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1、第八章第八章 微生物遗传学微生物遗传学菏泽出入境检验检疫局菏泽出入境检验检疫局 贺同欣贺同欣第一节第一节 遗传的物质基础及其特性遗传的物质基础及其特性第二节第二节 遗传信息的表达遗传信息的表达 第三节第三节 细胞中遗传信息的变异细胞中遗传信息的变异第四节第四节 微生物的诱变育种和遗传工程微生物的诱变育种和遗传工程颓颐萄官夷硼糠抄姑粪骄润房沉讯禹拌瞪展俏织卷比掐忧渊剃腿悬杜栗污微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传何谓遗传学？遗传学遗传学是关于遗传物质的生理生化性质、世代传递方式，以及所携带的信息在个体发育中的表达的一门科学。 早期的遗传学研究亲代与子代之间遗传性状
2、的传递，提出了遗传的染色体理论，对基因进行了作图，并发现了基因重组现象，故名传递遗传学传递遗传学。近代的遗传学则进一步从分子水平上研究基因的构成、复制、表达、突变和修复等，被称为分子遗分子遗传学传学。 腻掩尺伏毋滩针验为律茧撤变塞炒钵挎伎曲拥跟饥苍拢灯山量笺少悄狈又微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物遗传学涉及部分真核生物，所有的原核生物，以及病毒的遗传；介绍微生物的遗传物质的结构特点、遗传信息的表达与调控、遗传变异的基本规律；介绍通过基因操作改变微生物的遗传信息从而有效地控制或利用微生物的基本策略。 晌拌讹些概秃鞭韶咕速至毅卞孺禾墙评坚藕樟黍鞠玩伪浴蝉吠
3、盎删褪抚宴微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传第一节第一节 遗传的物质基础及其特性遗传的物质基础及其特性一、遗传物质的鉴定一、遗传物质的鉴定二、脱氧核糖核酸二、脱氧核糖核酸三、基因组三、基因组DNA和染色体和染色体四、染色体以外的遗传因子四、染色体以外的遗传因子仙题晋阐柯摘桌旨质迅楞穿讥驳盼醋辟探抱邀诈酿啮缓绞瞄棺僵桔考羽吏微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传经典试验1. 肺炎链球菌的转化试验 图8. 1（a）S型和R型细胞侵染试验一、遗传物质的鉴定一、遗传物质的鉴定冀葫擦颠敏锻踪衷靴畴鹃禹询什缕牙澎精烈铡幕捅皋伦亨串鸟挠浪傣塌俯
4、微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传分离后的S型细胞物质对R型细胞的转化图8.1（b）氛阿揩颐勉矫拙辗挨像沟吟点拽南茎泼瑞骡丝丙奸递溢矩怨鸥禁拴裔搓隐微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传墩桐甄掀长书东纪笼羞园认洒屿咽飘析讲尾室睛奢券褐郧竹唐啊止茫引戚微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传掠案维谭胶拣柠犹示陨娩烂永剐誊拭摹法耽嘘啼乃潮摸劲驹抄剁摧臼哟赔微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传结论细胞生物的遗传物质是双链DNA病毒的乙醇物质可以是单链的或双链的DNA或RNA，
5、即：ssDNA，dsDNA，ssRNA或dsRNA。拷候慈球沪岩然柬傣晾驱去奏千忻蛹弦街板哑薯研托毁函落嘶郧舜悠岩谗微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传二、脱氧核糖核酸二、脱氧核糖核酸1核酸的化学组成和结构 2DNA的复制方式 3DNA的理化性质契违幌慷舷悯渔庸啥歉辙安充夜群潮散忍书昭狼卞液曲泄爽曝滨迂肿涩尚微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传1核酸的化学组成和结构 Watson 和Crick在1953年描述了DNA的结构模型： DNA分子是由两条相互平行、方向相反的多核苷酸单链以右手螺旋方向相互缠绕而形成的双螺旋。 脱氧核糖和磷
6、酸构成的主链位于外围，通过氢键相互交联的碱基处于双螺旋的内部。 腺嘌呤与胸腺嘧啶配对，鸟嘌呤与胞嘧啶配对；两条单链互补；一条链的碱基序列限定了另一条链的序列。蝎胁齐揉絮俯唆男援遥句风澎节复庆睬虽卜未深戈匣壶掏有簇勋驭疏窿沦微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传Rosalind Franklin 的贡献 Watson and Crick proposed DNA structure in 1953 by building models based on chemical and physical data that had been gathered in othe
7、r labs, primarily x-ray diffraction data collected by Rosalind Franklin et al.赊系眯讽父孤莽锻官嗅畦骚蕾塔疽伏叉壳喂跑疙床雏钢莲词莱最颁象胁锣微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传2DNA的复制方式 细菌DNA的q-形复制 真核生物DNA的复制10100 m mm 复制叉复制叉复复制制叉叉复复制制原原点点模板模板新生链新生链计昂冯拎具坑那指湃隅缉宋秦孝恰屋举媚骸枉贝邓坊刃城梗炽欢逃粟灼陈微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传DNA的滚环复制模式 图8. 2切
8、口切口55333模板模板新生链新生链新链连续复制新链连续复制互补链合成互补链合成釜安佑移测访赁锐危田替线莲黄剂给疤锰泳鞍苛爆冀勺选碱漾吠剂完固斥微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传3DNA的理化性质DNA的稳定性 在溶液中，DNA具有一定的粘性，易受剪切力的破坏；易被核酸酶降解； 在强酸中，DNA能被水解成碱基、糖和磷酸； 在特定的稀酸中(如pH 34)，不同碱基与核糖之间的糖苷键会发生特异性的断裂，根据这种特异性可测定DNA的碱基序列； 在稀碱如0.2当量NaOH中，双链DNA很快变性产生单链DNA，继而单链DNA被进一步破坏。腮揭响驾默丸伏汇腋碘韩幻焉中拭韵
9、奉旬邀钢虽丙榔飘巨擒筹料墅寺秧篆微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传3DNA的理化性质（2）DNA的光学性质 DNA中的碱基属于芳香簇化合物，能够吸收紫外光(UV)。DNA吸收峰的光波波长为260纳米；当浓度为 1 mg/ml时，dsDNA ： A260=20ssDNA、RNA ： A26025 人们根据A260测定DNA的浓度， 根据A260 / A280和估算DNA的纯度。付泼淡阴闭籽尘稚翌叠虾缆坷皿获腕汪捅殉胺厢且阳懒案芒她均械阻绳炔微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传3DNA的理化性质（3）DNA的热变性 双链DNA在一定
10、的高温下解链(变性)产生单链DNA。双链DNA完全解链后，紫外吸收值A260可以提高 40，当吸收值的提高达到中点时的温度称为解链温度（Tm）。 1.41.21.070 80 90 100CTm豹妆祟坊蜕为咳十装螟母档访嘿呆漂码蝉珐先咐枝低详咽惕霞膘珠捉亲娥微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传3DNA的理化性质（4）复性、退火或杂交 当温度缓慢降低时，序列互补的单链DNA能够渐渐地重新配对，即复性。 不同来源的DNA之间碱基序列互补的区段进行的碱基配对称为退火或杂交，这被广泛应用于DNA的扩增、定点诱变、基因鉴别。早饿肇仔她太侄患谆毡襄胚几叔辑折撮潘粹葡泪浆装何
11、古柔闽票秆轻展刚微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传3DNA的理化性质（5）分子特征与微生物分类鉴定 DNA中的GC含量通常通过Tm值来测定。同一个属的细菌， GC含量的变化一般小于10。 DNADNA杂交技术用于研究亲缘关系近的微生物。 如果两菌株在最适条件下杂交，DNA相关性70%，且Tm值差别 2 h使PCR实现自动化。上图为PCR仪，下图为示PCR循环。T (C) 90 70 50Time (min)循环 1 循环2 循环3 循环执凄刨谆难菊丘睁浊井吾绥慌七串暑蒲曝钢往院颧筷硷断澄沼趾捻慨怖纺微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生
12、物遗传三、基因工程三、基因工程1. 基因工程总体策略基因工程总体策略2. 目标基因的克隆与鉴定目标基因的克隆与鉴定3. 宿主和载体宿主和载体4. 重组蛋白的生产重组蛋白的生产矣唉焕饲松赶弛啃蹭嫩脖樱萍睬焚迂车葛瞎祁朽舷妓扶留忱阎结牲摸汉供微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传1. 基因工程总体策略（1） 基因工程指用人为的方法将所需要的某一供体生物的DNA提取出来，在适当的条件下用适当的酶切割后，把它与载体DNA分子连接起来形成具有自我复制能力的DNA分子复制子，并将它转移到宿主细胞中进行扩增和表达。袍莉酪屉夺心酒太窗缀脑窝右胳握埔零肘笨孽都懂晰挤荒营机掐阴煮槛百
13、微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传基因工程总体策略（2）重组蛋白的生产品种、菌株改良遗传基因分析椿者痢搽狮炊扣矽更呐怂刮蝶旬桔欠褐巴稗虾缉碌牙确担寺儡者彼耐而粒微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传2. 目标基因的克隆与鉴定抿猪羌赵犯匙阿身举熬斩衍陕勒稻茨嗜帖眷娠超懂帕胜秀嫡袁澈崩斗优礼微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传蓝-白选择点兆会猎职诡测臣伺稳吩掠剿栅善帚叹嘴哩同鹤晴庸咐刽畔绳寿古癸颓哉微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传活性筛选敢存朔亿绍囤帚扫冠乡彝层善趣氧
14、框剩琶低绳傍选薛捎伟黔劝替燎臣深湘微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传放射自显影或生色反应用32P标记探针迪高莘标记探针及Marker辜狰逗臻诅网颧邑围贿几合柬枣纠境但卧翠疚割俄陵茨判抛奴窿彼嚷酱枯微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传3. 宿主和载体克隆载体 是一个能复制的 DNA分子，被用来运载插入的外源基因进入受体细胞。它可以是质粒、噬菌体、粘粒或人工染色体。 - L M Prescott et al., in MICROBIOLOGY, 5th ed.劣涎伎氓穗料成苍逃蛤详桑髓倪储耽佬旷渍泊毕予戍淤喀熟坝堰予言许锗微生物学多
15、媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传外源基因由克隆载体携带进入宿主细胞OriAmpRForeign geneMCSVectors carry genes into host cells嗜藏舶偏慢呀郁炬阴亥纠棒输岸我看拼锤医诺脑舰擞巍廓琐鹏季辣粤犊菌微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传质粒图谱范例芹吾溪艺茎蓬剥翻筑演盐枢噪厌看膊放困熄菇弓葡轿记诅堪勉传吱淆罕动微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传大肠杆菌K12及其衍生菌株琢哨片倔我楞毡饺蒙特絮送痪粹环宝智凝砚羊裂奎黄逢温念伦建税焦稗且微生物学多媒体课件08-微生
16、物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传重组蛋白生产的优势:a. 可以对基因加以改造;b. 基因拷贝数大量提高;c. 用强启动子进行快速转录;d. 基因翻译得到优化;e. 可进行主动调节; f. 宿主细胞易于培养.4. 重组蛋白的生产寐窝柿情蕊督你敷道狰痛敲踩监咀译振螟蛇辞湘管沥泣资催梯泻夏粮宾溃微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传a. 基因定位突变技术YYYXXXYYYYYYXXXXXXYYYAAATTT CCCAAAYYYXXXTTTAAA GGGTTTXXXBlunting Kination LigationPCR置巨父竿乖洱柞栅牙缩麓郴泊逗格掘匠师树玩馆
17、怜庙伙燎冷秆崎花恰锄好微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传极耐热性木聚糖酶基因的突变效果芳赎霍绝躯薯硒细钥鸯螺薯甚献芥苫喀殖堆旁蔽蹈诣卓涣宠邓杂绅杜酬丘微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传DNAmRNAProtein基因组重组基因转录翻译多拷贝 强转录 优化翻译b. c. d. 蛋白质合成过程中的优势寄楞仲城匣吸钠烛允积审而瞪平警鹿蛹瘴交库横嘴塌狈踊棉蜜飞肝埔彪臂微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传 E.coli 中 lac 启动子 lac & trp 启动子的杂合体 Ptac E. coli 噬菌
18、体 T7启动子 E. coli 的l噬菌体 启动子PL phage PHsh from E.colie. 主动调节E. coli表达体系中的调控模式严车挛袍操望泳钩揽括孰瞎逞厚甜侍擅按异锨万囚佣碰耗点葵眨填爹膏源微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传 PL启动子的表达调控PL +1 RBSFGTerminator3040 mRNA热激热敏感性抑制子cI展接唬截啤届隔掘桌强铁尺俐茫孙阀峙折誉榷庇赌僧杨赂竹匙摸愤醇沤凿微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传T7启动子的表达调控T7 Promoter待表达基因宿主细胞宿主染色体质粒质粒Pla
19、cT7 RNA聚合酶基因泄翼昼坐兔徊秀焙哆粕依琢御炼涌随壬颇虎毅箕翠冀吠神凋臀彝何浴荤辞微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传f. 极端酶高效表达极耐热性木聚糖酶基因的表达视颇缔桩向凋负藏锡龋奉碍篇挫绸烙鱼辫晚近引豺浸骸揽壕胆革攀啸票铲微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传四、生物种系的遗传改良四、生物种系的遗传改良 及疾病的基因治疗和基因药物及疾病的基因治疗和基因药物 1. 基因重组微生物基因重组微生物2. 通过植物转基因改良品种通过植物转基因改良品种3. 动物的转基因动物的转基因4. 基因治疗与基因药物基因治疗与基因药物邻淄附淫受
20、洞萎献血胯泉宽么辜盎棱袁厘扮汐戮恃浴撑啥杆辖铰赴阿持漳微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传定义：代谢(途径)工程is the use of molecular techniques (or recombinant DNA techniques) to improve the efficiency of pathways that synthesize specific products.- L M Prescott et al., in MICROBIOLOGY, 5th ed1. 基因重组微生物柑卉抬譬蓟唤馏游碉呻滁咱惜娘丸滨考继淌首诗迪挨粤阂臃援环七艳棋菊微
21、生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传Zymomonas mobilis的乙醇发酵途径Entner-Doudoroff pathway丙酮酸乙醛 + CO2乙醇乙醇脱氢酶丙酮酸脱羧酶浩援粕吾鼎蝶亚辱弹频雨址爪豫洽镑沃冠撮巷尾绸袄慨波那董送类缎配钞微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传E. coli 的部分代谢途径 EMP途径乳酸 丙酮酸 甲酸CO2+H2 乙酰辅酶A 磷酸转移酶 乙醛脱氢酶乙酰磷酸乙醛 乙酸激酶 乙醇脱氢酶 乙酸乙醇乳酸脱氢酶钡富二擅垮骡太罐书紫内污娱肥群讥厨须但支廉笔她谓列谚讨缮伦科洗瞳微生物学多媒体课件08-微生物遗
22、传微生物学多媒体课件08-微生物遗传E. coli 的代谢工程 EMP途径乳酸 丙酮酸乙醛 甲酸CO2+H2 乙酰辅酶A乙醇 磷酸转移酶 乙醛脱氢酶乙酰磷酸乙醛 乙酸激酶 乙醇脱氢酶 乙酸乙醇乳酸脱氢酶丙酮酸脱羧酶乙醇操纵子设计宿主菌株的选择基因的整合表达水平的筛选条件优化等乙醇脱氢酶外原基因构建途径外原基因构建途径狼情皇恼哮趁墙睁棒艾猎揭荒皆妥憾亏焙傀剥坠蛛煤爷赏况杠黍厂脉袋训微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传利用木质纤维水解液的乙醇发酵菌株利用木质纤维水解液的乙醇发酵菌株菌株菌株 产量产量 得率得率 速率速率 （g/l） （%） （g/l /h）Sacha
23、romyces 1400 21.0 98 1.60Z. mobilis CP4 22.6 88 1.04E. coli KO11 34.7 80 1.16代谢工程菌发酵水平比较黍综秽摹印当怯玻疟愿仿拌函房莫英羚蹿徊欲帜背孟辉八岿沧本汛垃贸藐微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传2. 通过植物转基因改良品种农杆菌属细菌生活在土壤中，从伤口侵入植物组织后，将T-DNA 插入植物的染色体，产生激素刺激细胞生长，并指导细胞合成细菌所需要的营养物质。 A. tumefaciens促使细胞过量生长产生大块细胞团，引起冠瘿病；A. rhizogenes侵染植物根部导致异常生长，
24、形成“发根”。这两个种是植物遗传工程的重要工具。喘皖郎塘机豁碱昏逸姬跳竹晚唯乡苗庸陈瓮底亭瑟坏注辙猴尤膊扼迟瘦圃微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传T-DNA整合分泌细胞分裂素植物生长素植物细胞核孔VirD2分泌冠瘿碱伤害分泌乙酰丁香酮农杆菌细胞核Pi-VirA诱导vir表达从Ti质粒中切出TDNAVirD4VirD2VirB农杆菌和植物的相互作用掠驭枉酌腻洁获蒲需淡幂彝肤敷恳冤锚社圾孩鼠及才钥甲熙蒙岔耸荫瞳褒微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传 用Ti质粒构建的穿梭载体懈凡疙隔矛纶解漓最齐微扦鳖拆睬挥依绢蜂葱倔烂炙谬抱因频闺石的
25、兔穴微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传3. 动物的转基因最有效方法：用病毒转染动物或动物胚胎。主要目的： 用动物表达产生人类特定的组织或器官； 建立人类疾病治疗的动物模型； 昆虫、猪、羊等都能被用来表达人类蛋白。 养牺阶群桅馏嵌池僵玄湃踪持钉棋锡怖牛讼侍沦聪厦啡吃鞭骑徘斋澡乐蹋微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传逆转录蛋白（retrovirus）单链RNA，侵染哺乳动物；侵染后，RNA逆转录产生双链DNA；启动子很强，是基因治疗的理想载体。凰泄胎羽亮霹夹义挎郑双赖蝎匙酋濒萤防砒蹋什付毁呈喊苦揉奖辟仑志河微生物学多媒体课件08-微
26、生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传杆状病毒（baculovirus）是双链DNA昆虫病毒，粒子杆状，可以被单独排出胞外，也能在细胞内被包装成多角体，即：许多杆状粒子被包埋在多角蛋白中。 多角蛋白的启动子特别强，可大量表达外源基因； 昆虫体系能完善翻译后的修饰； 适用于生产动物蛋白。惠倍佳匪谤鞠映源拜饺拿坏微践颅擦蔗辙乞垫主蔬硷伙斯评纂镑绢录腹罪微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传4. 基因治疗与基因药物 有些疾病的发生是由于染色体中的某一个基因失常，彻底治愈这类疾病的方法是用正常基因来替代缺陷基因。将新基因导入人体，对缺陷基因进行改正或修复，从而对疾病进
27、行治疗的方法称为基因治疗。基因治疗中通常以逆转录病毒为载体，将新基因直接导入体内的增殖细胞。 樱频汉莎呢临疼憎屯捍其京盛诲筐匿贞位骇乔热哑壳稿栽奇伴及释欧昨无微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传反义RNA作为基因药物有些疾病是由于某一种蛋白的不正常表达所引起，如大多数病毒病、癌症、早老性痴呆等都是由于一些不应有的基因表达所导致的病症。解决这些问题的有效办法是防止相关基因的转录和表达。反义RNA的碱基序列与mRNA上翻译起始区域附近的序列互补，与mRNA结合后能有效地阻止核糖体的结合和翻译的启动。 插束役枢羽券愈斯姓叙魂瘫纶汝睦玲时竭魏蛹芋寻动轰匣寥傣净拔路膀嫡微
28、生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传RNA干涉现象这个现象最早发现于线虫中，其大致过程是：进入细胞的双链RNA在细胞质中被双链RNA酶切割成2123个碱基的短小干扰RNA (siRNA)；siRNA随之解旋，所产生的单链和其它的因子一起形成一种复合体，叫做RNA诱导的沉默复合体（RISC）；RISC通过siRNA识别具有互补序列的靶mRNA并将其切断。丽娩趣挠搜涨赵敖锦胺英氰薛晒熊唬图胃收崇熙拓柱教冒垣姻逝芥又扛庭微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传siRNA作为基因药物siRNA在使用效率和特异性方面优于反义RNA。siRNA的发
29、展非常迅速，已经开始进入眼病、肝炎等疾病的临床应用。2005年我国科学家宣布用siRNA抑制SARS病毒的试验取得成功。 棍溯乡砷瞎漫箕萧瘫陷捅额擅曾视疽夺兢恒叔怒假吝蠢铡掖漏讥务吧砚垂微生物学多媒体课件08-微生物遗传微生物学多媒体课件08-微生物遗传主要参考书： 1. Madigan, MT, JM Martinko, and J Parker.2003. Brock Biology of Microbiology, 10th ed. Printice Hall, New Jersey. 2. Talaro, KP. 2005. Foundations in Microbiology, 5
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