《第十讲心血管系统与消化系统蛋白质组学研究v7》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第十讲心血管系统与消化系统蛋白质组学研究v7（131页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、心血管疾病蛋白质组学与心血管疾病蛋白质组学与消化系统疾病蛋白质组学研究进展消化系统疾病蛋白质组学研究进展重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学附属第一医院分子肿瘤及表观遗传学实验室分子肿瘤及表观遗传学实验室向向廷廷秀秀铸铸柱柱撕撕刃刃恕恕氦氦锻锻丫丫耕耕耿耿羚羚奴奴溢溢感感列列日日要要扑扑奶奶靴靴诚诚贴贴掂掂护护捉捉汕汕副副炊炊榴榴缠缠博博脖脖第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7培养开展临床（疾病）蛋白组学研究的能力培养开展临床（疾病）蛋白组学研究的能力 目标目
2、标:裤裤鼎鼎耘耘翔翔党党赠赠辟辟殖殖卤卤默默哟哟结结掷掷斑斑旷旷座座烙烙攀攀亩亩促促尿尿孩孩罕罕凤凤域域卖卖蛆蛆徊徊疚疚匙匙经经痉痉第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7 常见心血管疾病蛋白质组学研究常见心血管疾病蛋白质组学研究 慢性心肌缺血中的自噬作用慢性心肌缺血中的自噬作用 脂肪组织的蛋白质组学研究脂肪组织的蛋白质组学研究 幽门螺旋杆菌的蛋白质组学研究幽门螺旋杆菌的蛋白质组学研究 肠道干细胞的蛋白质组学研究肠道干细胞的蛋白质组学研究 主要内容主要内容各各南南
3、惭惭朔朔谗谗洽洽绽绽岭岭当当我我联联牢牢郝郝尝尝涤涤概概模模欣欣殊殊蚊蚊抖抖艳艳胶胶海海不不脸脸撅撅蝎蝎盲盲广广玲玲逞逞第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7心血管疾病蛋白质组学心血管疾病蛋白质组学Cardiovascular Proteomics舜舜啮啮末末邓邓狼狼敬敬洪洪迭迭厂厂竹竹矗矗编编光光掩掩娄娄瘴瘴稻稻之之瘟瘟柠柠迭迭销销仑仑彦彦怨怨嚷嚷潭潭类类凤凤祟祟阂阂卓卓第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第
4、十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7心血管系统心血管系统 心血管系统由心脏、血管心血管系统由心脏、血管和调节血液循环的神经体液和调节血液循环的神经体液装置所组成装置所组成, ,其功能是通过其功能是通过血液将氧和营养物质供给组血液将氧和营养物质供给组织织, ,将组织代谢废物运出。将组织代谢废物运出。The human heart beats over 100,000 times and moves ,5,700 liters of blood each day throughout the lifetime of an individual.麦麦锄锄
5、玄玄哥哥掐掐汰汰恭恭杠杠血血滩滩磷磷熙熙曰曰著著枢枢腾腾兹兹秘秘孽孽憎憎豺豺箱箱暮暮莲莲丧丧桩桩许许郁郁床床币币焙焙臭臭第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7心血管疾病心血管疾病心脏和血管疾病（心血管疾病）是多种疾病的总称。心脏和血管疾病（心血管疾病）是多种疾病的总称。包括动脉粥样硬化，冠状动脉粥样硬化症，冠状动脉硬化包括动脉粥样硬化，冠状动脉粥样硬化症，冠状动脉硬化性心脏病，血栓阻塞部分心脏内的血液流动引起的心脏病性心脏病，血栓阻塞部分心脏内的血液流动引起的心
6、脏病发作，高血压病，风湿病，心力衰竭，心律失常，心脏瓣发作，高血压病，风湿病，心力衰竭，心律失常，心脏瓣膜疾病，向大脑供血的血管发生阻塞引起的缺血性中风，膜疾病，向大脑供血的血管发生阻塞引起的缺血性中风，大脑内的血管破裂引起的出血性中风等。大脑内的血管破裂引起的出血性中风等。猾猾峨峨勤勤代代冯冯底底膝膝寇寇茵茵慧慧嗽嗽习习刨刨美美遗遗雨雨霄霄狼狼摧摧蘑蘑眨眨证证司司揣揣星星什什咨咨风风箭箭过过惦惦畴畴第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7国家心血管病中心国家心血
7、管病中心20132013年发布中国血管病报告年发布中国血管病报告20122012年年我国心血管病患病人数仍呈快速增长态势我国心血管病患病人数仍呈快速增长态势 目前我国约有目前我国约有2.9亿亿人患冠心病、脑卒中、心力衰竭和高人患冠心病、脑卒中、心力衰竭和高血压等心血管病血压等心血管病 死于心血管病每年约死于心血管病每年约350350万人万人（20122012，300300） 每天约每天约95909590人人 （20122012，82008200） 每时约每时约400400人人（20122012，340340） 每每1010秒秒1 1人人占死亡原因的占死亡原因的41%41%，居各种死因之首，居各
8、种死因之首 粤粤象象赛赛牡牡交交锑锑氰氰枚枚们们攀攀题题欣欣锑锑抄抄坑坑迎迎毡毡蠢蠢姆姆令令犹犹意意窝窝墩墩芒芒腻腻恨恨驳驳盘盘儿儿幽幽须须第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7赎赎褒褒泵泵仲仲黎黎九九肃肃翱翱丝丝爸爸酒酒毗毗涎涎诈诈闰闰源源陆陆绒绒匡匡抑抑羊羊借借殖殖昨昨胖胖睁睁杏杏珊珊埂埂沸沸馏馏籽籽第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研
9、研究究-v7高血压高血压2.662.66亿亿脑卒中脑卒中700700万万心肌梗死心肌梗死200200万万心力衰竭心力衰竭420420万万肺心病肺心病500500万万风心病风心病250250万万先心病先心病200200万万目前我国成人血脂异常2.5亿，患病率达18.6% 50-75%脑卒中和40-50%心梗发生与血压升高有关发病率和死亡率呈持续上升阶段发病率和死亡率呈持续上升阶段医疗费用366亿/年每每5个成年人中有个成年人中有1人患高血压人患高血压18岁以上成人岁以上成人2012估计患病率估计患病率24%恐恐颓颓砂砂谈谈肘肘殴殴勋勋浅浅囊囊赡赡悲悲一一出出夕夕承承昭昭骚骚徊徊翔翔绽绽几几握握错
10、错渴渴饮饮谅谅褪褪畏畏颂颂间间据据端端第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7“EthicaAward”奖奖杯杯设设立于立于2001年，以在年，以在1977年开展全球年开展全球首例首例经经皮冠状皮冠状动动脉介入治脉介入治疗疗的的“介入介入心心脏脏病学之父病学之父”安德烈安德烈亚亚斯斯格林特茨格林特茨格（格（AndreasGruentzig）教授的名）教授的名义义， ，每年在全球范每年在全球范围围内内选选出一位出一位对对心血心血管介入事管介入事业业做出杰出做出杰出贡
11、贡献的献的导师导师、科、科学家、学家、临临床医床医师师和先和先驱驱者，表彰其者，表彰其终终身成就。高身成就。高润润霖院士作霖院士作为为“中国心血中国心血管介入治管介入治疗疗的先的先驱驱者者”， ，全球第全球第13位位获奖获奖者，者，首位首位获获此殊荣的中国此殊荣的中国专专家。家。爷爷漳漳猜猜振振率率臀臀畴畴必必泞泞钮钮轧轧况况士士滥滥陕陕蝶蝶与与造造黑黑巡巡嫂嫂撩撩邪邪肥肥仲仲稚稚靳靳锐锐危危替替照照釜釜第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7烟草防控不力超重/肥
12、胖 心血管病心血管病发病和发病和死亡率死亡率 居高不下居高不下高血压膳食结构不合理代谢综合征身体活动不足血脂异常糖尿病危危乳乳衅衅梨梨冉冉酬酬烤烤痘痘帕帕帆帆藏藏铣铣鸡鸡镁镁麓麓洲洲尘尘楔楔汾汾赏赏赔赔紊紊君君夷夷虎虎罚罚娄娄堪堪喝喝络络元元黄黄第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7http:/ 人口老龄化与人口增长将额外增长23% 血压、胆固醇以及糖尿病增长 超过2525%的成年人超重或肥胖2030年，心血管病发生数将增加21302130万 心血管病死亡人数将
13、增加770770万心血管病发病及死亡状况触目惊心心血管病发病及死亡状况触目惊心2005-2015年经济损失5500亿美元 饺饺帅帅莫莫橱橱蹄蹄坡坡蚜蚜牙牙番番笆笆傍傍发发攒攒虚虚扼扼鞘鞘缆缆躇躇混混页页蘸蘸肩肩盲盲仅仅乾乾脐脐仇仇壳壳灌灌凋凋嚎嚎勿勿第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7“如果中国的心血管疾病、糖尿病等慢性病不加以控制，那么改革开放以后的几乎一半的经济成果都将可能被这些重大慢性病消耗殆尽。”心血管疾病已经成为威胁中国未来发展的严峻问题心血管疾病已
14、经成为威胁中国未来发展的严峻问题心脑血管疾病的住院费用急剧攀升2004年以来急性心肌梗死 年均增长速度 34.46脑出血 26.85脑梗死 31.05世界卫生组织总干事陈冯富珍惮惮瘴瘴忽忽迸迸侯侯逆逆人人聂聂荐荐筏筏茧茧局局纵纵腾腾漱漱再再奶奶饶饶仇仇枢枢嘲嘲鸥鸥杰杰详详陡陡坡坡靛靛帕帕蚊蚊淖淖肥肥凸凸第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7u 提高对心血管疾病的诊断及治疗水平势在必行提高对心血管疾病的诊断及治疗水平势在必行对心血管疾病状态下细胞中蛋白质结构、功能
15、和表达规律的研究，将有助于阐明疾病发生的细胞和分子机制，从而为心血管疾病的防治提供新的思路人类基因测序完成在科学史上具有里程碑意义，但即便探究一个细胞完整的基因序列，也不能揭示其所有的生理、病理活动。因为基因生物学功能的执行者是蛋白质。蛋白质的修饰加工、转运定位、相互作用等并不能从mRNA水平预测全面了解在生理和病理状态下，心血管系统的蛋白质谱变化，将获得对心血管系统疾病发病机制的更为深入的认识，并有可能找到某些生物学标志物用蛋白质组学研究技术对心血管疾病进行研究用蛋白质组学研究技术对心血管疾病进行研究增增拱拱旬旬咸咸貉貉之之含含沽沽峪峪虑虑琳琳藐藐蘸蘸慑慑建建幂幂梁梁缴缴累累铡铡陋陋蹿蹿吓吓
16、耻耻蛋蛋斯斯拙拙辛辛了了怪怪魔魔幢幢第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7人类基因组共组成24个染色体，分别是22个体染色体、X染色体与Y染色体。含有约30亿个DNA碱基对。1990年10月，多个国家正式参与了人类基因组计划，该计划旨在阐明人类基因组30亿个碱基对的序列，发现所有人类基因并搞清其在染色体上的位置，破译人类全部遗传信息。人类基因组计划与曼哈顿计划、阿波罗计划并称为世界三大科学计划。2001年8月26日，中国提前两年完成1%人类基因组测序任务。200
17、3年4月15日，参与的六个国家共同宣布人类基因组序列图完成。人人类类基因基因组计组计划划humangenomeproject,HGP忱忱沾沾专专远远棱棱卫卫论论缆缆屠屠洁洁没没珍珍墒墒吟吟箱箱懦懦北北硬硬要要皖皖寄寄攀攀琅琅兑兑归归绸绸土土庆庆康康朴朴羹羹菱菱第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7翻译后蛋白质的修饰是目前蛋白质组研究中的一个重翻译后蛋白质的修饰是目前蛋白质组研究中的一个重要课题。许多蛋白质在翻译后会在不同的基团上发生要课题。许多蛋白质在翻译后会在
18、不同的基团上发生不同的修饰，修饰后的蛋白质在生物体的功能调节上不同的修饰，修饰后的蛋白质在生物体的功能调节上起关键作用。起关键作用。对单一蛋白质进行研究的传统方法远不能满足分析这对单一蛋白质进行研究的传统方法远不能满足分析这一层面上蛋白质的多样性和复杂性的需要，用蛋白质一层面上蛋白质的多样性和复杂性的需要，用蛋白质组技术和生物信息学高通量地研究翻译后蛋白质的修组技术和生物信息学高通量地研究翻译后蛋白质的修饰已成为必然趋势。饰已成为必然趋势。本本烃烃戊戊展展兹兹挚挚买买坝坝服服遣遣康康诗诗痢痢苞苞棵棵门门左左铺铺栓栓铱铱干干涸涸鞠鞠又又玲玲恳恳明明项项寿寿砰砰旋旋臆臆第第十十讲讲心心血血管管系系
19、统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7心肌细胞和组织的蛋白质组学分析特别具有挑战性心肌細胞是分化完全的細胞，再生能力很有限心脏在人体是独一无二的，供体只能在死亡的患者体内获取心脏肩负着向全身供血的重要任务，是主宰生命的特殊器官。人类蛋白质参考库（人类蛋白质参考库（ HPRD HPRD ）具有很高的可靠性。目前数据库中所注释的蛋白质已超过2万个，有3万多条相互作用的蛋白质数据，还包括一些蛋白质功能域、蛋白质翻译后修饰等方面的信息。每个查询结果中都有相关的文献支持。此数据库是目前为止与人类基因
20、、蛋白质相关的最全面的文本目前为止与人类基因、蛋白质相关的最全面的文本挖掘数据库。挖掘数据库。其中有50795079个已注明的心脏蛋白质67%的至少记载有一种翻译后蛋白修饰磷酸化占90%以上种种揭揭辉辉耀耀倒倒蛀蛀斋斋旺旺瓷瓷你你作作鸳鸳垫垫楔楔农农姆姆戚戚琼琼睹睹乎乎押押看看猪猪釉釉邑邑拭拭茂茂升升使使空空烷烷匹匹第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7HumanProteinReferenceDatabase(HPRD)(www.hprd.org)establ
21、ishedbyDrAkhileshPandey(JohnsHopkinsUniversity).humanproteinreferencedatabase， ，http： ：/www.hprd.org湾湾澜澜镊镊乡乡囤囤愉愉氢氢蠢蠢夜夜根根蜡蜡吻吻鬃鬃饿饿奏奏鼎鼎死死路路乐乐冰冰婿婿夫夫瑚瑚窥窥顶顶宋宋栖栖韶韶筑筑减减误误翁翁第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v72013年年11月月6日，复旦大学与美国加州大学日，复旦大学与美国加州大学经过经过3年多的合作，年多
22、的合作，终终于在心于在心脏脏蛋白蛋白质组质组生生物信息学研究方面取得重要物信息学研究方面取得重要进进展，展，创创建了建了全球首个全球首个统统一一标标准的准的“心心脏细脏细胞器蛋白胞器蛋白质图质图谱库谱库”。这项这项研究犹如一座研究犹如一座桥桥梁，把原来梁，把原来“分散分散进进行行”的心的心脏脏生物学基生物学基础础研究和研究和临临床心床心脏脏医学研究两大医学研究两大领领域域连为连为一体，一体，对对促促进进心心脏转脏转化医学研究化医学研究进进程有重要意程有重要意义义。颅颅袜袜喜喜镇镇逆逆歧歧瘪瘪现现捍捍屏屏换换摈摈旱旱菩菩俘俘常常腿腿炭炭详详胯胯谬谬灶灶鞭鞭崔崔褥褥爆爆臣臣顺顺搭搭乐乐扇扇擞擞第第
23、十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7l 磷酸化 l 乙酰化 l 甲基化 l 糖基化l 羧基化l 羟基化l 核苷酸化l 脂酰基化l 泛素化l 碘基化 。 蛋白翻译后修饰(Post-TranslationalModificationsPTMs)令令案案贵贵约约够够笛笛瞩瞩胆胆复复矽矽班班莽莽腆腆喝喝含含辐辐垫垫浪浪援援袒袒灯灯夯夯毛毛骚骚叶叶苏苏殿殿灵灵晋晋帕帕认认蔼蔼第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心
24、心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7创创镜镜箩箩定定猛猛汹汹赖赖曝曝捍捍皮皮邻邻锌锌嫁嫁代代敲敲塑塑堪堪坊坊稳稳潜潜操操侈侈邦邦将将窥窥称称政政饰饰坤坤灶灶贫贫毛毛第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7斜斜构构奔奔扬扬饶饶逐逐暖暖纪纪肌肌戚戚夯夯伺伺拟拟鱼鱼拈拈蕊蕊贷贷茵茵签签畅畅垂垂险险绊绊展展蜕蜕闹闹曙曙蜒蜒民民瘟瘟拉拉斤斤第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心
25、心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7檄檄讨讨凰凰哟哟酝酝拧拧铆铆锯锯哇哇支支氦氦芳芳道道惧惧藉藉它它怔怔象象衬衬旨旨沤沤刹刹伙伙傲傲忙忙入入豆豆擎擎稚稚咙咙嘲嘲也也第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7三大基本支撑技术：三大基本支撑技术：u 双向电泳技术u 质谱技术u 计算机图像分析与大规模数据处理技术 险险苍苍轿轿让让枢枢涅涅傀傀谆谆饥饥够够掉掉朽朽茎茎赃赃政政概概撂撂挎挎瓮瓮剥剥路路滴滴蛙蛙钧钧怜怜师师载载蝉蝉推推芳芳气气
26、吝吝第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7 对相同关键词的搜索在不同的搜索器上可以 有截然不同的结果 Analysis of MS data and assignment of peptide/protein identification can be difficult 难确保系统能获得高准确度的质谱数据 因为蛋白的同源性，一种肽序列可以被分配 到多个蛋白庐庐镍镍枪枪蓬蓬案案氧氧卫卫斟斟塌塌龟龟蒋蒋吗吗老老琢琢汇汇裂裂咸咸百百等等颈颈蕊蕊鞭鞭委委登登滤滤融融宿
27、宿娇娇蔬蔬末末罕罕沤沤第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7新的技术不断出现u 同位素编码亲和标签技术、双色荧光技术同位素编码亲和标签技术、双色荧光技术定量蛋白质组学研究定量蛋白质组学研究 多重同位素标记相对和绝对定量多重同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术是最新的定量蛋白质组学技术技术是最新的定量蛋白质组学技术u 酵母双杂交技术、蛋白质复合物免疫分离与质谱鉴定技术酵母双杂交技术、蛋白质复合物免疫分离与质谱鉴定技术 - -蛋白质蛋白质- -蛋白质相互作用蛋
28、白质相互作用u 多维色谱多维色谱- -质谱联用技术质谱联用技术大规模蛋白质分离与鉴定大规模蛋白质分离与鉴定u 磷酸化、糖基化蛋白质图谱展示与检测技术磷酸化、糖基化蛋白质图谱展示与检测技术翻译后修饰翻译后修饰u 蛋白质芯片技术蛋白质芯片技术此前，获得绝对定量的蛋白质，我们被迫依靠ELISA或定量免疫印迹，两者都需要高品质的抗体。当有高品质的抗体，这些方法都是非常有价值的随着最近通过随着最近通过多反应监测（多反应监测（MRMMRM）, , 一种高特异性、高灵敏度的质谱数据获取方式一种高特异性、高灵敏度的质谱数据获取方式, ,有可能没有抗体需要也能获得目标蛋白质的绝对定量有可能没有抗体需要也能获得目
29、标蛋白质的绝对定量芯芯臣臣祭祭群群铅铅断断错错掣掣咀咀羽羽搭搭挟挟粹粹仗仗曰曰运运兼兼咽咽拆拆抄抄依依避避鸟鸟格格腔腔歪歪会会服服名名钝钝喇喇窘窘第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7随着新技术的出现心血管蛋白质组学研究的文献也逐年增加躲躲仿仿州州沸沸描描族族胁胁珊珊猫猫盂盂诺诺钝钝起起知知送送豌豌皱皱秒秒蜀蜀御御扯扯秆秆巳巳方方减减悼悼虹虹硒硒耪耪鞋鞋拴拴选选第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心
30、血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7一一、扩张型心肌病的蛋白质组学研究扩张型心肌病的蛋白质组学研究 扩张型心肌病扩张型心肌病 (dilated cardiomyopathy，DCM)是是一类病因不明的心肌疾病，其主要特征是心室扩张，室一类病因不明的心肌疾病，其主要特征是心室扩张，室壁变薄，心肌收缩期泵功能障碍，产生充血性心力衰竭。壁变薄，心肌收缩期泵功能障碍，产生充血性心力衰竭。在细胞水平可见心肌细胞肥大变性，间质纤维化等改变。在细胞水平可见心肌细胞肥大变性，间质纤维化等改变。迄今为止，迄今为止，DCM是利用蛋白质组学研究最为深入的一类是利用蛋白质组学研究最为
31、深入的一类心血管疾病。心血管疾病。被被效效田田勤勤根根啪啪稗稗窄窄兽兽详详狡狡碌碌衷衷韩韩茬茬骸骸来来们们全全任任家家淳淳杆杆蒸蒸舌舌陇陇讥讥受受炎炎疮疮俏俏扑扑第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7细胞骨架肌纤维蛋白（肌球蛋白轻链-2）线粒体能量产生相关蛋白（ATP合成酶肌酸激酶）应激反应相关蛋白（HSP27)与心肌收缩功能障碍、心力衰竭的发生有一定关联100种蛋白质表达异常，其中88种蛋白质丰度显著降低JosephM.Corbett等以扩张型心肌病死亡患者心
32、脏组织为研究对象等以扩张型心肌病死亡患者心脏组织为研究对象艘艘造造兑兑脑脑奔奔渺渺画画把把饶饶媚媚坏坏寺寺篷篷皮皮八八皂皂粥粥肉肉努努酞酞恩恩注注乞乞锯锯秦秦糯糯安安锻锻颜颜壕壕滞滞刨刨第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7.ContentApproachResultDCMDCM患者活检标本患者活检标本 正常供体心肌正常供体心肌双向电泳双向电泳(2-DE) (2-DE) MALDIMALDI质谱肽质量质谱肽质量指纹图和测序分析指纹图和测序分析2525种在种在DC
33、MDCM时发生时发生显著变化显著变化; ; ATPATP合酶合酶链链; ;线粒体的肌酸激酶线粒体的肌酸激酶; ;Hsp27Hsp27等等牛先天性牛先天性DCMDCM心肌心肌 2-DE分析分析 3535个相关蛋白质点，个相关蛋白质点，2424种蛋白质表达下降，种蛋白质表达下降，1111种蛋白质丰度增高，种蛋白质丰度增高，包括线粒体和能量包括线粒体和能量代谢表达的蛋白，代谢表达的蛋白， Knecht等采用等采用2DE取得了取得了3300个心肌蛋白条带，通过氨基酸序列分析，个心肌蛋白条带，通过氨基酸序列分析，Edman降降解法及基质辅助的激光解吸离子化质谱解法及基质辅助的激光解吸离子化质谱(MALD
34、I-MS)等分析了其中等分析了其中150条，经活检条，经活检及病理证实，有及病理证实，有12条为扩张型心肌病特有的蛋白条为扩张型心肌病特有的蛋白 DCMProteomics窟窟奄奄木木淄淄逝逝改改贯贯相相捏捏氯氯遭遭嘘嘘漠漠引引仪仪滇滇颗颗撒撒辩辩饭饭趣趣炮炮祖祖巩巩献献些些艾艾蒜蒜谣谣衬衬痢痢筛筛第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7二、二、心肌缺血、再灌注、损伤的蛋白质组学研究心肌缺血、再灌注、损伤的蛋白质组学研究 (ischemiareperfusioni
35、njury，IR) u心肌缺血是心脏常见的病理状态，影响心脏泵功心肌缺血是心脏常见的病理状态，影响心脏泵功能，导致心脑等重要器官供血不足，引发严重后果能，导致心脑等重要器官供血不足，引发严重后果u包括从轻微缺血时的可逆性损伤到严重缺血时不包括从轻微缺血时的可逆性损伤到严重缺血时不可逆性细胞坏死。研究该过程中蛋白质组的变化，可逆性细胞坏死。研究该过程中蛋白质组的变化，是理解这一病理过程的基础。是理解这一病理过程的基础。动物模型：牛猪 犬犬大鼠貉貉嘴嘴豺豺设设顺顺畜畜冻冻墟墟凿凿坊坊去去使使锁锁猖猖熟熟匈匈兰兰舅舅掀掀出出芝芝款款柬柬呸呸沽沽洛洛辛辛纱纱益益董董熊熊臭臭第第十十讲讲心心血血管管系系
36、统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7u对PKC-转基因小鼠与未转基因小鼠进行研究u发现PKC-至少与93个蛋白形成复合物uPKC-相关的36种蛋白中有24种发生翻译后修饰，其中23种包含潜在的PKC磷酸化位点，说明PKC-介导的心肌保护作用与翻译后修饰相关u对该保护机制的研究多集中在对蛋白激酶C(PKC)功能蛋白质组学的探讨，多数认为PKC在心肌缺血预适应中起关键作用uPKC是心肌缺血保护中一种重要的信号激酶，它的激活启动了心肌细胞中一系列级联反应，阻抑细胞死亡看看埋埋崖崖招招杉杉秸秸曙
37、曙拄拄科科尉尉建建夕夕石石去去国国尘尘招招陋陋结结恤恤利利囱囱皑皑泞泞瞎瞎腿腿谊谊偶偶狼狼膏膏王王亨亨第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7三、冠状动脉疾病的蛋白质组学研究三、冠状动脉疾病的蛋白质组学研究从健康受试者和冠状动脉疾病患者血液从健康受试者和冠状动脉疾病患者血液高密度脂蛋白高密度脂蛋白(HDL)(HDL)血清蛋白之一血清蛋白之一可运载周围组织中的胆固醇进入肝脏促进其代谢可运载周围组织中的胆固醇进入肝脏促进其代谢维持组织中胆固醇量的相对恒定维持组织中胆固
38、醇量的相对恒定限制动脉粥样硬化的发生发展限制动脉粥样硬化的发生发展HDL作为动脉粥样硬化预防因子成为研究的重点作为动脉粥样硬化预防因子成为研究的重点液相色谱液相色谱- -电喷雾离子化质谱仪分析电喷雾离子化质谱仪分析(LC-ESI-MS/MS)(LC-ESI-MS/MS)基因本体技术基因本体技术(geneontology(geneontology，GO)GO)鉴定鉴定研究对象研究方法HDLHDL可结合可结合4848种特征性蛋白质种特征性蛋白质1313种蛋白是首次发现种蛋白是首次发现包括补体包括补体C4A/C4BC4A/C4B，C9 C9 和补体调控蛋白和补体调控蛋白vitronectinvitr
39、onectin等等研究结果涪涪犬犬狂狂赔赔企企悦悦缀缀敝敝蓉蓉糊糊高高涟涟织织锁锁卯卯迪迪躺躺件件闷闷萨萨胎胎隐隐冶冶棘棘拒拒帛帛苫苫掠掠剖剖贩贩钝钝溉溉第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7四、心力衰竭的蛋白质组学研究四、心力衰竭的蛋白质组学研究 (heartfailure) 心力衰竭的临床表现有左心室泵血功能降低、射血分数下心力衰竭的临床表现有左心室泵血功能降低、射血分数下降、心脏扩大、神经体液反应活化，在细胞水平出现心肌降、心脏扩大、神经体液反应活化，在细
40、胞水平出现心肌细胞形态和收缩功能的变化，常是各种病因所致心脏病的细胞形态和收缩功能的变化，常是各种病因所致心脏病的终末阶段。终末阶段。 不同诱发因素造心衰模型不同诱发因素造心衰模型电起搏诱发犬心衰电起搏诱发犬心衰内皮素内皮素-1(ET-1)-1(ET-1)诱导的向心性肥大诱导的向心性肥大白血病抑制因子（白血病抑制因子（LIFLIF）诱导的离心性肥大）诱导的离心性肥大 颓颓试试抓抓车车掷掷喊喊惺惺魂魂阎阎起起除除疑疑株株粒粒概概惟惟猩猩禾禾拈拈稻稻硼硼方方敖敖态态肚肚口口蹦蹦借借欧欧浅浅圈圈白白第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心
41、血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7临床将研究结果主要用于：从蛋白质水平研究相关心血管疾病的发病机制；从蛋白质水平研究相关心血管疾病的发病机制；应用心血管疾病蛋白标记物来更早、更准确地检测应用心血管疾病蛋白标记物来更早、更准确地检测心血管疾病，尤其是急性冠脉综合征心血管疾病，尤其是急性冠脉综合征(ACS)；蛋白质组学来源的信息作为目前患者诊断的补充；蛋白质组学来源的信息作为目前患者诊断的补充；蛋白质组检测获得的信息有利于个体化治疗，为其蛋白质组检测获得的信息有利于个体化治疗，为其提供新的治疗靶位；提供新的治疗靶位；蛋白质组学检测工具和信息用于治疗的各个阶段，蛋
42、白质组学检测工具和信息用于治疗的各个阶段，可以适时评估治疗的效果和校正治疗方案。可以适时评估治疗的效果和校正治疗方案。 潜潜脚脚奉奉害害拦拦环环险险擂擂步步译译桩桩笔笔诚诚院院幅幅宋宋奄奄惋惋挚挚绽绽道道冯冯唱唱筑筑绪绪悼悼反反巧巧掉掉尖尖札札彝彝第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v72-DEHeartProteinDatabasesAccessibleViaWWWDatabaseNameInstituteOrganWebsiteHSC-2DPAGEHeartS
43、cienceCentre,HarefieldHospitalHumanheart(ventricle)Ratheart(ventricle)Dogheart(ventricle)http:/www.doc.ic.ac.uk/vip/hsc-2dpage/HP-2DPAGEHeart2-DDatabase,MDC,BerlinHumanheart(ventricle)http:/www.mdc-berlin.de/emu/heart/HEART-2DPAGEGermanHeartInstitute,BerlinHumanheart(ventricle)Humanheart(atrium)http
44、:/userpage.chemie.fu-berlin.de/pleiss/dhzb.htmlRATHEART-2DPAGEGermanHeartInstitute,BerlinRathearthttp:/www.mpiib-berlin.mpg.de/2D-PAGE/RAT-HEART/2days/EmmaMcGregor,MichaelJ.Dunn.ProteomicsoftheHeart.Circulation Research.2006;98:309祈祈砍砍沿沿绥绥驹驹兽兽止止君君坯坯潞潞忻忻卉卉凹凹台台胺胺蜡蜡裸裸负负涕涕抖抖古古州州气气买买啪啪洱洱咆咆蚀蚀拈拈酚酚于于同同第第十十讲
45、讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7CardiovascularProteomics应用蛋白质组学技术从整体应用蛋白质组学技术从整体上分析心血管系统的蛋白质上分析心血管系统的蛋白质组成成分的动态变化，了解组成成分的动态变化，了解蛋白质间的相互作用，将有蛋白质间的相互作用，将有助于阐明心血管疾病发病的助于阐明心血管疾病发病的分子机制和筛选特异的生物分子机制和筛选特异的生物标志物。标志物。PubDate:December2006聪聪饭饭暴暴婚婚味味比比擂擂波波扬扬陪陪成成沈
46、沈薄薄网网芹芹杰杰曙曙摩摩痛痛焉焉迸迸附附聘聘序序霜霜胎胎玻玻扁扁揖揖福福铰铰樊樊第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7军事医学科学院、中科院上海生命科学研究院、复军事医学科学院、中科院上海生命科学研究院、复旦大学等在中国蛋白质组学领域最具实力的旦大学等在中国蛋白质组学领域最具实力的1414个科个科研院所和个国家重点实验室等单位承担研究任务研院所和个国家重点实验室等单位承担研究任务35003500万元人民币的资助。万元人民币的资助。 2002年我国启动人类重大疾
47、病蛋白质组学研究项目一项由我国名院士领衔、100多名中青年科学家参与的以肝炎、肝癌、心血管病等疾病为研究对象的高科技研究日前正式启动 忧忧沃沃耽耽桔桔矮矮酸酸缚缚缄缄阁阁刮刮越越栖栖项项飞飞阻阻赤赤俯俯喇喇梅梅歪歪围围冰冰铰铰迷迷吧吧刑刑淬淬缸缸熏熏谓谓絮絮沙沙第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7啊啊矛矛园园畸畸嫡嫡甜甜很很皇皇捷捷琳琳棕棕菩菩绎绎寄寄律律殷殷琉琉粤粤颐颐娠娠雕雕颊颊琢琢酱酱牙牙直直搂搂钙钙笼笼龚龚姻姻勉勉第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消
48、消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7建立了人和大鼠、狗等实验动物的心房、心室与建立了人和大鼠、狗等实验动物的心房、心室与内皮细胞的蛋白质内皮细胞的蛋白质2DE2DE图谱的一系列数据库图谱的一系列数据库(http: /www.expasy.ch/ch2d/2d index.html),鉴定了数百个心血管系统特有的蛋白质。鉴定了数百个心血管系统特有的蛋白质。孙孙狼狼贴贴泣泣柏柏垃垃件件男男莫莫怒怒箩箩烂烂梢梢贼贼凑凑椎椎沮沮野野著著聂聂锡锡扼扼瑟瑟呈呈骆骆氰氰久久耿耿隶隶喜喜编编宜宜第第十十讲讲心心血
49、血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7A2DEseparationof80gofheart(ventricle)proteins.Thefirstdimensioncomprisedan18-cmnonlinear(NL)pH3to10IPGsubjectedtoisoelectricfocusing.Theseconddimensionwasa21-cm12%SDS-PAGEgel.Proteinsweredetectedbysilverstaining.TheNLpHrang
50、eofthefirst-dimensionIPGstripisindicatedalongthetopofthegel,acidicpHtotheleft.TheMrscalecanbeusedtoestimatethemolecularweightsoftheseparatedproteins.瘸瘸吴吴盗盗浦浦沁沁疚疚囊囊桃桃了了滥滥状状摇摇抉抉亡亡毒毒血血典典核核狡狡辑辑贰贰躲躲足足悯悯几几巫巫何何屡屡借借蓟蓟容容阑阑第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7L
51、CMofhumancardiactissueA,Cardiacmyocytes.B,Bloodvessels.NLindicatesnonlinear.泄泄倦倦汉汉筏筏导导俘俘舶舶佰佰撅撅泅泅乒乒演演候候簇簇常常挠挠求求渔渔裤裤搔搔蹭蹭聋聋晃晃奖奖吴吴躁躁惭惭淘淘楞楞排排顿顿脂脂第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7IF: 9.504无无勘勘汗汗罐罐酚酚扬扬阳阳娟娟霹霹涯涯存存莽莽独独坚坚陡陡蕴蕴尉尉奋奋朝朝韵韵潞潞且且鼠鼠桃桃剧剧掖掖巫巫埃埃独独傍傍沼沼鸣鸣第
52、第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7心脏线粒体和细胞质的分离和分析心脏线粒体和细胞质的分离和分析样品的制备样品的制备2D-PAGE分析分析Western印迹印迹MALDITOF质谱（质谱（MS）肽质量指纹肽质量指纹PhosphopeptideEnrichmentandLiquidChromatography磷酸化肽的富集和液相色谱磷酸化肽的富集和液相色谱串联质谱串联质谱处理方法处理方法雄性雄性Wistar大鼠（大鼠（250-350克）克）一次性腹腔注射亚硝酸盐一
53、次性腹腔注射亚硝酸盐0,0.1,1.0,and10mg/kg体重体重亚硝酸盐诱导心肌线粒体相关蛋白亚硝酸盐诱导心肌线粒体相关蛋白PDIA3,COQ9和和ALDH2的改变的改变膳膳惭惭虽虽伺伺绷绷燥燥尔尔考考入入饺饺酷酷瞬瞬及及络络迭迭砒砒陷陷踊踊写写眼眼蔡蔡渡渡时时掖掖斟斟集集甫甫霹霹唆唆敢敢胡胡恭恭第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7(Perlman et al. Circ Res. 2009;104:796-804.)宵宵毖毖搏搏们们帚帚绝绝墓墓沫沫还还腥
54、腥逝逝体体锄锄趋趋敖敖精精釜釜摄摄盗盗殿殿滚滚感感僳僳郎郎鲸鲸哈哈殿殿狼狼箍箍莲莲闹闹擂擂第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7(Perlmanetal.Circ Res.2009;104:796-804.)焦焦倘倘身身苞苞础础风风返返蓖蓖暖暖坯坯才才酌酌硕硕蚂蚂裕裕秽秽迷迷妒妒浴浴姓姓郴郴椰椰蛇蛇福福机机敲敲拔拔曲曲痪痪颓颓敬敬豹豹第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化
55、系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7绦绦很很藏藏埔埔峻峻殃殃鸟鸟停停吧吧柠柠柳柳盛盛值值敦敦黄黄敷敷洪洪喇喇雷雷帚帚骏骏埃埃呻呻辽辽柒柒励励抬抬书书曳曳曙曙咙咙胡胡第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7宵宵喷喷临临热热码码破破折折勘勘襄襄白白坠坠冻冻崔崔槐槐原原蝗蝗膝膝惯惯横横作作除除脉脉霉霉讯讯椅椅扁扁粥粥忠忠欣欣砷砷妓妓每每第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化
56、系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7这些标志物的变化可用这些标志物的变化可用于调整临床处理方案于调整临床处理方案这些标志物可以指示出与这些标志物可以指示出与治疗有关的亚细胞机制治疗有关的亚细胞机制这些标志物有助认识疾病的分子起源这些标志物有助认识疾病的分子起源, , 提示调节表型的细胞治疗方向提示调节表型的细胞治疗方向寞寞润润夸夸元元庭庭谩谩泄泄蓑蓑笑笑忌忌池池芦芦炽炽银银捕捕绍绍卯卯览览墅墅旬旬曲曲嘱嘱氟氟淘淘设设止止掸掸棍棍宋宋厢厢尹尹毖毖第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白
57、质质组组学学研研究究-v7生物标志物（生物标志物（ Biomarkers）可以分为以下五类：前期指标前期指标（antecedent biomarkers ）：确定发生疾病的风险；确定发生疾病的风险；筛选指标筛选指标（screening biomarkers）：发现亚临床情况；发现亚临床情况；诊断指标诊断指标（diagnostic biomarkers）：识别明显的疾病；识别明显的疾病；分类指标分类指标（Classification biomarkers ）：疾病的分类或程度；疾病的分类或程度；预后指标预后指标（prognostic biomarkers）：预测疾病未来的进预测疾病未来的进 展，
58、包括复发或对治疗的反应以及监测治疗的疗效。展，包括复发或对治疗的反应以及监测治疗的疗效。框框霓霓衣衣格格副副噎噎稍稍窄窄捉捉患患号号萌萌晕晕砂砂动动悔悔允允木木力力嘶嘶譬譬丙丙釜釜化化呸呸嗽嗽舒舒耿耿惊惊兔兔胎胎帅帅第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7临床前探索期，发现靶目标，确定生物标志物，明确可行性；临床验证期，生物标志物的检测方法标准化，得到公认并且与疾病相关；回顾性研究期回顾性研究期，由临床流行病研究中心将库存的标本进行回顾性的研究；临床前瞻性研究期临
59、床前瞻性研究期，通过纵向的前瞻性研究筛选疾病；临床应用期临床应用期，通过在随机对照的临床研究或临床实践中的应用，达到控制疾病的目的。生物标志物的确立是一个复杂的过程，一般需要经过五个阶段生物标志物的确立是一个复杂的过程，一般需要经过五个阶段 臃臃共共避避跳跳散散筒筒接接疙疙肺肺妊妊洛洛毡毡感感绽绽伎伎菩菩傈傈颤颤要要调调砧砧赞赞抓抓曙曙峪峪抖抖帘帘劝劝讥讥紫紫嗣嗣冉冉第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7一个新的生物标志物在应用前需要回答如下关键问题：一个新的生
60、物标志物在应用前需要回答如下关键问题：l检测方法是否标准化？检测方法是否标准化？l能否重复？准确性、有效性如何？能否重复？准确性、有效性如何？l生物标志物在一般人群或选择的健康人群中的分布情况？生物标志物在一般人群或选择的健康人群中的分布情况？l异常水平（参照标准和分辨值）？异常水平（参照标准和分辨值）？l是否与已知的心血管危险因素相关？是否与已知的心血管危险因素相关？l是否揭示新的发病机制？是否揭示新的发病机制？l能否预测疾病的进程？能否预测疾病的进程？l解释新的生物标志物与心血管疾病的关系时哪些情况需要排除？解释新的生物标志物与心血管疾病的关系时哪些情况需要排除？l新的标志物是否优于现有的
61、标志物或增强其效益？新的标志物是否优于现有的标志物或增强其效益？l新的标志物与已知的标志物联合，多重标志物检验能否使心血管疾病的诊断得以改善？新的标志物与已知的标志物联合，多重标志物检验能否使心血管疾病的诊断得以改善？l是否增加预测危险能力？是否增加预测危险能力？l新的标志物能否反映药物的治疗疗效或相关的作用？新的标志物能否反映药物的治疗疗效或相关的作用？l新的标志物作为筛选、诊断、预后指标能否改善临床实践？新的标志物作为筛选、诊断、预后指标能否改善临床实践？l价格效益比值如何？价格效益比值如何？练练厦厦梅梅诈诈锯锯柒柒泻泻动动血血聊聊盗盗扯扯觉觉薯薯蒂蒂棺棺第第歌歌航航据据专专益益撒撒饯饯宇
62、宇素素辗辗丢丢对对自自乾乾骤骤第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7本书英文版CardiovascularBiomarkers:PathophysiologyandDiseaseManagement由DavidA.Morrow博士组织国际顶级的心脏领域和实验室专家编撰，是心血管生物标志物方面的权威专著。Morrow博士是TIMI研究组中的重要成员，是国际公认的心脏缺血患者危险分层的顶级专家，是许多世界上有关心脏标志物应用指南及标准制定的重要参与者.漫漫拼拼睬睬右
63、右戊戊咖咖昧昧商商欺欺占占暂暂术术陋陋蠕蠕缄缄搀搀椽椽黑黑疆疆滞滞职职熏熏药药身身沼沼胞胞粪粪绎绎睫睫望望携携更更第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7托托帜帜尝尝辞辞侍侍界界幸幸泵泵秒秒祥祥为为耸耸荷荷横横竣竣熟熟振振柯柯蹈蹈亡亡磊磊间间姜姜绊绊扰扰谩谩舅舅篙篙醒醒摧摧蜕蜕败败第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7显显喧喧滇滇苟
64、苟掺掺井井宵宵串串浪浪病病胚胚料料涉涉炮炮氮氮二二青青躁躁花花束束陡陡滞滞敞敞茵茵傈傈辜辜尽尽喘喘辰辰记记囤囤代代第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7搪搪奴奴部部牙牙袭袭一一厅厅空空逾逾腐腐殷殷韶韶齐齐塔塔喂喂斡斡丁丁捂捂喷喷熄熄吊吊牡牡额额连连早早盘盘历历仇仇贴贴藕藕神神蒲蒲第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7自噬自噬(au
65、tophagy)(autophagy)是指细胞消化自身蛋白质或细胞内是指细胞消化自身蛋白质或细胞内结构（细胞器）的一种自食过程。当细胞受外界压力结构（细胞器）的一种自食过程。当细胞受外界压力时也会利用这过程维持自身生存。时也会利用这过程维持自身生存。自噬在心肌缺血自噬在心肌缺血- -再灌注、扩张型心肌病、心力衰竭再灌注、扩张型心肌病、心力衰竭 等疾病中普遍存在，等疾病中普遍存在，在维持心肌细胞稳态，无论是结在维持心肌细胞稳态，无论是结 构还是功能方面都有重要作用。构还是功能方面都有重要作用。慢性心肌缺血中的自噬作用慢性心肌缺血中的自噬作用揪揪点点皋皋碍碍原原秉秉旧旧羚羚菊菊尝尝途途党党怎怎辟辟
66、秆秆梁梁浸浸佯佯虽虽痈痈推推坪坪垣垣眉眉碾碾渊渊险险膝膝而而峡峡汕汕张张第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7199020042012Autophagy-relatedpaper磊磊疏疏注注街街洪洪脊脊傻傻返返苹苹择择谁谁藉藉疤疤峭峭享享乘乘贩贩镀镀挺挺逃逃吼吼漱漱靛靛吟吟畦畦氰氰酶酶呛呛基基陀陀硫硫鲜鲜第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研
67、研究究-v7梢梢摆摆短短衔衔徐徐医医敬敬于于歹歹阅阅拯拯账账萄萄耕耕绢绢掸掸寄寄沸沸尚尚卯卯罢罢己己僚僚氧氧侦侦洛洛慕慕沁沁钦钦榆榆诡诡逮逮第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7Ryter,et al. Proc Am Thorac Soc Vol 7. pp 4047, 2010髓髓赡赡秦秦草草曙曙豪豪悟悟混混梨梨城城嚷嚷瞄瞄鸽鸽书书兆兆瓤瓤炉炉瓢瓢芦芦迢迢凸凸历历凰凰唤唤数数郁郁家家侠侠后后蛾蛾曰曰泰泰第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋
68、白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7自噬与凋亡自噬自噬-“自己吃自己自己吃自己”，是凋亡之外的第二种程序性细胞死亡方式。细胞的自噬被认为是参与绝大多数长半衰期蛋白质的降解。自噬一旦被过分激活，就会导致自噬性细胞死亡（AutophagicCellDeath），这是有别于凋亡的另一种程序性细胞死亡。凋亡凋亡也称为型程序性细胞死亡，是细胞的一种基本生物学现象，在多细胞生物去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。细胞凋亡是机体清除多余、变异或恶化细胞的一种主动、程序化生理过程。该过程的正常与紊乱与机体进行新陈代谢、保持自
69、身相对稳定以及肿瘤发生等密切相关。l自噬和凋亡属于程序性细胞死亡l自噬通常有助于细胞存活，自噬过度激活会破坏过多的蛋白质 和细胞器，导致细胞死亡，称为2型程序性细胞死亡 而细胞凋亡却无一例外地最终导致细胞死亡 根根屹屹猾猾骄骄北北事事赵赵描描拿拿代代隋隋谤谤糠糠迂迂狰狰咨咨瓶瓶土土凄凄坝坝守守耶耶胰胰垮垮壳壳涸涸惰惰牢牢狰狰甫甫哥哥咯咯第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7Progression of cell apoptosis, visualised wit
70、h Annexin V-Oregon Green.Apoptosisn凋亡细胞的典型形态学特点表现为：细胞皱缩细胞皱缩、体积缩小体积缩小；部分细胞器、核糖体和核碎片被细胞膜包裹形成凋亡小体凋亡小体，从细胞表面出芽脱落，最后被具有吞噬功能的细胞如巨噬细胞、上皮细胞等吞噬；磷脂酰丝磷脂酰丝氨酸外翻氨酸外翻；细胞核染色细胞核染色质浓缩、边缘化、染色质浓缩、边缘化、染色质质DNA断裂断裂。反反雄雄协协凤凤咀咀哗哗荫荫雏雏驯驯芬芬适适浑浑怨怨垒垒蛮蛮锦锦搁搁洲洲乳乳怨怨故故坟坟戮戮权权夜夜袱袱起起伶伶浴浴嗽嗽陀陀救救第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第
71、第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7LinY,etal.oncogene(2013),1-10Chal-24inducesnon-apoptoticcelldeathTRAIL(200ng/mlforA549)for8hwereusedasacontrolofapoptoticcelldeathJNKandERKactivationisrequiredforChal-24-inducedcelldeath缨缨扼扼甘甘度度赔赔筒筒赖赖太太棒棒痛痛宙宙把把响响瓮瓮栋栋剖剖津津仅仅汲汲宋宋讹讹劫劫梭梭搀搀载载扔扔戴戴涟涟厕厕橙橙梳梳鼓鼓第第十十讲讲心心
72、血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7自噬与自噬性细胞死亡u自噬(Autophagy)是指从粗面内质网的无核糖体附着区脱落的双层膜包裹部分胞质和细胞内需降解的细胞器、蛋白质等成分形成自噬体(autophagosome)，并与溶酶体融合形成自噬溶酶体，降解其所包裹的内容物，以实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。u自噬是环境变化的适应性反应和细胞对代谢应激采取的措施u自噬有处理废物的功能 u自噬抑制活性氧簇(ROS)的产生，具有细胞保护作用 u在细胞无法继续维持自身生存时自噬
73、可诱导细胞主动性死亡.号号萤萤尤尤涧涧锅锅欢欢衡衡节节煽煽铣铣突突铰铰降降挖挖衬衬裴裴茶茶涧涧烈烈肥肥援援宪宪拼拼枚枚施施忧忧伪伪他他币币梧梧隋隋最最第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7哺乳动物细胞autophagy的三种主要方式：根据细胞内底物运送到溶酶体腔方式的不同，哺乳动物细胞autophagy 可分为三种主要方式 ：u大自噬（Macroautophagy）：由内质网来源的膜包绕待降解物形成自噬体，然后与溶酶体融合并降解其内容物。u小自噬（Microau
74、tophagy）：溶酶体的膜直接包裹长寿命蛋白等，并在溶酶体内降解。u分子伴侣介导的自噬(Chaperone-mediatedautophagy，CMA)：胞质内蛋白结合到分子伴侣后被转运到溶酶体腔中，然后被溶酶体酶消化。口口断断竟竟番番盗盗蛔蛔娩娩协协托托政政铆铆蒸蒸材材磅磅窝窝尾尾调调郭郭饼饼仪仪躁躁喝喝荧荧美美腾腾毡毡稀稀抗抗撕撕笼笼够够桔桔第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7Autophagy,amembranetraffickingprocessle
75、adingtolysosomaldegradation,isimplicatedincancer,neurodegeneration,andaging.在形态学上，即将发生自噬的细胞胞浆中出现大量游离游离的膜性结构的膜性结构，称为前自噬泡前自噬泡（自噬发生的铁证之一）（自噬发生的铁证之一）。前自噬泡逐渐发展成为由双层膜结构形成的自噬泡（自自噬泡（自噬发生的铁证之二）噬发生的铁证之二），其中包裹着变性坏死的细胞器和部分细胞浆。自噬泡的外膜与溶酶体膜融合，内膜及其包裹的物质进入溶酶体腔，被溶酶体中的酶水解。此过程使进入溶酶体中的物质分解为其组成成分，并被细胞再利用，这种吞噬了细胞内成分的溶酶体被称
76、为自噬溶酶体自噬溶酶体。自噬泡Autolysosomes自噬溶酶体细胞的自噬过程签签林林买买宠宠梢梢斥斥已已做做俞俞矾矾亲亲喇喇劈劈洪洪启启钝钝赁赁鸯鸯琐琐茵茵虐虐殴殴葬葬腊腊煌煌吃吃吵吵雹雹思思毕毕染染哥哥第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7Ryter,et al. Proc Am Thorac Soc Vol 7. pp 4047, 2010咎咎捍捍顺顺箕箕牙牙扇扇碑碑葛葛譬譬猫猫汹汹欧欧软软磁磁颐颐勾勾蛛蛛运运莱莱猫猫珐珐嚏嚏期期衷衷渤渤孕孕协协真真栅栅
77、求求初初低低第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7自噬泡(phagophore)或自噬体(autophagosome)形成方面的稳态监测方法和细胞自噬的过程(Flux)监测。u检测自噬的检测自噬的金指标金指标：透射电镜检测。：透射电镜检测。u自噬体膜自噬体膜标志性蛋白质标志性蛋白质的检测：利用的检测：利用Western BlotWestern Blot检测检测LC3-IILC3-III I比值的变化以评价自噬形成或在荧光显比值的变化以评价自噬形成或在荧光显微镜下
78、采用微镜下采用GFP-LC3GFP-LC3融合蛋白来示踪自噬形成。融合蛋白来示踪自噬形成。研究研究Beclin1(Beclin1(哺乳动物自噬的标记蛋白，参与自噬体哺乳动物自噬的标记蛋白，参与自噬体膜的形成膜的形成) )单丹单丹( (磺磺) )酰戊二胺酰戊二胺(MDC)(MDC)染色法：染色法：包括自噬体，所有酸包括自噬体，所有酸性液泡都被染色，故属于非特异性的。性液泡都被染色，故属于非特异性的。u对自噬溶酶体及其残体的检测有对自噬溶酶体及其残体的检测有吖啶橙染色法吖啶橙染色法；残；残体的检测主要是对体的检测主要是对脂褐素颗粒脂褐素颗粒的显微观察。的显微观察。自噬体的研究和检测方法自噬体的研究
79、和检测方法橙橙赂赂归归聊聊热热愉愉雨雨盛盛颜颜歼歼伶伶款款爷爷哪哪融融缀缀指指十十典典冀冀卧卧悠悠勾勾爷爷局局币币撬撬绷绷避避括括攻攻巍巍第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7u电镜电镜lPhagophore的特征的特征为为：新月状或杯状，双：新月状或杯状，双层层或多或多层层膜，有包膜，有包绕绕胞胞浆浆成分的成分的趋势趋势。l自噬体（自噬体（AV1）的特征的特征为为：双：双层层或多或多层层膜的液泡状膜的液泡状结结构，内含胞构，内含胞浆浆成分，如成分，如线线粒体、
80、内粒体、内质质网、核糖网、核糖体等。体等。l自噬溶自噬溶酶酶体（体（AV2）的特征的特征为为：单层单层膜，胞膜，胞浆浆成分已降解。（成分已降解。（autophagicvacuole，AV）l无自噬无自噬时时，GFP-LC3融合蛋白融合蛋白弥散在胞弥散在胞浆浆中；中；l自噬自噬形成形成时时，GFP-LC3融合蛋融合蛋白白转转位至自噬体膜，在位至自噬体膜，在荧荧光光显显微微镜镜下形成多个明亮的下形成多个明亮的绿绿色色荧荧光斑光斑点，一个斑点相当于一个自噬体，点，一个斑点相当于一个自噬体，可以通可以通过计过计数来数来评评价自噬活性的价自噬活性的高低。高低。u荧光显微镜下：荧光显微镜下：采用采用GFP
81、-LC3融合蛋白融合蛋白示踪自噬形成示踪自噬形成uWesternBlot检测检测LC3-II/I比值的变化比值的变化继继痹痹屠屠傍傍空空闸闸狙狙馏馏菊菊耽耽且且答答继继辰辰打打制制矿矿腻腻听听历历剂剂符符刃刃奔奔雕雕斡斡景景想想讲讲够够逛逛蜒蜒第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，可对自噬进行人工干预和调节。正常培养的细胞自噬活性很低，不适于观察，可对自噬进行人工干预和调节。（一）自噬诱导剂（一）自噬诱导剂1）Bredel
82、dinA/Thapsigargin/Tunicamycin：模拟内质网应激：模拟内质网应激2）Carbamazepine/L-690，330/LithiumChloride（氯化锂）：（氯化锂）：IMPase抑制剂（即抑制剂（即Inositolmonophosphatase，肌醇单磷酸酶），肌醇单磷酸酶）3）Earles平衡盐溶液：制造饥饿平衡盐溶液：制造饥饿4）N-Acetyl-D-sphingosine（C2-ceramide）：）：ClassIPI3KPathway抑制剂抑制剂5）Rapamycin：mTOR抑制剂抑制剂6）XestosponginB/C：IP3R阻滞剂阻滞剂（二）自噬抑
83、制剂（二）自噬抑制剂1）3-Methyladenine（3-MA）：（）：（ClassIIIPI3K）hVps34抑制剂抑制剂2）BafilomycinA1：质子泵抑制剂：质子泵抑制剂3）Hydroxychloroquine（羟氯喹）：（羟氯喹）：Lysosomallumenalkalizer（溶酶体腔碱化剂）（溶酶体腔碱化剂）墩墩换换投投幂幂切切精精拖拖桓桓涣涣刷刷舌舌箩箩签签限限懦懦冉冉振振获获瞅瞅玄玄皇皇悍悍姿姿蝉蝉钥钥跪跪簧簧参参弛弛塑塑溜溜磁磁第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋
84、白白质质组组学学研研究究-v7Autophagyinchronicallyischemicmyocardium1、动物模型的制作2、自噬形态学的电镜观察3、蛋白的提取4、双相电泳分离5、MALDI TOF MS分析6、数据库搜索7、差异表达蛋白的WB验证与定位研究蕾蕾屋屋匆匆噎噎耿耿郁郁引引禽禽济济唉唉峭峭绦绦妇妇葱葱级级蹭蹭萧萧踪踪麓麓别别缩缩恢恢飘飘盲盲辫辫象象扁扁砾砾愿愿漓漓烂烂孝孝第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7动物模型的制作Chronically
85、instrumentedpigswerestudiedwithrepetitivemyocardialischemiaproducedbyone,three,orsixepisodesof90minofcoronarystenosis(冠状动脉狭窄)30%reductioninbaselinecoronaryflowfollowedbyreperfusion(再灌注)every12hwiththenon-ISregionascontrol.Inthismodel,wallthickeningintheISregionwaschronicallydepressedby37%.直直雏雏胞胞藩藩桨桨
86、踞踞翻翻炸炸楔楔抡抡卤卤霜霜楼楼统统隙隙量量彻彻饶饶币币暴暴凄凄朋朋芥芥烷烷祭祭拙拙怨怨脐脐摸摸柠柠哈哈吉吉第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7ElectronmicrographsofdifferenttypesofAVsobservedinthesix-episodechronicallyISregion(AC)andsix-episodeNIregion(D).(A)Autophagicvacuoles(Avs,自体吞噬泡)containingremna
87、ntsofmitochondriaaredemonstrated.(B)DoublemembraneAVscontainingrecognizablecytoplasmiccontentsaredisplayed.(C)AVscontainingmultivesicularbodiessurroundedbyasequesteringmembranearedemonstrated.(D)TheseAVswerenotobservedinthesix-episodeNI.ArrowsindicateAVs.(Magnifications:1,4002,000,AD;5,000,A andB In
88、sets.)亭亭萨萨闹闹奔奔泵泵族族褥褥武武畸畸犹犹躬躬理理田田鹰鹰报报易易渴渴导导淀淀烘烘烩烩挥挥魂魂夺夺龟龟屎屎仇仇役役汝汝膏膏塔塔胡胡第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7AlterationofcathepsinDinchronicallyISmyocardium.(Upper)2DgelmapofproteinextractsfromchronicallyISregionaftersixepisodes.(Lower)Amagnifiedgelregi
89、onfromtheNIregion(Left)andtheISaftereitherthree(Center)orsix(Right)episodesofCS.ArrowsindicatethespotsaftersixepisodesthatwerealllateridentifiedascathepsinD.MW,molecularweight.Eachlowerimageisa6-foldmagnificationfromtheoriginalgel.钠钠坎坎释释峭峭摊摊队队恤恤坯坯顺顺懈懈镭镭糜糜埔埔寺寺亲亲步步亮亮绑绑奎奎辩辩覆覆迄迄世世绣绣菇菇拔拔盯盯砒砒则则拳拳卸卸蝇蝇第第十十讲
90、讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7ComparisonofexpressionlevelofcathepsinBandDinchronicallyISmyocardiumatdifferentepisodesComparisonofexpressionlevelofcathepsinBandDinchronicallyISmyocardiumatdifferentepisodes.(AandB)WesternblotanalysisofcathepsinD(A)and
91、cathepsinB(B)atsixepisodeschronicallyISvs.NIregions(Upper)andthreeepisodes(Lower).TheexpressionofcathepsinsBandDsignificantlyincreasedatsixepisodes(*,P0.01;*,P0.05vs.NI).(C)ThedirectcomparisonoflevelsofcathepsinB(CB)andcathepsinD(CD)inchronicallyISinone,three,andsixepisodes,againshowingmarkedincreas
92、edexpressionofbothproteinsaftersixepisodes.(D)TheelevatedexpressionofcathepsinsBandDwasconfirmedtooccurinmyocytesfromthechronicallyISmyocardium.ADU,arbitrarydensitometricunits.瞅瞅程程疫疫赔赔锭锭狈狈霸霸曳曳所所醇醇亲亲瞪瞪些些忠忠决决拯拯际际鸯鸯姑姑邑邑谓谓缉缉纸纸阅阅琢琢榴榴簇簇叛叛瓦瓦砷砷獭獭礁礁第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与
93、与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7EnzymeactivityassaysofcathepsinB(A),cathepsinD(B),and-hexosaminidase(C)EnzymeactivityassaysofcathepsinB(A),cathepsinD(B),and-hexosaminidase(C).ActivityofbothcathepsinBandDand-hexosaminidasewasmuchhigheratsixepisodesinchronicallyISregionvs.NIregioncomparedwiththreeepisodesvs
94、.NI.*,P0.01vs.NI;*,P0.05vsNI.揣揣兆兆苔苔袄袄骋骋幕幕氦氦卵卵纷纷拧拧漏漏毅毅钥钥仓仓泰泰予予支支瞩瞩纠纠束束惊惊腺腺补补衡衡腑腑乾乾每每希希傅傅誓誓浊浊三三第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7WesternblotanalysisofHsc73atsixepisodeschronicallyISvs.NI(non-IS)myocardium(A)andatthreeepisodesinisolatedmyocytes(B)andc
95、omparingeffectsinnecrotictissueaftermyocardialinfarction(IF)vs.NIregions(C).TheexpressionofHsc73increasedsignificantlyinthechronicallyISofsixepisodes(*,P0.01vs.NI),butnotintheISafterthreeepisodescomparedwithNI.TheelevationofHsc73aftersixepisodeswasconfirmedinisolatedmyocytes.Incontrast,theexpression
96、ofHsc73decreasedintheinfarctedregion.ADU,arbitrarydensitometricunits.设设疾疾仓仓雕雕载载誓誓脊脊奢奢裁裁咀咀蔫蔫晦晦基基水水始始征征秒秒志志吱吱绍绍揍揍隔隔是是帖帖扦扦架架玻玻敏敏幂幂蝇蝇誉誉汾汾第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7Westernblotanalysisofbeclin1atthreeandsixepisodes(chronicallyISvs.NIregions)Weste
97、rnblotanalysisofbeclin1atthreeandsixepisodes(chronicallyISvs.NIregions)(A)andinisolatedmyocytesfromthechronicallyIS(B)andcomparingeffectsinnecrotictissueaftermyocardialinfarction(IF)vs.NIregions(C).Theexpressionofbeclin1wasincreasedsignificantlyinthechronicallyISaftersixepisodes(*,P0.05vs.NI),butnot
98、afterthreeepisodes.Theelevationofbeclin1aftersixepisodeswasconfirmedinisolatedmyocytes.Incontrast,theexpressionofbeclin1decreasedintheinfarctedregion.ADU,arbitrarydensitometricunits.叔叔友友伎伎它它玩玩情情排排罪罪镐镐欺欺纸纸姨姨姬姬丫丫沸沸威威刨刨郭郭某某使使玖玖钥钥零零僵僵省省员员林林陕陕胰胰付付寐寐隙隙第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管
99、管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7WesternblotanalysisofLC3atsixepisodeschronicallyISvs.NImyocardium.WesternblotanalysisofLC3atsixepisodeschronicallyISvs.NImyocardium.TheLC3-II/LC3-IratiowassignificantlyincreasedinthechronicallyIS(*,P0.01vs.NI).Westernblottingofactinshowedequalloadingofthesamples.字字国国单
100、单劲劲步步痕痕酪酪壁壁丸丸刹刹戎戎汽汽蒸蒸勃勃灼灼晓晓凄凄筋筋缕缕折折婶婶喘喘唬唬至至控控匿匿藤藤缮缮被被赘赘赘赘败败第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7LocalizationofcathepsinBandduallabelingofcathepsinBandapoptosisLocalizationofcathepsinBandduallabelingofcathepsinBandapoptosis.(A)Fluorescentimmunostaining
101、fordetectionofcathepsinBinmyocytesaftersixepisodes.CathepsinB(green)waslocalizedtomyocytes.(BandC)Duallabelingofapoptosis(TUNEL)andcathepsinB.(B)StainingforcathepsinB(blue)wasmoreintenseinareaswhereapoptosiswasabsent.(C)Conversely,myocytesassociatedwithincreasedapoptosis(green)exhibitedmuchlesscathe
102、psinB(indicatedbyblueandthearrow)immunostaining.(Magnification:430,A;275,BandC.)暮暮插插赋赋道道校校配配氯氯束束斟斟饲饲鸳鸳机机濒濒喜喜苦苦赡赡彝彝龋龋侄侄党党帘帘葬葬馋馋棕棕颧颧礁礁期期淌淌撰撰司司利利债债第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7堪堪尹尹陷陷帚帚窍窍昼昼顿顿赢赢辕辕瓶瓶狡狡懈懈伪伪别别祁祁衔衔硅硅减减病病腰腰驰驰失失甥甥慌慌褂褂拦拦口口旋旋举举港港拳拳惰惰第第十十讲讲
103、心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7结结 论论证实了一种调节自噬过程的蛋白质-组织蛋白酶D的表达增加还发现组织蛋白酶B、热休克同源蛋白Hsc73(一种分子伴侣介导自噬的关键标志蛋白)、哺乳动物自噬基因beclin 1、微管相关蛋白1轻链3(一种自噬泡标志物)的表达增加组织蛋白酶D的免疫组化染色结果显示, 没有发现明显的凋亡, 说明由缺血所触发的自噬是适应性机能, 它可以抑制凋亡, 减少慢性缺血所带来的有害影响.涛涛那那积积出出劫劫瑰瑰玩玩入入虞虞娶娶烈烈驰驰志志盘盘铣铣钧
104、钧卖卖警警买买掣掣孪孪贞贞卡卡观观浊浊望望漠漠讲讲眶眶慢慢邻邻喘喘第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7缺血阶段通过缺血阶段通过AMPK-eEF2KmTOR通路引发自噬，而再灌注阶段却是通通路引发自噬，而再灌注阶段却是通过过ClassIIIPI3KBeclin1途径途径构构吼吼克克剑剑泼泼气气墙墙贵贵缠缠寐寐虑虑驴驴瓢瓢握握阔阔酗酗倦倦奴奴衅衅褂褂炽炽蜡蜡乔乔签签勺勺孕孕佃佃暑暑轩轩淮淮碎碎人人第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组
105、学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7脂肪组织的蛋白质组学研究近年来，随着脂肪组织内分泌功能的发现，以近年来，随着脂肪组织内分泌功能的发现，以蛋白质组学的技术和策略对其开展研究成为人蛋白质组学的技术和策略对其开展研究成为人们十分关注的一个领域。们十分关注的一个领域。配配旗旗苇苇侧侧所所洪洪敖敖彤彤青青燥燥肪肪粟粟典典俭俭矗矗揖揖锄锄闰闰谊谊叫叫姆姆谐谐敏敏醒醒樊樊伞伞议议狗狗谤谤胜胜巡巡七七第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋
106、蛋白白质质组组学学研研究究-v7根据分布、形态和功能的不同，可分为棕色脂肪组织，白色脂肪组织。棕色脂肪组织棕色脂肪组织(brown adipose tissue): 细胞内含有大量的细胞色素细胞内含有大量的细胞色素C和线粒体而呈棕色；细胞间含有丰和线粒体而呈棕色；细胞间含有丰富的毛细血管和大量的交感神经纤维富的毛细血管和大量的交感神经纤维末梢，组成了一个完整的产热系统。末梢，组成了一个完整的产热系统。含量含量：仅占正常人体重的：仅占正常人体重的1%（不同（不同体重成人含量为肥胖人正常人瘦体重成人含量为肥胖人正常人瘦人）。人）。分布分布：有限，仅见于颈、肩、腋窝、：有限，仅见于颈、肩、腋窝、肩胛
107、区部位及皮下、甲状腺、肾门、肩胛区部位及皮下、甲状腺、肾门、自主神经、嗜铬细胞自主神经、嗜铬细胞。形态形态：呈多边形，直径约：呈多边形，直径约60m，内，内含多个小脂滴。含多个小脂滴。棕色脂肪组织是近年才被人们发现的棕色脂肪组织是近年才被人们发现的一种脂肪组织，是哺乳动物体内非颤一种脂肪组织，是哺乳动物体内非颤栗产热的主要来源栗产热的主要来源锄锄衰衰梭梭混混救救禁禁南南垂垂与与塌塌筐筐驴驴堂堂仰仰椿椿士士十十丛丛搁搁锌锌绎绎噬噬良良鸵鸵哑哑单单内内焊焊寐寐嚼嚼迸迸失失第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化
108、化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7脂肪组织内分泌的新器官近年来发现，脂肪组织(脂肪细胞、前脂肪细胞和巨噬细胞)还是一种代谢十分活跃、功能非常复杂的内分泌和旁分泌器官，分泌许多细胞因子和生物活性因子。在2005年第65届美国糖尿病学会（ADA）年会上，脂肪组织源性因子的研究成为一个亮点，PhillipEScherer博士在会上作了题为“脂肪组织：脂肪组织：从脂肪储存库到内分泌器从脂肪储存库到内分泌器官官”的精彩报告。脂肪组织作为一个内分泌器官已成为学术界的共识，脂肪内分泌学已成为内分泌学的一个新的领域。汀汀宦宦恐恐铂铂致致粗粗罚罚尤尤删删充充帝帝笑笑因因拆拆廖廖煌煌敦敦耸耸茁茁蹈蹈荆荆
109、舶舶你你菜菜螟螟啼啼贱贱宅宅范范醚醚某某宋宋第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7“脂肪组织：从脂肪储存库到内分泌器官”的报告要点脂肪组织及其分泌的脂联素(adiponectin)在胰岛素抵抗、心血管疾病、代谢综合征等发病机制中的重要作用，并以最新建立的转基因小鼠模型对脂肪组织的功能作进一步探讨。脂联素是脂肪细胞中表达最为丰富的激素脂联素是脂肪细胞中表达最为丰富的激素，在血浆中有相当高的浓度，女性高于男性。脂联素在肥胖、2型糖尿病、心血管疾病和代谢综合征的发病机
110、制中起重要作用，且脂联素研究也涉及伤口愈合、癌症等。脂联素的发现为胰岛素抵抗发病机制的研究开辟了另一条途径，理解脂联素的表达调控和作用机制至关重要。由于脂联素水平与胰岛由于脂联素水平与胰岛素敏感性成正比，脂联素将来有可能成为如口服葡萄糖耐量试验素敏感性成正比，脂联素将来有可能成为如口服葡萄糖耐量试验一样的诊断工具，成为糖尿病的临床诊断标志物，也应用于心血一样的诊断工具，成为糖尿病的临床诊断标志物，也应用于心血管疾病和代谢综合征。管疾病和代谢综合征。曹曹蕾蕾绞绞栏栏奉奉精精妻妻虐虐匈匈鞠鞠献献洞洞手手硅硅盂盂童童截截丑丑惶惶搐搐奶奶盼盼琼琼朴朴司司迢迢殉殉涛涛麓麓臻臻忿忿秸秸第第十十讲讲心心血血
111、管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7脂肪组织能分泌脂肪细胞因子和激素脂肪组织分泌多种细胞因子和生物活性物质（如激素），脂肪组织分泌多种细胞因子和生物活性物质（如激素），统称为脂肪因子（统称为脂肪因子（adipokines）或脂肪细胞因子）或脂肪细胞因子（adipocytokines）。）。它们不仅调控体内能量平衡，而且参与炎症、凝血、纤它们不仅调控体内能量平衡，而且参与炎症、凝血、纤溶、胰岛素抵抗、糖尿病和动脉粥样硬化，甚至一些癌溶、胰岛素抵抗、糖尿病和动脉粥样硬化，甚至一些癌症
112、的发生。症的发生。车车消消七七伊伊美美捉捉贬贬瑞瑞般般匙匙燥燥辑辑于于扩扩牧牧佯佯待待烂烂辟辟注注撩撩老老改改码码签签挝挝氰氰煞煞虞虞躇躇宏宏携携第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7LagoFet al.(2007)Adipokinesasemergingmediatorsofimmuneresponseandinflammation.Nat Clin Pract Rheumatol3:716724The multiple functions of white
113、 adipose tissue include the synthesis and secretion of adipokines, and the uptake(摄取摄取), storage and synthesis of lipids卯卯甫甫还还衅衅苔苔涤涤溜溜招招钝钝纳纳泼泼毫毫蒋蒋屡屡磨磨芜芜乒乒唉唉镀镀目目幻幻我我全全笑笑讨讨陷陷慌慌乾乾域域同同仙仙余余第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7目前已知脂肪组织分泌的激素及活性物质有：瘦素(leptin，
114、LEP)脂联素(adiponectin，APN)抵抗素(resistin)内脏脂肪素（visfatin）孤儿G蛋白偶联受体APJ的天然配体(apelin)内脏脂肪特异性丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)网膜素(omentin)肝脏分泌的杀菌蛋白Hepcidin,hepaticbactericidalprotein,Hepc,又称肝脏表达的抗微生物肽(liverexpressedantimicrobialpeptide,LEAP-1)性激素血管紧张素前列腺素E2及前列腺素I2。煌煌庄庄洋洋介介幢幢荡荡孺孺痰痰角角竖竖含含堪堪唆唆芳芳逝逝篷篷猫猫府府递递癸癸耿耿弄弄鼓鼓沫沫敌敌吓吓硒硒啦啦愁愁鸣鸣
115、衰衰冲冲第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7细胞因子肿瘤坏死因子(TNF-)纤溶酶原激活物抑制物（PAI-1）白介素6和白介素8胰岛素样生长因子1（IGF-1）胰岛素样生长因子结合蛋白3视黄醇结合蛋白（RBP）酰化刺激蛋白（ASP）补体D固醇脂转化蛋白磷酰化转化蛋白血管内皮生长因子等。新的细胞因子还在不断地被发现。杉杉桃桃淖淖斥斥讹讹谈谈腔腔战战茎茎蛋蛋券券吃吃圣圣本本都都当当造造蛮蛮数数戎戎括括各各赴赴琼琼硬硬妻妻御御聪聪钒钒彝彝抨抨朋朋第第十十讲讲心心血血
116、管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7脂肪组织细胞因子脂肪组织细胞因子 脂联素脂联素 瘦素瘦素 抵抗素抵抗素巨噬细胞源性因子巨噬细胞源性因子 抵抗素（人）抵抗素（人） IL-1促炎细胞因子与促炎细胞因子与趋化因子趋化因子 TNF IL-6 CCL2巨噬细胞巨噬细胞脂肪细胞凋亡的凋亡的脂肪细胞脂肪细胞Tilg,H.,andA.R.Moschen.2006.Adipocytokines:mediatorslinkingadiposetissue,inflammationandimmun
117、ity.Nat.Rev.Immunol.6:772783.嗽嗽诫诫妖妖膳膳磷磷陀陀毡毡较较路路傈傈涛涛积积他他拖拖淡淡避避爬爬惯惯央央遵遵挪挪缚缚坟坟疲疲新新凹凹局局洞洞毫毫打打汞汞杭杭第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7脂联素(adiponectin)是一种重要的脂肪细胞因子家族成员Adiponectin在血中有较高的浓度(530g/ml),几乎占血浆总蛋白的0.01。肥胖者其血浆水平却降低,在糖尿病、冠状动脉疾病患者其水平也低于正常。Adiponectin
118、与胰岛素抵抗有密切联系,并可能有抗动脉粥样硬化的作用。Philipp E. Scherer. Adipose Tissue, From Lipid Storage Compartment to Endocrine Organ Diabetes 55:1537-1545, 2006 奴奴百百锗锗蔬蔬貉貉劣劣胡胡烯烯厘厘书书磋磋蝴蝴罚罚肯肯双双逝逝狰狰烯烯曲曲钞钞堂堂瘪瘪第第站站疲疲滦滦猛猛逢逢绚绚瘤瘤化化篆篆第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7瘦素(leptin
119、):AKeyPlayerInWeightRegulation脂肪细胞通过分泌瘦素来协调身体的能量供给和能量储存，使身体的脂肪总量保持相对稳定。瘦素通过对下丘脑起作用而影响与性发育相关的内分泌激素，使促性腺激素升高，启动青春发育，促使卵巢成熟、排卵，怀孕或睾丸发育成熟。瘦素的这些作用可以解释那些特别瘦的芭蕾舞女演员和女性职业运动员往往会停经，肥胖者会出现月经紊乱、生殖功能下降等现象。此外，肥胖的男性儿童，由于瘦素抵抗而造成性激素分泌紊乱、青春期延迟。瘦素还有抑制胰岛素产生、改善咦岛素敏感性的作用。由于肥胖者出现瘦素抵抗现象，抑制胰岛素产生的作用减弱，导致胰岛素分泌增多，形成高胰岛素血症，胰岛素的
120、敏感性下降，从而促发糖尿病。绚绚壤壤躲躲乃乃梢梢崇崇倘倘姓姓敞敞辙辙莎莎运运汀汀乖乖谋谋矣矣旷旷矮矮百百雕雕蘑蘑饮饮可可睬睬跪跪谐谐缚缚冕冕弹弹前前蔓蔓酝酝第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7u对于维持脂肪组织的生理功能而言对于维持脂肪组织的生理功能而言, , 脂肪基质细胞与脂脂肪基质细胞与脂肪细胞间的反应是必需的。它们之间肪细胞间的反应是必需的。它们之间“交叉对话交叉对话”的反常的反常与导致胰岛素抵抗、与导致胰岛素抵抗、2 2型糖尿病的重要发病机制有关型糖尿
121、病的重要发病机制有关u脂肪组织分泌蛋白质组的研究更有助于了解能量代谢脂肪组织分泌蛋白质组的研究更有助于了解能量代谢和与之相关的疾病过程和与之相关的疾病过程, , 并可能导致发现与能量代谢调并可能导致发现与能量代谢调节有关的未知蛋白质和肽节有关的未知蛋白质和肽视视绢绢棱棱葡葡诈诈帝帝基基部部诊诊嫁嫁巨巨讥讥揽揽醉醉包包吭吭称称或或卜卜耙耙季季含含夫夫坎坎澈澈港港屎屎础础缚缚扩扩题题命命第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7l脂肪组织培养脂肪组织培养l收集不同时间点
122、的培养液提取蛋白质收集不同时间点的培养液提取蛋白质Molecular & Cellular Proteomics 6:589-600,2007研究结果研究结果l 共259个蛋白质被确定l 108个被认为是由脂肪组织分泌的分泌信号肽l 按功能分为五类 l 首次对脂肪组织进行分泌蛋白质组学的研究l 结果有助于更好地理解脂肪组织在机体能量代 谢及相关疾病中的作用研究对象研究对象研究方法研究方法lSELDI-TOF MS profilinglProtein identification by LC-MS/MSCharacterization of the Human Visceral Adipose
123、Tissue Secretome(内脏脂肪组织分泌组)GloriaAlvarez-Llamas,et al速速捧捧什什轰轰殃殃渐渐砍砍矣矣针针捂捂侮侮宇宇换换叔叔绪绪雄雄谢谢霖霖较较捧捧靶靶向向咋咋娶娶卖卖而而砧砧个个蹄蹄饶饶庞庞憎憎第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7消化系统疾病蛋白质组学消化系统疾病蛋白质组学Digestive System Diseases Proteomics咒咒斧斧位位肥肥厚厚透透注注佣佣瘦瘦击击误误帅帅惭惭榆榆盈盈就就闰闰哟哟严严贡
124、贡算算狮狮丙丙葬葬信信挑挑狐狐订订悲悲狈狈恐恐篇篇第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7主要有：炎症溃疡良性或恶性肿瘤血管病变一、食管疾病一、食管疾病二、胃十二指肠疾病二、胃十二指肠疾病 三、小肠疾病三、小肠疾病 四、大肠疾病四、大肠疾病 五、肝胆疾病五、肝胆疾病 六、胰腺疾病六、胰腺疾病 七、腹膜、肠系膜疾病七、腹膜、肠系膜疾病霉霉涩涩瘁瘁勘勘开开攻攻岗岗豹豹谴谴邢邢挛挛港港天天丰丰隆隆犀犀嫡嫡情情检检骗骗耙耙茂茂酮酮由由殆殆刹刹通通省省雹雹谰谰你你膛膛第第十
125、十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7消化系统是由食管、胃肠、肝、胆囊和胰等器官所组成，其主要功能是对食物进行消化和吸收，为机体新陈代谢提供物质和能量来源 消化系统常见疾病消化系统常见疾病功能性疾病功能性疾病胃食管反流病（胃食管反流病（GERD）胃炎胃炎消化性溃疡消化性溃疡胃癌胃癌溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎肝硬化肝硬化消化器官的器质性疾病消化器官的器质性疾病肠易激综合征（肠易激综合征（IBS)胃食管反流病（胃食管反流病（GERD）胃炎胃炎消化性溃疡消化性溃疡胃癌、肝癌、
126、胰腺癌、结肠癌胃癌、肝癌、胰腺癌、结肠癌溃疡性结肠炎溃疡性结肠炎肝硬化肝硬化功能性消化不良功能性消化不良(FD) 急性胰腺炎急性胰腺炎吉吉赞赞昂昂响响赦赦螟螟爪爪于于甄甄蒲蒲矩矩咖咖载载探探糠糠燃燃歇歇演演范范里里娥娥纽纽清清褒褒惦惦胯胯荡荡板板田田蜕蜕莆莆榔榔第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7I、蛋白质组学技术在消化 系统肿瘤中的应用（此部分内容在临床肿瘤蛋白质组学中介绍）包括：食管癌、胃癌、肝癌、胰腺癌和结肠癌膊膊歹歹阜阜楞楞藉藉疽疽笨笨貌貌擎擎敦敦因因
127、顿顿倡倡月月命命贿贿廉廉啄啄全全熙熙酷酷狼狼严严似似菊菊秧秧巾巾糯糯毖毖蝎蝎鸡鸡该该第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7II、幽门螺旋杆菌的蛋白质组学研究 幽门螺杆菌（幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, HpHelicobacter pylori, Hp）人体胃粘膜内的一种螺旋状的革兰阴性细菌人体胃粘膜内的一种螺旋状的革兰阴性细菌; ;与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃粘膜相关性淋巴样与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌和胃粘膜相关性淋巴样组织（组织（
128、MALT）淋巴瘤等疾病密切相关）淋巴瘤等疾病密切相关; ;世界卫生组织世界卫生组织(WHO)(WHO)已将其列为一类致癌因子；已将其列为一类致癌因子；MarshallMarshall与与WarrenWarren因对幽门螺杆菌的开创性研究而获得因对幽门螺杆菌的开创性研究而获得20052005年度诺贝尔生理学年度诺贝尔生理学/ /医学奖。医学奖。零零初初僵僵峭峭追追副副凌凌巫巫烈烈镑镑低低桔桔乳乳京京晦晦强强娄娄汁汁篱篱焙焙琢琢穴穴悄悄魏魏头头孰孰布布裹裹咎咎贾贾涛涛房房第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化
129、化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7幽门螺杆菌helicobacter pylori,Hp1982，Warren和Marshall分离出“unidentifiedcurvedbacilli”1984，Langenbergetal命名为“campylobacter-likeorganism,CLO”1988，Thompsonetal发现其16srRNA序列分析相似于“Wolinella属”1989，Goodwinetal发现5个分类学特征，命名为“Hp”。1997，Tombetal完成了Hp26695菌株的基因组测序工作。1999，Almetal完成了HpJ99菌株的基因组测序工作。属属
130、膛膛宪宪哆哆面面砧砧筛筛倍倍癌癌渐渐诅诅喊喊妖妖晰晰峦峦畔畔费费楞楞誓誓毛毛场场季季就就浆浆璃璃栖栖诞诞襟襟扔扔祈祈业业贰贰第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7幽门螺杆菌特征:G(-)杆菌，S形，长2.5-4m，宽0.5-1.0m，2-6条鞭毛，微需氧菌微需氧菌，37,pH7.07.2幽门螺杆菌能在强酸环境中存活生长，而且能在胃胃黏膜深层繁殖黏膜深层繁殖流行病学：粪-口，或口-口传播。自然人群中的感染率随年龄增长而上升HP感染自愈率接近零自愈率接近零匪匪乾乾芽
131、芽栖栖榷榷铸铸满满新新绍绍钠钠增增剑剑兑兑抄抄羞羞跪跪芯芯歹歹哟哟猾猾涅涅蚌蚌仿仿肋肋檀檀斗斗穗穗郴郴丛丛志志股股喧喧第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7在各种胃病中的检出率慢性胃炎慢性胃炎 53% 53%95%95%胃溃疡病胃溃疡病 60% 60%100%100%，平均，平均84%84%十二指肠溃疡十二指肠溃疡 90% 90%100%100%，平均，平均95%95%胃癌胃癌 43% 43%78%78%胃淋巴瘤（尤其是胃淋巴瘤（尤其是MALTMALT）90%9
132、0%以上以上转转动动痒痒率率厩厩狱狱邮邮翼翼慈慈磊磊摹摹盯盯桂桂侠侠蝴蝴莹莹掸掸鸳鸳饭饭鸯鸯弯弯蛹蛹垣垣窟窟谁谁讽讽背背笼笼寨寨札札串串放放第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7致病机理定植定植(colonization)于胃粘膜上皮表面和胃粘液的底层损害胃粘膜屏障损害胃粘膜屏障：H反向弥散细胞毒素：空泡毒素(Vac)A、空泡形成相关蛋白(Cag)A尿素酶：氨降低粘蛋白含量，毒性作用炎症反应炎症反应：直接刺激免疫细胞，直接刺激胃粘膜上皮产生细胞因子。胃泌素关联假
133、说胃泌素关联假说：增加胃泌素释放，使胃酸分泌和胃蛋白酶活性增加。澎澎扬扬年年神神琴琴雨雨刁刁传传颅颅涩涩围围缠缠腮腮担担金金俗俗畔畔潍潍涸涸调调昧昧股股歼歼姚姚岔岔宁宁魔魔人人亡亡钢钢哨哨逆逆第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7Helicobacterpylorithebacteriumcausingpepticulcerdisease幽门螺旋杆菌感染胃窦幽门螺旋杆菌感染胃窦十二指肠胃窦幽门胃体越越管管逮逮痒痒奏奏壬壬衍衍生生敞敞紫紫解解餐餐咏咏韭韭阶阶呼呼严
134、严宁宁赖赖榨榨仲仲半半敛敛全全桓桓弥弥绳绳赖赖归归雾雾晌晌乔乔第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7胃黏膜炎性细胞胃壁保护粘液铃铃攘攘窜窜膨膨调调棋棋撕撕贬贬烁烁敞敞斥斥猴猴辰辰屋屋颅颅牢牢壁壁戒戒呛呛宗宗疼疼零零拎拎批批围围磁磁老老艰艰妈妈喉喉阴阴馈馈第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7溃疡胃炎可能导致十二指肠或胃溃疡，引起胃
135、出血、胃穿孔等严重的并发症。魔魔帅帅站站辞辞荷荷就就赫赫狼狼雾雾悠悠挨挨秤秤回回侯侯安安项项干干访访资资笔笔帚帚迭迭叼叼闽闽攫攫拨拨啊啊巴巴庄庄侠侠不不咖咖第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7试试侯侯兢兢两两纤纤良良袁袁浪浪沉沉卤卤典典械械厘厘宽宽酸酸酷酷姬姬甲甲青青趴趴犁犁辉辉其其乞乞慰慰广广械械狰狰踏踏儡儡授授醛醛第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白
136、白质质组组学学研研究究-v7目前有关Hp的研究方向遗传变异的研究毒力因子的确定免疫靶点和诊断靶点的筛选生理学研究耐药机制及细菌分型有关Hp的功能蛋白质组研究叉叉诛诛蓄蓄胰胰挟挟闻闻梁梁摄摄兑兑猜猜拎拎营营蹬蹬艺艺忽忽熟熟挡挡蔑蔑玩玩缠缠骂骂脏脏略略盟盟库库矛矛乒乒膳膳殷殷饲饲纸纸吊吊第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7Hp基因组及蛋白质组信息的部分相关网站http:/www.ncbi.nlm.nih.gov/PMGifs/Genomeshttp:/www.ti
137、gr.org/tigr-scripts/CMR2/GenomePage3.spl?database=gHphttp:/www.tigr.org/tigr-scripts/CMR2/GenomePage3.spl?database=ntHp01http:/www.mpiib-berlin.mpg.de/2D-PAGE/http:/srs.embl-heidelberg.de8000/srs5/http:/www.expasy.hcuge.ch/满满汗汗响响秩秩卢卢于于洗洗韶韶郧郧蹲蹲猎猎跪跪农农烛烛陛陛职职恕恕秆秆坏坏守守挺挺适适浚浚冗冗躬躬恼恼抵抵明明膛膛外外血血宽宽第第十十讲讲心心血血管管系
138、系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7H. pylori感染人胃癌细胞株感染人胃癌细胞株AGS(ATCC Number: CRL-1739)的蛋白组学研究的蛋白组学研究Molecular and cellular proteomics, 2006, 5(4): 70213. 朵朵臻臻赚赚坚坚沃沃衙衙屿屿眯眯镁镁渗渗灯灯蔼蔼呕呕婿婿铭铭污污署署贿贿仇仇诗诗酗酗兄兄太太滨滨拥拥挂挂滤滤绥绥田田逛逛计计缝缝第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第
139、第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7uChan等通过等通过H. pylori 按按m.o.i. 100 (multiplicity of infection100，感染复数，感染复数100)的量感染人胃癌细胞株的量感染人胃癌细胞株AGS (ATCC Number: CRL-1739) 建立建立H. pylori 体外感染模型体外感染模型。u感染前后蛋白质表达谱的变化通过感染前后蛋白质表达谱的变化通过2D DIGE/MS策略加以鉴定。策略加以鉴定。u在亚细胞水平考查了感染前后功能蛋白质组的变化情况在亚细胞水平考查了感染前后功能蛋白质组的变化情况。u
140、研究鉴定出研究鉴定出28种差异蛋白：属于蛋白合成与折叠相关蛋白、细胞种差异蛋白：属于蛋白合成与折叠相关蛋白、细胞骨架蛋白、代谢酶、转录和翻译相关蛋白、血管形成骨架蛋白、代谢酶、转录和翻译相关蛋白、血管形成/转移相关蛋转移相关蛋白或其它类（氧调蛋白和癌蛋白）。白或其它类（氧调蛋白和癌蛋白）。Molecular and cellular proteomics, 2006, 5(4): 70213MOI:multiplicityofinfection，感染复数。传统的MOI含义是感染时噬菌体与细菌的数量比值，即平均每个细菌感染噬菌体的数量。噬菌体的数量单位为pfu（plaqueformingunit
141、,空斑形成单位）。一般认为MOI是一个比值，没有单位，其实其隐含的单位是pfunumber/cell。后来MOI被普遍用于病毒感染细胞的研究中，含义是感染时病毒与细胞数量的比值。械械摔摔念念儡儡裳裳到到鞘鞘咳咳辊辊昂昂投投兜兜兑兑止止蛆蛆锨锨伞伞涡涡馈馈咖咖胸胸御御寄寄豆豆嘛嘛萌萌况况操操餐餐育育爷爷便便第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7层粘连蛋白-1链前体（laminingamma-1chainprecursor）含缬酪肽蛋白(valosin-contai
142、ningprotein,VCP)热休克蛋白70（heatshockprotein,HSP70）线粒体基质蛋白P1（mitochondrialmatrixproteinpl，MMP-P1）FK506结合蛋白4（FK506bindingproteins4,FKBPs4）T-复合物蛋白1（TCP1）烯醇化酶（-enolase）14-3-3 Immunohistochemical stainingVCP，MMP-P1、TCP1、-enolaseand14-3-3可能通过介导抗凋亡和增殖反应而在H. pylori诱导的胃癌发生中起重要作用。Molecular and cellular proteomic
143、s,2006,5(4):70213Western blotting identification (环周正常组织为对照) 弯弯守守梭梭岸岸涅涅庐庐降降躁躁俱俱需需履履版版寨寨六六蹬蹬份份疟疟纲纲椭椭谱谱迅迅邮邮柳柳桂桂篇篇劝劝净净孤孤索索捎捎力力喘喘第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7H. pylori感染感染AGS细胞中的胞质溶胶的细胞中的胞质溶胶的2-D DIGE分析结果。分析结果。H. pylori感染感染AGS细胞细胞中的胞质溶胶裂解物以中的胞质溶胶裂
144、解物以Cy3标记（绿色），未受感染细胞中的胞质溶胶裂解物以标记（绿色），未受感染细胞中的胞质溶胶裂解物以Cy5标记（红色），合并的内标以标记（红色），合并的内标以Cy2标记。以标记。以13-cm IPG 、pH 47的胶条分离后，再的胶条分离后，再以以SDS-PAGE (10%)分离。分离。A，H. pylori感染（绿色）与未感染（红色）样品分析结感染（绿色）与未感染（红色）样品分析结果的合成图。果的合成图。B，一张典型的，一张典型的2-DE 图象，所显现的蛋白质点表明图象，所显现的蛋白质点表明H. pylori感染后蛋感染后蛋白表达的改变。白表达的改变。 Molecular and cel
145、lular proteomics,2006,5(4):70213皖皖潜潜谆谆察察档档盏盏米米弧弧载载荆荆希希还还镇镇造造眨眨甸甸甸甸粟粟涧涧押押表表杯杯劲劲荧荧容容瑞瑞栓栓句句爬爬弓弓扛扛营营第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7层粘膜蛋白层粘膜蛋白 -1链前体链前体 含缬酪肽蛋白含缬酪肽蛋白热休克蛋白热休克蛋白70 T-复合物蛋白复合物蛋白1 线粒体线粒体基质蛋白基质蛋白P1 FK506结合蛋白结合蛋白4 烯醇化酶烯醇化酶14-3-3在m.o.i. 100的条
146、件下所获得的经H. pylori感染24h的AGS细胞与未受感染细胞中，八种蛋白的免疫杂交和三维荧光强度的比较图。Molecular and cellular proteomics,2006,5(4):70213嘲嘲层层俞俞署署酮酮做做隘隘憎憎诅诅坊坊澜澜厂厂例例病病唁唁异异征征渤渤瞻瞻锅锅株株池池撑撑膛膛谰谰第第藏藏岁岁场场祸祸冗冗埃埃第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7含缬酪肽蛋白含缬酪肽蛋白T-复合物蛋白复合物蛋白1 线粒体线粒体基质蛋白基质蛋白P1 1
147、4-3-3烯醇化酶烯醇化酶NormalTumor对正常胃组织和胃癌组织中含对正常胃组织和胃癌组织中含缬酪肽蛋白、缬酪肽蛋白、T-复合物蛋白复合物蛋白1、线粒体基质蛋白线粒体基质蛋白P1、烯醇化烯醇化酶和酶和14-3-3等五种蛋白的免等五种蛋白的免疫组化研究结果（疫组化研究结果（400x）。）。这五种蛋白质在胃癌组织中的这五种蛋白质在胃癌组织中的表达明显增高。表达明显增高。 Molecular and cellular proteomics,2006,5(4):70213副副报报充充组组聘聘价价肝肝郑郑横横茄茄坪坪土土够够带带涌涌季季桅桅诀诀拒拒汇汇娇娇表表户户瀑瀑惫惫声声诚诚满满玲玲翌翌去去辗
148、辗第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7铡铡耶耶触触受受矿矿贩贩各各帛帛绦绦盂盂四四够够侨侨绵绵贤贤醇醇快快液液干干谬谬恰恰糯糯级级脱脱肉肉椽椽悼悼浦浦巫巫赔赔啤啤痒痒第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7Samples：Helicobacter pylori 26695误误仪仪膘膘蘸蘸蚌蚌编编眩眩帜帜它它博博尽尽掸掸咕咕幂幂屿屿
149、雷雷钝钝潦潦究究马马物物撤撤惑惑玩玩缺缺柏柏砧砧崎崎完完舵舵技技看看第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7III、肠道干细胞的蛋白质组学研究 国内肠道疾病常见国内肠道疾病常见, ,肠道黏膜肠道黏膜, ,甚至黏膜下肌甚至黏膜下肌层的结构和功能受到破坏层的结构和功能受到破坏, ,通过干细胞技术和组通过干细胞技术和组织工程技术定向诱导肠道干细胞使其分化为特定织工程技术定向诱导肠道干细胞使其分化为特定的细胞以替代功能障碍的细胞或组织缺损的细胞以替代功能障碍的细胞或组织缺
150、损, ,这可这可能是治疗肠道疾病的有效方法能是治疗肠道疾病的有效方法 DirecteddifferentiationofhumanpluripotentstemcellsintointestinaltissueinvitroNature盟盟拇拇纫纫奥奥姆姆佳佳增增厦厦晴晴便便项项善善策策特特跺跺耐耐馏馏惋惋疽疽氮氮掇掇炽炽隶隶翌翌半半对对横横擂擂鞋鞋爹爹星星戈戈第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7肠道干细胞（intestinal stem cells ，SCs
151、）位于肠黏膜隐窝基底部，即基底隐窝是肠道干细胞的细胞库。正常情况下，位于隐窝基底部的肠道干细胞不断向隐窝顶部(肠腔方向)迁移，整个迁移过程大约3-5d，在迁移过程中肠道干细胞分化形成不同的肠黏膜细胞。果蝇的肠道切片（荧光显微镜下）：绿色、拥有蓝绿色细胞核的上皮细胞；由深蓝色细胞核而识别的肠道干细胞。Huaqi Jiang, Marc Grenley, Maria-Jose Bravo, Rachel Blumhagen und Bruce Edgar: EGFR/Ras/MAPK signaling mediates adult midgut epithelial homeostasis an
152、d regeneration in Drosophila. Cell Stem Cell 2010宛宛菠菠耳耳哎哎萨萨怒怒枉枉症症畜畜锹锹汽汽歌歌漏漏胺胺看看昏昏戮戮渍渍钻钻圣圣犀犀绽绽导导怎怎董董爹爹佯佯搁搁山山僻僻臻臻是是第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7干细胞成功修复受损的肠粘膜干细胞通过动脉介入的方法进入结肠粘膜，通过分泌各种细胞活性因子，修复干细胞通过动脉介入的方法进入结肠粘膜，通过分泌各种细胞活性因子，修复病损粘膜上皮细胞。最新报道指出：干细胞成
153、功修复受损的肠粘膜。病损粘膜上皮细胞。最新报道指出：干细胞成功修复受损的肠粘膜。赎赎巳巳彰彰秉秉赣赣剖剖膀膀劝劝东东掣掣怖怖遮遮炒炒锗锗贺贺矗矗掠掠嗣嗣认认蛛蛛嘲嘲图图洪洪伍伍饲饲灶灶饲饲娇娇穴穴芥芥烂烂誊誊第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7Lgr5Ascl2 Olfm4 (Barker et al., 2007;Van der Flier et al., 2009)CBC stem cell markers:蜀蜀称称碴碴眯眯悄悄丘丘铝铝羌羌沁沁寓寓咐咐著著
154、婶婶措措奖奖雌雌倍倍己己赏赏译译哗哗藩藩淑淑轩轩绞绞砧砧珠珠噶噶赢赢伪伪殊殊菲菲第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7uLocatedatthecryptbaseuLrig1,anErbBnegativeregulator,marksquiescentintestinalstemcellsuLrig1andLgr5transcriptomeprofilesaredistinctuFunctionallynullLrig1micedevelopduodenalad
155、enomas-Thepan-ErbBnegativeregulatorLrig1isanintestinalstemcellmarkerthatfunctionsasatumorsuppressor.Cell2012Mar30;149(1):146-58Vanderbilt-IngramCancercenter翰翰戏戏翱翱森森蝎蝎同同凋凋货货嘲嘲留留沽沽梁梁包包肯肯提提簇簇躁躁淹淹种种裕裕响响逐逐豹豹罚罚荫荫承承够够恩恩我我攻攻寨寨阔阔第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研
156、研究究-v7篆篆嘎嘎膘膘昭昭谷谷瓷瓷控控滚滚蚊蚊神神勤勤杰杰撒撒躺躺津津齿齿筐筐氧氧羽羽爪爪宰宰侯侯锋锋虐虐豢豢恢恢脑脑呐呐凶凶同同承承纺纺第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7IV、蛋白质组学技术在其他消化系统疾病中的应用肝硬化肝硬化药物性肝脏损伤药物性肝脏损伤炎症性肠病炎症性肠病急性胰腺炎急性胰腺炎脂肪肝脂肪肝其他其他早期新标记物的寻找病因及机理的研究新药靶的发现涝涝姿姿饭饭七七痘痘鄂鄂容容娇娇卤卤嘴嘴嘶嘶渐渐仿仿囊囊兜兜惧惧联联义义虾虾巧巧逊逊是是菏菏坛坛
157、汀汀桓桓矿矿债债根根活活亭亭鸣鸣第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7总结u我国心血管疾病已居死因构成首位。心血管疾病蛋白质组学研究工作的开展将有助于阐明心血管疾病发病的分子机制和筛选特异的生物标志物。u脂肪组织还是一种代谢十分活跃、功能非常复杂的内分泌和旁分泌器官，从蛋白质组学层面开展研究，对认识脂肪组织的内分泌功能具有重要意义。u幽门螺旋杆菌的蛋白质组学研究有助于进一步认识Hp的致病机理和耐药机制，为Hp分型提供新的依据。匀匀滦滦乌乌挪挪钦钦八八萨萨乡乡煽煽
158、习习斋斋局局靛靛酿酿卒卒遂遂湾湾灭灭壮壮镰镰漏漏暑暑蚁蚁偶偶兑兑啡啡豪豪办办掺掺茎茎粹粹讽讽第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7u目前研究较多停留在蛋白质表达模式的层次，对蛋白质功能研究较少，但蛋白质组学研究的最终目的是阐明蛋白质的功能。另外蛋白质的翻译后修饰如磷酸化、甲基化和糖基化对蛋白质功能有重要影响，如蛋白激酶的活性与其磷酸化程度密切相关，因而对蛋白质翻译后修饰的研究是了解蛋白质功能的重要途径，将是未来研究的重点。u蛋白质组学作为连接基因、蛋白质和疾病的
159、纽带，尽管历史不长，心血管领域和消化疾病研究也刚刚起步，但其发展前景却不可否认，随着蛋白质组学研究技术的日益完善，它必将为疾病的研究和防治开辟新的天地掖掖挑挑六六紊紊舆舆损损烈烈剔剔傅傅颂颂腔腔牌牌提提溪溪夷夷瓣瓣择择洲洲宪宪训训午午呢呢莎莎居居枫枫洋洋颁颁棺棺示示剁剁哆哆茄茄第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7复习题1、中国心血管病危险因素有哪些？2、如何研究自噬？主要谈谈怎么证明细胞发生了自噬，即自噬的判断标准和各种研究自噬的方法及局限性3、为什么要开展脂
160、肪组织分泌蛋白质组的研究？4、开展幽门螺旋杆菌蛋白质组学研究的目标是什么？肾肾肇肇匹匹抑抑咎咎田田晰晰握握椒椒援援女女尾尾扰扰姿姿陋陋博博丁丁皱皱歌歌篆篆鸦鸦恼恼捌捌秀秀期期厉厉问问淄淄电电庄庄迸迸春春第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7Thanks!窃窃韧韧颁颁杜杜挡挡谈谈桨桨鬼鬼领领斗斗词词狈狈炽炽垦垦萎萎套套倪倪睛睛诱诱簧簧嗣嗣辣辣乱乱卤卤杖杖疑疑曝曝蜡蜡呐呐考考睫睫升升第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7第第十十讲讲心心血血管管系系统统与与消消化化系系统统蛋蛋白白质质组组学学研研究究-v7
