复习：吩噻嗪类药物的分析复习：吩噻嗪类药物的分析基本基本结构结构基本基本性质性质鉴别鉴别l硫氮杂蒽母核硫氮杂蒽母核l10-碱性侧链碱性侧链l2-卤素卤素l碱性碱性; l易氧化易氧化; l 与金属离子与金属离子络合；络合；l紫外吸收紫外吸收l生物碱沉淀剂生物碱沉淀剂l氧化氧化l与鈀离子络合与鈀离子络合 l卤素取代基卤素取代基l氯化物氯化物含量含量测定测定l酸碱滴定法酸碱滴定法lUVl鈀离子比色鈀离子比色法法 l HPLC2021/7/241 第十二章第十二章 喹啉与喹啉与 青蒿素类抗疟药物青蒿素类抗疟药物 的分析的分析2021/7/242 第一节第一节 喹啉类药物的分析喹啉类药物的分析一、基本结构与主要化学性质一、基本结构与主要化学性质 1.结构：本类药物均有结构：本类药物均有吡啶吡啶与与苯苯稠合而成的喹啉稠合而成的喹啉杂环杂环硫酸奎宁硫酸奎宁喹啉环喹啉环奎宁环奎宁环喹核碱喹核碱难溶于水难溶于水22021/7/243 二盐酸奎二盐酸奎宁宁—易溶于水易溶于水2021/7/244 硫酸奎宁硫酸奎宁硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁奎宁和奎尼丁的分子式相同，但立体结构不同，奎宁和奎尼丁的分子式相同，但立体结构不同，因此旋光性、碱性、溶解度也不同。
因此旋光性、碱性、溶解度也不同2021/7/245 磷酸哌喹磷酸哌喹磷酸氯喹磷酸氯喹2021/7/246 2.2.主要化学性质主要化学性质 （（1 1）碱性）碱性 奎宁碱性：脂环氮奎宁碱性：脂环氮(pKa 8.8) > >喹啉环系芳香喹啉环系芳香氮氮(pKa 4.2 ，不能与硫酸成盐，不能与硫酸成盐) （（2 2）旋光性）旋光性 硫酸奎宁（左旋体）硫酸奎尼丁（右硫酸奎宁（左旋体）硫酸奎尼丁（右 旋体）二盐酸奎宁（左旋体）旋体）二盐酸奎宁（左旋体）2021/7/247 （（3 3）紫外吸收光谱）紫外吸收光谱 喹啉环喹啉环 （（4 4）荧光特性）荧光特性 硫酸奎宁和二盐酸奎宁硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝在稀硫酸中显蓝色荧光色荧光2021/7/248 二、鉴别试验二、鉴别试验（一）绿奎宁（一）绿奎宁反应反应 奎宁为奎宁为6 6位含氧喹啉衍生物，可以发生位含氧喹啉衍生物，可以发生绿奎宁反应绿奎宁反应 6 6－含氧喹啉＋氯水＋氨水－含氧喹啉＋氯水＋氨水 二醌基亚二醌基亚 胺的铵盐胺的铵盐 ChPChP采用此法鉴别采用此法鉴别硫酸奎宁和二盐酸奎宁硫酸奎宁和二盐酸奎宁 （溴水）（溴水）2021/7/249 二醌亚胺盐二醌亚胺盐绿绿/ /翠绿色产物翠绿色产物CH3O—2021/7/2410 （二）光谱特征（二）光谱特征 1.1.紫外吸收光谱紫外吸收光谱 磷酸氯喹盐酸溶液（磷酸氯喹盐酸溶液（0.01mol/L0.01mol/L）） λλmaxmax：：222nm222nm、、257nm257nm、、329nm329nm、、343nm343nm 2. 2.荧光光谱特征荧光光谱特征硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝色荧光硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸中显蓝色荧光3.3.红外吸收光谱特征红外吸收光谱特征 2021/7/2411 （三）无机酸盐（三）无机酸盐 SO42-+Ba2- BaSO4 ↓ Cl-+Ag- AgCl ↓硫酸奎宁硫酸奎宁2021/7/2412 三、有关物质检查三、有关物质检查 （一）硫酸奎宁中有关物质检查（一）硫酸奎宁中有关物质检查 1.1.酸度酸度 控制药物中的酸性杂质控制药物中的酸性杂质 用用pHpH计测定计测定,pH,pH为为5.75.7～～6.66.6。
2.2.氯仿－乙醇中的不溶物氯仿－乙醇中的不溶物 控制药物在制备过程中引入的醇中不溶控制药物在制备过程中引入的醇中不溶 性杂质或无机盐类性杂质或无机盐类 3.3.其他金鸡钠碱其他金鸡钠碱 控制其他的生物碱控制其他的生物碱 TLCTLC（（ChPChP）：主成分自身对照法）：主成分自身对照法 HPLCHPLC（（BPBP）：峰面积归一化法）：峰面积归一化法 2021/7/2413 （二）磷酸咯萘啶中有关物质的检查（二）磷酸咯萘啶中有关物质的检查 1.1.酸度酸度 2.2.水中不溶物水中不溶物 3.3.氯化物：生产工艺带入氯化物：生产工艺带入 4.4.甲醛甲醛 5.5.四氢吡咯四氢吡咯 2021/7/2414 四、含量测定四、含量测定（一）硫酸奎宁（一）硫酸奎宁•非水滴定法测定硫酸奎宁的含量（非水滴定法测定硫酸奎宁的含量（ChP、、USP））•HPLC测定硫酸奎宁片的含量（测定硫酸奎宁片的含量（USP）） 2021/7/2415 a. a.硫酸奎宁硫酸奎宁 奎宁为二元碱，其中奎宁为二元碱，其中喹核氮喹核氮的碱性较强，的碱性较强，可可与硫酸生成盐与硫酸生成盐；而；而喹啉环喹啉环的碱性极弱，不能的碱性极弱，不能与硫酸成盐，而保持与硫酸成盐，而保持游离状态游离状态。
硫酸是二元酸，但在非水介质中，只显示硫酸是二元酸，但在非水介质中，只显示一元酸解离为一元酸解离为HSOHSO4 4- -，即只供给一个，即只供给一个H H+ +，所以硫，所以硫酸盐类药物在酸盐类药物在冰醋酸中冰醋酸中，只能滴定至，只能滴定至硫酸氢盐硫酸氢盐，，因此可以用高氯酸滴定液直接滴定因此可以用高氯酸滴定液直接滴定反应的摩尔比？反应的摩尔比？ 2021/7/2416 SO42-H+H+H+H+HSO4-H+H+H+H+ClO4-ClO4-ClO4-+3HClO42021/7/2417 牢记：牢记：lmol的硫酸奎宁消耗的硫酸奎宁消耗3mol的高氯酸的高氯酸 (C20H24N2O2· H+)2SO4 + 3HClO4 → (C20H24N2O2· 2H+)·2ClO4- + (C20H24N2O2· 2H+)·HSO4-·ClO4-ChPChP和和USPUSP都采用此法测定硫酸奎宁的含量都采用此法测定硫酸奎宁的含量2021/7/2418 b.b.硫酸奎宁片硫酸奎宁片 硫酸奎宁片剂碱化处理，生成奎宁游离硫酸奎宁片剂碱化处理，生成奎宁游离碱，然后再用高氯酸标准溶液直接滴定。
碱，然后再用高氯酸标准溶液直接滴定2021/7/2419 ClO4-ClO4-ClO4-ClO4-H+H+H+H+2分子游离奎宁分子游离奎宁2021/7/2420 1mol硫酸奎宁生成硫酸奎宁生成2mol奎宁奎宁 1mol奎宁消耗奎宁消耗2mol高氯酸高氯酸 1mol的硫酸奎宁消耗的硫酸奎宁消耗4mol的高氯酸的高氯酸 片剂分析的滴定度与原料药分析的滴定度不同片剂分析的滴定度与原料药分析的滴定度不同 2021/7/2421 五、体内药物分析五、体内药物分析-自学自学 HPLC法测定人体血液中的氯喹法测定人体血液中的氯喹 P3222021/7/2422 重点内容重点内容基本基本结构结构基本基本性质性质鉴别鉴别l喹啉环喹啉环l碱性侧链碱性侧链l碱性碱性; l荧光特性荧光特性l 旋光性；旋光性；l共轭共轭l绿奎宁反应绿奎宁反应l紫外紫外l荧光荧光l无机酸盐无机酸盐 含量含量测定测定l酸碱滴定酸碱滴定1:3 1:42021/7/2423 第二节第二节 青蒿素类药物的分析青蒿素类药物的分析2011年年9月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗月，中国女药学家屠呦呦因创制新型抗疟药疟药-青蒿素和双氢青蒿素青蒿素和双氢青蒿素的贡献，获得被誉为的贡献，获得被誉为诺贝尔奖诺贝尔奖“风向标风向标”的拉斯克奖。
这是中国生的拉斯克奖这是中国生物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖物医学界迄今为止获得的世界级最高级大奖 2021/7/2424 含含过氧过氧基团的新型倍半萜内酯基团的新型倍半萜内酯一、结构与理化性质一、结构与理化性质 1.结构结构青蒿素青蒿素双氢青蒿素双氢青蒿素2021/7/2425 v青蒿琥酯青蒿琥酯v蒿甲醚蒿甲醚2021/7/2426 2.化学性质化学性质 （（1）氧化性）氧化性 （（2）旋光性）旋光性 （（3）水解性）水解性 （（4））UV：末端吸收：末端吸收青蒿素青蒿素2021/7/2427 二、鉴别试验二、鉴别试验（一）呈色反应（一）呈色反应1.过氧桥的氧化反应（过氧桥的氧化反应（KI-淀粉）淀粉）2.羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应-内酯内酯3.香草醛香草醛-硫酸反应：硫酸反应：萜类萜类 （（ 1 ) 取本品约取本品约5 mg , 加无水乙醇加无水乙醇0.5 ml 溶解后溶解后,加碘化钾试加碘化钾试液液0.4ml，稀硫酸，稀硫酸2.5 ml 与淀粉指示液与淀粉指示液4 滴，立即显紫色滴，立即显紫色 2 ) 取本品约取本品约5 mg , 加无水乙醇加无水乙醇0.5 ml 溶解后，溶解后， 加盐酸羟胺试加盐酸羟胺试液液0.5 ml 与氢氧化钠试液与氢氧化钠试液0.25 ml , 置水浴中微沸，放冷后，加置水浴中微沸，放冷后，加盐酸盐酸2滴和三氯化铁试液滴和三氯化铁试液1滴，立即显深紫红色。
滴，立即显深紫红色 取本品约取本品约50mg，加三氯甲烷，加三氯甲烷l ml使溶解，取使溶解，取3~4 滴置白滴置白瓷板上，瓷板上， 待三氯甲烷挥发后，待三氯甲烷挥发后， 加加2%香草醛硫酸溶液香草醛硫酸溶液1滴，显红滴，显红色青蒿素青蒿素青蒿琥酯青蒿琥酯2021/7/2428 （二）光谱法（二）光谱法 IR（三）色谱法（三）色谱法 TLC HPLC：：210nm2021/7/2429 三、杂质检查三、杂质检查 青蒿素有关物质检查（青蒿素有关物质检查（TLC，，ChP2010））取出，晾干，喷以含取出，晾干，喷以含2%香草醛的香草醛的20%硫酸乙醇溶硫酸乙醇溶液，在液，在85℃加热加热10～～20 分钟至斑点清晰，分钟至斑点清晰，要求：要求：•对照品溶液应显青蒿素与双氢青蒿素各自的清晰斑对照品溶液应显青蒿素与双氢青蒿素各自的清晰斑点•供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液（供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液（1）主斑）主斑点比较，不得更深；与对照溶液（点比较，不得更深；与对照溶液（2）的主斑点比）的主斑点比较，深于对照溶液（较，深于对照溶液（2）主斑点的斑点不得多于）主斑点的斑点不得多于1个。
个 2021/7/2430 四、含量测定四、含量测定v双氢青蒿素片的含量测定双氢青蒿素片的含量测定—分解后的分解后的UV法法v测定法测定法 精密量取对照品溶液与供试品溶液各精密量取对照品溶液与供试品溶液各1ml，分别置，分别置10ml量瓶中，各精密加入乙醇量瓶中，各精密加入乙醇1ml，摇匀，，摇匀，加加2%氢氧化钠溶液至刻度，摇匀，置氢氧化钠溶液至刻度，摇匀，置60℃恒温水恒温水浴中反应浴中反应30分钟分钟，取出冷至室温，以，取出冷至室温，以2%氢氧化钠溶氢氧化钠溶液液-乙醇（乙醇（4:1）为空白，照分光光度法（附录）为空白，照分光光度法（附录Ⅳ A），在），在238nm的波长处分别测定吸收度，计算，的波长处分别测定吸收度，计算，即得 2021/7/2431 v分解后的紫外吸收图谱分解后的紫外吸收图谱2021/7/2432 HPLC法测定青蒿琥酯的含量法测定青蒿琥酯的含量v用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液（取磷酸二氢钾（取磷酸二氢钾1.36g，加水，加水1000 ml 使溶解，使溶解， 用磷酸调用磷酸调pH值至值至3.0 （（ 42:58)为流动相；柱温为流动相；柱温30℃℃ ；检测波长为；检测波长为210nm。
取取双氢青蒿素对照品双氢青蒿素对照品4mg，置，置10ml量瓶中，加甲醇溶解并稀量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，作为释至刻度，作为双氢青蒿素对照品溶液双氢青蒿素对照品溶液；另取本品；另取本品40mg，，置置10ml量瓶中，加双氢青蒿素对照品溶液量瓶中，加双氢青蒿素对照品溶液l ml ,加甲醇适量使加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，取溶解并稀释至刻度，取40 μ1注人液相色谱仪，双氢青蒿素注人液相色谱仪，双氢青蒿素呈现两个色谱峰，青蒿琥酯峰与相邻的双氢青蒿素峰的分离呈现两个色谱峰，青蒿琥酯峰与相邻的双氢青蒿素峰的分离度应符合要求度应符合要求v测定法测定法 取本品约取本品约25 m g , 精密称定，精密称定， 置置25 m l 量瓶中，量瓶中， 加加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20μ1，注人液相色，注人液相色谱仪，谱仪， 记录色谱图另取记录色谱图另取青蒿琥酯对照品青蒿琥酯对照品同法测定按外标同法测定按外标法以峰面积计算，即得法以峰面积计算，即得2021/7/2433 重点内容重点内容基本基本结构结构基本基本性质性质鉴别鉴别l倍半萜倍半萜l过氧桥过氧桥l内酯内酯l氧化性氧化性; l易水解易水解 l 旋光性；旋光性；l无共轭无共轭l碘化钾碘化钾-淀粉淀粉l羟肟酸铁反应羟肟酸铁反应l香草醛香草醛-硫酸硫酸 含量含量测定测定l水解后水解后UV法法l HPLC2021/7/2434 习 题v用溶剂提取后非水溶液滴定法测定硫酸奎宁用溶剂提取后非水溶液滴定法测定硫酸奎宁片的含量时，片的含量时，Imol的硫酸奎宁可消耗高氯酸的硫酸奎宁可消耗高氯酸的摩尔数是的摩尔数是 A. l/2mol B.1mol C.2mol D.3mol E.4molv 答案：答案：[E]2021/7/2435 v非水溶液滴定法测定硫酸奎宁原料药的含量非水溶液滴定法测定硫酸奎宁原料药的含量时，时，Imol的硫酸奎宁可消耗高氯酸的摩尔数的硫酸奎宁可消耗高氯酸的摩尔数是是 A. 1/2mol B.1mol C.2mol D.3mol E.4molv 答案：答案：[D] 2021/7/2436 v具有绿奎宁反应的药物是具有绿奎宁反应的药物是A．硫酸奎宁．硫酸奎宁 B．盐酸吗啡．盐酸吗啡 C．磷酸可待因．磷酸可待因 D．盐酸麻黄碱．盐酸麻黄碱 E．硫酸阿托品．硫酸阿托品v 答案：答案：[A] 2021/7/2437 v青蒿素采用的鉴别方法是青蒿素采用的鉴别方法是 A．碘化钾试液．碘化钾试液·淀粉反应淀粉反应 B．硫酸乙醇反应．硫酸乙醇反应 C．．UV D．茚三酮反应．茚三酮反应 E．以上均不是．以上均不是•能在稀硫酸溶液中显蓝色荧光的喹啉类的药物有能在稀硫酸溶液中显蓝色荧光的喹啉类的药物有 A．硫酸奎宁．硫酸奎宁 B．磷酸氯喹．磷酸氯喹 C．磷酸哌喹．磷酸哌喹 D．磷酸咯萘啶．磷酸咯萘啶 E．二盐酸奎宁．二盐酸奎宁 答案：答案：[AE]答案：答案：A2021/7/2438 v硫酸奎宁的检查项目有硫酸奎宁的检查项目有A．其他金鸡纳碱．其他金鸡纳碱 B．三氯甲烷一乙醇中不溶物．三氯甲烷一乙醇中不溶物 C．乙醇中不溶物．乙醇中不溶物 D．酸度．酸度 E．酸中不溶物．酸中不溶物v 答案：答案：[ABD] 2021/7/2439 v喹啉类药物的主要理化性质有喹啉类药物的主要理化性质有 A．弱碱性．弱碱性 B．不能与硫酸成盐．不能与硫酸成盐 C．旋光性．旋光性 D．弱酸性．弱酸性 E．紫外吸收特性．紫外吸收特性v 答案：答案：[ACE]2021/7/2440 v青蒿素类药物共有的化学性质有青蒿素类药物共有的化学性质有 A．氧化性．氧化性 B．还原性．还原性 C．能发生水解．能发生水解 D．母核中有共轭体系．母核中有共轭体系 E．旋光性．旋光性v 答案：答案：[AE]2021/7/2441 。