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1、 医学微生物学实验医学微生物学实验Experiment of Medical Microbiology万海英医学微生物学医学微生物学课程设置课程设置 1. 1. 学时：学时：总学时（总学时（3636）：大班理论课（）：大班理论课（2828），小班实验课（），小班实验课（8 8）, ,2. 2. 授课方式：授课方式：大班讲课、小班讲课大班讲课、小班讲课+ +实验、自学实验、自学3. 3. 教学效果检查：教学效果检查：提问、实验操作及写报告、期末测验提问、实验操作及写报告、期末测验 4. 4. 成绩计算：成绩计算：平时（实验操作及实验报告）平时（实验操作及实验报告）30%30%，期末考试，期末考试
2、70%70% 巩固基础理论、基本概念 学习基本操作 树立无菌概念医学微生物实验目的医学微生物实验目的1.1.必须穿必须穿白大衣白大衣；2.2.上课时保持上课时保持安静安静；3.3.自己的实验材料上注明自己的实验材料上注明菌种菌种、班级、组、班级、组、姓名姓名、日期日期；4.4.注意安全；注意安全；实验室实验室禁止饮、食禁止饮、食注意注意无菌操作无菌操作除示教片以外，沾染过传染物的实验器材丢弃时，必须放除示教片以外，沾染过传染物的实验器材丢弃时，必须放入入消毒缸消毒缸5.5.不要随意调动实验室仪器不要随意调动实验室仪器( (温箱，水浴箱温箱，水浴箱) )；6.6.实验结束后，整理实验台，所用物品
3、按规定放回原处，泡实验结束后，整理实验台，所用物品按规定放回原处，泡手、手、洗手洗手，值日生做卫生。，值日生做卫生。实验室规则实验室规则主要内容（第主要内容（第1616、1717周）周）日日 期期理理 论论实实 验验2010.12.162010.12.16(1)(1)消毒灭菌（讲课）消毒灭菌（讲课）(2)(2)细菌形态结构的观察细菌形态结构的观察( (示教）示教）细菌分布细菌分布2010.12.232010.12.23(1)(1)录像录像(2)(2)结果观察结果观察(3)(3)写实验报告写实验报告革兰染色革兰染色消毒与灭菌消毒与灭菌内 容一、概念：灭菌、消毒、抑菌、防腐、清洁、无一、概念：灭菌
4、、消毒、抑菌、防腐、清洁、无菌、无菌操作菌、无菌操作二、消毒灭菌的方法二、消毒灭菌的方法三、影响消毒灭菌效果的因素三、影响消毒灭菌效果的因素四、实验：环境因素对细菌的影响四、实验：环境因素对细菌的影响一、概念（一、概念（不同级别要求，不同术语）不同级别要求，不同术语）1.1.灭灭菌菌（sterilizationsterilization）：杀杀死死物物体体上上所所有有微微生生物物的的方方法法。（病原微生物，非病原微生物（病原微生物，非病原微生物; ; 细菌芽孢，繁殖体）细菌芽孢，繁殖体）2.2.消毒消毒（disinfectiondisinfection）：）：杀死杀死物体上或者环境中物体上或者
5、环境中病原微生病原微生物物，但并不一定杀死非病原微生物或细菌芽胞的方法。（消，但并不一定杀死非病原微生物或细菌芽胞的方法。（消毒剂）毒剂）3.3.抑菌抑菌（bacteriostasisbacteriostasis）：抑制抑制人体内部或外部细菌生长人体内部或外部细菌生长繁殖的方法。（抗生素，低浓度的消毒剂）繁殖的方法。（抗生素，低浓度的消毒剂）4.4.防腐防腐（antisepsisantisepsis）：）：防止或抑制防止或抑制皮肤表面细菌繁殖的方皮肤表面细菌繁殖的方法，细菌一般不死亡。（防腐剂：乙醇、碘伏等）法，细菌一般不死亡。（防腐剂：乙醇、碘伏等）5.5.清洁清洁：通过去除尘埃和污秽以减少
6、附着在无机物体表面的通过去除尘埃和污秽以减少附着在无机物体表面的微生物数量的方法。微生物数量的方法。6.6.无菌无菌（asepsisasepsis）：）：不存在任何活菌。（目的和结果）不存在任何活菌。（目的和结果）7.7.无菌操作无菌操作（antiseptic technique)antiseptic technique)：防止细菌进入人体或防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。其他物品的操作技术。二、消毒灭菌方法：二、消毒灭菌方法：1.1.物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法热力灭菌法辐射灭菌法滤过除菌法干燥与低温抑菌法2.2.化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法高效消毒剂中效消毒剂低效消毒剂3.3.生物学
7、消毒灭菌法生物学消毒灭菌法抗生素细菌素噬菌体中草药1.1.物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 1 1）热力灭菌法）热力灭菌法 干热灭菌法干热灭菌法 湿热灭菌法湿热灭菌法l 焚烧焚烧：直接点燃或用焚烧炉焚烧l 烧灼烧灼：直接用火焰灭菌l 干烤干烤：用干烤箱灭菌 l 红外线红外线：110m波长l 巴氏消毒法巴氏消毒法:61.162.8 30min或71.7 1530sl 煮沸法煮沸法:100水煮沸l 高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法：103.4kPa，121.3，1520min n 湿热灭菌效果好于干热灭菌，原因如下： 湿热情况下菌体蛋白容易凝固变性; 湿热穿透力比干热大； 湿热的蒸汽具有潜热。 2 2）辐
8、射灭菌法）辐射灭菌法u 紫外线紫外线（ultraviolet ray, UV):ultraviolet ray, UV):波长波长240240300nm300nm原原理理 作作用用于于DNADNA，使使一一条条DNADNA链链上上相相邻邻的的两两个个胸胸腺腺嘧嘧啶啶（T T）共共价价结结合合形形成成二二聚聚体体，干干扰扰DNADNA的的复复制制和和转转录录，导导致致细菌的变异和死亡。细菌的变异和死亡。特点特点穿透力比较差穿透力比较差。只适用于。只适用于空气消毒或物体表面的消毒空气消毒或物体表面的消毒。紫外线可损伤皮肤、眼睛，使用时应注意防护。紫外线可损伤皮肤、眼睛，使用时应注意防护。u 电电离
9、离辐辐射射：（由由电电子子加加速速器器产产生生）和和射射线线（钴钴6060）等，常用于一次性大量医用塑料制品消毒。等，常用于一次性大量医用塑料制品消毒。u 微微波波：1 11000mm1000mm电电磁磁波波，可可穿穿透透玻玻璃璃、陶陶瓷瓷、薄薄塑塑料料，但不能穿透金属表面。但不能穿透金属表面。3 3）滤过除菌法）滤过除菌法 （不能去除病毒和支原体）不能去除病毒和支原体）uu 滤菌器滤菌器滤菌器滤菌器（filterfilterfilterfilter）：）：）：）：液体除菌液体除菌液体除菌液体除菌uu 生物洁净技术生物洁净技术生物洁净技术生物洁净技术（空气过滤器）：（空气过滤器）：（空气过滤器
10、）：（空气过滤器）：空气除菌空气除菌空气除菌空气除菌滤 器层流室4 4）干燥与低温抑菌法）干燥与低温抑菌法干冰, -80 液氮，-1962.2.化学消毒灭菌法化学消毒灭菌法 消毒剂：消毒剂：迅速杀灭病原微生物的化学药物。防腐剂防腐剂：抑制病原微生物生长繁殖的化学药物。p 化学消毒剂的杀菌机制： 使菌体蛋白变性使菌体蛋白变性：如酚、醇、醛类、重金属盐类等。 损伤细菌细胞膜损伤细菌细胞膜：如酚、脂溶剂、表面活性剂等，能降低菌细胞的表面张力并增加通透性，胞外液体内渗，菌体破坏死亡。 干扰细菌酶系统和代谢干扰细菌酶系统和代谢：如氧化剂、重金属盐类等。p化学消毒剂按照杀菌能力分为：高效消毒剂高效消毒剂：
11、可杀灭细菌芽孢在内的所有微生物，包括 含氯消毒剂； 过氧化物消毒剂； 醛类消毒剂； 环氧乙烷中效消毒剂中效消毒剂：能杀灭细菌繁殖体、真菌和大多数病毒，但不能杀灭细菌芽孢，包括 含碘消毒剂； 醇类消毒剂低效消毒剂低效消毒剂：可杀灭多数细菌繁殖体，但不能杀灭细菌芽孢、结核分枝杆菌及某些抵抗力较强的真菌和病毒，包括 季铵盐类； 氯已定； 高锰酸钾 3.3.生物学消毒灭菌法生物学消毒灭菌法1）抗生素：临床治疗2）细菌素：为微生物代谢产物，破坏同源性细菌3）噬菌体：感染细菌、真菌、放线菌、螺旋体等微生物的病毒。4）中草药 消毒灭菌的应用医疗器械室内空气手和皮肤黏膜病人排泄物与分泌物病人污染物品饮水环境三
12、、影响消毒灭菌效果的因素三、影响消毒灭菌效果的因素 1.1.微生物的种类与数量微生物的种类与数量 2.2.消毒剂的性质、浓度与作用时间消毒剂的性质、浓度与作用时间 3.3.温度：消毒效果随温度升高而增强温度：消毒效果随温度升高而增强 4.4.酸碱度酸碱度 5.5.有机物：有机物可消耗消毒剂，降低消毒剂浓度有机物：有机物可消耗消毒剂，降低消毒剂浓度重点掌握内容重点掌握内容名词：消毒、灭菌、防腐、抑菌、无菌、无菌名词：消毒、灭菌、防腐、抑菌、无菌、无菌操作。操作。常用消毒灭菌的方法。常用消毒灭菌的方法。湿热灭菌比干热灭菌效果好的原因。湿热灭菌比干热灭菌效果好的原因。紫外线杀菌的特点和常用范围。紫外
13、线杀菌的特点和常用范围。影响化学消毒剂作用的因素。影响化学消毒剂作用的因素。细菌的形态结构观察细菌的形态结构观察细菌的形态和结构细菌的形态和结构 （一）细菌基本形态：（一）细菌基本形态：球菌球菌杆菌杆菌螺螺形形菌菌（二）细菌基本结构：（二）细菌基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质细胞壁、细胞膜、细胞质、核质（三）细菌特殊结构：（三）细菌特殊结构：SporeCapsuleFlagellaPilus？Pilus细菌的形态和结构细菌的形态和结构：观察示教片观察示教片9张张 观察内容观察内容示教片示教片 重点观察重点观察细菌细菌基本基本形态形态球菌球菌葡萄球菌葡萄球菌链球菌链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌形状、大小、排列形状、大小、排列方式方式杆菌杆菌大肠杆菌大肠杆菌炭疽杆菌炭疽杆菌弧菌弧菌霍乱弧菌霍乱弧菌细菌细菌特殊特殊结构结构荚膜荚膜肺炎链球菌肺炎链球菌荚膜大小与菌体的荚膜大小与菌体的关系关系芽胞芽胞破伤风梭菌破伤风梭菌 芽胞在菌体上的位芽胞在菌体上的位置、大小置、大小 鞭毛鞭毛变形杆菌变形杆菌 鞭毛的形态、数量、鞭毛的形态、数量、位置位置 Thank You!
