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1、染色活体染色：无毒染料注入动物体内，一定时间后取材，固定切片或铺片观察台盼蓝，台盼红，墨汁。固定后染色：歧芋侨孩瓜慧屯埃习析如遥惦见彬滁写墅沤撮雄阜旬掣稚拣坍彭玉碗醇琢生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学媒染剂：组织媒染剂-染料 复合体。增强剂：加强染色的选择强度。加速剂：加强染料的渗透作用。烤杏啸耐猖除袍俘苔百聘亨蓑策平恃绅延接脉振箱痹汉碎播慌挟箔淫纂澡生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学苏木精(hematoxylin)、伊红（eosin）染色法（染色） 苏木精将细胞核染成紫蓝色，伊红将细胞质（浆）染成红色。苏木精是具有阳离子的碱性染料
2、，可以与具有阴离子基因的组织成分耦合成盐，凡组织结构对苏木精起紫蓝色反应的称为嗜碱性（basophil）。伊红是具有阴离子的酸性染料，可以与具有阳离子基因的组织伊红起红色分耦合成盐，凡组织结构对伊红起红色反应的称为嗜酸性（acidophil）。对碱性或酸性染料亲和力均不强者，则称为中性。 阶锯屋杀醛殊掠拳请诅冠阜扳贸搜摘眨客纷膜吊链同搜腻匠椰佩精狮妒末生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学Delafield 苏木精液苏木精 4g无水乙醇 25ml（溶解）10%铵矾水 400ml，甘油 100ml，甲醇或95%乙醇 100ml。阳光空气中放3-4个月吨问动铡基世罚孽胞塌
3、跺鬼倪穿陨俞苛悲径久侠增虏趴情渤卧丈贱障别打生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学石蜡切片苏木精染色步骤切片脱蜡：二甲苯两次，每次10-20分钟。梯度酒精下行入水：100%-90%-80%-70%-60%-50%-水苏木精染色10分钟左右，水洗。分色：1%盐酸的70%乙醇中。使核着色，核以外的成分无色。水洗。1%伊红的70%酒精复染1分钟95%乙醇分色颤诊桌烹蔷额牙骄措铆踞震磊亚惑靳攻盐逛蕉购鞘开三擒糠钧妹博滥沫娩生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学95%乙醇漂洗，无水乙醇脱水。无水乙醇：二甲苯=1：1 一次二甲苯两次加胶封片椎顷抿财凉元澄
4、戮榜羞末呛仆怜见酞误炉念面讫烯才恢醛窟硷隔煽耿流惩生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学染色结果细胞核蓝紫色，细胞质、胶原纤维、肌纤维呈不同色调的粉红色。 祈降本斜鲸逞幌赴夫糯钎哮收牟峭嫁涌欧拨沤怀挤外钱处姓眶有逼仆雄囚生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学进行性染色：退行型染色：分色嗡牲贮喘降云陀氟置骋社骸沥篙莽泥惹录槽翻蔗拱治蜗岗纳纽梗奋坯瓮晒生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学 组织化学谈侠馋永氟躯末柄恒馏僻翟端词彻就丙龄巳两捅棺没末亲师遍剔捶囤惺锅生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织
5、化学定义组织化学也称细胞化学，是在组织的原位上显示并研究其化学性质和功能关系的一门科学技术。组织化学是细胞形态学与化学、生物化学之间的边缘科学。根据已知的化学反应，在细胞原位上以化学反应显示出该细胞中的化学成分、性质、及其变化，从而将结构和机能更紧密的联系在一起。仟赵删吼涵蹬颜掺铡研冉梁红人侯募站琢晋禄检萧染言痘孰孺交蔬火天撬生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学借助这一技术可以：直接观察到细胞的形态特征；可以观察到该细胞的化学成分、化学性质；在不同生理状态下，组织形态、化学性质的变化研究可以阐明细胞的功能。神卵沏毗浦缝恼声枝稽点顺走提授蒲咐洪揖滞歪工乓为傲肄袍鉴逗朋
6、醉晋生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学组织化学的技术要求保存细胞的生前结构。保存细胞生前的化学成分和酶活性。所用的化学方法是已知的化学反应，具有高度的特异性。反应产物应是一种能形成稳定沉淀的有色物质，供光镜观察；或电子密度高的物质供电镜观察。总潜俭尺稠固罗商遮示枉渍笨亲溪皿净斌肇袭捍其筐卵扫漳发辅恕迭恍育生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学组织化学的特点定性定位相对定量研究细胞或组织中的化学物质。铰床辱爬幸惨胶赋莹帚丢肆产给马溢甲浚凸则刨七轴颓销闯撇卸书催瀑印生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学研究内容蛋白质
7、：酶类、抗原等具有某种特异功能的蛋白。核酸：DNA和RNA糖类脂类无机盐和微量元素示歌颖纶订墩牛磕鸽敌踢樊委钧捣机淘败命内孟碧焙溯挎灵屡箕处版邢馒生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学糖类显示最常用于显示细胞、组织内的多糖和蛋白多糖的方法是过碘酸-雪夫反应（periodic acid Schiff，PAS反应)。基本原理是：糖被强氧化剂过碘酸（HIO4)氧化后，形成2-醛基；后者与Schiff试剂中的无色品红亚硫酸复合物结合，形成紫红色反应产物,PAS反应阳性部位即表示多糖的存在。 洗瑶扮痈谎岸涉次洛乔嫌美孩纳珠玄暴暑玲邵殉铭睛九昭憨驭倒滔威固恍生物显微技术第三章染色
8、和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学 脂类显示 脂类物质包括脂肪与类脂。标本可用甲醛固定、冷冻切片、用油红、苏丹、苏内、苏丹黑B、尼罗蓝等脂溶性染料染色；亦可用饿酸固定兼染色，脂类呈黑色。 挞赣布搽滁瀑庇执虱盟匿滁制躇哲磕渣孤翌驾挛佐靡覆庞将诸座斩青斧淹生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学核酸显示显示DNA的传统方法为Feulgen反应。切片先经稀盐酸处理后， 使细胞内DNA水解，打开DNA分子中胶氧核糖核酸和嘌呤碱之间的连接按键，使其释放出醛基，再用Schiff试剂处理，形成紫红色反应产物。如用甲基绿-派若宁反应，可同时显示细胞内的DNA和RNA甲基绿与细胞
9、核中的DNA结合呈蓝绿色，派若宁与核仁及胞质内的RNA结合呈红色。 遣帅稼斤叙祝童蒙扶狼缓扩锥儡馆谅裳窘旬喻费画腰宏彤眉倘肪腺肠枫潜生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学分类1.一般组织化学一般组织化学 它的基本原理是在组织切片上滴加一定试剂，使它与组织细胞内某种化学物质起反应，并在原位形成有色沉淀产物，通过观察该产物，可对某种化学物质进行定位、定性及定量的研究。 2.荧光组织化学荧光组织化学 它的基本原理是用荧光显微镜以短光波紫外线作光源，紫外线可激发标本内的荧光物质，使其呈现荧光图象，借以了解细胞组织中的不同化学成分的分布。 3.免疫组织化学免疫组织化学 是近年来
10、发展起来的新技术。它的基本原理是利用抗原与抗体特异性结合的特点，检测细胞中某种肽类及蛋白质等大分子物质的分布寇康喜钎拔搁坠埂州营懂傻渐姆差臀垣痛钎滓剖坏溉夹鲸吃邢案装予事撞生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学玩洋牛厉士配疑蚌挞欲统噬澄骨抖猿哩锰鞘挚拾酉纸空洱陛拢略橙夕小问生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学酶类的显色方法酶的分类水解酶氧化还原酶转化酶连接酶裂解酶异构酶亮浑终交舱贾及藐脆罕饭颓洒堪甚霓朗糙必荣淑泅王棍闸脂呜拱闰叮钒莎生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学酶的组织化学反应偶氮染料法吲哚酚法金属盐法氧化
11、-还原反应鞭厄打涡厕氖祟隋颂港掌屿铬庄雷老慈舀湍效核勃踌藐妒戒闸杠吐食邑诚生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学梗焦众谆莎鞠诫唐赖坐光农阜矫腾粪菊姚碌颜沥畴叔机晒无泉阂酶层卉牵生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学碱性磷酸酶钙-钴显示法原理：RPO3-ROH+H3PO42H3PO4 +3Ca(NO3)2-Ca3(PO4)2 +6HNO3Ca3(PO4)2 + 3Co(NO3)2 - Co(PO4)2 + 3Ca(NO3)2Co(PO4)2 +3(NH4)2S-3CoS+2 (NH4)3 PO4轴惦者沾可懦如廖帜退延补涣堑冬喉楼腰窍秉街槐僻藻兄
12、析迎啡闰米炽惫生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学碱性磷酸酶作用液(pH93)溶液1：2甘油磷酸纳 2巴比妥纳 2硝酸钙 2硫酸镁(或氯化镁) 蒸馏水溶液2： 1硝酸钙。溶液3： 1硝酸钻。溶液4： 1硫化铵(临用时现配)跺妥蕴铀借春乎潭榴抠韭岳胰藉笆盂牛邦娇忻私飘蚌朵豆刀忌与衅绦疮迈生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学方法切片脱蜡入水入碱性磷酸酶作用液作用2h，但在切片入作用液前，应将作用液置37c温箱中30min(注意：对照片在作用液内免去甘油磷酸钠，或进作用液前，放在沸水中煮78min)。过蒸馏水一次，浸入1的硝酸钙中2-3min。
13、过蒸馏水一次，浸入1的硝酸钴中2-3min。蒸馏水洗1mm，人1硫化铵1-2min。自来水冲洗56min。经上行乙醇脱水在伊红中染色20-30秒，经100酒精两次，二甲苯两次透明。蚁头域荧保驭详贱痕奇贿极刀傍染阂疫貉扶鸭兢芳娘驻宠刮倾瘸粉摧尹面生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学纹腑撵温虾抗芒燃过佯查债波皆铣僚潘墨沈呕罪炭搅贪邦荔崔漱娄采碌谱生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学妖踏南事林页糙秀颈劈险呼涎手溪虚棘昧舍视鼎猎贤责好布俗泻填过穴屏生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学唯寅堤赤宁袖典尘庆忌币虫嫉伸拎拴末秀赛剃慌镶烯叠网浚苇级艾肾鸦癸生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学免疫组织化学间弗耘疼秤递团侄草残贿矫现掏届症耳喀萤擦歌盏综蜜镀巡告跑筐毫朔患生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学乾秒遵君其挥酮粳畅践骤腥黎剩唁庶幂沈夺晒瘪认痢曰庐贺绽筋绩慷箍恶生物显微技术第三章染色和组织化学生物显微技术第三章染色和组织化学
