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1、血糖平衡血糖平衡人体内血糖的来源和去路人体内血糖的来源和去路食物中的糖类食物中的糖类 消化、吸收消化、吸收肝糖原肝糖原分解分解脂肪等非糖物质脂肪等非糖物质转化转化血糖血糖3.896.11mmol/LCO2+H2O+能量能量氧化分解氧化分解肝糖原、肌糖原肝糖原、肌糖原合成合成脂肪、某些氨基酸等脂肪、某些氨基酸等转变转变血糖：指血液中葡萄糖血糖：指血液中葡萄糖血糖维持在恒定水平血糖维持在恒定水平调节血糖水平的激素：胰岛素、胰高血糖素、糖皮调节血糖水平的激素：胰岛素、胰高血糖素、糖皮质激素和肾上腺素。质激素和肾上腺素。胰岛素和肾上腺素是调节血糖浓度的两种重要激素，胰岛素和肾上腺素是调节血糖浓度的两种
2、重要激素，前者使血糖浓度降低，后者使血糖浓度升高。前者使血糖浓度降低，后者使血糖浓度升高。 血糖水平异常：血糖水平异常：高血糖及糖尿病；高血糖及糖尿病； 低血糖低血糖实验目的实验目的 掌握葡糖糖氧化酶法（掌握葡糖糖氧化酶法（GOD-POD）测定血糖的）测定血糖的原理及方法原理及方法 观察胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响观察胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 了解家兔耳缘静脉取血的方法了解家兔耳缘静脉取血的方法血糖测定的常用方法血糖测定的常用方法测定方法测定方法无机化学法：无机化学法： Folin-Wu法法有机化学法：邻甲苯胺法有机化学法：邻甲苯胺法酶法：酶法：葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法二、实验
3、原理葡萄糖氧化酶法红色的醌类化合物颜色深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在红色的醌类化合物颜色深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm505nm处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。处测定吸光度，与标准管比较可计算出血糖的浓度。标准管法标准管法 A标标=C标标KLA测测=C测测KLC测测=A标标A测测C标标待待测测I0标标准准I0A测测A标标C测测三、仪器与试剂酶酚混合试剂酶酚混合试剂处理后的处理后的葡萄糖应用液（葡萄糖应用液（5mmol/L5mmol/L）草酸钠抗凝剂草酸钠抗凝剂25%25%葡萄糖葡萄糖蛋白沉淀剂蛋白沉淀剂肾上腺素肾上腺素 （1mg/mL1mg/mL）胰岛素
4、（胰岛素（1U/mL1U/mL）实验器材：实验器材： 分光光度计、注射器、台式磅秤、兔分光光度计、注射器、台式磅秤、兔 台、三棱针、试管、试管架、漏斗台、三棱针、试管、试管架、漏斗实验动物：实验动物： 饥饿饥饿1616小时以上兔子四只小时以上兔子四只四四、操作步骤操作步骤1、动物准备动物准备（1）分组）分组每一列用一只兔子每一列用一只兔子第第1、3列做列做胰岛素胰岛素对血糖浓度的影响对血糖浓度的影响第第2、4列做列做肾上腺素肾上腺素对血糖浓度的影响对血糖浓度的影响（2）称重与固定）称重与固定记录体重记录体重称重称重四肢向上固定四肢向上固定2、制备抗凝管、制备抗凝管每列取每列取2只洁净且干燥的试
5、管，标好只洁净且干燥的试管，标好“实验前实验前”和和“实验后实验后”，草酸钠在讲台上，用药匙加一平匙的抗凝剂（草酸钠），草酸钠在讲台上，用药匙加一平匙的抗凝剂（草酸钠），晃动试管使管壁上沾有抗凝剂。晃动试管使管壁上沾有抗凝剂。3.准备激素准备激素胰岛素（胰岛素（1U/mL） 0.75U/Kg 0.75mL/Kg1kg兔子准备胰岛素兔子准备胰岛素0.75mL肾上腺素（肾上腺素（1mg/mL） 0. 5mg/Kg0.5mL/Kg1kg兔子准备胰岛素兔子准备胰岛素0. 5mL4、去蛋白质血滤液制备、去蛋白质血滤液制备取取2支试管，每管中取蛋白沉淀剂支试管，每管中取蛋白沉淀剂4mL,其中其中1管标管标
6、注实验前，另外注实验前，另外1管标注实验后管标注实验后。去蛋白质血滤液制备（待第去蛋白质血滤液制备（待第5和和6步结束，取全血步结束，取全血制备）：制备）：取全血取全血0.2mL，加入上述管混匀，室温，加入上述管混匀，室温放置放置7分钟过滤。分钟过滤。5.注射前取血注射前取血耳缘静脉取血法：耳缘静脉取血法：拔毛拔毛酒精擦拭酒精擦拭( (用手弹动）用手弹动）三棱针刺破三棱针刺破静脉放血静脉放血收集于抗凝管中（约收集于抗凝管中（约1-2mL)边取血边摇动抗凝管边取血边摇动抗凝管制备去蛋制备去蛋白血滤液白血滤液6.注射激素注射激素 抓住兔子，腹部朝上，提起腹抓住兔子，腹部朝上，提起腹部皮肤，刺入皮下
7、时有落空感，然部皮肤，刺入皮下时有落空感，然后缓慢注入激素后缓慢注入激素腹腔腹腔注射注射 胰岛素胰岛素 0.75U/Kg 肾上腺素肾上腺素 0.5mg/Kg0.5h1h取血（取血（2mL）制备去蛋白血滤液制备去蛋白血滤液取血（取血（2mL）制备去蛋白血滤液制备去蛋白血滤液7. GOD-POD7. GOD-POD法测血糖法测血糖试剂试剂(ml)测定管测定管（注射前）（注射前）测定管测定管（注射后）（注射后）标准管标准管空白管空白管去蛋白血滤液去蛋白血滤液0.50.5处理后的处理后的葡萄糖标准液葡萄糖标准液0.5蛋白沉淀剂蛋白沉淀剂0.5酶酚混合试剂酶酚混合试剂3.03.03.03.0充分混匀，充
8、分混匀，37 水浴水浴15min 505nm处比色以空白管调零，读取标准管及测定管处比色以空白管调零，读取标准管及测定管吸光度值。吸光度值。 按表配液按表配液实验结果与计算实验结果与计算计算：计算：标准管葡萄糖浓度：标准管葡萄糖浓度：5mmol/LC测=A标A测C标 测定管血糖浓度测定管血糖浓度（mmol/L）测定管吸光度测定管吸光度 标准管吸光度标准管吸光度5mmol/L实验结果与计算实验结果与计算通过计算比较家兔注射激素前、后血糖浓度的通过计算比较家兔注射激素前、后血糖浓度的变换变换正常人血糖浓度：正常人血糖浓度：3.896.11mmol/L验证胰岛素降血糖，肾上腺素升血糖验证胰岛素降血糖，肾上腺素升血糖结合理论课的内容分析激素影响血糖的机制结合理论课的内容分析激素影响血糖的机制临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要依据。的主要依据。科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某科研：在代谢疾病的研究中，常测定血糖。在某些药物的研究中，也涉及血糖的测定。些药物的研究中，也涉及血糖的测定。测定血糖的意义测定血糖的意义注意事项注意事项抓取兔子时小心被兔子抓伤抓取兔子时小心被兔子抓伤试管一定要标记清楚试管一定要标记清楚用漏斗过滤时，不要用水润湿用漏斗过滤时，不要用水润湿用加样枪加取量要准确用加样枪加取量要准确
