动物采血技术及血液常规检验课件

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1、学习项目二学习项目二实验室检验实验室检验学习任务一学习任务一血液常规检验血液常规检验子任务一子任务一 动物采血技术动物采血技术 血液检验血液检验血液样本的采取与抗凝血液样本的采取与抗凝血液样本的采取血液样本的采取 采血的部位和方法,根据检验的项目、所采血的部位和方法,根据检验的项目、所需血量和动物种类的不同,可分为毛细血需血量和动物种类的不同,可分为毛细血管采血、静脉采血和心脏采血。管采血、静脉采血和心脏采血。毛毛细细血血管管采采血血法法 除除血血沉沉测测定定和和红红细细胞胞压压积积测测定定需需较较多多量量血血液液外外,其其他他各各项项测测定定均均可可在在耳耳尖尖、耳耳缘缘及及耳耳静静脉脉处处

2、按按毛毛细细血血管管采采血血。采采血血前前先先剪剪毛毛,酒酒精精棉棉球球消消毒毒,待待酒酒精精挥挥发发后后,用用消消毒毒的的干干燥燥的的针针头头迅迅速速刺刺入入23mm23mm深深,让让血血液液自自然然流流出出,且且勿勿挤挤压以免混入过多组织液。压以免混入过多组织液。流流出出的的第第一一滴滴血血,可可用用于于制制作作血血片片,然然后后用用干干棉棉球球擦擦去去局局部部的的剩剩余余血血液液,用用流流出出的的第第二二滴滴血血液液作作红红、白白细细胞胞计计数数和和血血红红蛋蛋白白测测定定,若若利利用用第第三三滴滴血血时时,仍仍要要将将第第二二滴滴血血擦擦干干,否否则则流流出出的血不能形成滴状,不易吸取

3、。的血不能形成滴状,不易吸取。静静脉脉采采血血法法 马马、牛牛、羊羊可可由由颈颈静静脉脉采采血血。鸡鸡可可由由翼翼下下静静脉脉采采血血,即即用用细细针针头头刺刺入入翼翼下下静静脉脉后后,任任血血液液自自行行流流出出并并接接入入试试管管中中。犬犬、猫猫可可于于小小腿腿外外侧侧跖跖背背外外侧侧静静脉脉或或前前臂臂内内侧侧皮皮下下静静脉脉采采血血。局局部部剪剪毛毛消消毒毒,用用止止血血带带扎扎住住采采血血部部上上端端,使使静静脉脉怒怒张张,用用消消毒毒、干干燥燥的的注注射射器器接接上上针针头头,针针头头斜斜上上面面刺刺入入静静脉脉采采血血,待待抽抽至至所所需需量量后后,先先放放松松止止血血带带,再再

4、用用消消毒毒棉棉球球按按住住伤伤口口,拔拔出出针针头头。除除去去针针头头,将将血血液液缓缓缓缓注注入入清清洁洁的的试试管管内内。需需抗抗凝凝血血液液时时,试试管管内内加加抗抗凝凝剂剂,并并立立即即混混匀匀,以以免免凝固。凝固。心心脏脏采采血血法法 多多用用于于鸡鸡及及实实验验动动物物多多量量血血液液时时,鸡鸡可可由由胸胸腔腔入入口口处处向向心心脏脏刺刺入入由由于于心心腔腔压压力力较较静静脉脉高高,血血液液自自然然涌涌入入注注射射器器,兔兔及及鸡鸡亦亦可可在在左左侧侧胸胸部部第第1 1、2 2肋肋间间,心心搏搏动动明明显显处处的的肋肋间间隙隙,针针头头与与胸胸壁壁呈呈垂垂直方向刺入。直方向刺入。

5、牛尾静脉采血牛尾静脉采血采样者接触牛的头部,容易引起牛发惊,难保定,牛角容易伤人,危险性大,特别是奶牛应激强烈,产奶量减少,容易引起流产,造成经济损失。牛尾静脉采血法采集,接触牛尾部,牛不惊,牛尾神经相对迟钝,疼痛轻,保定省力,只须一人将牛牵好即可,无应激。1、尾静脉采血部位、尾静脉采血部位 牛尾静脉位于牛尾腹侧面的中心线皮下位置,因离尾根大约牛尾静脉位于牛尾腹侧面的中心线皮下位置,因离尾根大约10cm处,静脉较粗且较浅,所以此处为采血最佳部位。处,静脉较粗且较浅,所以此处为采血最佳部位。 2、 采血过程采血过程 助手将牛牵好,采血者左手托起牛尾巴,右手对采血部位消助手将牛牵好,采血者左手托起

6、牛尾巴,右手对采血部位消毒后,持带有毒后,持带有7号针头的一次性注射器,右手食指控制针头号针头的一次性注射器,右手食指控制针头深度,由下向上垂直刺入牛尾腹侧中心线位置约深度,由下向上垂直刺入牛尾腹侧中心线位置约0.5cm见有见有回血即可抽血,一般采用回血即可抽血,一般采用5ml即可,拔出采血针,用酒精棉即可,拔出采血针,用酒精棉球压一下针孔防止出血。球压一下针孔防止出血。 注意事项注意事项1.做好保定做好保定:保定后,牛不要左右活动,采血者左手托起牛尾巴,与水平线成45度角左右。 2.找准部位找准部位: 保定后选择最佳采血点,第4、5尾椎交界中点凹陷处垂直刺入,针头刺入约1cm深,针头触到尾骨

7、后再后退1mm,轻轻抽动注射器内芯,直到抽出一定量的血液为止,采到的动脉血鲜红,量多,如果是静脉血颜色暗,量少。3.做好消毒卫生做好消毒卫生: 采血前要清理牛舍粪便、尿液,保持圈舍、牛体干净卫生,以免污染采血部位和血样;采血部位要用75%的酒精棉球消毒,防止感染。 4.注意人身安全卫生注意人身安全卫生: 在进行尾部采血时,采血者要上身前倾,腿后移,以防被牛踢伤;要穿工作服,高筒水鞋,防止牛粪飞溅身上。 猪采血技术猪采血技术 猪场采血在基层兽医临床上是一项重要的工作。目前,大多数猪场都是使用耳静脉抽血的方法采血,这种方法费时费力,结合生产实际总结了几种采血方法,主要包括耳静脉采血、前腔静脉采血、

8、尾静脉采血和乳静脉采血。前腔静脉采血猪的尾静脉采血乳静脉采血 鸡翼下静脉采血法鸡翼下静脉采血法 静脉又称容量血管,其内含血量较多且流速较慢,位于翼下静脉具此特点,此静脉易找到,健康安全范围内在此可采血1020ml。而且操作方便,单人即可完成,采血量极易控制,止血彻底,对家禽影响小。 采血步骤:术者右手持注射器,左手将家禽双翼提起,露出翼静脉的采血位置,把覆盖血管的羽毛拔开,即可见到明显一条较粗的静脉血管。采血时用左手大拇指夹住覆盖静脉的羽毛,食指协调大拇指夹住双翼,中指、无名指和手掌轻轻提起或轻按背部保定鸡只,待其安静方可刺针。针头在距静脉血管0.30.5cm一旁倾斜刺入皮肤,再与血管平行进针

9、0.20.4cm后刺入血管,见有少量回血即可采集血液,采血完成后马上用手压迫伤口止血。 分离血清采完血后,先将血清放到37度静置2小时,然后再4度过夜,这样出的血清多。实在不行,将凝固的血液用针头划几下,效果比较好。如果成胶冻样,可以高速离心,就能分离出血清了。 血液检验血液检验血液的抗凝血液的抗凝草酸钠草酸钠 是常用的抗凝剂,每是常用的抗凝剂,每1.51.52.0mg2.0mg可抗凝可抗凝1.0ml1.0ml血液,可用于血液常规检验。因对红细胞大小有影响,血液,可用于血液常规检验。因对红细胞大小有影响,故不能用红细胞压积测定,如测定红细胞压积时,可故不能用红细胞压积测定,如测定红细胞压积时,

10、可用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。用双草酸盐抗凝剂或乙二胺四乙酸二钠。双草酸盐抗凝剂双草酸盐抗凝剂 草酸钠草酸钠 0.8g0.8g草酸铵草酸铵 1.2g1.2g蒸馏水蒸馏水 加至加至100ml 100ml 溶解后吸取溶解后吸取0.5ml0.5ml,加入供采血试管或小瓶中,置干燥加入供采血试管或小瓶中,置干燥箱内(温度不超过箱内(温度不超过8080)烘干备用,可供)烘干备用,可供5ml5ml全血抗凝全血抗凝血液检验血液检验乙乙二二胺胺四四乙乙酸酸二二钠钠(EDTAEDTANaNa2 2)每每10mg10mg可可使使5ml5ml全全血血抗抗凝凝;或或配配成成10%10%的的溶溶液液,每每2 2

11、滴滴可可使使5ml5ml全全血血抗抗凝凝。可可适适用用于于一一般般的的血血液液学学检检查查,特特别别是是血血小小板板计计数数,但但因因为为影影响响血血小小板板聚聚集集和和白白细细胞胞吞吞噬噬功功能能,不不适适合合于于血血象及血小板功能检查。象及血小板功能检查。3.8%3.8%枸枸橼橼酸酸钠钠溶溶液液 每每0.5ml0.5ml可可使使5ml5ml全全血血抗抗凝凝。常常用用于于血血沉沉、凝凝血血因因子子和和血血小小板板功功能能检检查查。因因其其毒毒性性小小又又可可作作为为血血液液保保养养液液。但但不不适适用用于于血血液液化化学学检检验验。由由于于抗抗凝凝剂剂溶溶解解缓缓慢慢,故故只只能能配配成成溶

12、溶液液,不不能能用用粉粉剂。剂。血液的抗凝血液的抗凝血液检验血液检验肝素肝素 肝素价格最贵,其优点是抗凝作用强,不影响肝素价格最贵,其优点是抗凝作用强,不影响血细胞的体积,不致溶血等,可用于多种血液生物化血细胞的体积,不致溶血等,可用于多种血液生物化学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细学分析和红细胞压积测定。但过量的肝素可引起白细胞聚集和血小板减少,故不适用于白细胞和血小板计胞聚集和血小板减少,故不适用于白细胞和血小板计数,也不适用于血涂片检查,因其在瑞氏染色时会出数,也不适用于血涂片检查,因其在瑞氏染色时会出现蓝色背景,更不能用于凝血象的检查。现蓝色背景,更不能用于凝血象的检查。血

13、液的抗凝血液的抗凝通常用肝素粉剂配成通常用肝素粉剂配成1g/L1g/L水溶液。取水溶液。取0.5ml0.5ml置小瓶内,置小瓶内,放于放于37375050中烘干后贮于冰箱内保存。能使中烘干后贮于冰箱内保存。能使5ml5ml血液血液不凝固,肝素抗凝剂应及时使用,放置过久易失效。不凝固,肝素抗凝剂应及时使用,放置过久易失效。怀疑传染病时,采血应防止到处流散,检后残余血液及怀疑传染病时,采血应防止到处流散,检后残余血液及所用器皿应进行消毒处理。所用器皿应进行消毒处理。子任务二子任务二 红细胞沉降率(红细胞沉降率(ESPESP)测定)测定血液检验血液检验红细胞沉降率测定红细胞沉降率测定魏氏法魏氏法魏魏

14、氏氏血血沉沉管管长长30cm,内内径径2.5mm管管上上有有0200的的刻刻度度,每每一一刻刻度度的距离为的距离为1mm,其溶积为其溶积为1ml。先先向向10ml刻刻度度试试管管中中加加入入3.8%枸枸橼橼酸酸1ml,再再自自静静脉脉采采血血4ml,颠颠倒倒混混合合数数次次,然然后后用用魏魏氏氏血血沉沉管管吸吸取取抗抗凝凝剂剂至至刻刻度度0处处,擦擦去去管管外外血血液液,在在室室温温条条件件下下,垂垂直直放放于于血血沉沉管管架架上上,经经15、30、45、60min,分别观察并记录细胞沉降数值。分别观察并记录细胞沉降数值。血液检验血液检验红细胞沉降率测定红细胞沉降率测定“六五六五”型血沉管法型

15、血沉管法“六五六五”型血沉管法内径型血沉管法内径0.9cm,全长全长1720cm,管管上有上有100个刻度容积为个刻度容积为10ml。于血沉管中加入抗凝剂(草酸钠于血沉管中加入抗凝剂(草酸钠0.0150.02g,枸橼酸枸橼酸钠粉末钠粉末0.040.05g),自颈静脉直接采血至刻度自颈静脉直接采血至刻度“0”处,处,立即充分混合,于室温垂直立于试管架上,镜立即充分混合,于室温垂直立于试管架上,镜15、30、45、60min各观察一次,并记录红细胞沉降的数值。各观察一次,并记录红细胞沉降的数值。血液检验血液检验红细胞沉降率测定红细胞沉降率测定各种动物的正常血沉值各种动物的正常血沉值动物种类动物种类

16、15分分30分分45分分60分分测定方法测定方法马马驴驴黄牛黄牛水牛水牛奶牛奶牛山羊山羊猪猪31329.80.33497530.80.785396.7650.752055110.70.891.61.20.630六五型法六五型法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法魏氏法六五型法六五型法测测定定血血沉沉时时必必须须用用新新配配制制的的抗抗凝凝血血;血血液液与与抗抗凝凝剂剂混混合合要要充充分分,柱柱面面上上不不应应有有气气泡泡,它它可可使使血血沉沉变变慢慢;用用魏魏氏氏法法测测定定时时,事事先先应应检检查查血血沉沉架架是是否否好好用用,以以防防漏漏用用;测测定定时时室室温温以以20

17、左左右右为为宜宜,温温度度过低可以减慢血沉。过低可以减慢血沉。血沉加快血沉加快,见于马传染性贫血、梨形虫病、结核、鼻疽、猪,见于马传染性贫血、梨形虫病、结核、鼻疽、猪瘟、化脓性炎症、风湿症等。瘟、化脓性炎症、风湿症等。血沉减慢血沉减慢,见于大出汗、多尿、剧烈腹泻、马流行性脑脊髓,见于大出汗、多尿、剧烈腹泻、马流行性脑脊髓炎、破伤风、牛瓣胃阻塞、腹痛症等。炎、破伤风、牛瓣胃阻塞、腹痛症等。子任务三子任务三 红细胞压积容量(红细胞压积容量(PCV)测定)测定血液检验血液检验红细胞压积测定红细胞压积测定将一定量的抗凝血液注入特制的测定将一定量的抗凝血液注入特制的测定管中,用一定速度和时间离心沉淀,管

18、中,用一定速度和时间离心沉淀,使红细胞压缩到最小容积,读取沉积使红细胞压缩到最小容积,读取沉积红细胞占全血的百分比。红细胞占全血的百分比。 用毛细玻璃吸管或长针头吸满抗凝全血,用毛细玻璃吸管或长针头吸满抗凝全血, 插入红细插入红细胞压积容量测定管,随后轻轻捏胶皮乳头,自下而胞压积容量测定管,随后轻轻捏胶皮乳头,自下而上挤入血液至刻度上挤入血液至刻度 10 处,处, 但吸管口或长针头尖在挤但吸管口或长针头尖在挤血过程中不要提出液面,以免液面形成气泡,影响血过程中不要提出液面,以免液面形成气泡,影响结果。结果。 将测定管置入电动离心机内,将测定管置入电动离心机内,3000rmin,牛血及猪血离,牛

19、血及猪血离心心 40min,离心后管内的血柱分为三层。上层为淡黄色,离心后管内的血柱分为三层。上层为淡黄色或白色的血浆;中部一薄层为灰白色,完全不透明,是或白色的血浆;中部一薄层为灰白色,完全不透明,是由白细胞及血小板所组成;下层为红细胞的叠积层。读由白细胞及血小板所组成;下层为红细胞的叠积层。读取红细胞柱层的刻度数,即为红细胞压积容量数值,数取红细胞柱层的刻度数,即为红细胞压积容量数值,数值用百分率表示。值用百分率表示。血液检验血液检验生理性增高生理性增高:多因家畜在兴奋、紧张或运动之后。由于脾脏收缩将贮存:多因家畜在兴奋、紧张或运动之后。由于脾脏收缩将贮存的红细胞释放到外周血液所致。的红细

20、胞释放到外周血液所致。 病理性增高病理性增高:见于各种性质脱水,如急性肠炎、牛瓣胃阻塞、急性腹膜:见于各种性质脱水,如急性肠炎、牛瓣胃阻塞、急性腹膜炎、食管梗塞、咽炎、小动物的呕吐。炎、食管梗塞、咽炎、小动物的呕吐。压压积积降降低低:主主要要见见于于各各种种贫贫血血,如如营营养养不不良良性性贫贫血血、寄寄生生虫虫性性贫贫血血、溶血性贫血、出血性贫血。溶血性贫血、出血性贫血。 临床意义临床意义子任务四子任务四 红细胞渗透脆性测定红细胞渗透脆性测定血液检验血液检验红细胞渗透脆性测定红细胞渗透脆性测定抗凝全血一份,先用生理盐水将红细胞洗涤抗凝全血一份,先用生理盐水将红细胞洗涤 1 12 2 次,次,

21、 然后做成然后做成 10%10%红细胞红细胞生理盐水悬液。取生理盐水悬液。取 10 10 亳升刻度试管亳升刻度试管 22 22 支,排列于试管架上,依次编号,按支,排列于试管架上,依次编号,按上表管号每管各加低渗氯化钠溶液上表管号每管各加低渗氯化钠溶液 5ml5ml。 用带胶皮乳头滴管吸用带胶皮乳头滴管吸 10%10%红细胞生红细胞生理盐水悬浮液,向每支试管各加理盐水悬浮液,向每支试管各加 2 2 滴,轻轻混合,室温中放置滴,轻轻混合,室温中放置 101015min 15min 后,后,离心离心 5min5min,读取结果。溶液如被染成浅桃红色,管底有大量红细胞沉渣,则,读取结果。溶液如被染成

22、浅桃红色,管底有大量红细胞沉渣,则为红细胞最大抵抗力。为红细胞最大抵抗力。 红细胞在等渗氯化钠溶液中,形态保持不变。红细胞在不同红细胞在等渗氯化钠溶液中,形态保持不变。红细胞在不同浓度低渗氯化钠溶液中,水分进入红细胞,红细胞逐渐胀大浓度低渗氯化钠溶液中,水分进入红细胞,红细胞逐渐胀大以至破裂溶血。开始溶血(即部分红细胞破裂)为最小抵抗以至破裂溶血。开始溶血(即部分红细胞破裂)为最小抵抗力;完全溶血(即全部红细胞破裂)为最大抵抗力。抵抗力力;完全溶血(即全部红细胞破裂)为最大抵抗力。抵抗力小,表示渗透脆性高;抵抗力大,表示渗透脆性低。通过这小,表示渗透脆性高;抵抗力大,表示渗透脆性低。通过这项检

23、验,可测定红细胞对于低渗溶液抵抗能力的大小。项检验,可测定红细胞对于低渗溶液抵抗能力的大小。血液检验血液检验渗透脆性增高:即病畜的红细胞比其正常的红细胞对于低渗溶液的渗透脆性增高:即病畜的红细胞比其正常的红细胞对于低渗溶液的抵抗力下降而易脆裂。主要见于犬、猫自体免疫性溶血。由于机体抵抗力下降而易脆裂。主要见于犬、猫自体免疫性溶血。由于机体自身红细胞产生球蛋白抗体,这种球蛋白抗体被覆于红细胞胞膜,自身红细胞产生球蛋白抗体,这种球蛋白抗体被覆于红细胞胞膜,使红细胞厚度增加接近球形,水分容易进入红细胞而致破裂。此外,使红细胞厚度增加接近球形,水分容易进入红细胞而致破裂。此外,还见于家畜溶血性毒物中毒

24、及其它溶血性疾病。还见于家畜溶血性毒物中毒及其它溶血性疾病。 渗渗透透脆脆性性减减低低:即即病病畜畜的的红红细细胞胞比比其其正正常常的的红红细细胞胞对对于于低低渗渗溶溶液液的的抵抵抗抗力力增增大大。多多见见于于仔仔猪猪等等幼幼畜畜缺缺铁铁性性贫贫血血。缺缺铁铁性性贫贫血血的的红红细细胞胞胞胞体体扁扁而而薄薄,其中含血红蛋白量少,进入较多水分方后即可破裂。其中含血红蛋白量少,进入较多水分方后即可破裂。 临床意义临床意义一般动物一般动物 0.62%0.84%Nacl 溶液开始溶血,溶液开始溶血,3.84.4g 溶液完全溶血,红溶液完全溶血,红细胞渗透性测定的目的主要在于了解贫血,尤其是溶血性贫血的

25、性质。细胞渗透性测定的目的主要在于了解贫血,尤其是溶血性贫血的性质。 子任务五子任务五 血液凝固时间测定血液凝固时间测定血液检验血液检验血液凝固时间测定血液凝固时间测定玻片法玻片法:采血,见到出血后立即用秒表记录时间。取血一滴,滴在玻:采血,见到出血后立即用秒表记录时间。取血一滴,滴在玻片一端,随即玻片稍稍倾斜,滴血一端向上。此时未凝固血液自上而片一端,随即玻片稍稍倾斜,滴血一端向上。此时未凝固血液自上而下流动,形成一条血线,放在室温下的平皿内,防止血液中水分蒸发,下流动,形成一条血线,放在室温下的平皿内,防止血液中水分蒸发,静置静置 2min,以后每隔,以后每隔 30秒用针尖挑动血线一次,待

26、针头挑起纤维丝时,秒用针尖挑动血线一次,待针头挑起纤维丝时,即停止秒表,记录时间,这段时间就是血凝时间。即停止秒表,记录时间,这段时间就是血凝时间。 按照血液凝固理论,当离体血液与异按照血液凝固理论,当离体血液与异物表面接触后,激活了血液中有关凝物表面接触后,激活了血液中有关凝血因子,形成凝血活酶,以至纤维蛋血因子,形成凝血活酶,以至纤维蛋白原转变成纤维蛋白,血液凝固。白原转变成纤维蛋白,血液凝固。 试管法试管法:采血前准备刻度小试管:采血前准备刻度小试管 3 支,并预先放在支,并预先放在 2537恒温水浴恒温水浴箱内。颈静脉采血,见到出血立即用秒表开始计时。随之将血液分别加箱内。颈静脉采血,

27、见到出血立即用秒表开始计时。随之将血液分别加入入 3 支试管内,每支试管各加支试管内,每支试管各加 1ml,再将试管放回水浴箱。从采血经放,再将试管放回水浴箱。从采血经放置置 3min 后,先从第后,先从第 1管做起,每隔管做起,每隔30 秒逐次倾斜试管一次,直到翻转秒逐次倾斜试管一次,直到翻转试管血液不能流出为止,并记录时间。试管血液不能流出为止,并记录时间。3 支小试管的平均时间即为血凝支小试管的平均时间即为血凝时间。时间。 血液检验血液检验凝血时间延长凝血时间延长:见于重度贫血、血斑病、某些出血性素质高、严重:见于重度贫血、血斑病、某些出血性素质高、严重肝脏疾病。炭疽病畜的血凝时间很长,

28、甚至几乎不凝。肝脏疾病。炭疽病畜的血凝时间很长,甚至几乎不凝。 血凝时间延血凝时间延长原因主要由于凝血因子明显减少或缺乏所致。长原因主要由于凝血因子明显减少或缺乏所致。 凝血时间缩短凝血时间缩短:兽医临床较少见,偶见于纤维素性肺炎:兽医临床较少见,偶见于纤维素性肺炎。 临床意义临床意义在兽医临床手术特别是大手术,或肝、脾等穿刺前,最好进行这项测定,在兽医临床手术特别是大手术,或肝、脾等穿刺前,最好进行这项测定,旨在及早发现出血性素质高的者,以防发生大量出血。旨在及早发现出血性素质高的者,以防发生大量出血。 子任务六子任务六 血红蛋白测定血红蛋白测定血液检验血液检验血红蛋白测定血红蛋白测定红细胞

29、遇酸溶解,游离出血红蛋白,红细胞遇酸溶解,游离出血红蛋白,并被酸化为褐色的酸性血红素,稀释并被酸化为褐色的酸性血红素,稀释后与标准色柱比色,即可求得血红蛋后与标准色柱比色,即可求得血红蛋白的含量。白的含量。血血红红蛋蛋白白试试纸纸测测定定法法 器器材材应应备备有有测测定定血血红红蛋蛋白白试试纸纸和和4g%15g%血血红红蛋蛋白白标标准准比比色色板板。测测定定时时,取取试试纸纸一一条条,吸吸附附被被检检血血液液一一小小滴滴,待待血血完完全全浸浸透透后后,立立即即置置于于所所附附标标准准色色板板的的小小孔孔下下,肉肉眼眼与与色色板板色色泽泽进进行行比比较较,选选择择颜颜色色相相同同或或近近似似者者

30、,即即得得100ml血血液液所含血红蛋白的克数。所含血红蛋白的克数。沙利氏血红蛋白测定法沙利氏血红蛋白测定法 沙利氏血红蛋白计由比色架、标沙利氏血红蛋白计由比色架、标准比色柱、血红蛋白测定管及血红蛋白吸管组成。测定准比色柱、血红蛋白测定管及血红蛋白吸管组成。测定管有两个刻度标志,一侧的管有两个刻度标志,一侧的224刻度表示刻度表示100ml血液中含血液中含有的血红蛋白克数;另一侧有有的血红蛋白克数;另一侧有20160刻度,表示刻度,表示100ml血血液中所含血红蛋白的百分数。液中所含血红蛋白的百分数。血液检验血液检验血红蛋白测定血红蛋白测定动物种类动物种类血红蛋白值(克血红蛋白值(克/100/

31、100毫升毫升)马、骡马、骡11.011.0(9.09.013.013.0)牛牛10.010.0(9.09.011.011.0)水牛水牛8.38.3(8.08.09.09.0)羊羊9.89.8(7.87.811.611.6)猪猪10.510.5(9.512.0)鸡鸡12.512.5(10.014.5)血红蛋白增高血红蛋白增高 见于各种原因引见于各种原因引起的血液浓缩,如腹泻、呕吐、起的血液浓缩,如腹泻、呕吐、大汗、多尿及肠梗阻等。大汗、多尿及肠梗阻等。血红蛋白减少血红蛋白减少 见于各种贫血,见于各种贫血,如马鼻疽、牛结核、牛羊肝片如马鼻疽、牛结核、牛羊肝片吸虫病、仔猪蛔虫等。吸虫病、仔猪蛔虫等

32、。子任务七子任务七 红细胞计数红细胞计数血液检验血液检验红细胞计数红细胞计数红红细细胞胞计计数数是是将将一一定定量量的的供供检检血血液液经经一一定定倍倍数数稀稀释释后后,计计数数一一定定容容积积的的红红细细胞胞数数,并并换换算算为为每立方毫米血液内含量。每立方毫米血液内含量。血液检验血液检验红细胞计数红细胞计数健康动物红细胞数(万健康动物红细胞数(万/立方毫米)立方毫米)动物种类动物种类平均数值平均数值变动范围变动范围马马650600700牛(包括水牛)牛(包括水牛)600550700绵羊绵羊9008001100山羊山羊130010001600猪猪600500700鸡鸡350250500红细胞

33、增多红细胞增多 可见于因各种原因引起的血液浓缩,如大出汗、胸可见于因各种原因引起的血液浓缩,如大出汗、胸膜炎和腹膜炎的渗出期等。膜炎和腹膜炎的渗出期等。红细胞减少红细胞减少 多见于各种类型贫血,如马传染性贫血、牛梨形虫多见于各种类型贫血,如马传染性贫血、牛梨形虫病、仔猪营养性贫血、新生幼畜溶血病、牛血红蛋白尿病等。病、仔猪营养性贫血、新生幼畜溶血病、牛血红蛋白尿病等。子任务八子任务八 白细胞计数白细胞计数血液检验血液检验白细胞计数白细胞计数用冰醋酸将红细胞破坏后,计算用冰醋酸将红细胞破坏后,计算每立方毫米内白细胞总数。每立方毫米内白细胞总数。健康动物白细胞数(个健康动物白细胞数(个/立方毫米)

34、立方毫米)动物种类动物种类平均数值平均数值变动范围变动范围马马800070009000黄牛、奶牛黄牛、奶牛750070008000水牛水牛880080009000绵羊绵羊850080009500山羊山羊10000700013000猪猪130001100016000鸡鸡200001800030000白细胞增多白细胞增多 可见于多数细菌性感染和炎症,如猪丹毒、猪肺疫、结核、可见于多数细菌性感染和炎症,如猪丹毒、猪肺疫、结核、马鼻疽、马腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病时以白细胞的显著马鼻疽、马腺疫、肺炎、胸膜炎、腹膜炎等。白血病时以白细胞的显著增多为特征。增多为特征。白细胞减少白细胞减少 主要见

35、于某些病毒性传染病,如猪瘟、流感等;某些重度疾主要见于某些病毒性传染病,如猪瘟、流感等;某些重度疾病的后期;长期应用某些药物(如氯霉素等);梨形虫病等。病的后期;长期应用某些药物(如氯霉素等);梨形虫病等。子任务九子任务九 白细胞分类计数白细胞分类计数血液检验血液检验白细胞分类计数白细胞分类计数以以百百分分率率表表示示各各种种类类型型白白细细胞胞间间的的数数量量关关系系,称称为为白白细细胞胞分分类类计计数。数。健康动物各类白细胞分类数值(健康动物各类白细胞分类数值(%)动物动物种类种类嗜碱性嗜碱性细胞细胞嗜酸性嗜酸性细胞细胞嗜中性细胞嗜中性细胞淋巴淋巴细胞细胞大单核大单核细胞细胞幼稚型幼稚型杆

36、状核杆状核分叶核分叶核马马牛牛水牛水牛猪猪羊羊0.50.50.50.50.54.54.010.02.55.50.51.04.04.04.55.01.053.033.035.035.033.035.056.047.053.057.03.02.03.03.03.0血液检验血液检验临床意义临床意义白细胞增多白细胞增多嗜中性白细胞增多嗜中性白细胞增多:见于猪、牛巴氏杆菌病、马腺:见于猪、牛巴氏杆菌病、马腺疫、肺炎及化脓性感染等。疫、肺炎及化脓性感染等。嗜酸性白细胞增多嗜酸性白细胞增多:见于某些蠕虫病、过敏性疾病:见于某些蠕虫病、过敏性疾病及湿疹等。及湿疹等。淋巴细胞增多淋巴细胞增多:见于结核、鼻疽、布

37、氏杆菌病、猪:见于结核、鼻疽、布氏杆菌病、猪瘟及牛梨形虫病。瘟及牛梨形虫病。单核细胞增多单核细胞增多:见于败血性疾病,某些梨形虫病及:见于败血性疾病,某些梨形虫病及李氏杆菌等。李氏杆菌等。白细胞减少白细胞减少嗜中性白细胞减少嗜中性白细胞减少:见于病毒性传染病、药物中毒:见于病毒性传染病、药物中毒(如长期服用抗生素)、各种疾病的垂危期。(如长期服用抗生素)、各种疾病的垂危期。嗜酸性白细胞减少嗜酸性白细胞减少:见于败血症、某些病毒病及牛梨:见于败血症、某些病毒病及牛梨形虫病等。形虫病等。淋巴细胞减少淋巴细胞减少:多为嗜中性白细胞增多而造成的相对:多为嗜中性白细胞增多而造成的相对性变化。性变化。血液

38、检验血液检验在分析嗜中性白细胞增、减变化时,还应注意嗜中性白在分析嗜中性白细胞增、减变化时,还应注意嗜中性白细胞的成熟情况。若未成熟的嗜中性白细胞增多,即出细胞的成熟情况。若未成熟的嗜中性白细胞增多,即出现嗜中性髓样细胞、幼稚型和杆状核嗜中性白细胞的比现嗜中性髓样细胞、幼稚型和杆状核嗜中性白细胞的比例增多,则称为核左移。若血液内分叶核嗜中性白细胞例增多,则称为核左移。若血液内分叶核嗜中性白细胞大量增多,而且核的分叶数目也增多,则称为核右移。大量增多,而且核的分叶数目也增多,则称为核右移。 白白细细胞胞总总数数增增多多的的同同时时,出出现现核核左左移移,表表示示骨骨髓髓造造血血机机能能加加强强,

39、机机体体处处于于积积极极防防御御阶阶段段;而而白白细细胞胞总总数数减减少少时时见见有有核核左左移移,则则表表示示骨骨髓髓造造血血机机能能减减退退,机机体体的的抗抗病病力力降降低低。至至于于核核右右移移,乃乃骨骨髓髓造造血血功功能能衰衰退退的的标标志,多因机体高度衰竭而引起,常提示预后慎重。志,多因机体高度衰竭而引起,常提示预后慎重。临床意义临床意义子任务十子任务十 血小板计数血小板计数血液检验血液检验血小板计数血小板计数尿素能溶解红细胞及白细胞而保存完整形尿素能溶解红细胞及白细胞而保存完整形态的血小板,经稀释后在细胞计数室内直态的血小板,经稀释后在细胞计数室内直接计数,以求得每立方毫米血液内的

40、血小接计数,以求得每立方毫米血液内的血小板数。稀释液中的枸椽酸钠有抗凝作用,板数。稀释液中的枸椽酸钠有抗凝作用,甲醛可固定血小板的形态。甲醛可固定血小板的形态。 吸取稀释液吸取稀释液 0.38ml 置于小试管中。用沙利吸血管吸取末梢血液或用置于小试管中。用沙利吸血管吸取末梢血液或用加有加有 EDTANa2 抗凝剂的新鲜静脉血液至抗凝剂的新鲜静脉血液至 20 mm 3 刻度处,擦去管刻度处,擦去管外沾附的血液,插入试管,吹吸数次,轻轻振摇,充分混匀。静置外沾附的血液,插入试管,吹吸数次,轻轻振摇,充分混匀。静置 20min 以上,使红细胞溶解。充分混匀后,用毛细吸管吸取以上,使红细胞溶解。充分混

41、匀后,用毛细吸管吸取1 小滴,小滴,充入计数室内,静置充入计数室内,静置 10min,用高倍镜观察。任选计数室一个大方,用高倍镜观察。任选计数室一个大方格,按计数法则计数。在高倍镜下,血小板呈椭圆形、圆形或不规格,按计数法则计数。在高倍镜下,血小板呈椭圆形、圆形或不规则折光小体,注意切勿误将尘埃等异物计入。则折光小体,注意切勿误将尘埃等异物计入。 血液检验血液检验血小板减少:血小板生成减少,见于再生性障碍贫血、急血小板减少:血小板生成减少,见于再生性障碍贫血、急性白血病、放化疗之时;血小板破坏增多,见于原发性血性白血病、放化疗之时;血小板破坏增多,见于原发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进。血小板

42、消耗过多,见于弥小板减少性紫癜、脾功能亢进。血小板消耗过多,见于弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜。散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜。 血血小小板板增增多多:见见于于原原发发性性血血小小板板增增多多症症;继继发发性性见见于于急急性性感染、急性出血及急性溶血。感染、急性出血及急性溶血。 临床意义临床意义子任务十一子任务十一 血液分析仪及其在兽医临床上的应用血液分析仪及其在兽医临床上的应用数数 目前,各类血液分析仪主要能完成两大功能:目前,各类血液分析仪主要能完成两大功能: 细胞计数功能。细胞计数功能。 细胞分类功能。细胞分类功能。 血液分析仪检测原理主要是电阻抗法。血液分析仪检测原理

43、主要是电阻抗法。 血液分析仪血液分析仪(HA),是目前临床血液检验常用检测仪器。,是目前临床血液检验常用检测仪器。 1、血球计数仪的结构、血球计数仪的结构2、血球计数仪的原理、血球计数仪的原理3、血球计数仪的使用、血球计数仪的使用血涂片的制作和血液细胞的观察目的:掌握血涂片的制备方法(瑞氏染色法)掌握血液各种有形成分的形态特征1、外周血涂片的制备方法用酒精棉球擦拭消毒采血部位,用消毒针头刺破末梢血管或末梢皮肤,从采血针眼处挤出绿豆大小的血滴,用清洁玻片的一端轻轻接触血滴,使血滴附于玻片面上(注意,勿触及皮肤,否则血在玻片上就不能成滴。)以左手拿该片的一端,迅速用右手拿住另一载玻片的一端,在左手载玻片上由前向后接触血滴,使两张玻片呈45度角,轻轻移动,使血滴呈一直线,然后由前向后推为一均匀的薄片。涂片在空气中干燥后,置于染色架上,滴加瑞氏染色液,使涂片被染色液覆盖。染1分钟后,再滴加等量的缓冲液于染色液上,浸染约5-8分钟,此时涂片表面呈现一层古铜色。用蒸馏水迅速冲洗,见涂片呈粉红色后,自然晾干。制作良好的涂片厚薄适宜,血膜分布均匀,呈粉红色。取一厚薄适宜部位置显微镜下观察。先用低倍镜观察全片,了解涂片染色,细胞分布情况,再用油镜观察。2.血细胞观察红细胞白细胞 嗜中性、嗜酸性、嗜碱性、淋巴、单核、血小板3.血液寄生虫观察

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