病诊断和分类，靶向药物的筛选，病原体的检测，遗传学研究等。等。等。等。l l数字化病理：病理切片数字化病理：病理切片数字化病理：病理切片数字化病理：病理切片扫描技术，远程会诊，图像分析系统，档案的扫描技术，远程会诊，图像分析系统，档案的数字化管理。数字化管理。病理技术的进步促使人类的认识从大体、细胞、病理技术的进步促使人类的认识从大体、细胞、病理技术的进步促使人类的认识从大体、细胞、病理技术的进步促使人类的认识从大体、细胞、超微结构、分子基因水平逐步深入。超微结构、分子基因水平逐步深入。超微结构、分子基因水平逐步深入。超微结构、分子基因水平逐步深入。免疫组化免疫组化免疫组化免疫
11、组化(pubmed(pubmed检索）检索）检索）检索） 应用免疫学（抗原抗应用免疫学（抗原抗体反应）和组织化学（化体反应）和组织化学（化学反应）的原理，对组织学反应）的原理，对组织切片或细胞标本中的某些切片或细胞标本中的某些成份进行原位定性、定位成份进行原位定性、定位甚至定量研究的技术。甚至定量研究的技术。 现代病理学技术现代病理学技术免疫组织化学技术的应用：免疫组织化学技术的应用：免疫组织化学技术的应用：免疫组织化学技术的应用：l l临床诊断和鉴别诊断临床诊断和鉴别诊断临床诊断和鉴别诊断临床诊断和鉴别诊断l l肿瘤的分型肿瘤的分型肿瘤的分型肿瘤的分型l l肿瘤起源的判断肿瘤起源的判断肿瘤起
12、源的判断肿瘤起源的判断l l靶向药物的筛选靶向药物的筛选靶向药物的筛选靶向药物的筛选l l肿瘤生物学行为的判断肿瘤生物学行为的判断肿瘤生物学行为的判断肿瘤生物学行为的判断l l病原体的检测病原体的检测病原体的检测病原体的检测l l? ?分子病理分子病理(pubmed检索）检索）现代病理学技术现代病理学技术分子病理学技术：分子病理学技术：分子病理学技术：分子病理学技术：l lFISHFISHl lPCRPCRl l原位杂交原位杂交原位杂交原位杂交l l基因测序基因测序基因测序基因测序分子病理学技术的应用分子病理学技术的应用分子病理学技术的应用分子病理学技术的应用l l诊断与鉴别诊断诊断与鉴别诊断
13、诊断与鉴别诊断诊断与鉴别诊断l l肿瘤预后判断肿瘤预后判断肿瘤预后判断肿瘤预后判断l l药物的筛选药物的筛选药物的筛选药物的筛选l l. .分子病理在临床中的应用分子病理在临床中的应用l l肺非小细胞癌肺非小细胞癌肺非小细胞癌肺非小细胞癌EGFREGFR突变的检测：突变的检测：突变的检测：突变的检测：EGFREGFR突变阳性者应用突变阳性者应用突变阳性者应用突变阳性者应用络氨酸激酶药物（易瑞沙）有效，否则效果不佳络氨酸激酶药物（易瑞沙）有效，否则效果不佳络氨酸激酶药物（易瑞沙）有效，否则效果不佳络氨酸激酶药物（易瑞沙）有效，否则效果不佳l l血尿的诊断：检测血尿的诊断：检测血尿的诊断：检测血尿
14、的诊断：检测9 9号，号，号，号，3 3号，号，号，号，1717号，号，号，号，7 7号染色体可以辅助号染色体可以辅助号染色体可以辅助号染色体可以辅助膀胱癌的诊断和预测术后复发的可能膀胱癌的诊断和预测术后复发的可能膀胱癌的诊断和预测术后复发的可能膀胱癌的诊断和预测术后复发的可能l lC-kitC-kit突变的检测：突变的检测：突变的检测：突变的检测：C-kitC-kit突变可用于选择是否使用药物突变可用于选择是否使用药物突变可用于选择是否使用药物突变可用于选择是否使用药物” ”格列卫格列卫格列卫格列卫“ “l l大肠癌大肠癌大肠癌大肠癌k-rask-ras基因检测：基因检测：基因检测：基因检测
15、：rasras基因突变对西妥昔单抗治疗无基因突变对西妥昔单抗治疗无基因突变对西妥昔单抗治疗无基因突变对西妥昔单抗治疗无效，患者预后差。效，患者预后差。效，患者预后差。效，患者预后差。l l淋巴瘤的分型：应用淋巴瘤的分型：应用淋巴瘤的分型：应用淋巴瘤的分型：应用FISHFISH检测可辅助淋巴瘤的分型，为临检测可辅助淋巴瘤的分型，为临检测可辅助淋巴瘤的分型，为临检测可辅助淋巴瘤的分型，为临床治疗提供依据。床治疗提供依据。床治疗提供依据。床治疗提供依据。l l. .电子显微镜技术电子显微镜技术n n电子显微镜，包括透射电镜和扫描电镜电子显微镜，包括透射电镜和扫描电镜电子显微镜，包括透射电镜和扫描电镜
16、电子显微镜，包括透射电镜和扫描电镜n n电镜技术包括负染色技术、冷冻蚀刻技术、电镜细胞化学电镜技术包括负染色技术、冷冻蚀刻技术、电镜细胞化学电镜技术包括负染色技术、冷冻蚀刻技术、电镜细胞化学电镜技术包括负染色技术、冷冻蚀刻技术、电镜细胞化学技术、电镜技术、电镜技术、电镜技术、电镜X X射线显微分析技术、电镜放射自显影技术等射线显微分析技术、电镜放射自显影技术等射线显微分析技术、电镜放射自显影技术等射线显微分析技术、电镜放射自显影技术等n n主要用于肾小球肾炎的分型主要用于肾小球肾炎的分型主要用于肾小球肾炎的分型主要用于肾小球肾炎的分型n n确定肿瘤细胞的组织发生、类型和分化程度确定肿瘤细胞的组
17、织发生、类型和分化程度确定肿瘤细胞的组织发生、类型和分化程度确定肿瘤细胞的组织发生、类型和分化程度n n扫描电镜能够直接观察样品的表面的结构，血管腔面改变扫描电镜能够直接观察样品的表面的结构，血管腔面改变扫描电镜能够直接观察样品的表面的结构，血管腔面改变扫描电镜能够直接观察样品的表面的结构，血管腔面改变共聚焦激光扫描显微镜共聚焦激光扫描显微镜共聚焦激光扫描显微镜共聚焦激光扫描显微镜 （confocal laser scanning microscopy）利用计算机及图像处理系统对组织，细胞及亚细利用计算机及图像处理系统对组织，细胞及亚细利用计算机及图像处理系统对组织，细胞及亚细利用计算机及图像
18、处理系统对组织，细胞及亚细胞结构进行断层扫描，再现三维立体空间结构，将形态学研胞结构进行断层扫描，再现三维立体空间结构，将形态学研胞结构进行断层扫描，再现三维立体空间结构，将形态学研胞结构进行断层扫描，再现三维立体空间结构，将形态学研究从平面图像水平提高到三维立体水平；在观察培养细胞形究从平面图像水平提高到三维立体水平；在观察培养细胞形究从平面图像水平提高到三维立体水平；在观察培养细胞形究从平面图像水平提高到三维立体水平；在观察培养细胞形态结构的同时，直接显示培养活体细胞内的代谢变化。态结构的同时，直接显示培养活体细胞内的代谢变化。态结构的同时，直接显示培养活体细胞内的代谢变化。态结构的同时，
19、直接显示培养活体细胞内的代谢变化。 共聚焦激光扫描显微镜共聚焦激光扫描显微镜l l观察活细胞、活组织：在不损伤细胞的前提下观察活细胞、活组织：在不损伤细胞的前提下, ,对对活组织、活细胞进行观察和测量，省去了繁琐的样品前期活组织、活细胞进行观察和测量，省去了繁琐的样品前期处理过程，而且观察过的样品还可以继续用于其他的研究。处理过程，而且观察过的样品还可以继续用于其他的研究。这种功能对于细胞培养、转基因研究尤为重要。这可以说这种功能对于细胞培养、转基因研究尤为重要。这可以说是最大的优势。是最大的优势。l l生化成分精确定位观察：配合专用的分子探针生化成分精确定位观察：配合专用的分子探针, ,对于
20、要检测对于要检测的成分不仅可以定位到细胞水平的成分不仅可以定位到细胞水平, ,还可以定位到亚细胞水平还可以定位到亚细胞水平和分子水平和分子水平共聚焦激光扫描显微镜共聚焦激光扫描显微镜l l动态观察：在同一样品平面上随时间进行连续扫描动态观察：在同一样品平面上随时间进行连续扫描动态观察：在同一样品平面上随时间进行连续扫描动态观察：在同一样品平面上随时间进行连续扫描, ,就可分就可分就可分就可分析细胞结构、内含、和标记等动力学变化。如观察心肌或析细胞结构、内含、和标记等动力学变化。如观察心肌或析细胞结构、内含、和标记等动力学变化。如观察心肌或析细胞结构、内含、和标记等动力学变化。如观察心肌或平滑肌
21、细胞内游离钙、钠、钾离子浓度或的动态变化。平滑肌细胞内游离钙、钠、钾离子浓度或的动态变化。平滑肌细胞内游离钙、钠、钾离子浓度或的动态变化。平滑肌细胞内游离钙、钠、钾离子浓度或的动态变化。l l数据、图像的数字化：计算机代替了普通的照相机数据、图像的数字化：计算机代替了普通的照相机数据、图像的数字化：计算机代替了普通的照相机数据、图像的数字化：计算机代替了普通的照相机, ,得到的得到的得到的得到的图像是数字化的图像是数字化的图像是数字化的图像是数字化的, ,可及时输出或长期储存可及时输出或长期储存可及时输出或长期储存可及时输出或长期储存, ,而且还可进一步而且还可进一步而且还可进一步而且还可进一
22、步加工处理。加工处理。加工处理。加工处理。l l定量测量：应用专一的荧光探针对样品进行染色定量测量：应用专一的荧光探针对样品进行染色定量测量：应用专一的荧光探针对样品进行染色定量测量：应用专一的荧光探针对样品进行染色, ,样品的荧样品的荧样品的荧样品的荧光强度和所测成分的含量呈正比光强度和所测成分的含量呈正比光强度和所测成分的含量呈正比光强度和所测成分的含量呈正比, , 通过对比各组样品之间通过对比各组样品之间通过对比各组样品之间通过对比各组样品之间的荧光强度值的荧光强度值的荧光强度值的荧光强度值, ,可得出特定成分的含量比。可得出特定成分的含量比。可得出特定成分的含量比。可得出特定成分的含量
23、比。生物芯片技术生物芯片技术 n n基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片、以及元件基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片、以及元件基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片、以及元件基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片、组织芯片、以及元件型微阵列芯片、通道型微阵列芯片、生物传感芯片等新型型微阵列芯片、通道型微阵列芯片、生物传感芯片等新型型微阵列芯片、通道型微阵列芯片、生物传感芯片等新型型微阵列芯片、通道型微阵列芯片、生物传感芯片等新型生物芯片。可对生物芯片。可对生物芯片。可对生物芯片。可对DNADNA、RNARNA、多肽、蛋白质、细胞、组、多肽、蛋白质、细胞、组、多肽、蛋白质、细胞、组、多肽、蛋
24、白质、细胞、组织以及其它生物成分进行高效快捷的测试和分析。织以及其它生物成分进行高效快捷的测试和分析。织以及其它生物成分进行高效快捷的测试和分析。织以及其它生物成分进行高效快捷的测试和分析。 组织芯片组织芯片 组组组组织织织织芯芯芯芯片片片片又又又又称称称称组组组组织织织织微微微微列列列列阵阵阵阵（tissue tissue microarraymicroarray） 是是是是将将将将数数数数十十十十个个个个 数数数数百百百百个个个个乃乃乃乃至至至至上上上上千千千千个个个个小小小小的的的的组组组组织织织织片片片片整整整整齐齐齐齐的的的的排排排排列列列列在在在在一一一一起起起起到到到到载玻片载玻
25、片载玻片载玻片, ,形成微缩的组织切片。形成微缩的组织切片。形成微缩的组织切片。形成微缩的组织切片。激光显微切割术激光显微切割术 （Laser micro-desection）在显微镜下用手工或仪器采样的方法从在显微镜下用手工或仪器采样的方法从在显微镜下用手工或仪器采样的方法从在显微镜下用手工或仪器采样的方法从组织切片或细胞涂片上将所要研究的形态或表型相组织切片或细胞涂片上将所要研究的形态或表型相组织切片或细胞涂片上将所要研究的形态或表型相组织切片或细胞涂片上将所要研究的形态或表型相同的细胞从组织三维构造中分离出来，获得纯的细同的细胞从组织三维构造中分离出来，获得纯的细同的细胞从组织三维构造中
26、分离出来，获得纯的细同的细胞从组织三维构造中分离出来，获得纯的细胞群（胞群（胞群（胞群（pure cell populationpure cell population），以备进一步作分子），以备进一步作分子），以备进一步作分子），以备进一步作分子水平的研究。微切割技术的贡献就是克服了组织的水平的研究。微切割技术的贡献就是克服了组织的水平的研究。微切割技术的贡献就是克服了组织的水平的研究。微切割技术的贡献就是克服了组织的细胞成分非常繁杂这一重大的缺点。细胞成分非常繁杂这一重大的缺点。细胞成分非常繁杂这一重大的缺点。细胞成分非常繁杂这一重大的缺点。 小结小结l l各学科相互融合成为当今发展的主流各学科相互融合成为当今发展的主流各学科相互融合成为当今发展的主流各学科相互融合成为当今发展的主流l l现代病理学技术是多学科相互融合的结果现代病理学技术是多学科相互融合的结果现代病理学技术是多学科相互融合的结果现代病理学技术是多学科相互融合的结果l l病理诊断，肿瘤预后判断和指导临床治疗的主要手段病理诊断，肿瘤预后判断和指导临床治疗的主要手段病理诊断，肿瘤预后判断和指导临床治疗的主要手段病理诊断，肿瘤预后判断和指导临床治疗的主要手段l l对疾病的认识更加深入对疾病的认识更加深入对疾病的认识更加深入对疾病的认识更加深入
