酶工程的应用

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1、酶的应用酶的应用酶的应用酶在医药方面的应用酶在食品方面的应用酶在轻工、化工方面的应用酶在环境保护方面的应用酶在生物技术方面的应用酶在医药方面的应用用酶进行疾病的诊断疾病的诊断用酶进行疾病的预防和治疗疾病的预防和治疗用酶制造各种药物药物1、根据体内酶活性的变化诊断疾病、根据体内酶活性的变化诊断疾病酶疾病与酶活力变化淀粉酶胰脏疾病,肾脏疾病时升高;肝病时下降胆碱酯酶肝病、肝硬化、有机磷中毒、风湿等,活力下降酸性磷酸酶前列腺癌、肝炎、红血球病变时,活力升高碱性磷酸酶佝偻病、软骨化病、骨瘤、甲状旁腺机能亢进时,活力升高;软骨发育不全等,活力下降谷丙转氨酶/谷草转氨酶肝病、心肌梗塞等,活力升高-谷氨酰转

2、肽酶(-GT)原发性和继发性肝癌,活力增高至200单位以上,阻塞性黄疸、肝硬化、胆道癌等,血清中酶活力升高醛縮酶急性传染性肝炎、心肌梗塞,血清中酶活力显著升高胃蛋白酶胃癌,活力升高;十二指肠溃疡,活力下降磷酸葡糖变位酶肝炎、癌症,活力升高乳酸脱氢酶肝癌、急性肝炎、心肌梗塞,活力显著升高;肝硬化,活力正常端粒酶癌细胞中含有端粒酶,正常体细胞内没有端粒酶活性山梨醇脱氢酶(SDH)急性肝炎,活力显著提高脂肪酶急性胰腺炎,活力明显增高,胰腺癌、胆管炎患者,活力升高肌酸磷酸激酶(CK)心肌梗塞,活力显著升高;肌炎、肌肉创伤,活力升高羟基丁酸脱氢酶心肌梗塞、心肌炎,活力增高磷酸己糖异构酶急性肝炎,活力极度

3、升高;心肌梗塞、急性肾炎,脑溢血,活力明显升高鸟氨酸氨基甲酰转移酶急性肝炎,活力急速增高;肝癌,活力明显升高乳酸脱氢酶同工酶心肌梗塞、恶性贫血,LDH1增高;白血病、肌肉萎缩,LDH2增高;白血病、淋巴肉瘤、肺癌,LDH3增高;转移性肝癌、结肠癌,LDH4增高;肝炎、原发性肝癌、脂肪肝、心肌梗塞、外伤、骨折,LDH5增高葡萄糖氧化酶测定血糖含量,诊断糖尿病亮氨酸氨肽酶(LAP)肝癌、阴道癌、阻塞性黄疸,活力明显升高PKU苯丙酮尿症脑发育受阻,严重脑力呆滞,智商 050苯丙氨酸代谢途径关系到三种遗传病苯丙氨酸代谢途径关系到三种遗传病体检表中有关酶的选项体检表中有关酶的选项2、用、用酶酶测测定体液

4、中某些物定体液中某些物质质的的变变化化诊诊断疾病断疾病 酶测定的物质用 途葡萄糖氧化酶葡萄糖测定血糖、尿糖,诊断糖尿病葡萄糖氧化酶+过氧化物酶葡萄糖测定血糖、尿糖,诊断糖尿病尿素酶尿素测定血液、尿液中尿素的量,诊断肝脏、肾脏病变谷氨酰胺酶谷氨酰胺测定脑脊液中谷氨酰胺的量,诊断肝昏迷、肝硬化胆固醇氧化酶胆固醇测定胆固醇含量,诊断高血脂等DNA聚合酶基因通过基因扩增,基因测序,诊断基因变异、检测癌基因利用葡萄糖氧化酶检测葡萄糖的含量,进行糖尿病诊断利用葡萄糖氧化酶和过氧化物酶的联合作用检测葡萄糖的含量,诊断糖尿病利用尿素酶测定尿素含量,从而诊断肝脏、肾脏病变利用胆固醇氧化酶测定血液中胆固醇的含量,

5、从而诊断高血脂等疾病利用谷氨酰胺酶测定脑脊液中谷氨酰胺含量,进行肝硬化、肝昏迷的诊断利用DNA聚合酶检测基因是否正常,进行基因诊断、检测癌基因利用酶标免疫检测法测定抗体或者抗原3、酶酶在疾病在疾病预预防和治防和治疗疗方面的方面的应应用用酶 名来 源用 途淀粉酶胰脏、麦芽、微生物治疗消化不良,食欲不振蛋白酶胰脏、胃、植物、微生物治疗消化不良,食欲不振,消炎,消肿,除去坏死组织,促进创伤愈合,降低血压脂肪酶胰脏、微生物治疗消化不良,食欲不振纤维素酶霉菌治疗消化不良,食欲不振溶菌酶蛋清、细菌治疗各种细菌性和病毒性疾病尿激酶人尿治疗心肌梗塞,结膜下出血,黄斑部出血链激酶链球菌治疗血栓性静脉炎,咳痰,血

6、肿,下出血,骨折青霉素酶蜡状芽孢杆菌治疗青霉素引起的变态反应L-天冬酰胺酶大肠杆菌治疗白血病超氧化物歧化酶微生物,植物,动物预防辐射损伤,治疗红斑狼疮,皮肌炎,结肠炎凝血酶动物,蛇,细菌,酵母等治疗各种出血病胶原酶细菌分解胶原,消炎,化脓,脱痂,治疗溃疡右旋糖酐酶微生物预防龋齿 胆碱酯酶细菌治疗皮肤病,支气管炎,气喘溶纤酶蚯蚓溶血栓弹性蛋白酶胰脏治疗动脉硬化,降血脂核糖核酸酶胰脏抗感染,祛痰,治肝癌尿酸酶牛肾治疗痛风溶菌酶溶菌酶凝血酶凝血酶4、酶酶在在药药物制造方面的物制造方面的应应用用 酶主要来源用途青霉素酰化酶微生物制造半合成青霉素和头孢菌素11-羟化酶霉菌制造氢化可的松L-酪氨酸转氨酶细

7、菌制造多巴(L-二羟苯丙氨酸)-酪氨酸酶植物制造多巴-甘露糖苷酶链霉菌制造高效链霉素核苷磷酸化酶微生物生产阿拉伯糖腺嘌呤核苷(阿糖腺苷)酰基氨基酸水解酶微生物生产L-氨基酸5-磷酸二酯酶桔青霉等微生物生产各种核苷酸多核苷酸磷酸化酶微生物生产聚肌胞,聚肌苷酸无色杆菌蛋白酶细菌由猪胰岛素(Ala-30)转变为人胰岛素(Thr-30)核糖核酸酶微生物生产核苷酸蛋白酶动物、植物、微生物生产L-氨基酸-葡萄糖苷酶黑曲霉等微生物生产人参皂甙-Rh2青霉素酰化酶制造半合成抗生素酪氨酸酶制造多巴核苷磷酸化酶制造阿糖腺苷无色杆菌蛋白酶制造人胰岛素多核苷酸磷酸化酶生产聚肌胞D葡萄糖腺苷酶制造抗肿瘤人参皂苷青霉素酰

8、化酶与抗生素改造青霉素酰化酶与抗生素改造酶的应用酶的应用酶在医药方面的应用酶在食品方面的应用酶在轻工、化工方面的应用酶在环境保护方面的应用酶在生物技术方面的应用酶在食品保鲜方面的应用酶在食品生产方面的应用酶在食品添加剂生产方面的应用酶在乳化剂生产中的应用酶的用途反应酶水解淀粉生产葡萄糖淀粉+H2O 葡萄糖糖化酶-淀粉酶水解RNA生产 5-IMP及5-GMP RNA+H2O 5-AMP+5- GMP+5- UMP+5 - CMP 5-AMP+H2O5-AMP+NH3 磷酸二酯酶 AMP 脱氨酶用Plaste in 反应修饰蛋白质肽 + 蛋氨酸乙酯 肽 - 蛋氨酸木瓜酶消除桔汁苦味 柚苷 +H2O

9、 鼠李糖 + 柚配质 -7- 葡糖苷(2) 柚配质-7-葡糖苷 葡萄糖+柚配质柚苷酶黄酮化合物糖苷酶生产果葡糖浆D-葡萄糖 D-果糖葡萄糖异构酶增加甜菜糖收率棉子糖 +H2O 半乳糖 + 蔗糖蜜二糖酶 (-半乳糖苷酶 ) 分解牛奶及乳清中乳糖乳糖 + 水 D-半乳糖 + 葡萄糖- 半乳糖苷酶消除食品中残留 H2O2 H2O2+ H2O2O2+ 2H2O 过氧化氢酶分离鱼碎肉废水中油和蛋白质蛋白质、油、聚丙烯酸钠、水肽氨基酸、油聚丙烯酸碱性蛋白酶啤酒澄清蛋白质 肽木瓜酶桔子脱囊衣半纤维素(高分子)半纤维素(低分子)粥化酶改进谷物淀粉收率淀粉、半纤维素、蛋白质(高分子) 淀粉、肽、半纤维素(低分子

10、)半纤维素酶、果胶酶提高饲料效率淀粉、半纤维素、纤维素 肽、纤维、半纤维粥化酶生产干酪酪素 肽内肽酶生产干酪用脂肪酶增香脂肪 脂肪酸脂肪酶改良面团淀粉 糊精-淀粉酶生产环糊精环糊精葡萄糖转移酶消除大豆腥臭 RCHO+NAD+H2O RCOOH+NADH RCHO+H2O+O2 RCOOH+H2O2醛脱氢酶醛氧化酶消除桔子汁柠碱柠碱酶酶在食品保鲜方面的应用酶在食品保鲜方面的应用食品除氧保鲜蛋类制品脱氧保鲜食品灭菌保鲜酶在食品生产方面的应用酶在食品生产方面的应用酶在淀粉类食品生产方面的应用 1、葡萄糖的生产 2、国葡萄糖的生产 3、饴糖、麦芽糖的生产 4、糊精、麦芽糊精的生产 5、环状糊精的生产淀

11、粉酶类与淀粉糖业淀粉酶类与淀粉糖业酶在蛋白质类食品生产方面的应用 1、水解蛋白的生产 2、氨基酸的生产 3、明胶的生产 4、干酪的生产 5、低乳糖奶的生产果汁生产与果胶酶乳制品与凝乳酶酶在果蔬类食品生产方面的应用 1、柑橘制品去除苦味 2、柑橘罐头防止白色浑浊 3、果蔬制品的脱色 4、酶在果汁生产中的应用 5、酶在果酒生产中的应用果菜清洗果菜清洗拣果机拣果机酶在食品添加剂生产方面的应用酶在食品添加剂生产方面的应用酶在酸味剂生产中的应用酶在食品增味剂生产中的应用酶在甜味剂生产中的应用酶在乳化剂生产中的应用酶的应用酶的应用酶在医药方面的应用酶在食品方面的应用酶在轻工、化工方面的应用酶在环境保护方面

12、的应用酶在生物技术方面的应用用酶进行原料处理用酶生产各种轻工、化工产品用酶增强产品的使用效果。 酶在原料处理方面的应用酶在原料处理方面的应用发酵原料液的处理防止原料的处理制浆、造纸原料的处理生丝的脱胶处理羊毛的除垢处理皮革的脱毛处理烟草原料的处理甜菜蜜糖的处理植物油的脱胶处理酶水解了毛根部的毛囊蛋白而使毛松动脱脱落落。蛋白酶分解皮纤维间质中的可溶性蛋白质,使皮纤维进一步松散软化软化。加速蛋白质的分解染色温度降低皮革脱毛与软化皮革脱毛与软化加酶洗涤剂加酶洗涤剂生丝脱胶与羊毛染生丝脱胶与羊毛染蛋白酶酶在轻工、化工产品制造方面的应用酶在轻工、化工产品制造方面的应用酶法生产L-氨基酸酶法生产有机酸酶法

13、制造化工原料加酶增强产品的使用效果加酶增强产品的使用效果加酶洗涤剂加酶牙膏、牙粉和漱口水加酶饲料加酶护肤品酶制剂在国外饲料工酶制剂在国外饲料工业中得到不断应用,业中得到不断应用,不仅提高了饲料原料不仅提高了饲料原料的转化率,也促进了的转化率,也促进了对饲料的消化。对饲料的消化。植酸酶植酸酶Bio-FeedBio-Feed PhytasePhytase ( ( RonozymeRonozyme P ) P ) 主要用于提高植酸磷的消化率,并相应改善钙和其它矿物元素的主要用于提高植酸磷的消化率,并相应改善钙和其它矿物元素的利用率。利用率。大大降低了动物粪便中磷的排放量,有益环保。大大降低了动物粪便

14、中磷的排放量,有益环保。 酶的应用酶的应用酶在医药方面的应用酶在食品方面的应用酶在轻工、化工方面的应用酶在环境保护方面的应用酶在生物技术方面的应用酶在环境监测方面的应用酶在废水处理方面的应用酶在可生物降解材料开发方面的应用酶在环境监测方面的应用酶在环境监测方面的应用酶在环境监测方面的应用酶在环境监测方面的应用利用胆碱酯酶检测有机磷农药污染利用乳酸脱氢酶的同工酶监测重金属污染通过葡聚糖苷酸酶监测大肠杆菌污染利用亚硝酸还原酶检测水中亚硝酸盐浓度酶的应用酶的应用酶在医药方面的应用酶在食品方面的应用酶在轻工、化工方面的应用酶在环境保护方面的应用酶在生物技术方面的应用酶在除去细胞壁方面的应用酶在大分子切

15、割方面的应用酶在分子拼接方面的应用 现代基因工程的创始人P伯格伯格(美国,1926)在1960年以敏锐的科学预见力提出一个大胆的设想:是否可以创造出一种人工方法,把外界的遗传基因引入动物体内,以达到改变遗传性状和治疗某些疾病的需要呢?1972年,伯格把两种病毒的DNA用同一种限制性内切酶切割后,再用DNA连接酶把这两种DNA分子连接起来,于是产生了一种新的重组DNA分子,首次实现两种不同生物的DNA体外连接,获得了第一批重组DNA分子,这标志着基因工程技术的诞生。伯格因此获得了1980年诺贝尔化学奖。 目的基因目的基因基因载体基因载体重组体重组体分切接转筛DNA DNA DNA DNA 连接酶

16、连接酶连接酶连接酶 “ “分子针线分子针线分子针线分子针线” ”限制性内切酶限制性内切酶限制性内切酶限制性内切酶 “ “分子手术刀分子手术刀分子手术刀分子手术刀 ” ”限制性酶活性缓冲液甲基化底物性状 一些限制性核酸内切一些限制性核酸内切酶酶的来源与作用位点的来源与作用位点酶识别序列与作用位点53来 源Alu AGCTArthrobacter luteusAvaCPyCGPuGAnabaena vayiabilisBamH GGATCCBacillus amyloliquefaciensBgl AGATCTBacillu globigiiEco R GAATTCEscherichia coli Rye13Hae GGCCHacmophilus aegyptiusHind AAGCTTHaemophilus influenzaeHpa GTTAACHacmophilus parainfluenzaeKpn GGTACCKlebsiella pneumoniaePst CTGCAGProvidencia stuartiiSal GTCGACStreptomyces albusSma CCCGGGSerratia marcensXba TCTAGAXanthomonas badriiXho CTCGAGXanthomonas holicola

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