支原体支原体 目的要求目的要求•掌握：掌握：支原体的概念和生物学性状， 支原体与L型的主要区别•熟悉：熟悉：肺炎支原体、溶脲脲原体所致 疾病•了解：了解：冷凝集试验的原理和应用 1.概念概念 支支原原体体是是一一群群无无细细胞胞些些壁壁能能独独立立生生存存的的，，介介于病毒与细菌之间的原核生物界微生物于病毒与细菌之间的原核生物界微生物2.特点特点(1)体积很小（体积很小（200nm）能通过滤菌器能通过滤菌器2)有有细细胞胞结结构构，，但但无无细细胞胞壁壁，，也也无无胞胞壁壁粘粘肽肽或或其其先质3)可可在在无无生生命命的的培培养养基基上上生生长长（（如如营营养养丰丰富富的的琼琼脂培养基），形成微小菌落脂培养基），形成微小菌落4)呈二分裂繁殖呈二分裂繁殖第一节第一节 概述概述 分分 类类 •目前已知目前已知150余种其中寄生性支原体有余种其中寄生性支原体有90余种，而人体支原体至少有余种，而人体支原体至少有15种 •为软皮体纲（为软皮体纲（Mollicutes），支原体目（），支原体目（Mycoplamatales），），支原体科支原体科（（Mycoplasmaceae）。
无胆甾原体属（无胆甾原体属（Acholeplasma）） 厌氧原体属（厌氧原体属（Anaeroplasma）） 无固醇原体属（无固醇原体属（Asterolplasma）） 支原体属（支原体属（Mycoplasma））：：64个种个种 螺原体属（螺原体属（Spiroplasma）） 脲原体属（脲原体属（Ureaplasma）：二个种）：二个种其中对人致病主要有其中对人致病主要有5种，包括：种，包括：肺炎支原体（肺炎支原体（M.pneumoniae））人型支原体（人型支原体（M.hominis））生殖器支原体（生殖器支原体（M.genitalium））穿通支原体（穿通支原体（M.penetraus））溶脲脲原体（溶脲脲原体（U.urealyticum）） 支原体与细菌支原体与细菌L型的区别型的区别 肺炎支原体肺炎支原体 溶脲脲原体溶脲脲原体人型支原体人型支原体生殖器支原体生殖器支原体泌尿生殖系感染、泌尿生殖系感染、不育症不育症肺炎肺炎主要致病支原体主要致病支原体 第二节第二节 主要致病支原体主要致病支原体 一、肺炎支原体一、肺炎支原体（（Mycoplasma pneumonia））形态与结构形态与结构1.G-，不易着染，，不易着染，Giemsa染色呈染色呈淡紫色淡紫色/浅蓝色。
浅蓝色2.无固定形状，而呈多形性（球、无固定形状，而呈多形性（球、杆、丝、颗粒、星、螺分枝），其杆、丝、颗粒、星、螺分枝），其典型形态似酒瓶状典型形态似酒瓶状3.结构：无细胞壁，仅有细胞膜结构：无细胞壁，仅有细胞膜电镜观察：电镜观察：4.4.大小：大小：大小：大小： 0.2～0.3m, 为原核细胞界微原核细胞界微 生物中最小生物中最小者 可通过除菌滤器可通过除菌滤器 内外两层内外两层——蛋白质①①细胞由三细胞由三成结构组成成结构组成 中层中层——脂质，其中胆固醇脂质，其中胆固醇 占占36% 核糖体核糖体——Pr合成的重要场所合成的重要场所②②细胞浆细胞浆 双链环形双链环形 DNA③③近细胞丝状体尖端有一球状的特殊结构，近细胞丝状体尖端有一球状的特殊结构，使支原体粘附于宿主上皮细胞表面使支原体粘附于宿主上皮细胞表面 培养特点培养特点1.可在人工培养基上繁殖，但营养要求颇高可在人工培养基上繁殖，但营养要求颇高。
2.偏硷环境（偏硷环境（pH7.6～～8.0）生长适宜，中性生长较差，）生长适宜，中性生长较差，酸性被抑制或死亡但溶脲脲原体除外（酸性被抑制或死亡但溶脲脲原体除外（pH6.0～～6.5最最适宜）3.有氧无氧均能生长有氧无氧均能生长4.固体培养基：经固体培养基：经2～～3d见小的集落犹如见小的集落犹如“油煎蛋样油煎蛋样”——集落中央长入培养基中（向内凹陷）边缘扁平贴附在集落中央长入培养基中（向内凹陷）边缘扁平贴附在培养基上培养基上5.繁殖速度缓慢（繁殖速度缓慢（3～～4h一代）一代）繁殖方式多样化繁殖方式多样化1)二分裂二分裂(2)颗粒型颗粒型(3)丝状体丝状体(4)出芽出芽 生化反应生化反应多数分解葡萄糖产酸不产气，一般不分解蛋白质通常多数分解葡萄糖产酸不产气，一般不分解蛋白质通常根据能否利用葡萄糖、水解精氨酸和尿素与其他致病性根据能否利用葡萄糖、水解精氨酸和尿素与其他致病性支原体区别支原体区别 抗原构造抗原构造：颇为复杂颇为复杂其主要其主要Ag性来自细胞膜胞膜外层蛋白质是主要型特异性来自细胞膜胞膜外层蛋白质是主要型特异性性Ag其抗原性常用生长抑制试验（其抗原性常用生长抑制试验（GIT）和代谢抑）和代谢抑制试验（制试验（MIT）鉴定。
鉴定 GIT：将吸有型特异性抗血清：将吸有型特异性抗血清的滤纸片贴在接种过支原体的的滤纸片贴在接种过支原体的平板上，孵育后，如有抑制生平板上，孵育后，如有抑制生长现象出现，则说明该支原体长现象出现，则说明该支原体与血清同型与血清同型MIT：是将支原体接种在含有抗：是将支原体接种在含有抗血清的葡萄糖（酚红）培养基中，血清的葡萄糖（酚红）培养基中，若抗体与支原体型一致，则抑制若抗体与支原体型一致，则抑制该支原体不能分解葡萄糖产酸，该支原体不能分解葡萄糖产酸，酚红不变色酚红不变色用用GIT和和MIT可将支原体分成若可将支原体分成若干血清型干血清型 若相应，则支原体生长、代谢受抑制，酚红不变色代谢抑制试验（代谢抑制试验（MIT））生长抑制试验生长抑制试验（（GIT）） 有些和一般细菌的繁殖体相似，但多数比较娇嫩有些和一般细菌的繁殖体相似，但多数比较娇嫩1.对热、干燥，一般重金属盐类和一般化学消毒剂对热、干燥，一般重金属盐类和一般化学消毒剂 敏感敏感2.对表面活性对表面活性 敏感敏感3.对青霉素、链霉素头孢菌素结晶紫，醋酸铊则有一定的抵抗对青霉素、链霉素头孢菌素结晶紫，醋酸铊则有一定的抵抗力抵抗力抵抗力（无细胞壁） 4.对作用于胆固醇的药物（二性霉素对作用于胆固醇的药物（二性霉素B等）和干扰等）和干扰蛋白质合成的药物（强力霉素、氯霉素、红霉素、蛋白质合成的药物（强力霉素、氯霉素、红霉素、链霉素等）敏感。
链霉素等）敏感 致病性与免疫性致病性与免疫性 致病物质致病物质1.黏附因子P1蛋白的定植作用:可吸附于宿主呼吸道黏膜细胞、红细胞等表面的受体神径氨酸酶上,避免微纤毛运动将其排除2.毒性代谢产物损害宿主黏膜上皮细胞，出现肿胀，坏死和脱落，微纤毛运动减弱3.荚膜具有抗吞噬作用，也有毒性4.糖脂抗原：与宿主细胞有共同抗原决定簇，故可引起变态反应，导致免疫损伤 所致疾病所致疾病支原体肺炎支原体肺炎①①肺炎，症状轻重不一，婴幼儿较重成人肺炎，症状轻重不一，婴幼儿较重成人通常较细菌性肺炎轻，有时无明显症状通常较细菌性肺炎轻，有时无明显症状②②支气管炎：陈发性咳嗽，胸部不适支气管炎：陈发性咳嗽，胸部不适③③咽炎④④鼓膜炎鼓膜炎——鼓膜出现疱疹、常为出血性的鼓膜出现疱疹、常为出血性的⑤⑤神经系统及其它系统损伤，少数患者出现神经系统及其它系统损伤，少数患者出现脑膜脑炎脑膜脑炎 •以隐性感染为主，可伴有呼吸道外症状，X线肺部呈线肺部呈羽毛状浸润羽毛状浸润 传播：传播：飞沫 免疫性免疫性 病后免疫力短暂，可反复感染以体液免疫为主，细胞免疫也起作用1.早期感染 单核-巨噬细胞刺激产生产生急性期炎症急性期炎症因子因子IL-1和和TNFa可扩张血管 ；增强吞噬细胞的功能诱导IL-6的产生 诱导肝细胞产生急性期蛋白 激活补体 2.产生的抗体IgG1和IgG2有调理作用 促进单核MΦ的吞噬作用 激活补体。
3.呼吸道黏膜分泌的SIgA有阻止肺炎支原体的吸附作用4.肺炎支原体与人类心、肺、脑和肾有共同抗原，可引起Ⅱ型变态反应（如溶血性贫血、血小板减少性紫癜、心肌炎、肾炎、脑膜炎和格林巴利综合征）5.IgG与相应抗原组成免疫复合物引起Ⅲ型超敏反应，如心肌炎和肾炎等6.肺炎支原体作为超级抗原可激活CD4+T细胞 微生物学检查法微生物学检查法 标本的采集标本的采集通通常常采采集集病病人人咽咽拭拭子子、、鼻鼻拭拭子子、、痰痰、、支支气气管管分分泌泌物、含嗽液其中以拭子为最佳物、含嗽液其中以拭子为最佳•注意事项：注意事项：（（1））因因支支原原体体对对热热、、干干燥燥敏敏感感取取材材后后应应立立即即接种；接种；（（2））如如不不能能立立即即接接种种可可置置于于蔗蔗糖糖磷磷酸酸盐盐缓缓冲冲液液，，4℃保存保存72h，，-70℃可长期保存可长期保存 检验方法检验方法1.标本直接检查标本直接检查（１）直接镜检（１）直接镜检Gram染色染色G-不易着染不易着染标本标本→涂片涂片→ 电镜观察无细胞壁易与细菌区别电镜观察无细胞壁易与细菌区别。
２２））核核酸酸检检测测：：用用PCR法法快快速速、、敏敏感感、、特特异异操操作作中中应应特特别别小小心、防止污染心、防止污染2. .分分离离培培养养：：慢慢阳阳性性率率不不高高对对临临床床快快速速诊诊断断意意义义不不大大，，但但对对流流行行病学调查有一定意义病学调查有一定意义 3.血清学检查血清学检查——抗体检测抗体检测１）（１）ELISA————特异、敏感、快速目前常用而可靠方特异、敏感、快速目前常用而可靠方法可检测法可检测IgM和和IgG （２）生长抑制试验（ＧＩＴ）（２）生长抑制试验（ＧＩＴ）（３）代谢抑制试验（ＭＩＴ）（３）代谢抑制试验（ＭＩＴ） （４）补体结合试验（（４）补体结合试验（CF））——常用常用（５）间接血凝试验（５）间接血凝试验 （（６６））冷冷凝凝集集试试验验——是是检检测测患患者者血血清清中中冷冷凝凝集集素素的的一一种种非非特特异异性性试试验验但但仅仅33%～～76%患患者者出出现现阳阳性性效效价价≥1：：64）），，效效价价越越高高或或4×以以上上升升高高，，近近期期感感染的可能性大染的可能性大•用病人血清与人用病人血清与人O O型红细胞或自身红细胞型红细胞或自身红细胞•混混合合4℃4℃过过夜夜，，观观察察红红细细胞胞的的凝凝集集现现象象，，37℃37℃时凝集又分开，即冷凝集试验时凝集又分开，即冷凝集试验４４.分子生物学检测：分子生物学检测：快速，敏感性高，特异性强快速，敏感性高，特异性强核酸探针、ＰＣＲ核酸探针、ＰＣＲ 预预 防防死疫苗和减毒活疫苗的效果尚不肯定。
死疫苗和减毒活疫苗的效果尚不肯定 治治 疗疗红霉素、链霉素、螺旋霉素等防治原则防治原则 二、 溶脲脲原体二、 溶脲脲原体（（Ureaplasma urealyticum，，Uu）） •是可引起泌尿生殖道感染的病原体是可引起泌尿生殖道感染的病原体 生物学性状生物学性状• 1．形态结构：基本同肺炎支原体．形态结构：基本同肺炎支原体• 2．培养特点．培养特点•（（1）营养要求较高）营养要求较高 •（（2）固体培养基）固体培养基 95%N2、、5%CO2 形成形成15～～50μm颗粒状颗粒状“荷包蛋荷包蛋”样小样小 菌落（放大菌落（放大200×才能见到）才能见到）•3．生化反应．生化反应•不分解葡萄糖和精氨酸不分解葡萄糖和精氨酸 脲酶脲酶 +•4.抗原结构（抗原结构（1）脂多糖）脂多糖Ag• （（2）蛋白质抗原蛋白质抗原• （（3）脲酶）脲酶Ag——种特异性种特异性Ag•5 5．抵抗力：基本同肺炎支原体．抵抗力：基本同肺炎支原体 致病性和免疫性致病性和免疫性 •Uu多寄生在男性尿道、包皮和女性阴道。
多寄生在男性尿道、包皮和女性阴道1.上行引起男性前列腺炎或附睾丸上行引起男性前列腺炎或附睾丸2.女性阴道炎、宫颈炎并导致流产女性阴道炎、宫颈炎并导致流产3.早早产产儿儿及及低低体体重重新新生生儿儿呼呼吸吸道道和和中中枢枢N系系统统感感染4. .淋淋病病患患者者损损伤伤泌泌尿尿生生殖殖道道粘粘膜膜，，有有利利于于Uu的的粘粘附，故淋病治愈后，有些人仍有症状遗留附，故淋病治愈后，有些人仍有症状遗留 溶脲脲原体引起不孕症的原因溶脲脲原体引起不孕症的原因１１.吸附精子表面，阻碍精子运动；吸附精子表面，阻碍精子运动；２２.产生神经氨酸酶样物质，干扰卵产生神经氨酸酶样物质，干扰卵子与精子结合；子与精子结合；３３.溶脲脲原体与精子有共同抗原，溶脲脲原体与精子有共同抗原，溶脲脲原体感染刺激机体产生的抗体溶脲脲原体感染刺激机体产生的抗体对精子产生损伤对精子产生损伤 微生物学检查法微生物学检查法1．标本的采集．标本的采集（（1）非淋菌性尿道炎患者）非淋菌性尿道炎患者——中段尿2）慢性前列腺炎患者）慢性前列腺炎患者——前列腺液前列腺液3）原因不明的不育症患者）原因不明的不育症患者——精液4）阴道炎、宫颈炎患者）阴道炎、宫颈炎患者——炎性分泌炎性分泌物、羊水、血液。
物、羊水、血液标本标本→离心离心→取沉淀物取沉淀物→送检 检验方法检验方法1.标本直接检查标本直接检查（（1）核酸检测）核酸检测——PCR法快速简便、稳定可靠、敏感性高快速简便、稳定可靠、敏感性高2））ELISA——特异性强、较敏感，有早期诊断意义特异性强、较敏感，有早期诊断意义3 3））免免疫疫斑斑点点试试验验（（IDT））：：利利用用免免疫疫斑斑点点试试验验检检测测抗抗原原提提取取物物和和Uu培养物敏感、特异性强、快速，不需特殊仪器，易于推广敏感、特异性强、快速，不需特殊仪器，易于推广 2.分离培养分离培养•标标本本 接接种种于于 pH6.0含含酚酚红红和和尿尿素素的的液液体体培培养养基基 37℃℃ 观观察察颜颜色色变化变化 .3. .抗体检测抗体检测————意义不大意义不大 注意性卫生，感染者用强力霉注意性卫生，感染者用强力霉素，红霉素，氯霉素等素，红霉素，氯霉素等防治原则防治原则 三、穿透支原体三、穿透支原体（（M.Pentrans，，MPe）） •人们越来越证实人们越来越证实MPe是加速是加速AIDS进程的辅助致病因素。
进程的辅助致病因素•1 1．形态结构杆状或长烧瓶状结构与肺炎支原体相似．形态结构杆状或长烧瓶状结构与肺炎支原体相似•2 2．培养特点．培养特点•（（1 1））营养要求高营养要求高，培养基中需加血清培养基中需加血清•（（2 2））生长缓慢生长缓慢•（（3 3）在改良）在改良SP-4SP-4培养基上菌落呈培养基上菌落呈“荷包蛋荷包蛋”样样•（（4 4）液体培养基：无明显的混浊或沉淀，呈）液体培养基：无明显的混浊或沉淀，呈透明状透明状•3 3．生化反应：发酵葡萄糖，水解精氨酸，但不分解尿素．生化反应：发酵葡萄糖，水解精氨酸，但不分解尿素•4 4．．AgAg构造与其他支原体不同构造与其他支原体不同•5 5．抵抗力：红霉素、四环素、林可霉素敏感，但对青霉素．抵抗力：红霉素、四环素、林可霉素敏感，但对青霉素不敏感 致病性与免疫性致病性与免疫性•1．致病因素．致病因素•（（1））MPe的的尖尖形形结结构构具具有有粘粘附附和和穿穿入入或或动动物物的的红红细细胞胞、、淋淋巴巴细细胞胞和和单单核核细细胞胞，，在在细细胞胞中中大大量复制，导制细胞受损和死亡量复制，导制细胞受损和死亡•（（2））MPe对对HIV感感染染者者T细细胞胞的的作作用用，，可可促促进进HIV的复制和病程发展。
的复制和病程发展•（（3））MPe对对诱诱导导肿肿瘤瘤坏坏死死因因子子TNF-α（（由由巨巨噬噬细细胞胞产产生生））的的表表达达可可能能也也是是造造成成损损伤伤细细胞胞的的主要因素主要因素•2．．所所致致疾疾病病：：多多数数人人认认为为Mpe感感染染是是艾艾滋滋病病的辅助致病因素的辅助致病因素 微生物学检查法微生物学检查法 •1．．标标本本的的采采集集——取取材材对对象象为为AIDS患患者和者和HIV感染者•（（1）咽部粘液）咽部粘液 •（（2））AIDS患患者者组组织织块块作作免免疫疫组组化化或或电电镜技术检测镜技术检测 •37℃ 每天观察颜色有无变化每天观察颜色有无变化→如由红变黄透明、如由红变黄透明、无沉淀无沉淀→视培养可疑阳性视培养可疑阳性→再用滤过，滤液转再用滤过，滤液转种传代，当培养基颜色再次由红变黄则认为种传代，当培养基颜色再次由红变黄则认为“初代培养阳性初代培养阳性”•（（2）生化反应）生化反应•①①葡萄糖发酵试验葡萄糖发酵试验 •②②精氨酸水解试验精氨酸水解试验 •③③脲素酶试验脲素酶试验 •（（3）代谢抑制试验（）代谢抑制试验（MIT）） •（（4））PCR 防治原则防治原则要预防艾滋病等继发性免疫缺陷病。
要预防艾滋病等继发性免疫缺陷病治疗用大环内酯类抗生素治疗用大环内酯类抗生素 思考题思考题名词解释：名词解释：支原体支原体问答题：问答题：1、请比较支原体和细菌、请比较支原体和细菌L型的主要区别？型的主要区别？2、常见的支原体主要有哪几类？、常见的支原体主要有哪几类？ 分别引起什么疾病？分别引起什么疾病？ 。