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1、第三节第三节 尿液常用的化学检查尿液常用的化学检查一一尿液酸度测定尿液酸度测定指示剂法指示剂法v原理：为湿化学反应法，常用的指示剂有溴原理：为湿化学反应法，常用的指示剂有溴麝香草酚蓝、石蕊和酚红等。麝香草酚蓝、石蕊和酚红等。v评价：试剂不便于保存及运输，且易受黄疸评价：试剂不便于保存及运输，且易受黄疸尿、血尿的干扰而影响结果判断。尿、血尿的干扰而影响结果判断。试纸法试纸法v原理：为干化学反应，利用酸碱指示剂反应。原理：为干化学反应，利用酸碱指示剂反应。v评价：可用肉眼与标准色板比较，也可用仪评价：可用肉眼与标准色板比较，也可用仪器判读结果。已在临床普及应用。器判读结果。已在临床普及应用。PH计
2、法计法v原理：使用原理：使用PH电极直接精确地测定尿液电极直接精确地测定尿液PH值。值。v评价：精密度高，但需专用仪器，仅适用于评价：精密度高，但需专用仪器，仅适用于科研。科研。滴定法滴定法v原理：常用标准氢氧化钠溶液对尿液进行滴原理：常用标准氢氧化钠溶液对尿液进行滴定，根据氢氧化钠消耗的用量求得尿液可滴定，根据氢氧化钠消耗的用量求得尿液可滴定酸度。定酸度。v评价：可进行评价：可进行PH值动态监测，但方法繁琐，值动态监测，但方法繁琐，已很少应用。已很少应用。参考值参考值v随机尿随机尿PH最大范围在最大范围在4.68.0之间，多数尿之间，多数尿在在5.56.5左右。左右。临床意义临床意义v酸碱平
3、衡状态的观察指标酸碱平衡状态的观察指标v泌尿系感染的辅助诊断泌尿系感染的辅助诊断v指导临床用药指导临床用药临床意义临床意义v pHpH值值 pHpH值值v疾病疾病 碱中毒、膀胱炎碱中毒、膀胱炎 酸中毒，糖尿病酸中毒，糖尿病v食物食物 蔬菜、水果蔬菜、水果 肉类及混合性肉类及混合性v药物药物 小苏打、碳酸钾小苏打、碳酸钾 氯化钾、氯化钙氯化钾、氯化钙v生理活动生理活动 饭后碱潮饭后碱潮 剧烈运动、应激剧烈运动、应激注：注：低钾性代谢性碱中毒时，尿低钾性代谢性碱中毒时，尿pHpH值值二、尿液蛋白质定性检查二、尿液蛋白质定性检查v健康成人蛋白质含量为健康成人蛋白质含量为30130mg/24h，其，其
4、中中2/3来自血浆，少量来自肾小管、尿路及生来自血浆，少量来自肾小管、尿路及生殖道的分泌性蛋白。殖道的分泌性蛋白。v蛋白尿：当尿蛋白排出量蛋白尿：当尿蛋白排出量 150mg/24h、或或尿中蛋白浓度尿中蛋白浓度100mg/L时，常规化学定性检时，常规化学定性检查呈阳性，称为蛋白尿。查呈阳性，称为蛋白尿。加热乙酸法加热乙酸法v原理：加热可使蛋白质变性凝固，加酸可使原理：加热可使蛋白质变性凝固，加酸可使蛋白质接近等电点，促使蛋白质沉淀，还可蛋白质接近等电点，促使蛋白质沉淀，还可碱性盐类结晶。碱性盐类结晶。v评价：本法是最为经典也最为准确的方法，评价：本法是最为经典也最为准确的方法，特异性强、干扰因
5、素少，对清特异性强、干扰因素少，对清/球蛋白均敏感，球蛋白均敏感，敏感度为敏感度为150mg/L。虽然操作较繁琐，但因。虽然操作较繁琐，但因结果准确，常用作蛋白质定性的确证试验。结果准确，常用作蛋白质定性的确证试验。磺基水杨酸法磺基水杨酸法v原理：在酸性环境下，磺酸根阴离子与原理：在酸性环境下，磺酸根阴离子与蛋白质氨基酸阳离子结合为不溶性蛋白蛋白质氨基酸阳离子结合为不溶性蛋白盐沉淀。盐沉淀。v评价：操作简便、快速，与清评价：操作简便、快速，与清/球蛋白、球蛋白、糖蛋白本周氏蛋白均能反应，敏感度高糖蛋白本周氏蛋白均能反应，敏感度高（ 50100mg/L ）。但干扰因素多，如）。但干扰因素多，如病
6、人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、病人应用大剂量青霉素钾盐、庆大霉素、磺胺或在高浓度的尿酸、草酸盐及粘蛋磺胺或在高浓度的尿酸、草酸盐及粘蛋白等作用下均可呈假阳性。因此本法适白等作用下均可呈假阳性。因此本法适用于蛋白尿的筛查。用于蛋白尿的筛查。干干化学试带法化学试带法v原理：利用指示剂的蛋白质误差原理，即模块中原理：利用指示剂的蛋白质误差原理，即模块中主要含有酸碱指示剂溴酚蓝（主要含有酸碱指示剂溴酚蓝（PH阈值为阈值为3.04.6）、枸橼酸缓冲系统和表面活性剂，在）、枸橼酸缓冲系统和表面活性剂，在PH3.2时溴酚蓝产生阴离子，与带有阳离子的蛋白质时溴酚蓝产生阴离子，与带有阳离子的蛋白质（清蛋白）
7、结合后发生颜色变化（由淡黄色渐呈（清蛋白）结合后发生颜色变化（由淡黄色渐呈绿色乃至蓝色），既可肉眼观察，又可用尿液分绿色乃至蓝色），既可肉眼观察，又可用尿液分析仪自动判断结果。析仪自动判断结果。v评价：本法与球蛋白反应弱，与血红蛋白、肌红评价：本法与球蛋白反应弱，与血红蛋白、肌红蛋白、粘蛋白及本周氏蛋白基本不反应，当尿液蛋白、粘蛋白及本周氏蛋白基本不反应，当尿液PH偏高，超过指示剂的缓冲能力时，会出现假偏高，超过指示剂的缓冲能力时，会出现假阳性结果。但因该法简便、快速已在临床得到普阳性结果。但因该法简便、快速已在临床得到普及应用，适合于健康普查，肾病的筛查。及应用，适合于健康普查，肾病的筛查。
8、方法选择方法选择v现场快速检验或初次就诊的门诊病人，采用干化学试带法或磺基水杨酸法。v进行疗效观察或预后判断时，则需配合加热乙酸法。干扰因素的控制与分析干扰因素的控制与分析尿PHvPH9.0可使加热乙酸法及磺基水杨酸法呈假可使加热乙酸法及磺基水杨酸法呈假阴性，干化学试带法呈假阳性。阴性，干化学试带法呈假阳性。vPH 8.88mmol/L ），或肾小管重吸收能力下降），或肾小管重吸收能力下降时，尿糖定性为阳性，称为糖尿。时，尿糖定性为阳性，称为糖尿。班氏法班氏法v原理：葡萄糖的还原性醛基在热碱性条件下，将蓝原理：葡萄糖的还原性醛基在热碱性条件下，将蓝色硫酸铜还原为氧化亚铜，进而生成红色的氢氧化色
9、硫酸铜还原为氧化亚铜，进而生成红色的氢氧化亚铜沉淀。亚铜沉淀。v评价：该法稳定，敏感度为评价：该法稳定，敏感度为5.5mmol/L，但缺乏特，但缺乏特异性，尿中其它糖类（果糖、乳糖、戊糖等）和许异性，尿中其它糖类（果糖、乳糖、戊糖等）和许多还原性物质（肌酐、尿酸、多还原性物质（肌酐、尿酸、VitC等）都可与班氏等）都可与班氏试剂起反应，出现假阳性。因此逐渐被葡萄糖氧化试剂起反应，出现假阳性。因此逐渐被葡萄糖氧化酶试带法取代。酶试带法取代。干干化学试带法化学试带法v原理：试带上的葡萄糖氧化酶只与尿中葡萄糖产生原理：试带上的葡萄糖氧化酶只与尿中葡萄糖产生氧化还原反应，生成的氧化还原反应，生成的H2
10、O2可催化色原（供氢体）可催化色原（供氢体）邻甲苯胺（或碘化钾）氧化脱氢，使供氢体显色。邻甲苯胺（或碘化钾）氧化脱氢，使供氢体显色。v评价：简便、快速、特异性高、敏感度更高（评价：简便、快速、特异性高、敏感度更高（ 2.05.0mmol/L ）、结果可目测、也可用于尿自动分）、结果可目测、也可用于尿自动分析仪。析仪。 VitC等等还原性物质可致假阴性，高浓度酮体、还原性物质可致假阴性，高浓度酮体、高比重尿可降低试带的敏感性。高比重尿可降低试带的敏感性。质量控制质量控制v标本留取：留取清晨空腹或餐后标本留取：留取清晨空腹或餐后2h尿尿v容器清洁：不含氧化性物质容器清洁：不含氧化性物质v及时送检：
11、及时送检：v判断结果：班氏法需待反应物自溶冷却后观判断结果：班氏法需待反应物自溶冷却后观察；试带法按说明书要求报告。察；试带法按说明书要求报告。干扰因素及处理干扰因素及处理vVitC 尿中尿中VitC、尿酸、水杨酸等，可使班氏定性出、尿酸、水杨酸等，可使班氏定性出现假阳性；而高浓度的现假阳性；而高浓度的VitC可使试带法呈假阴性，可使试带法呈假阴性，在病人大剂量注射在病人大剂量注射VitC后后5h内不宜做尿糖定性，最内不宜做尿糖定性，最简单的处理方法是先将尿液煮沸几分钟后再进行测简单的处理方法是先将尿液煮沸几分钟后再进行测定。定。v高比重尿或高酮体尿：可使试带法呈假阴性。必要高比重尿或高酮体尿
12、：可使试带法呈假阴性。必要时可用班氏法辅助确定阳性程度。时可用班氏法辅助确定阳性程度。v蛋白尿：应加热除去蛋白尿：应加热除去生生理理性性糖糖尿尿摄入性：摄入性：摄入糖类过多或注射高渗葡萄糖，一次进摄入糖类过多或注射高渗葡萄糖，一次进食葡萄糖食葡萄糖200g以上即可造成糖尿。以上即可造成糖尿。精神性：精神性：过度紧张、情绪激动过度紧张、情绪激动妊娠性：妊娠性：妊娠末期和哺乳期可因乳腺产生乳糖过妊娠末期和哺乳期可因乳腺产生乳糖过多而致乳糖尿。多而致乳糖尿。病病理理性性糖糖尿尿糖尿病：糖尿病：由于病人胰岛素水平降低或机体对胰岛素由于病人胰岛素水平降低或机体对胰岛素敏感性降低，导致葡萄糖贮存、利用障碍
13、，长期高敏感性降低，导致葡萄糖贮存、利用障碍，长期高血糖超过肾糖阈使空腹尿中葡萄糖定性阳性。血糖超过肾糖阈使空腹尿中葡萄糖定性阳性。肾性糖尿：肾性糖尿：血糖正常，但肾小管对葡萄糖吸收血糖正常，但肾小管对葡萄糖吸收能力减退、即肾糖阈降低所致的糖尿。如家族能力减退、即肾糖阈降低所致的糖尿。如家族性糖尿、慢性肾炎和肾病综合症时。性糖尿、慢性肾炎和肾病综合症时。其它：其它：甲亢、垂体前叶功能亢进等激素病以及颅甲亢、垂体前叶功能亢进等激素病以及颅脑外伤、脑血管意外、急性心肌梗死等均可出现脑外伤、脑血管意外、急性心肌梗死等均可出现高血糖和糖尿。高血糖和糖尿。四、尿中酮体定性检查四、尿中酮体定性检查v酮体：
14、是脂肪代谢的中间产物，由乙酰乙酸、酮体：是脂肪代谢的中间产物，由乙酰乙酸、-羟丁酸和丙酮组成。羟丁酸和丙酮组成。v24h尿中酮体的含量：乙酰乙酸尿中酮体的含量：乙酰乙酸25mg， -羟丁酸羟丁酸9mg，丙酮，丙酮3mg。常规化学定性方。常规化学定性方法测不出尿酮体。法测不出尿酮体。v酮血症：当体内脂肪代谢加速，生成的大量酮血症：当体内脂肪代谢加速，生成的大量酮体便在血中蓄积称为酮血症。酮体便在血中蓄积称为酮血症。朗格法（Lange）v原理：亚硝基铁氰化钠在碱性条件下与乙酰原理：亚硝基铁氰化钠在碱性条件下与乙酰乙酸或丙酮生成紫红色化合物。不与乙酸或丙酮生成紫红色化合物。不与-羟丁羟丁酸起反应。酸
15、起反应。v敏感度：乙酰乙酸敏感度：乙酰乙酸50mg/L，丙酮，丙酮200mg/L粉剂法（Rothera）v原理：同朗格法。原理：同朗格法。v评价：优点是减少了干粉试剂用量，便于储评价：优点是减少了干粉试剂用量，便于储存和携带，操作更加简便。存和携带，操作更加简便。v敏感度：乙酰乙酸敏感度：乙酰乙酸80mg/L，丙酮，丙酮100mg/L干化学试带法v原理：同朗格法原理：同朗格法v试带类型：一类只与乙酰乙酸反应，与其他试带类型：一类只与乙酰乙酸反应，与其他酮体不反应；另一类与乙酰乙酸和丙酮都起酮体不反应；另一类与乙酰乙酸和丙酮都起反应，但对乙酰乙酸明显高于丙酮，前者为反应，但对乙酰乙酸明显高于丙酮
16、，前者为50100mg/L ，后者仅为，后者仅为400700mg/L 。v评价：敏感、方评价：敏感、方便快速。已基本取得朗格法和粉剂法。酮酮 尿尿糖尿病酮症酸中毒：糖尿病酮症酸中毒： -羟丁酸定性试验对酮血症的羟丁酸定性试验对酮血症的早期诊断意义较大，酮尿是糖尿病性昏迷的前期指早期诊断意义较大，酮尿是糖尿病性昏迷的前期指标，多伴有高血糖和糖尿。标，多伴有高血糖和糖尿。其它：其它：如饥饿、过分节食、剧烈呕吐或腹泻、全身如饥饿、过分节食、剧烈呕吐或腹泻、全身麻醉、长时间空腹运动及寒冷刺激等尿酮体阳性。麻醉、长时间空腹运动及寒冷刺激等尿酮体阳性。五、五、尿液胆红素和尿胆原定性检查尿液胆红素和尿胆原定
17、性检查临床意义临床意义v 尿胆红素尿胆红素 尿胆原尿胆原v溶血性黄疸溶血性黄疸 阴性阴性 阳性阳性 v阻塞性黄疸阻塞性黄疸 阳性阳性 减少或消失减少或消失 肝细肝细胞性黄疸胞性黄疸 阳性阳性 轻度增加轻度增加v正常正常 阴性阴性 阴性弱阳性阴性弱阳性尿血红蛋白定性检查尿血红蛋白定性检查v同粪便隐血试验同粪便隐血试验尿液亚硝酸盐定性检查尿液亚硝酸盐定性检查v当尿中有病原微生物增殖，并且尿液在膀胱当尿中有病原微生物增殖，并且尿液在膀胱中存留足够长时间的情况下，某些含有硝酸中存留足够长时间的情况下，某些含有硝酸盐还原酶的感染病原菌，可将尿中的硝酸盐盐还原酶的感染病原菌，可将尿中的硝酸盐还原为亚硝酸盐（还原为亚硝酸盐（NIT）。）。v亚硝酸盐定性试验可作为泌尿系感染的筛选亚硝酸盐定性试验可作为泌尿系感染的筛选指标之一。指标之一。
